CN104367581B - 二水合水杨酸锌在制备用于治疗乳腺癌药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了二水合水杨酸锌在制备雌激素受体阴性乳腺癌药物中的应用及二水合水杨酸锌的给药剂量，本发明通过实验证明了二水合水杨酸锌可抑制乳腺癌细胞增殖和迁徙，浓度依赖性的促进乳腺癌细胞凋亡。本发明对二水合水杨酸锌发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体地指二水合水杨酸锌在制备用于治疗乳腺癌药物中的应用。
背景技术
全球乳腺癌发病率自20世纪70年代末开始一直呈上升趋势。中国原本不是乳腺癌的高发国家，但由于现代女性长期工作压力大、生活不规律、晚婚晚育、频繁吃避孕药以及久坐不动、缺少锻炼等原因，近年我国乳腺癌发病率的增长速度却高出高发国家1-2个百分点，而且呈现年轻化的发病趋势。由于乳腺癌细胞的高度侵润性、转移性和异质性，使其治疗存在很大困难，另外，部分化疗药物长期使用也使得耐药性问题愈加突出，因此寻求新型有效的抗乳腺癌药物成为科研工作者和医疗工作者的关注重点。
众所周知，炎症和癌症有密切关系，水杨酸及其衍生物作为非甾体类抗炎药物(NSAIDs)已经在各类炎症治疗中广泛应用。在长期使用包含水杨酸和阿司匹林在内的NSAIDs肿瘤患者身上进行的肿瘤风险研究，结果显示使用这些药物可以降低40-50％的大肠癌风险，同时可能抑制肺癌、胃癌等。
同时，中国专利(申请号为201010581178.1)公开了水杨酸钠作为外用制剂中促渗剂的用途，中国专利(申请号为200510042434.9)公开了亚硝脲类抗癌药物和亚硝脲类抗癌药物增效剂作为抗癌体内植入剂治疗癌症。
乳腺癌作为一种高度异质性的癌症，目前还没有特异抑制乳腺癌转移的药物，其致病因素至今未研究清楚，目前普遍研究认为其诱病原因包括物理、化学等各种因素导致乳腺癌细胞增殖和转移特别是周期调控失控和肿瘤抑制子失活或表达受阻。
水杨酸锌是由水杨酸钠与硫酸锌在水中加热反应制取的产物，其二水盐也称二水合水杨酸锌呈无色针状结晶，加热至150℃时变为无水盐，溶于水、乙醇，现有技术中未见其应用领域的报道。
发明内容
本发明的目的就是要解决上述背景技术的不足，提供二水合水杨酸锌在制备雌激素受体阴性乳腺癌药物中的应用。其中二水合水杨酸锌的分子结构式为(Ⅰ)所示。
优选的，所述二水合水杨酸锌的给药剂量为离体25-200μM，在体为20-50mg/kg。
优选的，所述二水合水杨酸锌制成的药物类型为注射剂、粉针剂、口服剂、口含片、喷雾剂、胶囊、栓剂等。
优选的，所述二水合水杨酸锌与其他药物配合制成治疗乳腺癌复方药物。
优选的，所述的二水合水杨酸锌单独制成治疗乳腺癌药物。
本发明的优点在于：
1.本发明对二水合水杨酸锌发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。
2.本发明的二水合水杨酸锌可以人工合成，合成的二水合水杨酸锌纯度可达99％以上，能够保证工业化生产。
3.本发明的二水合水杨酸锌配置成的药物可为多种剂型，如：注射剂、粉针剂、口服剂、口含片、喷雾剂、胶囊、栓剂等。
附图说明
图1为二水合水杨酸锌对MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞的增殖抑制检测示意图。
图2为二水合水杨酸锌对MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞凋亡的影响。
图3为二水合水杨酸锌对MDA-MB-231和BT-20细胞迁移的影响结果分析。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
二水合水杨酸锌对MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞的增殖抑制作用比较。
1.实验材料
1.1细胞株
人乳腺癌细胞株MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20购自中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，CCTCC)。
1.2药品及试剂
2.实验方法：
2.1细胞培养
人乳腺癌MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞株MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20用含有10％FBS、青霉素100μg/ml、链霉素100μg/ml的高糖DMEM培养液于37℃，CO2体积分数为5％的细胞培养箱内培养。
2.2MTS法检测不同浓度药物对MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞生长抑制情况
将细胞接种于96孔细胞培养板中，每孔10000个细胞，过夜待细胞贴壁后，加入不同药液，每个浓度平行5孔，37℃，5％CO2培养24小时候每孔加入5mg/ml MTS 20μl，继续培养4小时，用酶标仪在490nm波长处测出细胞对照组和各药物组的OD值，取各组均值，重复试验3次。以下面的公式计算各组药物对细胞的抑制率IR＝(1-药物组OD值/对照组OD值)×100％。图1为不同浓度二水合双水杨酸合锌加入到MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞中培养24h后，采用MTS法检测药物对细胞生长的影响，结果表明：二水合水杨酸锌明显抑制MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞增殖且呈剂量依赖关系；二水合双水杨酸合锌可以浓度依赖性的抑制MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20细胞增殖，说明抑制乳腺癌细胞增殖是二水合双水杨酸合锌治疗乳腺癌机制之一。
二水合水杨酸锌引起MCF-7、T47D、MDA-MB-231和BT-20凋亡的机制研究。
1.实验材料
1.1细胞株(同增殖抑制实验)
1.2药品及试剂
2.试验方法
2.1流式细胞仪检测细胞凋亡
取对数生长期MCF-7和MDA-MB-231细胞以2×105个/孔的细胞密度接种于6孔培养板中，置于细胞CO2培养箱内培养6-8h待细胞贴壁后，分别加入三种不同浓度的二水合水杨酸锌，终浓度为80μM，160μM，200μM，对照组加同样体积(1ml)的DMEM培养液。继续培养24h，每孔收集约10万细胞，离心后弃上清。加0.5ml的染色缓冲液重悬细胞，分别加入5μlAnnexin V-FITC和10μl PI，4℃染色15min，上机检测细胞凋亡情况。如图2所示，图2中图A-D均为MDA-MB-231细胞；E-H均为MCF-7细胞；A和E为对照组，加入1mlDMEM培养液；B和F中二水合水杨酸锌终浓度为50μM；C和G中二水合水杨酸锌终浓度为100μM；D和H中二水合水杨酸锌终浓度为200μM。结果显示二水合水杨酸锌可以浓度依赖性的促进MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡，而对细胞坏死没有明显影响。
二水合水杨酸锌对MDA-MB-231和BT-20细胞迁移的影响结果分析，划痕实验检测细胞迁移能力。
取对数生长期MDA-MB-231和BT-20细胞以2×105个/孔的细胞密度接种于6孔培养板中，置于细胞CO2培养箱内培养6-8h待细胞贴壁后，用白色枪头划痕，分别加入不同浓度的二水合水杨酸锌，终浓度为10μM，25μM，对照组加同样体积(1ml)的DMEM培养液，继续培养72h或96h，观察处理后迁移速率的改变，并对独立重复试验结果进行统计分析，如图3所示，其中图A和B均为MDA-MB-231细胞，C和D均为BT-20细胞，ZnSal指二水合水杨酸锌溶解后形成的锌盐，图中control表示对照组，10μM和25μM表示加入二水合水杨酸锌后溶液终浓度为10μM和25μM，结果显示二水合双水杨酸合锌抑制了MDA-MB-231和BT-20细胞迁移。
Claims (2)
1.二水合水杨酸锌制备抑制雌激素受体阴性乳腺癌细胞转移药物中的应用，其特征在于，所述乳腺癌细胞为MDA-MB-231和BT-20，所述二水合水杨酸锌的分子结构式为(Ⅰ)所示，所述二水合水杨酸锌的给药剂量为离体时25-200μM，在体时20-50mg/kg
2.如权利要求1所述的二水合水杨酸锌制备抑制雌激素受体阴性乳腺癌细胞转移药物中的应用，其特征在于，二水合水杨酸锌在制备的药物类型为注射剂、口服剂、喷雾剂、胶囊、栓剂。
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| 雌激素受体阴性/阳性MCF-7 细胞增殖速度差异及对鸡血藤提取物敏感性的研究;南楠 等;《北京中医药》;20140531;第33卷(第5期);第386-389页 * |
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