CN104161179B - 一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂、制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂、制备方法及应用，所述饲料添加剂包括以下重量份数的组分：抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉2-5份、黄芪多糖5-10份、当归多糖4.5-10.5份、枸杞多糖10-20份、甘草多糖10-30份。本发明的抗犬病毒性疾病饲料添加剂为抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉和由黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖、甘草多糖组成的复合多糖复配而成，添加在日常饲料中，可以提高机体免疫力和抗病能力。实验结果表明，添加本发明的饲料添加剂后，预防犬病毒性疾病的效果显著提高，明显优于单独添加卵黄抗体冻干粉或复合多糖的效果。

Description

一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂、制备方法及应用

技术领域

本发明涉及一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂，同时还涉及该饲料添加剂的制备方法及应用，属于饲料领域。

背景技术

随着社会的发展和人类精神层次的提高，越来越多的动物成为我们生活的伙伴。其中，犬类的数量占了其中的绝大多数，但是犬类疾病的发生率也在逐渐提高，每年犬类的发病治疗费用近几个亿，在人与犬类的感情基础上，人们心里希望它们健康生活，因此开发出一种能够添加在饲料中预防犬类疾病的饲料添加剂势在必行。目前，常见的犬类多发疾病主要是病毒性疾病，其中犬瘟热（CDV）和犬细小病毒病（CPV）在临床上较为多见。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂，可以有效预防犬病毒性疾病。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是提供一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂，所述饲料添加剂包括以下重量份数的组分：抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉2-5份、黄芪多糖5-10份、当归多糖4.5-10.5份、枸杞多糖10-20份、甘草多糖10-30份。

所述抗犬病毒性疾病的饲料添加剂包括以下重量份数的组分：抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉2-5份、黄芪多糖5-10份、当归多糖5-10份、枸杞多糖10-20份、甘草多糖10-30份。

所述抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉包括以下重量份数的组分：抗犬病毒性疾病卵黄抗体93-96份、防腐剂0.01-0.02份、灭活剂0.2-0.3份、维生素C0.5-1份、聚乙烯吡咯烷酮0.5-1份、甘氨酸0.5-1份、山梨醇1-2份、葡萄糖1-2份。

所述灭活剂为甲醛。

所述防腐剂为硫柳汞。

本发明的目的还在于提供一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法。

本发明所采用的技术方案还在于提供一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

1）将犬病毒性疾病病毒增殖并灭活制备成疫苗，免疫健康鸡群制得高免蛋，将高免蛋经过消毒、酸化处理、离心处理、配制、冻干得到抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉；

2）将抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉与其余组分混合即得。

所述的抗犬病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法，具体包括以下步骤：

1）将犬病毒性疾病病毒增殖并灭活制备成疫苗，每间隔7天对健康产蛋鸡群进行免疫，共免疫三次，第二次免疫后开始检测抗体效价，当抗体效价达到1：256时，收集高免蛋，将收集的高免蛋进行清理、消毒，晾干备用；

2）分离高免蛋卵黄，加入等体积的无菌水，充分搅拌，得到卵黄抗体溶液；将卵黄抗体溶液放入60-65℃水浴锅内均匀加热30min，然后加入pH=4.9-5.2、温度为4-6℃的酸化水溶液，酸化水溶液加入量为卵黄抗体溶液体积的6倍，混匀，静置沉淀，取上清液，15000rpm离心20min，得到含有卵黄抗体的上清液；

3）用0.45μm的滤膜对步骤2）所得上清液过滤，截流分子量大于200KD的大分子物质，再将滤液经0.22μm滤膜过滤，留滤液；

4）将滤液用超滤装置浓缩，使卵黄抗体溶液浓缩至2.5mL/500羽份；

5）向步骤4）所得卵黄抗体溶液中加入灭活剂、防腐剂、维生素C、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸、山梨醇、葡萄糖，并在﹣80℃条件下充分冷冻；

6）将步骤5）预冷的卵黄抗体溶液转入冻干机制得抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉；

7）将抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉与黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖、甘草多糖混合即得。

本发明的目的还在于提供一种饲料添加剂在制备抗犬病毒性疾病的饲料中的应用。

本发明所采用的技术方案还在于提供一种饲料添加剂在制备抗犬病毒性疾病的饲料中的应用，所述饲料添加剂的添加量为饲料总重量的3-7%。

本发明所述的犬病毒性疾病为常见的犬病毒性疾病，如犬瘟热、犬细小病毒病、犬冠状病毒病、犬传染性肝炎。

卵黄抗体是一种免疫球蛋白，由于机体受到外界抗原的刺激而产生的一种应激产物，可以和相应抗原结合，消除病因。

本发明免疫采用是健康的鸡群作为免疫对象，减少毒株返祖的可能性，同样可以使抗体效价快速达到1：256。本发明将抗犬病毒性疾病卵黄抗体和多种辅料进行复配，并通过调整辅料的成分、控制其用量，大大延长了卵黄抗体的保存时间，保证了卵黄抗体在较长一段时间内的活性。

多糖具有提高机体免疫能力，增强机体的适应能力和抵抗能力、抗菌、抗病毒、调节机体代谢等作用。其中，

黄芪多糖是黄芪的主要有效成分，黄芪，甘，温。归肺、脾经。益气升阳，固表止汗，利水消肿，脱毒生肌。主治一切气虚血亏之证。主要作用于肾利尿作用，为促进细胞中DNA合成，加速肝分化增殖的作用，提高淋巴细胞的增殖和白细胞诱生干扰素能力的增强，间接提高和促进机体免疫力功能。

当归多糖是当归的主要有效成分，当归，甘、辛、苦、温。归肝、心、脾经。补血活血，调经止痛，润燥滑肠。主治血虚诸证，月经不调，经闭，痛经，崩漏，虚寒腹痛，痿痹，肌肤麻木，肠燥便难，赤痢后重，痈疽疮疡，跌扑损伤。主要作用于心肝脏器调节气血，调节机体免疫功能、具有抗癌作用。

枸杞多糖是枸杞的主要有效成分，枸杞，甘，平。归肝、肾、肺经。养肝，滋润，润肺。主治肝肾亏虚，头晕目眩，目视不清，腰膝酸软，阳痿遗精，虚劳咳嗽，消渴引饮。主要作用于肝肾等脏器，可调节机体免疫功能、能有效抑制肿瘤生长和细胞突变、具有延缓衰老、抗脂肪肝、调节血脂和血糖、促进造血功能等方面的作用。

甘草多糖是甘草的主要有效成分，甘草，甘，平。归脾、胃、心、肺经，主要作用于脾脏，补益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，缓解药物毒性。

以上几种中草药多糖覆盖了机体的心、肝、脾、肺、肾、脾等脏器，保证了机体脏器之间的平衡运转，加强机体的免疫能力调节机能，是机体健康的保证，使用本发明的复合多糖效果明显优于单一使用。

本发明的抗犬病毒性疾病饲料添加剂为抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉和由黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖、甘草多糖组成的复合多糖复配而成，具有针对性强，抗体效价高，生物活性良好的优点，能够起到有效预防犬病毒性疾病的作用，且在常温下保存很长时间仍能保持活性。本发明的饲料添加剂无毒副作用，无残留危害，安全有效，对犬病毒性疾病，尤其是犬瘟热和犬细小病毒病具有很好的预防效果。

本发明将抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉和复合多糖合理搭配组合，添加在日常饲料中，可以提高机体免疫力和抗病能力。实验结果表明，饲喂添加本发明的饲料添加剂后，雏犬的抗病毒性疾病能力明显提高，其抗犬病毒性疾病的效果明显优于单独添加卵黄抗体冻干粉或复合多糖的效果。

具体实施方式

实施例1

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉，包括以下重量份数的组分：抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体93份、硫柳汞0.01份、甲醛0.3份、维生素C0.5份、聚乙烯吡咯烷酮1份、甘氨酸1份、山梨醇1份、葡萄糖2份。

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂，包括以下重量份数的组分：抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉4份、黄芪多糖5份、当归多糖10份、枸杞多糖20份、甘草多糖30份。

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

1）将犬瘟热病毒和犬细小病毒病病毒增殖并灭活制备成疫苗，备用；

2）免疫健康鸡群获得蛋：每隔7天对健康鸡免疫一次，共免疫三次，第一次免疫健康鸡群接种灭活疫苗1.5mL，第二次、第三次免疫接种加量1倍，第二次免疫后开始检测抗体效价，当抗体效价达到1：256时，收集高免蛋，将收集的高免蛋进行清理、消毒，晾干备用；

3）酸化处理：分离高免蛋卵黄，加入等体积的无菌水，充分搅拌，得到卵黄抗体溶液；将卵黄抗体溶液放入63℃水浴锅内均匀加热30min，然后加入pH=5、温度为5℃的酸化水溶液，酸化水溶液加入量为卵黄抗体溶液体积的6倍，混匀，静置沉淀，取上清液，15000rpm，离心20min，得到含有卵黄抗体的上清液；

4）用0.45μm的滤膜对步骤3）所得上清液过滤，截流分子量大于200KD的大分子物质，再将滤液经0.22μm滤膜过滤，留滤液；

5）将滤液用超滤装置浓缩，使卵黄抗体溶液浓缩至2.5mL/500羽份；

6）向卵黄抗体浓缩溶液中加入甲醛、硫柳汞、维生素C、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸、山梨醇、葡萄糖；

7）将步骤6）的卵黄溶液放置到-80℃条件下，充分冷冻；

8）将步骤7）所得预冷卵黄抗体溶液转入冻干机制得抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉；

9）将抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉与黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖、甘草多糖混合即得。

实施例2

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉，包括以下重量份数的组分：抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体95份、硫柳汞0.02份、甲醛0.2份、维生素C1份、聚乙烯吡咯烷酮0.5份、甘氨酸0.5份、山梨醇1.5份、葡萄糖1.5份。

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂，包括以下重量份数的组分：抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉5份、黄芪多糖8份、当归多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖10份。

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂的制备方法同实施例1，不同之处在于，各组分的用量不同。

实施例3

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉，包括以下重量份数的组分：抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体96份、硫柳汞0.015份、甲醛0.25份、维生素C0.8份、聚乙烯吡咯烷酮0.8份、甘氨酸0.8份、山梨醇2份、葡萄糖1份。

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂，包括以下重量份数的组分：抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体冻干粉2份、黄芪多糖10份、当归多糖5份、枸杞多糖10份、甘草多糖20份。

本实施例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂的制备方法同实施例1，不同之处在于，各组分的用量不同。

对比例1

本对比例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂，包括以下重量份数的组分：抗犬瘟热-犬细小病毒病二联卵黄抗体96份、硫柳汞0.015份、甲醛0.25份、维生素C0.8份、聚乙烯吡咯烷酮0.8份、甘氨酸0.8份、山梨醇2份、葡萄糖1份。

对比例2

本对比例的抗犬瘟热-犬细小病毒病二联的饲料添加剂，包括以下重量份数的组分：黄芪多糖8份、当归多糖7份、枸杞多糖15份、甘草多糖10份。

实验例1

本发明饲料添加剂的质量检测

实验方法：将本发明的饲料添加剂保存在37℃培养箱中，保存24个月，分别1周、2周、1月、2月、4月、8月、12月、16月、20月、24月后，用琼脂扩散（AGP）法，测定每个时间点取样品的卵黄抗体效价变化，结果见表1。

表1常温放置冻干粉不同时间段效价的变化

卵黄抗体质量检测：

[支原体检验]按《中国兽药典》进行，无支原体生长。

[外源病毒检验]按《中国兽药典》进行，符合规定。

[安全检验]用7日龄雏犬5只，肌肉注射5羽份，观察2周，应全部健活，注射部位没有病变。

[保质期]根据常温效价检测实验结果，可以存放2年。

实验例2

本发明的饲料添加剂抗犬瘟热-犬细小病毒病的效果分析

本实验例的普通饲料为市售常规狗粮。

实验方法：选取2月龄雏犬70只，其中10只作为攻毒组隔离饲养，10只作为空白组隔离饲养，20只作为对照组隔离饲养，30只作为试验组隔离饲养。攻毒组和空白组均饲喂普通饲料，对照组分为2组，每组100只，分别饲喂添加量7%对比例1-2饲料添加剂+普通饲料，试验组分为3组，每组100只，隔离饲养，分别饲喂添加量7%实施例1-3饲料添加剂+普通饲料。饲养方式采用自由采食，自由饮水，24h后，取试验组、对照组和攻毒组的雏犬肌注接种稀释后CDV、CPV病毒液，记录120h患病情况，结果如表2所示。

表2实施例1-3的饲料添加剂抗犬瘟热-犬细小病毒病的效果分析

从表2中可以看出，添加了本发明的饲料添加剂后，犬抗病毒性疾病能力明显提高，抗犬病毒性疾病的效果也明显优于单独添加卵黄抗体冻干粉或复合多糖的效果。

Claims (7)

1.一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂包括以下重量份数的组分：抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉2-5份、黄芪多糖5-10份、当归多糖4.5-10.5份、枸杞多糖10-20份、甘草多糖10-30份；

所述抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉包括以下重量份数的组分：抗犬病毒性疾病卵黄抗体93-96份、防腐剂0.01-0.02份、灭活剂0.2-0.3份、维生素C0.5-1份、聚乙烯吡咯烷酮0.5-1份、甘氨酸0.5-1份、山梨醇1-2份、葡萄糖1-2份。

2.根据权利要求1所述的一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂，其特征在于，所述灭活剂为甲醛。

3.根据权利要求1所述的一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂，其特征在于，所述防腐剂为硫柳汞。

4.一种如权利要求1所述的抗犬病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将犬病毒性疾病病毒增殖并灭活制备成疫苗，免疫健康鸡群制得高免蛋，将高免蛋经过消毒、酸化处理、离心处理、配制、冻干得到抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉；

2)将抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉与其余组分混合即得。

5.根据权利要求4所述的一种抗犬病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

1)将犬病毒性疾病病毒增殖并灭活制备成疫苗，每间隔7天对健康产蛋鸡群进行免疫，共免疫三次，第二次免疫后开始检测抗体效价，当抗体效价达到1：256时，收集高免蛋，将收集的高免蛋进行清理、消毒，晾干备用；

2)分离高免蛋卵黄，加入等体积的无菌水，充分搅拌，得到卵黄抗体溶液；将卵黄抗体溶液放入60-65℃水浴锅内均匀加热30min，然后加入pH＝4.9-5.2、温度为4-6℃的酸化水溶液，酸化水溶液加入量为卵黄抗体溶液体积的6倍，混匀，静置沉淀，取上清液，15000rpm离心20min，得到含有卵黄抗体的上清液；

3)用0.45μm的滤膜对步骤2)所得上清液过滤，截流分子量大于200KD的大分子物质，再将滤液经0.22μm滤膜过滤，留滤液；

4)将滤液用超滤装置浓缩，使卵黄抗体溶液浓缩至2.5mL/500羽份；

5)向步骤4)所得卵黄抗体溶液中加入灭活剂、防腐剂、维生素C、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸、山梨醇、葡萄糖，并在﹣80℃条件下充分冷冻；

6)将步骤5)预冷的卵黄抗体溶液转入冻干机制得抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉；

7)将抗犬病毒性疾病卵黄抗体冻干粉与黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖、甘草多糖混合即得。

6.一种如权利要求1所述的饲料添加剂在制备抗犬病毒性疾病的饲料中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂的添加量为饲料总重量的3-7％。