CN104257545B - 一种红景天发酵原浆化妆品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种红景天发酵原浆化妆品及其制备方法。该红景天发酵原浆化妆品，其有效成分为将红景天根的粉末、水与发酵菌混合而得的初始体系发酵而得的发酵液经灭菌、离心而得的上清液。所述发酵菌为酵母菌。本发明采用酵母菌对红景天根进行全植物发酵，保留了植物的全部功效成分及其活性，避免了提取方法造成的活性成分流失。提取时不添加任何有机试剂，发酵温度和发酵pH温和，植物活性成分结构不被破坏，保持植物的天然活性，发酵原浆中不添加香精等对化学成分，确保产品对人体的安全性。产品中富含红景天苷、熊果苷等具有抑制酪氨酸酶活性和抑制黑色素合成的活性，从而对皮肤具有较强的美白功能，同时与发酵滤液中的成分具有协同作用。
Description
技术领域
本发明属于化妆品领域，本发明涉及一种红景天发酵原浆化妆品及其制备方法。
背景技术
红景天是生长在北半球高寒无污染地带的珍稀药用植物。具有延缓衰老、抗氧化、美白等美容功效。目前市场上含有红景天成分的化妆品，都是在化妆品基础配方内添加一定比例的红景天提取物，其添加量较低，同时受提取条件限制，提取物中所含物质成分有限，不能充分发挥红景天的美容功效。
发明内容
本发明的目的是提供一种红景天发酵原浆化妆品及其制备方法。
本发明提供的红景天发酵原浆化妆品，其有效成分为将红景天根的粉末、水与发酵菌混合而得的初始体系发酵而得的发酵液经灭菌、离心而得的上清液。
上述化妆品中，所述红景天根的粉末的目数为20-50目，具体为50目；
所述发酵菌为酵母菌，更具体为黄酒酿造酵母(Saccharomyces Cerevisiae)。
所述发酵菌是以菌液的形式加入的；
所述初始体系是将10-40ml发酵菌浓度为105-108CFU/ml的发酵菌菌液、5-20g20-50目红景天根的粉末和100-300ml水混合而得。
所述初始体系具体为将20ml发酵菌浓度为105-108CFU/ml的发酵菌菌液、10g20-50目红景天根的粉末和200ml水混合而得。
所述发酵步骤中，温度为25-32℃，具体为28℃；时间为36-48小时；
所述离心步骤中，转速为10000-12000r/min，离心半径为9-12cm；离心时间为15-30min，具体为20min。
本发明提供的制备红景天发酵原浆化妆品的方法，包括如下步骤：
将红景天根的粉末、水与发酵菌混合而得的初始体系发酵而得的发酵液依次进行灭菌和离心，收集上清液，得到所述红景天发酵原浆化妆品。
上述方法中，红景天根的粉末的目数为20-50目，具体为50目；
所述发酵菌为酵母菌，更具体为黄酒酿造酵母(Saccharomyces Cerevisiae)。
所述发酵菌是以菌液的形式加入的；
所述初始体系是将10-40ml发酵菌浓度为105-108CFU/ml的发酵菌菌液、20-50目红景天根的粉末和100-300ml水混合而得。
所述初始体系具体为将20ml发酵菌浓度为105-108CFU/ml的发酵菌菌液、10g20-50目红景天根的粉末和200ml水混合而得。
所述发酵步骤中，温度为25-32℃；时间为36-48小时；
所述离心步骤中，转速为10000-12000r/min，离心半径为9-12cm；离心时间为15-30min。
另外，上述本发明提供的红景天发酵原浆化妆品在制备化妆品中的应用及以红景天发酵原浆化妆品为有效成分的化妆品，也属于本发明的保护范围。其中，所述化妆品为具有清除DPPH自由基和抑制酪氨酸酶活性中至少一种功能的产品。
本发明提供了一种利用红景天根发酵生产化妆品的方法。本发明所具有的优点是(1)本发明采用酵母菌对红景天根进行全植物发酵，保留了植物的全部功效成分及其活性，避免了提取方法造成的活性成分流失。(2)本发明所采用的发酵法，在对红景天有效成分提取过程中，不添加任何有机试剂，发酵温度和发酵pH温和，植物活性成分结构不被破坏，保持植物的天然活性。(3)本发明提供的化妆品发酵完成后，发酵原浆中不添加香精等对化学成分，确保产品对人体的安全性。(4)本发明提供的红景天发酵原浆化妆品中富含具有抑制酪氨酸酶活性和抑制黑色素合成的活性物质，从而对皮肤具有较强的美白功能，同时与发酵滤液中的成分具有协同作用。
附图说明
图1为红景天发酵原浆化妆品清除DPPH自由基结果示意图；
图2为红景天发酵原浆化妆品抑制酪氨酸酶活性结果示意图；
具体实施方式
以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
本发明所用红景天根购自于青海康普生物科技有限公司，粉碎后经过筛分去除了尺寸较大的颗粒。
本发明所用黄酒酿造酵母(Saccharomyces Cerevisiae)购自北京食品酿造研究所。
下述实施例所用酵母菌均按照如下步骤进行预处理：
发酵过程首先将菌种进行活化，使保持更高的生活力；然后将菌纯化，使发酵时使用单一菌种；接着扩培使菌大量繁殖。将扩培后的菌接入红景天根粉与水的混合液在适应的条件下进行发酵，然后离心取上清进行检测。具体过程如下：
(1)菌种活化：从保藏的斜面中挑取菌落放入液体培养基中，放入摇床中将菌种活化。
(2)菌种纯化：将活化的菌种梯度稀释铺板，以便获取单菌落。
(3)菌种扩培：将待用菌种接种到相应液体培养基中，在25-32℃的摇床中培养，至其OD值＝0.5-1.0时，菌种处在对数期，即为合适的接种浓度105-108CFU/ml。所用培养基为YPD培养基，组成如下：酵母浸粉1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％。
实施例1、红景天发酵原浆化妆品的制备及检测
将扩培培养基里的发酵菌浓度为105-108CFU/ml的发酵菌菌液20mL接种到50目10g的红景天根粉和200g的水中，并且在28℃摇床中进行发酵48小时后，将所得发酵液进行115℃高压灭菌，20min高压灭菌，使菌失活，将灭菌后的发酵液在12000r/min、离心半径为9cm的条件下离心20min，收集上清液，即为本发明提供的红景天发酵原浆化妆品。
该实施例制备所得的红景天发酵原浆化妆品的外观为粘稠液体、颜色为淡粉色至棕红色。pH值5.2-6.8，粘度200-500cP，可溶性固含物含量1.5-5.0％，菌落总数小于50CFU/ml，无致病菌检出。符合化妆品质量要求。
对该红景天发酵原浆化妆品进行成分分析，蛋白质检测方法参照GB5009.5-2010；粗多糖检测方法参照GB/T 5009.8-2008；氨基酸检测方法参照GB/T 5009.124-2003所得结果如下：
本发明制得的红景天发酵原浆化妆品含蛋白质4g/kg、粗多糖7.6g/kg、总黄酮0.076g/kg(以芦丁计)、总酚0.241g/kg。总氨基酸1.232g/kg，其中包括天门冬氨酸0.114g/kg、苏氨酸0.054g/kg、丝氨酸0.093g/kg、谷氨酸0.139g/kg、甘氨酸0.211g/kg、丙氨酸0.104g/kg、缬氨酸0.063g/kg、异亮氨酸0.034g/kg、亮氨酸0.061g/kg、赖氨酸0.062g/kg、组氨酸0.023g/kg、精氨酸0.098g/kg、脯氨酸0.177g/kg。
实施例2、红景天发酵原浆的抗氧化功效分析
DPPH是一种早期合成的有机自由基，常用来评估抗氧化物的供氢能力，它在有机溶剂中非常稳定，呈紫色，而且在处有一个特征吸收峰，当遇到自由基清除剂时，DPPH的孤对电子被配对而使其退色，也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此，可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果。
DPPH自由基清除实验的具体实验步骤为：
(1)取等体积(一般为3mL)的待测液与2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A1管)；
(2)取等体积的无水乙醇(待测物溶剂)与2×10-4mol/L的DPPH溶液混匀(A2管)；
(3)取等体积的无水乙醇与待测液混匀(A3管)；
(4)反应30min后，在517nm下测A1、A2、A3管吸光度值。
清除率计算公式为：清除率(％)＝[(A2+A3)-A1]/A2
做出红景天发酵原浆对DPPH自由基清除作用曲线，见附图1。
由图可知，实施例1所得红景天发酵原浆对DPPH清除作用的IC50＝1.97％，说明红景天发酵原浆具有较强的抗氧化能力可清除自由基，促进细胞代谢，增强细胞活力，改善机体的结构和功能，提高机体生命力，从而延缓细胞老化，发挥其抗衰老的作用。
实施例3、红景天发酵原浆的美白功效分析
酪氨酸酶是黑素生成的关键酶,它控制着黑素的形成过程,其活性程度对色素的沉积起主要作用。目前市场上销售的许多美白、祛斑产品都是以抑制酪氨酸酶达到美白作用,故对酪氨酸酶抑制作用的强弱是评价增白化妆品的主要指标。
通过测定样品对酪氨酸酶的影响来评价样品的美白功能，具体方法如下：
按表1配置溶液：
表1、溶液配制列表
| 单位(mL) | C1 | C2 | T1 | T2 |
| L-酪氨酸 | 2 | 2 | 2 | 2 |
| 样品 | 0 | 0 | 2 | 2 |
| PBS | 4 | 5 | 2 | 3 |
| 酪氨酸酶 | 1 | 0 | 1 | 0 |
| 总体积 | 7 | 7 | 7 | 7 |
注：C1和T1加入1mL酪氨酸酶，酶活为100U/mL。
(1)C2管配好摇匀后，在37℃水浴锅中水浴加热10min，波长475nm下调零。
(2)C1管溶液配好摇匀，37℃水浴10min后，加酪氨酸酶1ml，继续水浴10分钟，测定C1吸光度值。
(3)按(1)(2)同样方法，以T2调零测定T1吸光度值。
(4)计算样品对酪氨酸酶的活性抑制率T(％)。T(％)＝(C1-T1)/C1×100％
实验证明红景天发酵原浆对酪氨酸酶活性的抑制率为14.95％，1％的熊果苷对酪氨酸酶活性的抑制率97.94％，见附图2。即红景天发酵原浆的美白效果相当于0.153％的熊果苷的效果，具有一定的美白功效。
实施例4、红景天发酵原浆的安全性评价
斑贴试验主要是用于检测化妆品终产品或原料的刺激性。本发明对红景天发酵原浆化妆品进行人体封闭式斑贴试验，对其潜在皮肤刺激性进行评估。
选择合适的志愿者30人，年龄范围在18-60岁随机选择。称取0.020g-0.025g将固体样品或半固体的样品放入斑试器中备用。将液体样品0.2mL到0.025mL滴加在滤纸片上，再将滤纸片置于斑试器内。每个样品均设置空白对照，在对照斑试器孔内加入与样品等量的样品溶剂，如蒸馏水或橄榄油。
试验部位选为人体背部，利用无刺激性的胶带将斑试器固定贴敷于受试者背部。测试周期持续24h。为了试验结果的准确、可信和科学，在测试期间志愿者按照要求，不能摘掉斑试器，亦不可使受试部位接触水。
24h后去除斑试器，静置30min后，等待压痕消失，观察皮肤的反应。如果试验结果为阴性，则需要在斑贴试验后24h和48h分别再观察一次。
斑贴试验结果如表1：
表1、斑贴试验结果
*"-"＝阴性反应；
"±"＝可疑反应：仅有微弱红斑；
"+"＝弱阳性反应(红斑反应)：红斑、浸润、水肿、可有丘疹；
"++"＝强阳性反应(疱疹反应)；红斑、浸润、水肿、丘疹、疱疹；反应可超出受试区；
"+++"＝极强阳性反应(融合性疱疹反应)；明显红斑、严重浸润、水肿、融合性疱疹；反应超出受试区。
由表1可知，实施例1提供的红景天发酵原浆在试验中均产生2级反应的不超过2例。经判定，红景天发酵原浆具有安全性，不会给人体带来不良反应。
Claims (14)
1.一种红景天发酵原浆化妆品，其有效成分为将红景天根的粉末、水与发酵菌混合而得的初始体系发酵而得的发酵液经灭菌、离心而得的上清液；
所述发酵菌为黄酒酿造酵母Saccharomyces Cerevisiae；
所述初始体系是将10-40ml发酵菌浓度为105-108CFU/ml的发酵菌菌液、5-20g红景天根的粉末和100-300ml水混合而得。
2.根据权利要求1所述的化妆品，其特征在于：所述红景天根的粉末的目数为20-50目。
3.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于：所述红景天根的粉末的目数为50目。
4.根据权利要求1-3任一所述的化妆品，其特征在于：所述发酵菌是以菌液的形式加入的。
5.根据权利要求1-3任一所述的化妆品，其特征在于：所述发酵步骤中，温度为25-32℃；时间为36-48小时；
所述离心步骤中，转速为10000-12000r/min，离心半径为9-12cm；离心时间为15-30min。
6.一种制备权利要求1-5任一所述红景天发酵原浆化妆品的方法，包括如下步骤：
将红景天根的粉末、水与发酵菌混合而得的初始体系发酵而得的发酵液依次进行灭菌和离心，收集上清液，得到所述红景天发酵原浆化妆品；
所述发酵菌为黄酒酿造酵母Saccharomyces Cerevisiae；
所述初始体系是将10-40ml发酵菌浓度为105-108CFU/ml的发酵菌菌液、5-20g红景天根的粉末和100-300ml水混合而得。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述红景天根的粉末的目数为20-50目。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述红景天根的粉末的目数为50目。
9.根据权利要求6-8任一所述的方法，其特征在于：所述发酵菌是以菌液的形式加入的。
10.根据权利要求6-8任一所述的方法，其特征在于：所述发酵步骤中，温度为25-32℃；时间为36-48小时；
所述离心步骤中，转速为10000-12000r/min，离心半径为9-12cm；离心时间为15-30min。
11.权利要求1-5任一所述红景天发酵原浆化妆品在制备化妆品中的应用。
12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于：所述化妆品为具有清除DPPH自由基和抑制酪氨酸酶活性中至少一种功能的产品。
13.以权利要求1-5任一所述红景天发酵原浆化妆品为有效成分的化妆品。
14.根据权利要求13所述的化妆品，其特征在于：所述化妆品为具有清除DPPH自由基和抑制酪氨酸酶活性中至少一种功能的产品。
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| GR01 | Patent grant |