CN104306326A

CN104306326A - 含有hpph的水性药物组合物和注射液

Info

Publication number: CN104306326A
Application number: CN201410500467.2A
Authority: CN
Inventors: 蔡强; 葛月兰; 王琼
Original assignee: JIANGSU YEW PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: Wuxi Yew Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2014-09-25
Filing date: 2014-09-25
Publication date: 2015-01-28
Anticipated expiration: 2034-09-25
Also published as: CN104306326B

Abstract

本发明涉及一种含有HPPH的水性药物组合物，按原料的重量份计所述组合物包含：HPPH0.24-0.5份，95％乙醇4.0-8.2份，0.1mol/L磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液2.0-4.2份，吐温80 0.20-0.48份，还原型谷胱甘肽-亚硫酸氢钠混合物0.02-0.05份，二巯丁二钠-亚硫酸氢钠混合物0.04-0.08份；可选地，所述组合物的原料组分包含0.1％磷酸水溶液和/或1mol/L碳酸钠水溶液，以调节该组合物pH在7.3-7.5的范围内；其余为5％葡萄糖水溶液，其将HPPH、95％乙醇、0.1mol/L磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液和吐温80的总重量份补充至200-400份。

Description

含有HPPH的水性药物组合物和注射液

技术领域

本发明涉及一种水性药物组合物和注射液及其制备方法和用途，具体地，涉及含有HPPH的水性药物组合物和注射液及其制备方法和用途。

背景技术

新型抗肿瘤光敏剂3-(1’-己氧基)乙基-3-去乙烯焦脱镁叶绿酸a(2-[1-hexyloxyethyl]-2-devinyl pyropheophorbide-a，HPPH(Photochlor))，为第二代新型抗肿瘤光敏剂，其属于二氢卟酚类化合物并已获得自主知识产权。美国Roswell Park肿瘤研究所研究人员从绿色植物中通过提取、纯化、半合成等一系列操作制备了二氢卟酚类化合物，通过检测这类化合物的光谱学特性、光毒性、暗毒性和体外抑癌试验进行了构效关系研究，从中挑选出结构单一、长激发波长、暗毒性小的二氢卟酚类化合物HPPH。HPPH具有很好的光动力活性、理想的作用光谱以及很好的靶向性，对肿瘤组织的穿透率高，临床用于肺癌、食管癌、头面颈癌、膀胱癌、胃癌等多种实体肿瘤的治疗。与第一代光敏剂相比，其光毒性明显降低，基本不需避光，用量小，使用方便，是一种极富市场潜力的使用光动力学疗法(PDT)来治疗癌症的光敏剂。

HPPH分子式：C₃₉H₄₈N₄O₄为，对应分子量636.83，其照射波长为652nm，结构式如式(I)所示

HPPH的药物活性在本领域内已得到认可，健康研究有限公司(美国)的众多专利公开了其药效、药理作用和剂量研究。然而，尽管HPPH具有非常好的抗癌疗效，但其在水中溶解性较差，且在水溶液中稳定性不佳，专利CN103961323A公开了一种注射用HPPH冻干粉针制剂，但比较注射剂，注射用冻干粉末的制备步骤繁琐，大幅度增加成本。

由此可见，本领域急需寻求一种HPPH注射液，其能克服HPPH水溶性差的确定，并具备良好的稳定性，且取得较常用药物更好的疗效。

发明内容

本发明的目的之一在于提出一种含有HPPH的水性药物组合物，其按原料的重量份计所述组合物包含：

可选地，所述组合物的原料组分包含0.1％磷酸水溶液和/或1mol/L碳酸钠水溶液，以调节该组合物pH在7.3-7.5的范围内；

其余为5％葡萄糖水溶液，其将HPPH、95％乙醇、0.1mol/L磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液和吐温80的总重量份补充至200-400；

其中所述还原型谷胱甘肽-亚硫酸氢钠混合物中还原型谷胱甘肽和亚硫酸氢钠的重量比为2:1；所述二巯丁二钠-亚硫酸氢钠混合物中二巯丁二钠和亚硫酸氢钠的重量比为3:1。

该水性药物组合物的原料包括还原性谷胱甘肽，保护药品在制备过程中光照下不被氧化，谷胱甘肽也可抗体内过氧化离子，保护药品剂量稳定，从而带来在肿瘤细胞中疗效稳定，并使正常细胞不被过氧化；由于原性谷胱甘肽可形成抗氧化及抗过氧化离子，使药物杂质减少，药物安全性提高，并使人体抗放疗光辐射。

该水性药物组合物的原料还包括二巯丁二钠，能络合辅料中带来铁离子。由于二价铁离子在光照和氧作用下可被氧化成三价铁离子，而三价铁离子氧化药品，再次还原为二价铁离子，以此循环，药品含量递降；而巯丁二钠络合三价铁离子，消除药品含量递降。

另外亚硫酸氢钠的加入可保护HPPH的酮基，使其稳定。

本发明的目的还在于含有HPPH的水性药物组合物的制备方法，其包括以下步骤：

1)生产环境、反应容器和工具灭菌；

2)混合原料：按配比称取HPPH，依次加入95％乙醇、0.1M磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液、吐温80、5％葡萄糖水溶液、还原型谷胱甘肽-亚硫酸氢钠混合物和二巯丁二钠-亚硫酸氢钠混合物

3)溶解：搅拌至溶解完全，调节pH值；

4)过滤：依次进行粗滤、除菌过滤和除热原超滤。

在步骤1)中，生产环境、反应容器和工具灭菌可采用领域内任意已知的灭菌方式，一个示例性的灭菌方法如下：所述生产环境灭菌为使用经0.45μm膜过滤的消毒液擦洗房间，使用臭氧灭菌；所述反应容器灭菌为使用洗瓶机清洗反应容器，然后放至烘箱内在200℃，2小时的条件下进行干热灭菌；所述工具灭菌为将生产中用到的工具清洗后，根据工具材质的要求进行湿热和/或干热灭菌，其中湿热灭菌条件为121℃，45分钟，干热灭菌条件为200℃，2小时。

在步骤2)中，反应容器为锥形瓶；加入95％乙醇后，小心振摇，大部分HPPH可溶解，同时避免HPPH粉末粘于在容器壁；

优选地，加0.1M磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液后，振摇使HPPH全溶，所述0.1M磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液是新配制的溶液；

加入吐温80后，加入5％葡萄糖水溶液，其将HPPH、95％乙醇、0.1mol/L磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液和吐温80的总重量份补充至200-400份，然后再加入还原型谷胱甘肽-亚硫酸氢钠混合物和二巯丁二钠-亚硫酸氢钠混合物。

在步骤3)中，所述搅拌溶解在充保护气下进行，优选地，所述保护器为惰性气体，最优选氮气；保护器氛围中药物在光照下不被氧化；药物安全及疗效稳定；

搅拌转速为60-100r/min，搅拌温度为室温。

搅拌过程中监测HPPH含量，HPPH的浓度在1.15-1.25mg/ml范围内时停止搅拌；优选地，搅拌时间为3-6小时。

在步骤3)中，用0.1％磷酸水溶液调节pH值至7.3-7.5，当加入所述磷酸水溶液后组合物的pH值低于7.3时，用1mol/L碳酸钠水溶液回调。

在步骤4)中，所述粗滤采用0.45μm孔径的醋酸纤维素膜材进行；所述除菌过滤采用0.2μm孔径的醋酸纤维素膜进行；所述除热原超滤采用截留分子量2000D的膜。2000D膜超滤可除去药液中的细菌内毒素及细菌内毒素分子片断，消除药物中热原，保证药物安全。

本发明的目的还在于提供本发明所述的含有HPPH的水性药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。该组合物其能克服HPPH水溶性差的确定，并具备良好的稳定性，可装入适合的容器中，作为抗肿瘤注射剂使用。

本发明提供一种注射剂，其包含本发明所述的含有HPPH的水性药物组合物。

所述注射剂的制备方法为在充氮气保护下将本发明所述的含有HPPH的水性药物组合物灌装于安瓿瓶中，并进行封口。

本发明所述的含有HPPH的水性药物组合物使用还原型谷胱甘肽、二巯丁二钠和亚硫酸氢钠这三种成分，克服了HPPH水溶性差和不稳定的缺点。从抗肿瘤药物药效学试验可知，本发明的含有HPPH的水性药物组合物的抑瘤率最高可达94％，不良反应率最低为8％，可见该HPPH水性药物组合物取得了较其他抗肿瘤药物更好的药效。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。

实施例1

含有HPPH的水性组合物的原料及其重量

实施例2

含有HPPH的水性组合物的原料及其重量：

实施例3

含有HPPH的水性组合物的原料及其重量

实施例4

含有HPPH的水性组合物的原料及其重量

实施例5

HPPH注射液配比

实施例6

含有HPPH的水性组合物的制备方法：

1)生产环境、反应容器和工具灭菌；使用经0.45μm膜过滤的消毒液擦洗房间，任何使用臭氧灭菌；使用洗瓶机清洗反应容器，然后放至烘箱内在200℃，2小时的条件下进行干热灭菌；将生产中用到的工具清洗后，根据工具材质的要求进行湿热和/或干热灭菌，其中湿热灭菌条件为121℃，45分钟，干热灭菌条件为200℃，2小时。

2)混合原料：按上述实施例的配比称取HPPH原料于锥形瓶中，加入95％乙醇，小心振摇使大部分HPPH溶解，并避免将粉末粘在容器壁上；加入新制0.1M磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液，振摇使HPPH全溶；加入吐温80，振摇使完全分散并溶解；加5％葡萄糖溶液；加入还原型谷胱甘肽-亚硫酸氢钠混合物、二巯丁二钠-亚硫酸氢钠混合物。

3)溶解：充氮其保护下，60-100r/min的转速进行室温搅拌3-6小时，搅拌过程中取样监测含量，HPPH的浓度在1.15-1.25mg/ml范围内时可停止搅拌；使用0.1％磷酸调pH至7.3-7.5，如果低于7.3，可用1mol/L碳酸钠回调；

4)过滤：依次进行粗滤、除菌过滤和除热原超滤；采用0.45μm孔径醋酸纤维素膜材进行粗滤；采用0.2μm孔径醋酸纤维素膜材进行除菌过滤；用截留分子量2000D的膜除热原。

实施例7：

抗肿瘤药物药效学试验：

选大鼠种瘤模型：瓦克癌肉瘤(W256)型。取大鼠体重50-70g，每组10只。设阴性对照组和阳性对照组。阴性对照组注射生理盐水，阳性对照组采用现售紫杉醇药品。每天1次给药，治疗时间15天。停药24小时后处死动物，解剖剥离瘤块，称瘤重。计算疗效评价公式为：

肿瘤抑制率％＝(C-T)/C×100％

当抑制率大于30％时视为有效。

项目	肿瘤抑制率％	不良反应率％
			现售紫杉醇注射剂50mg/kg腹腔注射	73	30
实施例1组合物7mg/kg腹腔注射	88	10
			实施例2组合物7mg/kg腹腔注射	92	8
实施例3组合物7mg/kg腹腔注射	89	9
			实施例4组合物7mg/kg腹腔注射	94	13
实施例5组合物7mg/kg腹腔注射	88	11

该实施例证明，所述HPPH药物组合物的疗效、安全性优于现有药物。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims

1.一种含有HPPH的水性药物组合物，其特征在于，按原料的重量份计所述组合物包含：

其余为5％葡萄糖水溶液，其将HPPH、95％乙醇、0.1mol/L磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液和吐温80的总重量份补充至200-400份；

2.根据权利要求1所述的含有HPPH的水性药物组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)生产环境、反应容器和工具灭菌；

3)溶解：搅拌至溶解完全，调节pH值；

4)过滤：依次进行粗滤、除菌过滤和除热原超滤。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤1)中，所述生产环境灭菌为使用经0.45μm膜过滤的消毒液擦洗房间，使用臭氧灭菌；

优选地，所述反应容器灭菌为使用洗瓶机清洗反应容器，然后放至烘箱内在200℃，2小时的条件下进行干热灭菌；

优选地，所述工具灭菌为将生产中用到的工具清洗后，根据工具材质的要求进行湿热和/或干热灭菌，其中湿热灭菌条件为121℃，45分钟，干热灭菌条件为200℃，2小时。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤2)中，加入95％乙醇后，振摇溶解HPPH，且避免HPPH粉末粘于容器壁；

优选地，加0.1M磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液后，振摇使HPPH全溶，所述0.1M磷酸氢二钠5％葡萄糖水溶液是新配制的溶液。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，所述搅拌溶解在充保护气下进行，优选地，所述保护器为惰性气体，最优选氮气；

优选地，搅拌转速为60-100r/min，搅拌温度为室温；

优选地，搅拌过程中监测HPPH含量，HPPH的浓度在1.15-1.25mg/ml范围内时停止搅拌；

优选地，搅拌时间为3-6小时。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，用0.1％磷酸水溶液调节pH至7.3-7.5，当加入所述磷酸水溶液后组合物的pH值低于7.3时，用1mol/L碳酸钠水溶液回调。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤4)中，所述粗滤采用0.45μm孔径的醋酸纤维素膜材进行；

优选地，所述除菌过滤采用0.2μm孔径的醋酸纤维素膜进行；

优选地，所述除热原超滤采用截留分子量2000D的滤膜。

8.根据权利要求1所述的含有HPPH的水性药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

9.一种注射剂，其包含根据权利要求1所述的含有HPPH的水性药物组合物。

10.根据权利要求9所述的注射剂的制备方法，其特征在于，充保护气下将根据权利要求1所述的含有HPPH的水性药物组合物灌装于安瓿瓶中，并进行封口。