CN104597098A - 一种琼脂糖凝胶板的保存方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种琼脂糖凝胶板的保存方法，所述琼脂糖凝胶板外包覆密封包裹物，步骤为覆膜，单个包装，装盒和套袋。与现有技术相比，为了保证试剂盒的长期有效，本发明的目的是提供一种能长时间存放琼脂糖凝胶板的方法，通过该方法制得的琼脂糖凝胶无细菌生长，防腐性能极强，方便保存；经实验，经所述琼脂糖凝胶板的保存方法保存的琼脂糖凝胶板在4℃冰箱内保存时间长达6个月，解决了琼脂糖凝胶板保存时间过短的困扰，存在极大的市场价值。
Description
技术领域
本发明涉及医药卫生技术领域，具体来说，涉及琼脂糖凝胶板的保存方法。
背景技术
电泳法是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如淀粉胶、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(％)的方法。电泳缓冲液的pH在6～9之间，离子强度0.02～0.05为最适。常用1％的琼脂糖作为电泳支持物。琼脂糖凝胶分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广；醋酸纤维素薄膜电泳方法最简单，但点样不能太多，且区带淡；聚丙烯酰胺凝胶电泳易分离清晰，但操作繁琐，不易掌握且价格昂贵，试剂有毒需要防护；淀粉胶电泳制板时易碎裂，缺乏韧性，影响分离效果，操作亦较复杂。
临床应用上，对于分子量较大的样品，一般采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。
据了解，蛋白质和核酸会根据pH不同带有不同电荷，在电场中受力大小不同，因此跑的速度不同，根据这个原理可将其分开。许多琼脂糖分子依靠氢键及其他力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在泳动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。由于其分子上无带电基团，在缓冲液离子强度大于0.05时，对蛋白质无吸附作用，也无电渗现象，因而分辨率和重现性均较好，是一种用于血清蛋白电泳、各种同工酶电泳、脂蛋白电泳等项目检测的优良的电泳材料。
对于琼脂糖凝胶电泳，约可区分相差100bp的DNA片段，其浓度通常在0.5～2％之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。注意高浓度的胶可能使分子大小相近的DNA带不易分辨，造成条带缺失现象。
在发明人先期的研究中，成功制备了一种超薄型琼脂糖电泳凝胶板并用于血清蛋白的分离与检测(实用新型专利：一种超薄型琼脂糖凝胶电泳胶板分离血清蛋白类诊断试剂盒，专利号：ZL201220365558.6)。然而，尽管在制备凝胶板时已非常注意消毒步骤，但因为琼脂糖易长菌，导致配制好的琼脂糖凝胶板放置的时间很短，往往一周左右就会长菌而报废；仍需要现做现用，较为麻烦。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的是提供琼脂糖凝胶板的保存方法，使制备的琼脂糖凝胶板保存时间尽可能长，以长期处于良好的备用状态，这对试剂盒有效期的保证是极为重要的。
为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种琼脂糖凝胶板的保存方法，其中，所述琼脂糖凝胶板外包覆密封包裹物；包括如下步骤：
步骤a)将琼脂糖凝胶板覆膜；
步骤b)将步骤a)所得的琼脂糖凝胶板单个包装；
步骤c)将步骤b)所得的琼脂糖凝胶板装盒；
步骤d)将步骤c)所得的琼脂糖凝胶板套袋。
优选地，所述密封包裹物从内到外依次为塑料薄膜、真空无菌袋、密封盒和密实袋。
作为进一步优选方案，步骤a)具体操作为：取制得的琼脂糖凝胶板，将所述塑料薄膜贴于凝胶上，确保所述塑料薄膜与所述琼脂糖凝胶间不能有气泡；所述塑料薄膜四周多出部分向下衬聚酯垫片底部内侧翻折。
作为进一步优选方案，步骤b)具体操作为：将步骤a)所得的一包覆塑料薄膜的琼脂糖凝胶板放入真空无菌袋，密封。
作为进一步优选方案，步骤c)具体操作为：将步骤b)所得的装入真空无菌袋的琼脂糖凝胶板放入密封盒内，用胶带封口。
作为进一步优选方案，步骤d)具体操作为：将步骤c)所得的密封盒套上密实袋，放入4℃冰箱保存。
进一步，所述真空无菌袋所用材质包括但不限于：镀铝材料、纯铝材料、PET、VMPET、PA、PE、CPP、HDPE、LDPE、OPP、PO。
作为一种优选方案，该所述琼脂糖凝胶板的制备环境全程为无菌环境。
优选地，所述超薄琼脂糖凝胶板模具内部垫所述聚酯垫片。
更优选地，所述聚酯垫片为亲水性聚酯垫片。
优选地，所述该琼脂糖凝胶厚度小于1mm。
更优选地，所述该琼脂糖凝胶厚度为0.8mm，在不影响检测数据准确性的前提下节约成本。
优选地，所述塑料薄膜包被整个所述琼脂糖凝胶。
更优选地，所述塑料薄膜将所述琼脂糖凝胶密封包被于所述塑料薄膜和所述聚酯垫片之间。
优选地，所述真空无菌袋将琼脂糖凝胶板单个包装，即每个真空无菌袋中只有一个琼脂糖凝胶板。
更优选地，每个密封盒中存放一个或一个以上单个包装的琼脂糖凝胶板。
优选地，将已标明相关信息的密封盒套上密实袋后封口，放4℃冰箱保存。
另外需要说明的是，在保存琼脂糖凝胶板的过程中，本发明提出了在严格的无菌环境下制备、保存琼脂糖凝胶板的思路；但为得到更好的灭菌效果和更长的保存时间，可在制备琼脂糖凝胶板的过程中添加抗生素溶液加强防腐灭菌，此操作虽然延长了琼脂糖凝胶板的保存时效，但并不决定其的保存效果。与现有技术相比，所述该琼脂糖凝胶板体积小、方便存放，防腐性能强，有效解决了琼脂糖凝胶板保存过短的困扰，并存在极大的市场价值。
附图说明
图1是本发明的一较佳实施例未进行密封保存的示意图；
图2是本发明的一较佳实施例示意图；
图3是超薄琼脂糖凝胶板制成后当天实验泳道图；
图4是放入4℃冰箱保存3个月后的超薄琼脂糖凝胶板实验泳道图；
图5是放入4℃冰箱保存4个月后的超薄琼脂糖凝胶板实验泳道图；
图6是放入4℃冰箱保存5个月后的超薄琼脂糖凝胶板实验泳道图；
图7是放入4℃冰箱保存6个月后的超薄琼脂糖凝胶板实验泳道图；
图中：11、聚酯垫片，12、琼脂糖凝胶，13、塑料薄膜；
1、超薄新型琼脂糖凝胶板，2、密封组件，21、真空无菌袋，22、密封盒，23、密实袋。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细、完整地说明。
步骤a)将所述琼脂糖凝胶板覆膜
取制好的琼脂糖凝胶板，将所述塑料薄膜贴于凝胶上，确保所述塑料薄膜与所述琼脂糖凝胶间不能有气泡，所述塑料薄膜四周多出部分向下衬聚酯垫片底部内侧翻折；待所述琼脂糖凝胶凝固后，留待使用。
步骤b)将所述琼脂糖凝胶板单个包装
使用真空无菌袋单个包装所述该密封包被于塑料薄膜和聚酯垫片之间的琼脂糖凝胶板，每个所述真空无菌袋内放置一块所述琼脂糖凝胶板。
步骤c)将所述琼脂糖凝胶板装盒
取所述密封盒存放所述单个包装的琼脂糖凝胶板，每个所述密封盒放入一块或一块以上单个包装的琼脂糖凝胶板，用胶带封口，在盒盖上标明相关信息。
步骤d)将所述琼脂糖凝胶板套袋保存
将所述已标明相关信息的密封盒套上所述密实袋封口，放4℃冰箱保存。
下面就本发明制备完成的防腐琼脂糖凝胶板作稳定性实验。
实施例1 制成后当天实验图(图3)
取一新鲜血清样本，用制成当天的防腐琼脂糖凝胶板做蛋白电泳实验，并对其结果进行数据分析：
| 泳道 | ALB | α1球蛋白 | α2球蛋白 | β球蛋白 | γ球蛋白 |
| 1 | 64.5 | 3.6 | 8.7 | 12.3 | 10.8 |
| 2 | 64.8 | 3.8 | 9.2 | 11.7 | 10.4 |
| 3 | 65.2 | 4.0 | 8.7 | 12.1 | 10.0 |
| 4 | 65.9 | 3.9 | 8.9 | 11.5 | 9.8 |
| 均值(x) | 65.1 | 3.83 | 8.9 | 11.9 | 10.3 |
| 标准差(s) | 0.52 | 0.15 | 0.20 | 0.32 | 0.38 |
| 变异系数(CV％) | 0.81 | 3.87 | 2.31 | 2.66 | 3.75 |
[0053] 实施例2 4℃冰箱保存3个月样品实验图(图4)
取一样品，密封盒内潮湿、外观湿润、琼脂板水分充足、饱满、无细菌生长的防腐琼脂糖凝胶板。取一新鲜血清样本，用取出的样品做蛋白电泳实验，并对其结果进行数据分析(由于4号泳道存在拖尾，结果剔除)：
| 泳道 | ALB | α1球蛋白 | α2球蛋白 | β球蛋白 | γ球蛋白 |
| 1 | 54.7 | 4.9 | 10.2 | 14.3 | 16.0 |
| 2 | 54.2 | 4.3 | 9.6 | 14.6 | 17.3 |
| 3 | 53.4 | 4.8 | 10.3 | 13.2 | 18.2 |
| 5 | 52.2 | 4.3 | 10.2 | 15.1 | 18.2 |
| 6 | 54.7 | 4.0 | 10.5 | 12.6 | 18.2 |
| 7 | 55.6 | 4.7 | 9.9 | 13.6 | 16.2 |
| 均值(x) | 54.1 | 4.5 | 10.1 | 13.9 | 17.4 |
| 标准差(s) | 1.19 | 0.35 | 0.32 | 0.93 | 1.03 |
| 变异系数(CV％) | 2.20 | 7.83 | 3.15 | 6.72 | 5.94 |
实施例3 4℃冰箱保存4个月样品实验图(图5)
取一样品，密封盒内潮湿、外观湿润、琼脂板水分充足、饱满、无细菌生长的防腐琼脂糖凝胶板。取一新鲜血清样本，用取出的样品做蛋白电泳实验，并对其结果进行数据分析：
| 泳道 | ALB | α1球蛋白 | α2球蛋白 | β球蛋白 | γ球蛋白 |
| 1 | 61.2 | 2.8 | 7.9 | 12.4 | 15.7 |
| 2 | 63.0 | 2.5 | 8.1 | 10.1 | 16.2 |
| 3 | 60.2 | 2.8 | 7.1 | 13.0 | 16.8 |
| 4 | 60.7 | 2.6 | 7.1 | 11.7 | 17.9 |
| 5 | 60.0 | 2.6 | 7.2 | 11.8 | 18.5 |
| 6 | 62.4 | 2.8 | 6.3 | 11.6 | 16.9 |
| 7 | 62.1 | 2.7 | 7.2 | 11.4 | 16.6 |
| 8 | 62.3 | 3.0 | 6.5 | 11.5 | 16.8 |
| 9 | 61.7 | 2.7 | 8.2 | 11.9 | 15.6 |
[0059]
| 10 | 61.0 | 2.7 | 8.4 | 11.1 | 16.7 |
| 均值(x) | 16.46 | 2.72 | 7.4 | 11.65 | 16.77 |
| 标准差(s) | 1.00 | 0.14 | 0.72 | 0.76 | 0.89 |
| 变异系数(CV％) | 1.63 | 5.14 | 9.72 | 6.57 | 5.32 |
实施例4 4℃冰箱保存5个月样品实验图(图6)
取一样品，密封盒内潮湿、外观湿润、琼脂板水分充足、饱满、无细菌生长的防腐琼脂糖凝胶板。取一新鲜血清样本，用取出的样品做蛋白电泳实验，并对其结果进行数据分析：
| 泳道 | ALB | α1球蛋白 | α2球蛋白 | β球蛋白 | γ球蛋白 |
| 1 | 48.6 | 2.6 | 9.7 | 13.8 | 25.4 |
| 2 | 46.8 | 3.0 | 9.0 | 14.7 | 26.6 |
| 3 | 43.4 | 3.2 | 10.6 | 15.7 | 27.1 |
| 4 | 43.3 | 3.2 | 10.6 | 15.0 | 28.0 |
| 5 | 44.7 | 3.2 | 10.8 | 15.0 | 26.3 |
| 6 | 49.3 | 3.0 | 9.0 | 13.4 | 25.4 |
| 7 | 48.9 | 3.2 | 8.9 | 14.1 | 24.9 |
| 8 | 48.0 | 2.9 | 9.4 | 14.4 | 25.4 |
| 9 | 48.0 | 3.0 | 9.3 | 14.3 | 25.4 |
| 10 | 50.0 | 2.8 | 8.5 | 15.1 | 23.0 |
| 均值(x) | 47.1 | 3.0 | 9.6 | 14.6 | 25.8 |
| 标准差(s) | 2.46 | 0.20 | 0.82 | 0.69 | 1.36 |
| 变异系数(CV％) | 5.22 | 6.73 | 8.52 | 4.71 | 5.29 |
实施例5 4℃冰箱保存6个月样品实验图(图7)
取一样品，密封盒内潮湿、外观湿润、琼脂板水分充足、饱满、无细菌生长的防腐琼脂糖凝胶板。取一新鲜血清样本，用取出的样品做蛋白电泳实验，并对其结果进行数据分析：
| 泳道 | ALB | α1球蛋白 | α2球蛋白 | β球蛋白 | γ球蛋白 |
[0066]
| 1 | 63.1 | 2.6 | 7.9 | 11.7 | 14.8 |
| 2 | 65.8 | 2.8 | 7.1 | 11.2 | 13.1 |
| 3 | 61.8 | 2.6 | 7.9 | 12.5 | 15.1 |
| 4 | 61.9 | 2.8 | 8.0 | 12.4 | 14.9 |
| 5 | 64.4 | 2.6 | 7.2 | 11.3 | 14.4 |
| 6 | 62.2 | 2.8 | 7.1 | 13.2 | 14.7 |
| 7 | 64.4 | 2.9 | 8.0 | 10.9 | 13.8 |
| 8 | 62.1 | 3.0 | 7.4 | 12.6 | 14.8 |
| 9 | 64.0 | 2.7 | 6.6 | 12.4 | 14.3 |
| 10 | 61.5 | 2.7 | 7.5 | 13.9 | 14.4 |
| 均值(x) | 63.1 | 2.8 | 7.5 | 12.2 | 14.4 |
| 标准差(s) | 1.38 | 0.13 | 0.45 | 0.89 | 0.57 |
| 变异系数(CV％) | 2.19 | 4.67 | 6.05 | 7.31 | 3.92 |
综上述实验数据可知，所得数据变异系数(CV％)低于10％，均在可接受范围之内；由此可知，本发明制得的琼脂糖凝胶板能存放至少6个月。相较现有技术制得的琼脂糖凝胶板，本发明的优点是：无细菌生长，防腐性能极强，方便保存；经实验，经所述琼脂糖凝胶板的保存方法保存的琼脂糖凝胶板在4℃冰箱内保存时间长达6个月，有效解决了琼脂糖凝胶板保存时间过短的困扰，对临床医药分析制剂领域具有深远的借鉴意义并存在极大的市场价值。
最后有必要在此说明的是：上面结合附图对本发明实施方式进行了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。
Claims (10)
1.一种琼脂糖凝胶板的保存方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶板外包覆密封包裹物，包括如下步骤：
步骤a)将琼脂糖凝胶板覆膜；
步骤b)将步骤a)所得的琼脂糖凝胶板单个包装；
步骤c)将步骤b)所得的琼脂糖凝胶板装盒；
步骤d)将步骤c)所得的琼脂糖凝胶板套袋。
2.根据权利要求1所述的琼脂糖凝胶板的保存方法，其特征在于：所述密封包裹物从内到外依次为塑料薄膜、真空无菌袋、密封盒和密实袋。
3.根据权利要求1所述的琼脂糖凝胶板的保存方法，其特征在于，步骤a)具体操作为：取琼脂糖凝胶板，将所述塑料薄膜贴于凝胶上，所述塑料薄膜四周多出部分向下衬聚酯垫片底部内侧翻折。
4.根据权利要求1所述的琼脂糖凝胶板的保存方法，其特征在于，步骤b)具体操作为：将步骤a)所得的一包覆塑料薄膜的琼脂糖凝胶板放入真空无菌袋，密封。
5.根据权利要求1所述的琼脂糖凝胶板的保存方法，其特征在于，步骤c)具体操作为：将步骤b)所得的装入真空无菌袋的琼脂糖凝胶板放入密封盒内，用胶带封口。
6.根据权利要求1所述的琼脂糖凝胶板的保存方法，其特征在于，步骤d)具体操作为：将步骤c)所得的密封盒套上密实袋，放入4℃冰箱。
7.根据权利要求6所述的琼脂糖凝胶板的保存方法，其特征在于：所述真空无菌袋所用材质为镀铝材料、纯铝材料、PET、VMPET、PA、PE、CPP、HDPE、LDPE、OPP、PO。
8.根据权利要求3所述的琼脂糖凝胶板，其特征在于：所述塑料薄膜将所述琼脂糖凝胶密封包被于所述塑料薄膜和所述聚酯垫片之间。
9.根据权利要求4所述的琼脂糖凝胶板，其特征在于：每个所述真空无菌袋独立包装一所述琼脂糖凝胶板。
10.根据权利要求5所述的琼脂糖凝胶板，其特征在于：每个密封盒中存放一个或一个以上单个包装的琼脂糖凝胶板。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150506 |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |