CN104187110A

CN104187110A - 诱集野生黑水虻产卵的配方料及耐烟碱黑水虻品种的筛选方法

Info

Publication number: CN104187110A
Application number: CN201410421021.0A
Authority: CN
Inventors: 胡新军; 陈泽鹏
Original assignee: Sun Yat Sen University; China National Tobacco Corp Guangdong Branch
Current assignee: Sun Yat Sen University; China National Tobacco Corp Guangdong Branch
Priority date: 2014-08-25
Filing date: 2014-08-25
Publication date: 2014-12-10

Abstract

本发明涉及动物品种筛选技术领域，具体涉及诱集野生黑水虻产卵的配方料及耐烟碱黑水虻品种的筛选方法。所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮70～90%、进口鱼粉10～30%，用质量百分比浓度1‰～2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。本发明直接采用适宜浓度的烟碱水溶液与麸皮和进口鱼粉科学配伍，获得的配方料不仅成功掩盖烟碱的难闻和苦味，有效地诱集野生黑水虻前来产卵，而且因为烟碱含量的适当性和确定性，确保在同样的诱集环境中，不同批次的同样重量组成的配方料获得的黑水虻幼虫耐烟碱能力基本相同，获得稳定的筛选效果。

Description

诱集野生黑水虻产卵的配方料及耐烟碱黑水虻品种的筛选方法

技术领域

本发明涉及动物品种筛选技术领域，具体涉及一种诱集野生黑水虻产卵的配方料及耐烟碱黑水虻品种的筛选方法。

背景技术

不适用鲜烟叶指不适合用于烤烟生产的新鲜烟叶（含水量80～90%），与文献中大量提及的烤烟生产过程中产生的废次烟叶或低次烟叶（含水量约15%）不同。不适用烟叶通常是指烟株正常封顶并清除2～3片奶脚叶后，卷烟工业不适用的、需在田间清除处理的下部叶和上部叶，主要包括烟株底部因光照不足、发育不良、内含物不足、预计烤后品质较差、不具备烘烤价值的2片下部叶，以及烟株顶部开片不良、长度不足、结构僵硬、烤后品质较差的2片顶叶。

这些不适用烟叶若随意丢弃田间地头，极易造成环境污染和烟草病毒的重复感染，若采用现有技术的集中销毁或填埋的处理方式则需花费大量的费用，目前行业每吨不适用烟叶的处理费用平均高达200元，各烟叶产区往往需要在当地党委政府的组织领导下，进行政策宣传、造册登记、建设处理设施、统一清除、记录存档、公示、兑现补贴等措施督促进行不适用烟叶的处理，费时费力费成本。

采用耐烟碱的昆虫对不适用烟叶进行生物处理是一种较好的替代处理方法，环保，经济效益高。为了利用昆虫实现生物处理不适用鲜烟叶，首先需筛选出耐烟碱的昆虫品种。

本申请人基于对家蝇和不适用烟叶处理技术的长期研究，总结出利用不适用烟叶对家蝇进行耐烟碱品系的筛选、强化和培育的方法。所述筛选具体是以30～50%的不适用烟叶、30～60%的麸皮、0～10%的进口鱼粉（和/或0～10%的豆粕）配制成配方料，诱集野生家蝇前来产卵，并将其幼虫培育至老熟状态，再根据幼虫的生长发育指标，筛选出耐烟碱的家蝇品种。

虽然，该技术方案可以成功筛选出耐烟碱的家蝇品种，但是不同批次筛选获得的老熟幼虫的耐烟碱能力有所区别，存在效果的不确定性。主要原因在于不适用烟叶的应用方面，虽然经过创造性的研究和大量实验总结出配方料中添加合理范围的不适用烟叶可保证对家蝇幼虫毒害作用的控制，但影响不适用烟叶烟碱含量的因素非常繁多，机理复杂，较难实现精确控制。影响烟叶中烟碱含量的因素主要包括：（1）不同生长期，烟叶中所含烟碱含量不同：烟草种子中烟碱含量为0，育苗过程中起开始在根部形成，后随着根系的发展壮大，烟碱的合成和积累能力逐渐增强，所以不同生长期，烟叶中所含烟碱含量不同；（2）烟株不同部位，烟碱含量显著不同，烟碱含量还受叶位和叶数较大的影响；（3）不同品种烟叶所含烟碱量不同；（4）土壤干湿的气候条件等均对烟碱含量有不同积蓄的影响；（5）农艺措施的不同显著影响烟叶烟碱含量，包括施肥种类、栽培密度、打顶抹杈施肥、环割和切根施肥、采收方式等等因素都显著影响烟叶中的烟碱含量，以施肥种类为例，三种形态的氮肥中，尿素施用后，烟碱积累最高，硝铵次之，硝酸钾处理的烟碱积累最低，比施用尿素低27%；以打顶时期为例，张丹等研究发现，随打顶时期推迟烟碱积累强度高峰依次下降，烟碱含量也依次减低，每推迟一天打顶，烟碱含量就下降0.0504%；再以切根施肥为例，切根1/8与不切根相比，上部叶烟碱下降1.9个百分点降幅31.33%，中部叶烟碱下降2.13个百分点，降幅51.4%。

如何避免采用不同批次培养料筛选获得的老熟幼虫效果的不确定性是本领域亟待解决的技术难题。而采用稳定可行的技术方案筛选出更多品种的耐烟碱昆虫品系，是本领域同时需要解决的重要技术问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是为了克服现有技术中缺乏耐烟碱黑水虻种的缺陷，提供一种耐烟碱黑水虻种的筛选方法，本发明方法不受不适用烟叶各种因素影响，可保证获得稳定的筛选效果。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

黑水虻是不同于家蝇的另一种昆虫，其生活习性及对培养料的营养需求与家蝇不一样，是一种重要的经济昆虫和环保昆虫，可利用黑水虻处理各种腐败有机废弃物，如啤酒渣、豆渣、鸡粪、猪粪和餐厨垃圾等。现有黑水虻种对无毒的有机废弃物均有较好的生物处理能力，但对不适用鲜烟叶的处理效果不佳。主要原因是因为不适用鲜烟叶中含有一定量的烟碱等毒性物质，对黑水虻幼虫（黑水虻幼虫）具有一定的毒害和抑制生长的作用。为了利用黑水虻生物处理不适用鲜烟叶，首先需从野生黑水虻种中筛选出耐烟碱的黑水虻品种，提高黑水虻对鲜烟叶的耐受能力。

本发明提供一种诱集野生黑水虻产卵的配方料，所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮70～90%和进口鱼粉10～30%，用质量百分比浓度1‰～2‰的烟碱水溶液将上述混合后的配方料调至湿度为70%（每100kg混合料中含有水70kg）。

优选地，所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度1‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

所述烟碱可以采用化学纯的烟碱试剂（纯度≥99.5%）。

所述配方料的配制方法是：将麸皮与进口鱼粉按比例混匀后，加入烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

本发明同时提供一种耐烟碱黑水虻品种的筛选方法，包括如下步骤：

S1.配制含有特定浓度烟碱的配方料，将配方料装入开口容器中；

所述含有特定浓度烟碱的配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮70～90%、进口鱼粉10～30%，用质量百分比浓度1‰～2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%；

S2.天气晴好时，将装有配方料的容器分别放于生活垃圾堆、鸡场或猪场来诱集野生黑水虻卵；优选在9：00～16：00，可于上午8:00～9:00将装有配方料的容器分别放于生活垃圾堆、鸡场或猪场，下午17:00～18:00收回；

S3.将收回的各容器放在室内培养，等诱集到的野生黑水虻卵培育至幼虫老熟时，利用黑水虻幼虫的离食期行为将幼虫与配方料分离；

S4.通过黑水虻幼虫的形态学鉴定，挑出黑水虻幼虫；

S5.筛选出20～25天老熟、每条幼虫重0.10～0.16g、体态丰腴、颜色乌黑的黑水虻幼虫，在室温条件下，让黑水虻幼虫自然化蛹、羽化后即可获得耐烟碱的黑水虻种。

优选地，S3所述室内培养的培养条件为温度25～30℃，湿度30～70%。

利用黑水虻幼虫的离食期行为将幼虫与配方料分离的具体方法为：在幼虫培养20天后，将培养盆置于一个更大的装有干燥统糠粉的塑料盆中，黑水虻幼虫即自行爬离配方料，掉入装有统糠粉的塑料盆中，达到幼虫与配方料分离的目的。

优选地，S2所述的容器为长、宽、高分别为45cm、30cm、12cm的方形塑料盆，将1～1.5 kg调制好的配方料装入该方形塑料盆中用来诱集野生黑水虻卵。

本发明的有益效果是：

本发明直接采用适宜浓度的烟碱水溶液与麸皮和进口鱼粉科学配伍，获得的配方料不仅成功掩盖烟碱的难闻和苦味，有效地诱集野生黑水虻前来产卵，而且因为烟碱含量的适当性和确定性，确保在同样的诱集环境中，不同批次的同样重量组成的配方料的黑水虻幼虫诱集效果基本相同，获得稳定的筛选效果。

本发明配方料营养成分适当，黑水虻幼虫生长顺利，可将诱集到的黑水虻幼虫培育至老熟状态，再根据幼虫的生长发育指标，筛选出耐烟碱的黑水虻品种。

本发明方法受烟草种植季节、烟草种植地区、不适用烟叶的收集和运输、堆置场所等因素的影响较小。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、设备为本技术领域常规试剂和设备。除非特别说明，本发明实施例采用的麸皮、进口鱼粉和烟碱为常规市购原料，烟碱购于常规化学试剂店，纯度≥99.5%。

实施例1

S1.天气晴好时，配制含有特定浓度烟碱的配方料（诱集料），所述含有特定浓度烟碱的配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮90%、进口鱼粉10%，用质量百分比浓度1‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

S2.将上述调制好的配方料，每1 kg装入一方形塑料盆中（长*宽*高=45cm*30cm*12cm）。于当日上午8:00将装有配方料的塑料盆放于一生活垃圾堆旁，下午17:00收回各处塑料盆，带回室内培养。

S3.在室内条件下（温度25℃，湿度30%），在幼虫培养20天后，将培养盆置于一个更大的装有干燥统糠粉的塑料盆中，黑水虻幼虫即自行爬离配方料，掉入装有统糠粉的塑料盆中，达到幼虫与配方料分离的目的。

S4.在解剖镜下通过幼虫的形态学鉴定，用镊子单独挑出黑水虻幼虫，排除其他蝇种。

S5.筛选出20～25天老熟幼虫，每条幼虫重0.10～0.16 g、体态丰腴、颜色乌黑的黑水虻幼虫，并计数。在室温条件下，让这些黑水虻幼虫自然化蛹、羽化后即可获得耐烟碱的黑水虻种。

实施例2

其他操作同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮90%、进口鱼粉10%，用质量百分比浓度1.5‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

最终筛选出20～25天老熟、每条幼虫重0.10～0.16 g、体态丰腴、颜色乌黑的黑水虻幼虫，在室温条件下，让这些黑水虻幼虫自然化蛹、羽化后即可获得耐烟碱的黑水虻种。

实施例3

其他同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮90%、进口鱼粉10%，用质量百分比浓度2.0‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

实施例4

其他同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度1‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

实施例5

其他同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度1.5‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

实施例6

其他同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

实施例7

其他同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮70%、进口鱼粉30%，用质量百分比浓度1‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

实施例8

其他同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮70%、进口鱼粉30%，用质量百分比浓度1.5‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

实施例9

其他同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮70%、进口鱼粉30%，用质量百分比浓度2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

对比例1

其他操作同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度1‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为80%。

该对比例配方产生的不益后果是：由于诱集料初始湿度较高，物料发酵速度较慢，即不能及时产生足够的腐烂有机质的气味，不能在放置诱集料的当天诱集到野生黑水虻飞来产卵。

对比例2

其他操作同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度1‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为55%。

该对比例配方产生的不益后果是：由于诱集料初始湿度较低，物料发酵速度慢，且物料表面易干燥，不能及时产生足够的腐烂有机质的气味，导致在放置诱集料的当天诱集不到野生黑水虻前来产卵。

对比例3

其他操作同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度0.5‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

该对比例配方产生的不益后果是：用此配方有可能诱集到不耐烟碱的野生黑水虻也前来产卵，影响对耐烟碱野生黑水虻品种的诱集效果。

对比例4

其他操作同实施例1，不同的是所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度2.5‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

该对比例配方产生的不益后果是：由于诱集料中的初始烟碱浓度过高，毒性过强，导致诱集到的野生黑水虻幼虫大量死亡，影响对耐烟碱黑水虻品种的诱集效果。

对比例5

所述配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮90%、进口鱼粉10%，用清水将上述配方料调至湿度为70%。

利用如上所述配方料筛选耐烟碱的黑水虻种的方法同实施例1。

该对比例配方产生的不益后果是：虽然该配方能诱集到野生黑水虻成虫前来产卵，但将其后代所产的黑水虻卵接入用质量百分比浓度2.0‰的烟碱水溶液调制的配方料中，由于烟碱的毒害作用等，不能完成正常的生长发育过程。

实施例10

实施例1～9和对比例1～5筛选出来的黑水虻品种的耐烟碱能力测试实验：

耐烟碱能力测试过程为：将实施例1～9和对比例1～5筛选出来的黑水虻品种第二代成虫所产的黑水虻卵分别接入烟碱浓度较高的配方料（麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%），每1.5 kg装入一方形塑料盆中，每盆接卵量为1.5g。在室内条件下（温度30℃，湿度60%），在幼虫培养20天后，将培养盆置于一个更大的装有干燥统糠粉的塑料盆中，黑水虻幼虫即自行爬离配方料，掉入装有统糠粉的塑料盆中，达到幼虫与配方料分离的目的。

测试结果为：实施例1～9筛选出的黑水虻品种幼虫发育历期为20～25天，每条老熟幼虫体重约0.10～0.16克，体态丰腴，颜色乌黑，在室温条件下，可自然化蛹及羽化，不同的实施例的生长情况基本相同，说明实施例1～9配制的配方料可以很好的诱集和筛选到耐烟碱的黑水虻种，并能确保烟碱含量的适当性和确定性，在同样的诱集环境中，不同批次的同质量配方料获得的黑水虻幼虫生长情况基本相同，获得稳定的筛选效果。对比例1～5配制的配方料不能诱集或筛选到耐烟碱的黑水虻种。见表1所示。

表1

Claims

1.一种诱集野生黑水虻产卵的配方料，其特征在于，所述含有特定浓度烟碱的配方料由如下重量百分数的各组分组成：麸皮70～90%、进口鱼粉10～30%，用质量百分比浓度1‰～2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

2.根据权利要求1所述诱集野生黑水虻产卵的配方料，其特征在于，所述含有特定浓度烟碱的配方料含有如下重量百分数的各组分：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度1～2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

3.根据权利要求2所述诱集野生黑水虻产卵的配方料，其特征在于，所述含有特定浓度烟碱的配方料含有如下重量百分数的各组分：麸皮80%、进口鱼粉20%，用质量百分比浓度1.5‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。

4.一种耐烟碱黑水虻品种的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

所述含有特定浓度烟碱的配方料含有如下重量百分数的各组分：麸皮70～90%、进口鱼粉10～30%，用质量百分比浓度1‰～2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%；

S2.天气晴好时，上午8:00～9:00将装有配方料的容器分别放于生活垃圾堆、鸡场或猪场诱集野生黑水虻卵，下午17:00～18:00收回放于各处的容器；

S3.将回收的各容器放在室内培养，等诱集到的野生黑水虻卵培育至幼虫老熟时，利用黑水虻幼虫的离食期行为将幼虫与配方料分离；

S4.通过黑水虻幼虫的形态学鉴定，挑出黑水虻幼虫；

5.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于，S3所述室内培养的培养条件为温度25～30℃，湿度30～70%。

6.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于，S3所述利用黑水虻幼虫的离食期行为将幼虫与配方料分离的具体方法为：在幼虫培养20天后，将培养盆置于一个更大的装有干燥统糠粉的塑料盆中，黑水虻幼虫即自行爬离配方料，掉入装有统糠粉的塑料盆中。

7.根据权利要求4所述的筛选方法，其特征在于，所述含有特定浓度烟碱的配方料的配制方法为：将麸皮与进口鱼粉按比例混匀后，加入质量百分比浓度1‰～2‰的烟碱水溶液将上述配方料调至湿度为70%。