CN104548232A - 从全血提取高浓缩血浆的装置和方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从全血提取高浓缩血浆的装置和方法,其组成包括:第一注射器;离心分离管,安装在第一注射器上以对收容于第一注射器的全血进行离心分离;帽,安装在第一注射器,以对通过离心分离而采集在第一注射器的血浆进行再次离心分离;以及薄膜过滤器,具有:机体,呈圆筒状且在其两侧具有一对入口部,以使其能分别安装第一注射器和第二注射器;内置于机体的中空的薄膜;以及第一空间,形成在机体与薄膜之间以收集通过薄膜的成分,本发明在对全血进行离心分离而除去红血球之后使血浆通过薄膜过滤器,从而无需利用其它设备就能得到包含有高浓度血小板的浓缩血浆,因此,能够提高便利性、简单化工序、缩短时间。
Description
技术领域
本发明涉及一种从全血提取高浓缩血浆,更详细地说,涉及一种从全血提取高浓缩血浆的装置和方法,以使从全血进行分离而采集的血浆通过薄膜过滤器,从而提取高浓度的浓缩血浆。
背景技术
一般来说,全血(whole blood)大致分为血球(blood corpuscle)和血浆(plasma)。在此,血球由红血球(RBC)、白血球以及血小板构成,血浆主要包含水分,此外,还包含血液凝固因子和电解质等。
如果对血浆更详细地进行说明,血浆包含有91%水、7%蛋白质、1%脂肪、0.1%糖质以及0.9%其它无机物离子。在此,血浆的蛋白质可以利用对硫酸氨的溶解度之差区分血清蛋白和血红蛋白,它们分别由多个蛋白质混合而成。
在此,血清蛋白在蛋白质中大概占55%左右,主要对蛋白质的供给和维持凝胶渗透压起到重要的作用。此外,血红蛋白在蛋白质中大概占38%左右,它又分为α、β以及γ这3种。α-血红蛋白含有脂蛋白(lipoprotein)和糖蛋白,利用于维生素和激素等的运载,β-血红蛋白运载凝血素、血浆促凝血酶原激酶、铁以及铜成分等,γ-血红蛋白中主要包含有免疫抗体。
如上所述,在血液内起重要作用的血浆只需注入到人体就能使营养供给变得活泼,而且能使抑制有害物质等的作用最大化。
因此,如图1所示,从全血(Wb)通过离心分离过程分离为红血球层(Red Blood Cell:RBC)、血小板浓缩血浆(Platelet Rich Plasma:PRP)以及贫血小板血浆(Platelet Poor Plasma:PPP),并分别采取血小板浓缩血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)。
作为一个例子,对于10ml的全血可得到大概2.5ml左右的血小板浓缩血浆和大概2.5ml左右的贫血小板血浆。在此,血小板浓缩血浆利用于多种治疗和美容领域,其包括有:包括上颌窦提升术(sinus elevation)的移植的伤口治疗、心脏手术、整形手术、皮肤医学等。
在此,贫血小板血浆在从全血分离采取时含有尚未分离的少量的血小板和蛋白质等。该贫血小板血浆在血小板浓缩血浆进行施术后用作按摩材料或被废弃。
而且,虽然在利用现有方式制造的血小板浓缩血浆中血小板以高浓度浓缩,但是,存在血浆只浓缩两倍左右的缺点。因此,在全血所包含的的成分中除了红血球以外,不仅浓缩血小板,还需要浓缩血浆等。为此,以前为了从贫血小板血浆再次重新提取血浆而使用执行过滤过程或通过离心分离过程而单纯地只浓缩血浆的方法。
但是,从贫血小板血浆重新提取的血小板浓缩血浆存在血小板的浓度不高的问题。此外,关于用于获得包含上述低浓度血小板的浓缩血浆的现有装置和方法,也提出了低效率性的问题。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:KR10-2010-0041436;
专利文献2:KR10-2010-0116106。
发明内容
本发明为了解决上述的问题而提出,其目的在于,提供一种从全血提取高浓缩血浆的装置和方法,其通过对于从全血进行离心分离之后排出红血球而采集的血浆,区分存在白细胞层(buffy coat)或不存在白细胞层的情况使其通过薄膜过滤器,从而通过简单的过滤过程从血浆提取已区分白血球存在与否的高浓度的浓缩血浆,使采集的浓缩血浆中包含有高浓度的血小板。
此外,本发明的另一个目的在于,提供一种从全血提取高浓缩血浆的装置和方法,其通过使从全血进行离心分离而采集的已除去红血球的血浆直接或者再进行离心分离之后通过薄膜过滤器,从而能够提取高浓度的浓缩血浆。
为了达成上述目的,根据本发明的第一实施方式的从全血提取高浓缩血浆的装置,其组成包括:第一注射器;离心分离管,其安装在第一注射器上,以对收容于第一注射器的全血进行离心分离;帽,其安装在第一注射器上,以对通过离心分离采集到第一注射器中的血浆进行再次离心分离;以及薄膜过滤器,其具有:呈圆筒状的机体,,在机体的两侧具有一对入口部,以分别安装第一注射器和第二注射器;内置于机体的中空的薄膜;以及第一空间,其形成在机体和薄膜之间,以收集通过薄膜的成分。该装置将已进行离心分离或再次离心分离的血浆向第一注射器和第二注射器进行一次或多次往返流动,并使收容于血浆内的水或包含水的一定粒径一下的成分通过薄膜排出,从而提取高浓缩血浆。
在此,本发明的薄膜过滤器还包括:塞子,该塞子安装为封闭机体的开放的两端部,并形成为使从一面突出的固定卡口固定薄膜;以及出口部,该出口部形成在机体,以使第一空间与外部相通,通过入口部向第一注射器和第二注射器流动的血浆经过塞子而通过薄膜。
此外,在离心分离管中形成有:在离心分离管内部的上侧内表面形成有第一弯曲面,以增大收容红血球的空间的体积而使收容量上升,并在离心分离中使收容空间内的空气排出:在离心分离管与第一排出部的安装位置形成有第一间隙,以防止收容于离心分离管的红血球由表面张力而凝聚向外部流出,在帽中形成有:在帽内部的上侧内表面形成有第二弯曲面,以增大收容红血球的空间的体积而使收容量上升,并在离心分离中使收容空间内的空气排出;在帽与第一排出部的安装位置形成有第二间隙,以防止收容于离心分离管的红血球由表面张力而凝聚向外部流出。
此外,本发明的薄膜过滤器具有能使比分子量为66000道尔顿(dalton)小的40000~60000道尔顿分子量的血清蛋白残留的网眼(mesh)以排出血浆用的水和溶于水的尿酸和钾等,并使血清蛋白等有用的物质残存于血浆。
而且,全血收容于第一注射器、试管、具有分离凝胶体的试管或PRP设备进行离心分离。
另一方面,利用本发明的装置从全血提取高浓缩血浆的方法,该方法包括:第10步骤,在第一注射器中采集全血;第11步骤(S11),在第一注射器上安装离心分离管,进行离心分离;第12步骤(S12),对通过离心分离收容有红血球的离心分离管进行拆卸;第13步骤(S13),抽掉残存在第一注射器的白细胞层,使第一注射器中只残存有血浆;第14步骤(S14),在形成于薄膜过滤器的一对入口部上分别安装第一注射器和第二注射器;第15步骤(S15),施加压力将第一注射器内的血浆注入到薄膜过滤器中,使其向第二注射器流动;第16步骤(S16),将收容于第二注射器的血浆重新注入到薄膜过滤器中,使其向第一注射器流动;第17步骤(S17),反复进行第15步骤(S15)和第16步骤(S16);以及第18步骤(S18),单独采集包含有未能通过内置于薄膜过滤器的薄膜而残存在薄膜的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆。
此外,利用本发明的装置从全血提取高浓缩血浆的方法,该方法包括:第20步骤(S20),在第一注射器中采集全血;第21步骤(S21),在第二注射器上安装离心分离管,进行离心分离;第22步骤(S22),对通过离心分离而收容有红血球的离心分离管进行拆卸,使包含有白细胞层的血浆残存在第一注射器中;第23步骤(S23),在形成于薄膜过滤器的一对入口部上分别安装第一注射器和第二注射器;第24步骤(S24),施加压力将第一注射器内的包含白细胞层的血浆注入到薄膜过滤器中,使其向第二注射器流动;第25步骤(S25),将收容于第二注射器的包含有白细胞层的血浆重新注入到薄膜过滤器中,使其向第一注射器流动;第26步骤(S26),反复进行第24步骤(S24)和第25步骤(S25);以及第27步骤(S27),单独采集包含有未能通过内置于薄膜过滤器的薄膜而残存在薄膜的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆。
此外,利用本发明的装置从全血提取高浓缩血浆的方法,该方法包括:第30步骤(S30),在第一注射器中采集全血;第31步骤(S31),在第一注射器上安装离心分离管,进行离心分离;第32步骤(S32),对通过离心分离而收容有红血球的离心分离管进行拆卸,使包含有白细胞层的血浆残存在第一注射器中;第33步骤(S33),在第一注射器上安装帽,进行再次离心分离;第34步骤(S34),对通过再次离心分离而收容有红血球的帽进行拆卸;第35步骤(S35),在形成于薄膜过滤器的一对入口部上分别安装第一注射器和第二注射器;第36步骤(S36),施加压力将第一注射器内的浓缩血浆注入到薄膜过滤器中,使其向第二注射器流动;第37步骤(S37),将收容于第二注射器的浓缩血浆重新注入到薄膜过滤器中,使其向第一注射器流动;第38步骤(S38),反复进行第36步骤(S36)和第37步骤(S37);以及第39步骤(S39),单独采集包含有未能通过内置于薄膜过滤器的薄膜而残存在薄膜的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆。
另一方面,利用本发明的包括有变形的薄膜过滤器的装置用于从全血提取高浓缩血浆的装置,其包括:第一注射器;离心分离管,其安装在第一注射器上,以对收容于第一注射器的全血进行离心分离;以及薄膜过滤器,其包括:机体,其形成有入口部以安装第一注射器;内置在机体的内部的一部分空间内的薄膜,形成在残余空间内的第二空间,在流入到第二空间内的血浆中,收容在血浆内的水或包含水的一定粒径以下的成分将通过薄膜排出,包含有未能通过薄膜的一定粒径以上的成分的高浓缩血浆将残存在第二空间内。
在此,本发明的薄膜过滤器还包括:出口部,该出口部形成在机体的下部,以相对于形成在机体的上部的入口部;收集部,该收集部形成为使第二空间与外部相通,以使残存在形成于机体的内部上侧的第二空间的成分从外部收集;以及开闭构件,安装该开闭构件以使收集部的外侧端部进行开闭。
另一方面,利用包括有变形的薄膜过滤器的装置从全血提取浓缩血浆的方法,该方法包括:第40步骤(S40),在第一注射器中采集全血;第41步骤(S41),在第一注射器上安装离心分离管,进行离心分离;第42步骤(S42),对通过离心分离而收容有红血球的离心分离管进行拆卸,使包含有白细胞层的血浆残存在第一注射器中;第43步骤(S43),在形成于薄膜过滤器的入口部上安装第一注射器;第44步骤(S44),施加压力将第一注射器内的包含有白细胞层的血浆注入到薄膜过滤器中;以及第45步骤(S45),单独采集包含有未能通过内置于薄膜过滤器的薄膜而残存在第二空间且有一定粒径以上的成分的高浓缩血浆。
而且,在本发明的第45步骤(S45)中,残存在第二空间的高浓缩血浆通过入口部或形成在薄膜过滤器使第二空间与外部相通的收集部向外部排出而进行采集。
如上所述,根据本发明,对收容有全血的注射器、PRP设备或试管或包括分离凝胶体的试管进行离心分离而采集PRP和PPP,或者通过使排除红血球而采集的血浆通过薄膜过滤器,从而具有如下效果,即能通过简单而单一的工序在短时间内提取包含有血浆、浓缩血小板、蛋白质和纤维素(fibrin)等的高浓度的浓缩血浆。
此外,通过从全血采集的血浆中利用薄膜过滤器来分离水和尿酸等,使包含有血清蛋白、血红蛋白等的有益的成分残存,从而具有如下效果,即能够得到具有比贫血小板血浆内的血浆浓度的至少四倍以上的浓度的高浓度的浓缩血浆。
此外,对全血进行离心分离的状态下,以选择已除去白细胞层的血浆或包含有白细胞层的血浆而进行采集的状态通过薄膜过滤器,从而具有得到存在白血球或不存在白血球的高浓度的浓缩血浆的效果。
此外,通过将对全血进行离心分离而包含有残存的白细胞层的血浆进行再次离心分离而重新除去微量的红血球之后通过薄膜过滤器,从而具有得到深黄色的高浓度的浓缩血浆的效果。
此外,因为仅通过单一的过滤工序就能采集到高浓度的浓缩血浆,所以能够得到多种浓缩血浆,与现有的用于采集血小板浓缩血浆和浓缩血浆的离心分离和过滤工序相比,具有使工序更单一化,在时间和质量方面具有提高效率性的效果。
附图说明
在本说明书中附加的如下附图例示了本发明的优选的实施方式,结合发明的详细说明起到更容易理解本发明的技术思想的作用,因此,本发明不能只限定于如下附图所记载的内容而进行解释。
图1是图示了一般的全血进行离心分离的状态的侧面图。
图2是简略地图示了根据本发明的优选的实施方式的从全血提取高浓缩血浆的装置中用于进行离心分离的注射器和离心分离管的侧剖面图。
图3是简略地图示了图2的用于提取高浓缩血浆的装置中的注射器和薄膜过滤器的侧剖面图。
图4是图示了图3所示的薄膜的侧面图。
图5是简略地图示了图2的用于提取高浓缩血浆的装置中的注射器和帽的侧剖面图。
图6是简略地图示了利用图2的装置提取高浓缩血浆的方法的流程图。
图7是概简略地图示了利用图2的装置提取高浓缩血浆的另一种方法的流程图。
图8是简略地图示了利用图2和图5的装置提取高浓缩血浆的方法的流程图。
图9是简略地图示了图3所示的薄膜过滤器的实施方式的侧剖面图。
图10是简略地图示了利用图9的装置提取高浓缩血浆的方法的流程图。
附图标记说明
100:第一注射器;
110:第二注射器;
120:薄膜过滤器;
121:机体(主体);
121a:塞子;
122:入口部;
123:出口部;
124:薄膜;
125:第一空间;
126:第二空间;
127:收集部;
128:开闭构件;
200:离心分离管;
210:第一间隙;
220:第一弯曲面;
300:帽;
310:第二间隙;
320:第二弯曲面。
具体实施方式
下面,参照附图对优选的实施方式进行详细地说明,以使本领域技术人员能容易地实施本发明。但是,在对本发明的优选的实施方式的工作原理进行详细地说明时,判断对相关的公知功能或结构的具体的说明会不必要地混淆本发明的要旨的情况下,将省略其详细的说明。
参照附图对本发明的优选的实施方式的从全血提取高浓缩血浆的装置进行详细地说明。
图2是简略地图示了根据本发明的优选的实施方式的从全血提取高浓缩血浆的装置中的用于进行离心分离的注射器和离心分离管的侧剖面图,图3是简略地图示了图2的用于提取高浓缩血浆的装置中的注射器和薄膜过滤器的侧剖面图,图4是图示了图3所示的薄膜的侧面图,图5是简略地图示了图2的用于提取高浓缩血浆的装置中的注射器和帽的侧剖面图。
本发明的提取装置如图2至图5所示,组成包括第一注射器100、第二注射器110、薄膜过滤器120、离心分离管200以及帽300。
首先,如图2和图3所示,第一、第二注射器100、110的组成包括第一、第二圆筒101、111、第一、第二橡胶衬垫102、112、第一、第二活塞103、113以及针头(未图示),以下,为了方便说明,在附图中图示除去了针头的状态而进行说明。
第一注射器100是采集全血并进行收容的构件。在该第一注射器100的第一排出部104安装有离心分离管200,以进行一次离心分离。此外,在第一排出部104安装帽300,以除去一次离心分离后的微量的红血球而进行而次离心分离,特别是,安装在薄膜过滤器120的一对入口部122中的一侧入口部122以进行过滤血浆。
此外,以在第一注射器100收容有全血的状态,如图2所示,第一橡胶衬垫102和第一活塞103从第一排出部104被推向后方。此时,在第一排出部104安装离心分离管200以对第一注射器100进行一次离心分离。
此外,在进行1次离心分离之后拆卸收容有红血球的离心分离管200,对于采集在第一注射器100中的血浆和白细胞层,当排除白细胞层时,利用第一注射器100的第一活塞103抽掉白细胞层。
此外,第一排出部104安装在薄膜过滤器120的一对入口部122中的一侧入口部122,以使收容于第一注射器100的血浆(或血浆和白细胞层)能通过薄膜过滤器120。
而且,在收容有血浆(或血浆和白细胞层)状态的第一注射器100中将收容有一定量的空气A。空气A的作用是使通过薄膜过滤器120的血浆能顺利地流入到第二注射器110中。例如,优选地将血浆和空气A以大概1:1的比率收容于第一注射器100中,除此以外,也可以调节使血浆能够从第一注射器100完全流动到第二注射器110的程度的空气量而进行收容。
在此,第一注射器100是用于收容全血并对该全血进行离心分离的工具,代替该第一注射器100,也可以使用通常的试管、具有分离凝胶体的试管或PRP设备。这表明,在对全血进行离心分离时,不用拘泥于某一种工具或方式,能用多种工具和方式来进行。
第二注射器110是用于收容从第一注射器100排出而已通过薄膜过滤器120的血浆的构件。该第二注射器120的第二排出部114安装在薄膜过滤器120的一对入口部122中的另一侧入口部122。此时,在第二2注射器120中,作为用于收容贫血小板血浆的状态,如图3所示,第二橡胶衬垫112和第二活塞113位于第二排出部114侧。
因此,第一、第二注射器100、110设置为以如下方式进行相互运动,即,当对第一注射器100的第一活塞103向下加压时,血浆会经过薄膜过滤器120而流入到第二注射器110,而第而活塞113被推向后方。此后,加压第二活塞113使收容于第二注射器110中的血浆向第一注射器100流动而进行再次收容是很显然的。
因此,当交替地对第一活塞103和第二活塞113进行加压时,血浆会进行往返流动而经过薄膜过滤器120,通过这样的过程从血浆分离掉包含水、尿酸、钾以及磷酸盐等的一定粒径以下的成分。当然,随后除一定粒径以下的成分以外包含所剩余的蛋白质和血清蛋白等超过一定粒径的成分的血浆将收集在第一注射器100或第二注射器110中。
薄膜过滤器120的组成包括机体121、两个入口部122、出口部123、薄膜124以及第一空间125。该薄膜过滤器120调节网眼的大小,从血浆分离水或包含水、尿酸、钾以及磷酸盐等的一定粒径以下的成分,作为以使一部分含有包含有蛋白质和血清蛋白等的超过一定粒径的成分的有益的成分残留而包含于血浆的构件,可以利用血液透析用薄膜过滤器或对其进行变形或应用而制作。
首先,机体121大概呈圆筒状,其内部内置有薄膜124,以与机体的两端侧分别形成的入口部122相通的方式安装有塞子121a。即,设置为使通过入口部122流动的血浆经过塞子121a而通过薄膜(124)。
此时,如图3所示,通过从塞子121a的一面突出的固定卡口121b插入到薄膜124的中空内,而对薄膜124进行固定。
此外,入口部122由一对构成,其形成为以在机体121的两侧部沿同一方向分别安装有第一注射器100和第二注射器110。当然,优选地,入口部122从机体121向上形成。
此外,出口部123从机体121向下形成,以使通过薄膜124从血浆分离的水或包含有水、尿酸、钾以及磷酸盐等的一定粒径以下的成分能向外部排出。此时,出口部123可以形成有一个或多个,优选地,在机体121的两侧部分别形成有一个。
此外,薄膜124是用于从血浆提取部分含有包含蛋白质和血清蛋白等的浓缩血浆的构件,如图4所示,呈中空的圆筒状,内置于机体121以使血浆能沿中空流动。
在此,薄膜124是内径为200~300μm、厚度为40~50μm的圆形形态,有大约50~1000个薄膜光线内置于过滤器机体,优选地,其有效截面积为大概0.01m2~0.014m2左右。更加优选地,具有能使包括有比作为血清蛋白的分子量的66000道尔顿小的40000~60000道尔顿分子量的物质残留的网眼。在此,优选地,薄膜124为用于血液透析的薄膜。
而且,第一空间125通过在机体121的内表面与薄膜124的外表面之间构成一定的间隔而形成。该第一空间125形成为以收集贯通薄膜124而排出的一定粒径以下的成分并使其能顺利地流动到出口部123。
离心分离管200安装在第一注射器100的第一排出部104,作为收容对全血进行一次离心分离而采集的红血球的构件,在一次离心分离后从第一排出部104进行拆卸。即,离心分离管200先安装在第一注射器100进行一次离心分离,然后在将第一注射器100安装在薄膜过滤器120之前对其进行拆卸。
在此,在离心分离管200中的内部的上侧内表面形成有第一弯曲面220,以增大收容红血球的空间的体积而使收容量上升,并使一次离心分离中的内部空间内的空气不停滞地排到外部。此外,在与第一排出部104的安装位置形成有第一间隙210,该第一间隙210防止收容于离心分离管200的红血球由表面张力而凝聚向外部流出。
帽300是一次离心分离后需要进行二次离心分离时安装在第一注射器100的第一排出部104上,用于收容通过二次离心分离采集的红血球的构件。此外,该帽300是为了在一次离心分离后除去残留在血浆的微量的红血球时进行使用而安装在第一排出部104的构件。在此,在抽掉白细胞层时也可以不使用帽300。
此外,在帽300中,在内部的上侧内表面形成有第二弯曲面320,以增大收容红血球的空间的体积而使收容量上升,并使离心分离中的内部空间内的空气不停滞地排到外部。而且,在与第一排出部104的安装位置形成有第二间隙310,该第二间隙310防止收容于帽300的红血球由表面张力而凝聚向外部流出。
方法1
参照附图,详细地说明根据本发明对全血进行一次离心分离,从而分离白细胞层和红血球,使采集在第一注射器中的血浆通过薄膜过滤器,提取高浓缩血浆的方法。
图6是简略地图示了利用那个图2的装置提取高浓缩血浆的方法的流程图。
首先,在第一注射器100中采集全血(S10)。
接着,在第一注射器100上安装离心分离管200,进行离心分离(S11)。在第一注射器100的第一排出部104上安装离心分离管200,对第一注射器100和离心分离管200进行离心分离。由此将全血区分为包含有红血球、白细胞层的血小板浓缩血浆和贫血小板血浆的层。此时,红血球收容于离心分离管200中。在此,考虑从全血分离的红血球的量来形成离心分离管200的内部收容空间。即,红血球收容于离心分离管200中,白细胞层位于第一注射器100的第一排出部104的位置。
接着,拆卸收容有红血球的离心分离管200(S12)。进行离心分离后红血球处于收容在离心分离管200的状态,将该离心分离管200从第一注射器100进行拆卸。因此,在第一注射器100中处于采集有包含白细胞层的血浆的状态。
接着,抽掉白细胞层,使第一注射器100中只残存有血浆(S13)。在此,当拆卸离心分离管200时,白细胞层位于第一注射器100的第一排出部104位置的最下部,利用第一活塞103抽掉该白细胞层,使第一注射器100中只残存有血浆。
接着,在形成于薄膜过滤器120的一对入口部122上分别安装第一注射器100和第二注射器110(S14)。此时,在薄膜过滤器120的一侧入口部122上安装第一注射器100的第一排出部104,在薄膜过滤器120的另一侧入口部122上安装第二注射器110的第二排出部114。
接着,施加压力将第一注射器100内的血浆注入到薄膜过滤器120中,使其向第二注射器110流动(S15)。在此,流入到薄膜过滤器120的血浆将经过薄膜124的中空部分进行流动。
此时,从血浆分离包含有水、尿酸、钾和磷酸盐等的一定粒径以下的成分和包含有蛋白质和血清蛋白等的超过一定粒径的成分。即,一定粒径以下的成分被收集到第一空间125后通过出口部123向外部排出,一定粒径以上的成分残存在血浆中,向第二注射器110流动。
接着,将收容于第二注射器110中的血浆重新注入到薄膜过滤器120,使其向第一注射器100流动(S16)。当然,在此过程中,也反复进行与先前步骤(S15)相同的作用。在此,薄膜124的网眼设为40000~60000道尔顿,通过这个大小的网眼使66000道尔顿的分子大小的血清蛋白残存在血浆中。
优选地,薄膜124是内径为200~300μm、厚度为40~50μm的圆筒状,有大约50~1000个薄膜光线内置于过滤器机体中,有效截面积为大概0.01m2~0.014m2左右。更加优选地,具有能使包括有比作为血清蛋白的分子量的66000道尔顿小的40000~60000道尔顿的分子量的物质残留的网眼。在此,优选地,薄膜124是用于血液透析的薄膜。
接着,反复实施步骤(S15)和步骤(S16)(S17)。直到收集在第一空间125而通过出口部123向外部排出的一定粒径以下的成分的排出量全部排出为止,反复实施。这样,从以交替地收容于第一注射器100和第二注射器110的方式进行流动的血浆将分离水或包含水的一定粒径以下的成分,而变为高浓缩血浆。
最后,单独采集未能通过薄膜124而残存在薄膜124的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆(S18)。此时,对第一注射器100进行充分加压,使超过一定粒径的成分完全收容于第二注射器110中。当然,也可以加压第二注射器110,在第一注射器100中收容超过一定粒径的成分。
这种过程与现有的从贫血小板血浆得到血小板浓缩血浆不同,是为了得到从全血中已排除红血球的血浆而得到的高浓缩血浆,与现有的用于采集血小板浓缩血浆和浓缩血浆的离心分离和过滤工序相比,工序更单一化,包含高浓度血小板的浓缩血浆从浓度和成分方面与现有方法得到的相比,能够采集到更高纯度的更多的量。
方法2
参照附图,详细地说明根据本发明对全血进行一次离心分离而分离红血球,使采集在第一注射器中的白细胞层和血浆通过薄膜过滤器而提取高浓缩血浆的方法。
图7是简略地图示了利用图2的装置提取高浓缩血浆的另一种方法的流程图。
首先,在第一注射器100中采集全血(S20)。
接着,在第一注射器100上安装离心分离管200,进行离心分离(S21)。在第一注射器100的第一排出部104上安装离心分离管200,对第一注射器100和离心分离管200进行离心分离。由此,全血被区分为包含有红血球、白细胞层的血小板浓缩血浆和贫血小板血浆的层。此时,红血球收容于离心分离管200中。
在此,考虑从全血区分的红血球的量来形成离心分离管200的内部收容空间。即,红血球收容于离心分离管200中,白细胞层位于第一注射器100的第一排出部104的位置。
接着,拆卸收容有红血球的离心分离管200,使包含有白细胞层的血浆残存在第一注射器100(S22)中。进行离心分离后,红血球处于收容于离心分离管200的状态,只要将该离心分离管200从第一注射器100进行拆卸即可。因此,在第一注射器100中处于采集有包含白细胞层的血浆的状态。
接着,在形成于薄膜过滤器120的一对入口部122上分别安装第一注射器100和第二注射器110(S23)。此时,在薄膜过滤器120的一侧入口部122上安装第一注射器100的第一排出部104,在薄膜过滤器120的另一侧入口部122上安装第二注射器110的第二排出部114。
接着,施加压力将第一注射器100内的包含有白细胞层的血浆注入到薄膜过滤器120,使其向第二注射器110流动(S24)。在此,流入到薄膜过滤器120中的血浆将经过薄膜124的中空部分进行流动。
此时,从血浆分离包含有水、尿酸、钾以及磷酸盐等的一定粒径以下的成分和包含有蛋白质和血清蛋白等的超过一定粒径的成分。即,一定粒径以下的成分在收集到第一空间125后通过出口部123向外部排出,一定粒径以上的成分则残存在血浆中,向第二注射器110流动。
接着,将收容于第二注射器110的血浆重新注入到薄膜过滤器120中,使其向第一注射器100流动(S25)。当然,在此过程中也反复进行与先前步骤(S24)相同的作用。在此,优选地,薄膜124具有能使比分子量为66000道尔顿小的40000~60000道尔顿分子量的血清蛋白残留的网眼。
接着,反复实施步骤(S24)和步骤(S25)(S26)。直到被收集在第一空间125内而通过出口部123向外部排出的一定粒径以下的成分的排出量全部排出为止,反复实施。这样,从以使交替地收容于第一注射器100和第二注射器110的方式流动的血浆中分离水或包含水的一定粒径以下的成分,而变为高浓缩血浆。
最后,单独采集未能通过薄膜124而残存在薄膜124的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆(S27)。此时,对第一注射器100进行充分加压,使超过一定粒径的成分完全收容于第二注射器110中。当然,也可以加压第二注射器110,使超过一定粒径的成分收容于第二注射器100中。
通过这样的过程得到的高浓缩血浆在浓度和成分方面与现有的通过离心分离和过滤得到的相比,能够采集到更高纯度的更多的量。
方法3
参照附图,详细地说明根据本发明对全血进行一次离心分离而分离红血球,对采集在第一注射器的白细胞层和血浆进行二次离心分离而再次分离红血球之后,使其通过薄膜过滤器而提取高浓缩血浆的方法。
图8是简略地图示了利用图2和图5的装置提取高浓缩血浆的方法的流程图。
首先,在第一注射器100中采集全血(S30)。
接着,在第一注射器100上安装离心分离管200,进行离心分离(S31)。在第一注射器100的第一排出部104上安装离心分离管200,对第一注射器100和离心分离管200进行离心分离。
由此,将全血区分为包含红血球、白细胞层的血小板浓缩血浆和贫血小板血浆的层。此时,红血球收容于离心分离管200中。在此,考虑从全血区分的红血球的量来形成离心分离管200的内部收容空间。即,红血球收容于离心分离管200中,白细胞层位于第一注射器100的第一排出部104的位置。
接着,拆卸收容有红血球的离心分离管200,使包含有白细胞层的血浆残存在第一注射器100(S32)中。进行一次离心分离后,红血球处于收容于离心分离管200中的状态,将该离心分离管200从第一注射器100进行拆卸。因此,第一注射器100中处于采集有包含白细胞层的血浆的状态。
接着,在第一注射器100上安装帽300,进行二次离心分离(S33)。进行一次离心分离后,在第一注射器100的第一排出部104上安装帽300,对第一注射器100和帽300进行离心分离。由此,从收容于第一注射器100中的包含有白细胞层的血浆分离微量的红血球。进行二次离心分离后,在帽300中收容有少量的红血球,将该帽300从第一注射器100进行拆卸。
接着,拆卸收容有红血球的帽300(S34)。进行二次离心分离后,红血球处于收容于帽300的状态,将该帽300从第一注射器100分离。因此,第一注射器100中处于采集有完全已除去红血球的深黄色的浓缩血浆的状态。
接着,在形成于薄膜过滤器120的一对入口部122上分别安装第一注射器100和第二注射器110(S35)。此时,在薄膜过滤器120的一侧入口部122上安装第一注射器100的第一排出部104,在薄膜过滤器120的另一侧入口部122上安装第二注射器110的第二排出部114。
接着,施加压力将第一注射器100内的浓缩血浆注入到薄膜过滤器120中,使其向第二注射器110流动(S36)。在此,流入到薄膜过滤器120的浓缩血浆将经过薄膜124的中空部分进行流动。此时,从浓缩血浆分离包含有水、尿酸、钾以及磷酸盐等的一定粒径以下的成分和包含有蛋白质和血清蛋白等的超过一定粒径的成分。
即,一定粒径以下的成分在被收集到第一空间125后通过出口部123向外部排出,一定粒径以上的成分则残存在浓缩血浆,向第二注射器110流动。
接着,将收容于第二注射器110的浓缩血浆重新注入到薄膜过滤器120中,使其向第一注射器100流动(S37)。当然,在此过程中,也反复与先前步骤(S15)相同的作用。在此,薄膜124的网眼设为40000~60000道尔顿,通过这个大小的网眼使66000道尔顿的分子大小的血清蛋白残存在血浆中。
接着,反复实施步骤(S36)和步骤(S37)(S38)。直到被收集到第一空间125而通过出口部123向外部排出的一定粒径以下的成分的排出量全部排出为止,反复实施。这样,从以使交替地收容于第一注射器100和第二注射器110的方式流动的血浆分离水或包含水的一定粒径以下的成分,而变为高浓缩血浆。
最后,单独采集未能通过薄膜124而残存在薄膜124的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆(S27)。此时,对第一注射器100进行充分加压,使超过一定粒径的成分完全收容于第二注射器110中。当然,也可以加压第二注射器110,在第一注射器100中收容超过一定粒径的成分。
通过这样的过程得到的高浓缩血浆在浓度和成分方面与现有的通过离心分离和过滤得到的相比,能够采集到更高纯度的更多的量。此外,在方法1和方法2中通过实施一次离心分离,使血浆内处于残存有少量的红血球的状态,但是,在方法3中通过实施两次次离心分离,以使血浆内处于红血球完全被分离的状态,能采集呈深黄色的浓缩血浆。
薄膜过滤器的变形例参照附图对本发明的薄膜过滤器的变形例进行详细地说明。
图9是简略地图示了图3所示的薄膜过滤器的变形例的侧剖面图。以下,对于实现如图3所示的薄膜过滤器中记载的相同的功能的相同的构成要素标注相同的附图标记,以表示为相同的构件。此外,在说明变形例时,对于与如图3的薄膜过滤器相同的构成要素,当需要对其进行说明时将简略地提及,重点对不同的结构进行说明。
图9的薄膜过滤器120'的组成包括机体121'、入口部122、出口部123、第二空间126、薄膜124'以及收集部127。该薄膜过滤器120'是与图3的薄膜过滤器起到相同的功能的相同的构件,只不过是对其结构进行变形的例子。
首先,机体121'大概呈四边形,在其上部形成有入口部122,在其下部形成有出口部123,在其内部下侧内置有薄膜124',在其内部上侧形成有第二空间126,形成有使第二空间126与外部相通的收集部127。
此外,入口部122在机体121'的上部形成有一个或多个,优选地,在机体121'的上部一侧从其向上形成有一个。在该入口部122安装有第一注射器100的第一排出部104。
此外,出口部123在机体121'的下部形成有一个或多个,优选在机体121'的下部的另一侧从其向下形成有一个。此时,出口部123的位置最好与入口部122的位置对称。通过薄膜124'的一定粒径以下的成分将通过该出口部123向外部排出。
在此,薄膜过滤器120的下侧内表面朝向出口部123向下倾斜地形成,以使已通过薄膜124'的成分容易向出口部123流动。此外,也可以在该出口部123安装有用于收容一定粒径以下的成分的另外的注射器。
此外,第二空间126是通过入口部122而流入的血浆临时储存的地方,为了通过加在第一注射器100的压力和重力使临时储存在该第二空间126的血浆顺利地通过薄膜124',其以确保血浆与薄膜124'的最大接触面积的方式形成。
该第二空间126只使血浆的成分中的一定粒径以下的水或包含有水、尿酸、钾以及磷酸盐的成分通过该薄膜124',使除此以外的超过一定粒径的包含有蛋白质和血清蛋白等浓缩血浆残存于其中。
此外,薄膜124'内置于薄膜过滤器120的内部下侧。该薄膜124'是起到与图3的薄膜124相同的功能的相同的构件,只是其形态不同而已。即,薄膜124'是用于分离一定粒径以下的成分和超过一定粒径的成分而从血浆筛出浓缩血浆的构件。
而且,收集部127形成为使其与第二空间126相通,外部侧的端部由另外的开闭构件128选择性地进行开闭。该收集部127形成为使收容于第二空间126的血浆的成分中的未能通过薄膜124'而残存在第二空间126内且超过一定粒径的包含蛋白质和血清蛋白等的成分的浓缩血浆向外部排出。
当然,在第二空间126收容有血浆的状态下,收集部127由开闭构件128进行封闭,在第二空间126内只残存有浓缩血浆的状态下,收集部127由开闭构件128进行开放,使浓缩血浆向外部排出。
方法4
参照附图,详细地说明利用本发明的薄膜过滤器的变形例从全血提取高浓缩血浆的方法。
图10是简略地图示了利用图9的装置提取高浓缩血浆的流程图。
首先,在第一注射器100中采集全血(S40)。
接着,在第一注射器100上安装离心分离管200,进行离心分离(S41)。在第一注射器100的第一排出部104上安装离心分离管200,对第一注射器100和离心分离管200进行离心分离。由此,全血被区分为包含有红血球、白细胞层的血小板浓缩血浆和贫血小板血浆的层。
此时,红血球收容于离心分离管200中。在此,考虑从全血区分的红血球的量来形成离心分离管200的内部收容空间。即,红血球收容于离心分离管200中,白细胞层位于第一注射器100的第一排出部104的位置。
接着,拆卸收容有红血球的离心分离管200,使包含有白细胞层的血浆残存在第一注射器100(S42)中。进行离心分离后,红血球处于收容于离心分离管200的状态,将该离心分离管200从第一注射器100进行分离即可。因此,第一注射器100中处于采集有包含白细胞层的血浆的状态。
接着,在形成于薄膜过滤器120'的入口部122上安装第一注射器100(S43)。此时,在薄膜过滤器120'的一侧入口部122上安装第一注射器100的第一排出部104。
接着,施加压力将第一注射器100内的包含有白细胞层的血浆注入到薄膜过滤器120'中(S44)。在此,在流入到薄膜过滤器120'的血浆中,使一定粒径以下的水或包含有水、尿酸、钾以及磷酸盐等的成分通过薄膜124',使包含有蛋白质和血清蛋白等的超过一定粒径的成分残存在第二空间126内。在此,优选地,薄膜124具有使比分子量为66000道尔顿小的40000~60000道尔顿分子量的血清蛋白残留的网眼。
最后,单独采集未能通过薄膜124'而残存在薄膜124'的内部的超过一定粒径的成分的高浓缩血浆(S45)。为了采集第二空间126的高浓缩血浆,将第一注射器100从薄膜过滤器120'拆卸之后,使薄膜过滤器120'向一方向倾斜,通过入口部122或收集部127采集到另外的构件。此时,采集高浓缩血浆的另外的构件可以是第一注射器100或另外的注射器。
通过这样的过程得到的高浓缩血浆在浓度和成分方面与现有的通过离心分离和过滤得到的相比,能够采集到更高纯度的更多的量。
通过如上所述的说明,本领域技术人员不难理解本发明在不变更其技术思想或必要特征的情况下可以以其它具体的方式实施。因此,应理解为,上述的实施方式在所有方面都只是例示性的,而不是限定性的。相比详细的说明,本发明的范围更由后述的权利要求书所示出,从权利要求书的意思和范围以及等价概念所导出的所有的变更或变形的方式都应解释为包含在本发明的范围之中。
Claims (12)
1.一种从全血提取高浓缩血浆的装置,其特征在于,该装置包括:
第一注射器(100);
离心分离管(200),该离心分离管(200)安装在所述第一注射器(100)上,以对收容于所述第一注射器(100)的全血进行离心分离;
帽(300),该帽(300)安装在所述第一注射器(100)上,以对通过所述离心分离采集到所述第一注射器(100)的血浆进行再次离心分离;以及
薄膜过滤器(120),该薄膜过滤器(120)包括:机体(121),该机体(121)呈圆筒状,在该机体(121)的两侧具有一对入口部(122),以分别安装所述第一注射器(100)和第二注射器(110);内置于所述机体(121)的中空的薄膜(124);以及第一空间,该第一空间(125)形成在所述机体(121)和薄膜(124)之间,以收集通过薄膜(124)的成分,
经过离心分离或再次离心分离的所述血浆向第一注射器(100)和第二注射器(110)进行一次或多次往复流动,将收容于所述血浆内的水或包含水的一定粒径以下的成分通过薄膜(124)排出,从而提取高浓缩血浆。
2.根据权利要求1所述的从全血提取高浓缩血浆的装置,其特征在于,
所述薄膜过滤器(120)还包括:
塞子(121a),该塞子(121a)安装为封闭所述机体(121)的开放的两端部,并形成为使从一面突出的固定卡口(121b)固定所述薄膜(124);以及
出口部(123),该出口部(123)形成在所述机体(121)上,以使所述第一空间(125)与外部相通,
通过所述入口部(122)向所述第一注射器(100)和第二注射器(110)流动的血浆经过所述塞子(121a)而通过薄膜(124)。
3.根据权利要求1所述的从全血提取高浓缩血浆的装置,其特征在于,
在所述离心分离管(200)中形成有:第一弯曲面(220),该第一弯曲面(220)形成在所述离心分离管(200)内部的上侧内表面,以增大收容红血球的空间的体积而使收容量上升,并在离心分离中使收容空间内的空气排出;第一间隙(210),该第一间隙(210)形成在所述离心分离管(200)与所述第一排出部(104)的安装位置,以防止收容于所述离心分离管(200)的红血球由表面张力而凝聚向外部流出,
在所述帽(300)中形成有:第二弯曲面(320),该第二弯曲面(320)形成在所述帽(300)内部的上侧内表面,以增大收容红血球的空间的体积而使收容量上升,并在离心分离中使收容空间内的空气排出:第二间隙(310),该第二间隙(310)形成在所述帽(300)与所述第一排出部(104)的安装位置,以防止收容于所述离心分离管(200)的红血球由表面张力而凝聚向外部流出。
4.根据权利要求1所述的从全血提取高浓缩血浆的装置,其特征在于,
所述薄膜过滤器(120)具有能使40000~60000道尔顿大小分子量的物质残留的网眼,以使血清蛋白等有用的蛋白质残存于血浆。
5.根据权利要求1所述的从全血提取高浓缩血浆的装置,其特征在于,
所述全血收容于第一注射器(100)、试管、具有分离凝胶体的试管或PRP设备进行离心分离。
6.一种从全血提取高浓缩血浆的方法,利用权利要求1的装置从全血提取高浓缩血浆,其特征在于,该方法包括:
第10步骤(S10),在第一注射器(100)中采集全血;
第11步骤(S11),在所述第一注射器(100)上安装离心分离管(200)进行离心分离;
第12步骤(S12),对通过所述离心分离收容有红血球的离心分离管(200)进行拆卸;
第13步骤(S13),抽掉残存在所述第一注射器(100)中的白细胞层,使所述第一注射器(100)中只残存有血浆;
第14步骤(S14),在形成于薄膜过滤器(120)的一对入口部(122)上分别安装所述第一注射器(100)和第二注射器(110);
第15步骤(S15),施加压力将所述第一注射器(100)内的血浆注入到薄膜过滤器(120)中,使其向第二注射器(110)流动;
第16步骤(S16),将收容于所述第二注射器(110)的血浆重新注入到薄膜过滤器(120)中,使其向所述第一注射器(100)流动;
第17步骤(S17),反复进行所述第15步骤(S15)和第16步骤(S16);以及
第18步骤(S18),单独采集包含有未能通过内置于所述薄膜过滤器(120)的薄膜(124)而残存在所述薄膜(124)的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆。
7.一种从全血提取高浓缩血浆的方法,利用权利要求1的装置从全血提取高浓缩血浆,其特征在于,该方法包括:
第20步骤(S20),在第一注射器(100)中采集全血;
第21步骤(S21),在所述第一注射器(100)上安装离心分离管(200),进行离心分离;
第22步骤(S22),对通过所述离心分离而收容有红血球的离心分离管(200)进行拆卸,使包含有白细胞层的血浆残存在所述第一注射器(100)中;
第23步骤(S23),在形成于薄膜过滤器(120)的一对入口部(122)上分别安装所述第一注射器(100)和第二注射器(110);
第24步骤(S24),施加压力将所述第一注射器(100)内的包含有白细胞层的血浆注入到薄膜过滤器(120)中,使其向第二注射器(110)流动;
第25步骤(S25),将收容于所述第二注射器(110)的包含有白细胞层的血浆重新注入到薄膜过滤器(120)中,使其向所述第一注射器(100)流动;
第26步骤(S26),反复进行所述第24步骤(S24)和第25步骤(S25);以及
第27步骤(S27),单独采集包含有未能通过内置于所述薄膜过滤器(120)的薄膜(124)而残存在所述薄膜(124)的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆。
8.一种从全血提取高浓缩血浆的方法,利用权利要求1的装置从全血提取高浓缩血浆,其特征在于,该方法包括:
第30步骤(S30),在第一注射器(100)中采集全血;
第31步骤(S31),在所述第一注射器(100)上安装离心分离管(200),进行离心分离;
第32步骤(S32),对通过所述离心分离而收容有红血球的离心分离管(200)进行拆卸,使包含有白细胞层的血浆残存在所述第一注射器(100)中;
第33步骤(S33),在所述第一注射器(100)上安装帽(300),进行再次离心分离;
第34步骤(S34),对通过所述再次离心分离而收容有红血球的帽(300)进行拆卸;
第35步骤(S35),在形成于薄膜过滤器(120)的一对入口部(122)上分别安装所述第一注射器(100)和第二注射器(110);
第36步骤(S36),施加压力将所述第一注射器(100)内的浓缩血浆注入到薄膜过滤器(120)中,使其向第二注射器(110)流动;
第37步骤(S37),将收容于所述第二注射器(110)的浓缩血浆重新注入到薄膜过滤器(120)中,使其向所述第一注射器(100)流动;
第38步骤(S38),反复进行所述第36步骤(S36)和第37步骤(S37);以及
第39步骤(S39),单独采集包含有未能通过内置于所述薄膜过滤器(120)的薄膜(124)而残存在所述薄膜(124)的内部的中空空间且超过一定粒径的成分的高浓缩血浆。
9.一种从全血提取高浓缩血浆的装置,其特征在于,包括:
第一注射器(100);
离心分离管(200),该离心分离管(200)安装在所述第一注射器(100)上,以对收容于所述第一注射器(100)的全血进行离心分离;以及
薄膜过滤器(120'),该薄膜过滤器(120')包括:机体(121'),该机体(121')形成有入口部(122),以安装所述第一注射器(100);内置在所述机体(121')的内部的一部分空间内的薄膜(124');形成在残余空间内的第二空间(126),
在流入到所述第二空间(126)内的血浆中,收容在所述血浆内的水或包含水的一定粒径以下的成分将通过所述薄膜(124')排出,包含有未能通过所述薄膜(124')的一定粒径以上的成分的高浓缩血浆将残存在第二空间(126)内。
10.根据权利要求9所述的从贫血小板血浆提取高浓缩血浆的装置,其特征在于,
所述薄膜过滤器(120')还包括:
出口部(123),该出口部(123)形成在机体(121')的下部,以相对于形成在机体(121')的上部的入口部(122);
收集部(127),该收集部(127)形成为使第二空间(126)与外部相通,以使残存在形成于所述机体(121')的内部上侧的第二空间(126)的成分从外部采集;以及
开闭构件(128),该开闭构件(128)用于使所述收集部(127)的外侧端部进行开闭。
11.一种从全血提取高浓缩血浆的方法,利用权利要求9的装置从全血提取浓缩血浆,其特征在于,该方法包括:
第40步骤(S40),在第一注射器(100)中采集全血;
第41步骤(S41),在所述第一注射器(100)上安装离心分离管(200),进行离心分离;
第42步骤(S42),对通过所述离心分离而收容有红血球的离心分离管(200)进行拆卸,使包含有白细胞层的血浆残存在所述第一注射器(100)中;
第43步骤(S43),在形成于薄膜过滤器(120')的入口部(122)上安装所述第一注射器(100);
第44步骤(S44),施加压力将所述第一注射器(100)内的包含有白细胞层的血浆注入到薄膜过滤器(120')中;以及
第45步骤(S45),单独采集包含有未能通过内置于所述薄膜过滤器(120')的薄膜(124')而残存在第二空间(126)且有一定粒径以上的成分的高浓缩血浆。
12.根据权利要求11所述的从全血提取高浓缩血浆的方法,其特征在于,
在所述第45步骤(S45)中,残存在所述第二空间(126)的高浓缩血浆通过所述入口部(122)或形成在薄膜过滤器(120)使所述第二空间(126)与外部相通的收集部(127)向外部排出而进行采集。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
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CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170815 Termination date: 20181226 |