CN104585031B - 一种用于铁皮石斛的营养液制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，包括如下步骤：称取碘化钾、硫酸锰、硫酸锌、硼酸、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液；称取硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液；称取肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素和甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液；称取去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将硝酸铵、硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热，在加热过程中加入第一物料、2号母液、3号母液、4号母液、白糖和琼脂并搅拌均匀，加水并搅拌均匀后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液。

Description

一种用于铁皮石斛的营养液制备方法

技术领域

本发明涉及植物营养液技术领域，尤其涉及一种用于铁皮石斛的营养液制备方法。

背景技术

铁皮石斛是传统名贵中药，自古以来被认为是滋阴补益的珍品。早在1400多年前的《神农本草经》和400多年前的《本草纲目》等古籍中，就有铁皮石斛具有滋阴生津等功效的记载。利用现代的医学手段也证实铁皮石斛含有石斛碱、石斛次碱等生物碱，还有次甲基石斛素、石斛醌、挥发油和多糖等成分。铁皮石斛主要分布在海拔600-2500m的山谷半阴湿林中树上或林缘岩石上，要求的生态环境比较特殊，而且铁皮石斛坐果率低，种子不易发芽，自然繁殖率极低；又因森林遭受破坏，生存环境恶化，加上人们长期的采挖，野生铁皮石斛资源愈来愈稀少，种源已临枯竭，处于濒临灭绝的境地。因此发展铁皮石斛的人工栽培成为保护和利用铁皮石斛资源的必然之路。

目前，在铁皮石斛试管苗的繁殖体系中，培养基的选择是铁皮石斛人工栽培的关键一步，只有选择合适的培养基才能确保铁皮石斛生根好、生长快。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，通过调整个组分之间的比例和添加的先后顺序，使本发明为铁皮石斛提供全面的营养物质，能够使铁皮石斛快速促根生茎。

本发明提出的一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，包括如下步骤：

S1、按重量份称取250-350份碘化钾、4500-5000份硫酸锰、2800-3200份硫酸锌、3300-3700份硼酸、150-250份钼酸钠、20-30份硫酸铜、25-35份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为5-7：38-42；

S2、按重量份称取8000-8300份硫酸亚铁和19000-21000份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为80-83：19-21；

S3、按重量份称取59000-61000份肌醇、145-155份烟酸、290-310份盐酸吡哆醇、55-65份盐酸硫胺素和580-620份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为29-31：380-420；

S4、按重量份称取4800-5000份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将54-59份硝酸铵、64.5-68.5份硝酸钾、14.5-16.5份氯化钙、12-14份硫酸镁、5-7份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40-60℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2700-2900份白糖和280-290份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5-6.5得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为56-58：13-15，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.2-0.4:0.2-0.4:0.2-0.4:65-75；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液。

优选地，S1中，按重量份称取280-300份碘化钾、4700-4800份硫酸锰、2900-3000份硫酸锌、3400-3600份硼酸、180-220份钼酸钠、23-27份硫酸铜、29-32份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为5.6-6：39-41。

优选地，S2中，按重量份称取8100-8200份硫酸亚铁和19500-20000份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为81-82：19.5-20.5。

优选地，S3中，按重量份称取59500-60500份肌醇、147-153份烟酸、295-305份盐酸吡哆醇、57-62份盐酸硫胺素和590-610份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为147-153：1950-2050。

优选地，S4中，按重量份称取4850-4950份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将55-57份硝酸铵、65.5-67.5份硝酸钾、15-15.5份氯化钙、12.5-13份硫酸镁、5.5-6份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40-50℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2780-2820份白糖和284-288份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5.5-6得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为142-144：34-36，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.3:0.2-0.4:0.3:68-72。

优选地，S5中，高温高压灭菌的最高温度为120-125℃，高温高压灭菌的时间为20-25min。

优选地，上述用于铁皮石斛的营养液制备方法中，包括如下步骤：

S1、按重量份称取298份碘化钾、4776份硫酸锰、2940份硫酸锌、3480份硼酸、200份钼酸钠、25份硫酸铜、30份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为149：1000；

S2、按重量份称取8120份硫酸亚铁和19920份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为203：50；

S3、按重量份称取60000份肌醇、150份烟酸、300份盐酸吡哆醇、60份盐酸硫胺素和600份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为3：40；

S4、按重量份称取4900份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将56.65份硝酸铵、66.5份硝酸钾、15.4份氯化钙、12.95份硫酸镁、5.95份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2800份白糖和286份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5.8得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为286：70，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.3:0.3:0.3:70；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液，其中高温高压灭菌的最高温度为121℃，高温高压灭菌的时间为21min。

本发明配伍合理，通过调整个组分之间的比例和添加的先后顺序，使最终得到的营养液，能够为铁皮石斛提供全面的营养物质，能够使铁皮石斛快速促根生茎，能够提高铁皮石斛中多糖含量、氨基酸含量，提高铁皮石斛的生根率和生长速度，显著提高铁皮石斛的存活率。

具体实施方式

下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。

实施例1

本发明提出的一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，包括如下步骤：

S1、按重量份称取250份碘化钾、5000份硫酸锰、2800份硫酸锌、3700份硼酸、150份钼酸钠、30份硫酸铜、25份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为7：38；

S2、按重量份称取8300份硫酸亚铁和19000份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为83：19；

S3、按重量份称取61000份肌醇、145份烟酸、310份盐酸吡哆醇、55份盐酸硫胺素和620份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为29：420；

S4、按重量份称取4800份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将59份硝酸铵、64.5份硝酸钾、16.5份氯化钙、12份硫酸镁、7份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2900份白糖和280份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为6.5得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为56：15，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.2:0.4:0.2:75；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液。

实施例2

本发明提出的一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，包括如下步骤：

S1、按重量份称取300份碘化钾、4700份硫酸锰、3000份硫酸锌、3400份硼酸、220份钼酸钠、23份硫酸铜、32份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为5.6：41；

S2、按重量份称取8100份硫酸亚铁和20000份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为81：20.5；

S3、按重量份称取59500份肌醇、153份烟酸、295份盐酸吡哆醇、62份盐酸硫胺素和590份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为153：1950；

S4、按重量份称取5000份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将54份硝酸铵、68.5份硝酸钾、14.5份氯化钙、14份硫酸镁、5份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至60℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2700份白糖和290份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为58：13，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.4:0.2:0.4:65；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液。

实施例3

本发明提出的一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，包括如下步骤：

S1、按重量份称取298份碘化钾、4776份硫酸锰、2940份硫酸锌、3480份硼酸、200份钼酸钠、25份硫酸铜、30份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为149：1000；

S2、按重量份称取8120份硫酸亚铁和19920份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为203：50；

S3、按重量份称取60000份肌醇、150份烟酸、300份盐酸吡哆醇、60份盐酸硫胺素和600份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为3：40；

S4、按重量份称取4900份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将56.65份硝酸铵、66.5份硝酸钾、15.4份氯化钙、12.95份硫酸镁、5.95份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2800份白糖和286份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5.8得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为286：70，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.3:0.3:0.3:70；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液，其中高温高压灭菌的最高温度为121℃，高温高压灭菌的时间为21min。

实施例4

本发明提出的一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，包括如下步骤：

S1、按重量份称取280份碘化钾、4800份硫酸锰、2900份硫酸锌、3600份硼酸、180份钼酸钠、27份硫酸铜、29份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为6：39；

S2、按重量份称取8200份硫酸亚铁和19500份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为82：19.5；

S3、按重量份称取60500份肌醇、147份烟酸、305份盐酸吡哆醇、57份盐酸硫胺素和610份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为147：2050；

S4、按重量份称取4850份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将57份硝酸铵、65.5份硝酸钾、15.5份氯化钙、12.5份硫酸镁、6份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2820份白糖和284份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为6得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为71：18，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.3:0.2:0.3:72；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液，其中高温高压灭菌的最高温度为120℃，高温高压灭菌的时间为25min。

实施例5

本发明提出的一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，包括如下步骤：

S1、按重量份称取350份碘化钾、4500份硫酸锰、3200份硫酸锌、3300份硼酸、250份钼酸钠、20份硫酸铜、35份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比(g/L)为5：42；

S2、按重量份称取8000份硫酸亚铁和21000份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比(g/L)为80：21；

S3、按重量份称取59000份肌醇、155份烟酸、290份盐酸吡哆醇、65份盐酸硫胺素和580份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比(g/L)为31：380；

S4、按重量份称取4950份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将55份硝酸铵、67.5份硝酸钾、15份氯化钙、13份硫酸镁、5.5份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至50℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2780份白糖和288份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5.5得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比(g/L)为72：17，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.3:0.4:0.3:68；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液，其中高温高压灭菌的最高温度为125℃，高温高压灭菌的时间为20min。

在无菌条件下取长有2-3节茎段的长度为1.5-2cm的有腋芽的铁皮石斛茎段作为外植体，将外植体分别置于实验组(实施例1-5制得的营养液)和对照组(普通MS培养液)中培养30天后进行比较，其中培养条件如下：温度为23-27℃，光照强度为1500-2000Lux，光照时间为12-13h/d。实验结果如下：

有上表可以看出：利用本发明制备的营养液进行培养铁皮石斛，大大提高铁皮石斛的生根率，能够显著提高铁皮石斛的生长速率，而且能大幅提高铁皮石斛中的多糖含量。

需要说明的是，在本发明中，并不对S1、S2和S3三个步骤的顺序进行限定，可以根据时间安排的方便性对上述三个步骤的顺序进行调整，本领域技术人员在不付出创造性劳动的基础上，对上述三个步骤的安排调整得到的技术方案，均应在本发明的保护范围之内。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种用于铁皮石斛的营养液制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、按重量份称取250-350份碘化钾、4500-5000份硫酸锰、2800-3200份硫酸锌、3300-3700份硼酸、150-250份钼酸钠、20-30份硫酸铜、25-35份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比g:L为5-7：38-42；

S2、按重量份称取8000-8300份硫酸亚铁和19000-21000份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比g:L为80-83：19-21；

S3、按重量份称取59000-61000份肌醇、145-155份烟酸、290-310份盐酸吡哆醇、55-65份盐酸硫胺素和580-620份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比g:L为29-31：380-420；

S4、按重量份称取4800-5000份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将54-59份硝酸铵、64.5-68.5份硝酸钾、14.5-16.5份氯化钙、12-14份硫酸镁、5-7份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40-60℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2700-2900份白糖和280-290份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5-6.5得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比g:L为56-58：13-15，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.2-0.4:0.2-0.4:0.2-0.4:65-75；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液。

2.根据权利要求1所述用于铁皮石斛的营养液制备方法，其特征在于，S1中，按重量份称取280-300份碘化钾、4700-4800份硫酸锰、2900-3000份硫酸锌、3400-3600份硼酸、180-220份钼酸钠、23-27份硫酸铜、29-32份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比g:L为5.6-6：39-41。

3.根据权利要求1或2所述用于铁皮石斛的营养液制备方法，其特征在于，S2中，按重量份称取8100-8200份硫酸亚铁和19500-20000份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比g:L为81-82：19.5-20.5。

4.根据权利要求1或2所述用于铁皮石斛的营养液制备方法，其特征在于，S3中，按重量份称取59500-60500份肌醇、147-153份烟酸、295-305份盐酸吡哆醇、57-62份盐酸硫胺素和590-610份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比g:L为147-153：1950-2050。

5.根据权利要求1或2所述用于铁皮石斛的营养液制备方法，其特征在于，S4中，按重量份称取4850-4950份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将55-57份硝酸铵、65.5-67.5份硝酸钾、15-15.5份氯化钙、12.5-13份硫酸镁、5.5-6份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40-50℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2780-2820份白糖和284-288份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5.5-6得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比g:L为142-144：34-36，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.3:0.2-0.4:0.3:68-72。

6.根据权利要求1或2所述用于铁皮石斛的营养液制备方法，其特征在于，S5中，高温高压灭菌的最高温度为120-125℃，高温高压灭菌的时间为20-25min。

7.根据权利要求1或2所述用于铁皮石斛的营养液制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、按重量份称取298份碘化钾、4776份硫酸锰、2940份硫酸锌、3480份硼酸、200份钼酸钠、25份硫酸铜、30份氯化钴，加水溶解后搅拌均匀得到2号母液，其中碘化钾与2号母液的质量体积比g:L为149：1000；

S2、按重量份称取8120份硫酸亚铁和19920份乙二胺四乙酸二钠，加水溶解后搅拌均匀得到3号母液，其中硫酸亚铁与3号母液的质量体积比g:L为203：50；

S3、按重量份称取60000份肌醇、150份烟酸、300份盐酸吡哆醇、60份盐酸硫胺素和600份甘氨酸，加水溶解后搅拌均匀得到4号母液，其中烟酸与4号母液的质量体积比g:L为3：40；

S4、按重量份称取4900份去皮香蕉，加入料理机中，加水后进行搅拌得到香蕉泥；将56.65份硝酸铵、66.5份硝酸钾、15.4份氯化钙、12.95份硫酸镁、5.95份磷酸二氢钾加入水中溶解后混合均匀得到第一物料，接着将香蕉泥加热至40℃，在加热过程中加入第一物料并搅拌均匀，然后依次加入2号母液、3号母液和4号母液并搅拌均匀，继续加入2800份白糖和286份琼脂并搅拌均匀，加水溶解后搅拌均匀后，调节pH值为5.8得到第二物料，其中琼脂与第二物料的质量体积比g:L为286：70，2号母液、3号母液、4号母液和第二物料的体积比为0.3:0.3:0.3:70；

S5、将第二物料分装后，进行高温高压灭菌，冷却至室温得到用于铁皮石斛的营养液，其中高温高压灭菌的最高温度为121℃，高温高压灭菌的时间为21min。