CN104255674A - 利用孤雌卤虫克隆种群罕见雄体定向杂交育种的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种利用孤雌卤虫克隆种群罕见雄体定向杂交育种的方法。首先建立孤雌生殖型卤虫克隆种群,然后从中挑选有一定经济性状克隆种群罕见雄体,最后将上述获得的罕见雄体为父本与已有的两性生殖型雌性卤虫为母本进行杂交,利用杂交子代F1,按照常规的杂交育种方法对杂交后代进行筛选,即获得同时具有父本和母本经济性状且能稳定遗传的杂交良种。显然本发明弥补了现有技术不能进行卤虫杂交育种的不足,使数量巨大的孤雌生殖卤虫的优良经济性状可以在杂交育种中得以利用,不但增加了父本可选经济性状的多样性,而且实现了可以根据需求来进行卤虫定向育种的目的,为卤虫杂交育种的规模化和产业化提供了技术支持。
Description
技术领域
本发明涉及一种杂交育种的方法,特别是涉及一种利用孤雌卤虫克隆种群罕见雄体定向杂交育种的方法。
背景技术
卤虫作为一种使用方便且营养优良的鲜活饵料,目前广泛应用于经济鱼虾蟹水产养殖业和家庭水族养殖领域,尤其是其初孵无节幼体作为水产动物苗种(幼体)的开口活饵料具有重要和广泛的应用价值。
目前商品卤虫卵主要靠捕捞盐湖或沿海盐场的野生休眠卵,由于产量波动大,造成价格波动也大,我国内蒙古及沿海地区尝试进行人工增养殖也是靠捕捞天然卤虫卵进行引种养殖。目前我国还没有适合人工养殖的卤虫的杂交良种。究其原因,主要是目前国际上广泛认同的卤虫两性生殖物种有七种(Artemiasalina,Artemia franciscana,Aremia monica,Artemia urmiana,Artemia persimilis,Artemia sinica,Artemia tibetiana),而这七个物种的鉴定恰恰是根据生殖隔离和地理隔离现象确定的,这七个两性卤虫物种之间不能进行杂交或者出现后代不育现象。因此利用两性卤虫不同物种进行杂交育种而筛选良种不可能实现。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用孤雌卤虫克隆种群罕见雄体定向杂交育种的方法,以弥补现有技术的不足。
研究已发现,卤虫除了进行两性生殖的七个物种外,全世界还分布有大量孤雌生殖的卤虫种群(300多个分布点),而有些孤雌生殖的卤虫种群可以产生少量的罕见雄体(比例1%左右),而这些罕见雄体都具有正常的雄性生殖功能,可以与某些两性生殖的卤虫进行杂交。考虑到孤雌卤虫种群分布广,数量大,遗传背景丰富,筛选获得具有优良经济性状的克隆化种群容易,因此本发明以孤雌生殖卤虫的克隆种群罕见雄体为父本,与两性卤虫中具有优良经济性状的雌性个体(母本)进行定向杂交育种,可以快速筛选获得同时具有父本和母本优良性状的杂交后代。
本发明的杂交育种方法如下:
第一步建立孤雌生殖型卤虫克隆种群。根据育种目的定向选取具有某种经济性状(如耐寒、耐高温或抗病等)的孤雌生殖卤虫的天然卤虫卵孵化出无节幼体,在养殖容器中进行单个体隔离养殖至性成熟,在正常养殖条件下使其分别产生大量的后代而建立克隆种群(所谓克隆种群是指单一雌性通过孤雌生殖方式产生的大量后代而形成的种群)。
第二步获取具有该经济性状的克隆种群罕见雄体。方法是以克隆种群中的雌性为对象进行上述按育种目的定向选取的经济性状测定与确认,再根据雌雄形态特征差异从该克隆种群中挑选出罕见雄体。即以第一步克隆种群中的雌性(通常占种群数量99%左右)为对象进行所选的目的经济性状的测定,再次确认所获得的克隆种群具有所选目的经济性状;由于克隆种群中的卤虫都是来自同一母体,因此通常克隆种群中雌性与罕见雄体具有相同的经济性状,从克隆种群中根据雌雄外部形态特征差异不难拣选出具有相应经济性状的罕见雄体(占1%左右)用于后续的杂交。
第三步以第二步获得的罕见雄体为父本与已有的两性生殖型雌性卤虫为母本(该母本与父本经济性状互补)进行杂交。利用杂交子代F1,按照常规的杂交育种方法对杂交后代进行筛选,即可获得同时具有父本和母本经济性状且能稳定遗传的杂交良种。
本发明的上述经济性状包括优良的生长性状、繁殖性状或抗性性状等。
本发明的杂交育种的方法应用于定向培育具有优良生长性状、繁殖性状或抗性性状等卤虫新品种。
显然本发明克服了现有技术不能进行卤虫杂交育种的不足,使数量巨大的孤雌生殖卤虫的优良经济性状可以在杂交育种中得以利用,这样不但增加了父本可选经济性状的多样性,而且达到了可以根据实际需求来进行卤虫定向育种的目的,该发明为卤虫杂交育种的规模化和产业化提供了技术支持。
具体实施方式
本发明以下面的实施例的详细具体的操作方法或步骤,仅仅选取了一种育种目的来进一步说明,该实例的育种目的是为了获得一种能适宜人工集约化养殖的人工可控繁殖方式的卤虫品种,更具体的育种目标是实现杂交后代同时具有光周期敏感性和产小直径卵两个经济性状,即是同时具有光周期敏感性和产小直径卵两种经济性状组合的优良新品种。
实施例1
本发明的育种方法如下:
第一步根据文献资料筛选出可能具有光周期敏感型的孤雌生殖类型卤虫种群,本实例利用的是新疆孤雌生殖类型的卤虫野生休眠卵,在常规孵化条件孵化出无节幼体,然后在常规养殖水体中,利用50毫升离心管分管单个体养殖构建成多个克隆种群。
第二步将获得的上述各克隆种群中的雌性个体进行繁殖模式光周期敏感性测定统计,即分别在长光照周期和短光照周期下养殖50个个体,统计其繁殖模式,看是否在长光照周期下产无节幼体,而在短光照周期产休眠卵,统计结果确认并筛选出了其中的光周期敏感型的克隆种群,再从这些光周期敏感型的克隆种群中根据雌雄外部形态特征差异拣选获得罕见雄体,用于后续的杂交育种。
第三步将第二步获得的光周期敏感型的罕见雄体为父本与产小直径卵的两性卤虫雌性为母本(本例选取以产小直径卵为特性的美国旧金山卤虫)进行杂交。杂交得到的F1代(包含雌性和雄性)在长光周期下单个体隔离养殖,至性成熟后,F1代中部分雌性能产生无节幼体则可确定其繁殖类型为孤雌生殖型,将该部分雌性转入短光照周期下养殖筛选其中产小直径卵的个体,即获得了光周期敏感性产小直径卵的孤雌生殖类型的杂交良种。
其中F1代中另外一部分雌性不能单独繁殖后代则可确定其为两性生殖类型雌性,将该批雌性个体按照常规的杂交育种方法(如F1代雌雄自交,回交等)进行选育,筛选获得光周期敏感性产小直径卵并且能稳定遗传的两性生殖类型的杂交良种。
可见,上述两种生殖类型的杂交良种都实现了育种目标,都是同时具有光周期敏感性和产小直径卵两种经济性状组合的优良卤虫新品种。即本实施例的杂交育种的方法是具体应用于定向培育具有光周期敏感性和产小直径卵两种经济性状组合的优良卤虫新品种。
上述经济性状,是指卤虫对人类的生产和生活具有重要的经济价值的性状,主要包括生长性状(如生长速度)、繁殖性状(如产卵量,休眠卵颗粒直径等)、抗性性状(如抗病,抗低温、抗高温)等。
上述光周期敏感型是指在人工可控光周期的情况下养殖可以实现人工控制卤虫繁殖模式,即短光照周期(一天24小时内光照时间小于10小时)产休眠卵,长光照周期(一天24小时内光照时间大于14小时)产无节幼体。
上述产小直径卵是指卤虫繁殖产生的休眠卵直径小于210微米,小直径卵通常认为是一个卤虫的优良性状,可以使每克卵的卵粒数越多,从而使每克卵孵化的无节幼体的数量越多,在水产育苗中更有利。
Claims (6)
1.一种利用孤雌卤虫克隆种群罕见雄体定向杂交育种的方法,首先建立孤雌生殖型卤虫克隆种群,然后从中挑选有一定经济性状克隆种群罕见雄体,最后将上述获得的罕见雄体为父本与已有的两性生殖型雌性卤虫为母本进行杂交,利用杂交子代F1,按照常规的杂交育种的方法对杂交后代进行筛选,即获得同时具有父本和母本经济性状且能稳定遗传的杂交良种。
2.根据权利要求1所述的定向杂交育种的方法,其特征是上述建立孤雌生殖型卤虫克隆种群的方法是根据育种目的定向选取具有一定经济性状的孤雌生殖卤虫的天然卤虫卵孵化出无节幼体,在养殖容器中进行单个体隔离养殖至性成熟,并在通常养殖条件下使其分别产生大量的后代而建立克隆种群。
3.根据权利要求1所述的定向杂交育种的方法,其特征是上述挑选该经济性状克隆种群罕见雄体的方法是首先以克隆种群中的雌性为对象对上述按育种目的定向选取的经济性状进行测定与确认,再根据雌雄形态特征差异从该克隆种群中拣选出罕见雄体。
4.根据权利要求1和3所述的定向杂交育种的方法,其特征是上述经济性状包括优良生长性状、繁殖性状或抗性性状。
5.根据权利要求4所述的定向杂交育种的方法,其特征是上述经济性状是光周期敏感性和产小直径卵。
6.权利要求1所述的定向杂交育种的方法应用于定向培育具有优良生长性状、繁殖性状或抗性性状的卤虫新品种。
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