CN104592370A - OsPYL9蛋白及其编码基因和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了OsPYL9蛋白及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质,是如下(a)或(b)或(c):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐旱性相关的由序列1衍生的蛋白质;(c)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐渗透胁迫相关的由序列1衍生的蛋白质。将所述蛋白质的编码基因导入植物,可以显著提高植物对干旱和渗透胁迫的耐逆性。本发明对于培育耐旱性作物、耐旱性林草等耐旱新品种具有重要的理论及实际意义。
Description
技术领域
本发明涉及OsPYL9蛋白及其编码基因和应用。
背景技术
随着全球水资源的缺乏和极端气候事件频率的不断上升,干旱所造成的渗透胁迫对作物的产量和品质的负作用日趋显著,抗旱以及其它抗逆性状的改良成为今后作物改良的一个重要方向。脱落酸(ABA)是一个响应胁迫信号转导的关键调控因子,在胁迫条件下,ABA可调控气孔关闭和基因表达,进而调控植物的耐逆性。
ABA受体的研究对于深入了解植物生长发育及逆境适应性调节的分子生理机制具有重要的科学价值和社会意义。2009年,受体蛋白PYR/PYL/RCAR的发现标志着ABA受体的研究获得了前所未有的大丰收。人们对ABA受体的发现与认识的深化能够帮助植物对抗干旱等恶劣生存条件,有望让科学家设计出新的保护作物不受长期干旱伤害的方法,从而提高农作物的产量。
水稻(Oryza sativa)属于半水生性植物,耐旱性介于旱生性植物与水生性植物之间,是世界上主要的粮食作物之一。随着全球水资源的日益匮乏,干旱成为多数地区所面临的最严重的自然灾害之一,而这一现状严重影响了水稻的正常生长,制约了水稻生产的持续发展。
发明内容
本发明的目的是提供OsPYL9蛋白及其编码基因和应用。
本发明提供的蛋白质,来自水稻品系Dongjin,命名为OsPYL9蛋白,是如下(a)或(b)或(c):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐旱性相关的由序列1衍生的蛋白质;(c)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐渗透胁迫相关的由序列1衍生的蛋白质。
为了使(a)中的蛋白质便于纯化,可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。
表1标签的序列
标签 | 残基 | 序列 |
Poly-Arg | 5-6(通常为5个) | RRRRR |
Poly-His | 2-10(通常为6个) | HHHHHH |
FLAG | 8 | DYKDDDDK |
Strep-tag II | 8 | WSHPQFEK |
c-myc | 10 | EQKLISEEDL |
上述(b)或(c)中的蛋白质可人工合成,也可先合成其编码基因,再进行生物表达得到。上述(b)或(c)中的蛋白质的编码基因可通过将序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子,和/或进行一个或几个碱基对的错义突变,和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。
编码所述OsPYL9蛋白的基因(OsPYL9基因)也属于本发明的保护范围。
所述OsPYL9基因可为如下(1)或(2)或(3)或(4)或(5)或(6)所述的DNA分子:(1)编码区如序列表中序列2自5’末端第116-730位核苷酸所示的DNA分子;(2)序列表中序列2自5’末端第116-742位核苷酸所示的DNA分子;(3)在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA分子杂交且编码植物耐旱性相关蛋白的DNA分子;(4)与(1)或(2)限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码植物耐旱性相关蛋白的DNA分子;(5)在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA分子杂交且编码植物耐渗透胁迫相关蛋白的DNA分子;(6)与(1)或(2)限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码植物耐渗透胁迫相关蛋白的DNA分子。上述严格条件可为在6×SSC,0.5%SDS的溶液中,在65℃下杂交,然后用2×SSC、0.1%SDS和1×SSC、0.1%SDS各洗膜一次。
含有所述OsPYL9基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌均属于本发明的保护范围。
扩增所述OsPYL9基因的全长或其任意片段的引物对也属于本发明的保护范围。所述引物对可为如下引物对(用于扩增基因全长):5'-CACCGAATTCATGGTGGAGGT-3'和5'-CTTGAATTCTTGGCAACAATC-3'。所述引物对也可为如下引物对(用于对基因表达进行定量):5'-CTCAGTGTCAGGTTCGTGGGA-3'和5'-GCCTCCACGAAGTAGCATGTC-3'。
可用现有的植物表达载体构建含有所述OsPYL9基因的重组载体。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域,即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端。使用所述OsPYL9基因构建重组载体时,在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子或组成型启动子,它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用;此外,使用本发明的基因构建重组载体时,还可使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子,但必需与编码序列的阅读框相同,以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的,可以是天然的,也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选,可对所用植物表达载体进行加工,如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等。从转基因植物的安全性考虑,可不加任何选择性标记基因,直接以逆境筛选转化植株。
所述重组载体具体可为在植物表达载体pUlla的attR1和attR2重组位点间插入所述OsPYL9基因得到的重组质粒pUlla-OsPYL9。
本发明还保护一种培育转基因植物的方法,为将所述OsPYL9基因导入目的植物,得到耐旱性高于所述目的植物的转基因植物。所述耐旱性高体现为在干旱胁迫的条件下植物的存活率高和/或平均根长数值高。所述方法中,携带有所述OsPYL9基因的表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物。所述OsPYL9基因具体可通过所述重组质粒pUlla-OsPYL9导入所述目的植物。所述目的植物为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为水稻。所述双子叶植物具体为哥伦比亚生态型拟南芥。
本发明还保护一种培育转基因植物的方法,为将所述OsPYL9基因导入目的植物,得到耐渗透胁迫能力高于所述目的植物的转基因植物。所述渗透胁迫具体可为PEG引发的渗透胁迫,更具体可为PEG8000引发的渗透胁迫。所述耐渗透胁迫的能力高体现为在渗透胁迫的条件下植物的存活率高和/或平均根长数值高。以上所述方法中,携带有所述OsPYL9基因的表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物。所述OsPYL9基因具体可通过所述重组质粒pUlla-OsPYL9导入所述目的植物。所述目的植物为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为水稻。所述双子叶植物具体为哥伦比亚生态型拟南芥。
本发明还保护所述OsPYL9基因在植物育种中的应用。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为水稻。所述双子叶植物具体为哥伦比亚生态型拟南芥。
本发明还保护所述OsPYL9蛋白在调节植物的耐旱性中的应用。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为水稻。所述双子叶植物具体为哥伦比亚生态型拟南芥。
本发明还保护所述OsPYL9蛋白在调解植物对渗透胁迫的耐逆性中的应用。所述植物为单子叶植物或双子叶植物。所述单子叶植物具体可为水稻。所述双子叶植物具体为哥伦比亚生态型拟南芥。
本发明从水稻中筛选到一个能够提高植物对干旱胁迫和渗透胁迫的耐逆性的新蛋白及其编码基因。该基因突变失活的水稻在多个生长阶段表现出不良生长状况。将该基因导入拟南芥,可是显著提高拟南芥对干旱和渗透胁迫的耐逆性。本发明对于培育耐旱性作物、耐旱性林草等耐旱新品种具有重要的理论及实际意义,可用于培育农牧业和生态环境治理所需的抗性植物品种。
附图说明
图1为实施例1中OsPYL9基因的相对表达量结果。
图2为实施例2中PCR鉴定OsPYL9基因的电泳图。
图3为实施例2中的结实率和千粒重结果。
图4为实施例2中的生根率和根长结果。
图5为实施例2中,在MS培养基上培养4天后、在MS培养基上培养6天后和移栽到土中培养10天后的照片。
图6为实施例2中的株高结果。
图7为实施例2中的种子萌发率结果。
图8为实施例2中培养36小时时的照片。
图9为实施例3中OsPYL9基因的相对表达量结果。
图10为实施例3中的表型照片。
图11为实施例3中根长的测量结果。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。植物表达载体pLeela:Invitrogen公司。
植物表达载体pUlla:用序列表的序列3所示的Ubiquitin启动子取代植物表达载体pLeela中AscⅠ和HindⅢ酶切位点之间的小片段(即CaMV35S启动子)得到的重组质粒。
农杆菌菌株Gv3101(pMP90RK),又称Agrobacterium tumefaciens strain GV3101(pMP90RK):参考文献:Binary Agrobacterium vectors for plant transformation,M Bevanin,Nucleic Acids Research(1984)12:8711-8721.。
哥伦比亚生态型拟南芥(ecotype columbia,Arabidopsis thaliana):参考文献:Arabidopsis,a useful weed.Meyerowitz EM,Cell(1989)56:263-270.。
水稻品系Dongjin:参考文献:A rice orthologue of the ABA receptor,OsPYL/RCAR5,is a positive regulator of the ABA signal transduction pathwayin seed germination and early seedling growth.Hyunmi K,Journal ofExperimental Botany(2012)63:1013-1024.。
实施例1、OsPYL9基因的发现以及水稻胁迫处理时OsPYL9基因的表达情况
一、OsPYL9基因的发现
从水稻品系Dongjin中发现一个新基因,其开放阅读框如序列表的序列2自5’末端第116-730位核苷酸所示,将其命名为OsPYL9基因。OsPYL9基因编码的蛋白质如序列表的序列1所示,将其命名为OsPYL9蛋白。
二、水稻胁迫处理后OsPYL9基因的表达谱
取培养7天的水稻品系Dongjin的幼苗,分别进行干旱处理和ABA处理。干旱处理的方法为土壤失水80%。ABA处理的方法为用100μM ABA水溶液浸泡幼苗根部6h。同时设置未经任何处理的植株为对照。
完成处理后,取幼苗的地上部分,提取总RNA并反转录为cDNA。用F1和R1组成的引物对鉴定OsPYL9基因,用F2和R2组成的引物对鉴定OsACTIN1基因(内参基因),OsPYL9基因的相对表达量见图1。OsPYL9基因的表达明显受外源ABA的抑制,干旱处理对OsPYL9基因表达的影响不大,OsPYL9基因可能通过表达量的下调响应较高浓度的外源ABA,从而增强植物对外源ABA的耐受性。
F1:5'-CTCAGTGTCAGGTTCGTGGGA-3';
R1:5'-GCCTCCACGAAGTAGCATGTC-3'。
F2:5'-TGCTATGTACGTCGCCATCCAG-3';
R2:5'-AATGAGTAACCACGCTCCGTCA-3'。
实施例2、突变体水稻的生长发育过程和耐渗透胁迫能力
一、突变体水稻的获得
OsPYL9基因杂合突变体水稻种子(其出发植株为水稻品系Dongjin),购自CropBiotech Institute,Department of Plant Systems Biotech,Kyung Hee University,Yongin446-701,Republic of Korea。
将种子培育为植株并自交获得T1代种子,将T1代种子培育为T1植株。将T1代植株自交,获得T2代种子,将T2代种子培育为T2代植株。
取幼苗期T1代植株的叶片,用F1和R1组成的引物对鉴定OsPYL9基因,用F2和R2组成的引物对鉴定OsACTIN1基因(内参基因),OsPYL9基因不表达的植株为纯合的突变体植株。抽样取幼苗期T2代植株的叶片,用F1和R1组成的引物对鉴定OsPYL9基因,用F2和R2组成的引物对鉴定OsACTIN1基因(内参基因),OsPYL9基因不表达量的植株为纯合的突变体植株。对于某一纯合的突变体T1代植株来说,其抽样检测的T2代植株也应均为纯合的突变体植株。
以某一纯合的T1代植株(突变体株系)为例,其鉴定结果见图2。
二、突变体水稻的鉴定
取纯合的突变体株系的T2代种子,取水稻品系Dongjin的种子,分别进行如下操作:将种子置于蒸馏水浸湿的滤纸上培养至萌发(28℃,16小时光照/8小时黑暗,约48小时),然后将萌发的种子移至土中培养10天(28℃,16小时光照/8小时黑暗),然后于室外空地培养并收获种子。进行三次重复实验,每次重复实验中,突变体株系和水稻品系Dongjin各随机取5株植株统计结实率和千粒重(取植株的全部种子进行统计分析),结果见图3。突变体具有较低的结实率和千粒重,说明OsPYL9基因的突变会影响产量和种子质量。
取纯合的突变体株系的T2代种子,取水稻品系Dongjin的种子,分别进行如下操作:取种子,脱去颖壳后播种于MS培养基上进行培养(28℃,16小时光照/8小时黑暗),每天统计种子生根率和已萌发种子的根长,连续统计至萌发率与生根率均达到100%(通常需要7天);另取种子,置于蒸馏水浸湿的滤纸上培养至萌发(28℃,16小时光照/8小时黑暗,约48小时),然后移栽到土中培养10天(28℃,16小时光照/8小时黑暗)。进行三次重复实验,每次重复实验中,突变体株系和水稻品系Dongjin各随机取15粒种子。生根率和根长的结果见图4。在MS培养基上培养4天后的照片见图5A(横线以上为水稻品系Dongjin,横线以下为突变体),在MS培养基上培养6天后的照片见图5B(横线以上为水稻品系Dongjin,横线以下为突变体),移栽到土中培养10天后的照片见图5C(左为水稻品系Dongjin,右为突变体)。移栽到土中培养10天后的株高见图6。突变体种子的生根率和根长均小于水稻品系Dongjin,说明突变体种子萌发期生根较野生型水稻迟缓。突变体幼苗的株高小于水稻品系Dongjin,说明突变体幼苗期生长较野生型水稻迟缓。
取纯合的突变体株系的T2代种子,取水稻品系Dongjin的种子,分别进行如下操作:取种子,脱去颖壳后分成两组,分别置于蒸馏水浸湿的滤纸上或含20g/100mL PEG8000的水溶液浸润的滤纸上,培养(28℃,16小时光照/8小时黑暗),每12小时统计种子萌发率,连续统计至各组种子萌发率均达到100%(约60小时)。进行三次重复实验,每次重复实验中,突变体株系和水稻品系Dongjin各随机取30-40粒种子。种子萌发率的统计结果见图7。培养36小时时的照片见图8。在水处理的条件下,突变体和水稻品系Dongjin的萌发率没有显著差异。在PEG8000处理的条件下,突变体的种子萌发率低于水稻品系Dongjin,在处理36h时最为显著。结果表明,突变体种子萌发过程耐渗透胁迫能力比野生型水稻弱。
实施例3、转基因拟南芥的获得和鉴定
一、转基因拟南芥的获得
1、重组质粒pUlla-OsPYL9的获得
(1)提取分蘖期的水稻品系Dongjin的叶片的总RNA并反转录为cDNA。
(2)以步骤(1)得到的cDNA为模板,用F3和R3组成的引物对进行PCR扩增,得到PCR扩增产物。
F3:5'-CACCGAATTCATGGTGGAGGT-3';
R3:5'-CTTGAATTCTTGGCAACAATC-3'。
(3)将步骤(2)得到的PCR扩增产物与载体pENTR/D-TOPO(购自Invitrogen公司)连接,获得中间载体OsPYL9-pENTR。根据测序结果,对中间载体OsPYL9-pENTR进行结构描述如下:将具有序列表的序列2自5’末端第116-742位核苷酸的DNA分子导入了含有拓扑异构酶的载体pENTR/D-TOPO。
(4)取中间载体OsPYL9-pENTR,通过LR反应(LR克隆酶,购自Invitrogen公司)将步骤(2)得到的PCR扩增产物导入植物表达载体pUlla,得到重组质粒pUlla-OsPYL9。根据测序结果,对重组质粒pUlla-OsPYL9进行结构描述如下:在植物表达载体pUlla的attR1和attR2重组位点间插入了具有序列表的序列2自5’末端第116-742位核苷酸的DNA分子。重组质粒pUlla-OsPYL9中具有OsPYL9基因的表达盒(OsPYL9基因的表达盒自上游至下游依次包括Ubiquitin启动子、OsPYL9基因和pA35S终止子)。
2、重组农杆菌的获得
将重组质粒pUlla-OsPYL9导入农杆菌菌株Gv3101(pMP90RK),得到重组农杆菌,又称重组菌Gv3101(pMP90RK)/pUlla-OsPYL9。
3、转基因拟南芥的获得
(1)将重组菌Gv3101(pMP90RK)/pUlla-OsPYL9采用花序浸泡法转化哥伦比亚生态型拟南芥,收获T0代种子。
(2)将T0代种子播种于含100μg/ml草甘磷的MS培养基,筛选抗性植株(即为TO代植株),抗性植株自交获得T1代种子。
(3)将T1代种子播种于含100μg/ml草甘磷的MS培养基,筛选抗性植株(即为T1代植株),抗性植株自交获得T2代种子。
(4)将T2代种子随机抽样播种于含100μg/ml草甘磷的MS培养基,筛选抗性植株(即为T2代植株)。
对于某一TO代植株,如果其T1代植株中,抗性植株和非抗性植株满足3:1的分离比,该T0代植株为单拷贝的杂合转基因植株。
对于某一T1代植株,如果其抽样检测的T2代植株均为抗性植株,该T1代植株为纯合的转基因植株,该植株及其自交后代为一个纯合的转基因株系。
4、转空载体拟南芥的获得
用植物表达载体pUlla代替重组质粒pUlla-OsPYL9,依次进行步骤2和步骤3,得到转空载体拟南芥。
5、转基因拟南芥的鉴定
随机取3个单拷贝的纯合的转基因株系(OE-2株系、OE-3株系和OE-8株系)进行鉴定。
(1)分子鉴定
OE-2株系的T2代植株、OE-3株系的T2代植株、OE-8株系的T2代植株、转空载体拟南芥的T2代植株和哥伦比亚生态型拟南芥,分别进行如下鉴定:提取2周龄幼苗的总RNA并反转录为cDNA,用F1和R1组成的引物对鉴定OsPYL9基因,用F4和R4组成的引物对鉴定AtACTIN17基因(内参基因)。进行三次重复实验,每次重复实验中,每个株系随机取3株幼苗。
F4:5'-TTCCCGTTCTGCGGTAGTGG-3';
R4:5'-CCGGTATTGTGCTCGATTCTG-3'。
OsPYL9基因的相对表达量见图9。哥伦比亚生态型拟南芥和转空载体拟南芥中均没有检测到OsPYL9基因的表达,OE-2株系、OE-3株系和OE-8株系中均能检测到OsPYL9基因的表达。
(2)耐渗透胁迫能力和耐旱能力的鉴定
OE-2株系的T2代种子、OE-3株系的T2代种子、OE-8株系的T2代种子、转空载体拟南芥的T2代种子和哥伦比亚生态型拟南芥的种子,分别进行如下鉴定:将种子播种于MS培养基上,4℃春化3天;然后在22℃、50%湿度、16h光照/8h黑暗的条件下培养3天;然后将幼苗分成三组(分别移栽至MS培养基上、含20g/100mL PEG8000的MS培养基上或含40g/100mL PEG8000的MS培养基上),在相同培养条件下培养20天,拍照并测量根长。进行三次重复实验,每次重复实验中,每个株系随机对7株植株进行测量。
照片见图10。
在含40g/100mL PEG8000的MS培养基上培养后,哥伦比亚生态型拟南芥和转空载体拟南芥中多数植株已死亡(存活率为28.6%),OE-2株系、OE-3株系和OE-8株系中多数植株均存活(存活率依次为71.4%、85.7%和57.1%)。
在含20g/100mL PEG8000的MS培养基上培养后,根长的测量结果见图11。哥伦比亚生态型拟南芥的平均根长为2.74cm,转空载体拟南芥的平均根长为2.72cm,OE-2株系的平均根长为3.40cm,OE-3株系的平均根长为5.08cm,OE-8株系的平均根长为4.14cm。
以上结果说明,转OsPYL9基因拟南芥比野生型拟南芥耐旱性强,说明过表达OsPYL9基因可以引起植物耐旱,进而说明OsPYL9蛋白是植物耐旱性相关蛋白。
以上结果说明,转OsPYL9基因拟南芥比野生型拟南芥耐渗透胁迫能力强,说明过表达OsPYL9基因可以引起植物耐渗透胁迫优势,进而说明OsPYL9蛋白是植物耐渗透胁迫相关蛋白。
Claims (10)
1.一种蛋白质,是如下(a)或(b)或(c):
(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐旱性相关的由序列1衍生的蛋白质;
(c)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐渗透胁迫相关的由序列1衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白质的基因。
3.如权利要求2所述的基因,其特征在于:所述基因是如下(1)或(2)或(3)或(4)或(5)或(6)所述的DNA分子:
(1)编码区如序列表中序列2自5’末端第116-730位核苷酸所示的DNA分子;
(2)序列表中序列2自5’末端第116-742位核苷酸所示的DNA分子;
(3)在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA分子杂交且编码植物耐旱性相关蛋白的DNA分子;
(4)与(1)或(2)限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码植物耐旱性相关蛋白的DNA分子;
(5)在严格条件下与(1)或(2)限定的DNA分子杂交且编码植物耐渗透胁迫相关蛋白的DNA分子;
(6)与(1)或(2)限定的DNA分子至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码植物耐渗透胁迫相关蛋白的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.扩增权利要求2或3所述基因的全长或其任意片段的引物对。
6.一种培育转基因植物的方法,为将权利要求2或3所述基因导入目的植物,得到耐旱性高于所述目的植物的转基因植物。
7.一种培育转基因植物的方法,为将权利要求2或3所述基因导入目的植物,得到耐渗透胁迫能力高于所述目的植物的转基因植物。
8.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于:所述目的植物为双子叶植物或单子叶植物。
9.权利要求6至8中任一所述的方法在植物育种中的应用。
10.权利要求1所述蛋白质在调节植物的耐旱性中的应用和/或调解植物对渗透胁迫的耐逆性中的应用。
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2013
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