CN104560750A - 一种酵母菌剂及其用途和生产乙醇的方法 - Google Patents

一种酵母菌剂及其用途和生产乙醇的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种酵母菌剂，该酵母菌剂含有酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07，其中，酿酒酵母RIPP-06的保藏号为CGMCC？No.8203，酿酒酵母RIPP-01的保藏号为CGMCC？No.8201，酿酒酵母RIPP-07的保藏号为CGMCC？No.8204。本发明还公开了上述酵母菌剂在生产乙醇中的用途。此外，本发明还公开了一种生产乙醇的方法，该方法包括用上述酵母菌剂对乙醇发酵原液进行乙醇发酵。本发明的酵母菌剂具有高抗逆性和多重胁迫耐受性，且其遗传性能稳定，糖利用率和乙醇产量均较高，可应用于目前的燃料乙醇生产工艺和木质纤维素乙醇新工艺中，实用性较强。

Description

一种酵母菌剂及其用途和生产乙醇的方法
技术领域
本发明涉及一种酵母菌剂及其在乙醇生产中的用途和利用该酵母菌剂生产乙醇的方法。
背景技术
由于传统化石能源用量急增，能源紧缺已成为世界性问题，能源多元化发展和加快可再生能源开发已成为世界各国的研发重点，其中，燃料乙醇的生产和应用在经济发展和战略安全上显示出重大意义。以燃料乙醇等替代能源为代表的能源供应多元化战略已成为我国能源政策的重要方向。纤维素是十分丰富而廉价的生物质原料，可以被降解为可发酵性糖，用于燃料乙醇的生产。大力发展生物质燃料乙醇作为可再生能源，有助于缓解石油资源短缺，改善大气环境等问题，在稳定粮食生产、促进农业生产与消费的良性循环和可持续发展等方面具有积极作用。
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)作为单细胞真核生物，具有易培养、生长周期短的特点，已广泛应用于异源基因的表达。虽然普通酿酒酵母能够高效利用葡萄糖产乙醇，但对发酵液中的抑制物和高浓乙醇耐受性(Almeida J R M et al.,2007)较差，特别是对纤维素水解液中的抑制成分敏感，使酿酒酵母无法成为木质纤维素乙醇生产的优势菌株。其次，纤维素乙醇生产中，纤维素原料预处理过程产生和残留的降解物会对后续菌株发酵造成不同程度的抑制，其中乙酸、糠醛、酚类和SO4 2-等抑制因子对酵母有较强毒害作用，会显著抑制细胞的生长及其发酵性能。
目前，在纤维素乙醇生产菌种——酿酒酵母的研究领域，大多集中于将各种实验室缺陷型菌种为研究对象进行改造，而缺乏能够应用于生产的野生型酵母模型，能够耐受多重抑制物、具有高抗逆性的酿酒酵母具有更强的实用性，显然，研究获得具有上述特性的酵母模型的酵母菌剂极为重要。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种能够稳定发酵产乙醇、耐受多重抑制物且具有高抗逆性的酵母菌剂及其在乙醇生产中的用途和利用该酵母菌剂高效生产乙醇的方法。
为了实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种酵母菌剂，该酵母菌剂含有酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07，其中，酿酒酵母RIPP-06的保藏号为CGMCC No.8203，酿酒酵母RIPP-01的保藏号为CGMCC No.8201，酿酒酵母RIPP-07的保藏号为CGMCC No.8204。
第二方面，本发明提供了第一方面所述的酵母菌剂在生产乙醇中的用途。
第三方面，本发明提供了一种生产乙醇的方法，该方法包括：用第一方面所述的酵母菌剂对乙醇发酵原液进行乙醇发酵。
本发明的酵母菌剂具有高抗逆性和多重胁迫耐受性，且其遗传性能稳定，糖利用率和乙醇产量均较高，可应用于目前的燃料乙醇生产工艺和木质纤维素乙醇新工艺中，实用性较强。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
生物保藏
本发明的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)RIPP-06于2013年9月24日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(缩写为CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏编号为CGMCC No.8203。
本发明的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)RIPP-01于2013年9月24日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(缩写为CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏编号为CGMCC No.8201。
本发明的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)RIPP-07于2013年9月24日被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(缩写为CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏编号为CGMCC No.8204。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
在本发明中，在未作相反说明的情况下，使用的术语“抗逆性”是指微生物在偏离其最佳生长条件下的环境中的生长和发酵能力，比如较高或较低的温度，较高或较低的pH，较高或较低的渗透压，较高的反馈抑制，有毒物质的存在等环境。
本发明提供的酵母菌剂含有酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07，其中，酿酒酵母RIPP-06的保藏号为CGMCC No.8203，酿酒酵母RIPP-01的保藏号为CGMCC No.8201，酿酒酵母RIPP-07的保藏号为CGMCC No.8204。
本发明中，只要将上述各个酿酒酵母菌株混合作为酵母菌剂即可实现本发明的目的。酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07各自的活菌数可以相同或不同。
优选地，酿酒酵母RIPP-06的活菌数为总活菌数的10-45％，更优选为20-40％。
优选地，酿酒酵母RIPP-01的活菌数为总活菌数的10-45％，更优选为20-40％。
优选地，酿酒酵母RIPP-07的活菌数为总活菌数的10-45％，更优选为20-40％。
根据本发明的一种优选实施方式，所述酵母菌剂的制备方法为：将酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07接种至酵母培养基中进行培养。根据本发明优选实施方式制得的酵母菌剂具有更佳的发酵性能。
其中，对上述三种酿酒酵母的总接种量没有特别的限定，可以为常规的接种量，优选地，相对于所述酵母培养基中每克的总糖，酿酒酵母的总接种量为103-108个酵母菌体，更优选地，酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07的接种量之比为1:0.5-2:0.5-2。对所述酵母培养基没有特别的限定，可以为本领域各种能够用于培养酿酒酵母的培养基，如YEPD培养基。所述培养的条件可以为常规的酿酒酵母培养条件，优选情况下，所述培养的条件包括：培养的温度为28-33.5℃，培养的时间为24-72小时。
本发明还提供了上述本发明的酵母菌剂在生产乙醇中的用途。
此外，本发明提供的生产乙醇的方法包括：用上述本发明的酵母菌剂对乙醇发酵原液进行乙醇发酵。
本发明中，相对于所述乙醇发酵原液中每克的总糖，所述酵母菌剂的接种量可以为常规的数量，例如可以为103-108个酵母菌体，优选为104-107个酵母菌体。
其中，所述酵母菌体的个数以菌落形成单位数计算。菌落形成单位数是在光学显微镜下，用血球计数板计数保温后的溶液中活菌的数目(使用台盼蓝染色法进行染色，死菌染色，活菌不染色)。
本发明中，所述乙醇发酵的条件可以为常规的乙醇发酵条件，例如可以包括：发酵时间可以为36-75小时，发酵温度可以为30-33.5℃，pH值可以为4-5.5。
本发明中，所述酵母菌剂可以采用常规的方法接种，例如向乙醇发酵原液中加入5-15体积％的种子液。所述种子液可以为所述酵母菌剂的水溶液或培养基溶液，也可以为所述酵母菌剂的活化培养液。种子液的制备方法为本领域技术人员所熟知，在此不再赘述。
本发明中，所述乙醇发酵原液的选择可以为乙醇发酵领域常规的选择(如含葡萄糖的培养液)，例如，所述乙醇发酵原液可以为含淀粉的植物材料的酶解产物和/或含纤维素的植物材料的酶解产物。所述含淀粉的植物材料可以为玉米、小麦、木薯和马铃薯等常规的可用于乙醇发酵的植物材料。所述含纤维素的植物材料可以为玉米秸秆等。所述酶解产物的制备方法可以为本领域常规的选择，例如文献(苏小军等，燃料乙醇发酵技术研究进展，湖南农业大学学报(自然科学版)，第33卷第4期，第480页)中记载的方法。
根据本发明提供的生产乙醇的方法，可以得到乙醇含量高的成熟发酵液。成熟发酵液中的乙醇可以用常规的方法和步骤，根据不同工业产品的要求(比如燃料酒精要求乙醇的纯度达99％以上)分离并精制，比如蒸馏、浓缩、除水等步骤。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中的实验和检测方法，如无特殊说明，均为常规方法；所使用仪器，如无特殊说明，均为常规检测和操作仪器；所用的实验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂公司购买得到的；以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。实施例中采用的培养基等如下：
酿酒酵母S288C购自ATCC，货号为204508D-5TM。
酸性种子培养基：葡萄糖20g/L，蛋白胨10g/L，酵母抽提物5g/L，乙酸1-3g/L，pH5.0。
葡萄糖发酵培养基：葡萄糖80g/L，蛋白胨5g/L，酵母抽提物3g/L，CaCl2 0.25g/L，MgCl2 0.25g/L，KH2PO4 2.5g/L，pH 5.5，根据需要单独加入乙酸、糠醛等胁迫因子(抑制成分)作为含有抑制成分的葡萄糖发酵培养基。
发酵液的成分采用高效液相色谱法测定：样品经准确稀释后，先经10000r/min高速离心10min，上清液经0.45μm微孔滤膜过滤后进样测定。高效液相色谱条件为：Agilent 1260液相色谱仪，Hi-plex H(8μm，7.7×30μm)色谱柱，柱温60℃，流动相为乙腈：水(80:20)，流速0.5mL/min。
糖利用率(％)＝(培养基中的糖含量-发酵液中残糖含量)/培养基中糖含量×100％。
乙醇产量(g/L)定义为每升发酵液中乙醇的含量，其值越高，表明菌株发酵产乙醇的能力及乙醇耐受性越强。
制备实施例1
按照表1所示的配比制备酵母菌剂。
表1
制备实施例2
将酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07接种至酵母培养基(即不含乙酸的种子培养基)中进行培养(培养温度为30℃且培养时间50h)，酿酒酵母的总接种量为105个酵母菌体(相对于酵母培养基中每克的总糖)，酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07的接种量之比为1:1:1，获得酵母菌剂4#。
实施例1
本实施例用来说明本发明的酵母菌剂的抗逆性和多重胁迫耐受性。
将酵母菌剂1#-4#分别按照105个酵母菌体/mL的接种量分别接种至8种筛选培养基(葡萄糖20g/L，蛋白胨10g/L，酵母抽提物5g/L，胁迫因子5-40g/L，自然pH)中进行发酵，8种筛选培养基的胁迫因子分别为乙酸(3g/L)、糠醛(0.2g/L)、苯酚(0.3g/L)、Na2SO4、NaCl(40g/L)、KCl(25g/L)、NH4Ac(20g/L)、NaAc(30g/L)，发酵的条件为30℃、时间为72h，取5ml发酵液，10000r/min离心10min，上清液经0.45μm微孔滤膜过滤后进行发酵液成分测定。结果表明，各发酵液中的乙醇产量均在8.0g/L以上，说明本发明的酵母菌剂具有较高的抗逆性和多重胁迫耐受性。
实施例2
本实施例用来说明本发明的酵母菌剂的葡萄糖发酵性能。
(1)制备种子液
酵母菌剂1#-4#分别接种于酸性种子培养基(含乙酸3g/L)，30℃、200r/min振荡培养12h，得到一级种子培养液；
将所述一级种子培养液离心后，细胞转接于种子培养基(不含乙酸)，30℃、200r/min振荡培养16h，得到种子液。
(2)发酵葡萄糖产乙醇
将步骤(1)得到的种子液离心，收集细胞得到菌泥，将菌泥(以细胞干重计，控制初始细胞浓度为1.2g/L)接入装有100ml葡萄糖发酵培养基的250ml的摇瓶中，30℃、120r/min振荡培养，进行厌氧发酵。每次接种3个平行样，结果取平均值。
上述条件发酵72h后，取5ml发酵液，10000r/min离心10min，上清液经0.45μm微孔滤膜过滤后进行发酵液成分测定。结果如表2所示。
实施例3
本实施例用来说明本发明的酵母菌剂在含有抑制成分(1g/L乙酸)的葡萄糖发酵培养基中的发酵性能。
(1)制备种子液
同实施例2的步骤(1)。
(2)在抑制成分的存在下发酵葡萄糖产乙醇
将步骤(1)得到的种子液离心，收集细胞得到菌泥，将菌泥(以细胞干重计，控制初始细胞浓度为1.2g/L)接入装有100ml含抑制成分的葡萄糖发酵培养基的250ml的摇瓶中，其余步骤同实施例2的步骤(2)。结果如表2所示。
实施例4
本实施例用来说明本发明的酵母菌剂在含有抑制成分(3g/L乙酸)的葡萄糖发酵培养基中的发酵性能。
(1)制备种子液
同实施例2的步骤(1)。
(2)在抑制成分的存在下发酵葡萄糖产乙醇
将步骤(1)得到的种子液离心，收集细胞得到菌泥，将菌泥(以细胞干重计，控制初始细胞浓度为1.2g/L)接入装有100ml含抑制成分的葡萄糖发酵培养基的250ml的摇瓶中，其余步骤同实施例2的步骤(2)。结果如表2所示。
实施例5
本实施例用来说明本发明的酵母菌剂在含有抑制成分(1g/L乙酸和0.2g/L糠醛)的葡萄糖发酵培养基中的发酵性能。
(1)制备种子液
同实施例2的步骤(1)。
(2)在抑制成分的存在下发酵葡萄糖产乙醇
将步骤(1)得到的种子液离心，收集细胞得到菌泥，将菌泥(以细胞干重计，控制初始细胞浓度为1.2g/L)接入装有100ml含抑制成分的葡萄糖发酵培养基的250ml的摇瓶中，其余步骤同实施例2的步骤(2)。结果如表2所示。
实施例6
本实施例用来说明本发明获得的酵母菌剂在含有抑制成分(1g/L乙酸和0.3g/L苯酚)的葡萄糖发酵培养基中的发酵性能。
(1)制备种子液
同实施例2的步骤(1)。
(2)在抑制成分的存在下发酵葡萄糖产乙醇
将步骤(1)得到的种子液离心，收集细胞得到菌泥，将菌泥(以细胞干重计，控制初始细胞浓度为1.2g/L)接入装有100ml含抑制成分的葡萄糖发酵培养基的250ml的摇瓶中，其余步骤同实施例2的步骤(2)。结果如表2所示。
对比例1
按照制备例1的方式制备酵母菌剂D，不同的是，用酿酒酵母S288C代替酿酒酵母RIPP-06。按照与实施例2-6相同的方法对酵母菌剂D的发酵性能进行测定，结果如下表2所示，比较表2中显示的结果可以看出，采用非本发明特定酿酒酵母菌株组合而得到的酵母菌剂的发酵性能明显低于本发明的酵母菌剂。
表2
从以上实施例的结果可以看出，将本发明的酵母菌剂用于发酵产乙醇能够获得较高的糖利用率和乙醇产量。特别地，实施例2-6分别利用本发明的酵母菌剂在各种抑制成分的存在和不存在的情况下对葡萄糖进行发酵，结果均显示出较高的糖利用率和乙醇产量，说明本发明的酵母菌剂性能稳定，适用于在多种抑制成分存在的条件下发酵产乙醇，实用性强。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (10)

1.一种酵母菌剂，其特征在于，该酵母菌剂含有酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07，其中，酿酒酵母RIPP-06的保藏号为CGMCC No.8203，酿酒酵母RIPP-01的保藏号为CGMCC No.8201，酿酒酵母RIPP-07的保藏号为CGMCC No.8204。
2.根据权利要求1所述的酵母菌剂，其中，酿酒酵母RIPP-06的活菌数为总活菌数的10-45％、酿酒酵母RIPP-01的活菌数为总活菌数的10-45％、酿酒酵母RIPP-07的活菌数为总活菌数的10-45％。
3.根据权利要求1或2所述的酵母菌剂，其中，酿酒酵母RIPP-06的活菌数为总活菌数的20-40％、酿酒酵母RIPP-01的活菌数为总活菌数的20-40％、酿酒酵母RIPP-07的活菌数为总活菌数的20-40％。
4.根据权利要求1所述的酵母菌剂，其中，所述酵母菌剂的制备方法为：将酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07接种至酵母培养基中进行培养，相对于所述酵母培养基中每克的总糖，酿酒酵母的总接种量优选为103-108个酵母菌体，酿酒酵母RIPP-06、酿酒酵母RIPP-01和酿酒酵母RIPP-07的接种量之比优选为1:0.5-2:0.5-2。
5.根据权利要求4所述的酵母菌剂，其中，所述培养的条件包括：培养的温度为28-33.5℃，培养的时间为24-72小时。
6.权利要求1-5中任意一项所述的酵母菌剂在生产乙醇中的用途。
7.一种生产乙醇的方法，该方法包括：用权利要求1-5中任意一项所述的酵母菌剂对乙醇发酵原液进行乙醇发酵。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，相对于所述乙醇发酵原液中每克的总糖，所述酵母菌剂的接种量为103-108个酵母菌体。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其中，所述乙醇发酵的条件包括：发酵时间为36-75小时，发酵温度为30-33.5℃，pH值为4-5.5。
10.根据权利要求7或8所述的方法，其中，所述乙醇发酵原液为含淀粉的植物材料的酶解产物和/或含纤维素的植物材料的酶解产物。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110628656A (zh) * 2019-09-03 2019-12-31 云南师范大学 一种酵母菌剂及其在酿酒中的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101880636A (zh) * 2010-06-04 2010-11-10 天津大学 酿酒酵母的耐受多种抑制剂的菌株
CN102296034A (zh) * 2011-08-18 2011-12-28 天津大学 一种获得耐受多种抑制剂酵母菌株的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101880636A (zh) * 2010-06-04 2010-11-10 天津大学 酿酒酵母的耐受多种抑制剂的菌株
CN102296034A (zh) * 2011-08-18 2011-12-28 天津大学 一种获得耐受多种抑制剂酵母菌株的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SHIHUI YANG，ET AL: "RTehseaerc hZ ayrtimcleomonas mobilis regulator hfq contributes to tolerance against multiple lignocellulosic pretreatment inhibitors", 《BMC MICROBIOLOGY》 *
TOBIAS MODIG，ET AL: "Increased tolerance and conversion of inhibitors in lignocellulosic hydrolysates by Saccharomyces cerevisiae", 《JOURNAL OF CHEMICAL TECHNOLOGY AND BIOTECHNOLOGY》 *
XIN WANG, ET AL: "Metabolomic Analysis Reveals Key Metabolites Relatedto the Rapid Adaptation of Saccharomyce cerevisiae to Multiple Inhibitors of Furfural, Acetic Acid, and Phenol", 《A JOURNAL OF INTEGRATIVE BIOLOGY》 *
郝学才 等: "酿酒酵母在纤维素乙醇生产中对毒性化合物的耐受机理研究进展", 《微生物通报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110628656A (zh) * 2019-09-03 2019-12-31 云南师范大学 一种酵母菌剂及其在酿酒中的应用
CN110628656B (zh) * 2019-09-03 2023-08-22 云南师范大学 一种酵母菌剂及其在酿酒中的应用

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