CN104360091B - 一种芯片、使用方法及用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物检测领域，特别涉及微流控芯片领域，具体涉及一种芯片、使用方法及用途。该芯片具有反应孔303、与所述反应孔303连通的流路302和加样孔301；所述反应孔303设置于所述流路302的同一侧或两侧；所述反应孔303与所述流路302呈平行分布；所述反应孔303与所述流路302的连接处501不高于所述反应孔303的下边沿。本发明提供的芯片能将反应液自动分配进不同的反应孔并互相隔离，反应完成后可以通过离心将不同反应孔中的液体重新汇聚在一起回收出芯片。

Description

一种芯片、使用方法及用途

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别涉及微流控芯片领域，具体涉及一种芯片、使用方法及用途。

背景技术

微流控技术是一种通过微管道及微腔体等结构来控制微流体完成各种生物和化学过程的一种技术。目前已经广泛应用于细胞培养、细胞刺激、细胞裂解、核酸提取、核酸扩增反应、免疫分析、环境监测等相关研究中。这些应用往往需要多个反应单元，实现对多个样本或同一个样本的多个分析或检测指标的同步反应。所以这些分析需要的微流控芯片通常含有多个、独立、均一的反应池来独立或组合完成针对不同样本或指标的反应。因为不同的反应所需的试剂不同，所以不同反应池中往往需配置不同的反应体系，如酶、底物等。使用微流控芯片完成多指标生化反应或检测具有自动化程度高、试剂消耗量、反应所需成本低等特点。

要实现多指标的并行分析，需要1)样本的分配：将待检样本均匀分配到不同的反应池中；2)反应池的隔离：生化反应过程中不同反应池之间应互相隔离，避免不同反应间的交叉污染。3)反应后样本的回收：对于如核酸扩增等生化反应，芯片上完成扩增只是一个步骤，后续还可能需要电泳、杂交、测序等操作，所以很多需求下芯片的扩增产物需回收。

目前现有研究基本集中在前2个步骤，即实现样品分配和隔离，不进行反应后的样本回收。如利用外部设备让附有压敏胶的金属基材变形，堵塞连通反应池的管道，最终实现对不同反应池的物理隔离。该方法中反应产物被压敏胶固态隔离在片子上，无法回收取出，因而只适用于原位检测。采用光盘式结构的芯片通过离心力或离心力与毛细力相结合等方式将串联管道中的流体分配到位于管道外侧的反应腔体中。这类方法同样只考虑了样品的分配，没有针对样品回收进行设计。这些设计中反应孔辐射状分布在光盘式结构的外侧，仅靠离心力只能将溶液分配到反应孔中，无法将反应孔中的溶液再回收出来。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种芯片、使用方法及用途。该芯片能将反应液自动分配进不同的反应孔并互相隔离，反应完成后可以通过离心将不同反应孔中的液体重新汇聚在一起回收出芯片。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种芯片，具有反应孔303、与所述反应孔303连通的流路302和加样孔301。所述反应孔303设置于所述流路302的同一侧或两侧；所述反应孔303与所述流路302呈平行分布；

为了保证反应孔303中的溶液被充分回收，本芯片的反应孔和流路302的连接需要特别的考虑。如图8所示，反应孔303与流路302的连接处501需保证其位置不高于反应孔303的下边沿，确保反应孔303中的溶液都可以再离心力的作用下进入流路302而不滞留，从而保证充分回收。

在本发明的另一些实施例中，所述流路302为直管道或弯曲管道或不规则管道。

在本发明的另一些实施例中，所述弯曲管道为多个“V”字形首尾相连的弯曲管道。

在本发明的一些实施例中，为避免流路302中残留液体而使生化反应时不同的反应孔303之间的溶液互相污染，流路302设计为相对于芯片边沿有个倾斜的角度，夹角小于90°，确保离心时流路302中不残留溶液(图6)。

通过离心芯片等操作可将溶液分配到各个反应孔中并隔离，待反应结束后再次离心芯片可将各反应孔中的溶液分配回流路，通过注入口回收出芯片。

在本发明的另一些实施例中，所述反应孔303与所述流路302垂直连通。

将流路放置在更接近旋转中心位置旋转芯片即完成液体分配进反应孔，反应结束后旋转芯片方向反向离心即实现反应孔中溶液的回收。

在本发明的另一些实施例中，还包括第一储液池401。

在本发明的另一些实施例中，所述第一储液池401设置于所述反应孔303与所述加样孔301之间。

溶液通过加样孔加入储液池后，将流路放置在更接近旋转中心位置旋转芯片即完成液体分配进反应孔，反应结束后将芯片旋转90°将储液池放置在远离旋转中心的位置旋转芯片将反应孔中的溶液离心进储液池回收。

优选的，所述流路与离心方向不垂直，存在夹角。

在本发明的另一些实施例中，还包括第二储液池402。

在本发明的另一些实施例中，所述反应孔303与所述流路302之间远离所述第一储液池401方向的夹角小于90°。

溶液通过加样孔加入储液池后，将储液池放置在更接近旋转中心位置沿着流路方向旋转芯片即将液体分配进反应孔和连接管道中，打开远离储液池的注入口将连接流路中的溶液吸出即实现不同反应孔的隔离。生化反应结束后反向离心芯片即可将反应孔中的溶液离心进储液池回收。

在本发明的另一些实施例中，所述加样孔301至少为1个。

在本发明的另一些实施例中，所述加样孔301为2个，分别设置于所述流路302的两端或同一端。

在本发明的另一些实施例中，所述第一储液池401与所述第二储液池402分别设置于所述流路302的两端。

在本发明的另一些实施例中，所述流路302与所述第二储液池402之间还设置有阀601。

在本发明的另一些实施例中，所述阀601为一次性常闭阀。

在本发明的另一些实施例中，所述阀601为蜡阀。

在本发明的另一些实施例中，所述芯片为聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、聚碳酸酯、聚二甲基硅氧烷等高分子聚合物或玻璃、硅、金属材料中的一种或多种制成。

在本发明的另一些实施例中，所述芯片通过注塑、热压、键合、粘接等方式封装。

本发明还提供了上述芯片的使用方法，取所述芯片经加样离心，将溶液分配到所述反应孔303内，隔离、反应后，经回收离心，将反应后的溶液收集回所述流路302，经所述加样孔301回收；

所述加样离心时，所述流路302接近离心机的旋转中心，所述反应孔303远离离心机的旋转中心；

所述回收离心时，所述反应孔303接近离心机的旋转中心，所述流路302远离离心机的旋转中心。

本发明还提供了一种上述的芯片的使用方法，取所述芯片经加样离心，将溶液分配到所述反应孔303内，隔离、反应后，经回收离心，将反应后的溶液和所述第二储液池402中的溶液收集回所述第一储液池401，回收；

所述加样离心时，所述第一储液池401接近离心机的旋转中心，所述反应孔303远离离心机的旋转中心；

所述回收离心时，所述反应孔303接近离心机的旋转中心，所述第一储液池401远离离心机的旋转中心。

优选的，所述芯片为矩形，所述反应孔配置成与所述芯片边沿相对平行放置。

本发明还提供了上述芯片在生物检测或医疗检验中的应用。

在本发明的一些实施例中，所述生物检测或医疗检验为免疫分析、核酸扩增反应、核酸杂交反应分析或蛋白-受体结合反应。

本发明提供的上述微流控芯片在生物检测或医疗检验领域中有诸多应用，所述生物检测或医疗检验具体可为免疫分析、核酸扩增反应、核酸杂交反应分析或蛋白-受体结合反应。在以上反应中，不同的反应底物如抗体、引物、核酸探针等需预先固定在不同的反应孔中，待待检测溶液样本分配进入特定反应孔才溶解释放与样本反应，从而达成多指标分析的目的。

使用此微流控芯片，在实现样品的分配与隔离的基础上，实现了反应后的样本的回收，为后续的反应和检测制备样品。

本发明提供的芯片能将反应液自动分配进不同的反应孔并互相隔离，反应完成后可以通过离心将不同反应孔中的液体重新汇聚在一起回收出芯片。

附图说明

图1为实施例1中的芯片示意图；

图2为实施例1中的芯片使用示意图，其中，图2(a)示离心分配样品，图2(b)示反向离心回收样品；

图3为实施例1中变换流路形状的两种芯片结构示意图；

图4为实施例1中多个反应单元串联的芯片结构示意图；

图5为实施例2中的芯片示意图；

图6为实施例2中样品离心分配操作的示意图；

图7为实施例2中样品离心回收过程的示意图；

图8为实施例2中芯片反应孔与流路连接处的结构设计原理示意图；其中，图8(a)示普通设计，图8(b)示更优选设计，以便溶液物残留；

图9为实施例3中的芯片示意图；

图10为实施例3中样品离心分配和隔离操作的示意图；

图11为实施例3中样品回收过程的示意图；

图12为实施例4中的芯片示意图；

图13为实施例4中样品离心分配和隔离操作的示意图；

图14为实施例4中样品回收过程的示意图。

其中，附图标记说明如下：

301：加样孔；302：流路；303：反应孔；401：第一储液池；402：第二储液池；501反应孔与流路的连接管道；601：阀。

具体实施方式

本发明公开了一种芯片、使用方法及用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明提供的试样分析芯片具有多个反应孔、与各反应孔连接的流路和向流路注入溶液的注入口，通过离心等操作将注入的溶液分配到各反应孔，待反应结束后通过离心芯片可将各反应孔中的溶液重新汇聚到流路或溶液注入口附近，通过注入口回收反应后的溶液。

为了保证反应孔303中的溶液被充分回收，本芯片的反应孔和流路302的连接需要特别的考虑。如图8所示，反应孔303与流路302的连接处501需保证其位置不高于反应孔303的下边沿，确保反应孔303中的溶液都可以再离心力的作用下进入流路302而不滞留，从而保证充分回收。

为避免流路302中残留液体而使生化反应时不同的反应孔303之间的溶液互相污染，流路302设计为相对于芯片边沿有个倾斜的角度，确保离心时流路302中不残留溶液(图6)。

本发明所提供的一种试样分析芯片，包括多个反应孔和与所述反应孔连通的流路，所述流路位于反应孔一侧，包含至少2个液体加样孔分别位于流路的两端。

上述芯片通过离心可将从入口注入到流路内的溶液分配到流路一侧的反应孔中，各反应孔之间空气隔离。待反应结束后，反向离心芯片，可将反应孔中的溶液回收进连通管道中，通过入口回收反应后的溶液。

所述流路的形状可以有多种样式，可为直管道，也可为多个“V”字形弯曲形状的组合，亦可为含有多个粗细渐变的直管道。“V”字形的底部或粗细渐变管道离芯片边缘近的区域与反应孔相连。

本发明所提供的试样分析芯片，包括多个反应孔和与所述反应孔连通的流路，所述流路位于反应孔一侧，包含至少2个液体加样孔和位于流路一侧的储液池。所述储液池位于流路的一侧并相对于反应孔靠上的位置。储液池与流路有一个或多个连接处。

所述储液池与加样孔及流路相连。溶液通过加样孔进入储液池，然后离心芯片，储液池中的溶液通过流路进入一侧的反应孔，完成溶液的分配和隔离。反应结束后，将芯片旋转90度让储液池远离离心中心离心，反应孔中的溶液会离心进入储液池，通过加样孔回收反应后的溶液。

本发明所提供的第三种试样分析芯片，包括多个反应孔和与所述反应孔连通的流路，所述芯片包含至少1个位于流路一端的储液池和至少2个位于流路两端的液体加样孔。

所述反应孔位于流路的一侧或两侧分布，所述反应孔与流路呈现小于90度的连接呈远离储液池方向。

溶液通过储液池一侧的加样孔注入芯片的储液池，将芯片由储液池到流路另一侧的加样孔方向离心，溶液在离心力的作用下由储液池进入并充满所有反应孔和与反应孔连接的流路。停止离心后打开反应孔偏向的那一侧的加样孔将流路中的溶液吸出后封闭加样孔，这样大部分溶液就分配到反应孔中而不同反应孔被流路的空气隔离。待生化反应结束后将芯片反向离心，所有反应孔中的溶液会被离心进入储液池而回收出芯片。

本发明所提供的第四种试样分析芯片，包括多个反应孔和与所述反应孔连通的流路，所述芯片包含至少2个位于流路2端的储液池和至少2个位于流路两端的液体加样孔，以及至少1个位于流路上接近一个储液池的阀，如一次性的“蜡阀”。所述储液池分为第一储液池和第二储液池。

所述反应孔位于流路的一侧或两侧分布，所述反应孔与流路呈现小于90度的连接呈偏向阀的方向。

溶液通过远离阀的储液池一侧的加样孔注入芯片的储液池，将芯片由储液池到流路另一侧的加样孔方向离心，溶液在离心力的作用下由储液池进入并充满所有反应孔和与反应孔连接的流路。此时阀处于关闭状态，溶液被阻断在远离加样口的储液池前。打开阀，如融化石蜡打开“蜡阀”，继续之前的方向离心芯片。流路中的溶液会被离心进第二储液池，从而让反应孔之间的流路充满空气实现隔离。以上步骤实现了样品的分配和隔离。待生化反应结束后将芯片反向离心，所有反应孔中的溶液和第二储液池中的溶液会被离心进入第一储液池，从而回收出芯片。

本发明所提供的第五种试样分析芯片，包括多个反应孔和与所述反应孔连通的流路，所述芯片包含至少2个位于流路2端的储液池和至少2个位于流路两端的液体加样孔，以及至少1个位于流路上接近一个储液池的阀，如一次性的“蜡阀”。

所述反应孔位于流路的一侧或两侧分布，所述反应孔与流路呈现小于90度的连接呈偏向阀的方向。

溶液通过远离阀的储液池一侧的加样孔注入芯片的储液池，将芯片由储液池到流路另一侧的加样孔方向离心，溶液在离心力的作用下由储液池进入并充满所有反应孔和与反应孔连接的流路。此时阀处于关闭状态，溶液被阻断在远离加样口的储液池前。打开阀，如融化石蜡打开“蜡阀”，继续之前的方向离心芯片。流路中的溶液会被离心进第二储液池，从而让反应孔之间的流路充满空气实现隔离。以上步骤实现了样品的分配和隔离。待生化反应结束后将芯片反向离心，所有反应孔中的溶液和阀附近的储液池中的溶液会被离心进入第一储液池，从而回收出芯片。

上述的微流控芯片，隔离不同反应孔的介质是空气，研发人员亦可往芯片中加入油相来达成隔离，研发人员在以上芯片的结构上进行微调或调整加样方式即可达成这一目的。使用类似于以上结构的芯片，通过油相隔离反应孔的设计亦应在本发明的保护范畴。

本发明提供的上述微流控芯片在生物检测或医疗检验领域中有诸多应用，所述生物检测或医疗检验具体可为免疫分析、核酸扩增反应、核酸杂交反应分析或蛋白-受体结合反应。在以上反应中，不同的反应底物如抗体、引物、核酸探针等需预先固定在不同的反应孔中，待待检测溶液样本分配进入特定反应孔才溶解释放与样本反应，从而达成多指标分析的目的。

使用此微流控芯片，在实现样品的分配与隔离的基础上，实现了反应后的样本的回收，为后续的反应和检测制备样品。

本发明提供的芯片能将反应液自动分配进不同的反应孔并互相隔离，反应完成后可以通过离心将不同反应孔中的液体重新汇聚在一起回收出芯片。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中，芯片制作技术和使用方法均为微流控芯片领域和生物检测领域的常规技术和方法。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1、反应孔位于流路一侧，可逆离心实现样品的分配和回收。

图1是本发明试样分析芯片一实施方式的俯视图。芯片中的一个工作单元具有：2个加样孔301，流路302和多个反应孔303。所有反应孔303位于流路302的一侧并与之相连。流路302与反应孔303基本处于平行放置。反应孔303可以为矩形、圆形或椭圆形等多种形状。单个反应孔303的体积为2μL，反应孔之间的中心距为3mm，流路的体积为本实施例中所有21个反应孔体积之和42μL。所有结构深度为0.8mm，芯片总厚度为2mm。

该芯片可由聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚碳酸酯(PC)等高分子聚合物由注塑、激光雕刻、机械加工和热压封接、胶封等现有技术制作。

实验过程中，溶液通过加样孔301通入芯片的流路302，然后通过热压、胶封等方式封闭加样孔301。完成加样后将芯片放置在离心机中，让每个反应单元的反应孔303远离离心中心而流路302靠近离心中心离心，溶液会在离心力的驱动下由流路302进入反应孔303中。原本存在于反应孔303中的空气会进入流路302中隔离不同的反应孔(图2a)。

待生化反应如核酸扩增结束后，将芯片翻转放置，即让每个反应单元的反应孔303靠近离心中心而流路302远离离心中心的方向放置离心，反应孔303中反应后的溶液即进入连通管道302中。此时打开芯片加样孔301即可回收反应后的样本溶液(图2b)。

图1示意的流路302为直管道，实际上流路302的形状可以有多种变化，图3给出了粗细渐变和多个“V”字形串联的两种结构。这些结构的变形有利于实现样品的均匀分配，其反应后的样本回收过程同图2所示。此外，图1给出的是一张芯片上有3个重复单元的示意，这些重复单元可以串联在一起形成含有更多反应孔的结构(图4)，其样品分配和回收的过程同图2所示。

实施例2、反应孔位于流路的一侧，两次互相垂直方向的离心实现样品分配和回收。

图5是本发明试样分析芯片一实施方式的俯视图。芯片具有2个加样孔301，1个第一储液池401，流路302和多个反应孔303。流路302与第一储液池401形成闭环连接。第一储液池401的位置相对于反应孔303靠右上。芯片反应孔的体积为2μL，第一储液池401的体积为21个反应孔303体积的和42μL。流路302宽、深均为0.2mm，第一储液池401和反应孔303的深度为0.8mm，反应孔303的中心距为3mm，芯片总厚度2mm。

该芯片加工方式同实施例1。

实验过程中，溶液通过加样孔301注入芯片的第一储液池401，密封芯片。然后将芯片放置在离心机内以第一储液池401靠近离心中心而反应孔303远离离心中心的方向离心，溶液在离心力的作用下进入反应孔303。反应孔303中的空气会进入流路302而隔离不同的反应孔。为避免流路302中残留液体而使生化反应时不同的反应孔303之间的溶液互相污染，流路302设计为相对于芯片边沿有个倾斜的角度，确保离心时流路302中不残留溶液(图6)。待生化反应结束后，将芯片旋转90度放置，将第一储液池401远离离心中心而反应孔303沿离心方向分布，离心芯片。反应后的溶液即由反应孔303进入储液池，打开芯片加样孔301即可回收(图7)。

需要强调的是，为了保证反应孔303中的溶液被充分回收，本芯片的反应孔和流路302的连接需要特别的考虑。如图8所示，反应孔303与流路302的连接处501需保证其位置不高于反应孔303的下边沿，确保反应孔303中的溶液都可以再离心力的作用下进入流路302而不滞留，从而保证充分回收。实施例3：反应孔位于流路两侧，可逆离心实现实现样品的分配和回收。

图9是本发明试样分析芯片一实施方式的俯视图。芯片具有2个加样孔301a和301b，1个第一储液池401，流路302和多个反应孔303。反应孔303位于流路302的两侧，反应孔303与流路的连接呈远离第一储液池401方向小于90度的夹角，以确保离心的过程中没有空气残留在反应孔303中。芯片反应孔的体积为1μL，第一储液池401的体积为一个反应单元全部56个反应孔加流路302的总体积之和70μL。流路302宽、深均为0.2mm，第一储液池401和反应孔303的深度为1mm，反应孔303的中心距为2mm，芯片总厚度2mm。

该芯片的加工方式同实施例1。

实验过程中，溶液通过加样孔301a注入芯片的第一储液池401，密封芯片。然后将芯片放置在离心机内以第一储液池401靠近离心中心而沿着反应孔303排布的方向离心，溶液在离心力的作用下充满反应孔303和流路302。打开加样孔301b，吸出流路302中的溶液，反应孔303因为跟流路只有1个接口而不被吸出，从而实现了不同反应孔的隔离(图10)。密封芯片后进行生化反应，待反应完成后将芯片反向离心，所有反应孔303中的溶液均会被离心回收如第一储液池401中，打开芯片加样孔301a即完成反应后溶液的回收(图11)。

实施例4：反应孔位于流路两侧，3次离心加阀结构实现实现样品的分配和回收。

图12是本发明试样分析芯片一实施方式的俯视图。芯片结构与实施例3类似，具有2个加样孔301，2个储液池，一个第一储液池401和一个第二储液池402，分别位于流路302的两端。多个反应孔303位于流路302的两侧，反应孔303与流路的连接呈远离第一储液池401方向小于90度的夹角，以确保离心的过程中没有空气残留在反应孔303中。第二储液池402与流路302之间有一个一次性阀“蜡阀”601。

芯片反应孔的体积为1μL，第一储液池401的体积为一个反应单元全部56个反应孔加流路302位于“蜡阀”601以上部分的总体积之和70μL，第二储液池402的体积较小为15μL。流路302宽、深均为0.2mm，储液池401和反应孔303的深度为1mm，反应孔303的中心距为2mm，芯片总厚度2mm。

该芯片的加工方式同实施例1。

实验过程中，溶液通过加样孔301注入芯片的储液池第一储液池401，密封芯片。然后将芯片放置在离心机内以第一储液池401靠近离心中心而沿着反应孔303排布的方向离心，溶液在离心力的作用下充满反应孔303和流路302在“蜡阀”601以上的部分。加热芯片让“蜡阀”打开，按第一次离心的方向继续离心芯片，流路302中的溶液会被离心进第二储液池402中，从而实现不同反应孔的隔离(图13)。密封芯片后进行生化反应，待反应完成后将芯片反向离心，所有反应孔303中的溶液和第二储液池402中的溶液均会被离心回收如第一储液池401中，打开芯片加样孔301即完成反应后溶液的回收(图14)。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (12)

1.一种芯片，具有反应孔(303)、与所述反应孔(303)连通的流路(302)和加样孔(301)；其特征在于，所述反应孔(303)设置于所述流路(302)的同一侧或两侧；所述反应孔(303)与所述流路(302)呈平行分布；

所述反应孔(303)与所述流路(302)的连接处(501)不高于所述反应孔(303)的下边沿。

2.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于，所述流路(302)为弯曲管道；

所述弯曲管道为多个“V”字形首尾相连的弯曲管道。

3.根据权利要求1所述的芯片，其特征在于，所述流路(302)为直管道或不规则管道。

4.根据权利要求2所述的芯片，其特征在于，所述管道的拐角与所述芯片的边沿不平行，夹角小于90°。

5.根据权利要求4所述的芯片，其特征在于，还包括第一储液池(401)；所述第一储液池(401)设置于所述反应孔(303)与所述加样孔(301)之间；

所述反应孔(303)与所述流路(302)之间远离所述第一储液池(401)方向的夹角小于90°。

6.根据权利要求5所述的芯片，其特征在于，所述加样孔(301)至少为2个，分别设置于所述流路(302)的两端或同一端。

7.根据权利要求6所述的芯片，其特征在于，还包括第二储液池(402)。

8.根据权利要求7所述的芯片，其特征在于，所述第一储液池(401)与所述第二储液池(402)分别设置于所述流路(302)的两端。

9.根据权利要求8所述的芯片，其特征在于，所述流路(302)与所述第二储液池(402)之间还设置有阀(601)；

所述阀(601)为一次性常闭阀。

10.一种如权利要求1至3任一项所述的芯片的使用方法，其特征在于，取所述芯片经加样离心，将溶液分配到所述反应孔(303)内，隔离、反应后，经回收离心，将反应后的溶液收集回所述流路(302)，经所述加样孔(301)回收；所述加样离心时，所述流路(302)接近离心机的旋转中心，所述反应孔(303)远离离心机的旋转中心；所述回收离心时，所述反应孔(303)接近离心机的旋转中心，所述流路(302)远离离心机的旋转中心。

11.一种如权利要求7至9任一项所述的芯片的使用方法，其特征在于，取所述芯片经加样离心，将溶液分配到所述反应孔(303)内，隔离、反应后，经回收离心，将反应后的溶液和所述第二储液池(402)中的溶液收集回所述第一储液池(401)，回收；所述加样离心时，所述第一储液池(401)接近离心机的旋转中心，所述反应孔(303)远离离心机的旋转中心；所述回收离心时，所述反应孔(303)接近离心机的旋转中心，所述第一储液池(401)远离离心机的旋转中心。

12.一种如权利要求1至9任一项所述的芯片在生物检测或医疗检验中的应用；

所述生物检测或医疗检验为免疫分析、核酸扩增反应、核酸杂交反应分析或蛋白-受体结合反应。