CN104592049A - 普瑞巴林的原料药和制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了普瑞巴林的原料药和制剂，具体地说，本发明公开了一种组合物，其包含以下式I化合物，以及作为杂质的以下式II化合物。本发明还公开了包含所述组合物制备成的药物制剂以及它们的制药用途。本发明组合物具有良好的药学性质。

Description

普瑞巴林的原料药和制剂

本申请是2013年4月5日提交的中国专利申请号2013101155310的分案申请。

技术领域

本发明涉及可用于广泛性焦虑障碍、糖尿病性外周神经病、疱疹后神经痛、纤维肌痛综合征、癫痫的辅助治疗的氨甲基己酸衍生物特别是(S)-3-(氨甲基)-5-甲基己酸即普瑞巴林，以及其制剂。

背景技术

(S)-3-(氨甲基)-5-甲基己酸，通用名为普雷巴林(pregabalin)，亦常称为普瑞巴林，其分子式为C₈H₁₇NO₂，分子量为159.23。其与加巴喷丁一样，普雷巴林是一种γ-氨基丁酸(GABA)的3位取代类似物，它们的化学结构式如下：

由辉瑞公司开发的普雷巴林(pregabalin，商品名乐瑞卡，Lyrica)是一种γ-氨基丁酸的3位取代类似物，它作为该公司业已获得巨大商业成功的抗癫痫药加巴喷丁(gabapentin)的相关化合物及其预期承继者。普雷巴林是新一代神经痛治疗药物，钙离子通道调节剂。通过调节过度兴奋的神经元，减少兴奋性神经递质的过度释放，用于治疗带状疱疹后神经痛等神经病理性疼痛，被众多国际指南推荐为一线治疗药物。

具体而言，普雷巴林的药理作用机理为：普雷巴林与中枢神经系统中α2-δ位点(电压门控钙通道的一个辅助性亚基)有高度亲和力。普雷巴林的作用机制尚不明确，但是转基因小鼠和结构相关化合物(例如加巴喷丁)的研究结果提示，在动物模型中的镇痛及抗惊厥作用可能与普雷巴林与α2-δ亚基的结合有关。体外研究显示，普雷巴林可能通过调节钙通道功能而减少一些神经递质的钙依赖性释放。虽然普雷巴林是抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的结构衍生物，但它并不直接与GABAA、GABAB或苯二氮类受体结合，不增加体外培养神经元的GABAA反应，不改变大鼠脑中GABA浓度，对GABA摄取或降解无急性作用。但是研究发现，体外培养的神经元长时间暴露于普雷巴林，GABA转运蛋白密度和功能性GABA转运速率增加。普雷巴林不阻滞钠通道，对阿片类受体无活性，不改变环加氧酶活性，对多巴胺及5-羟色胺受体无活性，不抑制多巴胺、5-羟色胺或去甲肾上腺素的再摄取。

乐瑞卡(普雷巴林胶囊)2004年在美国上市，已被美国FDA批准用于带状疱疹后神经痛、糖尿病外周神经痛、癫痫、纤维肌痛，并在全球80多个国家和地区上市，并已经获得SFDA批准在中国上市，首个适应症为带状疱疹后神经痛。

普雷巴林于2004年7月已获欧盟批准用于治疗外周神经病性疼痛及用作部分癫痈发作治疗的附加疗法药物。普雷巴林也已于2004年12月底在美获得了批准，用于缓解糖尿病性外周神经病相关神经病性疼痛和带状疱疹后神经痛，从而成为美国迄今第一个正式获准能够同时治疗这两种神经病性疼痛的治疗药物，2005年又获得FDA批准用于成年癫痫患者部分性发作辅助治疗。2007年6月美国FDA批准了Lyrica用于治疗纤维肌痛，这是FDA批准的第一个用于治疗纤维肌痛的药物。

2006年欧洲神经病学学会联盟(EFNS)指南推荐乐瑞卡为痛性多发性神经病、带状疱疹后神经痛、中枢性疼痛的一线用药。2007年国际疼痛学会(IASP)专家共识推荐乐瑞卡为治疗带状疱疹后神经痛一线用药物。2007年，乐瑞卡(普雷巴林胶囊)被《时代周刊》评为年度十大医学突破之一。2010年英国NICE指南推荐乐瑞卡为唯一同时具有中枢、外周神经病理性疼痛适应症的药物。乐瑞卡(普雷巴林胶囊)的作用特点：可抑制中枢神经系统电压依赖性钙通道的α2-δ亚基，减少钙离子内流，随之减少谷氨酸盐、去甲肾上腺素、P物质等兴奋性神经递质的释放，从而有效控制神经病理性疼痛，并具有抗焦虑、抗惊厥的作用。

普雷巴林的优势：快速、持久、强效缓解带状疱疹后神经痛，显著改善带状疱疹后神经痛患者睡眠障碍和疼痛总体印象，严重不良反应罕见，暂未发现药物药代动力学相互作用，服药方便，利于调整，吸收与剂量呈线性相关，且呈剂量依赖型。

普雷巴林常规制剂胶囊剂推荐剂量为每次75或150mg，每日2次；或者每次50mg或100mg，每日3次。起始剂量可为每次75mg，每日2次；或者每次50mg，每日3次。可在1周内根据疗效及耐受性增加至每次150mg，每日2次。由于普雷巴林主要经肾脏排泄清除，肾功能减退的患者应调整剂量。以上推荐剂量适用于肌酐清除率≥60毫升/分的患者。服用普雷巴林300mg/日，2-4周后疼痛未得到充分缓解的患者，如可耐受本品，可增至每次300mg，每日2次，或每次200mg，每日3次(600mg/日)。由于不良反应呈剂量依赖性，且不良反应可导致更高的停药率，剂量超过300mg/日仅应用于耐受300mg/日剂量的持续性疼痛患。

普雷巴林在全球已获批准的临床适应症包括：广泛性焦虑障碍、糖尿病性外周神经病、疱疹后神经痛、纤维肌痛综合征、癫痫的辅助治疗。

药品的基本要求是安全、有效、可控，其中满足药品的一般质量要求例如要求药品在其有效期内稳定是临床用药的基本要求，这种药品质量的可控性又为药品的安全性提供了保障。通常而言，作为一种药品，其中的杂质是有必要作特别规定的，例如通常要求规定某一杂质低于5％，或者例如低于1％，或者例如低于0.5％，或者例如低于0.1％，或者例如低于0.05％。对于同一药品，其中可能含有多种杂质，这些杂质的最高含量上限可能相同亦可能不同，通常而言在药品的长期贮藏过程中例如2～3年的有效期内，其中的杂质含量应当是相对稳定的，合格的药品不允许其在长期贮藏过程中杂质含量显著增加。普雷巴林同样需要对其中的杂质进行控制，例如CN102869350A(埃吉斯，CN2011800195930)说明书的背景技术部分详尽阐述了GABA类药物容易出出分子内内酰胺杂质，例如其中明确指出，就加巴喷丁而言，分子内内酰胺4-环己基吡咯烷酮被视为比加巴喷丁更具有毒性，而普雷巴林的环内酰胺也是不期望的副产物，在GABA类药物研发和贮藏过程中控制和监测内酰胺杂质是重要的参数。

因此，本领域技术人员期待有一种质量稳定的普雷巴林应用于临床。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有良好稳定性能的普雷巴林以应用于临床。本发明是通过以下方式实现的。

本发明第一方面提供了一种组合物，其包含以下式I化合物：

以及作为杂质的以下式II化合物：

根据本发明第一方面的组合物，其为普雷巴林原料药，其在本发明中可称为“本发明组合物”、“本发明第一方面的组合物”等。在一个实施方案中，所述式II化合物亦可称为“内酰胺”、“内酰胺杂质”、“普雷巴林内酰胺”、“普雷巴林内酰胺杂质”等。

根据本发明第一方面的组合物，其中式I化合物含量大于98％，例如通常大于99％，例如大于99.5％。

根据本发明第一方面的组合物，其中式I化合物含量是式II化合物含量的100倍以上，例如该组合物中式I化合物含量是式II化合物含量的100～20000倍、例如为150～15000倍、例如为200～10000倍、例如为250～10000倍、例如为500～10000倍。

众所周知，作为化学药品的原料药，其中或多或少地会含有微量杂质，就本发明而言，提供的组合物中式I化合物的含量通常大于98％，例如通常大于99％，例如大于99.5％，并且对于原料药而言，其中各种杂质的总含量通常小于2％，例如通常小于1％，例如小于0.5％。上述短语“该组合物中式I化合物含量是式II化合物含量的100～20000倍”表示，例如在100g普雷巴林原料药中，如果其中含有98g式I化合物，则式II化合物的量为0.0049～0.98g，而其余的可能是其它杂质(包括例如水分)，使得式I化合物量+式II化合物量+其它杂质总量＝100g。具体地说，例如短语“该组合物中式I化合物含量是式II化合物含量的1000倍”表示的含义是，在100g普雷巴林原料药中，如果其中含有98g式I化合物，则式II化合物的量为0.098g，其它杂质总量为1.902g，这样，在该组合物中式I化合物的含量为98％，式II化合物的含量为0.098％。而对于包含药用辅料的药物制剂而言，提及作为杂质的式II化合物的含量时，是指药物制剂中式II化合物的绝对量除以该药物制剂中式I化合物绝对量的百分数，即，在一份药物制剂中，式II化合物的含量＝(该份药物制剂中式II化合物的重量÷该份药物制剂中式I化合物的重量)×100％。

本发明组合物中式I化合物的量和式II化合物的量可以通过本领域技术人员公知的方法测定，例如通过在HPLC法中使用对照品进行定量，例如下文【HPLC法A】所述的，这些方法可以容易地测定本发明组合物中式I化合物的含量和式II化合物的含量。

根据本发明第一方面的组合物，其中还任选地包含其它杂质。根据本发明第一方面的组合物，其中还任选地包含由本文【HPLC法A】确定的RRT1.45杂质。根据本发明第一方面的组合物，其中还任选地包含由本文【HPLC法A】确定的RRT1.73杂质。根据本发明第一方面的组合物，其中还任选地包含由本文【HPLC法A】确定的RRT1.94杂质。根据本发明第一方面的组合物，其中还任选地包含由本文【HPLC法A】确定的RRT2.15杂质。

根据本发明第一方面的组合物，其中还任选地包含由本文【HPLC法A】确定的选自下列的一种或多种的其它杂质：RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质。

根据本发明第一方面的组合物，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该组合物所得HPLC图谱中，所述式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的50倍以上，例如式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的100～20000倍、或者100～15000倍、或者100～10000倍、或者100～5000倍。或者，根据本发明第一方面的组合物，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该组合物所得HPLC图谱中，所述式I化合物与式II化合物的峰面积比大于50，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为100～5000。

根据本发明第一方面的组合物，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该组合物所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。上述“式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比大于100”亦可称为“式I化合物峰面积是RRT1.45杂质峰面积的100倍以上”；或者短语“式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～20000”亦可称为“式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的100～20000倍”，在本发明其它类似的语境下亦有相同的含义。

根据本发明第一方面的组合物，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该组合物所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。

根据本发明第一方面的组合物，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该组合物所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.94杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。

根据本发明第一方面的组合物，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该组合物所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。

根据本发明第一方面的组合物，其中测试和计算本发明组合物中式I化合物、式II化合物和其它杂质的含量、以及所述式I化合物峰面积与式II化合物(或者与其它杂质)峰面积之间的比值等参数所用的高效液相色谱法，可以照以下所示的【HPLC法A】进行：

【HPLC法A】

步骤1、采用中国药典2010年版二部附录VD所述的高效液相色谱法进行测定；

步骤2、色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水-甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液四者体积比550：350：100：1的混合液为流动相，检测波长为210nm，理论板数按普雷巴林峰计算不低于1800，普雷巴林与内酰胺杂质峰的分离度应大于8(其中所述磷酸盐缓冲液的配制方法为：取磷酸二氢钾3.5g和磷酸氢二钠十二水合物14.62g，加水溶解并稀释至1000ml，用磷酸或氢氧化钾溶液调节pH值至7.0，即得)；

步骤3、供试品溶液制备：取约相当于普雷巴林50mg的待测试样(其可以是普雷巴林原料药，亦可以是包含普雷巴林和药用辅料的药物组合物例如药物制剂，例如市售胶囊剂，取用的该待测试样中含普雷巴林约为50mg)，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解，搅拌或剧烈振摇15分钟，摇匀，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(其中普雷巴林的浓度约为1000μg/ml)；

步骤4、对照品溶液(其可用于测定供试品中普雷巴林的含量)制备：取普雷巴林对照品(该术语“对照品”具有本领域技术人员通常已知的含义，特别是可用于测定待测试样中主成分的含量，其通常可通过商业途径获得，例如可通过向中国食品药品检定研究院等政府机构或者其它商业机构购买，亦可通过纯化至例如含量达99.9％以上而获得，在本发明中，如未另外说明，提及的对照品均是所涉及的物质的含量/纯度在99.9％以上的对照品)约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解，搅拌或剧烈振摇15分钟，摇匀，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液(其中普雷巴林的浓度约为1000μg/ml)；

步骤5、1‰对照溶液的制备：精密量取上述供试品溶液5ml，置250ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；精密量取该稀释液5ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为1‰对照溶液(该1‰对照溶液浓度为以上供试品溶液浓度的千分之一，浓度约为1μg/ml)；

步骤6、内酰胺杂质溶液的制备：取式II内酰胺杂质对照品约10mg，精密称定，置250ml量瓶中，加流动相溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀；再精密量该溶液5ml，置200ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为内酰胺杂质对照品溶液(该内酰胺杂质对照品溶液约为1μg/ml)；

步骤7、测定法：

步骤71、精密量取1‰对照溶液50μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10％；

步骤72、精密量取1‰对照溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分(在本发明中，如未另外说明，提及主成分均指普雷巴林)色谱峰保留时间的8倍，该色谱图记为色谱图A，读取该色谱图A中的主成分峰的保留时间和峰面积；

步骤73、精密量取内酰胺杂质对照品溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至内酰胺杂质峰保留时间的3倍，该色谱图记为色谱图B，读取该色谱图B中的内酰胺杂质峰的保留时间和峰面积；

步骤74、精密量取步骤4配制的对照品溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的3倍，该色谱图记为色谱图C，读取该色谱图C中的主成分峰的保留时间和峰面积；

步骤75、精密量取供试品溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的8倍，该色谱图记为色谱图D，该色谱图D中溶剂峰和任选的药用辅料峰忽略不计，以主成分色谱峰的相对保留时间为1，分别读取该色谱图D中相对保留时间约为1.35～1.55的杂质(在本发明中，该杂质称为RRT1.45杂质)、相对保留时间约为1.63～1.83的杂质(在本发明中，该杂质称为RRT1.73杂质)、相对保留时间约为1.84～2.04的杂质(在本发明中，该杂质称为RRT1.94杂质)、相对保留时间约为2.05～2.25的杂质(在本发明中，该杂质称为RRT2.15杂质)的保留时间和峰面积，以及该色谱图D中与色谱图B中内酰胺杂质保留时间相应的杂质峰(其为内酰胺杂质峰)的峰面积；

步骤8、计算：

所测试的样品中，

式I化合物的含量：使用色谱图C和色谱图D中的主成分峰峰面积以及步骤3和步骤4中配液的称样量，按外标法以峰面积计算待测试样(即供试品，例如本发明组合物或者由其制备得到的药物制剂)中式I化合物的含量，该含量可以以％(w/w)表示(在本发明中，提及的短语“按外标法以峰面积计算”是本领域技术人员公知的，例如中国药典记载了大量使用HPLC法测定原料药物的含量并采用此种按外标法以峰面积计算的方法)，

式II化合物的含量：使用色谱图B和色谱图D中的内酰胺杂质峰的峰面积以及步骤3和步骤6中配液的称样量，按外标法以峰面积计算待测试样(即供试品，例如本发明组合物或者由其制备得到的药物制剂)中式II化合物的含量，该含量可以以％(w/w)表示，

式I化合物与式II化合物、RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质、或其它杂质之间的峰各积比，分别如按下公式计算：

在本发明中，涉及“比”或“比值”的表达方式是本领域技术人员公知的。例如涉及“式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比”时，如果式I化合物的峰面积为100，RRT1.45杂质的峰面积为1，则该“式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比”可以直接记为100，亦可记为100：1。

在本发明中，还可计算本发明组合物及由其制备得到的药物制剂的色谱纯度，该色谱纯度可以采用本文所述【HPLC法A】中色谱图D计算，扣除其中的溶剂峰、任选的药用辅料峰、任何小于1‰对照溶液主峰面积0.005倍的峰忽略不计，以面积归一化法计算，主成分峰面积除以全部峰面积总和即为该物料的色谱纯度。在本发明中，还可计算本发明组合物及由其制备得到的药物制剂中总杂质的含量，其为式II化合物以及RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质以及其它检测到的杂质的在组合物或者药物制中的含量的总和。

根据本发明第一方面的组合物，其中【HPLC法A】中，在步骤2中，所用的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，可以容易地从市场上获得各种品牌的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，其柱长可以根据需要选择，通常而言可以是10～30cm的柱长，色谱柱内径通常可以是4.6mm，流动相流速以及柱温亦可根据需要调整，通常而言流速为0.8～1.5min，柱温选择20～40℃之间的恒定温度；特别地，在本发明步骤2所述色谱条件与系统适用性试验中，可适当选择色谱柱柱长、流动相流速、柱温等，以使普雷巴林峰的保留时间控制在3～5min的范围内，例如控制在3～4.5min的范围内，例如控制在3～4min的范围内。这样，例如当普雷巴林峰的保留时间为3.5min时，在步骤64中色谱图D至少记录到28min；而对于相对保留时间约为1.35～1.55的RRT1.45杂质，其保留时间通常为4.7～5.4min。然而，上述调整普雷巴林峰至3～5min范围内只是为了便于测定，例如在保证各色谱峰分离符合要求的情况下不至使色谱图D的记录时间过长，在合理的时间内完成测试。另外，众所周知，上述例如色谱柱品牌、柱长、流速、柱温等作适当调整后，通常而言各杂质峰相对于主成分峰的相对保留时间不会有大的变化，这是液相色谱法中的基本知识。

此外，本领域技术人员公知，从色谱图D中同样可以直接获得式I化合物与各杂质的峰面积比，即用色谱峰D中普雷巴林峰的峰面积直接除以所记算的杂质峰的峰面积，即可得到所述峰面积比。然而，由于主峰与杂质峰的面积差异较大，人们通常采用与例如1％、0.5％、或0.1％浓度的溶液进行比较，以减小测量误差。在本发明中，如无另外说明，均是如上文【HPLC法A】所述使用1‰对照溶液进行计算的。

本发明出人意料地发现，当将本发明组合物中的RRT1.94杂质含量控制在一定范围内时，本发明可作为原料药的组合物及其制备得到的药物制剂具有明显更好的稳定性，特别是当式I化合物与RRT1.94杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000时，本发明组合物中的内酰胺可以有效地控制在与初始值无明显差异的范围内。

因此，根据本发明第一方面的组合物，其包含以下式I化合物：

以及作为杂质的以下式II化合物：

其中式I化合物含量是式II化合物含量的100倍以上(例如该组合物中式I化合物含量是式II化合物含量的100～20000倍、例如为150～15000倍、例如为200～10000倍、例如为250～10000倍、例如为500～10000倍)，

式I化合物与【HPLC法A】确定的RRT1.94杂质的峰面积比大于100(例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000)。

在本发明中，如未另外说明，提及的RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质均是如本文【HPLC法A】中所定义的，即，RRT1.45杂质是指使用本文【HPLC法A】测定与式I化合物相比相对保留时间约为1.35～1.55的杂质，RRT1.73杂质是指使用本文【HPLC法A】测定与式I化合物相比相对保留时间约为1.63～1.83的杂质，RRT1.94杂质是指使用本文【HPLC法A】测定与式I化合物相比相对保留时间约为1.84～2.04的杂质，RRT2.15杂质是指使用本文【HPLC法A】测定与式I化合物相比相对保留时间约为2.05～2.25的杂质。

在本发明中，保留时间可以用RT表示；相对保留时间可以用RRT表示，其为所提及的色谱峰的保留时间除以普雷巴林峰的保留时间所得的比值。

此外，本发明第二方面还提供了一种药物制剂，其中包含本发明第一方面任一方案所述组合物，以及药学可接受的辅料。

根据本发明第二方面的药物制剂，其是呈液体制剂或固体制剂的形式。

根据本发明第二方面的药物制剂，其中所述液体制剂是口服液或注射液的形式。

根据本发明第二方面的药物制剂，其中所述固体制剂是片剂或胶囊剂的形式。

根据本发明第二方面的药物制剂，其是呈速释(亦称为常释)或者缓释的片剂或胶囊剂的形式。

根据本发明第二方面的药物制剂，其中每个片剂或胶囊剂中包含5～500mg的式I化合物。已知上市的普雷巴林胶囊剂中，包括每粒胶囊含25、50、75、100、150、200、225和300mg式I化合物的规格，并且已知普雷巴林已向临床上推出了其缓释制剂，其单位制剂含药量将会更大，因此本发明药物制剂中活性成分式I化合物的量可以在较大范围内变化。

根据本发明第二方面的药物制剂，其中包含式I化合物，以及作为杂质的式II化合物。

根据本发明第二方面的药物制剂，其中式I化合物含量是式II化合物含量的100倍以上，例如该药物制剂中式I化合物含量是式II化合物含量的100～20000倍、例如为150～15000倍、例如为200～10000倍、例如为250～10000倍、例如为500～10000倍。本发明药物制剂中虽然添加了药用辅料，但其中的式I化合物、作为杂质的式II化合物、以及本文已提及的RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质的在本发明药物制剂中的含量以及相互之间的比例关系，可以容易地通过本发明所述【HPLC法A】测定获得。

根据本发明第二方面的药物制剂，其中还任选地包含由本文【HPLC法A】确定的选自下列的一种或多种的其它杂质：RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质。

根据本发明第二方面的药物制剂，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的50倍以上，例如式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的100～20000倍、或者100～15000倍、或者100～10000倍、或者100～5000倍。或者，根据本发明第二方面的药物制剂，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与式II化合物的峰面积比大于50，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为100～5000。

根据本发明第二方面的药物制剂，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。上述“式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比大于100”亦可称为“式I化合物峰面积是RRT1.45杂质峰面积的100倍以上”；或者短语“式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～20000”亦可称为“式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的100～20000倍”，在本发明其它类似的语境下亦有相同的含义。

根据本发明第二方面的药物制剂，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。

根据本发明第二方面的药物制剂，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.94杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。

根据本发明第二方面的药物制剂，其在可以使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件(例如本发明【HPLC法A】)下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比大于100，例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000。

根据本发明第二方面的药物制剂，其中测试和计算本发明药物制剂中式I化合物、式II化合物和其它杂质的含量、以及所述式I化合物峰面积与式II化合物(或者与其它杂质)峰面积之间的比值等参数所用的高效液相色谱法，可以照本发明上文所述的【HPLC法A】进行。

根据本发明第二方面的药物制剂，其包含以下式I化合物：

和药用辅料，

以及作为杂质的以下式II化合物：

其中式I化合物含量是式II化合物含量的100倍以上(例如该药物制剂中式I化合物含量是式II化合物含量的100～20000倍、例如为150～15000倍、例如为200～10000倍、例如为250～10000倍、例如为500～10000倍)，

式I化合物与【HPLC法A】确定的RRT1.94杂质的峰面积比大于100(例如该峰面积比为100～20000、例如为100～15000、例如为100～10000、例如为150～10000、例如为200～10000)。

另外，对于本发明的药物制剂，由于其添加了本发明各种实施方案的组合物作为活性成分，从而这些药物制剂中亦可能存在可以理解为杂质的式II化合物以及其它杂质例如包括但不限于下列的杂质：RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质等。本领域技术人员清楚，这些药物制剂在使用例如本发明所述的【HPLC法A】测定时，同样可以准确地反映出组合物中式I化合物与包括但不限于下列的杂质：式II化合物、RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质等，并且通常而言这种在加入到药物制剂中所测量到的含量比或者峰面积比与配制该药物制剂的原料药即例如本发明第一方面任一实施方案所述组合物所测定到的含量比或者峰面积比相同或者接近。

进一步地，本发明第三方面提供了制备本发明组合物的方法，其包括如下步骤：将普雷巴林加至异丙醇和乙腈的混合溶液中，加热(例如加热至40-60℃，例如加热至45-55℃，例如约50℃)使溶解，向混合溶液中加入0.5-5％(v/v)(例如0.5-2％，例如0.5-1％)的乳酸，搅拌均匀，缓缓冷却至约5℃(可以在此温度下静置2-10小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用异丙醇洗涤，40℃真空干燥，即得。

根据本发明第三方面的方法，其中所述异丙醇和乙腈二者的体积比为100：(30～50)，优选的体积比为100：(35～45)。

在一个实施方案中，已经发现，向上述异丙醇和乙腈的混合溶液加入适量乳酸后可以有效地降低物料中的RRT1.94杂质，并且通过重复上述重结晶过程可以使RRT1.94杂质在物料中的量降到更低。

已知普雷巴林可用于治疗或预防广泛性焦虑障碍、糖尿病性外周神经病、疱疹后神经痛(例如带状疱疹后神经痛)、纤维肌痛综合征、癫痫的辅助治疗。因此，再进一步地，本发明第四方面提供了本发明所述组合物在制备用于治疗或预防广泛性焦虑障碍、糖尿病性外周神经病、疱疹后神经痛(例如带状疱疹后神经痛)、纤维肌痛综合征、癫痫的辅助治疗的药物中的用途。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与任一方面的任一实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

在本发明中，确定各种物料(例如本发明组合物即原料药、药物制剂等)中普雷巴林或者其它杂质的含量时，以及确定这些物料中的色谱纯度时，可以采用本发明上文所述【HPLC法A】进行。此外还可以容易地使用【HPLC法A】测定药物制剂的一些制剂性能，例如溶出度等。在本发明中，尽管本发明人尚未知晓其中RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质的化学结构，然而本发明【HPLC法A】可以容易地对这些杂质进行定性，特别是可以通过本发明规定的【HPLC法A】以相对保留时间这个参数来定性地确定，特别是即使时色谱测试条件作适当的变化，甚至是在不同的实验室测量、甚至是由不同的试验人员测定、甚至是使用不同品牌的液相色谱仪测定时，这个参数都是相对固定的。另外，例如，RRT1.94杂质的相对保留时间(以式I化合物的相对保留时间为1计算)在1.84～2.04，这种±0.2或者±0.1个单位的波动是药物分析领域特别是高效液相色谱分析领域允许的。

本发明药物制剂(其亦可称为药物组合物)中使用的“药用辅料”或者“药学可接受的载体”可以是药物制剂领域中任何常规的载体或辅料。特定载体或辅料的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的载体包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳剂(注射用无菌粉针)等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

现已上市销售的普雷巴林药剂(例如，胶囊剂等)，其可用于治疗广泛性焦虑障碍、糖尿病性外周神经病、疱疹后神经痛、纤维肌痛综合征、癫痫的辅助治疗。本发明提供一种新的普雷巴林，其具有良好的稳定性能，因此本发明新的普雷巴林同样可用于治疗广泛性焦虑障碍、糖尿病性外周神经病、疱疹后神经痛、纤维肌痛综合征、癫痫的辅助治疗。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述,然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下,可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。

在下面的试验中，使用本发明【HPLC法A】，其中所用的具体测定条件为：

色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(购自安捷伦公司，200mm*4.6mm*5μm)，柱温25℃，流速1ml/min，式I化合物保留时间约3.4min，普雷巴林与内酰胺杂质峰的分离度大于10，溶剂峰以及添加药用辅料的药物制剂显示的辅料峰均在2.1min之前洗脱出，以式I化合物的相对保留时间为1计，RRT1.45杂质的相对保留时间在1.35～1.55之间，RRT1.73杂质的相对保留时间在1.63～1.83之间，RRT1.94杂质的相对保留时间在1.84～2.04之间，RRT2.15杂质的相对保留时间在2.05～2.25。测试中还发现，使用柱长为15～30cm的其它品牌C18柱，或者将柱温设定在20～40℃间的某一温度，或者者将流速设定在0.8～1.5ml/min之间的某一值，RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质四个杂质的相对保留时间均在它们的上述相应范围内。

原料制备例1：制备普雷巴林原料

照CN101848905A(中国专利申请号200880107269.2)中实施例1([0092]段至[0165]段)的方法制备得到普雷巴林原料。

作为对照品用的式II化合物亦可使用上述方法并经硅胶柱纯化得到。在本发明中用“含量比(I/II)”表示式I化合物含量与式II化合物含量的比值，用“峰面积比(I/RRT1.73)”表示色谱图中式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比，式I化合物与其它杂质的峰面积比亦类似表示。

经【HPLC法A】测定，该原料药中，式I化合物含量98.6％，式II化合物含量0.76％，含量比(I/II)＝130；原料药HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝103，峰面积比(I/RRT1.73)＝96，峰面积比(I/RRT1.94)＝93，峰面积比(I/RRT2.15)＝126。

原料制备例2：制备普雷巴林原料

照CN101821228A(中国专利申请号200880110859.0，韩国科技院)中实施例1至实施例7([0096]段至[0133]段)的方法制备得到普雷巴林原料。

经【HPLC法A】测定，该原料药中，式I化合物含量97.7％，式II化合物含量1.26％，含量比(I/II)＝78；原料药HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝96，峰面积比(I/RRT1.73)＝78，峰面积比(I/RRT1.94)＝81，峰面积比(I/RRT2.15)＝103。

原料制备例3：制备普雷巴林原料

照CN101585778A(中国专利申请号200810037609.0，上海臣邦)中实施例1至实施例9的方法制备得到普雷巴林原料。

经【HPLC法A】测定，该原料药中，式I化合物含量98.4％，式II化合物含量0.74％，含量比(I/II)＝133；原料药HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝138，峰面积比(I/RRT1.73)＝107，峰面积比(I/RRT1.94)＝74，峰面积比(I/RRT2.15)＝76。

试验用化合物制备例1：制备基本纯净的式I化合物和RRT1.94杂质

以原料制备例3所得普雷巴林作为原料，【HPLC法A】的色谱条件，使用制备型的ZORBAX EclipseXDB-C18色谱柱(购自，安捷伦公司，300mm*10mm*7μm)，分别截取式I化合物的色谱峰洗脱液以及与RRT1.94杂质()相应保留时间色谱峰的洗脱液，将所得洗脱液分别除溶剂，再分别用下文实施例1的方法进行重结晶，分别得到基本纯净的式I化合物和RRT1.94杂质，二者用【HPLC法A】测定色谱纯度均大于99.9％，并且在所得式I化合物中未检测到式II化合物以及RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质。如有需要，RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT2.15杂质亦可用类似方式得到。

实施例1：制备本发明普雷巴林

将以上原料制备例1得到的普雷巴林原料1g加至100ml异丙醇和40ml乙腈的混合溶液中，加热至约50℃使溶解，向混合溶液中加入1.0ml乳酸，搅拌均匀，缓缓冷却至约5℃(在此温度下静置约8小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用异丙醇洗涤，40℃真空干燥；再重复以上操作一次，得到可作为药物制剂配制用的普雷巴林，收率86.4％。

经【HPLC法A】测定，本实施例所得普雷巴林中，式I化合物含量99.6％，式II化合物含量0.03％，含量比(I/II)＝3320；本实施例所得普雷巴林HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝725，峰面积比(I/RRT1.73)＝453，峰面积比(I/RRT1.94)＝650，峰面积比(I/RRT2.15)＝2854。

实施例2：制备本发明普雷巴林

将以上原料制备例1得到的普雷巴林原料1g加至100ml异丙醇和35ml乙腈的混合溶液中，加热至约50℃使溶解，向混合溶液中加入1.35ml乳酸，搅拌均匀，缓缓冷却至约5℃(在此温度下静置约8小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用异丙醇洗涤，40℃真空干燥，再重复以上操作一次，得到可作为药物制剂配制用的普雷巴林，收率78.6％。

经【HPLC法A】测定，本实施例所得普雷巴林中，式I化合物含量99.7％，式II化合物含量0.04％，含量比(I/II)＝2493；本实施例所得普雷巴林HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝520，峰面积比(I/RRT1.73)＝375，峰面积比(I/RRT1.94)＝360，峰面积比(I/RRT2.15)＝1535。

实施例3：制备本发明普雷巴林

将以上原料制备例1得到的普雷巴林原料1g加至100ml异丙醇和45ml乙腈的混合溶液中，加热至约50℃使溶解，向混合溶液中加入0.725ml乳酸，搅拌均匀，缓缓冷却至约5℃(在此温度下静置约8小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用异丙醇洗涤，40℃真空干燥，即得，收率91.3％。

经【HPLC法A】测定，本实施例所得普雷巴林中，式I化合物含量99.3％，式II化合物含量0.198％，含量比(I/II)＝502；本实施例所得普雷巴林HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝225，峰面积比(I/RRT1.73)＝213，峰面积比(I/RRT1.94)＝210，峰面积比(I/RRT2.15)＝207。

实施例4：制备本发明普雷巴林

将以上实施例3得到的普雷巴林1g，照实施例1的方法进行处理(重结晶重复2次)，收率77.3％。

经【HPLC法A】测定，本实施例所得普雷巴林中，式I化合物含量99.8％，式II化合物含量0.01％，含量比(I/II)＝9980；本实施例所得普雷巴林HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝8325，峰面积比(I/RRT1.73)＝9720，峰面积比(I/RRT1.94)＝9830，峰面积比(I/RRT2.15)＝8950。

实施例5：制备本发明普雷巴林

将以上实施例3得到的普雷巴林1g，照实施例1的方法进行处理(但重结晶过程重复进行3次)，收率43.5％。

经【HPLC法A】测定，本实施例所得普雷巴林中，式I化合物含量99.8％，式II化合物含量0.005％，含量比(I/II)＝19960；本实施例所得普雷巴林HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝14430，峰面积比(I/RRT1.73)＝19310，峰面积比(I/RRT1.94)＝13860，峰面积比(I/RRT2.15)＝18550。

以上结果显示，尽管所得产物杂质大大降低，但是收率会大大降低，这从工业生产来讲在获得具有良好品质的原料药的前提出继续提高产品品质但收率大大降低的情况并不可取；实施例4所述收率在75％以上是可取的，即本发明所得普雷巴林原料药中，式I化合物含量是式II化合物含量的500～10000倍，式I化合物与【HPLC法A】确定的RRT1.94杂质或其它四个杂质的峰面积比为200～10000是可取的。

实施例6：制备本发明普雷巴林

将以上原料制备例2得到的普雷巴林原料，照实施例1的方法进行处理，得到可作为药物制剂配制用的普雷巴林，收率79.6％。

经【HPLC法A】测定，本实施例所得普雷巴林中，式I化合物含量99.6％，式II化合物含量0.013％，含量比(I/II)＝7662；本实施例所得普雷巴林HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝4225，RRT1.73杂质未检出，峰面积比(I/RRT1.94)＝475，峰面积比(I/RRT2.15)＝4854。

实施例7：制备本发明普雷巴林

将以上原料制备例3得到的普雷巴林原料，照实施例1的方法进行处理，得到可作为药物制剂配制用的普雷巴林，收率81.3％。

经【HPLC法A】测定，本实施例所得普雷巴林中，式I化合物含量99.5％，式II化合物含量0.083％，含量比(I/II)＝1199；本实施例所得普雷巴林HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.45)＝645，峰面积比(I/RRT1.73)＝312，峰面积比(I/RRT1.94)＝275，峰面积比(I/RRT2.15)＝1635。

本发明人还在另外的试验中发现，如果在以上实施例1-7中，不添加乳酸，则不能有效地提高峰面积比(I/RRT1.94)，特别是难以将该峰面积比(I/RRT1.94)提高到150以上，即不能有效地除去其中的RRT1.94杂质。例如在实施例1中，如果不添加乳酸，所得产物中峰面积比(I/RRT1.94)为133，而在实施例2中，如果不添加乳酸，所得产物中峰面积比(I/RRT1.94)为117。

实施例8：含有普雷巴林和RRT1.94的人工组合物的配制

使用上文“试验用化合物制备例1”制备得到的式I化合物和RRT1.94杂质，将二者按一定的比例进行组合(式I化合物与RRT1.94杂质重量比在100:0.0001～0.5的宽范围内以符合二者的峰面积比达到下表所列值，例如二者重量比为100:0.01组合时显示的峰面积比约360；由于二者重量差异大，配比混合时使二者溶于甲醇中，然后除去甲醇以便二者混合均匀)，得到多份组合物，这些配比组合所得组合物在【HPLC法A】条件下测定分别显示下表的峰面积比(I/RRT1.94)，即下表I/RRT1.94栏所示数值。

组合物No	#80	#81	#82	#83	#84	#85	#86	#87	#88	#89	#891
												I/RRT1.94	35710	7143	3570	715	310	210	143	70	36	24	18
II增量/％	0	0	0	0.0006	0.0011	0.0018	0.072	0.168	0.413	1.244	2.429

50C-4M试验：将以上#80至#891各粉末组合物置于密封玻璃瓶中，在50℃下放置4月(在本发明中可以用“50C-4M”表示该50℃下放置4月处置)。然后测定该试样中式II化合物的含量(％，以C4表示)，另外还测定该试样未经50C-4M时其中式II化合物的含量(％，以C0表示)，计算该试样中经50C-4M后式II化合物的含量增加值，即II增量(％)，以下式计算：II增量＝C4-C0。结果见上表，可见，在峰面积比(I/RRT1.94)大于200时式II化合物增加量极微，而当峰面积比(I/RRT1.94)小于200时，显示式II化合物增加明显，特别是当峰面积比(I/RRT1.94)达24时本身无式II化合物的基本纯净的普雷巴林中式II化合物含量达1％以上，完全不能满足药用要求。通常而言在作为药用原料药的普雷巴林中，式II化合物的含量应低于0.2％，优良品质的普雷巴林原料药中式II化合物的含量应低于0.1％，特别优选的是低于0.05％；并且如果高于0.5％是不可接受的。上述50C-4M试验方法可用于本发明上下文。

需要说明的是，在计算包含药用辅料的药物制剂时，由于其中添加有药用辅料，因此式I化合物在药物制剂中的含量可以用制剂中式I化合物的绝对量除以该份制剂中式I化合物的理论标示量所得的百分数表示；而对于其中的式II化合物，其含量是用该制剂中式II化合物的绝对量除以式I化合物的绝对量的百分数表示，其它作为杂质的物质在药物制剂中如果以含量表示时，亦具有与式II化合物类似的含义。

实施例81：含有普雷巴林和RRT1.94的药物制剂

将以上#80至#891各粉末组合物作为原料药，分别取其75mg，分别与乳糖10mg、玉米淀粉13mg、滑石粉2mg通过研磨混合均匀并过80目筛，装入空心硬胶囊中，得到含有式I化合物的11种胶囊剂，每粒胶囊含普雷巴林75mg，每批制5000粒。使用50C-4M试验测定这些胶囊经50C-4M处理后式II化合物含有量增加值。结果显示，各胶囊剂的“II增量”与其相应原料药的结果基本相同，例如#80至#82各粉末组合物所得胶囊的II增量均为0，#83至#85各粉末组合物所得胶囊的II增量均在0.0005～0.002％范围内，#86至#891各粉末组合物所得胶囊的II增量与上表中相应原料药的II增量相差小于0.05％个单位，例如用#89原料所得胶囊的II增量为1.265％。

实施例9：含有普雷巴林和RRT1.94的人工组合物的配制

将适量的上文“试验用化合物制备例1”制备得到的式I化合物或者RRT1.94杂质添加到上文实施例1所得本发明普雷巴林中(以共同溶解于甲醇中然后除甲醇以使物料混合的方式添加)，以使所得含有普雷巴林和RRT1.94以及其它杂质的人工组合物在【HPLC法A】条件下测定分别显示下表的峰面积比(I/RRT1.94)，例如向实施例1所得普雷巴林添加RRT1.94杂质时可以降低峰面积比(I/RRT1.94)。

组合物No	#90	#91	#92	#93	#94	#95	#96	#97	#98	#99	#991
												I/RRT1.94	32300	9550	3520	690	325	205	165	81	35	25	20
II增量/％	0	0	0	0.0005	0.0011	0.0015	0.077	0.165	0.431	1.289	2.503

照50C-4M试验方法测定以上各人工组合物经50C-4M处置后的II增量(％)。结果与实施例基本类似。可见，在作为原料药的普雷巴林中当控制峰面积比(I/RRT1.94)大于150特别是大于200时，对于其中式II内酰胺杂质化合物的量的控制是非常有利的。

实施例91：含有普雷巴林和RRT1.94的药物制剂

将以上#90至#991各粉末组合物作为原料药，分别取其75mg，分别与乳糖10mg、玉米淀粉13mg、滑石粉2mg通过研磨混合均匀并过80目筛，装入空心硬胶囊中，得到含有式I化合物的11种胶囊剂，每粒胶囊含普雷巴林75mg，每批制5000粒。使用50C-4M试验测定这些胶囊经50C-4M处理后式II化合物含有量增加值。结果显示，各胶囊剂的“II增量”与其相应原料药的结果基本相同，例如#90至#92各粉末组合物所得胶囊的II增量均为0，#93至#95各粉末组合物所得胶囊的II增量均在0.0005～0.0018％范围内，#86至#891各粉末组合物所得胶囊的II增量与上表中相应原料药的II增量相差小于0.05％个单位，例如用#89原料所得胶囊的II增量为1.273％。

以上实施例81和实施例91结果可见，具有特定含量的RRT1.94杂质的原料制备的药物制剂中，活性成分的降解产物式II内酰胺杂质同样具有与原料药基本相同的变化规律。因此对于本发明第一方面的组合物以及第二方面的药物制剂而言，其中含有较低含量的RRT1.94杂质，并且其经【HPLC法A】测定的HPLC图谱中，峰面积比(I/RRT1.94)大于150是优选的，特别是峰面积比(I/RRT1.94)大于200是非常优选的。

药物制剂例1：制备普雷巴林的胶囊剂药物组合物

取实施例1所得普雷巴林75mg与乳糖10mg、玉米淀粉13mg、滑石粉2mg通过研磨混合均匀并过80目筛，装入空心硬胶囊中，得到普雷巴林胶囊剂，每粒胶囊含普雷巴林75mg，每批制5000粒。以实施例1所得普雷巴林为原料由此得到的胶囊剂在本发明中称为胶囊1。

同样，分别以实施例2、3、4、5、6、7所得普雷巴林作为原料，同胶囊1的方法制备胶囊剂，分别得到胶囊2、胶囊3、胶囊4、胶囊5、胶囊6、胶囊7。

同样，分别以原料制备例1、原料制备例2、原料制备例3所得普雷巴林作为原料，同胶囊1的方法制备胶囊剂，分别得到胶囊01、胶囊02、胶囊03。

药物制剂例2：制备普雷巴林的片剂药物组合物

制备10000片规模，每片组成为：实施例2所得普雷巴林75mg、甘露醇100mg、玉米淀粉90mg、胶体二氧化硅2mg、聚维酮(K25)5mg、硬脂酸镁3mg。

制备方法：(a)各物料预先粉碎至过60～80目。将普雷巴林、甘露醇、玉米淀粉(2/3量)装载到流化床制粒机中；(b)将聚维酮溶解于水中以形成溶液，并将该溶液喷洒于该流化床制粒机中的颗粒上，将这些混合物制成颗粒以形成粒状混合物；(c)将该粒状混合物干燥至约1.0％至约2.5％的终点水分含量；(d)将步骤(c)的该粒状混合物与胶体二氧化硅、余量玉米淀粉及硬脂酸镁混合，并掺混以形成最终掺混物；(e)使用压片机将该最终掺混物压制成片剂。

药物制剂例3：制备普雷巴林的缓释片剂药物组合物

制备10000片规模，每片组成为：实施例3所得普雷巴林150mg、羟丙甲纤维素2208(MethocelK15M)150mg、玉米淀粉100mg、卡波姆941(71G)10mg、胶体二氧化硅5mg、硬脂酸镁3mg。

制备方法：(1)将各组分预先粉碎成过60-80目的细粉。在混合器中，使活性成分与少部分(约15％)羟丙甲纤维素预先混合；(2)接着在混合器中，使步骤(1)中的混合物与其余的羟丙甲纤维素、玉米淀粉、卡波姆混合均匀，接着加入胶体二氧化硅和硬脂酸镁，使物料充分混合均匀；(3)通过将最终混合物在适宜的压片机中压片，制备缓释型的骨架片。

药物制剂例4：制备普雷巴林的口服液药物组合物

制备10000ml规模，每5ml口服液组成为：实施例3所得普雷巴林75mg、丙二醇0.5ml、泥泊金乙酯10mg、甜菊苷5mg、水适量加至5ml。

制备方法：用适量水将各组分混合、溶解，加水至全量，分装到玻璃瓶中，即得口服液形式的药物制剂。

稳定性试验例1：对各种试样进行稳定性考察

考察试样：原料制备例1、2、3所得普雷巴林原料，实施例1、2、3、4、5、6、7制备的普雷巴林，药物制剂例1制备的胶囊1至胶囊7以及胶囊01至胶囊03，药物制剂例2制备的片剂，药物制剂例3制备的缓释片剂，药物制剂例4口服液，以及市售胶囊(普雷巴林胶囊，75mg/粒，国药准字J20100102，产品批号9408423023，生产时间2012年1月)共24个样品作为试样，进行稳定性考察。

将上述各原料药或胶囊或片剂分别用铝箔袋密封包装，口服液包装于玻璃瓶中，置于45℃恒温箱中放置5月(可称为“45C-5M试验”)，测定各试样在0月(即放样前)和5月时活性成分的含量以及式II化合物的含量变化。

对于每一试样，以5月活性成分含量除以0月活性成分含量所得的百分值，作为高温处置5月后的活性成分相对含量(％)，即计算式如下：

活性成分相对含量(％)＝(5月含量÷0月含量)×100％

对于每一试样，测定该试样中式II化合物的含量(％，以C5表示)，另外还测定该试样未经45C-5M时其中式II化合物的含量(％，以C0表示)，计算该试样中经45C-5M后式II化合物的含量增加值，即II增量(％)，以下式计算：II增量＝C5-C0。

以上45C-5M试验处置后，市售胶囊的活性成分相对含量为97.7％，经45C-5M后式II化合物的含量增加值为0.076％；其它各试样的结果见下表：

试样	I含量	II增量	试样	I含量	II增量
						原料制备例1	94.4％	0.163％	胶囊01	87.5％	0.274％
原料制备例2	92.7％	0.194％	胶囊02	85.8％	0.304％
						原料制备例3	93.1％	0.206％	胶囊03	86.4％	0.338％
实施例1	98.7％	<0.001％	胶囊1	96.4％	<0.001％
						实施例2	98.8％	<0.001％	胶囊2	97.3％	<0.001％
实施例3	99.2％	0.0014％	胶囊3	96.2％	0.0018％
						实施例4	98.4％	0	胶囊4	96.7％	0
实施例5	98.6％	0	胶囊5	98.1％	0
						实施例6	98.7％	<0.001％	胶囊6	96.5％	<0.001％
实施例7	98.9％	0.0011％	胶囊7	96.8％	0.0014％
						药物制剂例2	96.5％	0.0012％
药物制剂例3	96.8％	0.0021％
						药物制剂例4	96.3％	0.0024％

表中“I含量”栏表示活性成分式I化合物的相对含量。

从表中结果可见，本发明普雷巴林在原料药或者制剂状态下均具有比之于现有技术制备的结果更好的化学稳定性，特别是显示其中的一个相当期待避免的内酰胺杂质处于可控的水平。

Claims (10)

1.普瑞巴林的原料药，其包含以下式I化合物：

以及作为杂质的以下式II化合物：

该原料药中式I化合物含量大于98％，例如通常大于99％，例如大于99.5％；

该原料药中式I化合物含量是式II化合物含量的100～20000倍；

该原料药中还包含由【HPLC法A】确定的RRT1.94杂质，在所述【HPLC法A】所得的HPLC图谱中，式I化合物与RRT1.94杂质的峰面积比为200～10000；所述RRT1.94杂质是指使用所述【HPLC法A】测定与式I化合物相比相对保留时间为1.84～2.04的杂质；所述式II化合物亦称为内酰胺杂质；

所述的【HPLC法A】的方法包括以下步骤：

步骤1、采用中国药典2010年版二部附录VD所述的高效液相色谱法进行测定；

步骤2、色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水-甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液四者体积比550：350：100：1的混合液为流动相，检测波长为210nm，理论板数按普瑞巴林峰计算不低于1800，普瑞巴林与内酰胺杂质峰的分离度应大于8；其中所述磷酸盐缓冲液的配制方法为：取磷酸二氢钾3.5g和磷酸氢二钠十二水合物14.62g，加水溶解并稀释至1000ml，用磷酸或氢氧化钾溶液调节pH值至7.0，即得；

步骤3、供试品溶液制备：取相当于普瑞巴林50mg的待测试样，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解，搅拌或剧烈振摇15分钟，摇匀，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

步骤4、对照品溶液制备：取普瑞巴林对照品50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解，搅拌或剧烈振摇15分钟，摇匀，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；

步骤5、1‰对照溶液的制备：精密量取上述供试品溶液5ml，置250ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；精密量取该稀释液5ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为1‰对照溶液；

步骤6、内酰胺杂质溶液的制备：取式II内酰胺杂质对照品10mg，精密称定，置250ml量瓶中，加流动相溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀；再精密量该溶液5ml，置200ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为内酰胺杂质对照品溶液；

步骤7、测定法：

步骤71、精密量取1‰对照溶液50μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％；

步骤72、精密量取1‰对照溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的8倍，该色谱图记为色谱图A，读取该色谱图A中的主成分峰的保留时间和峰面积；

步骤73、精密量取内酰胺杂质对照品溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至内酰胺杂质峰保留时间的3倍，该色谱图记为色谱图B，读取该色谱图B中的内酰胺杂质峰的保留时间和峰面积；

步骤74、精密量取步骤4配制的对照品溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的3倍，该色谱图记为色谱图C，读取该色谱图C中的主成分峰的保留时间和峰面积；

步骤75、精密量取供试品溶液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的8倍，该色谱图记为色谱图D，该色谱图D中溶剂峰和任选的药用辅料峰忽略不计，以主成分色谱峰的相对保留时间为1，分别读取该色谱图D中相对保留时间为1.35～1.55的杂质、相对保留时间为1.63～1.83的杂质、相对保留时间为1.84～2.04的杂质、相对保留时间为2.05～2.25的杂质的保留时间和峰面积，以及该色谱图D中与色谱图B中内酰胺杂质保留时间相应的杂质峰的峰面积；其中，所述色谱图D中相对保留时间为1.35～1.55的杂质称为RRT1.45杂质、相对保留时间为1.63～1.83的杂质称为RRT1.73杂质、相对保留时间为1.84～2.04的杂质称为RRT1.94杂质、相对保留时间为2.05～2.25的杂质称为RRT2.15杂质，所述色谱图D中与色谱图B中内酰胺杂质保留时间相应的杂质峰称为内酰胺杂质峰；

步骤8、计算：

所测试的样品中，

式I化合物的含量：使用色谱图C和色谱图D中的主成分峰峰面积以及步骤3和步骤4中配液的称样量，按外标法以峰面积计算待测试样中式I化合物的含量，

式II化合物的含量：使用色谱图B和色谱图D中的内酰胺杂质峰的峰面积以及步骤3和步骤6中配液的称样量，按外标法以峰面积计算待测试样中式II化合物的含量，

式I化合物与式II化合物、RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT1.94杂质、RRT2.15杂质、或其它杂质之间的峰各积比，分别按如下公式计算：

2.根据权利要求1的原料药，其特征在于：

式I化合物含量是式II化合物含量的150～15000倍；

式I化合物含量是式II化合物含量的200～10000倍；

式I化合物含量是式II化合物含量的250～10000倍；和/或

式I化合物含量是式II化合物含量的500～10000倍。

3.根据权利要求1的原料药，其中还任选地包含可由【HPLC法A】确定的选自下列的一种或多种的其它杂质：RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT2.15杂质。

4.根据权利要求3的原料药，其特征在于：

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～20000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～15000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为150～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为200～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为100～20000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为100～15000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为100～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为150～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为200～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为100～20000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为100～15000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为100～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为150～10000；和/或

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该原料药所得HPLC图谱中：所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为200～10000。

5.一种药物制剂，其中包含权利要求1-4任一项所述原料药，以及药学可接受的辅料。

6.根据权利要求5的药物制剂，其是呈液体制剂或固体制剂的形式(例如，所述液体制剂是口服液或注射液的形式，所述固体制剂是片剂或胶囊剂的形式)；或者，其是呈速释或者缓释的片剂或胶囊剂的形式；例如，每个片剂或胶囊剂中包含5～500mg的式I化合物。

7.根据权利要求5-6任一项的药物制剂，其中包含式I化合物，以及作为杂质的式II化合物和由【HPLC法A】确定的RRT1.94杂质，其中式I化合物含量是式II化合物含量的100～20000倍，在所述【HPLC法A】所得的HPLC图谱中，式I化合物与RRT1.94杂质的峰面积比为200～10000；所述RRT1.94杂质是指使用所述【HPLC法A】测定与式I化合物相比相对保留时间为1.84～2.04的杂质；所述的【HPLC法A】的方法如权利要求1所述。

8.根据权利要求7的药物制剂，其特征在于：

式I化合物含量是式II化合物含量的150～15000倍；

式I化合物含量是式II化合物含量的200～10000倍；

式I化合物含量是式II化合物含量的250～10000倍；和/或

式I化合物含量是式II化合物含量的500～10000倍。

9.根据权利要求7的药物制剂，其中还任选地包含由【HPLC法A】确定的选自下列的一种或多种的其它杂质：RRT1.45杂质、RRT1.73杂质、RRT2.15杂质。

10.根据权利要求9的药物制剂，其特征在于：

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的100～20000倍；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物峰面积是式II化合物峰面积的100～15000倍；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～20000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～15000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.45杂质的峰面积比为100～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为100～20000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为100～15000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT1.73杂质的峰面积比为100～10000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为100～20000；

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为100～15000；和/或

在所述【HPLC法A】中使式I化合物与式II化合物之间的分离度大于8的高效液相色谱法色谱条件下，该药物制剂所得HPLC图谱中，所述式I化合物与RRT2.15杂质的峰面积比为100～10000。