CN104411328A - 组合物 - Google Patents

组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN104411328A
CN104411328A CN201380032533.1A CN201380032533A CN104411328A CN 104411328 A CN104411328 A CN 104411328A CN 201380032533 A CN201380032533 A CN 201380032533A CN 104411328 A CN104411328 A CN 104411328A
Authority
CN
China
Prior art keywords
amino acid
acid residue
aminoacid sequence
mimic epitope
lower group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201380032533.1A
Other languages
English (en)
Inventor
M.曼德勒
W.佐纳
F.马特纳
W.施密特
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Affiris AG
Original Assignee
Affiris AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Affiris AG filed Critical Affiris AG
Publication of CN104411328A publication Critical patent/CN104411328A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0007—Nervous system antigens; Prions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0003—Invertebrate antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/05—Actinobacteria, e.g. Actinomyces, Streptomyces, Nocardia, Bifidobacterium, Gardnerella, Corynebacterium; Propionibacterium
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/34—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Corynebacterium (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55516—Proteins; Peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55577—Saponins; Quil A; QS21; ISCOMS
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6075—Viral proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6081—Albumin; Keyhole limpet haemocyanin [KLH]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/55—Fusion polypeptide containing a fusion with a toxin, e.g. diphteria toxin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明涉及包含α-突触核蛋白表位的至少一种模拟表位的组合物，其用在预防和/或治疗β-淀粉样变性病包括阿尔茨海默氏病的方法中，其中所述至少一种模拟表位偶联或融合至药学可接受的载体蛋白，该载体蛋白选自下组：无毒白喉毒素突变体、匙孔虫戚形血蓝素(KLH)、白喉毒素(DT)、破伤风毒素(TT)和流感嗜血杆菌蛋白D(蛋白D)。

Description

组合物
技术领域
本发明涉及与β-淀粉样蛋白形成和/或聚集(β-淀粉样变性病)有关的疾病的预防和治疗。
背景技术
各种退行性疾病的特征在于错误折叠的特定蛋白质的累积和聚合。这些所谓的蛋白病(proteopathies)包括疾病例如阿尔茨海默氏病(AD)、帕金森氏病(PD)和亨廷顿氏病(HD)或者包涵体肌炎(inclusion body myositis，IBM)以及系统性实体(systemic entities)包含各种淀粉样变性病。
本发明涉及与错误折叠α突触核蛋白(α-syn)的累积和聚集有关的AD的预防、治疗和诊断。本发明的其他目标疾病包括但不限于额颞叶痴呆(FTD)、进行性核上性麻痹(PSP)以及唐氏综合征(DS)的痴呆和IBM。
α-syn(最初被鉴定为PARK1和PARK4)是一种在人类神经系统包括大脑区域如新皮质、海马、齿状回、嗅球、纹状体、丘脑和小脑中广泛表达的140个氨基酸的蛋白质。在神经系统中它主要存在于突触前末端，虽然其作用尚未被清楚地了解，但其与正常的突触功能相关。α-syn也在造血系统家族成员包括B-、T-、和NK细胞及单核细胞和血小板中高度表达。尽管在这些细胞中的确切作用目前是未知的，但是已证明其参与巨核细胞(血小板前体)的分化。
如前所述，α-syn为淀粉样变性病包涵体的重要成分，所述包涵体是从存在于患PD和多系统萎缩(MSA)病人的脑部中的神经元和神经胶质中分别找到的。这些包涵体代表这些显著的突触核蛋白病的典型病理改变，这与其他证据一起暗示，聚集的错误折叠α-syn是最终导致这些疾病的物质。
重要的是，这种错误折叠蛋白质的包涵体也在其他几种退行性疾病包括AD、FTD、PSP、DS和IBM中被发现。
在卢伊体型痴呆(Dementia with Lewy Body)(DLB)的转基因小鼠模型中，最近被证实人类α-syn与人类APP的共同表达导致与胆碱能神经元的丧失有关的认知及肌肉运动上的改变的发展、突触泡的减少、大量淀粉样蛋白块斑块及α-syn-免疫反应性神经元内纤维状包涵体的形成。双转基因小鼠的表现型比单转基因小鼠的表现型更加严重，表明两种分子的共同表达具有协同作用。
虽然α-syn累积功能性伤害并最终导致神经元的死亡的确切作用机理尚未完全清楚，但最近的研究显示，非正常折叠的α-syn累积参予在所述退行性过程中，是上述蛋白病的潜在原因。
在Iwatsubo T.(Neuropathology 27(5)(2007)：474-478)中，考察了α-突触核蛋白沉积物及其磷酸化与α-突触核蛋白病发病机制的关联。此出版物的作者发现，在突触核蛋白病损伤中沉积的α-突触核蛋白的丝氨酸129是被广泛磷酸化的。US 2007/213253涉及突变体人α-突触核蛋白及自其衍生的肽，其可以用于抑制野生型人α-突触核蛋白的聚集。在WO 2004/041067中，披露了用于预防或治疗与α-突触核蛋白聚集体有关的疾病的手段和方法，其包括使用α-突触核蛋白片段。在US 2003/166558中，描述了可用于诱导对蛋白质沉积物的免疫应答的肽。US 2005/198694涉及包含至少100个氨基酸，并C端删除1至23个氨基酸的α-突触核蛋白片段。
发明内容
本发明的目的是提供用于治疗和/或预防阿尔茨海默氏病的化合物及药物。
本发明涉及包含α-突触核蛋白的表位的至少一种模拟表位的组合物，其用在预防和/或治疗β-淀粉样变性病(amyloidose)包括阿尔茨海默氏病的方法中，其中所述的至少一种模拟表位是偶联或融合(优选偶联)至药学可接受的载体蛋白，该载体蛋白选自无毒白喉毒素突变体(non-toxic diphtheriatoxin mutant)、匙孔虫戚形血蓝素(keyhole limpet hemocyanin)(KLH)、白喉毒素(diphtheria toxin)(DT)、破伤风毒素(tetanus toxid)(TT)和流感嗜血杆菌蛋白D(haemophilus influenzae protein D)(蛋白D)。β-
出人意料地发现，α-突触核蛋白的表位的模拟表位可用于治疗与脑内β-淀粉样蛋白沉积物有关的疾病。
即使AD通常被认为是由淀粉样蛋白β(Aβ)及高度磷酸化Tau蛋白的广泛性沉积物所造成的蛋白病，但突触蛋白α-syn的非正常聚集和累积可能与AD中的斑块形成有关。有趣的是，α-syn最初被鉴定是AD病人脑部的富含淀粉样蛋白部分中的组分，这强调了α-syn对AD的潜在重要性(Uéda K.et al.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90(23)1993:11282–6；A.Iwai,T.Saitoh et al.Neuron,14(1995),pp.467–475)。另外，Matsubara等人(Dement Geriatr CognDisord 2001；12:106-109)也证明人类α-syn基因的一些变异体与AD的相关性。
关于α-syn及例如Aβ在上述疾病中的病理生理学上相互作用所籍由的机理，人们推测，它们通过参与协同神经退行性途径而可能直接相互作用。最近已证明，在人类疾病的临床前模型系统中，病理性折叠的Aβ与α-syn分子会彼此加剧其毒性作用(Masliah et al.PNAS 2001vol.98,no.21p.12245–12250)。明显地，这些研究结果提供了分子基础并因此表明Aβ、α-syn和特别是它们的共同作用在不同神经退行性病症中极为关键的角色。
因此，α-syn累积及低聚的减少就治疗与错误折叠的α-syn相关的疾病特别是AD、FTD、PSP、DS和IBM是有益的，并因此提供针对病因治疗该退行性疾病的新策略，以胜过目前仅仅减轻症状的治疗策略。
如果该模拟表位融合或偶联至选自下组的载体蛋白，则其免疫原性可被惊人地增加：无毒白喉毒素突变体、匙孔虫戚形血蓝素(KLH)、白喉毒素(DT)、破伤风毒素(TT)以及流感嗜血杆菌蛋白D(蛋白D)，其中无毒白喉毒素突变体例如CRM197是特别优选的。
如本文中所使用的术语“表位”指抗原中被特定的抗体分子识别的免疫原性区域。一个抗原会拥有一个或多个表位，每个表位能够结合识别特定表位的抗体。
根据本发明，术语“模拟表位”指具有与其模拟的表位具有拓扑学等同体的构象的分子。所述模拟表位结合至抗体的与期望抗原免疫特异性结合的同一抗原结合区。所述模拟表位会在对其模拟的抗原有反应的宿主中引发免疫学应答。所述模拟表位还可以在牵涉表位和结合所述表位的抗体的体外抑制测定法(例如，ELISA抑制测定法)中充当其模拟的表位的竞争物。然而，本发明的模拟表位可以不必在体外抑制测定法中阻止或竞争其模拟的表位的结合，尽管它能够在对哺乳动物施用时诱导特异性的免疫应答。包含此类模拟表位(还有上文列出的那些)的本发明化合物具有避免形成自身反应性T细胞的优点，因为这些化合物的肽具有与天然存在的淀粉样蛋白-β肽的那些氨基酸序列不同的氨基酸序列。
本发明的模拟表位可以通过本领域公知的化学合成方法来合成生成，或是作为分离的肽或作为另一肽或多肽的一部分。或者，所述肽模拟表位可以在生成肽模拟表位的微生物中生成，然后分离并(如果想要的话)进一步纯化。所述肽模拟表位可以在微生物例如细菌、酵母或真菌中；在真核细胞例如哺乳动物或昆虫细胞中；或在重组病毒载体例如腺病毒、痘病毒、疱疹病毒、Simliki森林病毒、杆状病毒、噬菌体、辛德毕斯病毒(sindbis virus)或仙台病毒中生成。用于生成肽模拟表位的合适细菌包括大肠杆菌(E.coli)、枯草杆菌(B.subtilis)或能够表达肽例如肽模拟表位的任何其它细菌。用于表达肽模拟表位的合适酵母类型包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、假丝酵母属(Candida)、巴斯德毕赤氏酵母(Pichia pastoris)或能够表达肽的任何其它酵母。相应的方法是本领域公知的。用于分离和纯化重组生成的肽的方法也是本领域公知的，而且包括例如凝胶过滤、亲和层析、离子交换层析等。
为了便于分离所述肽模拟表位，可生成融合多肽，其中所述肽模拟表位被翻译性融合(共价连接)至能够通过亲和层析来分离的异源多肽。典型的异源多肽为His标签(例如His6；6个组氨酸残基)、GST标签(谷胱甘肽-S-转移酶)等。融合多肽不仅便于纯化所述模拟表位，而且还能防止所述模拟表位多肽在纯化期间被降解。如果想要在纯化后除去异源多肽，则所述融合多肽可在肽模拟表位与异源多肽之间的接合处包含切割位点。所述切割位点由这样的氨基酸序列组成，所述氨基酸序列被对该位点处的氨基酸序列特异性的酶(例如蛋白酶)切割。
本发明的模拟表位还可在它们的N-和/或C-端处或附近被修饰，使得在所述位置处结合半胱氨酸残基。
本发明的模拟表位优选是它们的氨基酸序列不同于α突触核蛋白的氨基酸序列的抗原性多肽。在这个方面，本发明的模拟表位可不仅包含一种或多种天然存在的氨基酸残基的氨基酸替代，而且还可包含一种或多种非天然氨基酸(即不是来自20种“经典的”氨基酸)的氨基酸替代或者它们可以完全由此类非天然氨基酸装配而成。合适的抗体诱导性抗原可以自商品化肽文库提供。优选的是，这些肽为至少7个氨基酸，且优选的长度可以长达16，优选长达14或20个氨基酸(例如5至16个氨基酸残基)。然而，根据本发明，也可很好地采用更长的肽作为抗体诱导性抗原。另外，本发明的模拟表位也可以是多肽的一部分，并因此在它们的N和/或C端包含至少一个别的氨基酸残基。
为了制备本发明的模拟表位(即本文中公开的抗体诱导性抗原)，噬菌体文库、肽文库当然也是合适的，例如通过用于各种结构的组合化学的手段生成的或通过高通量筛选技术的手段获得的那些库(Display：A LaboratoryManual，Carlos F.Barbas等编；Willats WG，Phage display：practicalities andprospects.Plant Mol.Biol.2002Dec.；50(6)：837-54)。
如本文中所使用的，术语“表位”指抗原中被特定的抗体分子特异性结合的免疫原性区域。抗原会拥有一个或多个表位，每个表位能够结合识别特定表位的抗体。
本发明的组合物可包含至少1个，至少2个，至少3个，至少4个，至少5个或至少10个如本文定义的模拟表位。
根据本发明的一个优选的实施例，无毒白喉毒素突变体选自CRM 197、CRM 176、CRM 228、CRM 45、CRM 9、CRM 102、CRM 103和CRM 107，其中CRM 197是特别优选的。
本发明的模拟表位特别优选地融合或偶联至无毒白喉毒素突变体上，如CRM 197(一种无毒的但为白喉毒素抗原性相同的变体)、CRM 176、CRM228、CRM 45(Uchida et al J.Biol.Chem.218；3838-3844,1973)、CRM 9、CRM45、CRM 102、CRM 103、CRM 107以及由Nicholls和Youle在(GeneticallyEngineered Toxins,Ed:Frankel,Marcel Dekker Inc,1992)中描述的其他突变体。将肽例如模拟表位融合至其他肽、多肽或蛋白质的方法是本领域公知的。
本发明另一方面涉及一种组合物，其包含α-突触核蛋白的表位的至少一种模拟表位，其用在预防和/或治疗β-淀粉样变性病包括阿尔茨海默氏病的方法中。
在此种组合物中，所述至少一种模拟表位可被融合或偶联至药学可接受的载体上，所述药学可接受的载体优选为KLH(匙孔虫戚形血蓝素)、破伤风毒素、清蛋白结合蛋白、牛血清白蛋白、树状聚物(MAP；Biol.Chem.358：581)、肽接头(或侧翼区)以及Singh et al.，Nat.Biotech.17(1999)，1075-1081(特别是该文件表1中的那些)，和O'Hagan etal.,Nature Reviews,Drug Discovery 2(9)(2003),727-735(特别是其中记载的内源免疫强化性化合物和递送系统)中记载的物质，或其混合物。此语境中的偶联化学(例如经由异双功能化合物，例如GMBS，当然还有其它的，如“Biocojuugate Techniques”，Greg T.Hermanson中记载的那些)可选自本领域技术人员已知的反应。当然至少一种模拟表位也可融合偶联至药学可接受的载体蛋白，该载体蛋白选自如上定义的无毒白喉毒素突变体、匙孔虫戚形血蓝素(KLH)、白喉毒素(DT)、破伤风毒素(TT)和流感嗜血杆菌蛋白D(蛋白D)。
本发明化合物可通过任何合适的应用方式(例如皮内注射(i.d.)、静脉内注射(i.v.)、腹腔注射(i.p.)、肌内注射(i.m.)、鼻内、口服、皮下、透皮或皮内)来施用，及在任何合适的递送装置中施用(O'Hagan et al.，Nature Reviews，Drug Discovery 2(9)，(2003)，727-735)。因此，本发明至少一种模拟表位优选经配制用于静脉内给药、皮下给药、皮内给药或肌内给药(参见例如“Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations”,Sarfaraz Niazi,CRC Press Inc,2004)。
本发明组合物包含0.1ng至10mg，优选10ng至1mg，特别是100ng至100μg，或者，可选择地例如100fmol至10μmol，优选10pmol至1μmol，特别是100pmol至100nmol量的本发明的模拟表位。典型地，所述疫苗还可含有辅助性物质，例如缓冲剂、稳定剂等。
典型地，本发明的组合物还可含有辅助性物质，例如缓冲剂、稳定剂等。优选地，这样的辅助性物质，例如药学可接受的赋形剂例如水、缓冲剂和/或稳定剂，其含量为0.1至99％(重量)，更优选为5至80％(重量)，特别是10至70％(重量)。可能的给药方案包括每周、每两周、每四周(每月)或每两月治疗，持续约1至12月；然而，还优选的是可以2至5，特别地3至4次初始疫苗给药(在一个或两个月中)，接着此后6至12个月或甚至此后数年进行加强疫苗接种(boaster vaccination)(还包括已经针对其它疫苗建议的其它方案)。
根据本发明的一个优选实施方案，向个体给药每次免疫接种0.1ng至10mg，优选0.5至500μg，更优选是1至100μg量的至少一种模拟表位。在一个优选的实施方案中，这些量是指本发明组合物中存在的全部模拟表位。在另一个优选的实施方案中，这些剂量是指组合物中存在的每种单独的模拟表位。当然也可能提供这样的疫苗，该疫苗中所述各种模拟表位以相同或不同的量存在。然而，本发明的模拟表位也可选择性地以0.1ng至10mg，优选10ng至1mg，特别是100ng至300μg/kg体重的量给予至个体。
可与载体物质结合来制备单一剂型的模拟表位的量根据所治疗的宿主和具体的给药方式而变化。组合物的剂量也可根据例如疾病情况、年龄、性别、个体体重及个体中抗体诱发特定应答的能力等因素而发生变化。可调整剂量方案以提供最佳治疗应答。例如，每天可给予数个分份剂量，或根据治疗情况的紧急程度按比例降低剂量。也可根据环境改变疫苗的剂量以提供最佳的预防性剂量应答。举例而言，通常根据给药本发明组合物后诱导的抗体水平，将本发明的模拟表位及组合物以几天间隔、一或两周间隔或甚至几个月或几年间隔给予至个体。
在本发明的一个优选的实施例中，所述组合物可被施予2至10次之间，优选2至7次之间，更优选至多5次，最优选至多4次。这些免疫接种的次数可产生基础免疫(immunisation)。在一个特别优选的实施方案中，相继疫苗接种之间的时间间隔选自2周至5年之间，优选1个月至至多3年之间，更优选2个月至1.5年之间。示例性疫苗接种计划可包括在6至8周且至多6个月期间内3至4次初始疫苗接种。之后可以每2至10年重复所述疫苗接种。重复给予本发明的模拟表位可使治疗性疫苗接种的最终效果最大化。
根据本发明的一个优选的实施例，将所述至少一种模拟表位用至少一种佐剂进行配制。
“佐剂”为可增加对抗原(例如模拟表位)的免疫应答的化合物或其混合物。抗原主要用作递送系统、主要用作免疫调节物或是具有两者的强特征。合适的佐剂包括适合用于哺乳动物(包括人类)的那些佐剂。
根据本发明的一个特别优选的实施方案，用在本申请定义的组合物中的至少一种佐剂能够刺激先天性免疫系统。
先天性免疫应答是由位于细胞表面的toll样受体(TLR's)和细胞内的Nod-LRR蛋白(NLR)介导的，且分别由D1和D0区域所介导。先天性免疫应答包括应答TLR激活导致的细胞因子(cytokine)生成和应答特定NLR(包括Ipaf)导致的半胱天冬酶-1(Caspase-1)激活和IL-1β分泌。该应答独立于特异性抗原，但也可作为抗原特异性的适应性免疫应答的佐剂。该抗原可外源性地以疫苗或感染形式来提供，或可为内源性的(例如，在肿瘤相关抗原的情况下)。
多种不同的TLR已被表征。这些TLR与不同的配体结合并被激活，随之定位于不同的器官或结构上。因此在本领域中，具有诱发特定TLR反应能力的免疫增强剂的开发引起人们关注。举例而言，US 4,666,886描述了作为TLR2激动剂的一些脂肽分子。WO 2009/118296、WO 2008/005555、WO2009/111337及WO 2009/067081分别描述了TLR7的几类小分子激动剂。WO 2007/040840及WO 2010/014913描述了用于治疗疾病的TLR7及TLR8的激动剂。这些不同的化合物包含小分子免疫增强剂(SMIP)。
能够刺激先天性免疫系统的至少一种佐剂优选包含或由Toll样受体(TLR)激动剂组成，所述Toll样受体(TLR)激动剂优选自TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8或TLR9激动剂，特别优选的是TLR4激动剂。
Toll样受体激动剂是本领域公知的。举例而言，TLR2激动剂为Pam3CysSerLys4、肽聚糖(Ppg)、PamCys，TLR3激动剂为IPH 31XX，TLR4激动剂为氨基烷基氨基葡糖苷磷酸(Aminoalkyl glucosaminide phosphate)、E6020、CRX-527、CRX-601、CRX-675、5D24.D4、RC-527，TLR7激动剂为咪喹莫特(Imiquimod)、3M-003、艾达乐(Aldara)、852A、R850、R848、CL097，TLR8激动剂为3M-002，TLR9激动剂为鞭毛蛋白、Vaxlmmune、CpG ODN(AVE0675、HYB2093)、CYT005-15AllQbG10、dSLIM。
根据本发明的一个优选的实施方案，所述TLR激动剂选自单磷酰基脂质A(MPL)、3-脱-O-乙酰化单磷酰基脂质A(3D-MPL)、聚I:C、GLA、鞭毛蛋白、R848、咪喹莫特和CpG。
本发明的组合物可包含MPL。MPL可为合成生产的MPL或天然资源中获取的MPL。当然可向本发明的组合物中添加化学修饰的MPL。此类MPL的实例在本领域是公知的。
根据本发明的一个更优选的实施例，所述至少一种佐剂包含皂苷(优选QS21)、油包水乳液和脂质体或由皂苷(优选QS21)、油包水乳液和脂质体所组成。
所述至少一种佐剂优选自MF59、AS01、AS02、AS03、AS04、氢氧化铝和磷酸铝。
已知的可用于人类的合适的递送系统型佐剂的例子包括但不限于铝剂(alum)(例如:磷酸铝、硫酸铝或氢氧化铝)、磷酸钙、脂质体、水包油乳液(如MF59(4.3％w/v角鲨烯、0.5％w/v聚山梨醇酯80(Tween 80)、0.5％w/v失水山梨醇三油酸酯(Span 85))、油包水乳液(如Montanide)及聚(D,L-丙交酯-共-乙交酯)(PLG)微米粒子或纳米粒子。
已知的可用于人类的合适的免疫调节型佐剂的例子包括但不限于来自Aquilla树皮的皂苷提取物(QS21、Quil A)、TLR4激动剂(如MPL(单磷酰基脂质A))、3DMPL(3-O-去乙酰化MPL)或GLA-AQ、LT/CT突变体、细胞因子(如各种白介素(如IL-2、IL-12)或GM-CSF或类似的物质。
已知的可用于人类的同时具有递送和免疫调节特征的合适的免疫调节型佐剂，包括但不限于ISCOMS(参见，例如et al.(1998)J.LeukocyteBiol.64:713；WO90/03184,WO96/11711,WO 00/48630,WO98/36772,WO00/41720,WO06/134423和WO07/026,190)或GLA-EM，其为Toll-样受体激动剂如TLR4激动剂与水包油乳液的组合。
可提高本发明模拟表位组合物效力的更多示例性佐剂包括但不限于：(1)水包油乳液制剂(包含或不包含其他特异性免疫刺激剂，如胞壁酰肽(见下)或细菌细胞壁成分)，如(a)SAF，含有10％角鲨烯、0.4％Tween 80、5％普兰尼克嵌段的聚合物(pluronic-blocked polymer)L121及thr-MDP，其可被微流体化形成亚微型乳液或震荡形成大粒径乳液，(b)RIBITM佐剂系统(RAS)，(Ribi Immunochem,Hamilton,Mont.)，含有2％角鲨烯、0.2％Tween 80和一种或多种细菌细胞壁成分如单磷酰基脂质A(MPL)、海藻糖二霉菌酸酯(TDM)和细胞壁骨架(CWS)，优选MPL+CWS(DETOXTM)；(2)可使用皂苷佐剂，例如QS21、STIMULONTM(Cambridge Bioscience,Worcester,Mass.)、(Isconova,Sweden)或(Commonwealth Serum Laboratories,Australia)，或由其产生的颗粒例如ISCOM(免疫刺激复合物)，该ISCOMS可没有额外的清洁剂，如WO00/07621；(3)弗氏完全佐剂(CFA)和不完全弗氏佐剂(IFA)；(4)细胞因子，如白介素(例如IL-1、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-12(WO99/44636)等)、干扰素(例如γ干扰素)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)等；(5)单磷酰基脂质A(MPL)或3-O-去乙酰化MPL(3dMPL)(参见例如,GB-2220221、EP-A-0689454)，任选地，当与肺炎球菌糖类使用时基本不存在铝剂(参见例如WO00/56358)；(6)3dMPL与例如QS21和/或水包油乳液的组合(参见例如EP-A-0835318、EP-A-0735898和EP-A-0761231)；(7)聚氧乙烯醚或聚氧乙烯酯(参见例如WO99/52549)；(8)聚氧乙烯失水山梨醇酯表面活性剂与辛苯聚醇的组合(WO01/21207)或聚氧乙烯烷基醚或酯表面活性剂与至少一种额外的非离子表面活性剂如辛苯聚醇的组合(WO01/21152)；(9)皂苷和免疫刺激性寡核苷酸(例如CpG寡核苷酸)(WO00/62800)；(10)免疫刺激剂和金属盐颗粒(参见例如WO00/23105)；(11)皂苷和水包油乳液例如WO99/11241；(12)皂苷(例如QS21)+3dMPL+IM2(优选地+甾醇)例如WO98/57659；(13)其他的作为免疫刺激剂以提高该组合物效力的物质。胞壁酰肽包括N-乙酰基-胞壁酰基-L-苏氨酰基-D-异谷酰胺(thr-MDP)、N-25乙酰基-去胞壁酰基-L-丙氨酰基-D-异谷酰胺(nor-MDP)、N-乙酰基胞壁酰基-L-丙氨酰基-D-异谷酰胺基-L-丙氨酸-2-(1′-2′-二棕榈酰基-sn-甘油-3-羟基磷酰基氧基)-乙胺MTP-PE)等。
本发明特别优选的组合物包含作为佐剂的含有或不含有Toll-样受体激动剂的水包油乳液，以及脂质体和/或含皂苷的佐剂，含有或不含有Toll-样受体激动剂。本发明的组合物也可包含氢氧化铝，其含有或不含有Toll-样受体激动剂作为佐剂。
根据本发明的一个优选的实施方案，所述表位包含氨基酸序列KNEEGAP或DMPVDPDN或由氨基酸序列KNEEGAP或DMPVDPDN所组成。
前述表位的模拟表位是本领域技术人员公知的(参见例如WO2009/103105、WO 2011/020133)。
优选地，本发明的组合物包含至少一种模拟表位，该模拟表位包含如下氨基酸序列或由如下氨基酸序列组成
(X1)nX2X3X4X5GX6P(X7)m        (式I),
其中
X1是任意氨基酸残基，
X2是选自下组的氨基酸残基：赖氨酸(K)、精氨酸(R)、丙氨酸(A)和组氨酸(H)，
X3是选自下组的氨基酸残基：天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、甘氨酸(G)和丙氨酸(A)，优选天冬酰胺(N)、丝氨酸(S)、甘氨酸(G)和丙氨酸(A)，
X4是选自下组的氨基酸残基：谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)和丙氨酸(A)，
X5是选自下组的氨基酸残基：谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)，
X6是选自下组的氨基酸残基：丙氨酸(A)和酪氨酸(Y)，
X7是任意氨基酸残基，
n和m独立的是0或大于0的整数，
且其中式I的氨基酸序列与具有氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的7聚体多肽片段不相同，或者不包含所述7聚体多肽片段，且其中
包含式I的氨基酸序列的至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
术语“具有结合抗体能力的肽，所述抗体对α-突触核蛋白的表位是特异性的”是指所述肽能够结合于α-突触核蛋白特异性抗体，该抗体是向哺乳动物给予α-突触核蛋白或其片段后所产生的。具有所述结合能力的所述肽能够诱导哺乳动物中α-突触核蛋白特异性抗体的形成。后述抗体因此结合至本发明的化合物，也能结合至α-突触核蛋白。
根据本发明的一个特别优选的实施方案，X2是选自下组的氨基酸残基：赖氨酸(K)和精氨酸(R)和/或X6是丙氨酸(A)。
根据本发明的一个优选的实施方案，所述模拟表位包含选自如下的氨基酸序列或由选自如下的氨基酸序列所组成：(X1)nKNDEGAP(X7)m、(X1)nANEEGAP(X7)m、(X1)nKAEEGAP(X7)m、(X1)nKNAEGAP(X7)m、(X1)nRNEEGAP(X7)m、(X1)nHNEEGAP(X7)m、(X1)nKNEDGAP(X7)m、(X1)nKQEEGAP(X7)m、(X1)nKSEEGAP(X7)m、(X1)nKNDDGAP(X7)m、(X1)nRNDEGAP(X7)m、(X1)nRNEDGAP(X7)m、(X1)nRQEEGAP(X7)m、(X1)nRSEEGAP(X7)m、(X1)nANDEGAP(X7)m、(X1)nANEDGAP(X7)m、(X1)nHSEEGAP(X7)m、(X1)nASEEGAP(X7)m、(X1)nHNEDGAP(X7)m、(X1)nHNDEGAP(X7)m、(X1)nRNAEGAP(X7)m、(X1)nHNAEGAP(X7)m、(X1)nKSAEGAP(X7)m、(X1)nKSDEGAP(X7)m、(X1)nKSEDGAP(X7)m、(X1)nRQDEGAP(X7)m、(X1)nRQEDGAP(X7)m、(X1)nHSAEGAP(X7)m、(X1)nRSAEGAP(X7)m、(X1)nRSDEGAP(X7)m、(X1)nRSEDGAP(X7)m、(X1)nHSDEGAP(X7)m、(X1)nHSEDGAP(X7)m、(X1)nRQDDGAP(X7)m，优选(X1)nKNDEGAP(X2)m、(X1)nRNEEGAP(X2)m、(X1)nRNDEGAP(X2)m、(X1)nKNAEGAP(X2)m、(X1)nKSDEGAP(X2)m、(X1)nRNAEGAP(X2)m或(X1)nRSEEGAP(X2)m。
本发明的组合物优选包含至少一种模拟表位，该模拟表位包含选自如下的氨基酸序列或由选自如下的氨基酸序列所组成：(X1)nQASFAME(X7)m、(X1)nTASWKGE(X7)m、(X1)nQASSKLD(X7)m、(X1)nTPAWKGE(X7)m、(X1)nTPSWAGE(X7)m、(X1)nTPSWKGE(X7)m、
其中
X1是任意氨基酸残基,
X7是任意氨基酸残基,
n和m独立的是0或大于0的整数,
所述至少一种模拟表位具有结合抗体的性能，该抗体对包含氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的表位是特异性的，
所述组合物用于预防和/或治疗突触核蛋白病。
根据本发明的一个优选的实施方案，该至少一种模拟表位包含氨基酸序列
(X1’)n’X2’X3’PVX4’X5’X6’(X7’)m’     (式II),
其中
X1’是任意氨基酸残基,
X2’是选自下组的氨基酸残基：天冬氨酸(D)和谷氨酸(E),
X3’是任意氨基酸残基,
X4’是任意氨基酸残基,
X5’是选自下组的氨基酸残基：脯氨酸(P)和丙氨酸(A),
X6’是选自下组的氨基酸残基：天冬氨酸(D)和谷氨酸(E),
X7’是任意氨基酸残基,
n’和m’独立的是0或大于0的整数,
其中，式II的氨基酸序列与具有氨基酸序列DMPVDPDN的α-突触核蛋白的8-聚体多肽片段不同，或不包含所述8-聚体多肽片段，且其中
包含式II的氨基酸序列的所述至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列DMPVDPDN的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
根据本发明的一个优选的实施方案，X3’是选自下组的氨基酸残基：谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、精氨酸(R)、天冬酰胺(N)、缬氨酸(V)、组氨酸(H)、蛋氨酸(M)、酪氨酸(Y)、丙氨酸(A)和亮氨酸(L)。
根据本发明的一个特别优选的实施例，X4’是选自下组的氨基酸残基：谷氨酰胺(Q)、色氨酸(W)、苏氨酸(T)、精氨酸(R)、天冬氨酸(D)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)、组氨酸(H)、脯氨酸(P)、酪氨酸(Y)、丙氨酸(A)、丝氨酸(S)和亮氨酸(L).
本发明的模拟表位为本发明组合物的一部分，其优选具有选自下组的氨基酸序列：(C)DQPVLPD、(C)DMPVLPD、(C)DSPVLPD、(C)DSPVWAE、(C)DTPVLAE、(C)DQPVLPDN、(C)DMPVLPDN、(C)DSPVLPDN、(C)DQPVTAEN、(C)DSPVWAEN、(C)DTPVLAEN、(C)HDRPVTPD、(C)DRPVTPD、(C)DVPVLPD、(C)DTPVYPD、(C)DTPVIPD、(C)HDRPVTPDN、(C)DRPVTPDN、(C)DNPVHPEN、(C)DVPVLPDN、(C)DTPVYPDN、(C)DTPVIPDN、(C)DQPVLPDG、(C)DMPVLPDG、(C)DSPVLPDG、(C)DSPVWAEG、(C)DRPVAPEG、(C)DHPVHPDS、(C)DMPVSPDR、(C)DSPVPPDD、(C)DQPVYPDI、(C)DRPVYPDI、(C)DHPVTPDR、(C)EYPVYPES、(C)DTPVLPDS、(C)DMPVTPDT、(C)DAPVTPDT、(C)DSPVVPDN、(C)DLPVTPDR、(C)DSPVHPDT、(C)DAPVRPDS、(C)DMPVWPDG、(C)DAPVYPDG、(C)DRPVQPDR、(C)YDRPVQPDR、(C)DMPVDPEN、(C)DMPVDADN、DQPVLPD(C)、DMPVLPD(C)、(C)EMPVDPDN和(C)DNPVHPE。
根据本发明的一个特别优选的实施方案，n’和/或m’是1且X1’和/或X7是半胱氨酸(C)。
根据本发明的一个优选的实施方案，所述模拟表位包含7至30个，优选地7至20个，更优选地7至16个，最优选地8或9个氨基酸残基。
根据本发明的一个优选的实施方案，所述模拟表位包含下列组的氨基酸序列或由下列的氨基酸序列所组成：DQPVLPD、DSPVLPD、DVPVLPD、DSPVLPDG、YDRPVQPDR、DHPVHPDS、DAPVRPDS、KNDEGAP、KQEEGAP和KSEEGAP，特别是DQPVLPD和YDRPVQPDR。当然，为了方便将这些模拟表位偶联至本文定义的载体蛋白上，该模拟表位可在C-和/或N-端包含半胱氨酸残基。
根据本发明的一个特别优选的实施方案，本发明的组合物包含模拟表位和载体和/或佐剂的如下组合(参见表A)。
表A:
模拟表位序列(SEQ):A＝DQPVLPD,B＝DSPVLPD,C＝DVPVLPD,D＝DSPVLPDG,E＝YDRPVQPDR,F＝DHPVHPDS,G＝DAPVRPDS,H＝KNDEGAP,I＝KQEEGAP,J＝KSEEGAP(模拟表位包含用于将其偶联至载体分子上的C-端或N-端半胱氨酸残基)
载体(CAR):C1＝CRM197,C2＝KLH
佐剂(ADJ):A1＝铝剂，A2＝基于皂苷的制剂，A3＝QS21(纯的)，A4＝基于角鲨烯的制剂，A5＝Addavax(失水山梨醇三油酸酯(0.5％w/v)于角鲨烯油中(5％v/v)-Tween 80(0.5％w/v)于柠檬酸钠缓冲液中(10mM,pH 6.5))，A6＝MF59(0.5％聚山梨醇酯80，0.5％失水山梨醇三油酸酯，4.3％角鲨烯，注射用水，10mM柠檬酸钠缓冲液)，A7＝AS03，A8＝AF03，A9＝单磷酰基脂质A(MPL)，A10＝MPLA(脂质A的衍生物，来源于明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minnesota)脂多糖)，A11＝合成的MPL，A12＝A1+A3，A13＝A1+A5，A14＝A1+A9，A15＝A3+A9，A16＝A3+A4，A17＝A4+A9，A18＝A3+A4+A9，A19＝A1+A3+A4，A20＝A1+A4+A9，A21＝A1+A3+A9，A22＝Ribi佐剂系统，A23＝QS21(包封的)，A24＝CpG，A25＝A1+A23，A26＝A1+A24，A27＝A1+A2，A28＝A1+A9+A24，A29＝A1+A3+A24，A30＝A1+A23+A24，A31＝A4+A3，A32＝A4+A9，A33＝A4+A23，A34＝A4+A24，A35＝A4+A9+A24，A36＝A4+A3+A24，A37＝A4+A23+A24，A38＝A4+A3+A9，A39＝A4+A23+A9，A40＝A4+A3+A9+A24，A41＝A4+A23+A9+A24，A42＝A9+A23，A43＝A1+A3+A9+A24，A44＝A1+A9+A23+A24
No. SEQ CAR ADJ No. SEQ CAR ADJ No. SEQ CAR ADJ
1 A C1 A1 294 D C1 A30 587 G C2 A15
2 B C1 A1 295 E C1 A30 588 H C2 A15
3 C C1 A1 296 F C1 A30 589 I C2 A15
4 D C1 A1 297 G C1 A30 590 J C2 A15
5 E C1 A1 298 H C1 A30 591 A C2 A16
6 F C1 A1 299 I C1 A30 592 B C2 A16
7 G C1 A1 300 J C1 A30 593 C C2 A16
8 H C1 A1 301 A C1 A31 594 D C2 A16
9 I C1 A1 302 B C1 A31 595 E C2 A16
10 J C1 A1 303 C C1 A31 596 F C2 A16
11 A C1 A2 304 D C1 A31 597 G C2 A16
12 B C1 A2 305 E C1 A31 598 H C2 A16
13 C C1 A2 306 F C1 A31 599 I C2 A16
14 D C1 A2 307 G C1 A31 600 J C2 A16
15 E C1 A2 308 H C1 A31 601 A C2 A17
16 F C1 A2 309 I C1 A31 602 B C2 A17
17 G C1 A2 310 J C1 A31 603 C C2 A17
18 H C1 A2 311 A C1 A32 604 D C2 A17
19 I C1 A2 312 B C1 A32 605 E C2 A17
20 J C1 A2 313 C C1 A32 606 F C2 A17
21 A C1 A3 314 D C1 A32 607 G C2 A17
22 B C1 A3 315 E C1 A32 608 H C2 A17
23 C C1 A3 316 F C1 A32 609 I C2 A17
24 D C1 A3 317 G C1 A32 610 J C2 A17
25 E C1 A3 318 H C1 A32 611 A C2 A18
26 F C1 A3 319 I C1 A32 612 B C2 A18
27 G C1 A3 320 J C1 A32 613 C C2 A18
28 H C1 A3 321 A C1 A33 614 D C2 A18
29 I C1 A3 322 B C1 A33 615 E C2 A18
30 J C1 A3 323 C C1 A33 616 F C2 A18
31 A C1 A4 324 D C1 A33 617 G C2 A18
32 B C1 A4 325 E C1 A33 618 H C2 A18
33 C C1 A4 326 F C1 A33 619 I C2 A18
34 D C1 A4 327 G C1 A33 620 J C2 A18
35 E C1 A4 328 H C1 A33 621 A C2 A19
36 F C1 A4 329 I C1 A33 622 B C2 A19
37 G C1 A4 330 J C1 A33 623 C C2 A19
38 H C1 A4 331 A C1 A34 624 D C2 A19
39 I C1 A4 332 B C1 A34 625 E C2 A19
40 J C1 A4 333 C C1 A34 626 F C2 A19
41 A C1 A5 334 D C1 A34 627 G C2 A19
42 B C1 A5 335 E C1 A34 628 H C2 A19
43 C C1 A5 336 F C1 A34 629 I C2 A19
44 D C1 A5 337 G C1 A34 630 J C2 A19
45 E C1 A5 338 H C1 A34 631 A C2 A20
46 F C1 A5 339 I C1 A34 632 B C2 A20
47 G C1 A5 340 J C1 A34 633 C C2 A20
48 H C1 A5 341 A C1 A35 634 D C2 A20
49 I C1 A5 342 B C1 A35 635 E C2 A20
50 J C1 A5 343 C C1 A35 636 F C2 A20
51 A C1 A6 344 D C1 A35 637 G C2 A20
52 B C1 A6 345 E C1 A35 638 H C2 A20
53 C C1 A6 346 F C1 A35 639 I C2 A20
54 D C1 A6 347 G C1 A35 640 J C2 A20
55 E C1 A6 348 H C1 A35 641 A C2 A21
56 F C1 A6 349 I C1 A35 642 B C2 A21
57 G C1 A6 350 J C1 A35 643 C C2 A21
58 H C1 A6 351 A C1 A36 644 D C2 A21
59 I C1 A6 352 B C1 A36 645 E C2 A21
60 J C1 A6 353 C C1 A36 646 F C2 A21
61 A C1 A7 354 D C1 A36 647 G C2 A21
62 B C1 A7 355 E C1 A36 648 H C2 A21
63 C C1 A7 356 F C1 A36 649 I C2 A21
64 D C1 A7 357 G C1 A36 650 J C2 A21
65 E C1 A7 358 H C1 A36 651 A C2 A22
66 F C1 A7 359 I C1 A36 652 B C2 A22
67 G C1 A7 360 J C1 A36 653 C C2 A22
68 H C1 A7 361 A C1 A37 654 D C2 A22
69 I C1 A7 362 B C1 A37 655 E C2 A22
70 J C1 A7 363 C C1 A37 656 F C2 A22
71 A C1 A8 364 D C1 A37 657 G C2 A22
72 B C1 A8 365 E C1 A37 658 H C2 A22
73 C C1 A8 366 F C1 A37 659 I C2 A22
74 D C1 A8 367 G C1 A37 660 J C2 A22
75 E C1 A8 368 H C1 A37 661 A C2 A23
76 F C1 A8 369 I C1 A37 662 B C2 A23
77 G C1 A8 370 J C1 A37 663 C C2 A23
78 H C1 A8 371 A C1 A38 664 D C2 A23
79 I C1 A8 372 B C1 A38 665 E C2 A23
80 J C1 A8 373 C C1 A38 666 F C2 A23
81 A C1 A9 374 D C1 A38 667 G C2 A23
82 B C1 A9 375 E C1 A38 668 H C2 A23
83 C C1 A9 376 F C1 A38 669 I C2 A23
84 D C1 A9 377 G C1 A38 670 J C2 A23
85 E C1 A9 378 H C1 A38 671 A C2 A24
86 F C1 A9 379 I C1 A38 672 B C2 A24
87 G C1 A9 380 J C1 A38 673 C C2 A24
88 H C1 A9 381 A C1 A39 674 D C2 A24
89 I C1 A9 382 B C1 A39 675 E C2 A24
90 J C1 A9 383 C C1 A39 676 F C2 A24
91 A C1 A10 384 D C1 A39 677 G C2 A24
92 B C1 A10 385 E C1 A39 678 H C2 A24
93 C C1 A10 386 F C1 A39 679 I C2 A24
94 D C1 A10 387 G C1 A39 680 J C2 A24
95 E C1 A10 388 H C1 A39 681 A C2 A25
96 F C1 A10 389 I C1 A39 682 B C2 A25
97 G C1 A10 390 J C1 A39 683 C C2 A25
98 H C1 A10 391 A C1 A40 684 D C2 A25
99 I C1 A10 392 B C1 A40 685 E C2 A25
100 J C1 A10 393 C C1 A40 686 F C2 A25
101 A C1 A11 394 D C1 A40 687 G C2 A25
102 B C1 A11 395 E C1 A40 688 H C2 A25
103 C C1 A11 396 F C1 A40 689 I C2 A25
104 D C1 A11 397 G C1 A40 690 J C2 A25
105 E C1 A11 398 H C1 A40 691 A C2 A26
106 F C1 A11 399 I C1 A40 692 B C2 A26
107 G C1 A11 400 J C1 A40 693 C C2 A26
108 H C1 A11 401 A C1 A41 694 D C2 A26
109 I C1 A11 402 B C1 A41 695 E C2 A26
110 J C1 A11 403 C C1 A41 696 F C2 A26
111 A C1 A12 404 D C1 A41 697 G C2 A26
112 B C1 A12 405 E C1 A41 698 H C2 A26
113 C C1 A12 406 F C1 A41 699 I C2 A26
114 D C1 A12 407 G C1 A41 700 J C2 A26
115 E C1 A12 408 H C1 A41 701 A C2 A27
116 F C1 A12 409 I C1 A41 702 B C2 A27
117 G C1 A12 410 J C1 A41 703 C C2 A27
118 H C1 A12 411 A C1 A42 704 D C2 A27
119 I C1 A12 412 B C1 A42 705 E C2 A27
120 J C1 A12 413 C C1 A42 706 F C2 A27
121 A C1 A13 414 D C1 A42 707 G C2 A27
122 B C1 A13 415 E C1 A42 708 H C2 A27
123 C C1 A13 416 F C1 A42 709 I C2 A27
124 D C1 A13 417 G C1 A42 710 J C2 A27
125 E C1 A13 418 H C1 A42 711 A C2 A28
126 F C1 A13 419 I C1 A42 712 B C2 A28
127 G C1 A13 420 J C1 A42 713 C C2 A28
128 H C1 A13 421 A C1 A43 714 D C2 A28
129 I C1 A13 422 B C1 A43 715 E C2 A28
130 J C1 A13 423 C C1 A43 716 F C2 A28
131 A C1 A14 424 D C1 A43 717 G C2 A28
132 B C1 A14 425 E C1 A43 718 H C2 A28
133 C C1 A14 426 F C1 A43 719 I C2 A28
134 D C1 A14 427 G C1 A43 720 J C2 A28
135 E C1 A14 428 H C1 A43 721 A C2 A29
136 F C1 A14 429 I C1 A43 722 B C2 A29
137 G C1 A14 430 J C1 A43 723 C C2 A29
138 H C1 A14 431 A C1 A44 724 D C2 A29
139 I C1 A14 432 B C1 A44 725 E C2 A29
140 J C1 A14 433 C C1 A44 726 F C2 A29
141 A C1 A15 434 D C1 A44 727 G C2 A29
142 B C1 A15 435 E C1 A44 728 H C2 A29
143 C C1 A15 436 F C1 A44 729 I C2 A29
144 D C1 A15 437 G C1 A44 730 J C2 A29
145 E C1 A15 438 H C1 A44 731 A C2 A30
146 F C1 A15 439 I C1 A44 732 B C2 A30
147 G C1 A15 440 J C1 A44 733 C C2 A30
148 H C1 A15 441 A C2 A1 734 D C2 A30
149 I C1 A15 442 B C2 A1 735 E C2 A30
150 J C1 A15 443 C C2 A1 736 F C2 A30
151 A C1 A16 444 D C2 A1 737 G C2 A30
152 B C1 A16 445 E C2 A1 738 H C2 A30
153 C C1 A16 446 F C2 A1 739 I C2 A30
154 D C1 A16 447 G C2 A1 740 J C2 A30
155 E C1 A16 448 H C2 A1 741 A C2 A31
156 F C1 A16 449 I C2 A1 742 B C2 A31
157 G C1 A16 450 J C2 A1 743 C C2 A31
158 H C1 A16 451 A C2 A2 744 D C2 A31
159 I C1 A16 452 B C2 A2 745 E C2 A31
160 J C1 A16 453 C C2 A2 746 F C2 A31
161 A C1 A17 454 D C2 A2 747 G C2 A31
162 B C1 A17 455 E C2 A2 748 H C2 A31
163 C C1 A17 456 F C2 A2 749 I C2 A31
164 D C1 A17 457 G C2 A2 750 J C2 A31
165 E C1 A17 458 H C2 A2 751 A C2 A32
166 F C1 A17 459 I C2 A2 752 B C2 A32
167 G C1 A17 460 J C2 A2 753 C C2 A32
168 H C1 A17 461 A C2 A3 754 D C2 A32
169 I C1 A17 462 B C2 A3 755 E C2 A32
170 J C1 A17 463 C C2 A3 756 F C2 A32
171 A C1 A18 464 D C2 A3 757 G C2 A32
172 B C1 A18 465 E C2 A3 758 H C2 A32
173 C C1 A18 466 F C2 A3 759 I C2 A32
174 D C1 A18 467 G C2 A3 760 J C2 A32
175 E C1 A18 468 H C2 A3 761 A C2 A33
176 F C1 A18 469 I C2 A3 762 B C2 A33
177 G C1 A18 470 J C2 A3 763 C C2 A33
178 H C1 A18 471 A C2 A4 764 D C2 A33
179 I C1 A18 472 B C2 A4 765 E C2 A33
180 J C1 A18 473 C C2 A4 766 F C2 A33
181 A C1 A19 474 D C2 A4 767 G C2 A33
182 B C1 A19 475 E C2 A4 768 H C2 A33
183 C C1 A19 476 F C2 A4 769 I C2 A33
184 D C1 A19 477 G C2 A4 770 J C2 A33
185 E C1 A19 478 H C2 A4 771 A C2 A34
186 F C1 A19 479 I C2 A4 772 B C2 A34
187 G C1 A19 480 J C2 A4 773 C C2 A34
188 H C1 A19 481 A C2 A5 774 D C2 A34
189 I C1 A19 482 B C2 A5 775 E C2 A34
190 J C1 A19 483 C C2 A5 776 F C2 A34
191 A C1 A20 484 D C2 A5 777 G C2 A34
192 B C1 A20 485 E C2 A5 778 H C2 A34
193 C C1 A20 486 F C2 A5 779 I C2 A34
194 D C1 A20 487 G C2 A5 780 J C2 A34
195 E C1 A20 488 H C2 A5 781 A C2 A35
196 F C1 A20 489 I C2 A5 782 B C2 A35
197 G C1 A20 490 J C2 A5 783 C C2 A35
198 H C1 A20 491 A C2 A6 784 D C2 A35
199 I C1 A20 492 B C2 A6 785 E C2 A35
200 J C1 A20 493 C C2 A6 786 F C2 A35
201 A C1 A21 494 D C2 A6 787 G C2 A35
202 B C1 A21 495 E C2 A6 788 H C2 A35
203 C C1 A21 496 F C2 A6 789 I C2 A35
204 D C1 A21 497 G C2 A6 790 J C2 A35
205 E C1 A21 498 H C2 A6 791 A C2 A36
206 F C1 A21 499 I C2 A6 792 B C2 A36
207 G C1 A21 500 J C2 A6 793 C C2 A36
208 H C1 A21 501 A C2 A7 794 D C2 A36
209 I C1 A21 502 B C2 A7 795 E C2 A36
210 J C1 A21 503 C C2 A7 796 F C2 A36
211 A C1 A22 504 D C2 A7 797 G C2 A36
212 B C1 A22 505 E C2 A7 798 H C2 A36
213 C C1 A22 506 F C2 A7 799 I C2 A36
214 D C1 A22 507 G C2 A7 800 J C2 A36
215 E C1 A22 508 H C2 A7 801 A C2 A37
216 F C1 A22 509 I C2 A7 802 B C2 A37
217 G C1 A22 510 J C2 A7 803 C C2 A37
218 H C1 A22 511 A C2 A8 804 D C2 A37
219 I C1 A22 512 B C2 A8 805 E C2 A37
220 J C1 A22 513 C C2 A8 806 F C2 A37
221 A C1 A23 514 D C2 A8 807 G C2 A37
222 B C1 A23 515 E C2 A8 808 H C2 A37
223 C C1 A23 516 F C2 A8 809 I C2 A37
224 D C1 A23 517 G C2 A8 810 J C2 A37
225 E C1 A23 518 H C2 A8 811 A C2 A38
226 F C1 A23 519 I C2 A8 812 B C2 A38
227 G C1 A23 520 J C2 A8 813 C C2 A38
228 H C1 A23 521 A C2 A9 814 D C2 A38
229 I C1 A23 522 B C2 A9 815 E C2 A38
230 J C1 A23 523 C C2 A9 816 F C2 A38
231 A C1 A24 524 D C2 A9 817 G C2 A38
232 B C1 A24 525 E C2 A9 818 H C2 A38
233 C C1 A24 526 F C2 A9 819 I C2 A38
234 D C1 A24 527 G C2 A9 820 J C2 A38
235 E C1 A24 528 H C2 A9 821 A C2 A39
236 F C1 A24 529 I C2 A9 822 B C2 A39
237 G C1 A24 530 J C2 A9 823 C C2 A39
238 H C1 A24 531 A C2 A10 824 D C2 A39
239 I C1 A24 532 B C2 A10 825 E C2 A39
240 J C1 A24 533 C C2 A10 826 F C2 A39
241 A C1 A25 534 D C2 A10 827 G C2 A39
242 B C1 A25 535 E C2 A10 828 H C2 A39
243 C C1 A25 536 F C2 A10 829 I C2 A39
244 D C1 A25 537 G C2 A10 830 J C2 A39
245 E C1 A25 538 H C2 A10 831 A C2 A40
246 F C1 A25 539 I C2 A10 832 B C2 A40
247 G C1 A25 540 J C2 A10 833 C C2 A40
248 H C1 A25 541 A C2 A11 834 D C2 A40
249 I C1 A25 542 B C2 A11 835 E C2 A40
250 J C1 A25 543 C C2 A11 836 F C2 A40
251 A C1 A26 544 D C2 A11 837 G C2 A40
252 B C1 A26 545 E C2 A11 838 H C2 A40
253 C C1 A26 546 F C2 A11 839 I C2 A40
254 D C1 A26 547 G C2 A11 840 J C2 A40
255 E C1 A26 548 H C2 A11 841 A C2 A41
256 F C1 A26 549 I C2 A11 842 B C2 A41
257 G C1 A26 550 J C2 A11 843 C C2 A41
258 H C1 A26 551 A C2 A12 844 D C2 A41
259 I C1 A26 552 B C2 A12 845 E C2 A41
260 J C1 A26 553 C C2 A12 846 F C2 A41
261 A C1 A27 554 D C2 A12 847 G C2 A41
262 B C1 A27 555 E C2 A12 848 H C2 A41
263 C C1 A27 556 F C2 A12 849 I C2 A41
264 D C1 A27 557 G C2 A12 850 J C2 A41
265 E C1 A27 558 H C2 A12 851 A C2 A42
266 F C1 A27 559 I C2 A12 852 B C2 A42
267 G C1 A27 560 J C2 A12 853 C C2 A42
268 H C1 A27 561 A C2 A13 854 D C2 A42
269 I C1 A27 562 B C2 A13 855 E C2 A42
270 J C1 A27 563 C C2 A13 856 F C2 A42
271 A C1 A28 564 D C2 A13 857 G C2 A42
272 B C1 A28 565 E C2 A13 858 H C2 A42
273 C C1 A28 566 F C2 A13 859 I C2 A42
274 D C1 A28 567 G C2 A13 860 J C2 A42
275 E C1 A28 568 H C2 A13 861 A C2 A43
276 F C1 A28 569 I C2 A13 862 B C2 A43
277 G C1 A28 570 J C2 A13 863 C C2 A43
278 H C1 A28 571 A C2 A14 864 D C2 A43
279 I C1 A28 572 B C2 A14 865 E C2 A43
280 J C1 A28 573 C C2 A14 866 F C2 A43
281 A C1 A29 574 D C2 A14 867 G C2 A43
282 B C1 A29 575 E C2 A14 868 H C2 A43
283 C C1 A29 576 F C2 A14 869 I C2 A43
284 D C1 A29 577 G C2 A14 870 J C2 A43
285 E C1 A29 578 H C2 A14 871 A C2 A44
286 F C1 A29 579 I C2 A14 872 B C2 A44
287 G C1 A29 580 J C2 A14 873 C C2 A44
288 H C1 A29 581 A C2 A15 874 D C2 A44
289 I C1 A29 582 B C2 A15 875 E C2 A44
290 J C1 A29 583 C C2 A15 876 F C2 A44
291 A C1 A30 584 D C2 A15 877 G C2 A44
292 B C1 A30 585 E C2 A15 878 H C2 A44
293 C C1 A30 586 F C2 A15 879 I C2 A44
880 J C2 A44
特别优选的佐剂组合物包括A1、A4、A12＝A1+A3、A14＝A1+A9、A18＝A3+A4+A9、A21＝A1+A3+A9、A26＝A1+A24、A28＝A1+A9+A24、A29＝A1+A3+A24、A34＝A4+A24、A38＝A4+A3+A9和A42＝A9+A23。这些优选的佐剂组合物可以与本发明的模拟表位组合得到本发明的组合物。
表A中提及的佐剂是本领域公知的(参见例如Reed SG,Trend Immunol30(2008):23-32)。
根据本发明的一个特别优选的实施方案，本发明的组合物包含模拟表位、载体和佐剂的组合或由模拟表位、载体和佐剂的组合所组成，其中所述组合选自下列组：A-C1-A1、A-C1-A3、A-C1-A4/A5/A6、A-C1-A9、A-C1-A12、A-C1-A14、A-C1-A16、A-C1-A17、A-C1-A18、A-C1-A21、A-C1-A26、E-C1-A1、E-C1-A3、E-C1-A4/A5/A6、E-C1-A9、E-C1-A12、E-C1-A14、E-C1-A16、E-C1-A17、E-C1-A18、E-C1-A21、E-C1-A26、A-C2-A1、A-C2-A3、A-C2-A4/A5/A6、A-C2-A9、A-C2-A12、A-C2-A14、A-C2-A16、A-C2-A17、A-C2-A18、A-C2-A21、A-C2-A26、E-C2-A1、E-C2-A3、E-C2-A4/A5/A6、E-C2-A9、E-C2-A12、E-C2-A14、E-C2-A16、E-C2-A17、E-C2-A18、E-C2-A21和E-C2-A26，优选地为A-C1-A1、A-C1-A14、A-C1-A18、A-C1-A26、E-C1-A1、E-C1-A14、E-C1-A18、E-C1-A26、A-C2-A1、A-C2-A14、A-C2-A18、A-C2-A26、E-C2-A1、E-C2-A14、E-C2-A18和E-C2-A26，其变量如“表A”中所定义(见上)。
本发明的另一方面涉及一种用于预防和/或治疗本文定义的突触核蛋白病的方法，其通过向有此需要的受试者给药适当量的如权利要求所定义的组合物。
在此使用的术语“预防”，不仅涵盖预防疾病发生的措施(如危险因子减少)，也包含遏止其进展及降低其形成后的后果。
在此使用的术语“治疗”或其同义词，包含改善和/或逆转疾病(如神经退行性疾病)的症状。当用于本发明的筛选方法时，引起疾病相关的任何参数的改善的化合物因此可被认定为治疗性化合物。术语“治疗”，代表治疗性处理和预防性措施。例如，可从本发明的组合物和方法受益的人包括那些已经患疾病和/或障碍(如神经退行性疾病、认知功能缺乏或缺失)的那些人，及要预防(例如，使用本发明的预防性治疗)疾病或障碍的那些人。
本发明进一步如下列实施方案所定义:
1.组合物，其包含α-突触核蛋白的表位的至少一种模拟表位，所述组合物用在预防和/或治疗β-淀粉样变性病包括阿尔茨海默氏病的方法中，其中所述至少一种模拟表位偶联或融合至药学可接受的载体蛋白，该载体蛋白选自：无毒白喉毒素突变体、匙孔虫戚形血蓝素(KLH)、白喉毒素(DT)、破伤风毒素(TT)和流感嗜血杆菌蛋白D(蛋白D)。
2.根据实施方案1的组合物，其中所述无毒白喉毒素突变体选自：CRM197、CRM 176、CRM 228、CRM 45、CRM 9、CRM 102、CRM 103和CRM107，特别是CRM 197。
3.根据实施方案1或2的组合物，其中所述至少一种模拟表位经配制用于皮下给药、皮内给药、透皮给药或肌内给药。
4.根据实施方案1至3中任一项的组合物，其中将所述至少一种模拟表位是用至少一种佐剂进行配制。
5.根据实施方案4的组合物，其中所述至少一种佐剂能够刺激先天性免疫系统。
6.根据实施方案5的组合物，其中能够刺激先天性免疫系统的至少一种佐剂包含Toll样受体(TLR)激动剂或由Toll样受体(TLR)激动剂组成，所述激动剂优选为TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8或TLR9激动剂，特别优选的是TLR4激动剂。
7.根据实施方案6的组合物，其中所述TLR激动剂选自：单磷酰基脂质A(MPL)、3-去-O-乙酰化单磷酰基脂质A(3D-MPL)、聚I:C、GLA、鞭毛蛋白、R848、咪喹莫特和CpG。
8.根据实施方案4至7中任一项的组合物，其中所述至少一种佐剂包含皂苷优选QS21、油包水乳液和脂质体或由皂苷优选QS21、油包水乳液和脂质体所组成。
9.根据实施方案4的组合物，其中至少一种佐剂选自：MF59、AS01、AS02、AS03、AS04、氢氧化铝和磷酸铝。
10.根据实施方案1至9中任一项的组合物，其中所述表位包含氨基酸序列KNEEGAP或DMPVDPDN。
11.根据实施方案1至10中任一项的组合物，其中所述至少一种模拟表位包含氨基酸序列
(X1)nX2X3X4X5GX6P(X7)m       (式I),
其中
X1是任意氨基酸残基,
X2是选自下组的氨基酸残基：赖氨酸(K)、精氨酸(R)、丙氨酸(A)和组氨酸(H),
X3是选自下组的氨基酸残基：天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、甘氨酸(G)和丙氨酸(A)，优选为天冬酰胺(N)、丝氨酸(S)、甘氨酸(G)和丙氨酸(A),
X4是选自下组的氨基酸残基：谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)和丙氨酸(A),
X5是选自下组的氨基酸残基：谷氨酸(E)和天冬氨酸(D),
X6是选自下组的氨基酸残基：丙氨酸(A)和酪氨酸(Y),
X7是任意氨基酸残基,
n和m独立的是0或大于0的整数,
其中式I的氨基酸序列与具有氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的7聚体多肽片段不相同，或者不包含所述7聚体多肽片段，且其中
包含式I的氨基酸序列的所述至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
12.根据实施方案11的组合物，其中X2是选自下组的氨基酸残基：赖氨酸(K)和精氨酸(R)和/或X6是丙氨酸(A)。
13.根据实施方案11或12的组合物，其中所述模拟表位包含选自下组的氨基酸序列：(X1)nKNDEGAP(X7)m、(X1)nANEEGAP(X7)m、(X1)nKAEEGAP(X7)m、(X1)nKNAEGAP(X7)m、(X1)nRNEEGAP(X7)m、(X1)nHNEEGAP(X7)m、(X1)nKNEDGAP(X7)m、(X1)nKQEEGAP(X7)m、(X1)nKSEEGAP(X7)m、(X1)nKNDDGAP(X7)m、(X1)nRNDEGAP(X7)m、(X1)nRNEDGAP(X7)m、(X1)nRQEEGAP(X7)m、(X1)nRSEEGAP(X7)m、(X1)nANDEGAP(X7)m、(X1)nANEDGAP(X7)m、(X1)nHSEEGAP(X7)m、(X1)nASEEGAP(X7)m、(X1)nHNEDGAP(X7)m、(X1)nHNDEGAP(X7)m、(X1)nRNAEGAP(X7)m、(X1)nHNAEGAP(X7)m、(X1)nKSAEGAP(X7)m、(X1)nKSDEGAP(X7)m、(X1)nKSEDGAP(X7)m、(X1)nRQDEGAP(X7)m、(X1)nRQEDGAP(X7)m、(X1)nHSAEGAP(X7)m、(X1)nRSAEGAP(X7)m、(X1)nRSDEGAP(X7)m、(X1)nRSEDGAP(X7)m、(X1)nHSDEGAP(X7)m、(X1)nHSEDGAP(X7)m、(X1)nRQDDGAP(X7)m，优选地为(X1)nKNDEGAP(X2)m、(X1)nRNEEGAP(X2)m、(X1)nRNDEGAP(X2)m、(X1)nKNAEGAP(X2)m、(X1)nKSDEGAP(X2)m、(X1)nRNAEGAP(X2)m或(X1)nRSEEGAP(X2)m。
14.根据实施方案1至13中任一项的组合物，其包含至少一种模拟表位，该模拟表位包含选自下组的氨基酸序列：(X1)nQASFAME(X7)m、(X1)nTASWKGE(X7)m、(X1)nQASSKLD(X7)m、(X1)nTPAWKGE(X7)m、(X1)nTPSWAGE(X7)m、(X1)nTPSWKGE(X7)m，
其中
X1是任意氨基酸残基,
X7是任意氨基酸残基,
n和m独立的是0或大于0的整数,
所述至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
所述组合物用于预防和/或治疗突触核蛋白病。
15.根据实施方案1至14中任一项的组合物，其中至少一种模拟表位包含氨基酸序列
(X1’)n’X2’X3’PVX4’X5’X6’(X7’)m’     (式II),
其中
X1’是任意氨基酸残基,
X2’是选自下组的氨基酸残基：天冬氨酸(D)和谷氨酸(E),
X3’是任意氨基酸残基,
X4’是任意氨基酸残基,
X5’是选自下组的氨基酸残基：脯氨酸(P)和丙氨酸(A),
X6’是选自下组的氨基酸残基：天冬氨酸(D)和谷氨酸(E),
X7’是任意氨基酸残基,
n’和m’独立的是0或大于0的整数,
其中式II的氨基酸序列与具有氨基酸序列DMPVDPDN的α-突触核蛋白的8-聚体多肽片段不同，或不包含所述8-聚体多肽片段，且其中
包含式II的氨基酸序列的所述至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列DMPVDPDN的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
16.根据实施方案15的组合物，其中X3’是选自下组的氨基酸残基：谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、精氨酸(R)、天冬酰胺(N)、缬氨酸(V)、组氨酸(H)、蛋氨酸(M)、酪氨酸(Y)、丙氨酸(A)和亮氨酸(L)。
17.根据实施方案15或16的组合物，其中X4’是选自下组的氨基酸残基：谷氨酰胺(Q)、色氨酸(W)、苏氨酸(T)、精氨酸(R)、天冬氨酸(D)、异亮氨酸(I)、缬氨酸(V)、组氨酸(H)、脯氨酸(P)、酪氨酸(Y)、丙氨酸(A)、丝氨酸(S)和亮氨酸(L)。
18.根据实施方案15至17中任一项的组合物，其中所述模拟表位具有选自下列的氨基酸序列：(C)DQPVLPD、(C)DMPVLPD、(C)DSPVLPD、(C)DSPVWAE、(C)DTPVLAE、(C)DQPVLPDN、(C)DMPVLPDN、(C)DSPVLPDN、(C)DQPVTAEN、(C)DSPVWAEN、(C)DTPVLAEN、(C)HDRPVTPD、(C)DRPVTPD、(C)DVPVLPD、(C)DTPVYPD、(C)DTPVIPD、(C)HDRPVTPDN、(C)DRPVTPDN、(C)DNPVHPEN、(C)DVPVLPDN、(C)DTPVYPDN、(C)DTPVIPDN、(C)DQPVLPDG、(C)DMPVLPDG、(C)DSPVLPDG、(C)DSPVWAEG、(C)DRPVAPEG、(C)DHPVHPDS、(C)DMPVSPDR、(C)DSPVPPDD、(C)DQPVYPDI、(C)DRPVYPDI、(C)DHPVTPDR、(C)EYPVYPES、(C)DTPVLPDS、(C)DMPVTPDT、(C)DAPVTPDT、(C)DSPVVPDN、(C)DLPVTPDR、(C)DSPVHPDT、(C)DAPVRPDS、(C)DMPVWPDG、(C)DAPVYPDG、(C)DRPVQPDR、(C)YDRPVQPDR、(C)DMPVDPEN、(C)DMPVDADN、DQPVLPD(C)、DMPVLPD(C)、(C)EMPVDPDN和(C)DNPVHPE。
19.根据实施方案11至17中任一项的组合物，其特征在于n’和/或m’是1且X1’和/或X7’是半胱氨酸(C)。
20.根据实施方案11至19中任一项的组合物，其中所述模拟表位包含7至30个，优选地7至20个，更优选地7至16个，最优选地8或9个氨基酸残基。
21.根据实施方案1至20中任一项的组合物，其中所述至少一种模拟表位选自下组：DQPVLPD、DSPVLPD、DVPVLPD、DSPVLPDG、YDRPVQPDR、DHPVHPDS、DAPVRPDS、KNDEGAP、KQEEGAP和KSEEGAP，特别是DQPVLPD和YDRPVQPDR。
22.根据实施方案1至21中任一项的组合物，其包含至少一种模拟表位和载体和/或佐剂的如表A中所定义的组合，优选地为A-C1-A1、A-C1-A14、A-C1-A18,A-C1-A26、E-C1-A1、E-C1-A14、E-C1-A18、E-C1-A26、A-C2-A1、A-C2-A14、A-C2-A18、A-C2-A26、E-C2-A1、E-C2-A14、E-C2-A18和E-C2-A26。
本发明进一步通过下面的图和实施例进行说明，然而，不限于此。
图.1(A)显示利用可替代的包含TLR4、皂苷或水包油乳液的佐剂促进的注射式肽特异性免疫原性，其中当所述佐剂与DQPVLPD-CRM197缀合物(conjugate)组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与DQPVLPD-CRM197缀合物的组合具有更高的注射式肽特异性免疫原性。
图.1(B)显示利用可替代的包含TLR4和较少量的皂苷或水包油乳液的佐剂促进的注射式肽特异性免疫原性，其中当所述佐剂与YDRPVQPDR-CRM197缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与YDRPVQPDR-CRM197缀合物的组合具有更高的注射式肽特异性免疫原性。
图.1(C)显示利用可替代的包含TLR4但不包含水包油乳液或皂苷的佐剂促进的注射式肽特异性免疫原性，其中当所述佐剂与KNDEGAP-CRM197缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与KNDEGAP-CRM197缀合物的组合具有较高的注射式肽特异性免疫原性。
图.2(A)显示利用可替代的包含水包油乳液和TLR4或皂苷的佐剂促进的注射式肽特异性免疫原性，其中当佐剂与DQPVLPD-KLH缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与DQPVLPD-KLH缀合物的组合具有更高的注射式肽特异性免疫原性。
图2(B)和(D)分别显示利用可替代的包含TLR4或水包油乳液但不包含皂苷的佐剂促进的注射式肽特异性免疫原性，其中当佐剂分别与YDRPVQPDR-KLH(B)和DHPVHPDS-KLH(D)缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝分别与YDRPVQPDR-KLH和DHPVHPDS-KLH缀合物的组合具有更高的注射式肽特异性免疫原性。
图.2(C)显示利用可替代的包含TLR4和较少量的水包油乳液或皂苷的佐剂促进的注射式肽特异性免疫原性，其中当佐剂与KNDEGAP-KLH缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与KNDEGAP-KLH缀合物的组合具有更高的注射式肽特异性免疫原性。
图.3(A)显示利用可替代的包含皂苷和较少量的TLR4或水包油乳液的佐剂促进的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活，其中当佐剂与DQPVLPD-CRM197缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与DQPVLPD-CRM197缀合物的组合具有较高的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活。然而需要指出的是，Quil-A看起来已独自促进单核细胞/巨噬细胞刺激，虽然在非常低的水平。
图.3(B)显示利用可替代的包含皂苷、水包油乳液或TLR4的佐剂促进的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活，其中当佐剂与YDRPVQPDR-CRM197缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与YDRPVQPDR-CRM197缀合物的组合具有较高的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活。然而需要指出的是，Quil-A看起来已独自促进单核细胞/巨噬细胞刺激，虽然在非常低的水平。
图.3(C)显示利用可替代的包含皂苷或水包油乳液或TLR4的佐剂促进的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活，其中当佐剂与KNDEGAP-CRM197缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与KNDEGAP-CRM197缀合物的组合具有较高的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活。Quil-A看上去已独自促进单核细胞/巨噬细胞刺激，虽然在非常低的水平。
图.3(D)显示利用可替代的包含皂苷、TLR4或水包油乳液的佐剂促进的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活，其中当佐剂与DHPVHPDS-CRM197缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与DHPVHPDS-CRM197缀合物的组合具有较高的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活性。Quil-A看上去已独自促进单核细胞/巨噬细胞刺激，虽然在非常低的水平。
图.4(A)显示利用可替代的包含TLR4、皂苷或水包油乳液的佐剂促进的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活，其中当佐剂与DQPVLPD-KLH缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与DQPVLPD-KLH缀合物的组合具有较高的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活性。
图4(B)和(D)分别显示利用可替代的包含TLR4、水包油乳液或皂苷的佐剂促进的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活，其中当佐剂分别与YDRPVQPDR-KLH(B)和DHPVHPDS-KLH(D)缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝分别与YDRPVQPDR-KLH和DHPVHPDS-KLH缀合物的组合具有更高的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活。Quil-A看上去已独自促进单核细胞/巨噬细胞刺激。
图.4(C)显示利用可替代的包含水包油乳液或皂苷、但不包含TLR4的佐剂促进的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活，其中当佐剂与KNDEGAP-KLH缀合物组合时相较于单独的佐剂或相较于氢氧化铝与KNDEGAP-KLH缀合物的组合具有较高的基于MCP-1细胞因子水平的单核细胞/巨噬细胞激活。Quil-A看上去已独自促进单核细胞/巨噬细胞刺激。
图5(A)和(B)显示与CRM197-缀合物(A)和KLH-缀合物(B)组合的不同佐剂就它们对外周血液中单核细胞部分的大小的影响的对比，所有样品中的单核细胞百分比在生理学范围内，但QuilA独自及其与所有测试的模拟表位-缀合物的组合显示降低单核细胞数目的趋势。绝对方差反应了分析的变异性。
图6(A)和(D)显示对于体内外周血液单核细胞中的Aβ摄取，可替代的佐剂分别与KNDEGAP-CRM197(A)和DHPVHPDS-KLH(D)的组合相较于氢氧化铝分别与KNDEGAP-CRM197和DHPVHPDS-KLH缀合物的组合具有协同效应。
图.6(B)显示对于体内外周血液单核细胞中的Aβ摄取，含TLR4的佐剂或水包油乳液佐剂(但不是皂苷)与DHPVHPDS-CRM197的组合相较于氢氧化铝与DHPVHPDS-CRM197缀合物的组合具有协同效应。
图.6(C)显示对于体内外周血液单核细胞中的Aβ摄取，TLR4(但不是水包油乳液或皂苷)与KNDEGAP-KLH的组合相较于氢氧化铝与KNDEGAP-KLH缀合物的组合具有协同效应。
实施例:
材料和方法:
模拟表位-疫苗候选物的体内特征:
缀合物生产:
利用异双功能性交联剂(heterobifunctional crosslinking agent)GMBS将模拟表位肽偶联至载体CRM-197或KLH上。简言之，CRM-197/KLH与过量的GMBS于室温下混合以便活化，接着利用透析移除过量的GMBS。然后将过量的模拟表位肽加入已活化的载体中。将模拟表位CRM-197/KLH缀合物用于疫苗配制
利用不同的佐剂配制疫苗并施用于动物。当将CRM-197/KLH疫苗与其它疫苗或不同的佐剂相比较时，给每只小鼠注射相同剂量的已缀合的模拟表位肽。
动物实验:
将雌性BALB/c小鼠(每组6只)用使用了不同佐剂的模拟表位-CRM-197/KLH缀合物免疫。对照组使用CRM-197/KLH分别加上佐剂和/或PBS和/或单独佐剂进行免疫。
将动物以常规时间间隔(2周间隔)接种3次，且常规提取血浆样品(接种前一天)。
实施例1:使用不同佐剂系统的模拟表位-CRM197缀合物的作用:免疫 原性(图.1)
在多组平行的实验中，将雌性BALB/c小鼠用相同量的与CRM-197偶联的AFFITOPE肽(本申请公开的模拟表位)重复免疫，所述肽优选包含C-或N-端半胱氨酸残基(每次免疫接种使用10μg肽)。将使用相同AFFITOPE缀合物的不同制剂与合适的对照组(例如:单独PBS或单独佐剂或CRM-197+佐剂)比较。
使用了如下的肽-缀合物或缀合物的组合:
·DQPVLPD偶联至CRM197
·YDRPVQPDR偶联至CRM197
·DHPVHPDS偶联至CRM197
·KNDEGAP偶联至CRM197
本实施例中使用的佐剂为:
氢氧化铝、氢氧化铝和TLR激动剂MPLA、基于角鲨烯的佐剂、水包油乳液(＝Addavax)、含皂苷的佐剂(＝QuilA)。
在免疫接种后，用单只小鼠的血浆进行体外ELISA测定来确定抗体效价(titer)(参见描述于下的方法)
肽ELISA:
为了进行ELISA来检测已被接种动物的免疫应答，从小鼠抽取外周血液，并使用肝素作为抗凝剂，且血浆也从这些样品制备。然后将稀释的血浆用于ELISA分析。为此目的，将ELISA板(Nunc Maxisorb)上的孔用肽-BSA缀合物覆盖。接着，加入经稀释的血浆，用生物素化的抗小鼠IgG(SouthernBiotech)检测肽特异性抗体，接着利用链霉亲合素-POD(Streptavidin-POD)及ABTS进行显色反应。
实施例2:使用不同佐剂系统的模拟表位-KLH缀合物的作用:免疫原 性(图.2)
在多组平行实验中，将雌性BALB/c小鼠用与KLH偶联的相同剂量的模拟表位肽重复免疫接种(例如每次免疫接种使用10μg肽)。将使用相同模拟表位缀合物的不同制剂与合适的对照组比较(例如:单独的PBS或单独的佐剂或KLH+佐剂)。
使用如下的肽-缀合物或缀合物的组合:
·DQPVLPD偶联至KLH
·YDRPVQPDR偶联至KLH
·DHPVHPDS偶联至KLH
·KNDEGAP偶联至KLH
本实施例使用的佐剂(同实施例1):
氢氧化铝、氢氧化铝和MPLA、Addavax和QuilA。
在免疫接种后，用单只小鼠的血浆进行体外ELISA测定以确定抗体效价(参见实施例1描述的方法)
实施例3:使用不同佐剂系统的模拟表位-CRM197缀合物的作用:对 外周单核细胞/巨噬细胞的作用(图.3)
为了分析与前述不同佐剂进行佐剂化的模拟表位-CRM197是否能够改变细胞因子周围环境，进而影响外周单核细胞/巨噬细胞的激活，对已知的可激活单核细胞/巨噬细胞或指示单核细胞/巨噬细胞的激活(如CCL2/MCP1等)的细胞因子/趋化因子的水平进行测定。在注射不同的疫苗后2小时，测定来自经处理的动物的血浆中细胞因子/趋化因子的水平。
细胞因子测定:
为了测定细胞因子在已接种疫苗的动物的血液循环中的浓度，在注射疫苗后2小时从动物收集血液。接着，从血液样品中制备血浆，且使用FlowCytomix珠子阵列系统(eBioscience)及流式细胞分析来定义每一样品中细胞因子的浓度。
实施例4:使用不同佐剂系统的模拟表位-KLH缀合物的作用:对外周 单核细胞/巨噬细胞的作用(图.4)
为了分析与前述不同佐剂进行佐剂化的模拟表位-CRM197是否能够改变细胞因子周围环境，进而影响外周单核细胞/巨噬细胞的激活，对已知的可激活单核细胞/巨噬细胞或指示单核细胞/巨噬细胞的激活(如CCL2/MCP1等)的细胞因子/趋化因子的水平进行测定。在注射不同的疫苗后2小时，测定来自经处理的动物的血浆中细胞因子/趋化因子的水平(详细内容参见实施例3的方法)。
实施例5:免疫疗法对单核细胞和单核细胞性α突触核蛋白摄取的作 用(图.5)
还评测了新的疫苗制剂改变外周CDllb+单核细胞数目的能力、以及改变体内单核细胞性α突触核蛋白摄取的能力。
如前所述，单核细胞被认定为脑部小神经胶质细胞的外周血液前体细胞(Rezaie,P.,et al 1999.Dev.Brain Res.115:71–81；Mildner et al Nat Neurosci.2007Dec；10(12):1544-53)。标志物如CDllb和Ly6C为免疫标志物，其存在于所述外周血液单核细胞中并且当这些细胞渗透入脑部时持续存在(Mildneret al.,2007,Lebson L,et al.J Neurosci.2010Jul 21；30(29):9651-8)。
为研究含有佐剂或其组分的TLR激动剂是否有助于改变外周血液中的单核细胞的数目，进行如前所述的缀合物-制剂的对比分析。
该结果再次证明，模拟表位-疫苗诱导的免疫应答(抗体)与在佐剂中使用的TLR激动剂具有协同作用。
流式细胞计量法分析:
在分别注射最后一次疫苗及抗体后24小时，从小鼠抽取外周血液，其中使用K2-EDTA作为抗凝剂。使用BD Pharm LyseTM(BD Pharmingen)对单只动物样品进行红细胞溶解。将剩余的外周血液细胞与大鼠抗小鼠(Ratanti-Mouse)CD16/CD32(BD Biosciences的BD Fc BlockTM)一同孵育，并将细胞进一步与如Mildner et al.,2007所述的直接结合的抗体或相似抗体的组合一同孵育:PE-结合的仓鼠抗小鼠CD3、大鼠抗小鼠CD45R/B220、大鼠抗小鼠Ly-6G，小鼠抗小鼠NK1.1；APC-结合的大鼠抗小鼠CDllb；PE-Cy7-结合的仓鼠抗小鼠CDllc，FITC-大鼠抗小鼠Ly-6C以及合适的大鼠抗小鼠CD62L(BD Biosciences)。
样品由流式细胞仪(BD FACSCanto II)所收集，且数据由FACSDiva软件(BD Biosciences)分析，包含针对使用的荧光通道进行自动补偿程序。
单核细胞是通过它们的前向/侧向分散特性而被识别的，并且以CD3-/CD45R/B220-/Ly-6G-/NK1.1-(Lineage-)/CD11b+细胞形式受到门控。CDllb+单核细胞频率被报导为全部细胞的百分比(不包括碎片)。
α突触核蛋白摄取测定(图.6):
为了研究单核细胞在外周血液中的功能，测试这些单核细胞摄取重组人类α突触核蛋白的能力。为测定吞噬活性，使用荧光重组人类α突触核蛋白(1-140；HiLyte FluorTM488标记的,Anaspec Inc.)。
为了该分析，小鼠被注射HiLyte FluorTM488标记的α-突触核蛋白，且在注射后2小时抽取血液。采用流式细胞仪(BD FACSCanto II)获得用于α突触核蛋白摄取测定的样品并且通过FACSDiva软件(BD Biosciences)分析数据。
单核细胞通过其前向/侧向分散特性而被识别，不包括碎片并且以CD3-/CD45R/B220-/Ly-6G-/NK1.1-(Lineage-)/CD11b+细胞形式受到门控。通过以下方式评测α突触核蛋白摄取：报道在全部受门控的单核细胞中，HiLytefluorTM488α突触核蛋白阳性细胞的百分比。

Claims (16)

1.包含α-突触核蛋白的表位的至少一种模拟表位的组合物，其用在预防和/或治疗β-淀粉样变性病包括阿尔茨海默氏病的方法中，其中所述至少一种模拟表位偶联或融合至药学可接受的载体蛋白，该载体蛋白选自下组：无毒白喉毒素突变体、匙孔虫戚形血蓝素(KLH)、白喉毒素(DT)、破伤风毒素(TT)和流感嗜血杆菌蛋白D(蛋白D)。
2.根据权利要求1的组合物，其中所述无毒白喉毒素突变体选自下组：CRM 197、CRM 176、CRM 228、CRM 45、CRM 9、CRM 102、CRM 103和CRM 107，特别是CRM 197。
3.根据权利要求1或2的组合物，其中所述至少一种模拟表位用至少一种佐剂进行配制。
4.根据权利要求3的组合物，其中所述至少一种佐剂能够刺激先天性免疫系统。
5.根据权利要求4的组合物，其中所述能够刺激先天性免疫系统的至少一种佐剂包含Toll样受体(TLR)激动剂或由Toll样受体(TLR)激动剂组成，所述Toll样受体(TLR)激动剂优选为：TLR1激动剂、TLR2激动剂、TLR3激动剂、TLR4激动剂、TLR5激动剂、TLR7激动剂、TLR8激动剂或TLR9激动剂，特别优选为TLR4激动剂。
6.根据权利要求5的组合物，其中所述TLR激动剂选自下组：单磷酰基脂质A(MPL)、3-去-O-乙酰化单磷酰基脂质A(3D-MPL)、聚I:C、GLA、鞭毛蛋白、R848、咪喹莫特和CpG。
7.根据权利要求3至6中任意一项的组合物，其中所述至少一种佐剂包含皂苷优选QS21、油包水乳液和脂质体或由皂苷优选QS21、油包水乳液和脂质体所组成。
8.根据权利要求3的组合物，其中所述至少一种佐剂选自下组：MF59、AS01、AS02、AS03、AS04、氢氧化铝和磷酸铝。
9.根据权利要求1至8中任意一项的组合物，其中所述表位包含氨基酸序列KNEEGAP或DMPVDPDN。
10.根据权利要求1至9中任意一项的组合物，其中所述至少一种模拟表位包含氨基酸序列
(X1)nX2X3X4X5GX6P(X7)m    (式I),
其中
X1是任意氨基酸残基，
X2是选自下组的氨基酸残基：赖氨酸(K)、精氨酸(R)、丙氨酸(A)和组氨酸(H)，
X3是选自下组的氨基酸残基：天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、甘氨酸(G)和丙氨酸(A)，优选为天冬酰胺(N)、丝氨酸(S)、甘氨酸(G)和丙氨酸(A)，
X4是选自下组的氨基酸残基：谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)和丙氨酸(A)，
X5是选自下组的氨基酸残基：谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)，
X6是选自下组的氨基酸残基：丙氨酸(A)和酪氨酸(Y)，
X7是任意氨基酸残基，
n和m独立的是0或大于0的整数,
其中式I的氨基酸序列与具有氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的7聚体多肽片段不相同，或者不包含所述7聚体多肽片段，且其中
包含式I的氨基酸序列的所述至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
11.根据权利要求10的组合物,其中所述模拟表位包含选自下组的氨基酸序列：(X1)nKNDEGAP(X7)m、(X1)nANEEGAP(X7)m、(X1)nKAEEGAP(X7)m、(X1)nKNAEGAP(X7)m、(X1)nRNEEGAP(X7)m、(X1)nHNEEGAP(X7)m、(X1)nKNEDGAP(X7)m、(X1)nKQEEGAP(X7)m、(X1)nKSEEGAP(X7)m、(X1)nKNDDGAP(X7)m、(X1)nRNDEGAP(X7)m、(X1)nRNEDGAP(X7)m、(X1)nRQEEGAP(X7)m、(X1)nRSEEGAP(X7)m、(X1)nANDEGAP(X7)m、(X1)nANEDGAP(X7)m、(X1)nHSEEGAP(X7)m、(X1)nASEEGAP(X7)m、(X1)nHNEDGAP(X7)m、(X1)nHNDEGAP(X7)m、(X1)nRNAEGAP(X7)m、(X1)nHNAEGAP(X7)m、(X1)nKSAEGAP(X7)m、(X1)nKSDEGAP(X7)m、(X1)nKSEDGAP(X7)m、(X1)nRQDEGAP(X7)m、(X1)nRQEDGAP(X7)m、(X1)nHSAEGAP(X7)m、(X1)nRSAEGAP(X7)m、(X1)nRSDEGAP(X7)m、(X1)nRSEDGAP(X7)m、(X1)nHSDEGAP(X7)m、(X1)nHSEDGAP(X7)m、(X1)nRQDDGAP(X7)m，优选为(X1)nKNDEGAP(X2)m、(X1)nRNEEGAP(X2)m、(X1)nRNDEGAP(X2)m、(X1)nKNAEGAP(X2)m、(X1)nKSDEGAP(X2)m、(X1)nRNAEGAP(X2)m或(X1)nRSEEGAP(X2)m。
12.根据权利要求1至11中任意一项的组合物，其包含至少一种模拟表位，所述模拟表位包含选自下组的氨基酸序列：(X1)nQASFAME(X7)m、(X1)nTASWKGE(X7)m、(X1)nQASSKLD(X7)m、(X1)nTPAWKGE(X7)m、(X1)nTPSWAGE(X7)m、(X1)nTPSWKGE(X7)m，
其中
X1是任意氨基酸残基，
X7是任意氨基酸残基，
n和m独立的是0或大于0的整数，
所述至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列KNEEGAP的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
13.根据权利要求1至12中任意一项的组合物,其中所述至少一种模拟表位包含氨基酸序列
(X1’)n’X2’X3’PVX4’X5’X6’(X7’)m’    (式II),
其中
X1’是任意氨基酸残基,
X2’是选自下组的氨基酸残基：天冬氨酸(D)和谷氨酸(E)，
X3’是任意氨基酸残基，
X4’是任意氨基酸残基，
X5’是选自下组的氨基酸残基：脯氨酸(P)和丙氨酸(A)，
X6’是选自下组的氨基酸残基：天冬氨酸(D)和谷氨酸(E)，
X7’是任意氨基酸残基，
n’和m’独立的是0或大于0的整数，
其中式II的氨基酸序列与具有氨基酸序列DMPVDPDN的α-突触核蛋白的8-聚体多肽片段不同，或不包含所述8-聚体多肽片段，且其中
包含式II的氨基酸序列的所述至少一种模拟表位具有结合抗体的能力，该抗体对包含氨基酸序列DMPVDPDN的α-突触核蛋白的表位是特异性的。
14.根据权利要求3的组合物，其中所述模拟表位具有选自下组的氨基酸序列：(C)DQPVLPD、(C)DMPVLPD、(C)DSPVLPD、(C)DSPVWAE、(C)DTPVLAE、(C)DQPVLPDN、(C)DMPVLPDN、(C)DSPVLPDN、(C)DQPVTAEN、(C)DSPVWAEN、(C)DTPVLAEN、(C)HDRPVTPD、(C)DRPVTPD、(C)DVPVLPD、(C)DTPVYPD、(C)DTPVIPD、(C)HDRPVTPDN、(C)DRPVTPDN、(C)DNPVHPEN、(C)DVPVLPDN、(C)DTPVYPDN、(C)DTPVIPDN、(C)DQPVLPDG、(C)DMPVLPDG、(C)DSPVLPDG、(C)DSPVWAEG、(C)DRPVAPEG、(C)DHPVHPDS、(C)DMPVSPDR、(C)DSPVPPDD、(C)DQPVYPDI、(C)DRPVYPDI、(C)DHPVTPDR、(C)EYPVYPES、(C)DTPVLPDS、(C)DMPVTPDT、(C)DAPVTPDT、(C)DSPVVPDN、(C)DLPVTPDR、(C)DSPVHPDT、(C)DAPVRPDS、(C)DMPVWPDG、(C)DAPVYPDG、(C)DRPVQPDR、(C)YDRPVQPDR、(C)DMPVDPEN、(C)DMPVDADN、DQPVLPD(C)、DMPVLPD(C)、(C)EMPVDPDN和(C)DNPVHPE。
15.根据10至14中任意一项的组合物，其特征在于n’和/或m’是1且X1’和/或X7’是半胱氨酸(C)。
16.根据权利要求1至15中任意一项的组合物，其中所述至少一种模拟表位选自下组：DQPVLPD、DSPVLPD、DVPVLPD、DSPVLPDG、YDRPVQPDR、DHPVHPDS、DAPVRPDS、KNDEGAP、KQEEGAP和KSEEGAP，特别是DQPVLPD和YDRPVQPDR。
CN201380032533.1A 2012-05-01 2013-04-30 组合物 Pending CN104411328A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP12166314.0 2012-05-01
EP12166314.0A EP2659906A1 (en) 2012-05-01 2012-05-01 Compositions
PCT/EP2013/059024 WO2013164354A1 (en) 2012-05-01 2013-04-30 Composition

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104411328A true CN104411328A (zh) 2015-03-11

Family

ID=48227302

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380032533.1A Pending CN104411328A (zh) 2012-05-01 2013-04-30 组合物

Country Status (10)

Country Link
US (2) US20150093432A1 (zh)
EP (2) EP2659906A1 (zh)
JP (1) JP2015517457A (zh)
CN (1) CN104411328A (zh)
AR (1) AR090918A1 (zh)
AU (1) AU2013255859A1 (zh)
CA (1) CA2872135A1 (zh)
HK (1) HK1207989A1 (zh)
TW (1) TW201345928A (zh)
WO (1) WO2013164354A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108025073A (zh) * 2015-08-06 2018-05-11 葛兰素史密斯克莱知识产权发展有限公司 Ox40抗体和tlr4调节子的组合及其用途

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014037952A1 (en) * 2012-09-10 2014-03-13 Yeda Research And Development Co. Ltd At The Weizmann Institute Of Science Individualized immunomodulation therapy for neurodegenerative disorders, cns injury and age-related dementia
BR112017021981A2 (pt) * 2015-04-17 2018-07-10 Biolife Science Qld Limited composição de vacina e usos da mesma
CA3051839A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to alpha-synuclein and uses thereof
CR20240219A (es) 2017-10-25 2024-07-09 Ac Immune Sa COMPOSICIONES DE PÉPTIDOS TAU FOSFORILADOS Y SUS USOS (DIVISIONAL Exp. 2020-0219)
EP3574915A1 (en) * 2018-05-29 2019-12-04 Neovacs Immunogenic product comprising il-4 and/or il-13 for treating disorders associated with aberrant il-4 and/or il 13 expression or activity
BE1029149B1 (fr) 2021-02-26 2022-09-26 Nicolas Havelange Protéine porteuse pour antigene peptidique
BE1029148B1 (fr) 2021-02-26 2022-09-26 Curavac Europe Vaccin pour un traitement therapeutique ou prophylactique de la myastenie grave

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009103105A2 (en) * 2008-02-22 2009-08-27 Affiris Ag Mimotope
WO2011020133A1 (en) * 2009-08-21 2011-02-24 Affiris Ag Use of mimotopes of alpha-synuclein epitopes for treating lewy body diseases

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3485094D1 (de) 1983-01-25 1991-10-31 Ciba Geigy Ag Neue peptidderivate.
GB8815795D0 (en) 1988-07-02 1988-08-10 Bkl Extrusions Ltd Glazing bead
NZ230747A (en) 1988-09-30 1992-05-26 Bror Morein Immunomodulating matrix comprising a complex of at least one lipid and at least one saponin; certain glycosylated triterpenoid saponins derived from quillaja saponaria molina
NZ253137A (en) * 1992-06-25 1996-08-27 Smithkline Beecham Biolog Vaccine comprising antigen and/or antigenic composition, qs21 (quillaja saponaria molina extract) and 3 de-o-acylated monophosphoryl lipid a.
PL178578B1 (pl) 1993-03-23 2000-05-31 Smithkline Beecham Biolog Zawiesina cząstek 3-0-deacylowanego monofosforylolipidu A i sposób jej wytwarzania oraz kompozycja szczepionki zawierającej antygen w połączeniu z 3-0-deacylowanym monofosforylolipidem A i sposób jej wytwarzania
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
AUPM873294A0 (en) 1994-10-12 1994-11-03 Csl Limited Saponin preparations and use thereof in iscoms
GB9513261D0 (en) 1995-06-29 1995-09-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
AUPO517897A0 (en) 1997-02-19 1997-04-11 Csl Limited Chelating immunostimulating complexes
GB9712347D0 (en) 1997-06-14 1997-08-13 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
CA2302554C (en) 1997-09-05 2007-04-10 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Oil in water emulsions containing saponins
US6303114B1 (en) 1998-03-05 2001-10-16 The Medical College Of Ohio IL-12 enhancement of immune responses to T-independent antigens
JP2002511423A (ja) 1998-04-09 2002-04-16 スミスクライン ビーチャム バイオロジカルズ ソシエテ アノニム ワクチン
CA2347099C (en) 1998-10-16 2014-08-05 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Adjuvant systems comprising an immunostimulant adsorbed to a metallic salt particle and vaccines thereof
AUPP807399A0 (en) 1999-01-08 1999-02-04 Csl Limited Improved immunogenic lhrh composition and methods relating thereto
EP2204186B1 (en) 1999-02-17 2016-04-06 CSL Limited Immunogenic complexes and methods relating thereto
TR200103018T2 (tr) 1999-04-19 2002-02-21 Beecham Biologicals S.A. Smithkline İmmünostimülatör oligonükleotid ve saponin içeren katkı bileşikleri.
TR200200777T2 (tr) 1999-09-24 2002-09-23 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Polioksietilen alkil eteri veya esteriyle en az bir iyonik olmayan yüzey aktif maddeli adjuvant.
IL148672A0 (en) 1999-09-24 2002-09-12 Smithkline Beecham Biolog Use of combination of polyxyethylene sorbitan ester and octoxynol as adjuvant and its use in vaccines
CA2466841A1 (en) 2001-11-21 2003-06-05 New York University Synthetic immunogenic but non-deposit-forming polypeptides and peptides homologous to amyloid .beta., prion protein, amylin, .alpha.-synuclein, or polyglutamine repeats for induction of an immune response thereto
TW200509968A (en) 2002-11-01 2005-03-16 Elan Pharm Inc Prevention and treatment of synucleinopathic disease
US8697082B2 (en) * 2002-11-01 2014-04-15 Neotope Biosciences Limited Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
US7358331B2 (en) * 2003-05-19 2008-04-15 Elan Pharmaceuticals, Inc. Truncated fragments of alpha-synuclein in Lewy body disease
SI2361928T1 (sl) 2003-05-19 2017-07-31 Prothena Biosciences Limited Skrajšani fragmenti alfa-sinukleina pri bolezni Lewyjevih telesc
JPWO2004113535A1 (ja) 2003-06-22 2007-09-20 早出　広司 凝集抑制作用を有するシヌクレイン変異体
NZ553244A (en) 2004-07-18 2009-10-30 Csl Ltd Immuno stimulating complex and oligonucleotide formulations for inducing enhanced interferon-gamma responses
JP2008506683A (ja) 2004-07-18 2008-03-06 コーリー ファーマシューティカル グループ， リミテッド 先天免疫応答を誘導するための方法および組成物
TWI382019B (zh) 2005-08-19 2013-01-11 Array Biopharma Inc 作為類鐸受體（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）調節劑之胺基二氮雜呯
AU2007269557B2 (en) 2006-07-07 2013-11-07 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptor 7
PE20091236A1 (es) 2007-11-22 2009-09-16 Astrazeneca Ab Derivados de pirimidina como immunomoduladores de tlr7
US8466167B2 (en) 2008-03-03 2013-06-18 Irm Llc Compounds and compositions as TLR activity modulators
RS53059B (en) 2008-03-24 2014-04-30 4Sc Discovery Gmbh NEW SUBSTITUTED IMIDAZOCHINOLINES
JP5747414B2 (ja) * 2008-04-29 2015-07-15 バイオアークティック ニューロサイエンス アーベー α−シヌクレイン関連疾患についての治療および診断方法における使用のための抗体およびワクチン
DK2313111T3 (da) 2008-08-01 2013-12-02 Ventirx Pharmaceuticals Inc Toll-lignende receptoragonistformuleringer og anvendelse deraf
WO2010129674A2 (en) * 2009-05-05 2010-11-11 New York University Immunotherapy targeting of the shared abnormal conformational state of amyloidogenic peptides/proteins

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009103105A2 (en) * 2008-02-22 2009-08-27 Affiris Ag Mimotope
WO2011020133A1 (en) * 2009-08-21 2011-02-24 Affiris Ag Use of mimotopes of alpha-synuclein epitopes for treating lewy body diseases

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108025073A (zh) * 2015-08-06 2018-05-11 葛兰素史密斯克莱知识产权发展有限公司 Ox40抗体和tlr4调节子的组合及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
US20160008443A1 (en) 2016-01-14
EP2844280A1 (en) 2015-03-11
TW201345928A (zh) 2013-11-16
AR090918A1 (es) 2014-12-17
US20150093432A1 (en) 2015-04-02
WO2013164354A1 (en) 2013-11-07
AU2013255859A1 (en) 2014-12-11
EP2659906A1 (en) 2013-11-06
HK1207989A1 (zh) 2016-02-19
JP2015517457A (ja) 2015-06-22
CA2872135A1 (en) 2013-11-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104411328A (zh) 组合物
US10005825B2 (en) Compositions and methods related to diseases associated with deposits of amyloid, tau, and alpha-synuclein
US20150306194A1 (en) Method for treating a synucleiopathy
KR100850473B1 (ko) 면역원성이 불량한 항원의 면역원성을 향상시키는 약제조성물
TW201345927A (zh) 組成物
JP7563765B2 (ja) カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ｃｇｒｐ）を標的とするペプチド免疫原ならびに片頭痛の治療及び予防のためのそれらの配合物
US20220054631A1 (en) MHC Class I Associated Hepatitis B Peptides
TW202142551A (zh) 針對pcsk9胜肽免疫原及其預防和治療pcsk9介導疾病的製劑
KR20200116062A (ko) 면역원성 조성물 및 숙주에서 면역 반응을 증진시키는 방법
US11344614B2 (en) Pharmaceutical compositions comprising dengue virus-specific multiple HLA-binding T cell epitopes
TW201348264A (zh) 組成物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1207989

Country of ref document: HK

C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20150311

REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: WD

Ref document number: 1207989

Country of ref document: HK