CN104144742B - 用于固体蛋白质组合物的快速溶解的方法和装置 - Google Patents

Abstract

本发明提供了用于将诸如包含纤维蛋白原的固体组合物的固体蛋白质组合物溶于水性溶剂中的方法和装置。所述方法包括使用闭合容器，所述闭合容器包含一定体积的固体纤维蛋白原组合物和顶部空间，其中所述顶部空间内的压力为亚大气压。将水性溶剂引入所述容器内，同时保持所述亚大气压，并且在添加所述溶剂之后，所述顶部空间的大小得以减小以使所述压力达到大气压。所述装置适用于本发明所公开的方法中。

Description

用于固体蛋白质组合物的快速溶解的方法和装置

技术领域

本发明涉及制备药物组合物的技术领域，并且更具体地涉及用于将诸如包含纤维蛋白原的固体组合物的固体蛋白质组合物溶于水性溶剂中的方法和装置。

背景技术

纤维蛋白原为血纤维蛋白密封剂的制备过程中的重要组分，所述血纤维蛋白密封剂用于预防从组织渗漏流体，诸如，空气和/或液体，例如血液。纤维蛋白原通过涉及凝血酶和因子XIII的酶反应转变成血纤维蛋白。

纤维蛋白原可在存储之前例如通过冻干法转变成固体形式，以便减少蛋白质降解。固体纤维蛋白原制剂的优点在于其能够在至少4℃的温度下(诸如，室温下)存储相对较长的时间段，同时保持其生物活性。出于治疗用途，通常将固体纤维蛋白原在使用之前溶解于水性溶剂中。例如，当将纤维蛋白原连同凝血酶组分用作血纤维蛋白密封剂的组分时，通常需要具有高纤维蛋白原浓度的溶液，因为粘合强度通常与纤维蛋白原浓度成比例。

纤维蛋白原位于至少可溶的血浆蛋白中(The Preparation and Properties ofHuman Fibrinogen of Relatively High Solubility*M.W.Mosesson,Sol SherryBiochemistry，1966年，5(9)，第2829–2835页)。因此，溶解固体纤维蛋白原制剂以获得具有高纤维蛋白原浓度(例如至少40mg纤维蛋白原/ml)的溶液是困难的和耗时的。当在固体纤维蛋白原组合物溶解期间形成泡沫并且泡沫缓慢消散时，问题更加复杂。泡沫的存在还可延长溶解时间，并且/或者不利地影响纤维蛋白原功能性以及由纤维蛋白原溶液制备的血纤维蛋白密封剂的机械性能。

背景技术包括美国专利6,349,850；4,650,678；4,909,251；和5,962,405；美国专利公布2004/0005310；和欧洲专利公布EP 2130549A1。

存在下述尚未满足的需要，即在不添加赋形剂以增加纤维蛋白原的溶解度的前提下，能够使固体纤维蛋白原快速溶解以形成高浓缩纤维蛋白原溶液的方法和装置。

发明内容

本文提供了用于将诸如固体纤维蛋白原的固体蛋白质组合物溶于水性溶剂中的方法和装置。

本发明人已发现，相比于较高蛋白密度“粉饼”的使用而言，将诸如具有低蛋白质密度的冻干“粉饼”之类的固体纤维蛋白原组合物溶于水性溶剂中导致较高的溶解水平和较快的溶解速度。还发现，在亚大气压下随后平衡到大气压且在溶解过程期间不允许空气进入其中执行溶解的容器的条件下，将水性溶剂添加到固体组合物可最小化或避免泡沫的存在。

如本文所用，术语“固体组合物”是指具有基于固体组合物的总重量计等于或小于约5％(w/w)水(诸如，等于或小于3％)的水含量的组合物。

本发明的方面和实施例在下文的说明书和所附权利要求中有所描述。

根据本发明的一些实施例的方面，提供了一种用于将固体纤维蛋白原组合物溶于水性溶剂中的方法，所述方法包括以下步骤：提供包含一定体积的固体纤维蛋白原组合物和顶部空间的闭合容器，其中顶部空间内的压力为亚大气压；在顶部空间中的内部压力保持在亚大气压期间，将一定体积的水性溶剂引入容器中以形成具有至少40mg纤维蛋白原/ml的溶液，所述水性溶剂的体积小于固体纤维蛋白原组合物的体积；以及随后减小容器中的顶部空间的大小直至顶部空间中的压力等于大气压。

在一些实施例中，所述方法还包括搅动容器。

本文所公开的方法在等于或小于90秒的时间内提供具有至少40mg纤维蛋白原/ml的高纤维蛋白原浓度的溶液。在一些实施例中，在约90、85、80、75、70、75、70、65、60、55、50、45、40或30秒的时间内获得溶液。在一个实施例中，在约45至约90秒的时间范围内获得浓缩型纤维蛋白原溶液。

本文所公开的固体组合物包含固态形式的蛋白质，诸如纤维蛋白原。在一些实施例中，本文所述的固体纤维蛋白原组合物包含作为主要成分的纤维蛋白原，但是还可包含其他成分，例如其他蛋白质。组合物中的纤维蛋白原可为源于血液的或重组体。存在于组合物中的除纤维蛋白原之外的蛋白质的例子包括但不限于纤粘蛋白、因子VIII、血管假性血友病因子和因子XIII。在本发明的一个实施例中，组合物源自冷沉淀物。在本发明的一个实施例中，具体地从冷沉淀物中移除纤维蛋白溶酶原，以便延缓或阻止纤维蛋白溶解(例如美国专利5,792,835和7,125,569所述)。

在一些实施例中，纤维蛋白原组合物包含人纤维蛋白原(在本文中也称为BAC(生物活性组分))。BAC可为按照欧洲专利534,178中所述的方式制备的人血浆的浓缩的病毒灭活的冷沉淀物，所述冷沉淀物主要由纤维蛋白原(大约85％)组成，该欧洲专利好像全文示出地以引用方式并入本文。组合物可为去纤维蛋白溶酶原的，如在好像全文示出地以引用方式并入本文的欧洲专利1,390,485中所述，在这种情况下可不包括抗纤维蛋白溶解剂。在本发明的一个实施例中，BAC作为固体冻干“粉饼”而被提供。

术语“冷沉淀物”是指源于血液的组分，所述组分得自由全血制备的冷冻血浆、回收血浆、或者通过血浆去除法收集的源血浆。当将冷冻血浆在寒冷条件下(通常在0-4℃的温度下)解冻，导致形成包含纤维蛋白原和因子XIII的沉淀物时，可获得冷沉淀物。可例如通过离心法来收集沉淀物。

可利用本文所述的方法和装置溶解的固体组合物的形式的非限制性例子包括但不限于冻干型“粉饼”、固体颗粒、颗粒分散体、粉末和薄片。固体组合物可被制备成具有不同的蛋白密度。

在一些实施例中，固体纤维蛋白原组合物为冻干型粉饼。冻干型粉饼内的纤维蛋白原密度可降至约5mg/cc，同时能够保持冻干物的稳定性而不存在“粉饼”的任何塌缩(Parker et.al.“Determination of the influence of primary drying rates on themicroscale structural attributes and physicochemical properties of proteincontaining lyophilized products”.J Pharm Sci.2010年，99：4616-4629)。通常，至少5mg纤维蛋白原/cc的固体“粉饼”可基本上支撑其自身的结构而不塌缩。

在一些实施例中，固体纤维蛋白原组合物中的纤维蛋白原的密度在约5mg/cc至低于约63mg/cc的范围内，例如，等于或小于约6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61或62mg/cc。在一个实施例中，固体纤维蛋白原组合物具有不超过约23mg/cc的纤维蛋白原密度。

诸如冻干型粉饼的固体可由含纤维蛋白原溶液来制备，所述含纤维蛋白原溶液具有约5mg/ml至低于约63mg/ml范围内的纤维蛋白原浓度，例如，等于或小于约6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61和62mg/ml。通常，所得“粉饼”的体积等于用于制备“粉饼”的含纤维蛋白原的溶液的体积。

在一些实施例中，固体纤维蛋白原组合物从BAC原液溶液，诸如具有约63mg/ml的纤维蛋白原浓度的BAC原液溶液(例如，EVICEL^TM中的纤维蛋白原组分)获得。在一些实施例中，通过BAC原液溶液的冻干来获得固体纤维蛋白原。

在一些实施例中，通过将固体纤维蛋白原溶于水性溶剂中获得的溶液的高纤维蛋白原浓度在约40至约120mg纤维蛋白原/ml的范围内，例如，约40、41、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115或120mg纤维蛋白原/ml。在一个实施例中，获得了具有约63至约70mg/ml浓度范围内的纤维蛋白原的浓缩型纤维蛋白原溶液。纤维蛋白原为基本上完全溶解的。

在一些实施例中，水性溶剂为基本上不含赋形剂的注射用水。在一些实施例中，水性溶剂在引入包含固体组合物的容器之前进行脱气。

为了将“粉饼”溶于水性溶剂中，可任选地通过机械压碎“粉饼”来制备固体分散体。可任选地将分散体引入到铣削装置中以制备细粉，如WO08/053475所述，该专利的内容全文以引用方式并入本文。

水性溶剂包含水(在一些实施例中，至少50体积％的水)并且在一些实施例中可任选地包含附加成分，诸如缓冲剂和/或其他赋形剂诸如药学可接受的赋形剂(包括例如选自精氨酸盐酸盐、甘氨酸、氯化钠、柠檬酸钠和氯化钙中的一个或多个))。水可为例如BWFI(抑菌注射用水)、SWFI(无菌注射用水)等。

可按照下文在名称为“蛋白溶解水平测量”的材料和方法部分中所述的方式来测量通过将固体纤维蛋白原组合物溶于水性溶剂中形成的溶液中的蛋白质溶解水平。可目视检查泡沫的存在。

在一些实施例中，顶部空间中的内部压力最初低于约500mBar，诸如例如，等于或小于约500、450、400、350、300、250、200、150、100、50、25、20、15、10、5、1、0.5或0.12mBar。在一个实施例中，顶部空间中的内部压力不超过约0.12mBar。

在一些实施例中，通过下述方式来使闭合容器中的内部压力达到所需的亚大气压：在可编程式冻干装置中通过对此装置编程来获得所需的内部压力并且当获得所需压力时闭合容器。

在一些实施例中，通过从闭合容器中抽吸空气(例如，通过使用真空泵)来使闭合容器中的内部压力达到所需的亚大气压。在一些实施例中，为了监测和/或调节容器中的压力，使用电子真空计或电子压力计。

在一个实施例中，将具有约21mg/cc的纤维蛋白原浓度的固体纤维蛋白原组合物溶于溶剂中，其中顶部空间中的压力为约0.12mBar。

在一些实施例中，容器包括至少两个彼此流体连通的不同部分：包含水性溶剂的第一部分和包含固体纤维蛋白原组合物的第二部分，其中将水性溶剂从容器的第一不同部分引入到第二不同部分。

在一些实施例中，水性溶剂容纳在贮存器内，其中容器和贮存器彼此流体连通，并且其中搅动包括在容器和贮存器之间反复地转移水性溶剂。

在一些实施例中，搅动包括手动地摇动容器。在一些此类实施例中，在手动地摇动之前将至少一个具有大于溶液密度的密度的惰性固体材料的球体(诸如金属，如不锈钢))引入到容器中。在一些实施例中，球体包括具有约3至约7mm范围内直径的小珠。

在一些实施例中，在完成将溶剂引入到容器中和开始减小顶部空间的体积之间允许流逝至少5秒的时间间隔(诸如例如，至少6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20秒)。在一些实施例中，时间间隔为至少约20秒。

在一些实施例中，在减小顶部空间的体积之后，将溶液在容器中温育(即，允许在使用之前静置)例如不长于约2分钟的时间段。

可利用任何合适的装置或容器来执行本文所述的方法，所述装置或容器包括但不限于本领域中已知的瓶子、冻干容器、圆筒、广口瓶和注射器。在一些实施例中，利用下文所述的装置来执行所述方法。

根据本发明的一些实施例的一个方面，提供了适于将固体组合物溶于水性溶剂中的装置，所述装置包括用于保持第一固体组合物的第一闭合容器，所述第一闭合容器包括具有闭合状态和打开状态的第一闭合容器入口，其中在闭合状态下第一闭合容器入口密封至流体通道，并且在打开状态下第一闭合容器入口提供用于流体连通到第一闭合容器内的路径。所述装置还包括布置在第一闭合容器内的第一可移动密封元件，所述第一可移动密封元件用于密封第一闭合容器并且被配置成当在第一闭合容器内的至少第一位置和第二位置之间移动时保持第一闭合容器的密封，以减小第一闭合容器的内部体积。所述装置还包括被配置成将第一可移动密封元件保持在第一闭合容器内的第一位置的保持元件，和用于控制第一闭合容器入口在闭合状态和打开状态之间改变的第一控制器。

任选地，当第一闭合容器入口处于闭合状态而第一可移动密封元件处于第二位置，并且随后第一可移动密封元件移动到第一位置并且第一保持元件保持第一可移动密封元件时，形成具有亚大气压的顶部空间。作为另外一种选择，所述装置提供有闭合容器，所述闭合容器还包含具有亚大气压的顶部空间；闭合的容器入口；和将第一可移动密封元件保持在第一位置的保持元件。

在一些实施例中，所述装置还包括适于保持第一水性溶剂的第一贮存器；和布置在第一贮存器内的被配置成保持第一贮存器的密封的第二可移动密封元件，所述第一贮存器包括适于(直接地或间接地)与第一闭合容器入口流体连通的第一贮存器出口。

在一些实施例中，第一闭合容器为具有前端和后端的第一注射器圆筒，其中前端包括第一闭合容器入口，并且其中第一可移动密封元件包括第一活塞，所述第一活塞布置在第一注射器圆筒内从第一注射器圆筒的后端朝前端可滑动地移位并连接到第一活塞杆。

在一些实施例中，第一贮存器包括具有前端和后端的第二注射器圆筒，其中前端包括第一贮存器出口，并且第二可移动密封元件包括第二活塞，所述第二活塞布置在第二注射器圆筒内从第二注射器圆筒的后端朝前端可滑动地移位并连接到第二活塞杆。

在一些实施例中，其中当入口处于打开位置时并且其中当保持元件释放第一可移动密封件时，第一可移动密封件在第一闭合容器内从第一位置移向第二位置，从而减小第一闭合容器的内部体积，其中第一闭合容器内的内部压力增加。

在一些实施例中，所述装置还包括适于保持第二固体组合物的第二闭合容器，第二闭合容器包括具有闭合状态和打开状态的第二闭合容器入口，其中在闭合状态下第二闭合容器密封至流体通道，并且在打开状态下第二闭合容器入口提供用于流体连通到第一闭合容器内的路径。在此类实施例中，所述装置还包括布置在第二闭合容器内的第三可移动密封元件，所述第三可移动密封元件用于密封第二闭合容器并且被配置成当在第二闭合容器内的至少第一位置和第二位置之间移动时保持第二闭合容器的密封，以减小第二闭合容器的内部体积。在此类实施例中，所述装置还包括被配置成将第三可移动密封元件可释放地保持在第二闭合容器内的第一位置的保持元件，和用于控制第二闭合容器入口在闭合状态和打开状态之间改变的第二控制器。任选地，单个保持元件可将第一可移动密封元件和第三可移动密封元件可释放地保持在第一位置。作为另外一种选择，所述装置还可包括用于保持第三可移动密封元件的第二保持元件。所述装置提供有第二闭合容器，所述闭合容器还包括具有亚大气压的顶部空间；闭合的容器入口；和将第三可移动密封元件保持在第一位置的保持元件，或者当第二闭合容器入口处于闭合状态而第三可移动密封元件处于第二位置期间，并且随后将第三可移动密封元件移动到第一位置并且保持元件保持第三可移动密封元件时，形成具有亚大气压的顶部空间。

在一些实施例中，所述装置还包括适于保持第二水性溶剂的第二贮存器和布置在第二贮存器内的被配置成保持第二贮存器的密封的第四可移动密封元件，所述第二贮存器包括适于与第二闭合容器入口流体连通的第二流体出口。

在一些实施例中，第一闭合容器为具有前端和后端的第一注射器圆筒，其中第一注射器圆筒的前端包括第一闭合容器入口，并且其中第一注射器圆筒的第一可移动密封元件包括第一活塞，所述第一活塞布置在第一注射器圆筒内从第一注射器圆筒的后端朝前端可滑动地移位并连接到第一活塞杆。在此类实施例中，第一贮存器包括具有前端和后端的第二注射器圆筒，其中第二注射器圆筒的前端包括第一贮存器出口，并且其中第二可移动密封元件包括第二活塞，所述第二活塞布置在第二注射器圆筒内从第二注射器圆筒的后端朝前端可滑动地移位并连接到第二活塞杆。在此类实施例中，第二闭合容器为具有前端和后端的第三注射器圆筒，其中第三注射器圆筒的前端包括第二闭合容器入口，并且其中第三可移动密封元件包括第三活塞，所述第三活塞布置在第三注射器圆筒内从第三注射器圆筒的后端朝前端可滑动地移位并连接到第三活塞杆。在此类实施例中，第二贮存器包括具有前端和后端的第四注射器圆筒，其中第四注射器圆筒的前端包括第二贮存器出口，并且其中第四可移动密封元件包括第四活塞，所述第四活塞布置在第四注射器圆筒内从第四注射器圆筒的后端移位朝前端可滑动地移位并连接到第四活塞杆。

在一些实施例中，所述装置还包括用于在其中容纳第一闭合容器和第二闭合容器和/或第一贮存器和第二贮存器的外壳。

在一些实施例中，所述装置还包括用于在其中容纳第一闭合容器和第二闭合容器的第一外壳和/或用于在其中容纳第一贮存器和第二贮存器的第二外壳。

在一些实施例中，第一固体组合物包含固体纤维蛋白原。

在一些实施例中，第二固体组合物包含固体凝血酶。

在一些实施例中，第一活塞附接到包括至少一个凹槽的活塞杆，并且保持元件包括被配置成与凹槽接合的至少一个突起/凸起。

在一些实施例中，所述装置还包括控制器致动器，所述控制器致动器在致动时使得第一控制器和/或第二控制器从闭合状态改变为打开状态。

在至少一些实施例中，本文所公开的方法和装置使固体纤维蛋白原在短时间内(例如，在90秒或更短时间内)能基本上完全溶于水性溶剂中，以获得高浓缩的纤维蛋白溶液(例如，具有至少40mg/ml的纤维蛋白浓度)。在一些实施例中，所述方法允许纤维蛋白原溶液在或即将施用至受试者时来制备，例如，在施用至受试者之前90秒或更短时间内。

在至少一些实施例中，根据本文所公开的方法和装置制备的纤维蛋白原溶液中存在的泡沫为极少的或可忽略不计的。在一些实施例中，纤维蛋白原溶液基本上不含泡沫。

在至少一些实施例中，所述方法不需要添加赋形剂以增加纤维蛋白原的溶解度。

在至少一些实施例中，所述方法不包括加热步骤，例如加热至高于室温。

在至少一些实施例中，不允许将空气添加到其中执行溶解的容器内。

除非另外定义，否则本文所用的所有科技术语的含义均与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同。此外，描述、材料、方法和例子仅为示例性的，并且不旨在进行限制。类似于或等同于本文那些所述的方法和材料可用于本发明的操作中。

如本文所用，术语“溶液”是指包含至少一种部分地或基本上完全地溶于液体溶剂中的物质(溶质)的均匀混合物。“基本上完全溶解”意味着溶质至少有89％溶于溶剂中。

如本文所用，术语“溶解”是指将诸如固体的物质合掺入液体溶剂内以获得溶液。如本文所用，术语“溶解”、“增溶”和“重构”可为可互换的。

如本文所用，术语“大气压”是指施加在表面上的以给定位置处的表面上的空气重量计的每单位面积的力。标准的海平面大气压为1个大气压、或1000mBar。

如本文所用，术语“顶部空间”是指闭合容器中的液体或固体上方的气体体积、以及固体内的气体体积。

如本文所用，术语“控制器”是指通过提供液体流动的开放入口来调节液体的方向和/或流动(例如，经由通道或管道)的部件。控制器可为阀门、旋塞等等。作为另外一种选择，控制器可包括刺穿元件(z诸如针)，以用于刺穿覆盖件(例如，密封容器的橡胶盖或者壁)，由此来提供开放入口。

如本文所用，术语“冻干”是指冷冻溶液并且随后将水浓度(例如，通过升华)降低到不支持生物或化学反应的水平的过程。如本文所用，术语“粉饼”或“固体粉饼”是指得自冻干方法的多孔和海绵状结构状组合物。应该指出，至少5mg/cc的“固体粉饼”可基本上支撑其自身的结构而不会塌缩。如本文所用，相对于粉饼而言的术语“塌缩”是指粉饼不再能够支撑其自身结构的点。

如本文所用，术语“赋形剂”是指包含在药物组合物中的基本上惰性的物质。例如，可添加赋形剂以便确保组合物的活性物质在贮存时保持其化学稳定性和/或生物活性，以有助于制造过程和/或出于美观原因(例如，颜色)。

如本文所用，术语“药物组合物”是指用于施用到受试者的物质或物质混合物。

如本文所用，术语“包含”、“包括”、“具有”以及它们的语法变型被视为指定规定的结构、整数、步骤或部件，但不排除添加一个或多个附加结构、整数、步骤、部件或它们的组合。这些术语涵盖术语“由...组成”和“基本上由...组成”。

如本文所用，不定冠词“一”和“一个”是指“至少一个”或“一个或多个”，除非上下文中另外明确指明。

在一些实施例中，本文所公开的方法和装置任选地提供至少下述优点中的至少一个：使用户(例如外科医生或其他执业医师)能快速地溶解固体药物组合物，包括用于制备密封剂的固体组合物；使能形成具有极少或可忽略数量的泡沫的溶液；使能将高度多孔的和/或易碎的冻干粉饼用作固体组合物；使能从固体纤维蛋白原组合物快速地形成高浓缩的纤维蛋白原溶液；以及使浓缩的固体组合物能存储、稀释、和使用。在一些实施例中，本文所述的方法和装置尤其可用于存储和快速溶解纤维蛋白原以及将所得的溶液施用给患者。

附图说明

本发明的一些实施例在本文中参照附图来进行描述。结合附图的描述使得可如何实施本发明的一些实施例对于本领域的普通技术人员而言显而易见。附图用于例证性的论述目的，并非试图较详细地示出实施例的结构细节，而是对于本发明的基本理解所必需的。为了清晰起见，示于附图中的一些对象未按比例绘制。

在附图中：

图1A为根据本文所公开的教导内容的装置的示意图，所述装置包括用于保持固体组合物的具有入口的容器、布置在容器内的第一可移动密封元件、和将第一可移动密封元件可释放地保持在初始状态的保持元件；

图1B为在下述状态下的图1A的装置的示意图，其中入口从初始的闭合状态变为打开状态；

图1C为图1B的装置的示意图，其中可移动密封元件已从初始位置移动到第二位置。

图2示出了根据本发明的一些实施例的装置的横截面侧视图，所述装置包括用于保持固体组合物的具有入口的容器、布置在容器内的第一可移动密封元件、可释放地保持第一可移动密封元件的保持元件、第一控制器、用于保持溶剂的具有出口孔的贮存器、和布置在贮存器内的第二可移动密封元件。

图3示出了根据本发明的一些实施例的装置的上部视图。所述装置包括含固体的单元和含溶剂的单元。

图4示出了图3的彼此分离的两个单元的透视图。

图5示出了图3的装置的含溶剂的单元的分解图。

图6A示出了图3的含固体的单元的透视图。

图6B示出了图3的包括保持元件的实施例的含固体的单元的分解图。

图7A示出了图6B的保持元件的透视图和放大视图。

图7B示出了图3的含固体的单元的注射器的活塞杆的透视图。

图8A和图8B示出了图6B的位于保持含固体的单元的外壳上的保持元件的侧透视图。

图9A示出了图6B的位于保持包含固体单元的外壳上的保持元件的上部透视图，其中保持元件处于初始位置。

图9B示出了图6B中位于保持含固体的单元的外壳上的保持元件的底部透视图，其中保持元件处于与图9A相同的初始位置。

图9C示出了图6B中位于保持含固体的单元的外壳上的保持元件的底部透视图，，其中保持元件处于第二位置。

图10示出了控制器的实施例的侧视图。

图11A-11C示出了本文所公开的处于初始位置的装置的实施例。图11A示出了上部视图；图11B示出了横截面侧视图；并且图11C示出了包括图11B的控制器的区域的放大视图。

图12A-12C示出了根据本发明的一些实施例的处于第一操作步骤的本文所公开的装置的实施例。图12A示出了上部视图；图12B示出了横截面侧视图；并且图12C示出了包括图12B的控制器的区域的放大视图。

图13示出了连接到流体连接器系统的含溶剂的单元，通过所述流体连接器系统可递送溶解的组合物。

图14A示出了根据本发明的一些实施例的被配置成定位在活塞杆上的垫片元件。

图14B示出了图14A所示的定位在含固体的单元的注射器的活塞杆上的垫片。

具体实施方式

本文公开了用于溶解包含纤维蛋白原的固体组合物的方法和装置。

根据一些实施例的方面，提供了将固体纤维蛋白原组合物溶于水性溶剂中的方法，所述方法包括提供包含一定体积的固体纤维蛋白原组合物和顶部空间的闭合容器，其中顶部空间内的压力为亚大气压；在将顶部空间中的内部压力保持在亚大气压同时，将一定体积的水性溶剂引入容器内以形成包含至少40mg纤维蛋白原/ml的溶液，所述水性溶剂的体积小于固体纤维蛋白原组合物的体积；以及随后减小容器内的顶部空间的大小直至顶部空间中的压力等于大气压。在一些实施例中，所述方法还包括搅动容器。在一些实施例中，所述方法包括搅动在将溶剂添加到固体组合物时形成的部分溶解的溶液。在一些实施例中，溶解发生在不超过90秒的时间内。

根据一些实施例的方面，提供了一种适于将固体组合物溶于水性溶剂中的装置。所述装置包括适于保持第一固体组合物的第一闭合容器，所述第一闭合容器包括具有闭合状态和打开状态的第一闭合容器入口，其中在闭合状态下第一闭合容器入口密封至流体通道，并且在打开状态下第一闭合容器入口提供用于流体连通到第一闭合容器内的路径。所述装置还包括布置在第一闭合容器内的第一可移动密封元件，所述第一可移动密封元件用于密封第一闭合容器并且被配置成当在第一闭合容器内的至少第一和第二位置之间移动时保持第一闭合容器的密封，以减小第一闭合容器的内部体积。第一位置使得容器内的顶部空间具有亚大气压，并且第二位置使得顶部空间具有等于大气压的压力。所述装置还包括被配置成将第一可移动密封元件可释放地保持在第一闭合容器内的第一位置的第一保持元件。所述装置还包括用于控制第一闭合容器入口在闭合状态和打开状态之间改变的第一控制器。

当第一闭合容器入口处于闭合状态并且第一可移动密封元件位于第一位置时，第一闭合容器的压力为亚大气压。作为另外一种选择，当第一闭合容器入口处于闭合状态而第一可移动密封元件处于第二位置，并且随后第一可移动密封元件移动到第一位置并且第一保持元件保持第一可移动密封元件时，形成具有亚大气压的顶部空间。

参照附带的说明书和附图可更好地理解本文的教导内容的原理、使用和具体实施。在细读本文提供的说明书和附图之后，本领域的技术人员能够在无需过度的努力和实验的情况下来实施本发明。在附图中，类似的附图标号在整个全文中指类似的部件。

在详细阐释本发明的至少一个实施例前，应理解，本发明不一定限于其对应用于以下说明中所述和/或附图中所示的组件和/或方法的构造和布置的详细说明。本发明能够适用于其他实施例或者能够以多种方式来实施或执行。本文所采用的措辞和术语用于描述性目的，并且不应视为限制性的。

现在参见图1A-1C，示出了根据本文所公开的教导内容的装置10的示意图。装置10包括保持一定体积14的固体组合物、和顶部空间16的闭合容器12。容器可为适于保持固体组合物的任何接收器。容器的例子包括但不限于瓶子、冻干管、圆筒、广口瓶和注射器。容器由第一可移动密封元件(例如，橡胶盖)闭合。容器可由任何合适的材料制成，诸如玻璃、塑料、金属等等。

闭合容器12包括用于控制水性溶剂进入闭合容器12的内部体积的通道的入口18。入口18具有闭合状态，其中水性溶剂到闭合容器12的内部体积内的流动被阻断以及打开状态，其中入口18提供允许水性溶剂流入容器12的内部体积内的路径。控制器20控制入口18从打开状态到闭合状态的改变。作为另外一种选择，在一些实施例中，控制器20包括刺穿元件诸如附接到包括水性溶剂(未示出)的注射器的针，并且通过利用刺穿元件刺穿盖来在闭合容器12的盖中提供入口18的打开状态。

用于闭合容器12的可移动密封元件22布置在容器12内。可移动密封元件22可在容器12内进行移动以改变容器12内的顶部空间16的体积，其中在减小顶部空间16的体积的方向来移动密封元件22增加顶部空间16内的压力。可移动密封元件22(直接地或间接地)通过保持元件24可释放地保持在容器12内的第一位置，使得当可移动密封元件22处于第一位置时，顶部空间16的体积使得顶部空间16内的压力为亚大气压。保持元件24任选地连接到保持元件致动器39(示于图6B中)，所述保持元件致动器39致动以从保持元件24释放可移动密封元件22。

在释放时，可移动密封元件22移动到第二位置，使得顶部空间16的体积减小，并且顶部空间16的压力增加至等于大气压。

容器12可任选地保持在外壳64(示于例如图3中)内。

装置10可还包括用于容纳水性溶剂的贮存器42(示于例如图2中)。

如图1A所示，在初始状态，入口18处于闭合状态，保持元件24将可移动密封元件22保持在第一位置，并且顶部空间16中的压力为亚大气压。

图1B示出了装置10的使用，当入口18从初始闭合状态变为打开状态时使得允许水性溶剂流入容器12的内部体积内，同时可移动密封元件22通过保持元件24保持在容器12内的第一位置，使得顶部空间16的压力维持在亚大气压水平。由水性溶剂占据的体积小于由固体组合物占据的体积。

如图1C所示，在水性溶剂已被允许流入容器12的内部体积内之后，可移动密封元件22被从保持元件24释放，并且在容器12内移动到第二位置使得顶部空间16的体积减小并且顶部空间16内的压力成比例地增加，直到达到大气压。

根据一些实施例，闭合容器12包括注射器圆筒，并且可移动密封元件22包括至少部分地包封在筒内的活塞。在一些此类实施例中，保持元件24在使用之前将活塞可释放地保持在第一位置。

现在参见图2，示出了示例性装置30、具有前端34(其具有入口18)和后端36的第一注射器圆筒32、布置在第一注射器圆筒32内的第一可移动密封元件22a、用于可释放地保持第一可移动密封元件22a的保持元件24、以及用于将入口18从闭合状态改变为打开状态的控制器20的横截面侧视图。将控制器20间接地或直接地连接到控制器致动器38，所述控制器致动器38在致动时使得控制器20将入口18从闭合状态改变为打开状态。

第一可移动密封元件(图2)22a包括第一可滑动移位式活塞，所述活塞具有从注射器圆筒32的后端延伸出的第一活塞杆40a以用于操作第一活塞。

在一些实施例中，保持元件24包括设置在活塞杆40a的后端和第一注射器圆筒32的后端36之间的垫片，以阻止活塞杆40a向前移动到第一注射器圆筒32内。保持元件24任选地连接到致动器(未示出)，所述致动器在致动时使得保持元件24释放第一可移动密封元件22a。

在一些实施例中，在活塞杆40a中提供凹槽，并且保持元件24包括被配置成可逆地接合到凹槽70(如图7B所示)内的至少一个突起72(如图6B和图7A所示)。

在一些实施例中，装置30(例如图2)还包括用于在使用之前包含水性溶剂中的贮存器42(其包括第二注射器圆筒44)、和布置在圆筒44内的用于密封贮存器42的第二可移动密封元件22b。包括第二可滑动移位式活塞的第二可移动密封元件22b布置在圆筒44内，所述第二可滑动移位式活塞具有从注射器圆筒44的后端延伸出的第二活塞杆40b以用于操作第二活塞。

贮存器42包括直接地或间接地连接到入口18的出口46。在一些实施例中，闭合容器12和贮存器42被配置成允许水性溶剂在添加至固体组合物之后进行搅动，以促进固体组合物溶于溶剂中。在一些实施例中，闭合容器12和贮存器42被配置成允许通过在贮存器42和容器12之间反复地转移水性溶剂(和包括在将水性溶剂添加到固体组合物之后形成的部分溶解的溶液的悬浮液)来进行搅动。

控制器20任选地位于入口18和出口46之间。

图3示出了根据本发明的一些实施例的装置50的上部视图，其中装置50包括用于包含固体组合物的含固体的单元52和用于包含溶剂的含溶剂的单元54。

含固体的单元52包括两个闭合容器12a、12b，每个闭合容器包括具有入口18a、18b的注射器圆筒32a、32b，每个注射器圆筒32a、32b被配置成包含不同的固体组合物(例如，分别包含凝血酶和纤维蛋白原)。含溶剂的单元54包括两个贮存器，每个贮存器包含具有出口46a、46b的注射器圆筒44a、44b，每个注射器圆筒44a、44b被配置成包含用于溶解分别包含在注射器圆筒32a、32b内的固体组合物的溶剂。注射器圆筒44a、44b可包含相同或不同的水性溶剂。

注射器圆筒32a、32b、44a、44b各自具有分别布置在其中的可移动密封元件22a、22c、22b、22d(未示出)，和用于可释放地保持可移动密封元件22a、22c中的至少一个的保持元件24，以及用于将入口18a、18b中的至少第一者从闭合状态改变为打开状态的至少一个控制器20。在一些实施例中，控制器20将两个入口18a、18b从闭合状态改变为打开状态。装置50可任选地包括用于将入口18a、18b中的第二者从闭合状态改变为打开状态的第二控制器20b。控制器20a、20b(示于图6B中)分别任选地位于入口18a与出口46a之间、以及入口18b与出口46b之间。

装置50包括用于保持含固体的单元52的外壳64、和用于保持含溶剂的单元54的外壳66。作为另外一种选择，含固体的单元52和含溶剂的单元54二者可保持在单个外壳(未示出)内。此外，作为另外一种选择，含固体的单元52和含溶剂的单元54中的至少一个可被提供为不具有外壳。保持元件24任选地位于外壳64之内/之上。控制器20a和/或20b任选地位于外壳64内。

在一些实施例中，控制器20连接到控制器致动器38，所述控制器致动器38在致动时使得控制器20将入口18a、18b中的至少第一者从闭合状态改变为打开状态。作为另外一种选择，在包括第一控制器20a和第二控制器20b的一些实施例中，每个控制器20a、20b分别包括或连接到控制器致动器38a、38b，并且控制器20a、20b任选地定位在控制器致动器38a、38b下方。作为另外一种选择，在一些实施例中，单个控制器致动器38连接到并且控制第一控制器20a和第二控制器20b，如图6A和图6B所示。

当装置50处于初始状态时，在至少控制器致动器38的启动和控制器20a、20b的致动之前，入口18a、18b为闭合的，阻止水性溶剂流入注射器圆筒32a、32b内。在控制器致动器38启动时，控制器20a、20b中的至少一个被致动，使得入口18a、18b中的至少一个从闭合位置改变为打开位置，由此允许水性溶剂流入注射器圆筒32a、32b中的至少一个内。

每个可移动密封元件22a、22b、22c、22d包括可滑动移位式活塞，所述可滑动移位式活塞具有分别从相应的注射器圆筒32a、44a、32b、44b的后端延伸的活塞杆40a、40b、40c、40d以用于操作活塞。

任选地，含固体的单元52的活塞杆40a、40c经由联接元件56机械地连接在一起，并且含溶剂的单元54的活塞杆40b、40d经由联接元件58机械地连接在一起，使得每个单元中的一对活塞杆可一致地运动。

含固体的单元52的注射器圆筒32a、32b经由流体连接器60、62分别与含溶剂的单元54的注射器圆筒44a、44b可逆地流体连通。流体连接器可为例如鲁尔接头。例如，含固体的单元52可包括流体连接器60(其包括两个公鲁尔接头)并且含溶剂的单元52可包括流体连接器62(其包括两个母鲁尔接头)。注射器圆筒32a、32b分别定位成与注射器圆筒44a、44b相对，并且通过鲁尔接头进行连接以提供流体连通。

当装置50处于初始位置时，每个注射器圆筒32a、32b内的顶部空间16中的压力为亚大气压，入口18a、18b处于闭合状态，并且保持元件24将活塞杆40a、40c保持在第一位置，其中顶部空间16中的压力保持在亚大气压水平。

在一些实施例中，打开入口18a、18b并且由此使溶剂能流入注射器圆筒32a、32b的步骤导致顶部空间16内的压力增加。在溶剂进入注射器圆筒32a、32b的步骤期间，将顶部空间16中的压力有利地保持在亚大气压。例如，具有大表面积的高度多孔的粉饼可用于缩短溶解时间，因为在将溶剂引入注射器圆筒32之前，能够防止由注射器圆筒32中的活塞对此类粉饼造成塌缩。

在一些实施例中，保持注射器圆筒32a、32b内的顶部空间16中的压力与注射器圆筒44a、44b内的压力之间的压差，同时打开入口18a、18b使溶剂能被自发地吸入注射器圆筒32a、32b内。

根据一些实施例，当装置50包括两个注射器圆筒32a、32b(每个均保持固体组合物)时，能够实现两种固体组合物的溶解以及两种溶解的固体组合物(例如，含溶解的纤维蛋白原的溶液和含溶解的凝血酶的溶液)的即时和同时给药。

图4示出了图3的装置50的透视图，其中示出了通过包括公鲁尔接头的流体连接器60与包括母鲁尔接头的流体连接器62的脱离而彼此分离的图3的含固体的单元52和含溶剂的单元54。

图5示出了图3和图4的含溶剂的单元54的实施例的分解图，所述含溶剂的单元54包括注射器圆筒44a、44b、具有分别位于每个注射器圆筒44a、44b内的活塞杆40b、40d的活塞。每个注射器圆筒44a、44b分别具有出口46a、46b。注射器圆筒44a、44b被配置成包含溶剂。注射器圆筒44a、44b中的每个可包括相同的或不同的溶剂。

图6A示出了图3和图4的含固体的单元52的实施例的透视图，所述含固体单元52包含在外壳64内并且包括保持元件24，所述保持元件24任选地定位在外壳64上并且任选地通过两个“U”形部件25(示于图6B中)保持固定，形成类似沟槽的结构。含固体的单元52包括两个注射器圆筒32a、32b，每个注射器圆筒被配置成保持固体组合物。每个注射器圆筒32a、32b可保持相同的或不同的固体组合物。在一个实施例中，注射器圆筒32a包括包含纤维蛋白原的固体组合物并且注射器圆筒32b包括包含凝血酶的固体组合物。装置50还包括控制器致动器38。

图6B示出了图6A的含固体的单元52的分解图，其中活塞杆40a、40c包括至少一个凹槽70，并且保持元件24(任选地直接或间接地定位在含固体的单元52的后端上或外壳64上)包括至少一个突起(例如，至少一个凸起72)，其中凹槽70被配置成可逆地接合凸起72，使得当装置50处于初始位置时，凸起72接合到凹槽70内并且保持元件24将至少一个可移动密封元件22a、22c保持在固定位置以在含固体的单元52的注射器圆筒32a、32b内保持亚大气压。根据圆筒32a、32b内的顶部空间16的所需体积来确定凹槽70的位置，以用于在顶部空间16内保持所需压力。

在一些实施例中，每个活塞杆40a、40c分别包括一个凹槽70a、70b，并且保持元件24包括两个凸起72a、72b，所述凸起中的每个被配置成接合在凹槽70a和70b中的一个内，使得通过保持元件24来保持可移动密封件22a、22c，并且将圆筒32a、32b的中的每个内的顶部空间16的体积保持为在顶部空间16提供亚大气压的水平。

作为另外一种选择，仅第一活塞杆40a包括凹槽70，所述凹槽70被配置成接合保持元件24的一个凸起72。在此类实施例中，活塞杆40c任选地连接到活塞杆40a使得两个活塞杆40a、40c最初通过保持元件24保持在第一位置，使得在每个注射器圆筒32a、32b内的顶部空间16中保持亚大气压。作为另外一种选择，活塞杆40a、40c可为分开的，使得仅在注射器圆筒32a的顶部空间16中保持亚大气压。

此外任选的是，活塞杆40a、40c中的一个或多个可包括位于沿活塞杆40a和/或40c的不同位置处的不止一个凹槽70的，以在顶部空间16内提供不同的任选压力水平。

此外如图6B所示，控制器20a、20b连接到控制器致动器38，所述控制器致动器38在致动(例如，在装置50的第一操作步骤中由用户向下按压)时使得第一控制器20a将入口18a从闭合状态改变为打开状态以允许溶剂流入含固体的单元52的注射器圆筒32a内，并且使得第二控制器20b将入口18b从闭合状态改变为打开状态以允许溶剂流入注射器圆筒32b内。任选地，单个控制器20同时将入口18a和18b从闭合位置改变为打开位置。

保持元件24任选地包括或连接到保持元件致动器39，所述保持元件致动器在致动(例如，在装置50的第二操作步骤中由用户向下按压)时，使得可移动密封元件22a、22c中的至少一个从保持元件24释放，由此使至少一个可移动密封元件22a、22c能移动到容器内。任选地，可移动密封元件22a、22c中的每个同时从保持元件24释放。作为另外一种选择，装置50可包括保持元件24a、24b，以用于分别单独地保持可移动密封元件22a、22c中的每个。保持元件致动器39任选地致动单个保持元件24以同时地释放可移动密封元件22a、22c中的每个。作为另外一种选择，装置50可包括单独的保持元件致动器39a、39b，以用于分别致动保持元件24a、24b。

在一些实施例中，在装置50的初始位置中，包含固体组合物的注射器圆筒32a、32b中的每个均在顶部空间16中具有亚大气压，控制器20(或控制器20a、20b)被关闭，并且活塞杆40a、40c通过保持元件24保持在第一位置，以在注射器圆筒32a、32b的顶部空间16内保持亚大气压并且防止活塞杆40a、40c因环境大气压与圆筒32a、32b的顶部空间16内的亚大气压之间的压力差而被抽吸到注射器圆筒32a、32b内。

图7A示出了包括两个凸起72a、72b，和保持元件致动器39的保持元件24的实施例的透视图和放大视图。保持元件24包括狭窄的基座部分74和较宽的上部部分76。在此类实施例中，由于上部部分76的宽度，使得防止保持元件24在由“U”形部件25(示于图6B中)形成的通道状结构中被向下推压。

图7B示出了根据本文所公开的一些实施例的含固体的单元52的注射器圆筒32a、32b的活塞杆40a、40c的实施例的透视图。凹槽70a、70b分别被配置成接合凸起72a、72b。

图8A和图8B示出了保持元件24的实施例的透视图，所述保持元件24包括位于外壳64的近端的凸起72a、72b，所述外壳64将含固体的单元52的注射器圆筒32a、32b保持在一起。在图8A中，保持元件24在致动之前处于第一位置78，其中凸起72a、72b分别接合在凹槽70a、70b内。在图8B中，在通过保持元件致动器39致动并且使凸起72a、72b从凹槽70a、70b脱离之后，保持元件24移动到外壳64上的第二位置80。

图9A示出了致动之前的处于第一位置78的保持元件24的实施例的上部透视图，其中保持元件24的两个凸起72a、72b接合在位于沿活塞杆40a、40c的固定位置处的两个凹槽70a、70b内，使得活塞杆40a、40c保持在第一位置。

图9B示出了位于与图9A中相同的位置中的保持元件24的实施例的底部透视图。

图9C示出了在保持元件致动器39致动之后的位于第二位置80的保持元件24的实施例的底部透视图，其中凸起72a、72b从凹槽70a、70b脱离，由此从活塞杆40a、40c释放保持元件24，使得活塞杆40a、40c能够分别在注射器圆筒32a、32b内自由地移动。

图10示出了控制器20的实施例的侧视图，所述控制器20具有基本上圆柱形的部分82和较宽的凹的下部部分84。在控制器20致动之前，较宽部分84位于包括固体组合物的注射器圆筒32a、32b与包括水性溶剂的注射器圆筒44a、44b之间的流体路径中，使得溶剂从注射器圆筒44a、44b到注射器圆筒32a、32b的流动被物理性地阻断。当控制器致动器38致动控制器20时，移动控制器20使得圆柱形部分82位于流动路径内并且可在圆柱形部分82周围产生溶剂从注射器圆筒44a、44b到注射器圆筒32a、32b的流动。在一个实施例中，在控制器20致动时，流动路径保持开放。

图11A至图11C示出了处于初始状态的装置50，其中溶剂包含在注射器圆筒44a、44b内，入口18a、18b处于由控制器20保持的闭合位置。图11A示出了上部视图；图11B示出了横截面侧视图；并且图11C示出了包括控制器20的区域的放大视图。在该图中，活塞杆40a、40c处于初始位置以保持顶部空间16的体积，使得顶部空间16中的压力保持在亚大气压。随后，控制器致动器38被致动使得控制器20诸如通过从流体路径中移除控制器20的较宽的凹的下部部分84来将入口18a、18b从闭合位置改变为打开位置。含溶剂的单元54的活塞杆40b、40d因周围环境的大气压与注射器32a、32b内的顶部空间16中的亚大气压之间的压力差而被抽吸到注射器圆筒44a、44b内，使得溶剂分别从注射器圆筒44a、44b流入注射器圆筒32a、32b。

图12A至图12C示出了溶剂从注射器圆筒44a、44b转移到注射器圆筒32a、32b之后的装置50。图12A示出了上部视图；图12B示出了横截面侧视图；并且图12C示出了包括控制器20的区域的放大视图。在此步骤期间，控制器20的基本上圆柱形的部分82位于流体流动路径中。

图13示出了与含固体的单元52分离并连接到流体连接器系统86的含溶剂的单元54，所述流体连接器系统86包括具有鲁尔接头的流体连接器60、62，通过所述鲁尔接头可将由两种固体组合物溶于溶剂中形成的溶液施用给受试者。流体连接器系统86可任选地包括具有多个腔以提供多个流动通道的导管。

图14A示出了包括具有隧道状结构90的垫片88的保持元件24的实施例，所述保持元件24任选地包括刚性材料并且被配置成定位在含固体的单元52的活塞杆40a、40c上且任选地位于活塞杆40a、40c的后端与包含固体组合物的注射器圆筒32的后端之间。

图14B示出了定位在含固体的单元52的注射器圆筒32的活塞杆40上的垫片88。在此类实施例中，垫片88防止活塞杆40被抽吸到注射器圆筒32内。在从活塞杆40上移除垫片88时，活塞杆40被释放并被抽吸到注射器圆筒32内。根据注射器圆筒32内所需的顶部空间16的体积(以便提供顶部空间16内的所需压力)来确定垫片88的长度和位置。

在一些实施例中，装置50的操作序列包括以下步骤：

在初始位置，含固体的单元52和包含液体/溶剂的单元54彼此连接在一起(例如，通过包括鲁尔接头的流体连接器60、62)，所述流体连接器被配置成提供含溶剂的单元54的注射器圆筒44a、44b与含固体的单元52的注射器圆筒32a、32b之间的流体连通。在这个阶段，入口18a、18b为闭合的，由此阻止流体从注射器圆筒44a、44b流到注射器圆筒32a、32b。由注射器圆筒44a、44b中的溶剂占据的体积小于由注射器圆筒32a、32b中的固体组合物占据的体积。注射器圆筒32a、32b内的顶部空间16中的压力为亚大气压。注射器圆筒44a、44b内的顶部空间中的压力等于环境压力，例如，大气压。利用上文阐述的保持元件24来将含固体的单元52的注射器的活塞杆40a、40c保持在其初始位置并且部分地包封在其相应的圆筒内。

在第一步骤中，用户例如通过向下按压来启动控制器致动器38，从而致动控制器20a、20b并且打开入口18a、18b和出口46a、46b，从而允许溶剂从注射器圆筒44a流到注射器圆筒32a并且允许溶剂从注射器圆筒44b流到注射器圆筒32b。当溶剂流到注射器圆筒32a、32b内时，圆筒32a、32b中的顶部空间16内的压力保持在亚大气压水平。

在一个实施例中，在启动控制器致动器38之后，流体连接件保持为打开的。

在第二阶段，在全部溶剂引入到注射器圆筒32a、32b内之后，用户启动保持元件致动器39(其任选地为保持元件24的一部分)，导致含固体的单元52的活塞杆40a、40c的释放。随后，由于注射器圆筒32a、32b相对于环境大气压具有较低的压力，活塞杆40a、40c被抽吸到其相应的注射器圆筒32a、32b内，从而导致圆筒32a、32b的顶部空间16内的压力增加，直至顶部空间16内的压力等于大气压。

根据本文所公开的原理，通过减小注射器圆筒32a、32b中的顶部空间来实现压力增加且无需将气体引入注射器内。有利地，顶部空间16内的压力水平的改变可基本上消除或最小化泡沫形成，并且使在几乎完全不存在泡沫的情况下来搅动固体组合物在溶剂中的悬浮液。

可利用活塞杆40a、40b、40c、40d使得悬浮液在注射器圆筒44a和32a之间，以及在注射器圆筒44b和32b之间转移若干次来搅动悬浮液，以促进完全溶解并且形成其中固体组合物完全溶于溶剂中的溶液。在完成溶解或重悬之后，用户可使单元52与单元54分离，并且例如通过连接流体连接器系统86(通过所述流体连接器系统可递送这两个重悬溶液)来将重悬的溶液施用到期望的位置。

应理解，为清晰起见在各独立实施例的上下文中描述的本发明的某些特征，也可以组合形式提供在单个实施例中。相反地，为简明起见在单个实施例的上下文中描述的本发明的各种特征，也可单独地、或以任何合适的子组合形式、或适用于本发明的任何其他所述实施例的形式来提供。在各实施例的上下文中描述的某些特征未被示为这些实施例的基本特征，除非所述实施例在不存在这些元件的情况下不能工作。

尽管本发明已结合其具体实施例来进行描述，但显然的是，多种另选的替代方案、修改和变型对于本领域的技术人员而言将是显而易见的。因此，其旨在涵盖落入所附权利要求的范围内的全部此类另选的替代方案、修改和变型。

本专利申请中的任何参考的引用或标识不得理解为此类参考文献被许可用作本发明的现有技术。

实例

材料和方法：

冻干：

根据表1所示的周期利用Christ Epsilon 2-8D冻干器来执行冻干。在圆柱形小瓶或行冻干，所述圆柱形小瓶或杯在冻干过程完成时进行密封。冻干过程产生了固体、三维纤维蛋白原“粉饼”。

表1

任选地，在步骤13之后并且在密封冻干小瓶之前，可通过将冻干小瓶中的压力增加到所期望的压力来提供高于0.12mBar的压力。

Clauss凝固时间方法。

这种方法利用凝固时间机(Diagnostica Stago Inc.,USA)并且根据样品在存在恒定量的凝血酶的情况下的凝固时间来测量样品中的可凝固纤维蛋白原浓度。将针对样品测得的凝固时间与利用由纤维蛋白原标准产生校准曲线获得的凝固时间进行比较。所用的方法为Eu.Ph.测定法0903/1997的修改，该方法阐述于下述文献中：EuropeanPharmacopaiea,Fibrin sealant kit.1997：0903：858；和ClaussA.Gerinnungsphysiologische Schnellmethode zur Bestimmung des Fibrinogens.ActaHaematol.1957；17：237-246。

脱气双蒸馏水(脱气DDW)的制备

在真空条件下搅动双蒸馏水(DDW)直到不再有气泡出现在水的表面之上。

纤维蛋白原原液溶液。

将具有55-85mg/ml的可凝固纤维蛋白原浓度的生物活性组分(BAC)溶液如血纤维蛋白密封剂(Omrix Biopharmaceuticals Ltd.)用作下述全部实验中的纤维蛋白原液溶液。

蛋白质溶解水平的测量。

测量冻干和溶解之后的纤维蛋白原测试溶液的光密度(OD)、以及包括未经受冻干和溶解的BAC纤维蛋白原原液溶液的对照溶液的光密度。

将来自每份纤维蛋白原测试溶液的150μl的样品与DDW按1:400进行稀释，并且相对于DDW坯料来在280-320nm下测量OD。在丙烯酸比色皿(Sarstedt，德国；目录号67.740)中利用ULTRASPEC2100pro分光光度计(Amersham Pharmacia Biotech,Sweden)来执行测量。

对照溶液的OD被视为100％。根据下述公式进行计算，结果为百分比形式表示：

实例1：溶解固体纤维蛋白原以获得浓缩的纤维蛋白原溶液。

检查通过上述冻干法获得的固体三维纤维蛋白原低密度“粉饼”的纤维蛋白原密度对水性溶剂中的蛋白质溶解水平的影响。从冻干后的蛋白质溶液的“粉饼”中获得的蛋白质密度(以mg/cc表示)基本上等于冻干前的溶液的蛋白质密度(以mg/cc表示)。因此，与通过未稀释的原液溶液的冻干获得的“粉饼”相比，冻干前对储备溶液的稀释导致较低密度的“粉饼”。“粉饼”的体积基本上等于用于制备“粉饼”的溶液的体积。因此，将“粉饼”溶于等于“粉饼”体积的体积中导致具有与用于制备“粉饼”的溶液的浓度的相等浓度的溶液，而将“粉饼”溶于小于“粉饼”体积的体积中导致具有高于用于制备“粉饼”的溶液的浓度的浓度的溶液。

为了制备具有不同纤维蛋白原密度的低密度“粉饼”，将包括63mg/ml纤维蛋白原(如上面的材料与方法部分中所述)的纤维蛋白原原液溶液利用DDW进行稀释以获得具有21至42mg/ml范围内的浓度的纤维蛋白原溶液。将稀释的溶液和包括未稀释的纤维蛋白原原液溶液的对照样品进行冻干，从而产生具有不同纤维蛋白原密度的“粉饼”。将“粉饼”溶于水性溶剂中并且按照下文所述的方式来测量蛋白质溶解水平。

更具体地，将5ml原液溶液利用DDW进行稀释以产生分别具有42mg/ml、32mg/ml和21mg/ml可凝固纤维蛋白原浓度以及7.5ml、10ml和15ml最终体积的溶液。在下个步骤中，将包括纤维蛋白原原液溶液的5ml对照样品和最终体积的稀释溶液均转移到圆柱形玻璃杯内(直径：30mm/高度：25mm)，所述圆柱形玻璃杯被设计用于制备能够贴合在注射器内的粉饼并且根据材料和方法部分中所述的周期来经受冻干。在这种实验中，圆柱形玻璃杯为不封盖的。

在冻干周期结束时，获得了具有63(得自对照样品)、42、32和21mg/cc(得自稀释的实验样品)的纤维蛋白原密度的干燥冻干“粉饼”。将每个“粉饼”从圆柱形玻璃杯中移出并且通过如下方式装入50ml注射器(PICIndolor,Italy)的圆筒内：移出注射器的活塞、将“粉饼”插入注射器的圆筒内，并且随后将活塞放入圆筒中。将50ml注射器连接到三通旋塞(Medipharm,UK)的第一连接点，将包含5ml脱气DDW(例如上制得)的5ml注射器(TERUMO,Belgium)连接到旋塞的第二连接点，并且将20μm过滤器(MDI,India；目录号SYPP0611MNXX104)连接到第三连接点。

将得自稀释溶液的低密度“粉饼”中的每个在22±2℃的温度下溶于5ml DDW中，以便获得下述方法中的一个的具有63mg/ml(与特别是用作止血剂的纤维蛋白原储备溶液的浓度相似)的最终纤维蛋白原浓度的溶液：

方法1：设定三通旋塞以允许包含脱气DDW的5ml注射器与包含低密度“粉饼”的50ml注射器之间的流体连通，并且将脱气DDW引入到50ml注射器内。在将脱气DDW引入到50ml注射器内之后，通过来回地移动注射器的活塞来使由此形成的包含部分溶解的纤维蛋白的溶液从一个注射器到另一个注射器转移三次，以便增加纤维蛋白原的溶解。将注射器组件在室温下温育两分钟以获得包含基本上完全溶解的纤维蛋白原的溶液。从引入脱气DDW至温育结束的总时间为约150秒。随后，设定三通旋塞以允许纤维蛋白原溶液流过20μm过滤器，以便从溶液中移除未溶解的颗粒。

方法2：按照与上述方法1相类似的方式执行溶解，不同的是使包含部分溶解的纤维蛋白原的溶液从一个注射器到另个一注射器转移五次，并且在不存在任何温育周期的情况下来立即过滤所得的溶液。从引入脱气DDW直到溶液在两个注射器间的第五次转移结束的时间为约30秒。

按照上文在材料和方法部分的“蛋白质溶解水平的测量”中所述的方式来测量溶液中的溶解蛋白的百分比。结果示于下表2中。

表2

*测量被重复执行三次。

据观察，在两种溶解方法中，与较高蛋白质密度“粉饼”所获得的情况相比，将较低蛋白质密度“粉饼”溶于水中导致增加的蛋白溶解百分比。在此实验中，当利用方法1，其包括温育并且持续150秒，溶解具有21mg/cc的纤维蛋白原浓度的冻干型“粉饼”时，获得最佳的蛋白质溶解。结果表明，温育和混合或搅动为重要的，并且需要相对较长的间期以溶解固体纤维蛋白原制剂。值得注意的是，冻干型粉饼内的纤维蛋白原密度可降至5mg/cc，同时能够保持冻干物的稳定性而不存在“粉饼”的任何塌缩(Parker等人“Determination of theinfluence of primary drying rates on the microscale structural attributes andphysicochemical properties of protein containing lyophilized products”.JPharm Sci.2010年，99：4616-4629)。

溶液的目测显示，以上述方式溶解冻干“粉饼”导致泡沫溶液的形成。

实例2：溶解期间压力对泡沫消散速率的影响。

利用亚大气压条件并且随后平衡至大气压(1000mBar)的情况来研究压力对于冻干型低密度纤维蛋白原“粉饼”溶解期间形成的泡沫的消散速率的影响。

出于这种目的，制备了具有21mg/cc的纤维蛋白原密度的“粉饼”。通过按照上文所述的方式利用10mlDDW稀释具有63mg/ml的纤维蛋白原浓度的5ml储备溶液来制备八个测试溶液，每份测试溶液具有15ml的体积和21mg/ml的可凝固纤维蛋白原浓度。将溶液分别在50ml的玻璃小瓶中进行冻干。将八个冻干小瓶利用橡胶盖进行部分地覆盖，并且按照材料和方法部分的表1中所述的方式进行冻干。在冻干周期结束时，获得具有21mg/cc纤维蛋白原密度的干燥“粉饼”。

使“粉饼”经受下述的亚大气压：0.12、100、250或500mBar。出于这种目的，通过将冻干器内的压力调节至所需压力并且降低橡胶盖上的冻干器搁架来密封并且盖住包含“粉饼”的玻璃小瓶。将用于在每份压力下测试的样品重复地提供两次。

然后将测试样品的“粉饼”在室温(22±2℃)下溶于DDW中以提供具有63mg/ml的纤维蛋白原浓度的溶液，如下所述。首先，利用连接到23G针(Medi plus,China)的5ml注射器(Terumo,Belgium)来将4.4ml脱气DDW通过橡胶盖注射到包含“粉饼”的小瓶内，同时将小瓶中的压力保持在指定的亚大气压下。允许注射之后将针保留在橡胶盖内。在将脱气DDW注射到小瓶内之后二十秒，通过使注射器与针分离并且允许空气从周围区域通过针进入小瓶来将小瓶中的压力平衡至大气压。以这种方式来溶解每个压力水平下的一个样品。

通过在22±2℃的温度以及大气压下注射脱气DDW来执行第二(对照)样品的“粉饼”在每个压力水平下的溶解，如下所述：第一，略微地打开小瓶的盖以使小瓶内的压力达到大气压，然后将4.4ml脱气DDW添加到小瓶以获得63mg/ml可凝固纤维蛋白原的浓度(如同原液溶液的浓度)。从将脱气DDW添加到冻干型低密度“粉饼”的时间开始直到从上面可看到溶解溶液的表面区域的三分之一的时间来测量泡沫消散所需的时间。结果示于下表3中。

表3

*测量被重复执行三次。

**从引入脱气DDW至多到从上面可看到溶解溶液的表面区域的三分之一的时间点。

***压力水平增加至1000mBar伴有小瓶内的空气的增加。

据观察，与对照组(在大气压下注射脱气DDW)相比，冻干型纤维蛋白原“粉饼”在亚大气压并且随后平衡至大气压的情况下的溶解提高了泡沫消散速率。在添加脱气DDW期间的小瓶内的压力水平被示为与泡沫消散时间直接相关(即，添加脱气DDW期间的小瓶内的低压导致短泡沫消散时间)。在此实验中，通过在0.12mBar压力下将DDW添加到低密度“粉饼”、温育20秒、并且随后平衡至大气压可观察到最佳结果。

这些结果表明，为了最小化冻干型纤维蛋白原“粉饼”溶解期间产生的泡沫，有利的是在亚大气压并且随后平衡至大气压的情况下添加溶剂。

实例3：搅动溶液对泡沫形成、蛋白溶解水平和溶解速率的影响。

先前的实验表明，在亚大气压并且随后将空气引入小瓶内并且将冻干小瓶中的压力平衡至大气压的情况下溶解冻干型低密度“粉饼”导致较短的泡沫消散时间。

搅动混合物可期望缩短溶解时间和获得均匀的溶液。在下面的实验中，在不将空气引入小瓶内的情况下机械地实现平衡至大气压，然后检查搅动溶液对蛋白溶解水平、溶解速率和泡面消散的影响。通过两种不同的方法来执行溶液的搅动：A-通过利用两个连接的注射器并且将溶液从一个注射器转移到另一个注射器(即，通过使用往复式混合装置)；或者B-通过手动地摇动包含溶液的容器。在两个实验中，在室温(22±2℃)下执行溶解并且添加的DDW处于22±2℃的温度下。

A.通过往复式混合装置搅动溶液-

按照下述方式来制备低密度“粉饼”。利用DDW稀释具有63mg/ml凝固纤维蛋白原的4ml纤维蛋白原原液溶液以获得具有48、32和21mg/ml的凝固纤维蛋白原浓度的溶液。在稀释步骤之后分别获得6、8和12ml的最终体积。在下一步骤中，根据材料和方法部分中所述的周期来冻干4ml未稀释的纤维蛋白原储备溶液中的每份和最终体积的稀释溶液。在专门设计的圆柱形玻璃杯(直径：23mm/高度：25mm)中来执行冻干工序。

在其中稀释溶液的最终体积高于玻璃杯的体积(5ml)的情况下，在不止一个玻璃杯中来冻干稀释溶液(即63mg/ml-1个杯、48mg/ml-2个杯、32mg/ml-2个杯、21mg/ml-3个杯)。在此实验中，在冻干周期结束时未在亚大气压条件下对圆柱形玻璃杯封盖或密封。四种不同的纤维蛋白原溶液的冻干产生了具有63、48、32和21mg/cc的纤维蛋白原密度的冻干“粉饼”。然后，通过移出注射器活塞、将“粉饼”插入注射器的圆筒内、并且将活塞恢复到圆筒来将每份获得的冻干“粉饼”装入12ml注射器内。在其中使用多于一个杯来进行冻干的情况下，将所有获得的粉饼插入到同一圆筒内。将12ml注射器连接到三通旋塞(Medipharm,UK)的第一连接点，将包含大约3.6ml脱气DDW(按照材料和方法部分中所述制得)的第二12ml注射器连接到三通旋塞的第二连接点，并且将真空泵(KNFNeuberger,Germany)与真空压力计(FisherScientific,USA)连接到第三连接点。

然后使低密度“粉饼”经受亚大气压水平。出于这种目的，设定三通旋塞以允许真空泵与保持冻干“粉饼”的12ml注射器之间的流体连通；并且通过铝垫片来将保持冻干“粉饼”的12ml注射器的柱塞保持在注射器圆筒的顶部，以在使低密度“粉饼”经受亚大气压的步骤期间，将柱塞保持保持固定并且阻止其被抽吸到注射器圆筒内。然后通过真空泵来从保持冻干“粉饼”的12ml注射器中抽出空气以提供25、200或500mBar预先确定的压力。在另一测试组中，未将空气从注射器圆筒中抽出，使得注射器内的压力为1000mBar。

利用下述方法来将冻干“粉饼”溶于DDW中以提供具有63mg/ml的纤维蛋白原浓度的溶液(如同未稀释的储备溶液)：首先，设定三通旋塞以允许保持脱气DDW(3.6ml)的12ml注射器与保持冻干“粉饼”的12ml注射器之间的流体连通，由此导致脱气DDW流入保持冻干“粉饼”的注射器内并且提供包含部分溶解的纤维蛋白原的溶液，同时保持亚大气压。在此步骤中，保持包含部分溶解的纤维蛋白原的溶液的注射器内的压力相对于先前步骤期间的压力得到增加，但仍低于大气压。然后，通过从注射器中移除铝垫片并且让柱塞被抽吸到圆筒内或者通过推压柱塞来使得圆筒内的压力在不存在空气的情况下平衡至大气压。压力平衡因而是以机械方式实现的而不需要引入空气或气体，与此形成对照的是实例2，其中通过将来自周围区域的空气引入小瓶内来实现与大气压的平衡。然后使注射器组件与包含部分溶解的纤维蛋白原的溶液保持静置30秒，并且同时使真空泵与三通旋塞分离。在下一步骤中，通过利用定制的溶解机器使溶液以3.8cm/sec的速率从一个注射器向另一个注射器转移10次来搅动包含部分溶解的纤维蛋白原的溶液，以获得包含基本上完全溶解的纤维蛋白原的溶液。简而言之，定制的溶解机器包括两个彼此面对的注射器泵，每个注射器泵包含注射器。利用包含阀门的连接元件来将两个注射器泵的注射器连接在一起，以控制水的通过并且保持含固体注射器内的真空。两个注射器泵同步工作，使得当第一注射器泵牵拉第一注射器的柱塞时，第二注射器泵推压第二注射器的柱塞，反之亦然。

然后，使保持包含基本上完全溶解的纤维蛋白原的溶液的注射器与三通旋塞分开，并且通过20μm过滤器来过滤溶液以从溶液中分离任何未溶解的材料。

按照与上文所述相同的方式来实现大气压下的冻干型低密度“粉饼”的溶解，不同的是未使用铝垫片并且整个溶解步骤期间的压力等于大气压。从引入脱气DDW直到溶液在两个注射器之间第十次转移结束的时间为45秒。

为了评估固体蛋白质在上述条件下溶解的能力，按照上文在材料与方法部分的“蛋白溶解水平的测量”中所述的方式来测量溶解溶液内的蛋白溶解水平。目视检查泡沫的存在。

结果示于下表4中。

表4

*被卡住是指因注射器被未溶解的颗粒阻塞而使得溶解机器不能移动柱塞。

**每个实验被重复执行5次。

结果表明，在低于200mBar(例如，25mBar)的压力下随后在不引入空气的情况下平衡至大气压，并且搅动溶液(例如，通过使溶液在两个注射器之间往复运动)，这样使得具有小于42mg/cc(例如，32mg/cc或21mg/cc)的纤维蛋白原密度的冻干“粉饼”的溶解在45秒的短时间内导致100％蛋白溶解。在25mBar的压力下溶解之后未观察到显著量的泡沫，而较高压力水平导致显著的泡沫形成。

B-通过手动地摇动包含溶液的容器来搅动。

在存在不锈钢球体的情况下通过手动地摇动包含溶液的注射器来执行搅动。

为了检查手动摇动的效果，按照上文所述的方式利用分别具有23、35、47和70mg/ml的纤维蛋白原浓度的纤维蛋白原溶液来制备具有23、35、47和70mg/cc的纤维蛋白原密度的冻干“粉饼”。简而言之，利用DDW来将4ml纤维蛋白原储备溶液稀释成23、35、47mg/ml的纤维蛋白原浓度，如上所述。根据表1所述的冻干周期来冻干每份稀释纤维蛋白原溶液的总体积和未稀释纤维蛋白原储备溶液的4ml样品。在冻干周期结束时，未将包含冻干“粉饼”的小瓶在低压条件下进行封盖或密封。将获得的低密度“粉饼”与4个不锈钢球体一起插入到如上所述的12ml注射器的圆筒内。在此实验中使用两种不同的不锈钢球体：4mm直径的球体(重260mg)和6.4mm直径的球体。

将12ml注射器连接到三通旋塞(Medipharm,UK)的第一连接点，将包含4.35ml脱气DDW(例如上制得)的5ml注射器(TERUMO,Belgium)连接到三通旋塞的第二连接点，并且将真空泵(KNF Neuberger,Germany)与真空压力计(Fisher Scientific,USA)连接到第三连接点。

然后，使低密度“粉饼”经受25mBar的压力水平。为此，设定三通旋塞以允许保持冻干“粉饼”的注射器与真空泵之间的流体流通，并且通过如上所述的垫片来将保持“粉饼”的注射器的柱塞固定在注射器的圆筒的顶部的适当位置中。然后通过真空泵从保持冻干“粉饼”的注射器中抽出空气，直至达到25mBar的压力。在抽出空气之后，设定三通旋塞以允许从保持脱气DDW的注射器到保持冻干“粉饼”的注射器的流体连通，以获得包含部分溶解的纤维蛋白原的溶液。移除铝垫片，从而在未将空气引入注射器内的情况下来导致保持溶液的注射器内的压力与大气压平衡。在将脱气DDW引入“粉饼”之后三十秒时，将包含具有部分溶解的纤维蛋白原的溶液的注射器与三通旋塞一起与注射器组件分离，并且手动地摇动60秒，由此导致不锈钢球体在圆筒内的运动并且提供包含基本上完全溶解的纤维蛋白原的溶液。从引入脱气DDW到手动摇动步骤结束的时间为约90秒。

然后，将三通旋塞连接到20μm过滤器，并且过滤包含基本上完全溶解的纤维蛋白原的溶液以从溶液中分离任何未溶解的材料。按照上文所述的方式来确定蛋白质溶解的百分比。目视检查泡沫的存在。

针对每个测试组来将此实验重复执行三次。结果在表5中示出。

表5：

可以看出，通过在25mBar的低压下且随后在未引入空气的情况下平衡至大气压来溶解具有低纤维蛋白原密度(例如，等于或小于47mg/cc)的冻干“粉饼”并且通过手动地摇动具有大球体(例如，具有6.4mm的直径)的溶液，在90秒的短时间内获得了完全的蛋白溶解。在测试组的任何一个中均未观察到显著量的泡沫。

相比之下，在检查冻干“粉饼”内的蛋白质密度对蛋白溶解水平的影响的实例1中，在150秒内获得了完全的蛋白溶解(97.4±9.8％)，这比这些实验中完全溶解所需的时间(45或90秒)长约1.7-3.4倍。

Claims (27)

1.一种用于将固体纤维蛋白原组合物溶于水性溶剂中的方法，包括：

i) 提供闭合容器，所述闭合容器包含：一定体积的所述固体纤维蛋白原组合物和顶部空间，其中所述顶部空间内的压力为亚大气压；

ii) 在将所述顶部空间中的内部压力保持在亚大气压的同时，将一定体积的所述水性溶剂引入所述容器内以形成具有至少40mg纤维蛋白原/ml的溶液，所述水性溶剂的体积小于所述固体纤维蛋白原组合物的体积；以及

iii) 在ii)之后，减小所述容器中的所述顶部空间的大小，而不允许气体进入所述容器中，直至所述顶部空间中的压力等于大气压。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括搅动所述溶液。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述固体纤维蛋白原组合物为冻 干粉饼。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述固体纤维蛋白原组合物中的纤维蛋白原的密度在至少5mg/cc至低于63mg/cc的范围内。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述纤维蛋白原的密度不超过23mg/cc。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所获得的溶液中的所述纤维蛋白原浓度为40mg/ml至120mg/ml。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述水性溶剂为脱气的水性溶剂。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤i)中的所述顶部空间中的内部压力不超过500mBar。

9.根据权利要求8所述的方法，其中步骤i)中的所述顶部空间中的内部压力不超过0.12mBar。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述容器包括至少两个彼此流体连通的不同部分：包含所述水性溶剂的第一部分；和包含所述固体纤维蛋白原组合物的第二部分，并且其中将所述水性溶剂从所述不同部分的所述第一部分引入到所述容器的不同部分的所述第二部分。

11.根据权利要求2所述的方法，其中所述水性溶剂包含在贮存器内，并且其中所述容器和所述贮存器彼此流体连通，并且其中所述搅动包括在所述容器和所述贮存器之间反复地转移所述水性溶剂。

12.根据权利要求2所述的方法，其中所述容器包括至少一个惰性材料球体，所述惰性材料球体不溶于所述溶液中并具有大于所述溶液密度的密度，并且其中所述搅动包括摇动所述容器。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述球体包括具有3mm至7mm范围内的直径的小珠。

14.根据权利要求1或2所述的方法，其中在步骤ii)完成和步骤iii)开始之间允许经过至少5秒的时间间隔。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述时间间隔为至少20秒。

16.根据权利要求1或2所述的方法，还包括在所述容器中温育所述溶液。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述温育被执行不长于2分钟。

18.一种适于将固体组合物溶于水性溶剂中的装置(10, 30, 50)，所述装置包括：

适于保持第一固体组合物的第一闭合容器(12a)，所述第一闭合容器包括具有闭合状态和打开状态的第一闭合容器入口(18a)，其中在所述闭合状态下所述第一闭合容器入口密封至流体通道，并且在所述打开状态下所述第一闭合容器入口提供用于流体连通到所述第一闭合容器中的路径；

布置在所述第一闭合容器内的第一可移动密封元件(22a)，所述第一可移动密封元件用于密封所述第一闭合容器并被配置成当在所述第一闭合容器内的至少第一位置和第二位置之间移动时保持所述第一闭合容器的密封，以减小所述第一闭合容器的内部体积；

被配置成将所述第一可移动密封元件可释放地保持在所述第一闭合容器内的第一位置的保持元件(24)；

用于控制所述第一闭合容器入口在闭合状态和打开状态之间改变的第一控制器(20a)；以及

适于保持第一水性溶剂的第一贮存器(42a)；和布置在所述第一贮存器内的被配置成保持所述第一贮存器的密封的第二可移动密封元件(22b)，所述第一贮存器包括适于与所述第一容器入口流体连通的第一贮存器出口(46a)，

其中当所述第一闭合容器入口处于闭合状态而所述第一可移动密封元件处于所述第二位置，并且随后所述第一可移动密封元件移动到所述第一位置并且所述保持元件保持所述第一可移动密封元件时，形成具有亚大气压的顶部空间，

其中所述第一闭合容器包括具有前端(34)和后端(36)的第一注射器圆筒(32a)，其中所述前端包括所述第一闭合容器入口，并且其中所述第一可移动密封元件包括第一活塞，所述第一活塞布置在所述第一注射器圆筒内从所述第一注射器圆筒的所述后端朝所述前端可滑动地移位并连接到第一活塞杆(40a)，

其中所述第一贮存器包括具有前端(34)和后端(36)的第二注射器圆筒(44a)，其中所述前端包括所述第一贮存器出口，并且所述第二可移动密封元件包括第二活塞，所述第二活塞布置在所述第二注射器圆筒内从所述第二注射器圆筒的所述后端朝所述前端可滑动地移位并连接到第二活塞杆(40b)。

19.根据权利要求18所述的装置，其中当所述入口处于打开位置时并且其中当所述保持元件释放所述第一可移动密封件时，所述第一可移动密封件在所述第一闭合容器内从第一位置移动到第二位置，从而减小所述第一闭合容器的内部体积，其中所述第一闭合容器内的内部压力增加。

20.根据权利要求18或19所述的装置，还包括：

适于保持第二固体组合物的第二闭合容器(12b)，所述第二闭合容器包括具有闭合状态和打开状态的第二闭合容器入口(18b)，其中在所述闭合状态下所述第二闭合容器密封至流体通道，并且在所述打开状态下所述第二闭合容器入口提供用于流体连通到所述第二闭合容器中的路径；

布置在所述第二闭合容器内的第三可移动密封元件(22c)，所述第三可移动密封元件用于密封所述第二闭合容器并被配置成当在所述第二闭合容器内的至少第一位置和第二位置之间移动时保持所述第二闭合容器的密封，以减小所述第二闭合容器的内部体积；

被配置成将所述第三可移动密封元件可释放地保持在所述第二闭合容器内的第一位置的保持元件；以及

用于控制所述第二闭合容器入口在闭合状态和打开状态之间改变的第二控制器(20b)，

其中所述装置提供有所述第二闭合容器，所述第二闭合容器还包括具有亚大气压的顶部空间(16)；闭合的容器入口(18b)；和将所述第三可移动密封元件保持在所述第一位置的所述保持元件；或者当所述第二闭合容器入口处于闭合状态而所述第三可移动密封元件处于所述第二位置，并且随后所述第三可移动密封元件移动到所述第一位置并且所述保持元件保持所述第三可移动密封元件时，形成具有亚大气压的顶部空间。

21.根据权利要求20所述的装置，还包括适于保持第二水性溶剂的第二贮存器(42b)，和布置在所述第二贮存器内的被配置成保持所述第二贮存器的密封的第四可移动密封元件(22d)，所述第二贮存器包括适于与所述第二闭合容器入口流体连通的第二流体出口(46b)。

22.根据权利要求21所述的装置，其中：

所述第一闭合容器为具有前端和后端的第一注射器圆筒，其中所述第一注射器圆筒的所述前端包括所述第一闭合容器入口，并且其中所述第一闭合容器的所述第一可移动密封元件包括第一活塞，所述第一活塞布置在所述第一注射器圆筒内从所述第一注射器圆筒的所述后端朝所述前端可滑动地移位；

其中所述第一贮存器包括具有前端和后端的第二注射器圆筒，其中所述第二注射器圆筒的所述前端包括所述第一贮存器出口，并且其中所述第二可移动密封元件包括第二活塞，所述第二活塞布置在所述第二注射器圆筒内从所述第二注射器圆筒的所述后端朝所述前端可滑动地移位；

其中所述第二闭合容器为具有前端和后端的第三注射器圆筒，其中所述第三注射器圆筒的所述前端包括所述第二闭合容器入口，并且其中所述第三可移动密封元件包括第三活塞，所述第三活塞布置在所述第三注射器圆筒内从所述第三注射器圆筒的所述后端朝所述前端可滑动地移位并连接到第三活塞杆(40c)；并且

其中所述第二贮存器包括具有前端和后端的第四注射器圆筒(44b)，其中所述第四注射器圆筒的所述前端包括所述第二贮存器出口，并且其中所述第四可移动密封元件包括第四活塞，所述第四活塞布置在所述第四注射器圆筒内从所述第四注射器圆筒的所述后端朝所述前端可滑动地移位并连接到第四活塞杆(40d)。

23.根据权利要求21所述的装置，还包括用于在其中包含所述第一闭容器和所述第二闭合容器和/或所述第一贮存器和所述第二贮存器的外壳(64, 66)。

24.根据权利要求18或19所述的装置，其中所述第一固体组合物包含固体纤维蛋白原。

25.根据权利要求20所述的装置，其中所述第二固体组合物包含固体凝血酶。

26.根据权利要求18或19所述的装置，其中所述第一活塞附接到具有至少一个凹槽(70)的活塞杆，并且所述保持元件包括被配置成接合在所述凹槽内的至少一个突起(72)。

27.根据权利要求18或19所述的装置，还包括控制器致动器(38)，所述控制器致动器在致动时使得所述第一控制器从所述闭合状态移动到所述打开状态。