CN104338168A - 一种针对上呼吸道感染的空气清新剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种针对上呼吸道感染的空气清新剂，其由莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油、乙醇和去离子水组成，其中所述莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油的体积比为(0.5-1.5)∶(0.5-0.8)∶(1.0-2.0)∶(0.5-1.5)∶(1.0-1.5)，剩下的为乙醇和去离子水，其中乙醇和去离子水之间的体积比在1∶1.98-1∶2.02的区间内。本发明的空气清新剂具有安全、高效、无毒、无刺激性和绿色环保的优点，同时还能够有效抑制上呼吸道感染的常见致病菌，如流感嗜血杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄糖球菌等，能够起到彻底改善空气质量，保持室内空气清新洁净、避免上呼吸道感染的作用。

Description

一种针对上呼吸道感染的空气清新剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种空气清新剂及其制备方法，具体来说，本发明涉及一种具有抑制空气中上呼吸道感染常见致病菌功效的由天然植物精油组成的抑菌空气清新剂及其制备方法。

背景技术

室内空气质量对人体健康至关重要，尤其是2003年非典的爆发更促使人们越来越关注室内空气中微生物污染的问题，另外，许多公共场所由于通风不畅等原因无法通过新鲜空气来自然净化环境，难免会积存异味，使人产生不舒服的感觉。同时，室内外较差的空气质量常含有多种致病病菌，同时结合多变的气候很容易使人们上呼吸道感染，上呼吸道感染是指自鼻腔至喉部之间的急性炎症的总称，是最常见的感染性疾病，该病四季、任何年龄均可发病，通过含有细菌的飞沫、雾滴，或经污染的用具进行传播并且常在机体抵抗力降低时，如受寒、劳累、淋雨等情况，原已存在或由外界侵入的病毒或/和细菌，迅速生长繁殖，导致感染。为了使在室内外活动的人们能够尽量避免患上上呼吸道感染，使用具有杀菌抑菌作用、具有芳香气味且简单、省事、便捷的液体喷雾空气清新剂来杀灭空气中的病菌、驱走异味、改善空气质量便成了人们的一个主要选择。

目前，市场上出售的空气清新剂种类繁多，香型各异，但大多是以有机化合物如芳香族化合物和一些单萜类化合物等再配以香精混合而成的，通过散发香味来掩盖异味，减轻人们对异味不舒服的感觉，但却不能真正起到净化空气的作用，并且其中某些化学合成物长期使用会对人体产生危害，引起神经衰弱或者上呼吸道系统病变，甚至对一些免疫系统、造血系统有伤害，如二甲苯、甲酮和醛等，大剂量使用可致中毒。另有报道指出，有些化学合成的空气清新剂能够诱发癌症。因此，空气清新剂的安全性及其有效性愈加引起重视。

针对上述问题，目前国内外研究人员将研究重点投向天然植物空气清新剂领域，也出现了很多有关天然植物提取物制备而成的空气清新剂的专利申请。公开号为CN1562380A的专利中公开了一种全天然液体型空气清新剂，含有天然芳香植物精油-薰衣草精油、胡椒薄荷精油和柠檬精油，并使用百里香的蒸馏水作为空气清新剂的载体配制而成。公开号为CN 1436572A的专利中公开了一种以桉树叶提取液为主要有效成分的空气清新剂，用桉树叶水提液替代化学杀菌剂，并添加了增溶剂(吐温类或司盘类增溶剂或二者的混合物)及防腐剂等，以及公开号为CN101143226A的专利，其中以中药药材青蒿精油和桉叶精油为主要抗菌和驱虫成分，代替传统的有毒副作用的化学抗菌驱虫剂。公开号为CN10104486的专利公开了一种用于环保、防病、祛蚊的喷雾液体，同样属于中药药物技术领域，该喷雾由山胡椒、薄荷和少量食用香精(如菠萝香型或桔子香型的食用香精)组成，其中的中药成分能够在迅速祛蚊的同时消灭和抑制室内22种细菌和6种病毒。公开号为CN1817369A的专利中公开了多用途抑菌抗菌增新剂的概念，是将介质中的有害气体溶解酶母料、天然薄荷精油分别加入到载体物质的环保型溶剂白油中进行匀质后，再将介质的负离子添加剂和空气触媒催化剂充分溶入到混合载体物质的环保型溶剂白油中，得到多用途空气抑菌抗菌增新剂。

总的说来，近年来使用天然植物提取物作为主要成分的空气清新剂或空气净化剂在数量和质量上相对于传统的化学合成品都有了较大提高，但是还存在如空气清新剂的抑菌、抗菌效果不显著、抑菌时间不持久、气味不够宜人、精油配比不合适而对人体有刺激作用等问题。此外，更重要的是，市面上众多产品往往没有对于病菌的针对性，没有出现在清新空气同时抑制上呼吸道感染病菌的空气清新剂。

发明内容

为了克服现有空气清新剂的不足，本发明旨在提供一种具有抑制上呼吸道感染致病病菌功效的由天然植物精油组成的抑菌型空气清新剂。

本发明所提供的一种针对上呼吸道感染的空气清新剂，其由莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油、乙醇和去离子水组成。

优选的是，所述莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油的体积比为(0.5-1.5)∶(0.5-0.8)∶(1.0-2.0)∶(0.5-1.5)∶(1.0-1.5)，剩下的为乙醇和去离子水，其中乙醇和去离子水之间的体积比在1∶1.98-1∶2.02的区间内。

优选的是，上述空气清新剂还包括牛至精油，其中莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油和牛至精油的体积比为(0.5-1.5)∶(0.5-0.8)∶(1.0-2.0)∶(0.5-1.5)∶(1.0-1.5)∶(1.2-2.0)，剩下的为乙醇和去离子水，其中乙醇和去离子水之间的体积比在1∶1.98-1∶2.02的区间内。

本发明还涉及一种制备上述空气清新剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油和安息香精油按照相应配比加入到安装有搅拌器的容器中，搅拌均匀；

(2)在上述步骤(1)的混合物中加入95％的乙醇和去离子水，搅拌均匀即得到空气清新剂，其中乙醇和去离子水之间的比例配比在1∶1.98和1∶2.02之间调整。

本发明还涉及一种如上述的空气清新剂在抑制空气中致病菌中的作用。

本发明的抑菌作用主要针对流感嗜血杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。

上述空气清新剂中，所述各种植物精油可以是从植物中直接提取获得的，也可以是市售的产品。所述从植物中提取精油的方法是本领域常规的方法。

上述空气清新剂中，对于莱姆精油，伴随着凉感冒、喉咙疼痛和流行性感冒的发烧，都可藉莱姆精油降低体温。舒解咳嗽、胸部郁积、黏膜发炎以及鼻窦炎。是免疫系统的补品，降低感染病菌的机率，缩短病后的虚弱状态，很快地重拾精力；所述葡萄柚精油有激励情绪的效果，可以缓和压力和沮丧，其葡萄柚精油含有高浓度的维生素C，因而对免疫系统非常有利用价值。可以有效地预防感冒和流感，同时对于治疗肌肉疲乏和僵硬疗效显著；所述月桂精油可藉由它发汗的作用能降低体温，用在传染性疾病上的功效卓着，可能还有助于治疗支气管炎；所述罗文莎叶精油味道很特别，像带点甜甜水果味的尤加利，用途也和尤加利一样能缓解呼吸不适，由于化学成分中，氧化物就占了60％，因此不难了解它对于感冒、呼吸道感染有极佳的改善力；所述安息香精油，最大的功能是润肺，以及畅通呼吸道，对咳嗽、喉咙痛，气喘、气管炎、清痰都有帮助，并且香味强烈，能够增强记忆力，提神醒脑，改善紧张情绪。

本发明的空气清新剂可以制成各种剂型，具体可为喷雾剂。

与市场上现有的空气清新剂相比，本发明的空气清新剂具有安全、高效、无毒、无刺激性和绿色环保的优点。由于植物精油有很强的挥发性，因而具有较强的抑菌、抗菌功效，能够净化空气，改善空气质量，同时由于天然植物精油的各种保健功效，可以使人们在吸入香气之后在心理方面起作用，使人感到舒爽、愉悦、安宁。

本发明的空气清新剂能够有效抑制上呼吸道感染的常见致病菌，如流感嗜血杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄糖球菌等，能够起到彻底改善空气质量，保持室内空气清新洁净、避免上呼吸道感染的作用，其抑菌活性与链霉菌相似，本发明的空气清新剂用芳香植物精油替代化学合成的香精，其清香宜人的气味能够使人感觉仿佛置身于自然之中，使人们身心得到放松，精神爽利、心旷神怡，植物精油在充分发挥作用的同时对人体无毒无害，也没有刺激伤害和敏感性等副作用。

具体实施方式

下面将具体描述本发明的针对上呼吸道感染的空气清新剂的制备方法，下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和生物材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1、针对上呼吸道感染的空气清新剂的制备及其效果实验

1、空气清新剂的制备

(1)将0.5份莱姆精油、0.5份葡萄柚精油、1.0份月桂精油、0.5份罗文莎叶精油和1.0份安息香精油加入到安装有搅拌器的容器中，搅拌均匀；

(2)在上述步骤(1)的混合物中加入95％的乙醇32份和去离子水64.5份，搅拌均匀即得到100份的空气清新剂，其中乙醇和去离子水之间按照1∶2的比例配比，具体地乙醇和去离子水之间配比可根据实际情况在1∶1.98和1∶2.02之间调整。

上述制备的空气清新剂无需加压，直接装入喷雾瓶中即可对室内空气进行消毒杀菌，操作简单，极大地简化了生产操作程序，适用范围广。

2、菌悬液的配置

在本实施例中，主要针对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)配置菌悬液，具体操作如下：

取冻干菌种管，在无菌操作下，以毛细吸管加入适量营养肉汤，轻柔吸吹数次，使菌种融化分散，取含5.0ml-10.0ml营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线于营养琼脂培养基平板上，于37℃培养18h～24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，于37℃培养18h～24h，即为第3代培养物(放在4℃左右冰箱中保藏。每隔2-3个月移种一次，继续保藏，将第3代培养物用5.0ml吸管吸取3.0ml-5.0ml稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用5.0ml吸管将洗液移至另一无菌试管中，在手掌上振敲80次(力度适中，勿溅出)，以使细菌悬液均匀。

3、空气清新剂的效果实验

下面将用抑菌环法对流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、大肠杆菌(Escherichia coli)以及金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)进行抑菌检测，具体检测上述步骤2制备的空气清新剂的抑菌抗菌效果，以了解本发明的空气清新剂的抗菌抑菌活性，包括抑菌圈直径和抑菌时间等，具体检测方法如下：

(1)抑菌环法检测空气清新剂的效果

参照QB/T2738-2005，7.5抑菌型日化产品的抑菌效果检验方法(抑菌环法)检测上述步骤1制备的空气清新剂的抑菌效果。

取无菌干燥滤纸片，每片滴加30ul上述步骤1制备的空气清新剂，同时以滴加相同体积无菌蒸馏水的滤纸和滴加30ul浓度为1mg/ml的链霉素的滤纸作为对照。将上述滤纸片分别平放于清洁的无菌平皿内，开盖置于恒温箱(37℃)中烘干或室温下自然干燥后备用。

用灭菌的移液器分别吸取浓度为1×10⁵cfu/ml-9×10⁵cfU/ml的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)金黄色亚种的菌悬液各150ul，分别在营养琼脂培养基平板表面用涂布棒均匀涂沫3次。每涂抹1次，将平板转动60°，最后用涂布棒沿平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温条件下培养。

用无菌镊子取上述制备的滴加有空气清新剂、链霉素或无菌水的滤纸片，分别贴放于上述涂布有不同菌的平板上，每个平板上贴放4片滴加有空气清新剂的滤纸片、1片滴加有链霉素的滤纸片和1片滴加有无菌水的滤纸片。各滤纸片中心之间相距25mm以上，且与平板的边缘相距15mm以上。贴好后，用无菌镊子轻压滤纸片，使其紧贴于平板表面，最后盖好平皿，置于37℃恒温箱中，培养12h-24h后观察结果。

用游标卡尺测量抑菌环的直径并拍照记录，测量抑菌环直径时，应选择均匀而完全无菌生长的抑菌环进行，以抑菌环外沿为界。实验设三次重复，取三次重复的平均值作为实验结果。抑菌环直径大于7mm者，属于B2以上级，其中抑菌率在90％以上者为B1级，抑菌率介于50％～90％之间为B2级；抑菌环直径小于或等于7mm者，属于B3以下级，具体而言，抑菌率在50％以下者为B3级。

抑菌圈直径随时间变化的结果如表1所示。其中，A、B、C分别代表滴加无菌蒸馏水、滴加链霉素和滴加空气清新剂的抑菌圈直径测量结果。

表1：抑菌圈直径随时间变化

通过以上数据可以明显看出：本发明涉及的空气清新剂相对链霉素针对流感嗜血杆菌有着更强的抑菌作用，且针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，尽管相同时间条件下的抑菌率相较链霉素没有更好的抑菌效果，但是该空气清新剂的抑菌持续时间更长，抑菌效果更加持久。

(2)通过统计菌落数检测空气清新剂的效果

分别测定上述步骤(1)的贴有滴加有空气清新剂的滤纸片的平板上的菌落数，计算杀菌率。实验设三次重复，结果保留整数，杀菌率的结果如表2所示。

杀菌率(％)＝(I-II)/I×100％，

式中：I表示滴加无菌水的滤纸片的平板上的平均菌落数，II滴加空气清新剂的滤纸片的平板上的平均菌落数。

根据QB/T2738-2005(《中华人民共和国轻工行业标准-日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》中的规定，杀菌率≥90％属于A1级，杀菌率介于50％～90％之间的属于A2级，杀菌率≤50％属于A3级。

表2：杀菌效果对比

通过以上数据可以明显看出：空气清新剂的针对流感嗜血杆菌的杀菌率高于链霉素，呈现出更好的流感嗜血杆菌杀菌抑菌作用，而针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，尽管空气清新剂的杀菌率与链霉素的杀菌率不相上下，但是随时间推移，空气清新剂的杀菌率降低幅度更小，效果更加持久。

实施例2、针对上呼吸道感染的空气清新剂的制备及其效果实验

1、空气清新剂的制备

(1)将1.0份莱姆精油、0.7份葡萄柚精油、1.5份月桂精油、1.0份罗文莎叶精油和1.3份安息香精油加入到安装有搅拌器的容器中，搅拌均匀。

(2)在上述步骤(1)的混合物中加入95％的乙醇31.5份和去离子水63份，搅拌均匀即得到100份空气清新剂，其中乙醇和去离子水之间按照1∶2的比例配比，具体地乙醇和去离子水之间之间配比可根据实际情况在1∶1.98和1∶2.02之间调整。

上述制备的空气清新剂无需加压，直接装入喷雾瓶中即可对室内空气进行消毒杀菌，操作简单，极大地简化了生产操作程序，适用范围广。

2、菌悬液的配置

在本实施例中，主要针对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)配置菌悬液，具体操作如下：

取冻干菌种管，在无菌操作下，以毛细吸管加入适量营养肉汤，轻柔吸吹数次，使菌种融化分散，取含5.0ml-10.0ml营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线于营养琼脂培养基平板上，于37℃培养18h～24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，于37℃培养18h～24h，即为第3代培养物(放在4℃左右冰箱中保藏。每隔2-3个月移种一次，继续保藏，将第3代培养物用5.0ml吸管吸取3.0ml-5.0ml稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用5.0ml吸管将洗液移至另一无菌试管中，在手掌上振敲80次(力度适中，勿溅出)，以使细菌悬液均匀。

3、空气清新剂的效果实验

下面将用抑菌环法对流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、大肠杆菌(Escherichia coli)以及金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)进行抑菌检测，具体检测上述步骤1制备的空气清新剂的抑菌抗菌效果，以了解本发明的空气清新剂的抗菌抑菌活性，包括抑菌圈直径和抑菌时间等，具体检测方法如下：

(1)抑菌环法检测空气清新剂的效果

参照QB/T2738-2005，7.5抑菌型日化产品的抑菌效果检验方法(抑菌环法)检测上述步骤1制备的空气清新剂的抑菌效果。

取无菌干燥滤纸片，每片滴加30ul上述步骤1制备的空气清新剂，同时以滴加相同体积无菌蒸馏水的滤纸和滴加30ul浓度为1mg/ml的链霉素的滤纸作为对照。将上述滤纸片分别平放于清洁的无菌平皿内，开盖置于恒温箱(37℃)中烘干或室温下自然干燥后备用。

用灭菌的移液器分别吸取浓度为1×10⁵cfu/ml-9×10⁵cfU/ml的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)金黄色亚种的菌悬液各150ul，分别在营养琼脂培养基平板表面用涂布棒均匀涂沫3次。每涂抹1次，将平板转动60°，最后用涂布棒沿平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温条件下培养。

用无菌镊子取上述制备的滴加有空气清新剂、链霉素或无菌水的滤纸片，分别贴放于上述涂布有不同菌的平板上，每个平板上贴放4片滴加有空气清新剂的滤纸片、1片滴加有链霉素的滤纸片和1片滴加有无菌水的滤纸片。各滤纸片中心之间相距25mm以上，且与平板的边缘相距15mm以上。贴好后，用无菌镊子轻压滤纸片，使其紧贴于平板表面，最后盖好平皿，置于37℃恒温箱中，培养12h-24h后观察结果。

用游标卡尺测量抑菌环的直径并拍照记录，测量抑菌环直径时，应选择均匀而完全无菌生长的抑菌环进行，以抑菌环外沿为界。实验设三次重复，取三次重复的平均值作为实验结果。抑菌环直径大于7mm者，属于B2以上级，其中抑菌率在90％以上者为B1级，抑菌率介于50％～90％之间为B2级；抑菌环直径小于或等于7mm者，属于B3以下级，具体而言，抑菌率在50％以下者为B3级。

抑菌圈直径随时间变化的结果如表1所示。其中，A、B、C分别代表滴加无菌蒸馏水、滴加链霉素和滴加空气清新剂的抑菌圈直径测量结果。

表3：抑菌圈直径随时间变化

通过以上数据可以明显看出：本发明涉及的空气清新剂相对链霉素针对流感嗜血杆菌有着更强的抑菌作用，且针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，尽管相同时间条件下的抑菌率相较链霉素没有更好的抑菌效果，但是该空气清新剂的抑菌持续时间更长，抑菌效果更加持久。

(2)通过统计菌落数检测空气清新剂的效果

分别测定上述步骤(1)的贴有滴加有空气清新剂的滤纸片的平板上的菌落数，计算杀菌率。实验设三次重复，结果保留整数，杀菌率的结果如表2所示。

杀菌率(％)＝(I-II)/I×100％，

式中：I表示滴加无菌水的滤纸片的平板上的平均菌落数，II滴加空气清新剂的滤纸片的平板上的平均菌落数。

根据QB/T2738-2005(《中华人民共和国轻工行业标准-日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》中的规定，杀菌率≥90％属于A1级，杀菌率介于50％～90％之间的属于A2级，杀菌率≤50％属于A3级。

表4：杀菌效果对比

通过以上数据可以明显看出：空气清新剂的针对流感嗜血杆菌的杀菌率高于链霉素，呈现出更好的流感嗜血杆菌杀菌抑菌作用，而针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，尽管空气清新剂的杀菌率与链霉素的杀菌率不相上下，但是随时间推移，空气清新剂的杀菌率降低幅度更小，效果更加持久。

实施例3、针对上呼吸道感染的空气清新剂的制备及其效果实验

1、空气清新剂的制备

(1)将1.5份莱姆精油、0.8份葡萄柚精油、2.0份月桂精油、1.5份罗文莎叶精油和1.5份安息香精油加入到安装有搅拌器的容器中，搅拌均匀。

(2)在上述步骤(1)的混合物中加入95％的乙醇31份和去离子水61.7份，搅拌均匀即得到100份空气清新剂，其中乙醇和去离子水之间按照1∶2的比例配比，具体地乙醇和去离子水之间的配比可根据实际情况在1∶1.98和1∶2.02之间调整。

上述制备的空气清新剂无需加压，直接装入喷雾瓶中即可对室内空气进行消毒杀菌，操作简单，极大地简化了生产操作程序，适用范围广。

2、菌悬液的配置

在本实施例中，主要针对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)配置菌悬液，具体操作如下：

取冻干菌种管，在无菌操作下，以毛细吸管加入适量营养肉汤，轻柔吸吹数次，使菌种融化分散，取含5.0ml-10.0ml营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37℃培养18h～24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线于营养琼脂培养基平板上，于37℃培养18h～24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，于37℃培养18h～24h，即为第3代培养物(放在4℃左右冰箱中保藏。每隔2-3个月移种一次，继续保藏，将第3代培养物用5.0ml吸管吸取3.0ml-5.0ml稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用5.0ml吸管将洗液移至另一无菌试管中，在手掌上振敲80次(力度适中，勿溅出)，以使细菌悬液均匀。

3、空气清新剂的效果实验

下面将用抑菌环法对流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、大肠杆菌(Escherichia coli)以及金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)进行抑菌检测，具体检测上述步骤1制备的空气清新剂的抑菌抗菌效果，以了解本发明的空气清新剂的抗菌抑菌活性，包括抑菌圈直径和抑菌时间等，具体检测方法如下：

(1)抑菌环法检测空气清新剂的效果

参照QB/T 2738-2005，7.5抑菌型日化产品的抑菌效果检验方法(抑菌环法)检测上述步骤1制备的空气清新剂的抑菌效果。

取无菌干燥滤纸片，每片滴加30ul上述步骤1制备的空气清新剂，同时以滴加相同体积无菌蒸馏水的滤纸和滴加30ul浓度为1mg/ml的链霉素的滤纸作为对照。将上述滤纸片分别平放于清洁的无菌平皿内，开盖置于恒温箱(37℃)中烘干或室温下自然干燥后备用。

用灭菌的移液器分别吸取浓度为1×10⁵cfu/ml-9×10⁵cfU/ml的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)金黄色亚种的菌悬液各150ul，分别在营养琼脂培养基平板表面用涂布棒均匀涂沫3次。每涂抹1次，将平板转动60°，最后用涂布棒沿平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温条件下培养。

用无菌镊子取上述制备的滴加有空气清新剂、链霉素或无菌水的滤纸片，分别贴放于上述涂布有不同菌的平板上，每个平板上贴放4片滴加有空气清新剂的滤纸片、1片滴加有链霉素的滤纸片和1片滴加有无菌水的滤纸片。各滤纸片中心之间相距25mm以上，且与平板的边缘相距15mm以上。贴好后，用无菌镊子轻压滤纸片，使其紧贴于平板表面，最后盖好平皿，置于37℃恒温箱中，培养12h-24h后观察结果。

用游标卡尺测量抑菌环的直径并拍照记录，测量抑菌环直径时，应选择均匀而完全无菌生长的抑菌环进行，以抑菌环外沿为界。实验设三次重复，取三次重复的平均值作为实验结果。抑菌环直径大于7mm者，属于B2以上级，其中抑菌率在90％以上者为B1级，抑菌率介于50％～90％之间为B2级；抑菌环直径小于或等于7mm者，属于B3以下级，具体而言，抑菌率在50％以下者为B3级。

抑菌圈直径随时间变化的结果如表1所示。其中，A、B、C分别代表滴加无菌蒸馏水、滴加链霉素和滴加空气清新剂的抑菌圈直径测量结果。

表5：抑菌圈直径随时间变化

通过以上数据可以明显看出：本发明涉及的空气清新剂相对链霉素针对流感嗜血杆菌有着更强的抑菌作用，且针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，尽管相同时间条件下的抑菌率相较链霉素没有更好的抑菌效果，但是该空气清新剂的抑菌持续时间更长，抑菌效果更加持久。

(2)通过统计菌落数检测空气清新剂的效果

分别测定上述步骤(1)的贴有滴加有空气清新剂的滤纸片的平板上的菌落数，计算杀菌率。实验设三次重复，结果保留整数，杀菌率的结果如表2所示。

杀菌率(％)＝(I-II)/I×100％，

式中：I表示滴加无菌水的滤纸片的平板上的平均菌落数，II滴加空气清新剂的滤纸片的平板上的平均菌落数。

根据QB/T2738-2005(《中华人民共和国轻工行业标准-日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》中的规定，杀菌率≥90％属于A1级，杀菌率介于50％～90％之间的属于A2级，杀菌率≤50％属于A3级。

表6：杀菌效果对比

通过以上数据可以明显看出：空气清新剂的针对流感嗜血杆菌的杀菌率高于链霉素，呈现出更好的流感嗜血杆菌杀菌抑菌作用，而针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，尽管空气清新剂的杀菌率与链霉素的杀菌率不相上下，但是随时间推移，空气清新剂的杀菌率降低幅度更小，效果更加持久。

实施例4：针对上呼吸道感染的空气清新剂的制备及其效果实验

实施例4与上述3个实施例之间最大的区别在于：在空气清新剂中添加了牛至精油，具体配比为：

0.5-1.5份莱姆精油、0.5-0.8份葡萄柚精油、1.0-2.0份月桂精油、0.5-1.5份罗文莎叶精油、1.0-1.5份安息香精油以及1.2-2.0份牛至精油，剩下的95％的乙醇和去离子水按照1∶2的配比组成该空气清新剂，，具体地乙醇和去离子水之间的配比可根据实际情况在1∶1.98和1∶2.02之间调整。

按照上述方式进行抑菌环法测试，基于上述实施例1-3的配比进行测试，并且在上述实施例1-3的莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油的3个独立配比条件下，分别多加入1.2、1.6以及2.0份牛至精油，剩下的95％的乙醇和去离子水按照1∶2的配比组成该空气清新剂。实施例4中的加入牛至精油的空气清新剂在6小时、12小时、24小时以及48小时后的三种细菌的抑菌圈直径上普遍比相应实施例1或2或3中未加入牛至精油的空气清新剂的抑菌圈直径大5％-10％，杀菌率也相应多0.5％-1％，因此，优选地加入牛至精油后可提高空气清新剂的抑菌作用。

本发明的空气清新剂采用喷雾的方式喷施效果会更加直观，抑菌效果也会更加明显。此外，针对乙醇和去离子水的配比，基于1∶1、1∶2、1∶3的三个配比条件，分别根据实施例1-4中各精油的配比分别作了三组实验，根据不同的乙醇和去离子水的配比条件，发现空气清新剂在上述实施例1-4中的乙醇和去离子水的1∶2的配比，可以最大化地便于空气清新剂在空气中的挥发和人群的接受和满意度，具体而言，分别有42％、77％和53％的人认为在乙醇和去离子水之间1∶1，、1∶2、1∶3的三个配比条件下感受舒适和喷洒浓度合适，由此可见乙醇和去离子水之间1∶2的配比条件是较适宜的，能够被大部分人所接受。

上述抑菌环的测定方法还存在一些限制，比如空气清新剂在平板上的扩散能力等会影响到对抑菌效果的评价，这也可能是上述实施例1、2、3中空气清新剂的抑菌效果在某些情况下较链霉素稍差的原因。

本发明的代表性实施例得到了详细的描述。这些详细的描述仅仅给本领域技术人员更进一步的相信内容，以用于实施本发明的优选方面，并且不会对本发明的范围进行限制。仅有权利要求用于确定本发明的保护范围。因此，在前述详细描述中的特征和步骤的结合不是必要的用于在最宽广的范围内实施本发明，并且可替换地仅对本发明的特别详细描述的代表性实施例给出教导。此外，为了获得本发明的附加有用实施例，在说明书中给出教导的各种不同的特征可通过多种方式结合，然而这些方式没有特别地被例举出来。

Claims (6)

1.一种针对上呼吸道感染的空气清新剂，其特征在于由莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油、乙醇和去离子水组成。

2.根据权利要求1所述的空气清新剂，其特征在于：所述莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油的体积比为(0.5-1.5)∶(0.5-0.8)∶(1.0-2.0)∶(0.5-1.5)∶(1.0-1.5)，剩下的为乙醇和去离子水，其中乙醇和去离子水之间的体积比在1∶1.98-1∶2.02的区间内。

3.根据权利要求1或2所述的空气清新剂，其特征在于：还包括牛至精油，其中莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油、安息香精油和牛至精油的体积比为(0.5-1.5)∶(0.5-0.8)∶(1.0-2.0)∶(0.5-1.5)∶(1.0-1.5)∶(1.2-2.0)，剩下的为乙醇和去离子水，其中乙醇和去离子水之间的体积比在1∶1.98-1∶2.02的区间内。

4.一种制备如权利要求1或2所述的空气清新剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将莱姆精油、葡萄柚精油、月桂精油、罗文莎叶精油和安息香精油按照相应配比加入到安装有搅拌器的容器中，搅拌均匀；

(2)在上述步骤(1)的混合物中加入95％的乙醇和去离子水，搅拌均匀即得到空气清新剂，其中乙醇和去离子水之间的比例配比在1∶1.98和1∶2.02之间调整。

5.一种如权利要求1-3中任一项所述的空气清新剂在抑制空气中致病菌中的作用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述致病菌包括流感嗜血杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。