CN104366026A

CN104366026A - 一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂

Info

Publication number: CN104366026A
Application number: CN201410558231.4A
Authority: CN
Inventors: 郭时金; 沈志强
Original assignee: SHANDONG LVDU'ANTE VETERINARY DRUG INDUSTRY Co Ltd
Current assignee: SHANDONG LVDU'ANTE VETERINARY DRUG INDUSTRY Co Ltd
Priority date: 2014-10-20
Filing date: 2014-10-20
Publication date: 2015-02-25

Abstract

本发明公开了本发明公开了一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，包括以下重量配比的组分：中药提取物20～30份、维生素E 10～15份、维生素B₁ 0.5～1份、维生素B₆ 0.2～0.4份、维生素B₁₂ 0.2～0.4份、维生素C 3～5份、低聚木糖10～20份、防腐剂1～3份、抗氧化剂0.5～0.7份,其余重量由葡萄糖补足。其中中药提取物主要有蜂胶、板蓝根多糖、黄芪多糖、淫羊藿多糖、党参多糖、紫锥菊多糖，组成比例为0.5:2:1:2:1:1。本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂具有明显的补充机体维生素、提高机体免疫力、促进生长及提高生产性能等作用。

Description

一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂

技术领域

本发明涉及禽用免疫增强剂技术领域，尤其涉及一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂。

背景技术

为了提高动物机体免疫力，增强动物抗病能力，饲料中添加一定比例的抗生素已成为一种趋势，其弊端也随之显现出来：临床治疗中动物对抗生素类药物的抗药性、动物性食品中抗生素的蓄积，最终将表现为对终末消费者—人类的危害。因此一种绿色、健康、无残留、无毒副作用，不会产生抗药性，对环境无不良影响的免疫增强剂成为人类的迫切需求。

中药在兽医业中的应用已有几百年的历史，特别是抗生素的副作用一次次掀起世界各地对中药研究的高潮，中药作为饲料添加剂应用已有报道，但其应用仅限于几种。中药多糖具有抗肿瘤、抗氧化、抗糖尿病、抗病毒、抗辐射、调节性功能、调血脂等多方面功能，维生素是维持正常的生理功能必需的一类微量有机物质。中药提取物和维生素从不同角度保证动物生长发育、提高动物免疫力，而中药提取物维生素预混料类免疫增强剂却未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种集补充维生素、促进生长、免疫增强、预防应激及提高生产性能等作用于一体的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂。

本发明采用如下技术方案：

本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂是由中药提取物、维生素、低聚木糖、防腐剂、抗氧化剂和葡萄糖组成；其中维生素是由维生素B₁、维生素B₆、维生素B₁₂、维生素C和维生素E组成。

本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂具体是由以下重量份的原料组成：中药提取物20～30份、维生素E10～15份、维生素B₁0.5～1份、维生素B₆0.2～0.4份、维生素B₁₂0.2～0.4份、维生素C3～5份、低聚木糖10～20份、防腐剂1～3份、抗氧化剂0.5～0.7份，葡萄糖924.5～954.6份。

优选本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂具体是由以下重量份的原料组成：中药提取物20、维生素E10、维生素B₁0.6、维生素B₆0.2、维生素B₁₂0.2、维生素C4、低聚木糖12、防腐剂1、抗氧化剂0.5，葡萄糖951.5。上述配方的免疫增强剂适用于雏禽，添加比例为0.1％。

优选本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂具体是由以下重量份的原料组成：中药提取物20、维生素E12、维生素B₁0.5、维生素B₆0.4、维生素B₁₂0.4、维生素C4、低聚木糖10、防腐剂3、抗氧化剂0.7，葡萄糖949。上述配方的免疫增强剂适用于成年家禽，添加比例为0.1％。

所述的中药提取物是由蜂胶、板蓝根多糖、黄芪多糖、淫羊藿多糖、党参多糖及紫锥菊多糖组成，它们的重量比为0.5:2:1:2:1:1。

所述的防腐剂是双乙酸钠、丙酸钠或甲酸钙。

所述的抗氧化剂是乙氧基喹啉、丁基羟基茴香醚或二丁基羟基甲苯。

本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂的制备方法的具体步骤如下：

(1)按配方称取各种原料；

(2)将蜂胶、板蓝根多糖、黄芪多糖、党参多糖、淫羊藿多糖及紫锥菊多糖进行混合，得到一次混合物；

(3)将一次混合物、维生素E、维生素B₁、维生素C、低聚木糖进行第二次混合，得到二次混合物；

(4)在二次混合物中加入维生素B₆、维生素B₁₂、(维生素B₆、维生素B₁₂预先用100倍量葡萄糖预混)防腐剂及抗氧化剂进行第三次混合，得到三次混合物；

(5)在三次混合物中加入剩余的葡萄糖进行第四次混合，即得到成品。

本发明的积极效果如下：

本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，选用的都是常见原料，因此能最大限度控制生产成本。其中维生素是动物体必需的微量有机物，在动物生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用；板蓝根多糖和黄芪多糖具有免疫调节作用，对特异性免疫和非特异性免疫均有一定的促进作用；淫羊藿多糖具有激活胸腺免疫功能、增强T细胞和B细胞的免疫功能；党参多糖、紫锥菊多糖和蜂胶均能提高机体免疫力；低聚木糖有很强的增殖双歧杆菌的功能。本发明的动物免疫增强剂，适宜动物长期服用，不会使动物产生抗药性，可全部或大部分替代饲料中的抗生素。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

实施例1

一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，按下述配比称取原料(g)：中药提取物20、维生素E10、维生素B₁0.6、维生素B₆0.2、维生素B₁₂0.2、维生素C4、低聚木糖12、防腐剂1、抗氧化剂0.5，葡萄糖951.5。

一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂的生产方法，包括以下步骤：

(1)按配方称取各种原料；

实施例1所述禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，适用于雏禽，添加比例为0.1％。

实施例2

一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，按下述配比称取原料(g)：中药提取物20、维生素E12、维生素B₁0.5、维生素B₆0.4、维生素B₁₂0.4、维生素C4、低聚木糖10、防腐剂3、抗氧化剂0.7，葡萄糖949。

生产方法同实施例1。

实施例2所述禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，适用

于成年家禽，添加比例为0.1％。

本发明的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂对动物免疫能力的增强功能可通过以下的试验方法来证明。

试验例1禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂对雏鸡生产性能的影响

1.材料与方法

1.1试验鸡和分组

1日龄海兰褐公雏240只，随机分为对照组和试验组2组，每组4个重复，每个重复30只鸡。预试期3天，试验期6周。试验鸡饲喂玉米-豆粕型日粮，对照组饲料组成见表1，试验组在基础日粮的基础上添加实施例1所述预混料。

表1雏鸡基础日粮营养组成

成分	含量/％	成分	含量/％
				玉米	66.0	蛋氨酸	0.15
豆饼	30.0	食盐	0.37
				骨粉	3.21	微量元素	0.1
赖氨酸	0.11	多维	0.02

1.2禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂对雏鸡生产性能影响

每日记录采食量、发病及死亡数，计算平均日增重、平均日采食量、料重比及成活率。试验结果见表2。所有数据采用SPSS统计学软件进行分析比较。

1.3禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂对免疫器官和血清学指标的影响

试验结束时屠宰取样，分别称重脾脏、胸腺和法氏囊，计算各脏器系数；通过心脏无菌采集血样制备血清，采用免疫浊度法试剂盒测定血清抗体IgA、IgG、IgM，补体C3、C4，ELISA方法试剂盒测定血清中细胞因子IL-1、IL-2含量，在CHEM-5半自动生化分析仪上测定。结果见表3-表5。

2.试验结果

表2对照组和试验组雏鸡生产性能比较

注：同一行数据小写字母不同者表示两组数据相比差异显著(p﹤0.05)，相同者表示两组数据相比差异不显著(p﹥0.05)。

由上表可以看出，经过六周的饲喂试验经过六周的饲喂试验，试验组平均日增重明显较快，较对照组提高7.35％，二者呈显著性差异(p﹤0.05)，整个试验期间，对照组和试验组的采食量无明显区别，但料肉比分别为3.05和2.85，两组数据相比差异显著(p﹤0.05)。

表3对照组和试验组雏鸡免疫器官指数比较

由上表可以看出，试验组脾脏指数、胸腺指数及法氏囊指数分别比对照组提高24.86％、30.10％和5.34％，均呈显著性差异(p﹤0.05)。

表4对照组和试验组雏鸡血清IgG、IgA和IgM及C3、C4水平比较

与对照组相比，试验组鸡血清中IgG和IgA提高了3.0％和7.7％，差异不显著；C3和C4水平提高了30.6％和23.9％，差异显著；血清中IgM水平降低3.4％，但差异不显著。

表5对照组和试验组雏鸡血清中IL-1和IL-2水平比较

与对照组相比，试验组血清中IL-1和IL-2水平分别提高了48.9％(P<0.05)和14.5％(P>0.05)。

综上所述，实施例所述禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂可明显提高雏鸡的生长速度，提高饲料报酬；同时，可同时，实施例所述预混料可显著提高雏鸡脾脏、胸腺、法氏囊等免疫器官指数及C3、C4、IL-1水平，具有明显的免疫促进作用；

试验例2禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂对蛋鸡生产性能的影响

1.材料与方法

1.1试验鸡和分组

试验选用120只体况良好，产蛋率和体重相近的35周龄罗曼褐商品蛋鸡，随机分为试验组和对照组两组。试验预试期3天，试验期60天。对照组饲料组成见表6，试验组在基础日粮的基础上添加实施例2所述预混料。

表6蛋鸡基础日粮营养组成

成分	含量/％	成分	含量/％
				玉米	56.0	酒精蛋白粉	5.0
豆粕	14.6	玉米蛋白粉	2.0
				菜粕	3.4	石粉	8.2
花生饼	3.0	沸石	1.0
				鱼粉	2.0	磷酸氢钙	1.8
酵母粉	2.4	预混料	0.6

1.2禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂对蛋鸡生产性能影响

每天观察试验鸡的精神状态，采食状况，记录产蛋数、蛋重、饲料消耗量及鸡只死亡情况。所有数据采用SPSS统计学软件进行分析比较。

1.3禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂外周血淋巴细胞转化率的影响

(1)取2.0ml无菌抗凝血与等量Hanks液混合，稀释悬浮细胞。将细胞悬液小心缓慢加在与血液等量(2.0ml)的淋巴细胞分离液上，使血液重叠于分层液上，室温水平离心2000gpm20min。除去最上面的血浆，用毛细管将血浆和分层液之间白雾状淋巴细胞层吸至含5mlHanks液的试管中，混匀后1000rpm10min，清洗两次，洗去残余的淋巴细胞分离液。用台盼蓝染色检测细胞活力>95％并计数。用含20％胎牛血清的细胞培养液将细胞调整为2×10⁶个细胞/ml。

(2)96孔细胞培养板每孔加入单细胞悬液100μl和100μlPHA，每组设置5个重复孔，同时设置培养液空白对照，放5％CO₂、37℃细胞培养箱静置培养72h，终止培养前4小时每孔加入5mg/ml四甲基偶氮唑盐(MTT)溶液20μl继续培养4h后，弃去培养孔中的上清液，每孔再加入DMSO溶液100μl，在微量振荡器上震荡使其充分混匀；于室温避光静置15min后，测定570nm波长的吸光值。

1.4禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂脾脏细胞增殖试验

(1)无菌取鸡脾脏，置于无血清RPMI-1640培养液(含青霉素和链霉素)平皿中，反复冲洗，用针筒栓小心将脾压碎，经400目不锈钢滤网过滤，用培养液清洗两次(1000rpm，5min)，用含20％胎牛血清的RPMI-1640培养液制成细胞悬液。用含20％胎牛血清的RPMI-1640培养液调整脾淋巴细胞数为6×10⁶个细胞/ml。

(2)细胞接种：用96孔平板培养，每孔加上述细胞悬液100μl、另加ConA或PHA，每组设5个重复孔，同时设培养液空白对照，放5％CO₂、37℃细胞培养箱静置培养48h。

(3)MTT法测细胞增殖：于终止培养前4小时，每孔加5mgmlMTT溶液20μl，继续放培养箱培养4小时后每孔再加入DMSO溶液100μl，在微型振荡器上振荡10分钟使其变澄清，之后用酶联免疫检测仪(BIO-RAD)570nm波长下检测每孔OD₅₇₀值。

2.试验结果

试验期间，对照组和试验组试验鸡生长状况正常。试验结果见下表。

表7对照组和试验组蛋鸡生产性能比较

由表7可以看出，对照组产蛋率为78.80％，试验组为88.35％，试验组比对照组提高12.11％，二者相比差异显著。对照组料蛋比为2.56，显著高于试验组(2.40)，说明中药提取物维生素预混料可显著提高产蛋鸡的产蛋率，同时，提高饲料报酬。

表8本发明对鸡外周血淋巴细胞转化率的影响结果

由表8可以看出，与对照组相比，试验组在Con诱导下外周血T-淋巴细胞转化率提高了13.4％，但差异不显著；在Lps诱导B-淋巴细胞转化率提高了15.2％，差异显著(P<0.05)。

表9本发明对鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响结果

由表9可以看出，与对照组相比，试验组在Con诱导下脾脏细胞转化率提高了15.7％(P<0.05)，在Lps诱导下脾脏细胞转化率提高了16.1％(P<0.05)。

综上所述，实施例2所述禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂可明显提高蛋鸡的产蛋率，降低料蛋比，提高饲料报酬；同时，可明显提高LPS诱导的B淋巴细胞转化率和CON及LPS诱导的脾脏细胞转化率，具有明显的提高机体免疫力的作用。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims

1.一种禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂是由中药提取物、维生素、低聚木糖、防腐剂、抗氧化剂和葡萄糖组成。

2.如权利要求1所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的维生素是由维生素B₁、维生素B₆、维生素B₁₂、维生素C和维生素E组成。

3.如权利要求2所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂具体是由以下重量份的原料组成：中药提取物20～30份、维生素E10～15份、维生素B₁ 0.5～1份、维生素B₆ 0.2～0.4份、维生素B₁₂ 0.2～0.4份、维生素C3～5份、低聚木糖10～20份、防腐剂1～3份、抗氧化剂0.5～0.7份，葡萄糖924.5～954.6份。

4.如权利要求2所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂具体是由以下重量份的原料组成：中药提取物20、维生素E10、维生素B₁ 0.6、维生素B₆ 0.2、维生素B₁₂ 0.2、维生素C4、低聚木糖12、防腐剂1、抗氧化剂0.5，葡萄糖951.5。

5.如权利要求2所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂具体是由以下重量份的原料组成：中药提取物20、维生素E12、维生素B₁ 0.5、维生素B₆ 0.4、维生素B₁₂ 0.4、维生素C4、低聚木糖10、防腐剂3、抗氧化剂0.7，葡萄糖949。

6.如权利要求1-5任一项所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的中药提取物是由蜂胶、板蓝根多糖、黄芪多糖、淫羊藿多糖、党参多糖及紫锥菊多糖组成，它们的重量比为0.5:2:1:2:1:1。

7.如权利要求1-5任一项所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的防腐剂是双乙酸钠、丙酸钠或甲酸钙中的一种。

8.如权利要求1-5任一项所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂，其特征在于:所述的抗氧化剂是乙氧基喹啉、丁基羟基茴香醚或二丁基羟基甲苯中的一种。

9.一种制备如权利要求6所述的禽用中药提取物维生素预混料类免疫增强剂的方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：

(1)按配方称取各种原料；

(4)在二次混合物中加入维生素B₆、维生素B₁₂、防腐剂及抗氧化剂进行第三次混合，得到三次混合物，维生素B₆和维生素B₁₂预先用100倍量葡萄糖预混；