CN104479027A - 一种防治老年痴呆的药物 - Google Patents
一种防治老年痴呆的药物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104479027A CN104479027A CN201410668134.0A CN201410668134A CN104479027A CN 104479027 A CN104479027 A CN 104479027A CN 201410668134 A CN201410668134 A CN 201410668134A CN 104479027 A CN104479027 A CN 104479027A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ptpn1
- tat
- sip
- senile dementia
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 40
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 40
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 38
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 abstract description 21
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 abstract description 21
- 102100027831 14-3-3 protein theta Human genes 0.000 abstract description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 15
- 101001087394 Homo sapiens Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 1 Proteins 0.000 abstract description 7
- 102100033001 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type 1 Human genes 0.000 abstract description 7
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 7
- 108091056924 miR-124 stem-loop Proteins 0.000 abstract description 5
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 abstract description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 4
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 abstract description 3
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 abstract 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 abstract 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 abstract 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 abstract 1
- 208000020358 Learning disease Diseases 0.000 abstract 1
- 108010015847 Non-Receptor Type 1 Protein Tyrosine Phosphatase Proteins 0.000 abstract 1
- 102000002072 Non-Receptor Type 1 Protein Tyrosine Phosphatase Human genes 0.000 abstract 1
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 abstract 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 abstract 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 abstract 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 abstract 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract 1
- 201000003723 learning disability Diseases 0.000 abstract 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 abstract 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 abstract 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 43
- 230000036749 excitatory postsynaptic potential Effects 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 18
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 17
- 210000003520 dendritic spine Anatomy 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 description 12
- 102000013498 tau Proteins Human genes 0.000 description 11
- 108010026424 tau Proteins Proteins 0.000 description 11
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 10
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 10
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 9
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000012549 training Methods 0.000 description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 6
- 206010036631 Presenile dementia Diseases 0.000 description 6
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 6
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 6
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 5
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 5
- 230000006933 amyloid-beta aggregation Effects 0.000 description 5
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 5
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 102100040243 Microtubule-associated protein tau Human genes 0.000 description 4
- 101710115937 Microtubule-associated protein tau Proteins 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 4
- 230000007087 memory ability Effects 0.000 description 4
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 230000009465 prokaryotic expression Effects 0.000 description 3
- 230000003976 synaptic dysfunction Effects 0.000 description 3
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 3
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 2
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 2
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 2
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000054727 Serum Amyloid A Human genes 0.000 description 2
- 108700028909 Serum Amyloid A Proteins 0.000 description 2
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000002547 anomalous effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 230000007831 electrophysiology Effects 0.000 description 2
- 238000002001 electrophysiology Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 2
- 230000006951 hyperphosphorylation Effects 0.000 description 2
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 2
- 210000002682 neurofibrillary tangle Anatomy 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 2
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 2
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 208000031091 Amnestic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010050012 Bradyphrenia Diseases 0.000 description 1
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 1
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 description 1
- 208000004481 Choline Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 101000746263 Conus leopardus Conotoxin Lp5.1 Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 101000589010 Homo sapiens Myomesin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 1
- 101000589013 Mus musculus Myomesin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100032971 Myomesin-1 Human genes 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 229920005372 Plexiglas® Polymers 0.000 description 1
- 208000033240 Progressive symmetric erythrokeratodermia Diseases 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 230000006986 amnesia Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000739 chaotic effect Effects 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 208000021752 choline deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000009514 concussion Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000004070 electrodeposition Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000006386 memory function Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003982 neuronal uptake Effects 0.000 description 1
- 210000004179 neuropil Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 210000000633 nuclear envelope Anatomy 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000006919 peptide aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- KMUONIBRACKNSN-UHFFFAOYSA-N potassium dichromate Chemical compound [K+].[K+].[O-][Cr](=O)(=O)O[Cr]([O-])(=O)=O KMUONIBRACKNSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 238000011820 transgenic animal model Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical class OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明公开了小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA及其在制备治疗或预防老年痴呆药物中的应用，利用人工合成TAT蛋白转导结构域和siP-PTPN1-HA的融合蛋白多肽TAT-siP-PTPN1-HA，TAT可以携带siP-PTPN1-HA蛋白多肽经血液穿过血脑屏障被神经元摄取，将其运用到在体的老年痴呆模型上，可有效发挥其阻断miR-124与非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶1(protein tyrosine phosphatase,non-receptor type 1,PTPN1)3′-非编码序列(3′-untranslated region,3′-UTR)结合的生物学作用，从而有效逆转PTPN1表达，并改善老年痴呆模型动物表现出的微管相关蛋白tau的过度磷酸化、淀粉样蛋白沉积，以及动物学习、记忆障碍，为进一步开发临床治疗老年痴呆的药物提供了新的方向。
Description
技术领域
本发明涉及医学疾病治疗药物研发领域，具体涉及一种小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA，还涉及小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA在制备治疗或预防老年痴呆药物中的应用。
技术背景
老年性痴呆(Alzheimer Disease,AD)是一种常见的神经退行性疾病，其主要症状表现为记忆力减退，认知能力低下和思维迟钝，且进行性加重，最后生活不能自理而死亡，病程一般8～10年。随着社会老龄化进程的加快，AD的患病人数急剧上升，已成为威胁老龄特别是高龄人口身心健康的严重疾病，并带来了严重的社会、经济和家庭问题。
AD病人主要脑病理改变是形成大量神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)和大量老年斑、其分子标志物分别是异常磷酸化的tau蛋白和β-淀粉样蛋白(Aβ)。国外学者已采用转基因技术，在小鼠成功地复制出β-淀粉样蛋白沉积形成的老年斑样病变，从而使得未来AD治疗将减少Aβ沉积作为药物干预的靶标成为可能。NFTs的数量与AD临床痴呆程度正相关。因此，干预NFTs对AD的防治尤为重要。自从发现NFTs的主要成分是异常、过度磷酸化的Tau蛋白聚集形成的双螺旋丝以来，国内外学者普遍公认，骨架蛋白tau的异常、过度磷酸化是NFTs形成的关键步骤。过度磷酸化tau蛋白的聚集不仅以缠结的形式存在，它也是神经毡纤丝和老年斑中的营养不良突起的主要成分。
目前尚没有针对老年性痴呆病理特征的特效治疗药物和方法，常用的减缓老年痴呆发作药物有：(1)改善胆碱神经传递药物：老年痴呆的一个主要原因是胆碱不足导致记忆衰退。因此乙酰胆碱酯酶(AchE)抑制剂通过增强胆碱能作用在老年痴呆治疗方面发挥了重要作用；(2)改善脑血液循环和脑细胞代谢的药物：此类药物可以扩张脑血管以改善老年痴呆患者的糖、蛋白、核酸、脂质等代谢障碍；(3)钙拮抗剂：此类药物易于通过血脑屏障，选择性扩张脑血管，从而改善记忆和认知功能；(4)激素类药物：主要缓解女性患者的症状。然而，这些药物仅对中晚期老年性痴呆患者的痴呆症状有所轻度改善或延缓痴呆进展。因此研发新的针对老年性痴呆病理学特征的药物，成为全球的期待。
TAT称细胞穿膜多肽(cell penetrating peptides)，是近年来发现的一种高效运输载体。TAT能够穿透细胞膜、细胞核膜，携带多肽、蛋白质以及DNA分子等通过受体转运方式进入胞质和胞核发挥相应的生物效应。目前研究显示HIV-TAT，能够穿过所有组织细胞，且无明显的毒副作用。TAT能将与之相连的多肽在数分钟内带入细胞，而且可以跨越血脑屏障进入神经元内，被带入细胞的多肽则保留了它们原有的生物活性，从而发挥生物学作用。
基于申请人最近的研究与TAT技术，申请人合成了一个由与miR-124竞争性结合到PTPN1的3′-UTR的氨基酸序列组成的膜渗透性小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA，通过运用到在体的老年痴呆转基因动物模型上，有效发挥其阻断miR-124与PTPN1的3′-UTR结合的生物学作用，促进PTPN1表达，改善老年痴呆模型动物表现出的微管相关蛋白tau的过度磷酸化、淀粉样蛋白沉积，以及动物学习、记忆障碍，为进一步开发临床治疗老年痴呆的药物提供了分子靶点。
发明内容
本发明目的在于提供了一种小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA，其序列为SEQ ID NO.1所示。本发明将TAT穿膜肽(GRKKRRQRRRPRQ)与siP-PTPN1-HA(PYGCRVIQRIGNYVIQHVASNNVEKIGGYVIRHVGGYVIRHVGNYVIQHVGNYVIQHVGCRVIQRILYPYDVPDYA)连接，得到具有生物活性的TAT-siP-PTPN1-HA多肽(SEQ ID NO.1:M GRKKRRQRRRPRQPYGCRVIQRIGNYVIQHVASNNVEKIGGYVIRHVGGYVIRHVGNYVIQHVGNYVIQHVGCRVIQRILYPYDVPDYA)，利用TAT的穿膜功能将siP-PTPN1-HA多肽输送进入血液穿过血脑屏障，并被大脑神经细胞摄取从而发挥其生物学功能。
本发明的目的还在于提供了小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA对应的核苷酸序列，具体为SEQ ID NO.2所示(SEQ ID NO.2:ATGGGTCGTAAGAAGCGTCGTCAGCGTCGTCGTCCTCGTCAGCCTTACGGTTGTCGTGTTATTCAGCGTATTGGTAATTACGTTATCCAGCACGTTGCTTCTAATAACGTTGAGAAAATTGGTGGCTATGTTATCCGCCACGTTGGCGGCTACGTTATTCGTCACGTGGGCAATTACGTGATCCAGCATGTTGGTAATTATGTGATTCAACATGTGGGCTGCCGTGTGATTCAGCGTATTCTTTACCCATACGATGTTCCAGATTACGCATGA)，但不局限于该序列，所有编码TAT-siP-PTPN1-HA多肽的核苷酸序列都为本发明的保护范围。
本发明的另一个目的在于提供了一种小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA在制备治疗或预防老年痴呆药物中的应用，将其静脉注射，发现其可有效改善老年痴呆模型动物表现出的微管相关蛋白tau的过度磷酸化、淀粉样蛋白沉积，以及动物学习、记忆障碍，为进一步开发临床治疗老年痴呆的药物提供了分子靶点。
为了实现上述目的，本发明采用的技术措施是：申请人发现，老年痴呆模型动物中miR-124和PTPN1的3′-UTR相互结合，并介导下游微管相关蛋白tau的过度磷酸化、淀粉样蛋白沉积，以及动物学习、记忆障碍。阻断miR-124和PTPN1的3′-UTR相互结合，能有效改善上述症状。针对这一发现，申请人将TAT穿膜肽(GRKKRRQRRRPRQ)与siP-PTPN1-HA(PYGCRVIQRIGNYVIQHVASNNVEKIGGYVIRHVGGYVIRHVGNYVIQHVGNYVIQHVGCRVIQRILYPYDVPDYA)连接，得到具有生物活性的TAT-siP-PTPN1-HA多肽，通过在体静脉注射方式，使TAT-siP-PTPN1-HA多肽进入血液穿过血脑屏障并被大脑神经细胞摄取发挥其生物学功能。
小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA，其序列如下：
MGRKKRRQRRRPRQPYGCRVIQRIGNYVIQHVASNNVEKIGGYVIRHVGGYVIRHVGNYVIQHVGNYVIQHVGCRVIQRILYPYDVPDYA。
TAT-siP-PTPN1-HA的对照为TAT-scramble-HA，其序列为：
MGRKKRRQRRRPRQLIRQIVRCGVHQIVYNGVHQIVYNGVHRIVYGGVHRIVYGGIKEVNNSAVHQIVYNGIRQIVRCGYPYPYDVPDYA。
TAT-siP-PTPN1-HA多肽和对照TAT-scramble-HA由申请人通过原核表达、收集、纯化得到。
小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA在制备治疗或预防老年痴呆药物的应用，其应用过程如下：
TAT-siP-PTPN1-HA在老年痴呆动物模型的应用
Tg2576转基因鼠是公认的老年痴呆动物模型。通过免疫印迹检测tau蛋白磷酸化变化，ELISA检测Aβ含量，水迷宫实验、长时程增强、高尔基染色检测转基因小鼠的学习记忆能力。对12月龄Tg2576转基因小鼠小鼠尾静脉单次注射10mg/kg的TAT-siP-PTPN1-HA溶液，1周后，动物进行水迷宫实验，或者处死，取出脑组织。结果显示其可有效改善老年痴呆模型动物Tg2576小鼠表现出的微管相关蛋白tau的过度磷酸化、淀粉样蛋白沉积，以及动物学习、记忆障碍。进一步证明，TAT-siP-PTPN1-HA对老年痴呆模型具有确切的治疗作用。
与现有技术相比，本发明具有以下特点：(1)本发明所涉及的小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA容易诱导表达纯度，完全可溶，适合静脉注射，无毒副作用。(2)本发明公开的TAT-siP-PTPN1-HA多肽，TAT可以携带siP-PTPN1-HA蛋白多肽经血液穿过血脑屏障被神经元摄取，可以转化应用于神经系统疾病如老年痴呆，使其具有实际操作的可行性。
实验材料：
本发明通过给12月龄Tg2576小鼠注射TAT-siP-PTPN1-HA多肽，发现其可以改善老年痴呆模型动物的老年斑、tau蛋白过度磷酸化与学习、记忆障碍。
具体操作步骤如下：
1.实验对象
雄性Tg2576小鼠(购买自Jax实验室)，SPF级，体重25～32克，20只，常规环境饲养。实验分组：①对照组(野生型对照小鼠)；②模型组(注射TAT-scramble-HA)；③治疗组(注射TAT-siP-PTPN1-HA)；每组10只。
2.实验模型制备
①正常组：12月龄野生型对照小鼠，不处理
②模型组：12月龄Tg2576小鼠，通过尾静脉单次注射给予TAT-scramble-HA多肽，剂量为10mg/kg。
③治疗组：12月龄Tg2576小鼠，通过尾静脉单次注射给予TAT-siP-PTPN1-HA多肽，剂量为10mg/kg。
3.研究方法
①多肽诱导表达：采用原核表达载体，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，考马斯亮蓝染色鉴定。
②表达鉴定：通过免疫印迹检测HA表达。
③小鼠学习记忆的能力：Morris水迷宫训练及测试；
④海马tau蛋白磷酸化：免疫印迹；
⑤海马Aβ含量：酶联免疫吸附法
⑥海马突触形态：高尔基染色
⑦小鼠电生理：长时程增强电生理记录
4.实验结果
*P<0.05，与正常组比较
**P<0.01，与正常组比较
#P<0.05，与模型组比较
##P<0.01，与模型组比较
(1)考马斯亮蓝染色验证表达：见图1。没有加入IPTG药物诱导，以及加入IPTG诱导0.5,1小时均没有明显表达；当诱导2小时后，在目的分子量出现大量蛋白。
(2)免疫印迹染色验证表达：见图2。通过识别HA的特异性抗体染色，检测到TAT-siP-PTPN1-HA的表达。
(3)Morris水迷宫训练及测试结果：见图3。模型组与正常组相比出现明显学习记忆障碍，统计结果表明水迷宫测试的潜伏期明显延长，学习的时间延长。模型组在目标象限停留时间和距离以及穿越平台的次数明显减少，说明记忆能力的减退，模型模拟老年痴呆症状。治疗组与模型组相比潜伏期时间变短，目标象限停留次数和穿越平台次数增加，其学习和记忆能力都得到了良好的改善。
(4)Tau磷酸化免疫印迹结果：见图4。与正常组相比较，模型组的海马内tau蛋白在丝氨酸396，丝氨酸404位点,磷酸化水平明显增高，TAT-siP-PTPN1-HA处理后，tau磷酸化水平明显下降。
(5)酶联免疫法检测小鼠海马Aβ含量：见图5。酶联免疫吸附法(ELISA)检测发现，与正常组相比较，模型组海马内Aβ含量升高，TAT-siP-PTPN1-HA处理后，Aβ含量明显下降。
(6)高尔基染色结果：见图6。与正常组比较，模型组的海马内树突棘密度明显减少，代表具有功能性的蘑菇状树突棘含量降低，说明模型组出现突触形态异常变化。治疗组与模型组相比树突棘密度增加，蘑菇状树突棘含量增加。
(7)电生理记录结果：见图7。与正常组相比较，模型组小鼠的兴奋性突触后电位(EPSP)的幅度和频率都下降，说明模型组出现突触功能障碍。治疗组与模型组相比树突棘密度增加兴奋性突触后电位(EPSP)的斜率明显升高。
5.结论及用法建议：
以上结果显示尾静脉注射TAT-siP-PTPN1-HA的Tg2576小鼠水迷宫训练及检测过程中平台的潜伏期增加，穿越平台次数明显减少说明小鼠的学习和记忆能力损伤，检测早老性痴呆相关指标tau蛋白磷酸化以及Aβ含量后发现，tau蛋白的磷酸化水平显著上升，Aβ含量也有明显升高，这些早老性痴呆的相关特征的改变，说明Tg2576小鼠模拟了老年痴呆症状。
跟模型组相比较，在给与了TAT-siP-PTPN1-HA处理后，检测小鼠水迷宫行为学，其学习和记忆能力得到了有效的改善；同时，早老性痴呆相关指标tau蛋白磷酸化以及Aβ含量和模型组比较也有明显降低，说明TAT-siP-PTPN1-HA能缓减Tg2576小鼠海马区tau的异常过度磷酸化、能减少淀粉样蛋白Aβ沉积并改善动物学习、记忆障碍。TAT-siP-PTPN1-HA能用于老年性痴呆的预防和治疗。
附图说明
所有图中，*P<0.05,**P<0.01与正常组比较；#P<0.05,##P<0.01与模型组比较。正常组，不做任何处理；模型组，Tg2576小鼠给予TAT-scramble-HA；治疗组：Tg2576小鼠给予TAT-siP-PTPN1-HA。单次尾静脉注射，剂量为10mg/kg。
图1为一种小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA的考马斯亮蓝染色图。
多肽的核苷酸序列由武汉擎科公司合成，通过分子生物学技术，将其构建到元和表达载体pGEX-5X-1中，在BL21感受态(北京全式金公司)中进行转化，扩增。当菌液OD600达到0.6时，加入2mM的IPTG分别诱导0.5,1,2小时，最后通过SDS-PAGE电泳，并采用考马斯亮蓝染色观察蛋白表达。结果发现，当诱导2小时后，在目的大小位置出现大量富集蛋白。图中1,2,3,4分别表示没有加入IPTG诱导，诱导0.5,1,2小时。箭头所指为目的大小分子量。
图2为一种小分子多肽TAT-siP-PTPN1-HA的免疫印迹染色图。
多肽经诱导表达后，进行纯化，并采用Factor Xa进行剪切，分离出目的小分子多肽(约8kDa)。纯化后蛋白样品，采用免疫印迹实验，通过HA特异性抗体检测表达情况。结果证实表达成功。
图3为TAT-siP-PTPN1-HA改善Tg2576小鼠学习记忆的水迷宫结果统计图。
实验所采用Morris水迷宫测试系统包括圆形水池直径120cm，高60cm；圆柱形有机玻璃平台直径10cm，高40cm。水池中水面高约45cm，室温及水温均保持在26±2℃，平台放置于某一象限的中心位置，并没于水面下约2cm。训练时将小鼠从任一象限1/2弧度处头面向池壁轻放于水中，检测其潜伏期(即小鼠从入水点起到找到平台所用的时间)、路径作为衡量小鼠学习记忆和测试成绩的指标。每只小鼠每天在4个象限共训练4次，每次游泳时限为60s,即在60s内未找到平台者系统自动停止记录，潜伏期记为60s，由测试者引导其上台，休息30s后进行下一次训练。首先训练时间为6天，在第7天的时候，记录小鼠找到平台期所需时间，记录小鼠找到平台所需潜伏期。休息一天，去平台，计算1分钟内小鼠在目标象限的停留时间并分析其在平台所在位置的穿越次数，以评价其记忆能力。
结果显示跟正常组相比模型组小鼠游泳轨迹混乱，找到平台所需潜伏期时间最长,说明小鼠学习能力受到损伤，在给予TAT-siP-PTPN1-HA后，治疗组小鼠跟模型组相比轨迹重新恢复简单，潜伏期变短；模型组小鼠穿越平台的时间和距离最短，次数最少，说明模型组老鼠的记忆能力受到损害，不记得平台的位置；治疗组小鼠跟模型组相比穿越平台的时间和距离恢复到正常一致，穿越平台次数也相应增加，其记忆能力在给予TAT-siP-PTPN1-HA后得到明显恢复。
图4为TAT-siP-PTPN1-HA改善Tg2576小鼠tau蛋白磷酸化结果统计图。
水迷宫训练完成后，颈椎脱臼断头处死小鼠，迅速取出大脑脑组织置于0-4℃0.05M Tris缓冲盐溶液(TB，pH7.0)内，快速分离双侧海马，制成10﹪的蛋白匀浆，在1000rmp离心5分钟，取上清，测定蛋白含量后备用。
分别检测tau蛋白不同位点的磷酸化水平，包括pS396，pS404。β-actin为内参条带，证明蛋白上样量的一致性。通过与总tau tau5比较，模型组磷酸化位点磷酸化水平明显增加，tau发生过度磷酸化；治疗组给TAT-siP-PTPN1-HA后，tau的过度磷酸化得到改善。
图5为TAT-siP-PTPN1-HA改善Tg2576小鼠Aβ沉积结果统计图。
样品制备同免疫印迹，用Aβ42的抗体进行包被后漂洗，加入样品，用四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)显色，并在分光光度计上波长450nm读数。
阿尔茨海默病病人的另一病理学特征是脑内Aβ聚集，Aβ的产生是由于淡粉样蛋白前体蛋白(APP)的剪切错误导致的，可以产生两种剪切片段Aβ40和Aβ42。其中，Aβ42具有较高的毒性作用。实验结果显示，模型组老鼠中Aβ42片段的释放明显增多，TAT-siP-PTPN1-HA治疗后，治疗组Aβ42回到正常组水平，进一步证明TAT-siP-PTPN1-HA能够改善阿尔茨海默病模型小鼠出现的病理特征。
图6为TAT-siP-PTPN1-HA改善Tg2576小鼠学习记忆的高尔基染色结果统计图。
水迷宫训练完成后，进行麻醉处理，并依次采用4％甲醛生理盐水、含重铬酸钾媒染液、1％硝酸银溶液灌流，经震荡切片机进行切片，采用梯度酒精脱水，二甲苯透明处理后，中性树胶封片，显微镜下观察树突棘形态。模型组小鼠的大脑海马内树突棘数量减少，蘑菇状树突棘比例下降，治疗组增加了树突棘密度和蘑菇状树突棘含量。
图7为TAT-siP-PTPN1-HA改善Tg2576小鼠学习记忆的长时程增强结果统计图。
小鼠麻醉后固定于立体定位仪上，施行局部开颅术，将刺激电极和记录电极分别放在海马CA3和CA1区域。刺激CA3区诱发场电位。选择合适的刺激和记录电极位置。绘制I/O曲线，选择诱发fEPSP幅度最大值的40％当作刺激强度，使用一串高频刺激(100Hz,1s)刺激CA3区Schaeffer collateral-commissural fibers诱导CA1区长时程增强(LTP)，记录120分钟。
与正常组相比较，模型组小鼠的兴奋性突触后电位(EPSP)的幅度和频率都下降，说明模型组出现突触功能障碍。治疗组与模型组相比树突棘密度增加兴奋性突触后电位(EPSP)的幅度和频率都明显升高。
具体实施方式
实验材料：
本发明通过给12月龄Tg2576小鼠注射TAT-siP-PTPN1-HA多肽，发现其可以改善老年痴呆模型动物的老年斑、tau蛋白过度磷酸化与学习、记忆障碍。
具体操作步骤如下：
1.实验对象：雄性Tg2576小鼠(购买自Jax实验室)，SPF级，体重25～32克，20只，常规环境饲养。实验分组：①对照组(野生型对照小鼠)；②模型组(注射TAT-scramble-HA)；③治疗组(注射TAT-siP-PTPN1-HA)；每组10只。
2.实验模型制备：
①正常组：12月龄野生型对照小鼠，不处理
②模型组：12月龄Tg2576小鼠，通过尾静脉单次注射给予TAT-scramble-HA多肽，剂量为10mg/kg。
③治疗组：12月龄Tg2576小鼠，通过尾静脉单次注射给予TAT-siP-PTPN1-HA多肽，剂量为10mg/kg。
3.研究方法：
①多肽诱导表达：采用原核表达载体，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，考马斯亮蓝染色鉴定。
②表达鉴定：通过免疫印迹检测HA表达。
③小鼠学习记忆的能力：Morris水迷宫训练及测试；
④海马tau蛋白磷酸化：免疫印迹；
⑤海马Aβ含量：酶联免疫吸附法
⑥海马突触形态：高尔基染色
⑦小鼠电生理：长时程增强电生理记录
4.实验结果：
*P<0.05，与正常组比较
**P<0.01，与正常组比较
#P<0.05，与模型组比较
##P<0.01，与模型组比较
(1)考马斯亮蓝染色验证表达：见图1。没有加入IPTG药物诱导，以及加入IPTG诱导0.5,1小时均没有明显表达；当诱导2小时后，在目的分子量出现大量蛋白。
(2)免疫印迹染色验证表达：见图2。通过识别HA的特异性抗体染色，检测到TAT-siP-PTPN1-HA的表达。
(3)Morris水迷宫训练及测试结果：见图3。模型组与正常组相比出现明显学习记忆障碍，统计结果表明水迷宫测试的潜伏期明显延长，学习的时间延长。模型组在目标象限停留时间和距离以及穿越平台的次数明显减少，说明记忆能力的减退，模型模拟老年痴呆症状。治疗组与模型组相比潜伏期时间变短，目标象限停留次数和穿越平台次数增加，其学习和记忆能力都得到了良好的改善。
(4)Tau磷酸化免疫印迹结果：见图4。与正常组相比较，模型组的海马内tau蛋白在丝氨酸396，丝氨酸404位点,磷酸化水平明显增高，TAT-siP-PTPN1-HA处理后，tau磷酸化水平明显下降。
(5)酶联免疫法检测小鼠海马Aβ含量：见图5。酶联免疫吸附法(ELISA)检测发现，与正常组相比较，模型组海马内Aβ含量升高，TAT-siP-PTPN1-HA处理后，Aβ含量明显下降。
(6)高尔基染色结果：见图6。与正常组比较，模型组的海马内树突棘密度明显减少，代表具有功能性的蘑菇状树突棘含量降低，说明模型组出现突触形态异常变化。治疗组与模型组相比树突棘密度增加，蘑菇状树突棘含量增加。
(7)电生理记录结果：见图7。与正常组相比较，模型组小鼠的兴奋性突触后电位(EPSP)的幅度和频率都下降，说明模型组出现突触功能障碍。治疗组与模型组相比树突棘密度增加兴奋性突触后电位(EPSP)的斜率明显升高。
5.结论及用法建议：以上结果显示尾静脉注射TAT-siP-PTPN1-HA的Tg2576小鼠水迷宫训练及检测过程中平台的潜伏期增加，穿越平台次数明显减少说明小鼠的学习和记忆能力损伤，检测早老性痴呆相关指标tau蛋白磷酸化以及Aβ含量后发现，tau蛋白的磷酸化水平显著上升，Aβ含量也有明显升高，这些早老性痴呆的相关特征的改变，说明Tg2576小鼠模拟了老年痴呆症状。跟模型组相比较，在给与了TAT-siP-PTPN1-HA处理后，检测小鼠水迷宫行为学，其学习和记忆能力得到了有效的改善；同时，早老性痴呆相关指标tau蛋白磷酸化以及Aβ含量和模型组比较也有明显降低，说明TAT-siP-PTPN1-HA能缓减Tg2576小鼠海马区tau的异常过度磷酸化、能减少淀粉样蛋白Aβ沉积并改善动物学习、记忆障碍。TAT-siP-PTPN1-HA能用于老年性痴呆的预防和治疗。
Claims (4)
1.一种人工合成的小分子多肽，其序列为SEQ ID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述小分子多肽的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的核苷酸序列，其序列为SEQ ID NO.2所示。
4.权利要求1或权利要求2所述的序列在制备治疗或预防老年痴呆药物中的应用。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410668134.0A CN104479027B (zh) | 2014-11-20 | 2014-11-20 | 一种防治老年痴呆的药物 |
| PCT/CN2015/094568 WO2016078546A1 (zh) | 2014-11-20 | 2015-11-13 | 一种防治老年痴呆的药物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410668134.0A CN104479027B (zh) | 2014-11-20 | 2014-11-20 | 一种防治老年痴呆的药物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104479027A true CN104479027A (zh) | 2015-04-01 |
| CN104479027B CN104479027B (zh) | 2017-06-16 |
Family
ID=52753644
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410668134.0A Active CN104479027B (zh) | 2014-11-20 | 2014-11-20 | 一种防治老年痴呆的药物 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104479027B (zh) |
| WO (1) | WO2016078546A1 (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105237628A (zh) * | 2015-11-17 | 2016-01-13 | 南开大学 | 一种用于治疗阿尔兹海默症的多肽 |
| WO2016078546A1 (zh) * | 2014-11-20 | 2016-05-26 | 华中科技大学 | 一种防治老年痴呆的药物 |
| CN109553685A (zh) * | 2017-09-25 | 2019-04-02 | 华中科技大学 | 一种小分子多肽及其在制备防治缺血性脑卒中药物中的应用 |
| CN110003342A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-07-12 | 华中科技大学 | 一种多肽及其在改善低社会等级对机体不良影响中的应用 |
| CN111253492A (zh) * | 2018-11-30 | 2020-06-09 | 华中科技大学 | 一种透脑性多肽及其在制备防治老年痴呆药物中应用 |
| CN112703402A (zh) * | 2018-07-19 | 2021-04-23 | 吉宁特有限公司 | 基于标志物分子将个体鉴定为具有淀粉样蛋白阳性痴呆症或处于发展淀粉样蛋白阳性痴呆症的风险中的方法和相关用途 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090192111A1 (en) * | 2007-12-01 | 2009-07-30 | Asuragen, Inc. | miR-124 Regulated Genes and Pathways as Targets for Therapeutic Intervention |
| CN101974089A (zh) * | 2010-06-11 | 2011-02-16 | 华中科技大学 | 重组Trx-TAT-hMsrA融合蛋白及其在神经细胞保护方面的应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012032519A2 (en) * | 2010-09-07 | 2012-03-15 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Methods of diagnosing parkinson's disease |
| CN104479027B (zh) * | 2014-11-20 | 2017-06-16 | 华中科技大学 | 一种防治老年痴呆的药物 |
-
2014
- 2014-11-20 CN CN201410668134.0A patent/CN104479027B/zh active Active
-
2015
- 2015-11-13 WO PCT/CN2015/094568 patent/WO2016078546A1/zh active Application Filing
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090192111A1 (en) * | 2007-12-01 | 2009-07-30 | Asuragen, Inc. | miR-124 Regulated Genes and Pathways as Targets for Therapeutic Intervention |
| CN101974089A (zh) * | 2010-06-11 | 2011-02-16 | 华中科技大学 | 重组Trx-TAT-hMsrA融合蛋白及其在神经细胞保护方面的应用 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| KAI LIAO等: "《Enriched odor exposure decrease tau phosphorylation in the rat hippocampus and cortex》", 《NEUROSCIENCE LETTERS》 * |
| MARIANA LAGOS-QUINTANA: "《Identification of Tissure-Specific MicroRNAs from Mouse》", 《CURRENT BIOLOGY》 * |
| MICHAEL OLIVIER: "《Human nucleotide polymorphisms in protein tyrosine phosphatase 1β（PTPN1）are associated with essential hypertension and obesity》", 《HUMAN MOLECULAR GENETICS》 * |
| SHLOMIT KOREN: "《Inhibition of the protein tyrosine phosphatase PTPIB: potential therapy for obesity,insulin resistance and type-2 diabetes mellitus》", 《BEST PRACTICE & RESEARCH CLINICAL ENDOCRINOLOGY & METABOLISM》 * |
| XIN-AN LIU等: "《Estradiol Attenuates Tau Hyperphosphorylation Induced by Upregulation of Protein Kinase-A》", 《NEUROCHEMICAL RESEARCH》 * |
| 吴媛媛: "《透脑屏障的模拟脑源性神经营养因子融合多肽的神经保护作用及机制研究》", 《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）医药卫生科技辑》 * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016078546A1 (zh) * | 2014-11-20 | 2016-05-26 | 华中科技大学 | 一种防治老年痴呆的药物 |
| CN105237628A (zh) * | 2015-11-17 | 2016-01-13 | 南开大学 | 一种用于治疗阿尔兹海默症的多肽 |
| CN105237628B (zh) * | 2015-11-17 | 2018-08-07 | 南开大学 | 一种用于治疗阿尔兹海默症的多肽 |
| CN109553685A (zh) * | 2017-09-25 | 2019-04-02 | 华中科技大学 | 一种小分子多肽及其在制备防治缺血性脑卒中药物中的应用 |
| CN109553685B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-07-27 | 华中科技大学 | 一种小分子多肽及其在制备防治缺血性脑卒中药物中的应用 |
| CN112703402A (zh) * | 2018-07-19 | 2021-04-23 | 吉宁特有限公司 | 基于标志物分子将个体鉴定为具有淀粉样蛋白阳性痴呆症或处于发展淀粉样蛋白阳性痴呆症的风险中的方法和相关用途 |
| CN111253492A (zh) * | 2018-11-30 | 2020-06-09 | 华中科技大学 | 一种透脑性多肽及其在制备防治老年痴呆药物中应用 |
| CN111253492B (zh) * | 2018-11-30 | 2021-10-08 | 华中科技大学 | 一种透脑性多肽及其在制备防治老年痴呆药物中应用 |
| CN110003342A (zh) * | 2018-12-29 | 2019-07-12 | 华中科技大学 | 一种多肽及其在改善低社会等级对机体不良影响中的应用 |
| CN110003342B (zh) * | 2018-12-29 | 2020-09-08 | 华中科技大学 | 一种多肽及其在改善低社会等级对机体不良影响中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2016078546A1 (zh) | 2016-05-26 |
| CN104479027B (zh) | 2017-06-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11413308B2 (en) | Dosing regimen for treatment of cognitive and motor impairments with blood plasma and blood plasma products | |
| CN104479027A (zh) | 一种防治老年痴呆的药物 | |
| Zheng et al. | Rhythmic light flicker rescues hippocampal low gamma and protects ischemic neurons by enhancing presynaptic plasticity | |
| Francis et al. | The selective RhoA inhibitor rhosin promotes stress resiliency through enhancing D1-medium spiny neuron plasticity and reducing hyperexcitability | |
| JP7447069B2 (ja) | 加齢性認知障害の処置としての血漿画分 | |
| WO2020018343A1 (en) | Dosing regimen for treatment of cognitive and motor impairments with blood plasma and blood plasma products | |
| Li et al. | Nimodipine improves cognitive impairment after subarachnoid hemorrhage in rats through IncRNA NEAT1/miR-27a/MAPT axis | |
| Liao et al. | 3-N-butylphthalide inhibits neuronal apoptosis in rats with cerebral infarction via targeting P38/MAPK. | |
| Xu et al. | Elevating Integrin-linked Kinase expression has rescued hippocampal neurogenesis and memory deficits in an AD animal model | |
| Pu et al. | Involvement of paired immunoglobulin-like receptor B in diabetes-associated cognitive dysfunction through modulation of axon outgrowth and dendritic remodeling | |
| Zhang et al. | The short-term improvements of enriched environment in behaviors and pathological changes of APP/PS1 mice via regulating cytokines | |
| Hazra et al. | The role of hippocampal CaMKII in resilience to trauma-related psychopathology | |
| Duan et al. | The effect of different frequencies of electroacupuncture on BDNF and NGF expression in the hippocampal CA3 area of the ischemic hemisphere in cerebral ischemic rats | |
| CN104083345A (zh) | 番茄红素在制备防治老年痴呆药物中的应用 | |
| CN101107924A (zh) | 一种复合型早老性痴呆动物模型的构建方法 | |
| CN103948608A (zh) | 一种用于预防和治疗老年性痴呆的药物及制剂 | |
| CN109908300A (zh) | 醒脑静注射液作为改善阿尔茨海默病药物的应用 | |
| WO2023151701A1 (zh) | 一种评估精神疾病和/或神经退行性疾病治疗效果的系统 | |
| CN103816143A (zh) | 一种防治老年痴呆的药物 | |
| Banasadegh et al. | Enhancing brain health: Swimming-induced BDNF release and epigenetic influence in MS female mouse models | |
| NZ758615B2 (en) | Dosing regimen for treatment of cognitive and motor impairments with blood plasma and blood plasma products | |
| CN114699530A (zh) | 一种减轻糖尿病脑病的髓鞘损伤的靶点及应用 | |
| EA042179B1 (ru) | Схема применения плазмы крови и препаратов плазмы крови для лечения когнитивных и двигательных нарушений | |
| Soler | Shedding Light on Hippocampal Function | |
| CN114685680A (zh) | 一种多肽及其在改善老年痴呆学习记忆障碍中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant |