CN104383014A - 一种治疗矽肺病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中药领域，具体涉及一种治疗矽肺病的药物组合物。发明名称为一种治疗矽肺病的药物组合物及其制备方法。该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：冰凉花1～3，地锦槭1～3，半边钱1～3。该药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。该药物组合物可用于制备治疗矽肺病的药物。

Description

一种治疗矽肺病的药物组合物及其制备方法
 
技术领域：
本发明属于中药领域，涉及一种由冰凉花、地锦槭、半边钱组成的具有治疗矽肺病的药物组合物。
 
技术背景：
矽肺又称硅肺，是尘肺中最为常见的一种类型，是由于长期吸入大量游离二氧化硅粉尘所引起，以肺部广泛的结节性纤维化为主的疾病。矽肺是尘肺中最常见、进展最快、危害最严重的一种类型。我国每年有为2万例左右的尘肺新患者出现。因此，尘肺的防治是一项艰巨的工作。
临床表现:尘肺病无特异的临床表现，其临床表现多与合并症有关。
咳嗽：早期尘肺病人咳嗽多不明显，但随着病程的迸展，病人多合并慢性支气管炎，晚期病人多合并肺部感染，均可使咳嗽明显加重。咳嗽与季节、气候等有关。
咳痰：咳痰主要是呼吸系统对粉尘的不断清除所引起的。一般咳痰量不多，多为灰色稀薄痰。如合并肺内感染及慢性支气管炎，痰量则明显增多，痰呈黄色粘稠状或块状。常不易咳出.
胸痛：尘肺病人常常感觉胸痛，胸痛和尘肺临床表现多无相关或平行关系。部位不一，且常有变化，多为局限性。一般为隐痛，也可胀痛、针刺样痛等。
呼吸困难：随肺组织纤维化程度的加重，有效呼吸面积减少，通气/血流比例失调，呼吸困难也逐渐加重。合并症的发生可明显加重呼吸困难的程度和发展速度。
咯血：较为少见，可由于呼吸道长期慢性炎症引起粘膜血管损伤，痰中带少量血丝；也可能由于大块纤维化病灶的溶解破裂损及血管而使血量增多。
其它：除上述呼吸系统症状外，可有程度不同的全身症状，常见有消化功能减。
肺纤维化是许多慢性肺部疾病的终末病理过程，其发病率和死亡率各不相同，严重程度各异，但共同特点是缺少特异性治疗。本发明药物组合物具有抗炎、抗氧化、清除体内自由基、抑制恶性肿瘤生长和转移等多种活性，本发明药物组合物直接清除氧自由基的抗氧化作用甚至超过经典抗氧化剂维生素C和维生素E。
 
发明内容：
本发明的目的是提供一种治疗矽肺病的药物组合物。
本发明的另一目的是提供药物组合物的制备方法。
本发明的还提供该药物组合物在制备治疗矽肺病以及肺纤维化、肺炎药物中的应用。
本发明的目的是通过以下方式实现的：
一种治疗矽肺病的药物组合物，是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 1～3，地锦槭1～3，半边钱1～3。    
所述药物组合物优选是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 1，地锦槭2，半边钱3。
    所述药物组合物优选是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 2，地锦槭3，半边钱2。
所述药物组合物优选是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 1，地锦槭1，半边钱1。
所述药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成口服制剂。
所述药物组合物制备成的口服制剂为片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。
所述药物组合物采用如下方法制备：取冰凉花、地锦槭、半边钱，混合，药材加5～15倍量水煎煮1～3次，每次0.5～2 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为40%～60%，充分搅拌，静置12～48 h，取上清液，残渣加适量40%～60%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12～48h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒剂，即得。
所述药物组合物优选采用如下方法制备：取冰凉花、地锦槭、半边钱，混合，药材加10倍量水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒剂，即得。
所述药物组合物可用于制备治疗矽肺病的药物。
所述药物组合物可用于制备治疗肺纤维化的药物。
所述药物组合物可用于制备治疗肺炎的药物。
本发明所述的药物组合物中的冰凉花为毛茛科侧金盏花属植物冰凉花Adonis amurensis Regel et Radde[A.vernalis L. var . amurensis Finet et Gagnep.]的带根全草；地锦槭为槭树科槭属植物色木槭Acer mono Maxim.[A.pictum Thunb.]的枝、叶；半边钱为豆科蝙蝠草属植物铺地蝙蝠草Christia obcordata (Poir.)Bahn.f.[Hedysarum obcordatum Poir.;Lourea oncordata Desv.]的全草。
通过如下实验研究验证本发明的技术效果：
实验一：本发明药物组合物治疗二氧化硅粉尘致肺纤维化大鼠的实验研究
本研究旨在探讨本发明药物组合物对游离二氧化硅粉尘所致肺纤维化的干预作用，同时也为矽肺的防治提供新的思路。
    1材料与方法
1.1材料
雄性健康成年SPF级SD大鼠，体重180～220g，6周龄，北京维通利华实验动物有限公司提供；饲养于烟台大学动物实验研究中心屏障环境；二氧化硅(游离二氧化硅含量≥99%，＜5μm的粒子≥99%)；HYP试剂盒、CAT试剂盒、GSH-Px试剂盒均购自南京建成生物技术有限公司；其余化学试剂均为国产或进口分析纯级。
1.2药物与试剂配制
二氧化硅粉尘悬液配制：称取质量为5g的二氧化硅粉尘(充分研磨)，加0.9%的生理盐水溶解到100ml，配出浓度为50mg/ml的二氧化硅粉尘悬液；临用前高压灭菌并加入青霉素钠2500U/ml。
本发明药物组合物：取干燥的冰凉花 333g、地锦槭333g、半边钱333g，混合，药材加10000mL水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，的1g生药/mL的浸膏；根据大鼠体重每天灌胃500mg/kg的本发明药物组合物。
1.3方法
1.3.1实验动物分组
大鼠适应性饲养1周后编号，按体重随机分为6组，即对照组、染尘组(7、14、21和28d)、本发明药物组合物干预组，每组8只。采用非暴露式气管内注入法，对照组大鼠经气管注入无菌生理盐水1ml，4个染尘组和本发明药物组合物干预组均在第1天一次性灌肺50mg/ml的二氧化硅混悬液1ml，本发明药物组合物干预组每天灌胃50mg/kg的本发明药物组合物至第28天处死，对照组和染尘组每天以无菌生理盐水灌胃。大鼠在屏障动物实验室饲养，自由饮水，分别于7、14、21、28d后处死。
1.3.2血清及肺组织标本的收集
将各组大鼠称重后以0.3%戊巴比妥钠腹腔注射(1ml/100g体重)腹腔注射麻醉，右心室采血(约4ml)处死大鼠。剪开左心耳，经右心室注入无菌生理盐水，灌洗双肺至苍白胶冻样。结扎右主支气管，由左主支气管向左肺内注入4%多聚甲醛，后将左肺组织放入4%多聚甲醛中固定。随机在不同部位取材3块，石蜡包埋，制作成5μm的切片，HE染色观察肺泡炎和肺纤维化程度。同时收集右肺用于肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline，HYP)含量以及过氧化氢酶(catalase，CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase，GSH-Px)的活性测定。
1.3.3肺组织中抗氧化酶和HYP的含量检测
GSH-Px测定采用二硫代二硝基苯甲酸法；比色法检测肺组织中HYP的表达含量；具体操作严格按试剂盒说明书进行。
1.4统计学处理
建立Excel数据库，SPSS13.0统计软件进行数据分析。实验数据均采用±s表示，样本均数的比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验，以α=0.05为检验水准，P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1一般情况观察
对照组大鼠精神状态良好，饮食、活动、体重增长正常；染尘组大鼠偶有出现精神不振，皮毛枯槁，无光泽，摄食及体重下降；本发明药物组合物干预组大鼠精神状态良好，饮食较好，毛发较润泽，状态较好于染尘组。
2.2肺组织病理学变化
2.2.1肉眼观察结果
对照组：肺组织基本正常，有轻微灶性出血点。
染尘组：7d时，肺中部有白色病灶，明显肿胀；
14d时，双肺弥漫性出血、肿胀，呈豆腐渣样改变，以左下、右上肺较为严重，切面有泡沫样液体渗出；
21d时，双肺海绵样改变，肺包膜紧张，体积增大，有片状出血；
28d时，双肺有针头大小散在的灰白结节，分布较均匀，触之有砂粒感。
本发明药物组合物干预组：肺组织病理改变介于14d染尘组和对照组之间。
2.2.2镜下观察结果
按照实验性矽肺四级分类法，将矽肺分为4级：0级，未发生病变；Ⅰ级，细胞性结节；Ⅱ级，细胞纤维性结节；Ⅲ级，纤维细胞性结节；Ⅳ级，纤维性矽结节，并可见部分结节融合。
肺组织结构相对清晰，肺泡间隔未见增厚，炎症反应轻微。染尘组：注入二氧化硅粉尘后第7天，肺泡隔水肿并明显增厚，肉芽肿内上皮样细胞数量增加，伴成纤维细胞增生；14d时，肺泡结构破坏，出现斑片状纤维化，细胞结节数量多；21d时，肉芽肿大面积纤维化，肺泡间隔断裂现象较严重，结节间有灶性肺气肿形成；28d时，纤维化损害进一步扩大，肺泡结构大部遭到破坏，部分肺泡腔消失，可见巨大纤维性结节。本发明药物组合物干预组的HE染色结果介于染尘组与对照组之间，肺泡壁可见充血、水肿，正常肺泡结构破坏较少，炎性细胞浸润较轻，胶原纤维增生较少，肺泡炎和纤维化均有不同程度的减轻，见表1。
表1各组大鼠肺的病理分级
2.3本发明药物组合物对肺组织中抗氧化酶CAT、GSH-Px活性和HYP含量的影响
由表2可见，与对照组比较，染尘组肺组织中CAT和GSH-Px的活性明显降低(P＜0.05)，而本发明药物组合物干预组肺组织中CAT和GSH-Px的活性明显高于28d染尘组(P＜0.05)。染尘组与对照组相比肺组织中HYP的表达量显著增高(P＜0.05)，而本发明药物组合物干预组肺组织中HYP的表达量明显低于28d染尘组(P＜0.05)。
表2肺组织中抗氧化酶CAT、GSH-Px的活性和HYP含量
组别 CAT/(U/mgprot) GSH-Px/(U/mgprot) HYP/(μg/mg)
对照组 59.53±12.24 335.50±46.74 0.66±0.17
7d染尘组 42.65±8.31 247.78±15.85 0.76±0.17
14d染尘组 24.92±3.96(1) 181.04±24.35(1) 0.98±0.15(1)
21d染尘组 21.02±4.33(1) 172.84±41.29(1) 0.97±0.27(1)
28d染尘组 19.07±2.93(1) 139.60±12.08(1) 1.06±0.14(1)
本发明药物组合物干预组 46.52±6.11(2) 214.67±41.25(2) 0.79±0.18(2)
注：与对照组比较，(1)P＜0.05；与28d染尘组比较，(2)P＜0.05
3讨论
在肺纤维化的形成机制中，氧自由基损伤及其作用机制的研究受到众多学者的重视。与游离二氧化硅粉尘有关的活性氧自由基(ROS)所致的脂质过氧化损伤，在矽肺和肿瘤等的发生和发展中起重要作用。本研究发现二氧化硅粉尘染毒后14天，小鼠肺组织中抗氧化酶CAT和GSH-Px的活性均显著降低，可见机体抗氧化系统在对抗ROS时受到损伤，抗氧化能力严重下降，肺组织细胞内ROS的产生与清除的平衡状态被打破。因为二氧化硅粉尘染毒激活了体内氧化抗氧化平衡系统，从而使体内产生了大量的活性氧，自由基同时也的大量堆积，导致消耗了大量的相应的抗氧化酶，CAT、GSH-PX主要用于清除体内大量堆积的H2O2，从而CAT和GSH-Px的活性就出现了下降的趋势。同时，胶原沉积在肺纤维化发生进展过程中起着重要的作用，HYP是胶原蛋白的组成成分，约占其氨基酸总量的13%，肺组织中HYP的含量可作为其胶原蛋白分解代谢的重要指标，本研究结果进一步证明染尘14天以后的大鼠肺组织中HYP含量显著高于对照组。
在正常生理条件下，机体内抗氧化酶系能及时调节和清除自由基。氧自由基如果释放过多，或是机体清除氧自由基能力下降，氧自由基就会损伤组织细胞，而肺脏是易受损的靶器官之一。目前许多研究表明，在肺纤维化发病过程中，存在着下呼吸道氧化/抗氧化失衡状态。因此，在寻求治疗肺纤维化有效药物的研究中，增强机体的抗氧化能力，尤其是清除氧自由基的能力，已成为衡量疗效的标准之一。本实验结果显示，在加入本发明药物组合物后肺组织中的CAT、GSH-PX的活性又出现在了上升的趋势，HYP的表达量出现了下降趋势，由此可以看出，本发明药物组合物能不同程度调节大鼠肺纤维化模型体内的自由基代谢，提高模型大鼠体内抗氧化酶CAT与GSH-Px的活性，降低HYP的含量。这种作用说明，本发明药物组合物能够增加氧自由基清除剂的含量，降低氧自由基代谢产物的损害，并且具有改变胶原代谢的作用，对游离二氧化硅粉尘致大鼠肺损伤具有一定的保护作用，从而缓解肺泡炎程度，减轻大鼠肺纤维化病变。
本发明药物对矽肺病动物模型的治疗效果表明，该药能使胆碱酯酶和单胺氧化酶活力降低，使丙二醛的含量减少，血液流变学改善，全血粘度和血浆粘度降低，表皮基底细胞和棘细胞黑色素增加，且黑素颗粒细胞数也明显增加，本发明药物为一纯中药制剂，显示在长期的治疗过程中具有较好的安全性，符合矽肺病的基本治疗原则，有利于患者的短期利益和长远利益。
实验二：本发明药物组合物颗粒剂提取及纯化工艺优选
根据方中化学成分的特性，选择加拿大麻苷和矢车菊苷为指标成分，采用正交试验优选本发明药物组合物颗粒的水提工艺，并通过比较超滤法和醇沉法以筛选其纯化工艺，为该制剂的临床应用及推广提供参考。
1 材料
1100 系列高效液相色谱仪(美国Agilent 公司)，XS 205 DU 型电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司) 。冰凉花、地锦槭、半边钱等3味中药均购自亳州福春堂中药饮片有限公司，均符合《中国药典》2010 年版一部各项下相关规定。矢车菊苷、加拿大麻苷对照品（中国食品药品检定研究院），乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 加拿大麻苷的含量测定
2. 1. 1 色谱条件：Kromasil ODS C18色谱柱(4. 6mm×250 mm，5μm)，流动相乙腈-水(35∶65)，流速1. 0 mL·min-1，柱温40 ℃，ELSD 检测器，雾化器温度80 ℃，蒸发器温度100 ℃，载气流速1. 5 mL·min-1，进样量10μL。理论板数按加拿大麻苷峰计算不低于4000，见附图1。
2.1.2 溶液的制备：精密称取加拿大麻苷对照品适量，加甲醇制成0. 5 g·L-1的对照品溶液。按处方比例称取2倍处方量药材共166 g，加10 倍量水提取3次，每次1 h，合并水提液，减压浓缩至100 mL，精密量取20 mL，用水饱和的正丁醇振摇提取4 次，每次40 mL，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2 次，每次40 mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至10 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，得供试品溶液。取缺黄芪的处方药材适量，同法制备阴性对照溶液。
2. 1. 3 线性关系考察：精密称取加拿大麻苷对照品15. 60 mg，置10 mL棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得贮备液。精密吸取该贮备液适量，稀释得0. 78，0. 624，0. 468，0. 312，0. 156 g·L-1的系列对照品溶液，按2. 1. 1 项下色谱条件测定，以质量浓度的对数为横坐标，以峰面积的对数为纵坐标，得回归方程Y = 1. 547 8X－1. 205(Ｒ2 = 0. 999 8)，线性范围1. 56～7. 80μg。
2. 1. 4 稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于配制后0，1，2，4，8h 按2.1. 1 项下色谱条件测定。结果加拿大麻苷峰面积的RSD1. 3%，表明供试品溶液在8 h 内稳定性良好。
2. 1. 5 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液，按2. 1. 1 项下色谱条件连续进样5 次，计算加拿大麻苷峰面积的RSD0. 98%，表明仪器精密度良好。
2. 1. 6 重复性试验：取同一提取液5 份，按2. 1. 2项下方法制备供试品溶液，按2. 1. 1 项下色谱条件测定，结果加拿大麻苷平均质量浓度0. 124 g·L-1，
RSD1. 4%，表明本方法重复性良好。
2. 1. 7 加样回收率试验：精密量取已知加拿大麻苷质量(2. 4738 mg) 的提取液20 mL，共6 份，各加入加拿大麻苷对照品溶液2. 0，2. 0，3. 0，3. 0，4. 0，4. 0 mL，按2. 1. 2 项下方法制备供试品溶液，按2. 1. 1 项下色谱条件测定，见表3，表明该方法回收率良好。
表3本发明药物组合物颗粒剂提取液中加拿大麻苷加样回收率试验
注: 样品中量均为2. 4738 g。
2. 2 矢车菊苷的含量测定
2. 2. 1 色谱条件：Kromasil ODS C18色谱柱(4. 6mm×250 mm，5 μm)，流动相甲醇-水(27∶73)，流速0. 8 mL·min-1，柱温30 ℃，检测波长271 nm，进样量10 μL。理论板数按矢车菊苷峰计算不低于3000，见附图2。
2. 2. 2 溶液的制备：精密称取矢车菊苷对照品适量，加甲醇制成0. 5 g·L- 1的对照品溶液。精密量取2. 1. 2 项下浓缩液20 mL，蒸干，残渣加流动相溶解并转移至25 mL 量瓶中，定容，摇匀，滤过，精密移取续滤液3 mL至10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。取缺秦艽的处方药材适量，同法制备阴性样品溶液。
2. 2. 3 线性关系考察：精密称取矢车菊苷对照品20 mg，置于25 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得储备液。稀释得304. 0，152. 0，76. 0，30. 4，15. 2，7. 6 mg·L-1的系列对照品溶液，按2. 2. 1 项下方法测定，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程Y = 14. 575X－2. 983 (R2 = 1)，线性范围0. 076～3. 04 μg。
2. 2. 4 稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于配制后0，1，2，4，8h 按2. 2. 1 项下方法测定，计算矢车菊苷峰面积的RSD1. 6%，表明供试品溶液在8 h内基本稳定。
2. 2. 5 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液，按2. 2. 1 项下方法重复进样5 次，计算矢车菊苷峰面积的RSD0. 71%，表明仪器精密度良好。
2. 2. 6 重复性试验：取同一提取液5 份，按2. 2. 2项下方法制备供试品溶液，按2. 2. 1 项下方法测定，计算矢车菊苷平均质量浓度0. 617 g·L-1，RSD1. 4%，表明本方法重复性良好。
2. 2. 7 加样回收试验：精密量取已知矢车菊苷质量(18. 5136 mg) 的提取液30 mL，共6 份，分别精密加入矢车菊苷对照品1. 520，1. 520，2. 280，2. 280，3. 040，3. 040 mg，按2. 2. 2 项下方法制备供试品溶液，按2. 2. 1 项下方法测定，计算回收率平均值98. 73%，RSD1. 6%，表明本法准确可靠。
2. 3 提取工艺优选：以加拿大麻苷(Y1) 和矢车菊苷(Y2) 质量的综合评分为指标，综合评分= (Y1×10 + Y2) /2。选取加水量、提取时间、提取次数为考察因素，按处方比例称取药材共9 份，每份166 g，采用L9(34) 正交试验优化水提工艺条件，试验安排及结果见表4，方差分析见表5。由直观分析可知，各因素对本发明药物组合物颗粒水提工艺的影响顺序为C＞A＞B。方差分析表明因素C具有极显著性影响，因素A 影响显著，因素B 则无显著性影响。从节约能源和提高生产效率角度考虑，将提取时间定为最小，确定最佳提取方案为A3B1C3，即药材加10倍量水煎煮3次，每次1 h。按处方比例称取药材共166 g，共3份，按优选的工艺条件进行提取，计算20 mL 提取液中加拿大麻苷、矢车菊苷质量平均值分别为4. 34，43. 7 mg，RSD均为1. 8%，表明该方案切实可行。
表4本发明药物组合物颗粒水提工艺正交试验安排及直观分析
NO. A 加水量/倍 B 提取时间/h C 提取数/次 D(空白) 加拿大麻苷/mg 矢车菊苷/mg 综合评分
1 6 1.0 1 1 0.77 9.7 8.7
2 6 1.5 2 2 2.19 28.2 25.1
3 6 1.2 3 3 4.41 31.1 37.6
4 8 1.0 2 3 2.47 18.5 21.6
5 8 1.5 3 1 4.05 35.2 37.8
6 8 1.2 1 2 1.19 19.0 15.4
7 10 1.0 3 2 3.50 45.9 40.4
8 10 1.5 1 3 2.12 23.2 22.2
9 10 1.2 2 1 3.59 44.8 40.3
K1 23.8 23.6 15.4 28.9      
K2 24.9 28.4 29.0 27.0      
K3 34.3 31.1 38.6 27.1      
R 10.5 7.5 23.2 1.9      
表5 综合评分方差分析
方差来源 SS MS F P
A 199. 27 99. 63 27. 93 ＜ 0. 05
B 87. 26 43. 63 12. 23 ＞ 0. 05
C 812. 91 406. 45 113. 92 ＜ 0. 01
D(误差) 7. 14 3. 57    
注: F0. 01(2，2) = 99. 00，F0. 05(2，2) = 19. 00
2. 4 纯化工艺优选
2. 4. 1 样品制备方法：按处方比例称取药材664 g，加10倍量水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，均分成4份。取初滤液1份，依次进行微滤(45 ℃，0. 25 MPa) 、超滤(35 ℃，0. 5 MPa) 、纳滤(30 ℃，1. 6 MPa)，得超滤液。取初滤液2 份，浓缩至相对密度1. 08(80 ℃)，等分成2 份，分别加入乙醇使含醇量分别为50% 和70%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50% 乙醇或70% 乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液1 和醇沉液2。
2.4.2 评价指标及结果：加拿大麻苷和矢车菊苷的保留率分别测定初滤液、超滤液、醇沉液1、醇沉液2中加拿大麻苷和矢车菊苷的含量，计算保留率，结果见表6。分别精密移取初滤液、超滤液、醇沉液1 和醇沉液2 适量，水浴蒸干，105 ℃烘箱干燥3 h，干燥器中冷却30 min，称定质量，计算出膏率，结果见表6。结果显示超滤法出膏率最低，加拿大麻苷、矢车菊苷损失最大; 而不同醇沉法所得指标成分保留率和出膏率均较高，且结果相近，从减少乙醇用量考虑，选择醇沉浓度50%。
表6 不同方法本发明药物组合物颗粒水提液的纯化效果比较
附图说明：
图1：本发明药物组合物颗粒提取液中加拿大麻苷HPLC图；其中：A．对照品; B．供试品; C． 阴性样品; 1. 加拿大麻苷
图2：本发明药物组合物颗粒提取液中矢车菊苷HPLC图；其中：A．对照品; B．供试品; C． 阴性样品; 1. 矢车菊苷
具体实施方式：
实施例1：
处方：冰凉花 600g，地锦槭200g，半边钱200g。
制法：取干燥的冰凉花 600g、地锦槭200g、半边钱200g，混合，药材加5000mL水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入胶囊，制成硬胶囊剂1000粒。
实施例2：
处方：冰凉花 166g，地锦槭332g，半边钱498g。
    制法：取干燥的冰凉花 166g、地锦槭332g、半边钱498g，混合，药材加8000mL水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，压制成片，包衣，制成1000片。
实施例3：
处方：冰凉花 286g，地锦槭429g，半边钱286g。
制法：取干燥的冰凉花 286g、地锦槭429g、半边钱286g，混合，药材加10000mL水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，干燥，制成5000丸。
实施例4：
处方：冰凉花 333g，地锦槭333g，半边钱333g。
制法：取干燥的冰凉花 333g、地锦槭333g、半边钱333g，混合，药材加10000mL水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒剂10000g。
   实施例5：
处方：冰凉花 333g，地锦槭333g，半边钱333g, 多头菊111g,枸杞101g，艾草102g。
制法：取干燥的冰凉花 333g、地锦槭333g、半边钱333g，多头菊111g,枸杞101g，艾草102g混合，药材加10000mL水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒剂10000g。

Claims (10)

1.一种具有治疗矽肺病的药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 1～3，地锦槭1～3，半边钱1～3。
2.  如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 1，地锦槭2，半边钱3。
3. 如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 2，地锦槭3，半边钱2。
4. 如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：冰凉花 1，地锦槭1，半边钱1。
5. 如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。
6. 如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用如下方法制备：取冰凉花、地锦槭、半边钱，混合，药材加5～15倍量水煎煮1～3次，每次0.5～2 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为40%～60%，充分搅拌，静置12～48 h，取上清液，残渣加适量40%～60%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12～48h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒剂，即得。
7. 如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用如下方法制备：取冰凉花、地锦槭、半边钱，混合，药材加10倍量水煎煮3次，每次1 h，合并水煎液，滤过，得初滤液，加入乙醇使含醇量为50%，充分搅拌，静置24 h，取上清液，残渣加适量50%乙醇使溶解，搅拌均匀，静置12 h，取上清液，分别合并2次上清液，得醇沉液，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，制成颗粒剂，即得。
8.如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物在制备治疗矽肺病的药物中的应用。
9.如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物在制备治疗肺纤维化药物中的应用。
10.如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物在制备治疗肺炎药物中的应用。
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