CN104620805A - 一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种中药材重楼的快速繁殖技术，特别是一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术。解决现有技术（种子、切块、组培）种苗繁殖率低、出苗慢、消耗大量块茎的问题。一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术，主要包括以下步骤：（1）重楼母本的选择；（2）追肥；（3）促发生长点；（4）顶芽愈伤移栽；（5）出苗移栽。在重楼活体块茎上进行快速分蘖繁殖的方法，在不破坏活体块茎的条件下，通过生物学原理阻断植株原生长点，促使活体重楼块茎产生多点萌发。

Description

一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术

技术领域

本发明涉及一种中药材重楼的快速繁殖技术，特别是一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术。

背景技术

重楼（Paris polyphylla Smith var. yunnanensis （Franch.）Hand.-Mazz.）是延龄草科重楼属多年生草本植物，别名独脚莲、重楼一枝箭、草河车等，是《中华人民共和国药典》（2005版）收载的中药材重楼的基源植物之一。野生重楼分布在云南、四川、贵州等省份，主产区为云南的滇中、滇西和滇西北地区，生长在海拔为1400～3100m，年平均气温为10～13 ℃，年降雨量850～1200mm的冷凉山区，多生于常绿阔叶林、针阔混交林、山坡阴湿处及灌木丛山地。重楼从种子萌发生长发育5～6年后，才进入生殖生长期。由于生长缓慢，多年的大量采挖使野生重楼资源面临枯竭。

重楼以根茎入药，秋季采收。重楼最早以蚤休之名始载于《神农本草经》,是我国常用的传统中药之一。其性微寒味苦，有小毒，归肝经，具有清热解毒，消肿止痛，凉肝定惊等功效，主治疔疮痈肿，咽喉肿痛，毒蛇咬伤，跌打伤痛，惊风抽搐等症。总皂苷是重楼的主要成分指标，《中华人民共和国药典》（2005版）规定，重楼干燥药材中含重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ的总量，不得少于0.80%。现代药理研究证明，重楼有止血、祛痰和抑菌、镇静镇痛、抗早孕杀灭精子、抗细胞毒等作用，临床用于治疗功能性子宫出血、神经性皮炎、外科炎症以及肿瘤等，具有显著的疗效。国内以重楼为主要原料的产品有云南白药系列、宫血宁、热毒清、抗病毒颗粒、季德胜蛇药片、重楼解毒酊等，产值40亿元。

由于制药企业对重楼原料大量的需求，使得重楼野生资源长期过度无序地采挖，野生药材的供应量不断减少，已不能满足国内以重楼为原料的制药企业的生产需求。重楼从播种到收获利用需八～十年的时间，制药企业为获取更多原料，大幅度提高重楼收购价格，现在好的产品收购价格已达800元/kg以上，是五年前的16～30倍。收购价格上涨再刺激农民过度的采挖，采挖速度远远超过了野生资源繁殖生长的速度，导致重楼成为稀缺资源。重楼的稀缺已成为制约相关制药企业规模生产和可持续发展的瓶颈。进行重楼人工栽培，保证药材有效供应，满足制药企业需求，造福人类健康，已势在必行。但人工栽培重楼存在一些急待攻克的关键技术。

重楼种子休眠程度高、萌发缓慢、出苗率低等生物学特征限制，种子种苗繁殖难度大；根茎繁殖不仅因使用营养体繁殖，重楼块茎需求量大，使野生资源锐减，而且会使种质退化，抗逆性下降；至今为止，对重楼的组织培养方面尚未取得令人满意的结果。缺乏高效的种苗繁殖技术和完善的种苗繁育标准体系，缺乏重楼优质种苗供给是制约重楼栽培快速发展的关键因素。

为了解决市场供需矛盾，进行重楼人工驯化，发展人工栽培，一些学者开展了重楼种苗繁育的研究。

种子繁育种苗：孟繁蕴等（2006）研究发现重楼种子休眠和发育过程中种子内源激素ABA含量显著下降，与休眠解除有较大的相关性，GA3，IAA，ZR含量逐渐升高，变化趋势与重楼分化和发育一致。黄玮等（2008）进一步探讨重楼种子休眠机理，研究结果表明重楼种子不存在吸水障碍，与休眠无关，内源激素ABA和GA3在重楼种子休眠与萌发中发挥重要作用。陈翠等（2007年）研究不同温度、不同播种方式(播种时间、覆土厚度、地膜覆盖)等因素对重楼种子萌发和出苗的影响，结果表明，重楼种子胚后熟和萌发的最适温度在l8～20℃，在此温度下处理3～4个月以后，转至0～10℃低温处理2～4个月，可在翌年4月出苗；适宜的播种时间是4月份以前，育苗土覆盖厚度为1 cm 左右，播种后用黑色地膜进行覆盖，可提高出苗率。

    陈翠等（2009年）在相同种植条件下，对来源于云南省23份云南重楼种源进行了物候期、形态特征及经济性状的观察、分析与评价。 结果表明，不同地理种源的重楼生长物候期、形态特征及经济性状园地理来源不同有一定的差异。

切块繁殖：荣林姚（2008）对重楼的无性繁殖技术进行研究，以培养种苗。方法采用根茎分割法繁殖。结果根茎分割法繁殖出苗率高（98％）。结论根茎分割法可缩短重楼的生长周期，其应用可为重楼规模化种植提供良好的种源。陈翠等（2010）研究云南重楼种苗繁育技术。在对云南重楼种苗繁育技术多年试验研究的基础上，总结了云南重楼有性和无性繁育技术。通过种子胚后熟催芽处理，当年出苗率达到30％以上，种子育苗5年开花结果可移栽作种苗，根茎单重达到8～15g；带顶芽的切段当年可移栽，成苗率达到90％以上，不带顶芽的切段第3年开花结果成苗，成苗率达到78％以上，根茎单重达到7～12g。

    通过此技术可实现云南重楼种苗的规范化快速生产，促进云南重楼的产业化栽培和发展。

组织培养：李群等（2006年）以MS培养基为基本培养基,附加不同种类和浓度的生长调节物质,对不同器官,不同取材时期的重楼外植体进行愈伤组织的诱导培养研究。结果表明：6-BA和IAA 有利于愈伤组织的诱导；生长期的幼芽组织是较适宜的培养器官,其愈伤组织的诱导频率达26.7%。至今为止，对重楼的组织培养方面尚未取得令人满意的结果。

    中国科学院昆明植物研究所多次试验采用茎、叶、花蕾作外植体对重楼进行组织培养，均未得到愈伤组织，虽用幼芽曾诱导出愈伤组织，但此愈伤组织生长缓慢，且不含原植物中的皂甙。

发明内容

为了克服现有方法在选材和技术的缺点，本发明提供了在重楼活体块茎上进行快速分蘖繁殖的方法，在不破坏活体块茎的条件下，通过生物学原理阻断植株原生长点，促使活体重楼块茎产生多点萌发。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：以正常生长的重楼块茎为母本，人为阻断活体重楼块茎的原生长点，通过生物学原理促使活体重楼块茎产生萌发多个新的生长点，从而达到快速、多量无性繁殖新植株体（种源）的目的，解决现有技术种子繁育种苗、切块繁殖和组织培养三种方式种苗繁殖率低、出苗慢、消耗大量块茎的问题。

上述技术方案，主要包括以下步骤：

（1）重楼母本的选择：选择基地条件好，定植4-6年以上，块茎重量80-120克以上，植株生长旺盛的重楼作为母本。

（2）追肥：在常规管理的基础上,从6月份重楼的生长旺盛期开始,每隔45天追施富含钙、磷、钾、氮的有机肥，追肥2-4次，按每亩130-150公斤施肥，保持土壤湿度65%，控制遮荫率在70-75%，为母本储存好养份，为来年多点萌发分蘖繁殖积存养分。

（3）促发生长点：在12月份重楼地上植株到苗，新芽尚未出土时，拨开覆土找到顶芽，切除原生长点即顶芽， 毁坏原生长点，促使重楼块茎萌发新的生长点。

（4）顶芽愈伤移栽：切除的顶芽的切口进行愈伤处理，可用草木灰、创痕灵等直接在创口涂抹覆盖，作愈伤处理后直接移栽，移栽后覆土。

（5）出苗移栽：到次年3-5月份新的生长点即可萌发长出新芽并出苗；新芽经过一年的常规管理生长后即可移栽，之后按正常的常规管理即可使顶芽生长为正常植株。

本发明具有以下有益效果：

1、不损坏母本重楼；母本顶芽可现时移栽，在母本生长的过程中就可以有效积累肥料，便于后期的出芽生长，追肥次数间隔大减少肥料用量；

2、新芽形成快，仅需一年的时间，相比现有技术一般需要三年才能移栽，提高了产量，缩短生长和培育周期，保证种苗的后续；

3、成苗率高，一个母本可形成3-30个新芽，呈几何级扩繁，除去顶芽以后促进其他的生长点，获得更多地新芽；

4、新芽增重快。由于有活体母本共给营养，一年的新芽可达2-10克，前期追肥积累肥料，这样便于后期培育新芽，降低施肥的用量，节约成本，生长更为经济；

5、解决了种子育苗时间长，现有技术都是3年后才可移栽；切块育苗母本需求大，现有技术每个母本块3-8克；发芽率低，现有技术每个母本块只发一个新芽等实际问题，可为重楼产业化发展提供更多、更快的种苗。冬天也不需要进行保暖措施，容易实施。

具体实施方式

实施例1

    滇重楼活体块茎快速分蘖繁殖，（1）滇重楼母本的选择：选择基地条件好，定植6年以上，块茎重量100克以上，植株生长旺盛的重楼作为母本。

（2）追肥：在常规管理的基础上，从6月份重楼的生长旺盛期开始，每隔45天追施富含钙、磷、钾、氮的有机肥，追肥3次，按每亩150公斤施肥，保持土壤湿度65%，控制遮荫率在70%，为母本储存好养份，为来年多点萌发分蘖繁殖积存养分。

（3）促发生长点：其他时间常规管理，在12月份重楼地上植株到苗，新芽尚未出土时，拨开覆土找到顶芽，切除原生长点即顶芽， 毁坏原生长点，促使重楼块茎萌发新的生长点。

（4）顶芽愈伤移栽：切除的顶芽的切口进行愈伤处理，可用草木灰直接在创口涂抹覆盖，作愈伤处理后直接移栽，移栽后覆土，一周内禁止浇水淋雨；

因活体重楼块茎处于休眠期，其水分营养消耗不大，由细根即可供给水分。一周内防水主要是防止创口感染导致块茎腐烂，之后按正常的常规管理即可使顶芽生长为正常植株。

（5）出苗移栽：到次年3-5月份新的生长点即可萌发长出新芽并出苗。萌发新芽数量与母本大小呈正相关，3-30个不等；

     新芽经过一年的常规管理生长后即可移栽，之后按正常的常规管理即可使顶芽生长为正常植株。新芽的大小与母本大小呈正相关，与新芽的数量呈负相关，一般为10克/芽。

不损坏母本重楼；母本顶芽可现时移栽，在母本生长的过程中就可以有效积累肥料，便于后期的出芽生长，追肥次数间隔大减少肥料用量。

      新芽形成快，仅需一年的时间，相比现有技术一般需要三年才能移栽，提高了产量，缩短生长和培育周期，保证种苗的后续。

实施例2

    华重楼活体块茎快速分蘖繁殖，（1）华重楼母本的选择：选择基地条件好，定植5年以上，块茎重量90克以上，植株生长旺盛的重楼作为母本。

（2）追肥：在常规管理的基础上，从6月份重楼的生长旺盛期开始，每隔45天追施富含钙、磷、钾、氮的有机肥，追肥3次，按每亩135公斤施肥，保持土壤湿度65%，控制遮荫率在75%，为母本储存好养份，为来年多点萌发分蘖繁殖积存养分。

（3）促发生长点：在12月份重楼地上植株到苗，新芽尚未出土时，拨开覆土找到顶芽，切除原生长点即顶芽， 毁坏原生长点，促使重楼块茎萌发新的生长点。

（4）顶芽愈伤移栽：切除的顶芽的切口进行愈伤处理，可用创痕灵直接在创口涂抹覆盖，作愈伤处理后直接移栽，移栽后覆土，一周内禁止浇水淋雨，因活体重楼块茎处于休眠期，其水分营养消耗不大，由细根即可供给水分。

一周内防水主要是防止创口感染导致块茎腐烂，之后按正常的常规管理即可使顶芽生长为正常植株。

（5）出苗移栽：到次年3-5月份新的生长点即可萌发长出新芽并出苗。萌发新芽数量与母本大小呈正相关，3-30个不等；新芽经过一年的生长后即可移栽。新芽的大小与母本大小呈正相关，与新芽的数量呈负相关，一般为8克/芽左右。

成苗率高，一个母本可形成3-30个新芽，呈几何级扩繁，除去顶芽以后促进其他的生长点，获得更多地新芽。新芽增重快。

由于有活体母本共给营养，一年的新芽可达2-10克，前期追肥积累肥料，这样便于后期培育新芽，降低施肥的用量，节约成本，生长更为经济。

实施例3

    南重楼活体块茎快速分蘖繁殖，（1）南重楼母本的选择：选择基地条件好，定植4年以上，块茎重量120克以上，植株生长旺盛的重楼作为母本。

（2）追肥：在常规管理的基础上，从6月份重楼的生长旺盛期开始，每隔45天追施富含钙、磷、钾、氮的有机肥，追肥4次，按每亩140公斤施肥，保持土壤湿度65%，控制遮荫率在70%，为母本储存好养份，为来年多点萌发分蘖繁殖积存养分。

（3）促发生长点：在常规管理的基础上，到12月份重楼地上植株到苗，新芽尚未出土时,拨开覆土找到顶芽，切除原生长点即顶芽， 毁坏原生长点，促使重楼块茎萌发新的生长点。

（4）顶芽愈伤移栽：切除的顶芽的切口进行愈伤处理，可用草木灰、创痕灵等直接在创口涂抹覆盖，作愈伤处理后直接移栽，移栽后覆土，一周内禁止浇水淋雨，因活体重楼块茎处于休眠期，其水分营养消耗不大，由细根即可供给水分。一周内防水主要是防止创口感染导致块茎腐烂，之后按正常的常规管理即可使顶芽生长为正常植株。

（5）出苗移栽：到次年3-5月份新的生长点即可萌发长出新芽并出苗。萌发新芽数量与母本大小呈正相关，3-30个不等；新芽经过一年的生长后即可移栽。新芽的大小与母本大小呈正相关，与新芽的数量呈负相关，一般为7克/芽左右。

Claims (5)

1.一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术，采用如下步骤进行：

（1）重楼母本的选择：选择基地条件好，定植4-6年以上，块茎重量80-120克以上，植株生长旺盛的重楼作为母本；

（2）追肥：从6月份重楼的生长旺盛期开始，每隔45天追施富含钙、磷、钾、氮的有机肥，保持土壤湿度65%，控制遮荫率在70-75%，为母本储存好养份；

（3）促发生长点：在12月份重楼地上植株到苗，新芽尚未出土时，拨开覆土找到顶芽，切除顶芽即原生长点；

（4）顶芽愈伤移栽：切除的顶芽的切口进行愈伤处理，作愈伤处理后直接移栽，移栽后覆土，一周内禁止浇水淋雨；

（5）出苗移栽：到次年3-5月份新的生长点即可萌发长出新芽并出苗；新芽经过一年的常规管理生长后即可移栽，之后按正常的常规管理即可使顶芽生长为正常植株。

2.如权利要求1所述的一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术，其特征在于：所述步骤（2）追肥为按每亩130-150公斤进行追施有机肥。

3.如权利要求1所述的一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术，其特征在于：所述步骤（2）追肥次数为2-4次。

4.如权利要求2所述的一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术，其特征在于：所述步骤（2）追肥次数为2-4次。

5.如权利要求1-4任一项所述的一种重楼活体块茎快速分蘖繁殖技术，其特征在于：所述步骤（4）中的愈伤处理可用草木灰活创痕灵直接在创口涂抹覆盖。