CN101617640A - 长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法 - Google Patents

长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法 Download PDF

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王庆志
于瑞海
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Abstract

本发明涉及一种长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法，它利用长牡蛎外套膜颜色这一可遗传数量性状为标记，从自然群体中选取不同外套膜纯色个体为亲本，通过连续数代的定向纯化，筛选出生长快、出肉率高的外套膜纯黑品系和抗逆性强的外套膜纯黄品系。本发明包括亲本选择，受精孵化，幼体培育，中间培育及后期养成过程。本发明方法简单，具有较强的可操作性。通过连续选育得到的长牡蛎外套膜纯色品系，具有商品价值高、生长快、抗逆性强、出肉率高等优点，不但可以实现产业化应用，还可为长牡蛎的育种和遗传改良奠定基础。

Description

长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法
技术领域
本发明涉及一种贝类制种的方法，特别是涉及一种长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法。
背景技术
长牡蛎(Crassostrea gigas)也称太平洋牡蛎，自然分布于日本、中国和韩国，由于生长速度快、环境适应性强、肉味鲜美，是世界上养殖范围最广、产量最大的海洋贝类。2006年世界牡蛎产量达460万吨，其中我国产量占81％，已达375万吨(FAO，2008)。目前，长牡蛎在我国南北沿海均有养殖，养殖所需苗种主要依靠人工育苗，所用亲本都是来源于未经过遗传改良的养殖群体。近几年，长牡蛎出现死亡率高、出肉率低、肉质差等问题，导致其市场价格偏低，影响了我国牡蛎养殖业的发展。因此，进行长牡蛎的遗传改良，培育具有优质、高产、抗逆等优良性状的新品种，已成为牡蛎养殖业亟待解决的问题。
选择育种是一种传统的育种方法，水产动物中，无论是食用种还是观赏种，均可通过人工选育来控制颜色的变化，且大部分颜色性状属遗传模式相对简单的可遗传性状，如属质量性状的大鳞大麻哈鱼肌肉的“红肉”和“白肉”，锦鲤(Cryprinus carpiod)和罗非鱼(Tilapia sp.)的体色，属数量性状的银鲑(Oncorhynchus kisutch)和大西洋鲑(Salmo salar)的体色。国内外根据颜色这一性状对水生动物开展的选择育种工作已取得一定进展。鱼类育种方面，吴清江等(1980)通过鲤的杂交和连续自交选育出红色镜鲤；贝类育种方面，Wada和Komaru(1990)选育出了珍珠品质高的白壳珍珠贝(Pinctada fucata martensii)品系，张国范等(2005)选育出了桔红壳色的“中科红”海湾扇贝，何毛贤等(2006)选育出马氏珠母贝(Pinctada martensii)红壳色品系等。
大量观察表明，长牡蛎的外套膜颜色由于色素沉着程度不同，表现出介于黄、黑之间变化的连续性状。当长牡蛎以“半壳贝”销售时，消费者表现出对外套膜颜色有不同的喜好，如日本消费者较喜欢黑色外套膜的牡蛎，而进行长牡蛎的深加工时，色素较少的黄色外套膜更受欢迎。因此开展纯色外套膜品系的选育不但可满足不同消费者的需求，还可提高长牡蛎产品的价值。
发明内容
本发明的目的是提供一种长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法，它能满足现有技术的上述需求。
一种长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法，其特征在于先从同一地理群体的长牡蛎个体中，挑选2-3龄、壳高10-15cm、壳形规整的个体作为亲本；将性腺发育成熟的亲本经解剖辨别外套膜颜色，同时区分雌雄，选取外套膜颜色为纯黑和纯黄的个体为亲本，分别取雌雄配子，置于不同容器中；将获得的相同外套膜颜色的雌、雄配子分别进行群体交配和单对交配；采取严格隔离措施进行幼体培养；在自然海区天然长牡蛎幼体附着期结束前进行中间培育；分别标记不同选育系，置于同一海区进行养成。
本发明以长牡蛎外套膜颜色这一数量性状为标记，通过群体选育和家系选育，培育出具有外套膜纯色、生长快、出肉率高、抗逆性强等优良性状的长牡蛎品系。
具体实施方式
下面结合实例对本发明作进一步说明：
F1代选育
1.亲本选择：于2007年3月，从长牡蛎威海养殖群体中挑选(2-3)龄、壳高(10-15)cm、壳型规整的个体(500-600)个作为繁殖亲本。
2.获得雌雄配子：性腺发育成熟的亲本经解剖辨别外套膜颜色，同时区分雌雄，选取外套膜颜色为纯黑和纯黄的个体为亲本，以(200-260)目抄网过滤去除杂质，将获得的雌、雄配子分别收集于标记好的(5-10)L聚乙烯塑料桶中。
3.人工受精及孵化：群体交配时，选取(6-15)个相同外套膜纯色亲本的雌、雄配子进行混合交配，确保各亲本雌配子和雄配子的使用量相同；单对交配时，选取相同外套膜纯色雌、雄亲本各1个进行交配。将各组受精卵分别放到标记好的盛有新鲜海水的100L或200L聚乙烯塑料桶中，微量充气，孵化密度控制在(40-80)个/ml，在水温(20-24)℃条件下，大约经过24h全部孵化至D形幼虫。
4.幼体培养：用300目筛绢抄网将上述D形幼虫选优后，分别置于(100-200)L的白色聚乙烯塑料桶中培育。根据生长阶段调整培育密度：早期幼虫(＜120μm)(10-15)个/ml，后期(150μm-200μm)小于5个/ml，达到(250-300)μm时，减少为2个/ml；投喂适量等边金藻(Isochrysis galbana)和扁藻(Platymonas sp.)，保持各选育系幼体密度相同，投饵、换水、充气等操作一致，操作过程中，各家系之间严格避免相互混杂，即从亲本解剖受精开始到幼虫附着变态阶段，所采用的一切器具和设施均分别单独使用，幼体培育期间，水温为(20.2-24.8)℃，盐度为28-30。
5.中间培育：为避免自然海区天然长牡蛎幼体对选育系造成污染，对已附着变态的选育系进行中间培育，即将分别标记的不同选育系置于无天然长牡蛎幼体的室外水池或室内水池中培养，在室内水池培养时，饲以充足的混合饵料。
6.海上养成：待自然海区天然长牡蛎幼体的附着期(6月-8月)已过，将不同选育系分别标记区分后置于同一海区进行养成，养成期间应及时清理附着生物，并定时测量生长情况。
7.经上述亲本选择、获得雌雄配子、人工受精及孵化、幼体培养、中间培育、海上养成的步骤，获得了F1代不同外套膜颜色的选育系。次年6月中旬子代达性成熟，即可进行F2代选育，如此连续选育可使外套膜颜色纯化。
F2代选育
1.亲本选择：于2008年6月，从2007年建立的长牡蛎外套膜纯色选育系中挑选壳型规整的个体，各(300-500)个作为F2代亲本。
2.获得雌雄配子、人工受精及孵化、幼体培养、中间培育、海上养成各步骤均同F1代选育。
3.2008年6月上旬，实施例1得到的F1代选育系性成熟，通过实施例1各环节，获得F2代，使外套膜颜色进一步纯化，至2009年6月F2代选育系个体生长至外套膜颜色已固定时，外套膜颜色纯化率已达60％。2007-2008年，先后选育出F1-F2代外套膜颜色纯黑和纯黄品系，发现外套膜纯黑品系具有生长快、出肉率高的特点，外套膜纯黄品系具有外套膜颜色纯化速度快、抗逆性强的特点。与对照组相比，三者的生长速度关系为：外套膜纯黑品系＞外套膜纯黄品系＞对照组；出肉率为：外套膜纯黑品系＞外套膜纯黄品系＞对照组；抗逆性为：外套膜纯黄品系＞外套膜纯黑品系＞对照组，其中外套膜纯黄品系较对照组存活率高50-80％。
本发明通过对长牡蛎外套膜颜色进行连续数代的定向纯化，可在短期世代内使外套膜颜色纯化，可操作性较强。此外，由于采用传统的群体选育和家系选育育种方法，实践中仅用长牡蛎常规苗种生产方法即可，无需额外增加成本，可在生产中大规模应用。

Claims (5)

1.一种长牡蛎外套膜纯色选育系的制种方法，其特征在于先从同一地理群体的长牡蛎个体中，挑选2-3龄、壳高10-15cm、壳形规整的个体作为亲本；将性腺发育成熟的亲本经解剖辨别外套膜颜色，同时区分雌雄，选取外套膜颜色为纯黑和纯黄的个体为亲本，分别取雌雄配子，置于不同容器中；将获得的相同外套膜颜色的雌、雄配子分别进行群体交配和单对交配；采取严格隔离措施进行幼体培养；在自然海区天然长牡蛎幼体附着期结束前进行中间培育；分别标记不同选育系，置于同一海区进行养成。
2.如权利要求1所述的制种方法，其特征是所述的配子区分雌雄后，以200目-260目抄网过滤去除杂质，分别收集雌雄配子于5L-10L容器中。
3.如权利要求1所述的制种方法，其特征是所述的群体交配为以相同外套膜色雌、雄亲本各6-15个作混合交配；所述的单对交配为以相同外套膜色雌、雄亲本各1个作单对交配。
4.如权利要求1所述的制种方法，其特征是所述的中间培育为将分别标记的不同选育系置于无天然长牡蛎幼体的室外水体或室内水体中培养。
5.如权利要求1所述的制种方法，其特征是所述的分别标记为将不同选育系放入不同养殖笼中单独标记。
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