CN104272112B - 用于帮助诊断中风的基于生物标记的方法和生物芯片 - Google Patents

用于帮助诊断中风的基于生物标记的方法和生物芯片 Download PDF

Info

Publication number
CN104272112B
CN104272112B CN201280068312.5A CN201280068312A CN104272112B CN 104272112 B CN104272112 B CN 104272112B CN 201280068312 A CN201280068312 A CN 201280068312A CN 104272112 B CN104272112 B CN 104272112B
Authority
CN
China
Prior art keywords
biomarker
apoplexy
concentration
stroke
patient
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201280068312.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104272112A (zh
Inventor
J·莱蒙特
I·迈克耐尔
P·菲茨杰拉德
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Randox Laboratories Ltd
Original Assignee
Randox Laboratories Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Randox Laboratories Ltd filed Critical Randox Laboratories Ltd
Publication of CN104272112A publication Critical patent/CN104272112A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104272112B publication Critical patent/CN104272112B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
    • G01N33/6842—Proteomic analysis of subsets of protein mixtures with reduced complexity, e.g. membrane proteins, phosphoproteins, organelle proteins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6863—Cytokines, i.e. immune system proteins modifying a biological response such as cell growth proliferation or differentiation, e.g. TNF, CNF, GM-CSF, lymphotoxin, MIF or their receptors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G01N2333/4701—Details
    • G01N2333/4737—C-reactive protein
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/52—Assays involving cytokines
    • G01N2333/54—Interleukins [IL]
    • G01N2333/5412—IL-6
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G01N2333/70525—ICAM molecules, e.g. CD50, CD54, CD102
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G01N2333/70542—CD106
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/7056—Selectin superfamily, e.g. LAM-1, GlyCAM, ELAM-1, PADGEM
    • G01N2333/70564—Selectins, e.g. CD62
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30 CD40 or CD95
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/715—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • G01N2333/7151—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF]; for lymphotoxin [LT]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2871—Cerebrovascular disorders, e.g. stroke, cerebral infarct, cerebral haemorrhage, transient ischemic event
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/32—Cardiovascular disorders
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/60—Complex ways of combining multiple protein biomarkers for diagnosis

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明提供了用于诊断怀疑遭受中风的患者的中风的基于生物标记的方法，以及还提供了用于区分缺血性中风和短暂性脑缺血发作的基于生物标记的方法。还描述了包括用于在本发明的方法中有用的生物标记的特定组合的探针的基质。

Description

用于帮助诊断中风的基于生物标记的方法和生物芯片
背景技术
中风是全球第三大致死原因，并且可被定义为由于脑部供血中断造成的快速发展的脑功能损失。根据世界卫生组织统计，全球每年有1500万人遭受中风，其中500万人死亡且还有500万人永久致残。高血压被估计是这1500万中风病例中的1270万病例的致病因素。在英国，每年大约150000人遭受中风，并且每年中风造成大约53000例死亡。中风使得仅英国经济就每年花费估计80亿英镑，并且中风患者占用了全部急救床位的大约20％以及长期床位的25％。中风可被分类成三种子类型：
i)在脑部供血降低时发生缺血性中风(IS)，这造成脑部损伤。在血管变得堵塞(通常经由血块)时发生缺血性中风。这一血块可在动脉粥样硬化斑块处局部形成(血栓性中风)，或者可由于血流中源自其他位置的游动颗粒或碎片而发生(栓塞性中风)。
ii)短暂性脑缺血发作(TIA)是在内部供血暂时降低时发生的‘迷你中风’。如果症状快速消退(在24小时内，个人恢复正常健康)，则TIA被确诊；以及
iii)当血液在颅顶积聚时(通常是在弱化血管破裂时)，溢血性中风(HS)发生。溢血性中风可被分类成两个主要子类，即脑内(脑组织内)和蛛网膜下(脑表面周围及其保护层之下)。
IS和TIA占所有中风病例的大约85％，而HS占15％。为了最小化中风后神经损伤，中风患者被快速且准确地确诊以使得可以给予适当地治疗是关键的。例如，为了分解血块，可以给予诸如组织纤维蛋白溶酶原激活剂(TPA)等溶栓治疗。然而，这样的治疗只在IS中是被许可的而在HS中是有害的。TIA的性质不需要这样的治疗并且在这些情况下开出诸如华法林和阿司匹林等血液稀释剂处方。
当前，如果怀疑患有中风，则评估身体症状并且通常执行计算机断层(CT)扫描。CT扫描具有用于标识HS患者的良好敏感性(大约90％敏感性)但具有用于标识IS和TIA患者的很差敏感性(大约20％敏感性)。在实践中，对于TIA而言，由于其暂时的性质，最小或没有组织损伤发生，因此CT扫描作为诊断技术是无效的。磁共振成像(MRI)具有用于IS诊断的经改进的敏感性(上达大约80％)，但增加的时间要求、机器可访问性、以及高成本限制了它被用于中风诊断。CT扫描来检测IS和TIA的很差敏感性意味着用于检测IS和TIA的基于生物体液的诊断生物标记测试将会是帮助临床医生诊断中风子类型的无价工具。基于生物体液的生物标记具有加快并提高中风诊断的准确性的潜力。
已经提出了各种候选的生物标记来用于中风诊断和中风子类型描绘，并且现有技术中存在这IS/TIA对HS区分的若干描述，例如EP1238284、WO 2010/086697、WO 2010/012834以及WO 2002/012892。
EP1419388公开了将IS与HS相区分以及将所有中风类型与非中风对照相区分的数据。然而，迄今，无人发现在临床实践中的用途并且存在着对所有三个中风子类型的具有用于启用准确诊断的高敏感性和特异性的生物标记的真实临床需求。
此外，当前没有用于将IS与TIA区分开的生物标记。使用血液测试区分IS和TIA会促进更有见识的临床决策，可能放弃不必要的昂贵且较不迅速的神经成像诊断，并且会提高对可能需要溶栓治疗干预的患者的标识。
发明内容
根据第一方面，本发明提供一种用于诊断怀疑患有中风的患者的中风的方法，包括确定从该患者获得的体外样本中的至少两个生物标记的浓度，以及通过将每一生物标记的浓度值与对应的对照值进行比较来确立生物标记的浓度的显著性，其中该至少两个生物标记是从ICAM-1、L-选择素、P-选择素、VCAM-1、IL-6、sTNFR1、D-二聚体以及CRP中选择的，并且其中这两个生物标记中的至少一个是从ICAM-1、L-选择素、P-选择素以及VCAM-1中选择的。
根据第二方面，本发明提供了一种基质，包括用于从ICAM-1、L-选择素、P-选择素、VCAM-1、IL-6、sTNFR1、D-二聚体以及CRP中选择来用于根据本发明的第一方面的方法的至少两个生物标记的探针，其中该基质包括用于ICAM-1、L-选择素、P-选择素以及VCAM-1中的至少一个的探针。
根据第三方面，本发明涉及将根据所述第二方面的基质用于根据所述第一方面的诊断中风的方法中。
根据第四方面，本发明提供了一种帮助诊断怀疑患有中风的患者的缺血性中风的方法，包括：
i)确定在从患者获得的体外样本中VCAM-1和从h-FABP、IL-6以及CRP中选择的一个或多个生物标记的浓度；以及
ii)通过将每一生物标记的浓度值与对应的对照值进行比较来确立生物标记的浓度的显著性，其中对应的对照值是从获得自一个或多个短暂性脑缺血发作患者的体外样本确定的对应生物标记的浓度值。这一方法可被用来区别性地诊断出缺血性中风和短暂性脑缺血发作。
根据第五方面，本发明提供了一种包括探针的基质，所述探针用于VCAM-1和从h-FABP、IL-6以及CRP选择的至少一个其他生物标记来用于根据本发明的第三方面的方法。
根据第六方面，本发明涉及将根据所述第五方面的基质用于根据所述第四方面的诊断中风的方法中。
附图说明
图1是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的VCAM-1的浓度的图表；
图2是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的ICAM-1的浓度的图表；
图3是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的E-选择素的浓度的图表；
图4是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的P-选择素的浓度的图表；
图5是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的L-选择素的浓度的图表；
图6是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的IL-6的浓度的图表；
图7是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的sTNFR1的浓度的图表；
图8是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的NGAL的浓度的图表；
图9是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的D-二聚体的浓度的图表；
图10是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的TM的浓度的图表；
图11是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的CRP的浓度的图表；
图12是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的h-FABP的浓度的图表；
图13是示出所有中风患者、每一中风子类型以及对照受验者的经稀释的CRP的浓度的图表；
图14是VCAM-1的ROC曲线(所有中风对对照)；
图15是ICAM-1的ROC曲线(所有中风对对照)；
图16是P-选择素的ROC曲线(所有中风对对照)；
图17是L-选择素的ROC曲线(所有中风对对照)；
图18是IL-6的ROC曲线(所有中风对对照)；
图19是sTNFR1的ROC曲线(所有中风对对照)；
图20是CRP的ROC曲线(所有中风对对照)；
图21是NGAL的ROC曲线(所有中风对对照)；以及
图22是D-二聚体的ROC曲线(所有中风对对照)。
具体实施方式
本发明涉及可被用来快速诊断中风的基于生物标记的方法和生物芯片，并且还涉及帮助区分三种中风子类型：。溢血性中风(HS)、缺血性中风(IS)以及短暂性脑缺血发作(TIA)。
除非另外指明，本文中对术语‘中风’的所有引用涵盖了所有三种形式的中风。
本文中对‘怀疑患有中风的患者’或‘患有中风’的引用包括怀疑当前遭受中风或怀疑先前遭受过中风的患者。中风可以是最近事件，如发起了个人寻求临床帮助的过程的事件。
在本文中，术语“受验者”和“患者”可互换地使用并且指的是包括非灵长类(例如，牛、猪、马、狗、猫、大鼠以及小鼠)和灵长类(例如，猴和人类)的哺乳动物。优选地，受验者或患者是人类。
如在本文中使用的，术语‘生物标记’指的是从患者获得的生物样本中存在的分子，其在所述样本中的浓度可指示病理状态。本文描述了已被发现(单独地或与其他诊断方法相组合，或作为与其他生物标记相组合的补充性生物标记)有用于诊断中风和中风子类型的各种生物标记。如在本文中使用的，术语‘补充性生物标记’指的是可结合其他中风生物标记来使用以支持诊断的生物标记。
本领域中很好理解，生物标记正常或‘背景’浓度可由于例如年龄、性别或人种/地理基因型而展现出微小的变化。结果，在本发明的方法中使用的临界值也可由于取决于目标患者/人群的优化而稍微变化。
从患者获得的生物样本优选地是血液、血清、或血浆样本。如本文中所使用的，术语‘体外’具有其在本领域中的普通意义，并且指的是已从患者的身体移除的样本。
在从患者取得血液样本以供分析时，全部血液、血清或血浆被分析。对血液样本的分析可以通过若干分析方法，如链接到预分离步骤的质谱分析(如色谱法)。优选的方法基于免疫学检测。免疫学检测技术也容易地合并到便携式或手持式设备以供在临床环境之外使用。诸如蛋白质印迹法(Western blot)或ELISA等定量免疫分析可被用来检测蛋白质的量。一种优选的分析方法包括使用多分析物生物芯片，它使得能够同时检测并量化若干蛋白质。2D凝胶电泳也是一种可被用于多分析物分析的技术。
本发明的第一方面提供一种用于诊断怀疑患有中风的患者的中风的方法，包括确定从该患者获得的体外样本中的至少两个生物标记的浓度，以及通过将每一生物标记的浓度值与对应的对照值进行比较来确立生物标记的浓度的显著性，其中该至少两个生物标记是从ICAM-1、L-选择素、P-选择素、VCAM-1、IL-6、sTNFR1、D-二聚体以及CRP中选择的，并且其中这两个生物标记中的至少一个是从ICAM-1、L-选择素、P-选择素以及VCAM-1中选择的。
优选地，该至少两个生物标记是从(i)ICAM-1或VCAM-1以及(ii)L-选择素或P-选择素中选择的，并且更优选地，它们是ICAM-1和L-选择素。三个或更多生物标记的组合也是优选的，因为它们示出了最高的敏感性和特异性。
在优选实施例中，该方法还包括确定从IL-6、sTNFR1、D-二聚体以及CRP选择的一个或多个生物标记的样本浓度。该方法还可包括确定h-FABP的样本浓度。
为了避免疑惑，在本发明的这一方面的上下文中，‘中风’指的是‘所有中风’(即，所有三种中风子类型)。
优选的生物标记组合是在表1或表2中列出的那些。这些表提供了中风对对照的不同生物标记组合的敏感性、特异性以及AUC数据。
表1
表2
生物标记浓度可通过将样本接触具有专用于该生物标记组合中包括的各生物标记中的每一生物标记的探针的基质来确定。生物标记与其相应探针之间的相互作用可被使用本领域已知的各种技术来监视并量化。生物标记浓度优选地按ng/ml来测量。
优选地，固态设备被用于本发明的方法中，优选地是生物芯片阵列技术(BiochipArray Technology)系统(BAT)(可从Randox Laboratories有限公司购得)。更优选地，迹象演化(Evidence Evolution)和迹象调查(Evidence Investigator)装置(可从RandoxLaboratories购得)可被用来确定样本中生物标记的水平。
对照值是从得自没有经历中风的一个或多个人的生物样本中的对应生物标记的浓度来导出的。没有经历中风的这些人可以例如是健康的人、遭受与中风不同的疾病的人。或者，对照值可与在中风事件之前从该患者获得的样本中的每一生物标记的浓度相对应。
为避免疑惑，术语‘对应的生物标记’意味着相关于该患者的样本所确定的生物标记的同一组合的浓度也被用于确定对照值。例如，如果患者的样本中的ICAM-1和L-选择素的浓度被确定，则对照样本中ICAM-1和L-选择素的浓度也被确定。
在优选实施例中，患者和对照生物样本浓度值中的每一个被输入到一个或多个统计算法以产生指示是否发生中风的输出值。
临界浓度或值是使用统计技术导出的；各种不同的方法可用于开发统计算法并且对本领域技术人员而言是公知的。一种生物标记统计分析的标准方法是使用单变量方法来将各组中的生物标记水平进行比较并突出其浓度在特定组之间显著不同的那些生物标记。
根据本发明使用的统计方法的准确度可由它们的受试者工作特性(ROC)来最佳地描述。ROC曲线既解决测试的敏感性、真阳性的数量，也解决测试的特异性、真阴性的数量。因此，生物标记的给定组合的敏感性和特异性值是化验准确度的指示。例如，如果生物标记组合具有80％的敏感性和特异性值，则在患有中风的100个患者中，80个将根据确定生物标记的该特定组合的存在来作为中风阳性而被正确标识出，而在没有遭受中风的100个患者中，80个将针对该疾病被正确地测试为阴性。
如果两个或更多个生物标记要被用于该诊断方法中，可以导出合适的数学模型，如逻辑回归(logistic regression)方程。该逻辑回归方程可包括其他变量，如患者的年龄和性别。ROC曲线可被用来评估逻辑回归模型的准确度。逻辑回归方程可被独立地使用或在一算法中使用以帮助临床决策。虽然逻辑回归方程是在这些情况下使用的常见的数学/统计过程，并且在本发明的上下文中是优选的，但也可使用其他数学/统计过程。
作为示例，适用于本发明的(分类临界值为0.5)用于生物标记组合ICAM-1、L-选择素、D-二聚体以及sTNFR1以指示怀疑患有或当前经历中风的患者的中风对非中风(对照)的逻辑回归方程被如下计算：
其中[ICAM-1]、[L-选择素]、[D-二聚体]以及[sTNFR1]是在从患者取得的血液样本中测量的ICAM-1、L-选择素、D-二聚体以及sTNFR1的浓度(参见表1的118号的AUC值)。
如果执行本发明的方法的结果是中风的阳性诊断，则患者应当被相应地治疗。然而，因为最适当和有效的治疗根据中风子类型而变化，所以在中风的阳性诊断之后能够进一步区分三种不同子类型是有用的。例如，如果患者遭受IS，则可以给予诸如组织纤维蛋白溶酶原激活剂(TPA)等溶栓治疗以分解血块。或者，如果患者遭受TIA，则可以开出诸如华法林和阿司匹林等血液稀释剂处方。
因此，根据另一实施例，根据本发明的第一方面的方法可任选地包括执行如本发明的第四方面中定义的用于区别性地诊断出IS和TIA的附加步骤。
本发明的第二相关方面提供了一种基质，包括用于从ICAM-1、L-选择素、P-选择素、VCAM-1、IL-6、sTNFR1、D-二聚体以及CRP中选择来用于根据本发明的第一方面的诊断患者中风的方法的至少两个生物标记的探针，其中该基质包括用于ICAM-1、L-选择素、P-选择素以及VCAM-1中的至少一个的探针。可任选地，该基质还可包括用于h-FABP的探针。
优选地，该基质上固定有至少两个探针，更优选地，固定有三个、四个或更多个探针，其中每一探针专用于一单独的生物标记。如本文中所使用的，术语‘专用’意味着该探针只结合到本发明的各生物标记之一，只具有与本发明的其他生物标记或与被分析的生物样本中的其他分析物的可忽略结合。这确保使用本发明的生物标记的诊断化验及其结果的完整性不受附加结合事件的损害。
该基质可以是能够支持一个或多个探针的任何基质，但优选地是生物芯片。生物芯片是可以是例如基于矿物或聚合物的平坦基质，但优选地是陶瓷。在标识本发明的各生物标记/蛋白质时，对本领域技术人员显而易见的是，与标识全长蛋白质相同，标识蛋白质的一段或几段是可能的，假定这允许准确标识该蛋白质。类似地，虽然本发明的优选探针是多克隆或单克隆抗体，但可以使用诸如适配体、分子印迹聚合体、短链抗体片段、以及其他基于抗体的探针等其他探针。
在本发明的相关第三方面，根据所述第二方面的基质被用于根据本发明的第一方面的方法中。
本发明还提供一种套件，该套件包括用于从ICAM-1、L-选择素、P-选择素、VCAM-1、IL-6、sTNFR1、D-二聚体以及CRP中选择的至少两个生物标记的探针，附加试剂，基质/反应面和/或使用说明。这样的套件可被用来根据本发明的第一方面诊断患者的中风。
本发明的第四方面提供了一种帮助诊断怀疑患有中风的患者的缺血性中风的方法，包括：
i)确定在从患者获得的体外样本中VCAM-1和从h-FABP、IL-6以及CRP中选择的一个或多个生物标记的浓度；以及
ii)通过将每一生物标记的浓度值与对应的对照值进行比较来确立生物标记的浓度的显著性，其中对应的对照值是从获得自一个或多个短暂性脑缺血发作患者的体外样本确定的对应生物标记的浓度值。
有利地，这一方法可被用来区别性地诊断出缺血性中风和短暂性脑缺血发作。
生物标记或生物标记组合中的每一个可被单独使用或作为补充性生物标记来使用。可以从表4中的数据中标识出优选的生物标记组合。
可通过测量在临床上诊断为患有或曾患有TIA的一个或多个患者的生物标记VCAM-1和一个或多个h-FABP、IL-6以及CRP的浓度来确立对照值。该诊断可以使用诸如临床检查和神经成像分析(这会排除HS的可能性)等技术来导出。
生物标记浓度可通过将样本接触具有专用于该生物标记组合中包括的各生物标记中的每一生物标记的探针的基质来确定。生物标记与其相应探针之间的相互作用可被使用本领域已知的各种技术来监视并量化。
在优选实施例中，患者和对照生物样本浓度值中的每一个被输入到一个或多个统计算法以产生指示是否发生缺血性中风的输出值。
作为示例，以下浓度(‘临界(cut-off)’浓度)支持患者的IS诊断：h-FABP≥约10ng/ml；VCAM-1≥约570ng/ml；CRP≥约30μg/ml；以及IL-6≥约12pg/ml。然而，生物标记正常或‘背景’浓度可由于例如年龄、性别或人种/地理基因型而展现出微小的变化。结果，所使用的临界值也可由于取决于目标患者/人群的优化而稍微变化。
临界浓度或值通常使用统计技术来导出。一种生物标记统计分析的标准方法是使用单变量方法来将各组中的生物标记水平进行比较并突出其浓度在特定组之间显著不同的那些生物标记。此后是受试者工作特性(ROC)分析。
如以上相关于本发明的第一方面所描述的，ROC曲线是评估诊断测试的准确度的优选方法。它还以曲线下面积(AUC)的形式提供了该测试的预测力的测量，这可具有0.5到1的值。作为一般规则，具有约80％或更高敏感性以及约80％或更高特异性的测试在本领域中被认为是可能有用的测试，但这些值根据临床应用而变化。
根据本发明的方法，为了区分IS和TIA，高特异性是关键的。对于给定测试，它的AUC的值越接近1.0，预测力就越大。可以从涉及两个或更多个生物标记的任何测试中导出逻辑回归方程。该逻辑回归方程可包括其他变量，如患者的年龄和性别。ROC曲线可被用来评估逻辑回归模型的准确度。逻辑回归方程可被独立地使用或在一算法中使用以帮助临床决策。虽然逻辑回归方程是常见数学/统计工具，但其他数学/统计过程在本领域中是公知的并且可根据本发明来使用。
执行根据本发明的这一方面的方法的结果将是诊断出IS或TIA并且患者应当随后被相应地治疗。如果作为执行本发明的方法的结果，确定患者遭受IS，则可以给予诸如溶栓治疗(例如，组织纤维蛋白溶酶原激活剂(TPA))等适当的治疗来分解血块。这可以结合其他适当的治疗来给药，如医生所确定的。如果作为执行本发明的方法的结果，确定患者遭受TIA，则可开出诸如华法林和阿司匹林等血液稀释剂处方并给药。
本发明的相关第五方面提供了一种包括用于VCAM-1和从h-FABP、IL-6以及CRP选择的至少一个其他生物标记来用于根据本发明的帮助诊断患者的缺血性中风的方法的探针的基质。
该基质包括至少两个探针，优选地是三或四个探针，每一探针专用于一单独的生物标记。如本文中所使用的，术语‘专用’意味着该探针只结合到本发明的各生物标记之一，只具有与本发明的其他生物标记或与被分析的生物样本中的其他分析物的可忽略结合。这确保使用本发明的生物标记的诊断化验及其结果的完整性不受附加结合事件的损害。
该基质可以是能够支持一个或多个探针的任何基质，但优选地是生物芯片。生物芯片是可以是例如基于矿物或聚合物的平坦基质，但优选地是陶瓷。在标识本发明的各生物标记/蛋白质以及标识全长蛋白质时，对本领域技术人员显而易见的是，标识蛋白质的一段或几段是可能的，假定这允许准确标识该蛋白质。类似地，虽然本发明的优选探针是多克隆或单克隆抗体，但可以使用诸如适配体、分子印迹聚合体、短链抗体片段、以及其他基于抗体的探针等其他探针。
优选地，固态设备被用于本发明的方法中，优选地是生物芯片阵列技术(BiochipArray Technology)系统(BAT)(可从Randox Laboratories有限公司购得)。更优选地，迹象演化(Evidence Evolution)和迹象调查(Evidence Investigator)装置(可从RandoxLaboratories购得)可被用来确定样本中生物标记的水平。
在本发明的相关第六方面，根据所述第五方面的基质被用于根据本发明的第四方面的方法中。
本发明还提供一种套件，该套件包括用于VCAM-1和从h-FABP、IL-6以及CRP选择的至少一个其他生物标记的探针，附加试剂，基质/反应面和/或使用说明。这样的套件可被用来根据本发明的第三方面诊断患者的IS。
本发明的又一方面涉及使用h-FABP、sTNFR1、IL-6、D-二聚体、L-选择素、P-选择素、ICAM-1、VCAM-1以及CRP中的一个或多个作为中风或中风子类型的补充性生物标记。作为补充性生物标记，它们可结合诸如DJ-1、BNP、S100β、MMP-9、MCP-1、ApoC1、ApoC3、血管性血友病(von Willebrand)因子、NMDA受体、ADMA以及Lp-PLA2等蛋白质来被用于中风/中风子类型诊断。
现在将通过引用以下非限制性示例来进一步描述本发明。
示例：
患者组
本研究包括进入希腊雅典的KAT General Hospital的急诊部的显示中风症状的98位患者。在入院时以及在第1、2、3和7天采集了血液样本。从中风症状发作到入院的平均时间是3.2小时。患者的平均年龄是75.2岁(标准差9.4)。临床评估(使用背景部分中突出显示的准则)和神经成像技术标识出44例缺血性中风(IS)、25例溢血性中风(HS)、29例短暂性脑缺血发作(TIA)；60个健康受验者担当对照(C)。
样本分析
以下蛋白质对照从研究组的患者获得的血液的EDTA血浆样本进行了测试：ICAM-1、VCAM-1、E-选择素、L-选择素、P-选择素、IL-6、h-FABP、CRP、D-二聚体、sTNFR1、TM以及NGAL。这些蛋白质是使用合并了生物标记专用抗体和迹象调查(英国Crumlin的RandoxLaboratories有限公司)的复用生物芯片来检测和量化的。同时免疫测定根据制造者的说明来执行。对于每一生物标记化验九点校准曲线和三次基准控制以允许结果的确认。对于CRP IS对TIA分析，样本被10倍稀释。
统计分析
Kruskal-Wallis测试(显著性极限0.05)被用来标识跨这四个组(IS、HS、TIA以及C)区别性地表达的分析物。使用Holm的顺序Bonferroni调整来实现不同组之间的事后比较。Mann-Whitney测试被用来比较‘所有中风’和‘对照’。结果在图1-13中示出。
单个生物标记经受ROC曲线分析以评估敏感性和特异性。逻辑回归被用来在ROC曲线分析之后对中风和中风子类型对于生物标记的各组合的浓度的依赖性进行建模，以评估该模型的分类准确度。结果在图1-22中示出。
结果
表1和表2详细示出了诊断中风的生物标记的示例性组合的敏感性、特异性以及统计力(AUC)(所有中风对对照)。通过组合从ICAM-1、VCAM-1、L-选择素、P-选择素、IL-6、CRP、D-二聚体以及sTNFR1选择的两个或更多个生物标记来测试中风的发生，达到了具有高诊断性能的测试。同样，首次发现蛋白质VCAM-1、IL-6、h-FABP以及CRP的血液浓度能够区分IS和TIA。本发明的有用性的关键是生物标记的高区分力。旨在区分IS和TIA的测试必须具有尽可能高的特异性以排除TIA。
如果TIA不能通过生物标记来排除，则该诊断将是IS或TIA，即它将不能区分这两种中风子类型。因此，该测试的特异性应当尽可能接近100％。该测试的敏感性应当足够大以对患者具有价值并且在经济上是可行的。表3示出了使用Mann-Whitney和Kruskal-Wallis测试的对于遭受TIA、IS以及HS的患者的分析物浓度的统计分析。表4示出了针对IS对TIA的单独的和编组的生物标记的ROC曲线分析(敏感性和特异性值)。如可以看到的，生物标记中的每一个具有100％特异性以及与通常使用的CAT扫描相等或更大的敏感性。这以经济且快速的方式促进了临床诊断并为怀疑的中风患者的后续治疗决策提供更多信息。
表3
[所有中风＝TIA+IS+HS；C＝对照；ns＝在50％水平上没有显著不同(P>0.05)]
表4
本发明的临床使用
本发明的使用可被预想在与遭受中风类事件的个人相关的以下场景中：
i)在运往医院途中，从该个人取得生物体液样本并使用本发明的生物标记来测试所有中风类型——阳性中风结果被确认并且被进一步分成HS或IS/TIA，此后由医生和使用CAT扫描分析来检查该个人。如果HS被排除，则进一步的生物标记测试被实现以区分IS/TIA。
ii)在医院，在医生检查之前，与CAT扫描检查相关联地进行从该个人取得的生物体液样本的中风生物标记分析——如果HS被排除，则进一步的生物标记测试被实现以区分IS/TIA。
缩写
IL-6–白细胞介素-6
ICAM-1–细胞内粘附分子-1
VCAM-1–血管细胞粘附分子-1
CRP-C-反应蛋白
h-FABP–人脂肪酸结合蛋白
sTNFR–可溶性TNFα受体
TM-血栓调节蛋白
NGAL-中性粒细胞明胶酶相关脂蛋白
MMP-9-基质金属蛋白酶-9
BNP-脑钠素
ADMA–不对称二甲基精氨酸
Lp-PLA2-脂蛋白相关磷脂酶A2

Claims (3)

1.一种VCAM-1和IL-6中的一个或多个以及h-FABP作为生物标记在制备帮助区分缺血性中风和短暂性脑缺血发作的试剂中的用途。
2.一种包括用于h-FABP和从VCAM-1、IL-6及CRP中选择的至少一个其他生物标记的探针的套件在制备帮助区分缺血性中风和短暂性脑缺血发作的试剂中的用途。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述套件还包括附加试剂，反应面和/或使用说明。
CN201280068312.5A 2011-12-02 2012-12-03 用于帮助诊断中风的基于生物标记的方法和生物芯片 Active CN104272112B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB1120781.8 2011-12-02
GB1120781.8A GB2497138A (en) 2011-12-02 2011-12-02 Biomarkers for stroke and stroke subtype diagnosis.
PCT/GB2012/052993 WO2013079981A2 (en) 2011-12-02 2012-12-03 Biomarker-based methods and biochips for aiding the diagnosis of stroke

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104272112A CN104272112A (zh) 2015-01-07
CN104272112B true CN104272112B (zh) 2019-02-19

Family

ID=45509085

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201280068312.5A Active CN104272112B (zh) 2011-12-02 2012-12-03 用于帮助诊断中风的基于生物标记的方法和生物芯片

Country Status (8)

Country Link
US (2) US20150126385A1 (zh)
EP (1) EP2786155B1 (zh)
JP (1) JP6199880B2 (zh)
CN (1) CN104272112B (zh)
AU (2) AU2012343537B2 (zh)
CA (1) CA2857589C (zh)
GB (1) GB2497138A (zh)
WO (1) WO2013079981A2 (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201309928D0 (en) * 2013-06-04 2013-07-17 Randox Lab Ltd Method
JP6312302B2 (ja) * 2014-01-06 2018-04-18 公益財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 脳梗塞の診断マーカー
BR112019026389A2 (pt) 2017-06-13 2020-07-21 F. Hoffmann-La Roche Ag método para diagnosticar a fibrilação atrial paroxística, método para auxiliar no diagnóstico de fibrilação atrial paroxística e seus usos
GB2563415A (en) * 2017-06-14 2018-12-19 Randox Laboratories Ltd Combinations for use in stroke diagnosis
GB2563414A (en) * 2017-06-14 2018-12-19 Randox Laboratories Ltd Improvements in stroke diagnostics
JP6499342B2 (ja) * 2018-03-19 2019-04-10 隆樹 日和佐 脳梗塞の診断マーカー
KR102299968B1 (ko) * 2019-11-19 2021-09-09 경북대학교 산학협력단 혈액성분 분리용 다중필터 및 그를 이용한 질병 진단키트

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1751128A (zh) * 2002-12-24 2006-03-22 博适公司 用于区分性诊断的标志物和其应用方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5474796A (en) * 1991-09-04 1995-12-12 Protogene Laboratories, Inc. Method and apparatus for conducting an array of chemical reactions on a support surface
US5879010A (en) 1997-07-22 1999-03-09 Green Tweed Of Delaware, Inc. Seal assembly with mechanically joined anti-extrusion rings
GB9929140D0 (en) 1999-12-10 2000-02-02 Univ Geneve Diagnostic assay for stroke
AU2001280996A1 (en) 2000-08-04 2002-02-18 Cis Biotech, Inc. Rapid multiple panel of biomarkers in laboratory blood tests for tia/stroke
AUPR005600A0 (en) * 2000-09-12 2000-10-05 University Of Sydney, The Diagnostic assay
WO2003016910A1 (en) * 2001-08-20 2003-02-27 Biosite, Inc. Diagnostic markers of stroke and cerebral injury and methods of use thereof
US20030199000A1 (en) * 2001-08-20 2003-10-23 Valkirs Gunars E. Diagnostic markers of stroke and cerebral injury and methods of use thereof
US20040253637A1 (en) * 2001-04-13 2004-12-16 Biosite Incorporated Markers for differential diagnosis and methods of use thereof
CA2358007C (en) * 2001-10-02 2008-02-19 Royce Technologies Llc, A Nevada Corporation Ceramic biomolecule imaging chip
EP1664795B1 (en) * 2003-09-20 2017-11-08 Electrophoretics Limited Diagnostic method for brain damage-related disorders
US20050181386A1 (en) * 2003-09-23 2005-08-18 Cornelius Diamond Diagnostic markers of cardiovascular illness and methods of use thereof
US7634360B2 (en) * 2003-09-23 2009-12-15 Prediction Sciences, LL Cellular fibronectin as a diagnostic marker in stroke and methods of use thereof
US7392140B2 (en) * 2003-09-23 2008-06-24 Prediction Sciences, Llc Cellular fibronectin as a diagnostic marker in stroke and methods of use thereof
WO2005103720A1 (en) * 2004-03-29 2005-11-03 Medstar Research Institute, Inc. Methods of diagnosing cardiovascular disease
WO2007124439A2 (en) * 2006-04-21 2007-11-01 Rules-Based Medicine, Inc. Diagnosis of stroke using metalloproteinase or transaminase
CA2683791A1 (en) * 2007-06-06 2008-12-11 Domantis Limited Polypeptides, antibody variable domains & antagonists
WO2010012834A1 (en) 2008-08-01 2010-02-04 Bio-Rad Pasteur Method for the in vitro diagnosis of stroke
CN102257386B (zh) * 2008-10-24 2014-12-31 B.R.A.H.M.S有限公司 通过测定标志肽的水平在已患过中风或短暂性缺血性发作的患者中进行预后和风险评估
EP2206726A1 (en) * 2009-01-08 2010-07-14 Universite Joseph Fourier Non-invasive tools for detecting vulnerable atherosclerotic plaques
JP5589000B2 (ja) 2009-01-30 2014-09-10 バイオ−ラッド・イノヴァシオン 脳卒中のｉｎｖｉｔｒｏ診断方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1751128A (zh) * 2002-12-24 2006-03-22 博适公司 用于区分性诊断的标志物和其应用方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Fatty Acid Binding Protein as a Serum Marker for the Early Diagnosis of Stroke;Catherine G.Zimmermann, et al.;《Molecular & Cellular Proteomics》;20040131;第3卷(第1期);第66-72页
Immune-inflammatory markers and arterial stiffness indexes in subjects with acute ischemic stroke;Antonino Tuttolomondo et al.;《Atherosclerosis》;20100826;第213卷;第311-318页
粘附因子与缺血性脑损伤;尹静等;《脑与神经疾病杂志》;20071231;第15卷(第4期);第318-319页

Also Published As

Publication number Publication date
EP2786155A2 (en) 2014-10-08
WO2013079981A3 (en) 2013-11-07
US10914745B2 (en) 2021-02-09
WO2013079981A2 (en) 2013-06-06
AU2018247291A1 (en) 2018-11-01
CA2857589A1 (en) 2013-06-06
US20170184611A1 (en) 2017-06-29
CA2857589C (en) 2020-01-14
EP2786155B1 (en) 2020-03-11
US20150126385A1 (en) 2015-05-07
CN104272112A (zh) 2015-01-07
JP2015500464A (ja) 2015-01-05
AU2012343537A1 (en) 2014-06-19
GB2497138A (en) 2013-06-05
JP6199880B2 (ja) 2017-09-20
GB201120781D0 (en) 2012-01-11
AU2012343537B2 (en) 2018-11-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104272112B (zh) 用于帮助诊断中风的基于生物标记的方法和生物芯片
JP4927825B2 (ja) 初期段階の心機能異常を診断または予測するための装置および方法
CN105705652B (zh) 协助鉴别诊断中风的方法
Moon et al. Usefulness of enhanced liver fibrosis, glycosylation isomer of Mac-2 binding protein, galectin-3, and soluble suppression of tumorigenicity 2 for assessing liver fibrosis in chronic liver diseases
CA2799351A1 (en) Methods and devices for diagnosing alzheimers disease
US20130149725A1 (en) Methods and compositions for diagnosis of urosepsis and urinary tract infection
CN105308455B (zh) 用于诊断先兆子痫的方法和组合物
CN116953261A (zh) 一种检测脓毒症的联检试剂盒及其应用
JP5832534B2 (ja) 虚血性脳卒中を検出する方法
JP2011107116A (ja) 脳梗塞の検査方法
EP3639037A1 (en) Combinations for use in stroke diagnosis
CN117031042B (zh) 用于筛查诊断先天性心脏病胎儿的生物标志物及其应用
CN117030993A (zh) 一种Homer1作为脑梗死预后生物标志物的用途
Robinson et al. Putative Concussion Biomarkers Identified in Adolescent Male Athletes Using Targeted Plasma Proteomics
Moon HeeWon et al. Usefulness of enhanced liver fibrosis, glycosylation isomer of Mac-2 binding protein, galectin-3, and soluble suppression of tumorigenicity 2 for assessing liver fibrosis in chronic liver diseases.
JP2012107933A (ja) Ｈｅｍｏｐｅｘｉｎ蛋白質による脳梗塞の検査方法
JP2013205242A (ja) Ｉｌ−８蛋白質／ｎｉｈｓｓによる脳梗塞の予後検査方法
JP2015111050A (ja) Ｋａｌｌｉｓｔａｔｉｎ蛋白質による脳梗塞検査方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant