CN104136049A - 形成止血产品的方法 - Google Patents

Abstract

一种具有多层止血层的止血产品，每一止血层包括：右旋糖酐支持物；和至少一种止血剂，所述止血剂选自由凝血酶和纤维蛋白原组成的组。所述止血层以堆叠构造安排。

Description

形成止血产品的方法

技术领域

本发明一般地涉及具有止血特性的产品。更具体地说，本发明涉及形成止血产品的方法。

背景技术

为阻止从伤口出血，身体的自然反应是通过被称为凝血级联（coagulation cascade）的复杂过程启动凝血。所述级联包括两条途径，最终导致产生酶凝血酶（thrombin），其催化纤维蛋白原（fibrinogen）转化为纤维蛋白（fibrin）。

然后，纤维蛋白交联形成凝血块（clot），导致止血。对于没有拮抗情况（countervening condition）的个体内不严重的伤口，身体通常能够以阻止从伤口过度失血的方式有效地进行这个过程。然而，在严重伤口的情况下，或凝血机制被破坏的个体的情况下，这可能并非如此。

然而，对于此类个体，可能通过直接向伤口施用凝血级联成分，尤其是凝血酶和纤维蛋白原，而实现止血。出血伤口包扎也是通常的做法，在某种程度上隔离并保护伤口区域，并也提供向伤口施加压力的手段，这也能帮助控制出血。

虽然在轻度创伤或在“受控”伤害（如手术）的情况下，可以令人满意地实施这些方法，但是在许多最需要这类处理的情况也是那些最难提供这类处理的情况。这类创伤的例子包括，例如，那些搏斗中或作为意外事件结果的意料之外的创伤。

在这种情况下，受伤个体的生存可能取决于阻止由伤口的出血和受伤后最初几分钟内达到的止血。不幸的是，由于这类受伤的情况，可能无法立即使用适当的医疗干预。

特别是，处理穿透伤（penetrating wound）如子弹创伤或一些由弹片造成的创伤是有问题的。这是由于难以在精确的受伤位置放置绷带和/或治疗剂，所述受伤位置包括刚好身体表面以下的、难以或不可能使用常规技术到达的区域。

Jiang等人在Biomacromolecules, v. 5, p. 326-333 (2004)中教导了电纺丝右旋糖酐纤维（electrospun dextran fibers）。与纤维（如BSA、溶菌酶）相联合的药剂直接电纺丝入纤维内。所述纤维也可能包括与右旋糖酐静电纺纺丝的其它聚合物。

Jiang等人在Journal of Biomedical Materials Research Part B: Applied Biomaterials, p. 50-57 (2006)中公开了电纺丝纤维，其是以聚己内酯（poly(c-caprolactone)）作为外壳和以右旋糖酐作为核心的组合物。这些纤维提供药剂（牛血清白蛋白，BSA）的缓慢释放，所述药剂也被电纺丝入纤维内。

Smith等人的美国专利第6,753,454号公开了电纺丝纤维，其包含亲水性聚合物和至少弱疏水性聚合物的基本上均匀的混合物，其可用于形成绷带。所述绷带可包含活性剂（如右旋糖酐）。然而，所公开的纤维不容易溶解于液体中。

MacPhee等人的美国专利第6,762,336号教导了止血多层绷带，其包含两纤维蛋白原层之间的凝血酶层。所述绷带还可以含有其它可吸收的材料，如乙醇酸或基于乳酸的聚合物或共聚物。无论是电纺丝纤维还是右旋糖酐纤维均未被教导用作绷带的组成成分。

Smith等人的美国专利第6,821,479号教导了一种在干燥的保护性基质中保存生物材料的方法，所述基质包括纤维如电纺丝纤维。所述纤维的一种成分可为右旋糖酐，但是并未描述均相右旋糖酐纤维。

Cochrum等人的美国专利第7,101,862号教导了用于控制出血的止血组合物和方法。所述组合物包括含纤维素制品（如纱布），其上共价或离子交联多糖。所述交联多糖可以是右旋糖酐。然而，所述组合物不是电纺丝，并且所述组合物中不包含外源性凝血剂。

Wnek等人的美国专利公开第2004/0018226号，公开了通过电加工技术如电纺丝生产的纤维。所述纤维内部包括内罩，用于包含不与纤维混溶的物质。右旋糖酐未被教导作为纤维成分。

Fisher等人的美国专利公开第2007/0160653号，教导了一种止血织物，其包含止血因子（如凝血酶、纤维蛋白原），但所述纤维是由电纺丝玻璃加第二纤维（如丝、陶瓷、竹、麻、人造丝等）形成的。

Carpenter等人的美国专利公开第2008/0020015号，教导了伤口敷料，其包含各种可生物降解聚合物和具有分散于所述聚合物内的异源或自体前体细胞（例如干细胞）的水凝胶。所述聚合物可通过电纺丝制备，并且一种聚合物组分可以是右旋糖酐。然而，所述聚合物不能与液体一接触即溶解，由于它们必须为随着时间推移递送细胞而提供脚手架，尽管所述聚合物最终原位生物降解。

Li等人的美国专利公开第2008/0265469号，描述了电纺丝纳米纤维，其可包含右旋糖酐。然而，未描述所述纳米纤维易溶于液体中。

Eskridge等人的美国专利公开第2009/0053288号，教导了一种编织止血织物，其包含约65％的玻璃纤维线和约35％的竹纤维线。 所述玻璃纤维组分可以电纺丝，并且止血因子如凝血酶可与织物相联合，例如通过将材料浸泡在凝血酶溶液中。该文献表明右旋糖酐可作为吸湿剂加入。

需要持续提供改进的方法和手段来启动伤口中的血液凝固，以阻止或至少减缓失血。特别是，需要持续改进用容易的方式易于促使严重伤口中止血的能力，特别是在由医务人员实施的立即处理受限或不能的情况下。

Bowlin等人的美国专利公开第2011/0150973号，公开了一种向目标位置递送一种或多种目标药剂的方法。所述方法包括对目标位置敷用或递送止血产品。所述止血产品包括与液体接触而溶解的电纺丝右旋糖酐纤维。所述止血产品也包括与所述电纺丝右旋糖酐纤维相联合的一种或多种目标药剂。敷用或递送导致在目标位置所述电纺丝右旋糖酐纤维溶解于液体中，从而释放一种或多种目标药剂到液体中。

发明内容

本发明的一个实施方案涉及一种包括多层止血层的止血产品。每一止血层具有右旋糖酐支持物（support）和至少一种止血剂，所述止血剂选自由凝血酶和纤维蛋白原组成的组。所述止血层以堆叠构造安排。

本发明的另一个实施方案涉及一种制备包括多层止血层的止血产品的方法。形成右旋糖酐支持物。分配至少一种止血剂在所述右旋糖酐支持物上。所述至少一种止血剂选自由凝血酶和纤维蛋白原组成的组。所述止血层以堆叠构造安排。

附图说明

附图被包括以提供进一步理解实施方案，其被并入并且构成本说明书的一部分。附图说明实施方案，并连同说明书一起用于解释实施方案的原理。由于通过参考下面的详细描述能够更好地理解它们，其它实施方案和实施方案的许多预期优点将很容易理解。附图中的元件不一定按相对于彼此的比例绘制。相似的标号表示对应的相似部分。

图1. 电纺丝装置的示意图。电纺丝系统的关键要素包括高压电源、用于聚合物的原料储存器和接地心轴（grounded mandrel）。该系统采用圆筒形靶心轴；然而，电纺丝工艺可适于产生更复杂的形状。单个和/或多个聚合物可以独立地或同时地从一个或多个原料储存器输送到电场。可使用按时间顺序从独立的源电纺丝不同且独特的聚合物而生产叠层结构。

图2A和B. A，空气刷基右旋糖酐工艺示意图；B，由电气雾工艺生产的右旋糖酐纤维。描绘的材料量是可能足够约2个止血产品的量。注意材料的放样。使用电场将右旋糖酐靶向至心轴。

图3. 电纺丝右旋糖酐纤维的扫描电子显微照片。单个纤维的标称平均截面直径为1微米，提供了大量的表面积。

图4A-E. 由电纺丝右旋糖酐纤维形成示例性止血产品的示意图。A，用非透性支持材料作为背衬（backing）的止血产品；B，带有网状支持材料的止血产品；C，带有非透性背衬和将电纺丝纤维维持在背衬上的网状支持材料的止血产品；D，用于将治疗剂递送至深层伤口的止血产品；E，用于将治疗剂递送至深层伤口的止血产品的可选实施方案。

图5A和B. 暴露于鲑鱼纤维蛋白原/凝血酶止血产品的动物体内细胞因子（cytokine）水平的变化。(A) IL-1β、IL-6、TNF-α、 IFN-γ、 IL-4 和 IL-10的水平被示为初次手术植入血管口时确定的血液中细胞因子水平与暴露后的峰值水平的对数比值。在前炎症反应（IL-1β、 IL-6、 TNF-α、 IFN-γ）和体液反应（IL-4 和 IL-10）中均见变化。(B)个体动物内细胞因子的变化显示初次暴露（第一箭头）和随后的静脉输注蛋白（第二箭头）诱导出反应，该反应能够在下一次取血的样品中检测到。

图6A-F. 通过蛋白质印迹法定性评估猪响应鲑鱼蛋白产生的免疫球蛋白。(A) 鲑鱼(Sal)、人(Hu)和猪(Sw)的纤维蛋白原制剂及用源于两种动物（B 和 C）血清的相应蛋白质印迹的PAGE。这些组显示了来自暴露前和最终无痛处死后的血液的血清情况。通过特异性HRP抗猪IgG第二抗体并按照检测结合到凝胶样品中的蛋白质可视化出现在血清中的IgG同种型。箭头指示猪蛋白泳道中IgG重链和轻链成分的位置，也能被第二抗体识别。左侧（kDal×10^-3）示出了分子量。(D) 鲑鱼(Sal)、人(Hu)和猪(Sw)的凝血酶制剂及用源于（C 和 D）示出的相同动物血清的相应蛋白质印迹的PAGE。在这些动物中，在E中识别到凝血酶，但在F（箭头）的鲑鱼蛋白泳道中有微弱的反应。检测系统中的相机检测到膜上的重链猪凝血酶蛋白为F中的白色条带。

图7A-D. 经由皮肤贴片程序暴露于鲑鱼凝血酶/纤维蛋白原止血产品的动物体内抗体发生的时间过程。使用抗IgG试剂进行ELISA。下列抗原用作ELISA中的靶标：（A）鲑鱼纤维蛋白原、（B）鲑鱼凝血酶、（C）人纤维蛋白原和（D）人凝血酶。在随后的样品组A、B、C观察到的吸光度增加发生于静脉输注鲑鱼蛋白之后。每个曲线代表来自不同动物的数据。

图8A-D. 经由腹部贴片程序暴露于鲑鱼凝血酶/纤维蛋白原止血产品的动物体内抗体发生的时间过程。使用抗IgG试剂进行ELISA。下列抗原用作ELISA中的靶标：（A）鲑鱼纤维蛋白原、（B）鲑鱼凝血酶、（C）人纤维蛋白原和（D）人凝血酶。

图9A-D. 全厚度伤后的皮肤愈合进程。从对照（A）和鲑鱼止血产品处理的（B）伤第7天取样的图像，显示纤维坏死性凝结物填充了伤口缺损（*）并且随着初始凝血后的伤口愈合进程两个案例中都有向伤口中心的上皮细胞投射。（H&E 染色， 标尺=100 um）。从对照（C）和鲑鱼止血产品处理的（D）伤第28天的取样显示通过增生性和角化过的表皮产生竞争性再上皮化。（H&E 染色， 标尺=100 um）。

图10. 凝血级联的示意图。

具体实施方式

本发明的一个实施方案涉及由多种片材止血材料形成止血产品的方法。作为形成止血产品的初始步骤，准备止血材料的片材。

尽管由多层止血材料片材形成所述止血产品增强所述止血产品提供止血功能，但是这种结构表现出对将所述片材维持在相对彼此所需的位置的挑战。

当止血产品被应用到损伤位点，用于制造止血产品的材料溶解从而释放所述材料到损伤位点，并提供止血效果。

在一个实施方案中，作用位点是创面床（wound bed），并且由该止血产品递送的活性剂是参与凝血级联的因子或药剂，如凝血酶和纤维蛋白原。给伤口施用该止血产品导致右旋糖酐纤维在创面床内的血液中溶解，这又导致活性剂释放或递送到或进入该位点。

与止血产品相联合的凝血酶和纤维蛋白原的形式是当它们接触到血液时具有生物活性。因此，在溶解时，凝血酶作用于纤维蛋白原，将其转化为纤维蛋白，然后在伤口内形成凝血块，并因此阻止血液流出。

在本发明的一些实施方案中，仅使用纺右旋糖酐纤维，因此凝血块形成之后，就没有必要干扰凝血块以去除止血产品成分，因为在该位点没有留下什么。在其它实施方案中，如下所述，止血产品可包括其它材料，如支持或背衬材料，最初的快速施用止血产品后，可能随后除去以进一步通过常规方法处理伤口。

电纺丝是一种非机械处理策略，并且可以扩展以适应大容量需求，满足商业化处理的需要。图1提供了用于电纺丝的一种类型的设置示意图。在该工艺中，用电流注入聚合物溶液或熔体以建立电荷不平衡。然后，将带电的溶液置于靠近接地靶（在图1中，接地心轴）。

在临界电压处，电荷不平衡开始克服聚合物源的表面张力，形成带电射流。在电场中，射流被导向接地靶并且载体溶剂蒸发。如图1所示，取决于反应条件和在此工艺中所用的聚合物，可利用电纺丝生产材料的精细气雾或纤维状材料的连续的非织造垫。

对于许多聚合物，电纺丝过程的性质本质上提供了对所得纤维直径的高度控制。通过调节存在于所述电纺丝溶液中聚合物的起始浓度，可以简单地选择性实现微米到纳米级的直径。通过控制相对于所述源溶液的接地靶的运动，可以将纤丝沉积成随机矩阵或沉积成沿一限定轴线定向排列的阵列。

图2A示出了电纺丝装置的第二示意图。电纺丝系统的关键要素包括高压电源、用于聚合物的原料储存器和接地靶心轴。描绘的系统采用圆筒形靶心轴；然而，电纺丝工艺可适于产生更复杂的形状。

单个和/或多个聚合物可以独立地或同时地从一个或多个原料储存器输送到电场。此外，可使用按时间顺序从独立的源电纺丝不同且独特的聚合物而生产叠层结构。图2B示出了电纺丝约10克溶解于去离子水中的右旋糖酐到圆形心轴靶的结果，如在下面的实施例1中描述的。图3示出了单根纤维的平均横截面直径约1微米的电纺丝右旋糖酐纤维的扫描电子显微照片。

本领域的技术人员将认识到，电纺丝不是生产右旋糖酐纤维的唯一途径。可以通过雾化（aerosolization）的其它方法生产这样的纤维。然而，电场有助于纤维的有效收集并且电纺丝可能产生更均匀的纤维。也可用于纺右旋糖酐纤维的其它技术，包括那些在Luo等人的美国专利第7,067,444号，Bogue等人的美国专利第6,116,880号和Fuisz等人的美国专利第5,447,423号中描述的那些技术，其各自的全部内容均通过引用并入本文。

尤其是，所谓的“棉花糖机（cotton-candy machines）”（带或不带施加的静电力）可适合于制造本发明的右旋糖酐纤维使用。在下面的实施例2中，提供了制备本发明右旋糖酐纤维的方法的更详细描述。

其它方法包括在两个板或其它平坦表面之间压缩右旋糖酐溶液，并将两个板或表面彼此拉开，通常重复进行。在两个表面间形成右旋糖酐纤维。

在一些实施方案中，使用其它物质而不是右旋糖酐形成纤维用于本发明的止血产品中，尤其是（但不限于）使用棉花糖机的时候。这类物质的例子包括但不限于糖类，如葡萄糖、蔗糖等。

用于生产本发明电纺丝纤维的可商购的右旋糖酐，可通过某些乳酸菌细胞表面的酶催化而从蔗糖合成，最有名的乳酸菌是肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）和变形链球菌（Streptococcus mutans）。右旋糖酐是一种复杂的、支链葡聚糖（glucan）（由许多D-葡萄糖分子组成的多糖），由各种长度（例如从10至200千道尔顿）的链组成。直链由葡萄糖分子之间的α-1,6糖苷键组成，而支链由α-1,4糖苷键（并在某些情况下还有α-1,2和α-1,3糖苷键）开始。

可商购得到的右旋糖酐在宽分子量范围内，例如从约10千道尔顿（kDa）至约200kDa。商业制剂是不同分子量的右旋糖酐的混合物，通常在较窄的重量范围内，并且可以按照例如，“低”或“高”分子量的右旋糖酐提供。例如，“右旋糖酐40”具有40 kDa的平均分子量，“右旋糖酐75”具有75 kDa的平均分子量，等。

在本发明的实施中，用于电纺丝的右旋糖酐典型的分子量范围从约10至约200kDa，或从约25至约200kDa，或从约50至约200kDa，或从约75至200 kDa，并且通常为从约60至90 kDa，或从约100至约200kDa。

另外，本领域的技术人员将会理解，右旋糖酐制剂中右旋糖酐分子的中值大小（median size）也具有这样的效应：如果中值重量按特定量为高，可使用较少的右旋糖酐形成期望量的纤维。

一般而言，用于电纺丝右旋糖酐的条件如下：环境温度为从约60至约75°F，相对湿度为从约30％至约40％，且典型地至少约20％。所得到的纤维典型地在横截面直径为纳米或毫米的范围内，通常从约0.75微米至约1.25微米。

所述电纺丝纤维是“干燥的”，应避免暴露于潮湿，以防止过早溶解。然而，一些水与纤维相联合，并且纤维组合物可含有从约7至约8％的水，但是当通过X-射线照射灭菌纤维时，必须小于约5％。

本发明的止血产品通常由基本上均匀的电纺丝右旋糖酐形成。每个止血产品的右旋糖酐量可以广泛地变化，这取决于被制造的止血产品的尺寸，典型的止血产品配方是每个止血产品使用从约5-10克右旋糖酐（通常100,000-200,000 Mr）。

然而，该范围可以广泛地扩展，例如从低至约0.5克或更少（对于小止血产品）至高达每个止血产品100或更多克（对于大止血产品）。在本发明的一些实施方案中，使用较少量的右旋糖酐（例如，每个止血产品约0.1至约0.5克右旋糖酐）来将由止血产品递送的活性剂集中成较小体积是有用的。

更重要的是溶液中由其纺成纤维的右旋糖酐的浓度。通常，用于电纺丝的溶液右旋糖酐的浓度为每毫升（ml）溶剂从约0.1至约10克的范围内，或每毫升从约0.5至约5克，并且通常这样的溶液在浓度为每毫升约1克±约0.15毫克（mg）。优选的范围是每毫升要被纺丝的溶液从约0.9至约1.1克右旋糖酐。

本领域的技术人员将认识到，由于右旋糖酐制剂中分子量范围的变化，并且由于声称有特定分子量范围的商购制剂批间固有的变化，典型地需要测试每批右旋糖酐关于电纺丝的性能。这种测试在本领域技术人员的常识之内，并且通常涉及溶解于合适溶剂的一系列浓度的右旋糖酐的电纺丝试验，以确定哪一个浓度结果具有最期望的纤维特性，例如稳定性（例如对热、湿等），均匀性，横截面直径等。

本领域的技术人员将认识到，当尝试新批次的右旋糖酐时，成功的重要指标是非常明显的。纺丝溶液中右旋糖酐太少导致从针中“喷溅（spitting）”，然而右旋糖酐太多导致干液滴的生成，或根本难以纺丝。

同样，当湿度过低时，可发生类似的结果，即不能形成纤维并且在某些情况下不能有效地靶向于接地芯轴。可根据本领域技术人员所公知的方法评估这些特性，但不限于视觉观察，纤维强度和柔韧性的测试，通过电子显微镜观察，溶解性试验，对热和/或照射的抗性，颜色和褪色倾向，等。本领域的技术人员应理解，所有这些测试可在各种条件的热、湿度等情况下进行。也可使用动物实验评估配方。

本发明止血产品的面积（长度和宽度）可以广泛地变化，并且可以通过调节纺丝参数进行调整。此外，纺丝后右旋糖酐纤维垫可以切割成期望的尺寸。通常，所述止血产品的长度和/或宽度从大约0.5厘米或更少至约30厘米或更多，但是也可以考虑更大或更小的尺寸。

取决于止血产品的预期用途，止血产品的高度或厚度可以同样有很大的不同。在某些实施方案中，止血产品具有约1毫米至约5厘米之间的厚度。

止血产品的厚度（与体积相关）可能影响与液体接触时右旋糖酐的溶解速率。例如，在纤维面层可比较的条件下，薄的止血产品（例如约2毫米）将会比较厚的止血产品溶解得更快。

在大多数实施方案中，右旋糖酐纤维的溶解是极其迅速的，例如暴露于液体后，约5分钟或更少，或约4分钟或更少，或约3分钟或更少，或约2分钟或更少，或约1分钟或更少，例如，止血产品典型地只需少许秒钟（例如从约1至约20秒）溶解。

这样迅速的溶解可在本文中称作“瞬时”或“立即”溶解。可通过压缩电纺丝右旋糖酐垫调节溶解速率，较高水平的压缩负影响所述速率，即压缩程度越大，溶解速率越慢。迅速的溶解速率是有优势的，特别是当向作用位点（如伤口）递送生物活性剂（如止血剂）的时候。当部署止血产品时，载体右旋糖酐纤维的迅速溶解提供向伤口极其迅速的止血剂递送。

本领域的技术人员将认识到，过多液体溶剂的存在，可能溶解右旋糖酐。然而，用于电纺丝右旋糖酐的较好结果的实现通常是溶剂为水，特别是去离子水或蒸馏水或去离子、蒸馏水（ddH ₂ O）或其他形式相对较纯的水。另外，存在极少与水的使用相关的环境影响。

已经发现，一般来说，溶剂中应该避免高浓度的盐。然而，经常使用盐促进一些电纺丝聚合物的纺丝，这是不适合于右旋糖酐。应将纺丝溶液中盐的浓度保持在最低限度，以成功地形成右旋糖酐纤维。

与所述止血产品的右旋糖酐纤维相联合的一种或多种活性剂可以是任何活性剂，所述活性剂对于递送到将使用或应用止血产品的位点是可取的或有优势的。在本发明的一个实施方案中，所述止血产品是止血产品并被用于递送活性剂，例如，给伤口。

这种伤口包括身体或组织完整性的伤口或破裂，其作为创伤（例如意外创伤，由冲突如枪击伤、刀伤等造成的创伤）的结果而发生，还包括故意产生的伤口，如手术切口、身体穿伤，等。

通常，所述活性剂是在伤口位点具有有益或治疗效果的生物活性剂。在一个实施方案中，所述位点是出血伤口，需要形成血凝块以阻止或减缓出血。在本实施例中，目标治疗性物质可以包括，例如，凝血酶和纤维蛋白原，尽管在促进止血中具有活性作用的其它药剂，包括但不限于capscian，也可包括在内。

此外，电纺丝或非电纺丝胶原蛋白，吸收水分的药剂，当置于与例如血液接触时倾向于吸收液体的各种干盐，工程凝血酶或凝血酶仿制品，工程纤维蛋白原，引起血管痉挛以帮助收缩和封住出血血管的药剂（例如ADP、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine ，5-HT）和凝血恶烷（thromboxane ，TXA-2））等，也可包括在内。

此外，可将凝血级联的其它成分添加到止血产品。这种其它成分的实例包括那些通常只表达于受损细胞表面上的组织因子和启动正常凝血级联的组织因子；增强血小板聚集和促进血管收缩的血清素；和用来代替血友病中缺失的凝血级联成分的其它药剂，例如，因子7（激活所谓的外部外源性凝血级联）和血小板粗提取物。这些药物本质上是通过发起反应网络远下游的级联而“跳跃开启”凝血，如图10所示。在图10中，各种因子（以及它们的替代术语和/或特性和/或活性）如下：

· 因子VII（Proconvertin，前转变素）：丝氨酸蛋白酶，在肝脏内依赖维生素K合成；

· 因子VIII：糖蛋白结合的vWF，由内皮细胞和肝脏产生；

· 因子IX（Christmas-Eve Factor，克雷司马斯因子）：丝氨酸蛋白酶；

· 因子X（Stuart-Prowler因子，凝血因子X）：丝氨酸内肽酶，将凝血酶原转变为凝血酶；和

· 因子XI（血浆促凝血酶原激酶前体）：丝氨酸蛋白酶，血浆蛋白；

· 因子XII（Hageman factor，哈格曼因子）：丝氨酸蛋白酶，血浆蛋白结合胶原蛋白；

· 因子XIII（纤维蛋白稳定酶）：稳定纤维蛋白聚合体，血浆蛋白，也存在于血小板和单核细胞系中。

在图10中，斜体通路表示抑制，并且示出了凝血酶在激活凝血和失活凝血中的核心作用，其中：

· VI=使凝血酶原向凝血酶转换的Xa因子的辅因子；

· APC=活性蛋白C，细胞外信号分子，通过蛋白水解事件抑制FVI（相当于FVa，使凝血酶原向凝血酶转换的XA因子的辅因子）和FVIIIa；和

· TAFI=凝血酶激活的纤维蛋白溶解抑制剂，凝血块消散的抑制剂。

此外，也可包括其作用是促进伤口愈合的最后阶段的活性剂，例如，以促进细胞迁移和重塑。胶原蛋白（collagen）的引入是这样的活性剂的例子。

在实施本发明中，可使用一个或多个任意的这些活性剂。治疗剂必须是适于干燥的，并在干燥状态下与止血产品的其它成分相联合，因为液体可能负面影响止血产品中使用的至少一种成分。例如，活性剂可以是失水或冻干的，或通过一些其它手段去除去水的。

一般，当它们与电纺丝右旋糖酐纤维相联合时，存在于所述物质中的水量低于约5％，并且优选低于约2％。这些物质如在血液中再水化时保持全部或部分活性。与本发明的止血产品相联合的治疗性物质在与液体接触时，一般保持它们干燥或失水前的至少约25%、或约50%、或甚至约75至100%的活性，与所述物质的标准制剂相比，使用本领域技术人员已知的标准试验检测。

在一些实施方案中，将凝血酶或纤维蛋白原或二者，与止血产品相联合。在一些实施方案中，凝血酶和纤维蛋白原是鲑鱼凝血酶和纤维蛋白原。使用鲑鱼作为这些材料来源的优点包括但不限于不必考虑病原体（例如病毒）的传播，当使用人类或其他哺乳动物来源的凝血酶或纤维蛋白原（例如牛的）时，这种传播可能发生。

当用于猪模型（pig model）中，鲑鱼凝血酶和纤维蛋白原是高度有效的并且没有有害的副作用，猪模型是公认的动物模型，被认为对人类有预示性结果。

添加到止血产品的纤维蛋白原的量通常是在约10毫克至约3克的范围内。在某些实施方案中，每个止血产品中纤维蛋白原的量在约20毫克至约1克之间。

添加到每个止血产品的凝血酶的量通常是在约10至10000个NIH单位之间。在某些实施方案中，每个止血产品中凝血酶的量在约20至6000个NIH单位之间。

在一些实施方案中，可单独电纺丝治疗剂本身。例如，将治疗剂溶解于溶液并从溶液纺丝。在一些实施方案中，可将治疗剂电纺丝成纤维。在其它实施方案中，可将活性剂电纺丝成其他形式，如（droplet）、珠子（bead）等。

在一些实施中，可将活性剂如凝血酶与蔗糖一起电喷雾形成蔗糖微滴，这趋于稳定凝血酶，并且也能“捕获”其它目标物质递送至止血产品。

对于凝血酶和纤维蛋白原，在大多数实施方案中，这些（或其它）活性剂是精细分散的干燥微粒或颗粒形式，如作为细粉（fine powder）或粉尘（dust），由于电纺丝可能倾向于降低它们的活性。换句话说，活性剂本身是不能电纺丝的。

以细粉末形式供应物质提供了当这些物质与流体接触时利于溶解的大接触表面积。一般，这样的颗粒将具有约1至10,000微米的平均直径，并且，在某些实施方案中，在约10至1000微米之间。

可通过几种手段中的任一个形成这样的干固体颗粒，包括但不限于研磨、粉碎、压碎等。然而，本领域的技术人员将认识到，在止血产品中也可包含其它形式的这些活性剂，例如：薄片、薄膜、片材、线等。此外，在一些实施方案中，当与赋形剂（excipient）或载体相联合时，凝血酶和纤维蛋白原是电纺丝微滴的形式。

可通过本领域技术人员已知的许多合适的技术中任一个来实现目标物质与赋形剂或载体的联合，并将部分地取决于所述物质的确切形式和在手边的手段。例如，对于粉碎的微粒状凝血酶和纤维蛋白原，可通过洒、振摇、鼓风等将所述药剂联合到赋形剂或载体层上。

取决于纤维垫的密度，所述目标物质可能相对均匀地分散于整个纤维的编织垫或者可能主要局限于纤维垫的最顶端部分。如果没有背衬的存在，后一实施方案是优选的，以防止目标微粒物质透过垫子掉落或落出垫子。

可以调整（例如增加）纤维垫的密度，例如，通过调整其厚度和/或通过在压力下压缩该垫，使纤维更靠近在一起。也存在用于联合的其它技术，例如将干燥但可溶于液体的材料的片材或料条置于载体层上或载体层间，作为不连续层或以不连续层的形式电纺丝添加的物质，等，并且可使用任何这样的技术。

用于装配本发明止血产品的技术可以是手工或机械化实施的，或可用手工操作和机械化的组合。特别对于凝血酶，5000 个NIH单位的凝血酶是相对少量的粉末。因此，可加入惰性载体（inert carrier）或填充剂（bulking agent）如葡萄糖，以保证活性剂在止血产品中更完全的分散。

可根据许多不同的安排来进行目标物质与赋形剂的联合。例如，可形成赋形剂的第一层，并可将一个或多个所述物质与第一层联合。然后可在目标物质上面形成另一个赋形剂的第二层。并且可将相同或其它目标物质与第二层联合，依此类推。

可加上赋形剂的最后或最外层，以防止目标物质被从下面的层中逐出。本发明的止血产品使用的赋形剂层的数量可变化很大，从少至1-2到多达几打，或甚至几百个，取决于止血产品的所需特性。

典型地，止血产品将包含1-2层。在其它实施方案中，止血产品可包括2-20层之间。非常轻微量的湿度存在于准备好的止血产品中，可有助于将凝血酶和纤维蛋白原捕获和保持在止血产品表面。

在本发明的一些实施方案中，止血产品还包括组合在其中的一种或多种支持结构或支持材料。例如，可将背衬组合入止血产品。

可从各种电纺丝材料，如聚乙醇酸（polyglycolic acid ，PGA）、聚乳酸（polylactic acid ，PLA）以及它们的共聚物（PLGAs）形成支持材料；还有带电尼龙等。在一个实施方案中，所述支持材料是压缩的电纺丝右旋糖酐纤维。用“压缩的电纺丝右旋糖酐纤维”我们指在压力下电纺丝右旋糖酐纤维被压在一起。

例如，在两个板（例如一副）之间的压力下，进行电纺丝右旋糖酐纤维的压缩，并且可压缩约3英寸高度（厚度）的纤维垫至约0.5英寸高度或甚至更少（例如约0.1至约0.4英寸）的片材。在一些实施方案中，将电纺丝右旋糖酐纤维直接电纺丝到先前的电纺丝支持材料上，然而在其它实施方案中，分别电纺丝后，将支持材料和电纺丝右旋糖酐纤维例如通过将各自的一层或多层连接而联合起来。

在其它实施方案中，支持材料不是电纺丝材料，而是一些其它（通常重量轻）的材料。这样材料的实例包括但不限于纱布，各种塑料，水凝胶和其它促进吸收血液并因此形成血凝块的吸收性材料，等。

支持材料可以是或可以不是可溶于液体中的，或可以是缓慢溶解于液体中的，并且可以是或可以不是对液体透过性的。缓慢溶解的材料包括那些由其形成可吸收或溶解（可生物降解的）缝线（stitche）或缝线（suture）的材料，包括PGA、聚乳酸和己内酯的聚合物。

在某些实施方案中，支持材料可相对快速溶解，如小于约1小时溶解。在其它实施方案中，支持材料可从约10天至8周之内溶解。在任一情况下，支持材料提供不需移除止血产品和不存在破坏凝血块风险的优点。

然而，在任何情况下，支持材料不应干扰赋形剂的立即溶解和递送与其相联合的活性剂到溶解赋形剂的液体中。因此，支持材料可能仅在止血产品的一侧，以便当该止血产品是（例如）止血产品并施加于伤口时，止血产品的取向便于赋形剂而不是支持材料与创面床中的血液接触，即当放置在伤口上时，支持材料是止血产品的“顶部”或最外表面。

例如，在图4A中说明了这个实施方案，其中电纺丝右旋糖酐纤维10被示为沉积在非孔性、液体不可渗透性的支持材料20上。当施加到伤口，赋形剂10将朝下面向伤口，并且非孔性的支持材料20将面向远离伤口。

这种安排具有一个优势，通过支持材料可向伤口施加压力，利于中断出血。作为选择，支持材料可包含能允许液体达到止血产品中赋形剂的孔、开口或空间，即使当支持材料存在时。例如，支持材料可以是网（net）或网状（web）材料，其不能溶解（或缓慢溶解）但允许液体自由地达到赋形剂和相联合的目标物质。

在图4B中示意性地说明了这个实施方案，其中显示电纺丝右旋糖酐纤维10沉积在网40上（或可能下面，或上面和下面，或贯穿织物），其中网40部分地以虚影（phantom）形式显示，虚影部分被电纺丝右旋糖酐纤维10覆盖。又在其它实施方案中，在所述装置中可存在“背衬”或“顶部”支持材料以及第二网状支持材料。

在图4C中示意性地说明了这个实施方案，其中显示电纺丝右旋糖酐纤维10沉积在非孔性支持材料50上并用网状材料60覆盖，即电纺丝右旋糖酐纤维10被“夹入”非孔性支持材料50和网状材料60之间。

本领域的技术人员将能够预想到许多赋形剂层和支持材料的其他组合和形状，其将按照特别的设定提供优势。例如，可将赋形剂卷绕或缠绕延长的支持物如细丝或细绳，或可将赋形剂绕着一个具有空洞形状的特定外形卷绕，在所述空洞中可能放置止血产品，所述空度如弹孔等。

在另一个实施方案中，每个片材主要由右旋糖酐和凝血酶制成。每层可能具有约0.001至约0.50英寸的厚度。

取决于所述止血产品预期用于的伤口类型，可能将2至20层片层以堆叠关系放置形成所述止血产品。

有可能制造片材以将纤维蛋白原也包括于所述片材的至少一部分中，在某些实施方案中，以粉末提供纤维蛋白原，将其分散到所述片材的至少一部分的表面上。

为增强从所述止血产品获得最优结果的能力，可按照能使所述层保持在基本上彼此相互固定的位置的方式，将制造所述止血产品中使用的各层接合在一起。

其后，将所述片材切割成需要的形状和大小，然后彼此堆叠起来。一旦需要的数量被堆叠起来，所述片材融合在一起，从而防止彼此间运动。在本发明的一个方面，切割导致片材融合在一起。另一种适合用于融合片层在一起的技术是超声波焊接。所述超声波焊接避免了由粘合剂存在造成的并发症。

可用于将片层融合在彼此相互固定位置的其它技术的非限制性的例子是缝合、卷边、热密封和施用医用级粘合剂。无论利用什么技术将片层融合在一起，所述技术应该保持止血产品基本上溶解的能力，使得患者不会遭受由这类不溶解的成分造成的并发症，并使得当所述止血产品用于不是患者皮肤上表面时，患者不会遭受附加手术程序以移除不溶解的成分。

刺透伤位点的问题症结在于受伤组织相对难以接近。例如，对于子弹伤（例如在腿或股中），不会发生如在表面那样多的出血，但是比较深入组织中，其内由子弹形成空洞，空洞难以通过简单的覆盖于外部创伤处（如子弹、刀、榴散弹、剑、刺刀等的进入点，或其它造成的创伤）的止血产品处理。

本发明的这方面解决了与刺透伤相关的问题，所述刺透伤导致深处组织内的大量出血，本发明利用右旋糖酐止血产品高溶解性的特性。这种类型创伤中的复杂因素涉及将高溶解性止血材料递送到这种位点的能力。

在伤口的进入点可能有出血和其它流动性事件，而且对该表面位点施用止血产品可能导致止血产品在表面完全溶解，没有递送活性物质到伤口空洞内根本的出血源。本发明通过提供递送活性剂深入伤口而解决该事件。现有的止血产品不能充分解决这一问题。

本发明通过提供其形状和应用能适于用于这种伤口的止血产品而解决该问题。例如， 提供延伸的圆柱状“雪茄形”止血产品，其含有凝血酶和纤维蛋白原，并可含有支持材料。

可将止血产品储存在保护性遮盖物、包装或管子内。该管子保护止血产品脱离周围环境。止血产品和管子均优选灭菌的。可将这些部分进一步附于（例如）纸、聚合物、水泡包的外包装内，类似于用于可任意使用的注射器那样，以防止丧失灭菌状态。

使用时，撕开外包装获得灭菌管包含的止血产品。在一些实施方案中，移除管子的一端并置于创伤的最外面易接近部分。管子还可包括“活塞”或类似装置，其使得使用者将止血产品排出管子并进入伤口，结果是“注射”止血产品进入伤口。

可使用诸如那些用于叶鞘递送（vaginal delivery）例如棉球（即“圆筒内的圆筒”）的装置，或者可使用注射器样装置。因此止血产品沿着伤口轨迹被深入地引入组织内，并且止血产品中的治疗剂被递送到最需要它们的地方，即伤口内部。

在其它实施方案中，本质上不包括活塞，但是管子的风格是两端均能开口的，并且可通过在管子的相反开口端施加压力而将止血产品从一端推入伤口内，可以使用任何适合至少部分地进入管子的物体施加压力，充分地将止血产品推出管子进入伤口内。这类物体的实例包括手指和棍棒。

这种物体可被包括于本发明的止血产品中。本领域的技术人员将认识到，由于一些配置相对高的柔韧性，所述止血产品的本实施方案可在止血产品四周或内部包括支持材料（例如生物相容性网、杆等，其将通过生物降解而分解），使得止血产品深入伤口时，更加坚固并更少柔韧性。

此外，止血产品的最外端，即（例如用活塞）向其施加压力以将止血产品排出管子并进入伤口的那端，可用支持材料加强，以便用于推动止血产品的活塞或其他物体能够传递足够的力，以将止血产品从管子移出。

在图4D中，提供了本发明的该实施方案的一个示例性示意图，其中止血产品100图示为封装在管子200内，止血产品100包括纺丝右旋糖酐纤维110和（可选的）支持材料120，并具有第一端130和第二端140。

止血产品100被封装在管子200内，但为了清楚起见，并不以虚影的形式显示。管子200有开口210和 220，使用前两个开口均可盖住（未示出盖子）或均可开着，尤其是如果整个器械包裹于灭菌包装400。使用前，移除或打破灭菌包装400，以取出所述器械。为了使用所述器械，必须打开开口210和 220。

为了将止血产品100递送到刺透伤，将物体如活塞300插入管子的开口210端。当活塞300接触到装置末端130，向止血产品100施加压力，止血产品100最终经由开口220（以由箭头指示的方向）被推出管子200，并进入刺透伤（未示出）。在图4E中示出了这种止血产品的第二示意图。

在该示意图中，不包括支持材料，并且与治疗剂相联合的干燥、灭菌的止血产品材料（例如右旋糖酐纤维）被定位于或安置于小、封装的圆筒内，所述圆筒的一端有盖子，另一端有活塞。使用时，丢弃盖子，将圆筒的开口端置于伤口的裂口上并可插入伤口，并且压迫活塞，转移或注射止血产品材料深入伤口。

可使用类似设计递送止血产品到孔或通道，如鼻通道、耳管、阴道、肛门，进入血管，等。在这种应用中使用的部件将被形成为按次序约1至约6英寸长且从约¼英寸至1英寸直径的形状，即止血产品的尺寸将适合于插穿外部开口并伸入孔或伤口空洞内。

本发明意图包括在此描述的载体层和支持材料的所有这类安排、形状和实施方案。

使用前可灭菌所述止血产品，通常通过使用电磁辐射，例如，X-射线、伽马射线、紫外线等。如果所述止血产品包含凝血酶，可能需要降低止血产品（例如绷带或纱布）的水分含量至小于约5%，以在灭菌期间保护凝血酶活性。

可通过干燥制造的止血产品，例如在真空下，或者通过使用从开始就降低水分含量的制造方法，实现水分含量的降低。典型地，以约5至25千戈瑞（kGray）之间的剂量使用X-射线灭菌所述止血产品。任何不破坏载体或与纤维相联合物质的活性的方法均可用于灭菌本发明的止血产品。

当止血产品是绷带时，与所述止血产品的纤维联合的目标物质可包括凝血酶和纤维蛋白原，并且所述止血产品可用于阻止出血。然而，活性成分的范围可随着止血产品的具体应用而变化。

例如，仅包含凝血酶的止血产品可用于小伤或与其它干预组合使用。此外，其它治疗性有益物质也可与所述止血产品相联合，包括但不限于：抗生素，减轻疼痛的药物，生长因子，骨形态发生蛋白，血管活性物质（如引起血管痉挛的物质），减少炎症的类固醇，以及它们的组合。

在其它实施方案中，本发明的装置不包含促进凝血的药剂。本领域的技术人员将认识到，本发明的装置高度适合于递送许多目标物质到需要的液体环境或位置。例如，该装置可被设计用于递送治疗或有益物质到身体的任何潮湿环境，只要有足够的液体来溶解电纺丝右旋糖酐纤维并释放活性物质，并且其中溶解右旋糖酐是不存在问题的。

经口服、经鼻、经气管、经肛门、经肺和经阴道递送的物质的实例包括但不限于，如抗微生物剂、镇痛剂、营养剂等。口服应用包括递送对牙齿治疗有用的物质，例如，抗生素、止痛药、美白剂等。可以与所述装置联合使用的治疗或有益物质的实例包括，抗生素、减轻疼痛的药物、生长因子、骨形态发生蛋白、血管活性物质（如引起血管痉挛的药物）、炎症减少性类固醇以及它们的组合。

然而，在一些实施方案中，没有体液存在（或者如果存在的体液不足），所施用的止血产品可以通过润湿“激活”，例如通过喷雾，或通过其它方式施加湿气源（例如，通过将止血产品暴露于潮湿材料如海绵），或将止血产品投于液体（例如水体），以引起与右旋糖酐纤维相联合的目标药剂的释放。

由于止血产品的面积小、重量轻的特性，它们对于装备的空间和重量非常宝贵的情形是理想的。这种情形的例子包括但不限于：军事行动，其中士兵的装备部件的重量和尺寸是重要问题；在急救包内；旅行期间的紧急护理（例如太空飞行、露营等）；等。

所述止血产品可用于不需要考虑空间和重量的各种情形和各种目的。例如，在传统的手术室内，本发明的止血产品提供对外科手术伤口施用凝血酶和纤维蛋白原的方便手段。

当需要包装并最终释放一种或多种干燥物质，但其中所述干燥物质是难以或不需要直接操作的，例如其中量极小或物质是有毒的情形，也可有利地利用本发明的止血产品。

在这种情况下，所述止血产品可充当用于容纳、存储和/或运输所述物质的“脚手架（scaffolding）”或载体，直到使用时，即直到与溶解所述电纺丝右旋糖酐纤维的液体接触并伴随释放所述物质到液体中时。这类物质可包括，例如，酶或它们的前体（例如酶原（pro-enzymes）或酶原（zymogens））和它们的底物，即激活蛋白或酶（例如蛋白酶、辅因子等）的物质，等等。

本发明还涉及抵抗所述止血产品利用的成分过早降解的稳定剂的使用。所述稳定剂还能提高所述止血产品的可用保质期。在某些实施方案中，所述稳定剂提供止血产品具有至少约2年的保质期。在其它实施方案中，所述止血产品表现出至少3年的保质期。

如本文所用，术语可用保质期的含义是，当不放大观察或放大观察如放大镜或显微镜观察时，所述止血产品不表现出明显的降解。

一种这种稳定​​剂适于与凝血酶结合使用。据认为，凝血酶稳定剂进入凝血酶的结构内，从而降低凝血酶分解的速率。可在将凝血酶与用于制造所述止血产品的其它成分混合之前，将至少一种凝血酶稳定剂与凝血酶混合。

在一个实施方案中，所述凝血酶稳定剂含有糖，如蔗糖。在某些实施方案中，蔗糖按凝血酶重量计以高达约5％的浓度用在凝血酶稳定剂中。在其它实施方案中，蔗糖浓度按凝血酶重量计为约1％。

在将凝血酶稳定剂与凝血酶混合之前，可将凝血酶稳定剂与右旋糖酐混合。据认为，右旋糖酐增强蔗糖进入凝血酶结构的能力。

在某些实施方案中，右旋糖酐按凝血酶重量计以高达约5％的浓度用于凝血酶稳定剂中。在其它实施方案中，右旋糖酐浓度按凝血酶重量计为约1％。

类似地，稳定剂与纤维蛋白原结合使用。在将纤维蛋白原施加到止血绷带其它成分中之前，将纤维蛋白原稳定剂与纤维蛋白原混合。据认为，纤维蛋白原稳定剂进入纤维蛋白原的结构内，从而降低纤维蛋白原分解的速率。

在一个实施方案中，所述纤维蛋白原稳定剂含有糖，如蔗糖。在某些实施方案中，蔗糖按纤维蛋白原重量计以高达约5％的浓度用在纤维蛋白原稳定剂中。在其它实施方案中，蔗糖的浓度按纤维蛋白原重量计在约2%至3%之间。又在其它实施方案中，蔗糖浓度按纤维蛋白原重量计为约1％。

在混合纤维蛋白原稳定剂和纤维蛋白原之前，可将纤维蛋白原稳定剂与增溶剂混合。据认为，增溶剂增强蔗糖进入纤维蛋白原结构的能力。在某些实施方案中，增溶剂是去垢剂。在其它实施方案中，增溶剂是普流尼克（Pluronic）。

在某些实施方案中，增溶剂按纤维蛋白原重量以高达约1％的浓度用在纤维蛋白原稳定剂中。在其它实施方案中，增溶剂的浓度按纤维蛋白原重量计为约0.002％的。

在本发明的另一实施方案中，纤维蛋白原和凝血酶被置于溶解膜基体表面和/或整合进入溶解膜基体内。以这种结构使用纤维蛋白原和凝血酶使得所述止血产品能被安置在身体的出血并因此需要止血的位置上。

可将溶解膜配置成当暴露于液体如血液时相对快速地溶解。在某些实施方案中，所述膜在少于约30秒内溶解。在其它实施方案中，所述膜在少于约5秒内溶解。一种合适的溶解膜的实例由Hughes Medical Corp出售。

另一种溶解膜的实例是溶解纸，其由溶解后不会对患者造成健康危害的材料制造而成。在某些实施方案中，所述溶解纸可由增强纤维蛋白原和凝血酶至少一种实现止血能力的材料制造而成。一种这种溶解纸的实例由Daymark Technologies出售。

在另一个实施方案中，在两层可溶解材料之间提供纤维蛋白原和凝血酶。一种此类合适的溶解膜的实例由Hughes Medical Corp出售，其如上所论述。

使用本发明的精神，可以以多种配置来提供纤维蛋白原及凝血酶。在一个这种配置中，以粉末形式提供纤维蛋白原和凝血酶的至少一个，将其保持在可溶解材料的层间。

所述可溶解材料应具有足够的结构完整性以将纤维蛋白原和凝血酶保持在其中，同时不能与纤维蛋白原和凝血酶相互作用。当暴露于液体如血液，所述可溶解材料也应相对快速地溶解，以便使纤维蛋白原和凝血酶从其释放出来。

如本文所用，“快速溶解”意指所述可溶解材料分解到充分的程度，使得纤维蛋白原和凝血酶的重要部分在不到约30秒内与血液接触。在其它实施方案中，所述可溶解材料在不到约10秒内分解。

所述可溶解材料也应便于容易地接合，以便两层可溶解材料可围绕其边缘连接在一起，以形成适于将纤维蛋白原和凝血酶保持在其中的围圈。

一种用于彼此连接可溶解材料的适合技术的实例是，向意欲接合在一起的材料件的至少一个施用少量液体。水引起可溶解材料的轻微降解，使得当将两层可溶解材料置于彼此相邻时，可溶解材料的层结合在一起。

可以由多种材料制造所述可溶解材料。所述可溶解材料不应对纤维蛋白原和凝血酶的稳定性造成负面影响。用于制造可溶解层的材料也应选择不对意欲使用所述产品的人或动物造成任何不良健康影响的材料。

在某些实施方案中，制造止血产品使用的材料可单独或者与纤维蛋白原或凝血酶结合而提高止血速率。可用于可溶解材料的成分的实例包括纤维素衍生材料。

在一种配置中，使用独立的装置来将所述止血产品维持在患者相关的期望位置。一种这类装置的实例是纱布，其缠绕在身体的出血部位。

在另一种配置中，所述止血产品的至少一部分覆盖有粘合剂。所述粘合剂可围绕止血产品边缘的至少一部分安置。在一个可替代的配置中，所述粘合剂覆盖止血产品内表面的实质部分。

在这种粘合剂可能与患者身体的出血部分接触的配置中，应该选择生物相容粘合剂，以减少由所述粘合剂与出血组织接触引起的潜在患者经历并发症。

在另一个实施方案中，可将纤维蛋白原和凝血酶置于外壳内和/或外壳表面，当所述外壳暴露于液体如血液而不溶解。这种构造可便于在其上形成血凝块，使得可从患者移除所述血凝块。

这种构造可类似于传统的茶叶袋，其中外壳可连接于细绳上，所述细绳与外壳组合使用以实现将所述产品布置在最接近需要止血的区域或者从患者移除所述产品和相联合的血液凝块中至少其一。

可由足够强的材料制造所述细绳，使得无论是当布置所述产品还是当从患者移除所述产品的时候，细绳都不会断裂。也应该由不太可能产生不良生物学相互作用的材料制造所述细绳。

可将外壳配置成在选定时间范围内排出纤维蛋白原或凝血酶。纤维蛋白原或凝血酶排出的速率可基于从患者排出的血液的速率和/或体积而调整。

在一种可选择的配置中，可将外壳配置成在一段延长时间范围内降解。当所述外壳降解，纤维蛋白原和凝血酶可从所述产品排出。

通过控制纤维蛋白原和凝血酶从产品排出的速率和/或外壳降解的速率，所述产品将具有相对大尺寸凝血块的形成降到最低，而可能利于形成较多具有较小尺寸的凝血块。相比如果引起形成相对大的凝血块，这种较小凝血块在体内更容易降解。

止血产品的这种结构可能特别适于与患者中的出血结合使用，其中出血在身体的洞内，这种身体的洞可从身体外部到达。可与所述止血产品结合使用的外科手术技术的实例包括窦和扁桃体手术。

在另一个实施方案中，纤维蛋白原和凝血酶被压制成片剂。除纤维蛋白原和凝血酶，所述片剂还可包含至少一种赋形剂。所述赋形剂不仅应利于纤维蛋白原和凝血酶结合在一起，也应促进片剂相对快速地溶解。

如本文所用，术语“相对快速地”意指当置于液体中所述片剂在少于约30秒内溶解。在其它配置中，片剂在少于约10秒内溶解。快速地溶解片剂使纤维蛋白原和凝血酶从片剂中快速地释放，使得这些材料可提供快速止血。

另外，在某些实施方案中，用于配制所述片剂的赋形剂不应降低纤维蛋白原和凝血酶的稳定性和/或溶解性。在某些实施方案中，用于配制所述片剂的赋形剂应增加纤维蛋白原和凝血酶的稳定性。

一个这种赋形剂的实例是山梨糖醇（sorbitol），其已形成小颗粒，例如通过使用喷雾干燥。在一个这种配置中，所述颗粒具有通常的球形并具有通常均匀的尺寸。

喷雾干燥的山梨糖醇颗粒不仅提供优势的流动特性，而且当使用直接压缩技术形成片剂时，表现出理想的压实特性。

此外，喷雾干燥的山梨糖醇颗粒为从片剂中释放纤维蛋白原和凝血酶提供良好的溶解性。一个这种喷雾干燥的山梨糖醇颗粒的实例由SORBITAB SD 250指定下的SPI药业出售。

另一种可在制造片剂中使用的赋形剂是甘露醇（mannitol），其已形成小颗粒，例如可使用喷雾干燥。可形成具有窄粒径分布的颗粒，其降低当形成片剂时成分隔离的潜在可能性。

甘露醇的一个优点是该材料是不吸湿的，使得所述甘露醇不对在片剂中使用的其它成分增加水分，并且不会有助于在形成片剂的工艺期间或片剂形成后吸收水分。从而所述甘露醇保护水敏感性的纤维蛋白原和凝血酶。

喷雾干燥的甘露醇颗粒不仅提供优势的流动特性，而且当使用直接压缩技术形成片剂时，表现出理想的压实特性。

喷雾干燥的甘露醇颗粒也促使所述片剂快速崩解或溶解，使得纤维蛋白原和凝血酶可快速地从片剂释放。一个这种喷雾干燥的甘露醇颗粒的实例是由MANNOGEM EZ指定的SPI药业出售的。

当制备片剂时可用作赋形剂的其它材料包括果糖和麦芽糖。类似于上面讨论的其它赋形剂，前述的赋形剂使用之前可形成为小颗粒，与在片剂中使用的其它成分混合。

另一种可与纤维蛋白原和凝血酶结合使用的赋形剂是由PHARMABURST 500指定下的SPI药业出售的速溶台（platform）。该材料提供片剂迅速溶解的能力，同时还提供期望的压实和脆性特性。

取决于在片剂中使用的赋形剂，当制备所述片剂时也可能需要润滑剂。所述润滑剂可提高片剂的物理性能。这类物理性能的例子包括脆度、易碎度和硬度。一个这种润滑剂的实例是硬脂富马酸钠（sodium stearyl fumarate），可从LUBRIPHARM指定下的SPI药业购得。

在制造片剂中使用的润滑剂的浓度可能取决于多种因素，如所使用的赋形剂的类型。在某些实施方案中，所述润滑剂的浓度按重量计高达约5％。在其它实施方案中，所述润滑剂的浓度按重量计为约2%至3％之间。又在其它实施方案中，所述润滑剂的浓度按重量计为约2.5％。

一旦成分混合在一起，将混合物进行压缩，从而导致成分形成片剂。在某些实施方案中，压缩力为至少5000磅/平方英寸（psi）。在其它实施方案中，压缩力为约10,000 psi至约12,000 psi之间。

当使用前述工艺制备片剂时，可能不必要包括右旋糖酐。即使右旋糖酐可能是不必要的，但可能与用于配制片剂的其它成分一起使用右旋糖酐。

在本发明的另一个实施方案中，纤维蛋白原和凝血酶可合并成快速溶解片剂，如通过使用由Zydis指定下的Catalent公司出售的技术。

所述快速溶解片剂在少于30秒内溶解，并且在某些配置中，在小于约5秒内溶解。快速溶解所述片剂是重要的，因为在片剂溶解时，其中所含的纤维蛋白原和凝血酶被释放，从而能够产生止血作用。

可基于出血量选择在片剂中使用的纤维蛋白原和凝血酶的量。在某些实施方案中，在每个片剂中有高达约1克纤维蛋白原和凝血酶。在其它实施方案中，在每个片剂中有约500微克纤维蛋白原和凝血酶。

在本发明的另一个实施方案中，将纤维蛋白原和凝血酶施加到涂药器的表面或掺入涂药器（applicator）中。这种涂药器使得纤维蛋白原和凝血酶被准确地递送需要止血的区域。

在一个这种配置中，所述涂药器具有可由正使用止血产品的人抓握的延伸部分。所述涂药器可具有类似于药签（swab）的构造。止血产品的这种构造特别适合于难以直接到达的位置。一个可使用这种止血产品处理的情形的实例是鼻出血。

至少纤维蛋白原和凝血酶中的一个可以单独电纺丝或与另一成分如右旋糖酐一起电纺丝。使用这种工艺生产的纤维可围绕涂药器的远端卷绕。

可将所述涂抹器配置成一旦止血产品遇到血液即释放纤维蛋白原和凝血酶。使用这种方法，纤维蛋白原和凝血酶将会导致凝血块形成。所述凝血块可从患者身上移除。如果凝血块足够小，可被允许保留在患者体内使得所述凝血块可最终被降解。

在这种止血产品的另一种配置中，可将纤维蛋白原和凝血酶中至少一个配置成保持相对接近于涂抹器或限制于涂抹器，使得当纤维蛋白原和凝血酶引起至少一个凝血块形成时，这种凝血块保持附着在涂抹器上。这种构造利于从患者移除凝血块，并且在凝血块可能足够大以致不希望保持在体内的地方，需要从患者移除。

为便于纤维蛋白原和凝血酶不被从涂抹器释放出来，可将纤维蛋白原和凝血酶并入附着于所述涂抹器一端的材料中。一个这种材料的实例是泡沫。所述泡沫可以是开孔泡沫或闭孔泡沫。所述泡沫应具有足够大的孔隙以接收纤维蛋白原和凝血酶。所述泡沫不应对纤维蛋白原或凝血酶具有强亲和力，以便当纤维蛋白原和凝血酶暴露于水，这些成分被从泡沫释放出来。

在本发明的另一个实施方案中，将纤维蛋白原和凝血酶掺入泡沫。一个这种合适的泡沫的实例是吸收性明胶海绵，如从VETSPON指定下的Novartis购买的。

取决于需要使用止血海绵的应用，可能需要在将所述止血海绵施用于需要止血的区域之前，预湿所述止血海绵。

使用泡沫的另一个优点是，可将所述泡沫构造成可弯曲的，使得所述止血泡沫可被弯曲成符合需要止血的区域的形状。一旦所述止血泡沫被弯曲成所需的构造，它就可维持在那种构造，即使不使用固定装置来维持所述止血泡沫在所需的形状和/或位置。

相似于上面描述的泡沫，该泡沫可以是开孔泡沫或闭孔泡沫。所述泡沫不应对纤维蛋白原或凝血酶具有强亲和力，以便当纤维蛋白原和凝血酶暴露于水，这些成分被从泡沫释放出来。

可将纤维蛋白原和凝血酶掺入被用来制造泡沫的成分中，使得不是将纤维蛋白原和凝血酶施加到所述泡沫的表面，而是将纤维蛋白原和凝血酶分散于整个泡沫基质中。

这种构造利于纤维蛋白原和凝血酶从泡沫持续释放，并且当需要在可能经历再出血的身体区域形成凝血块的时候，可能是特别有益的。

快速溶解片剂适合于用在各种应用中。一个这种应用的实例是口腔出血。如果打算将所述产品结合使用于口腔出血，所述片剂可能是调味过的片剂。

结合使用于各种外科手术技术，有必要在患者身体形成切口。一旦完成手术，有必要使用缝合线（suture）或钉子（staple）来闭合所述切口。尽管缝合线或钉子对于将组织保持在一起是有效的，但是这些闭合机制并不能总是有效地阻止血液通过所述切口流出。

可将所述止血产品置于血液经过的缝合线的至少一部分上。所述纤维蛋白原和凝血酶接触这种血液，并因此提供止血。

与多种医药治疗，如给患者递送化疗药物，结合使用血管进入装置。在一个配置中，血管进入装置是外科手术植入在靠近患者心脏的大静脉中的。所述血管进入装置可能会留在适当位置很长一段时间，如一年多的时间。

外科手术植入血管进入装置的一个挑战是阻止围绕血管进入装置的出血。例如，血液可能会渗出缝合线或导管周围。在不可能阻止渗漏的某些情况下，有必要将病人带入手术室以努力阻止渗漏。

可将止血产品围绕血管进入装置放置，从而引起止血。取决于血管进入装置的形状，止血产品可能具有多种构造。

在其它情况下，与血管进入装置相联合的导管可能是多孔的。止血产品可能被用来提供止血，从而防止血液穿过多孔管道。

所述止血产品的一个或多个前述构造可能适用于阻止从患者出血，如从患者中的大腿动脉移除导管的时候。在这种构造中，所述止血产品可能包含粘合剂，当止血正在发生时，其维持止血产品在适当位置。

主动脉根手术被用来治疗主动脉的扩张或扩大。由于主动脉的性质，止血在该程序的成功中起着重要的作用。可使用上面讨论的止血产品的一个构造来提供止血，而不会导致主动脉收缩，所述主动脉收缩频繁地由现有技术的药剂引起，所述药剂用来与这种类型的手术结合使用以提供止血。

对于更深入患者中的伤口，可能需要以填絮的形式使用所述止血产品，将其至少部分地置入伤口内，从而在伤口内引起止血。

又在另一种配置中，可以以拉长的结构提供止血产品，如止血垫型的形状。也可以以蠕虫或绳的形状提供止血产品。这样的结构可用于阴道手术后的止血。这样的结构也可结合使用于患者体内的延伸洞，如可能是由枪伤造成的洞。

所述止血产品的圆柱形结构也适合于用在组织中有大开口的情形中。在这种情形下，可将多个圆柱形止血产品插入大开口，从而填充这种开口的一部分。

为利于施用拉长的止血产品，可能需要将所述止血产品储存在涂药器中，如活塞中。所述活塞可被用于将拉长的止血产品插入患者体内的伤口中。

在止血产品的另一个构造中，止血产品每种成分单独包装，例如在注射器中。这种构造使得以不同的速率分配各成分，使得可根据特定的患者或为特定类型的伤口定制止血。所述涂药器可允许选择性地或同时地递送每种成分。

所述止血产品可以基本上由纤维蛋白原、凝血酶和适于被生物吸收的载体组成。作为选择，可将所述纤维蛋白原和凝血酶置于止血产品的外表面，使得完成止血后止血产品将被从患者体内取出。

又在另一个配置中，通过喷雾剂递送所述纤维蛋白原和凝血酶。可以以微球体（microsphere）的形式提供所述纤维蛋白原和凝血酶，其能够使用喷雾剂容器分配。

也可能与机器人外科手术结合使用所述止血产品。尽管机器人由与患者所在地遥远的外科医生提供了进行外科手术程序的能力，但是机器人有一定的局限性。可将止血产品与所述机器人手术程序结合使用，以提供止血，从而克服这种局限性。

除了用来在人类中产生止血，本发明的精神可适用于与其他动物结合使用。本发明可用于的这类动物的实例包括狗和猫。

在本发明的另一个实施方案中，将有效量的水与右旋糖酐混合以形成含水右旋糖酐溶液。此后，将含水右旋糖酐溶液电纺丝而形成右旋糖酐片材。

所述右旋糖酐片材可被存储，直到其需要用于制造止血产品。在一个这样的配置中，将右旋糖酐片材卷起。卷起右旋糖酐片材不仅降低当储存所述右旋糖酐片材时右旋糖酐片材占用的区域，而且降低制造所述止血产品前所述右旋糖酐片材被破坏的潜在可能性。

当卷起右旋糖酐片材时，应当谨慎，不要将右旋糖酐片材卷得太紧，因为这种过程将会增加右旋糖酐片材的密度。作为选择，制造所述止血产品前可能需要紧紧地卷右旋糖酐片材来增加右旋糖酐片材的密度。

仅在需要制造所述止血产品之前，将所述凝血酶和纤维蛋白原按本专利申请其他部分中讨论的比例混合在一起。所述混合应使得在混合物中的凝血酶和纤维蛋白原相对均匀分散。

在某些实施方案中，将凝血酶分散在右旋糖酐片材上，以提供平方厘米右旋糖酐片材有2至200 NIH单位的凝血酶浓度。

在某些实施方案中，将纤维蛋白原分散在右旋糖酐片材上，以提供平方厘米右旋糖酐片材有20至60克的纤维蛋白原浓度。

将右旋糖酐片材解开，并将凝血酶和纤维蛋白原混合物分散在右旋糖酐片材的表面上。在某些实施方案中，将凝血酶和纤维蛋白原混合物以基本上均匀的方式分散在右旋糖酐片材的表面上。需要这种均匀的分散，是因为它使得止血产品的每一部分具有基本的止血活性。

重复该过程，使得所述片材被堆叠，直到止血产品表现止血活性的所需量。在某些实施方案中，止血产品包括约2至20层右旋糖酐层。

不将凝血酶和纤维蛋白原混合物置于所述右旋糖酐片材的最上层。使用这种配置，凝血酶和纤维蛋白原被定位在止血产品的内部位置。以这种方式制造止血产品增强了将凝血酶和纤维蛋白原保持在止血产品内部的能力，即使凝血酶和纤维蛋白原洒在右旋糖酐片材的表面上。

尽管可能将凝血酶和纤维蛋白原放在所述止血产品的外面，在使用之前，凝血酶和纤维蛋白原的一部分也可能从所述止血产品解离出来。鉴于凝血酶和纤维蛋白原的成本，理想的是基本上所有凝血酶和纤维蛋白原都保持与所述止血产品相联合直到需要使用所述止血产品，以最大化所述止血产品的功效。

尽管将凝血酶和纤维蛋白原置于右旋糖酐片材之前将凝血酶和纤维蛋白原混合在一起，所述凝血酶和纤维蛋白原充分地分散在右旋糖酐片材上，以使在将止血产品置于需要止血的位置之前，凝血酶和纤维蛋白原不反应。

然后将止血产品切成片。在某些实施方案中，可以以通常正方形的形状形成所述片。可以基于止血产品的预期应用选择片的大小。例如，当止血产品预期用于外科手术应用中时，所述片可以比如果止血产品预期用于外伤的应用具有更小的尺寸。

可使用刀具将止血产品切割成所需的尺寸。除了将所述止血产品切成片，所述刀具可能引起所述右旋糖酐片材邻近刀具的层被压缩在一起。这种压缩导致右旋糖酐片材呆在一起。

在某些实施方案中，止血产品片是真空包装的。除了保持止血产品无菌，真空包装也压缩止血产品中的各层，这增强层止血产品使用前从包装中取出后抗层间分离的能力。

该方法因此增强了止血产品的使用能力，因为在止血产品中的各层抗分离。使用该方法的一个优点在于，不需要额外的步骤以将各层保持在一起。此外，它不需要使用可能会影响止血产品功效的额外成分和/或额外处理步骤。

在本发明直接制造止血产品的另一个实施方案中，将右旋糖酐与水混合直到制备出充分均匀的混合物。可以以粉末形式提供右旋糖酐，其具有相对精细的微粒。可选择相对高纯度的右旋糖酐和水，如典型地用于医药用途的纯度。一个这种适合的水的实例是蒸馏水。

在一个这样的配置中，有约3克至约9克的右旋糖酐和约6毫升水。在其它实施方案中，有约6克右旋糖酐和约6毫升水混合。本领域的技术人员将理解，可使用多种技术将右旋糖酐和水混合在一起，以从右旋糖酐和水生产充分均匀的混合物。一个能用于将右旋糖酐和水混合在一起的技术的非限制性的实例是电纺丝。

为制备右旋糖酐和水的充分均匀混合物而需要的混合时间可能取决于各种因素，如为进行混合而使用的设备类型。在某些配置中，该混合进行超过约30分钟。所述混合可在约40ºF至约70ºF之间的温度进行。

其次，将凝血酶与右旋糖酐-水混合物混合。将凝血酶加入右旋糖酐-水混合物，以从其制备止血产品，其中凝血酶的浓度在约20 至 6,000 NIH单位之间。

可以以粉末的形式提供凝血酶，其具有相对精细的微粒。可选择相对高纯度的凝血酶，如典型地用于医药用途的纯度。

类似于制备右旋糖酐-水混合物使用的方法，当混合凝血酶和右旋糖酐-水混合物的时候可使用电纺丝。凝血酶和右旋糖酐-水混合物的混合可在约40ºF至约70ºF之间的温度进行。

为制备凝血酶、右旋糖酐和水的充分均匀混合物而需要的混合时间可能取决于各种因素，如为进行混合而使用的设备类型。在某些配置中，该混合进行约10至30分钟。在其它配置中，该混合进行约1小时。

一旦完成混合，将混合物引入电纺丝机器中。电纺丝机器被配置成生产具有高达约1米宽度的片材。然而，取决于用于止血产品的需要尺寸，也可使用较短的宽度。

将一个释放片置于电纺丝机器下面，纤维被放置于释放片上。加工和剪切期间，释放片为纤维提供支持。应选择不与制造止血产品中使用的成分相互作用的释放片。可将释放片配置成当剪切和/或其它工艺完成后而与产品分离。

由于如挑战这样的因素，所述挑战与将纤维蛋白原和在形成止血产品中利用的其它成分合并相联合，可将纤维蛋白原提供在止血产品中一层的表面上，而不会被并入数层中的一层或多层中。

在下面的实施例中详细描述了本发明的产品和方法。提供这些实施例以说明本发明，并不意在限制本发明。

实施例

将右旋糖酐与有效量的水混合形成右旋糖酐水溶液。将右旋糖酐水溶液电纺丝成电纺丝右旋糖酐片材。

将凝血酶和纤维蛋白原混合在一起，然后分散在电纺丝右旋糖酐片材上。按照每平方厘米电纺丝右旋糖酐片材约1.3至2.7 NIH单位的比率分散凝血酶。按照每平方厘米电纺丝右旋糖酐片材约3.6 至 7.4毫克的比率分散纤维蛋白原。

重复该过程，直到有8层堆叠构造的电纺丝右旋糖酐片材。凝血酶和纤维蛋白原混合物不要分散在最上层的表面上。电纺丝右旋糖酐片材的厚度为大约1至3毫米。

然后用刀具将止血产品切成宽度约4.8厘米、长度约4.8厘米的片。除了形成所需尺寸的片，切割使电纺丝右旋糖酐层被压在一起。该过程使得电纺丝右旋糖酐层抗分离。将止血产品片真空包装以便储存直至使用。除了防止止血产品的污染，真空包装使得电纺丝右旋糖酐被推压在一起。

使用TACHOSIL指定下的Nycomed出售的商购可吸收纤维蛋白封闭剂产品与本专利申请描述的止血产品的性能进行比较。

TACHOSIL产品包含与凝血酶和纤维蛋白原一起涂覆在其一侧上马胶原海绵。TACHOSIL产品的每平方厘米产品上含有3.6至7.4毫克的人纤维蛋白原并且每平方厘米产品上含有1.3至2.7 NIH单位的人凝血酶。

利用关于TACHOSIL产品上凝血酶和纤维蛋白原浓度的前述信息，将TACHOSIL产品切割成正方形片，使得每片TACHOSIL产品上凝血酶和纤维蛋白原的量约等于上面制备的止血产品上凝血酶和纤维蛋白原的量。

使用猪肝脏损伤模型评估本专利申请的止血产品和TACHOSIL产品的止血功效，该模型先前已被用于评价止血功效。猪肝脏损伤模型使得能够在单个动物上进行多个测试。

使用重量约50-70公斤的成年、家养、非繁殖、雌性猪进行测试。对每只动物进行初步审查，以确认动物健康状况良好。程序之前，将动物隔离三天，期间随意地为动物提供食物和水。

开始程序之前，给动物实施麻醉。程序期间，给动物实施麻醉和流体维护。程序期间，在动物下面放置加热垫以助于程序期间保持动物的体温。

进行中线剖腹手术以达到腹部器官，在此处进行肝脏活组织切片检查（hepatic biopsie）。使用直径大约8毫米的活检穿孔器创建每个肝脏活组织切片。每个肝脏活组织切片宽度约8毫米、深度约4毫米。用剪刀外科手术式地移除圆柱状肝脏活组织切片。

在活组织检查位点观察到约20-25秒的连续自由出血的存在。此后，将止血产品施用到活组织检查位点。用手压约20秒将止血产品维持在适当位置。

然后移开手的压力同时将止血产品留在活组织检查位点上。为活动性出血的明显迹象，观察活组织检查位点约2分钟。

如果出血持续存在，将一个额外的止血产品放置在活组织检查位点上。用手压约20秒将止血产品维持在适当位置。然后移开手的压力同时将止血产品留在活组织检查位点上。为活动性出血的明显迹象，观察活组织检查位点约2分钟。如果出血先前没有停止，重复该过程多达4次。

作为对照，使用活检穿孔器创建宽度约8毫米、深度约4毫米的肝脏活组织切片。观察活组织检查约2分钟。在这段时间内，活组织检查没有停止出血。

以随机顺序进行使用本专利申请的止血产品、TACHOSIL产品和对照的检测，以将由评估期间使用止血产品的顺序引起的潜在影响降到最低。

进行止血剂评估的顺序和由这种评估获得的结果列于下面的表1中。

表1

使用5个额外动物重复所述评估。在5个额外动物上使用止血产品的顺序也是随机的。

将列于表1中的第一次评估结果与5个额外动物的结果组合在一起。对于来自本专利申请的止血产品和TACHOSIL产品的每一个共有18个样本。

对于这18个样本，来自本专利申请的止血产品引起止血的平均时间是2.9分钟，具有1.7分钟的标准偏差。对于这18个样本， TACHOSIL产品引起止血的平均时间是4.7分钟，具有1.4分钟的标准偏差。因此为实现止血，来自本专利申请的止血产品提供了在时间上接近2分钟的降低。

活组织检查之前和实现止血后，评估了动物血液在血液学上潜在的变化。对于来自本专利申请的止血产品和TACHOSIL产品，在血液学结果上没有明显的差异。

使用病理学比较了本专利申请的止血产品提供的凝血块和TACHOSIL产品提供的凝血块。在所有使用本专利申请的止血产品处理的活组织检查中均可识别到纤维蛋白。在另一方面，在使用TACHOSIL产品处理的18个活组织检查中的5个未识别到纤维蛋白。

对于本专利申请的止血产品，需要额外按压的活组织检查的总数是5个。对于TACHOSIL产品，需要额外按压的活组织检查的总数是17个。因此与TACHOSIL产品相比，本专利申请的止血产品表现出需要额外按压的活组织检查的超过70%的降低。

对于本专利申请的止血产品，为提供止血而需要的额外按压的总数是8个。对于TACHOSIL产品，为提供止血而需要的额外按压的总数是24个。因此与TACHOSIL产品相比，本专利申请的止血产品表现出额外按压超过60%的降低。

据认为，本专利申请的止血产品的“网篮”结构允许分散于整个活组织检查位点的红血球诱捕。在另一方面，TACHOSIL产品导致在活组织检查位点基部或无定形植入材料之间区域发生红血球片诱捕。

由于在TACHOSIL产品中使用的凝血酶和纤维蛋白原是从人血浆中获得的，因此TACHOSIL产品存在可能含有感染性病原体的风险。本发明的止血产品优于TACHOSIL的一个优势是，本发明的止血产品表现出比TACHOSIL产品在较高温度下保持稳定。

尽管没有进行直接比较，但是在与流体接触时，根据本发明生产的止血产品中使用的电纺丝右旋糖酐基迅速溶解。所述右旋糖酐在从数分钟到数天的相对短时间段内被吸收入身体内。右旋糖酐载体的迅速损耗提供与降低炎症和瘢痕风险相关的有益效果。

与此相反，在TACHOSIL产品中使用的胶原海绵在一段较长的时间段内降解，例如高达约4个月。TACHOSIL产品的这一方面被制造商指明为一个特色，因为据指明胶原海绵维持纤维蛋白凝血块在伤口表面以实现止血。胶原的缓慢吸收能与炎症和瘢痕风险增加相关。

在止血产品中使用的电纺丝右旋糖酐，相比于在TACHOSIL产品中使用的胶原海绵，为止血产品提供更高水平的柔韧性。这种增强的柔韧性使得在本专利申请中描述的止血产品比TACHOSIL产品更容易适应伤口的表面。

在前面的详细描述中，参考了附图，这些附图形成其一部分，并且通过说明具体实施方案在其中示出的方式也可以以此实施本发明。在这点上，方向术语，例如“顶部”、“底部”、“前”、“后”、“首”、“尾”等相对于被描述的图的取向而使用。由于可以以多种不同取向定位实施方案的组件，方向术语用于说明性目的而绝不是限制性的。应当理解的是，在不脱离本发明的范围下，可采用其它实施方案并可作出结构或逻辑改变。因此，不应将前面的详细描述视为具有限制意义，并且本发明的范围由所附的权利要求限定。

可以设想，可混合和匹配本申请中公开的特征以及那些通过引用并入上面描述的申请中的特征，以适应具体情况。各种其它修饰和变化对于普通技术人员将是显而易见的。 

Claims (25)

1. 一种止血产品，其特征在于，包括多层止血层，每一止血层包括：

右旋糖酐支持物；和

至少一种止血剂，所述止血剂选自由凝血酶和纤维蛋白原组成的组，其中所述止血层以堆叠构造安排。

2. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，所述右旋糖酐支持物包括电纺丝右旋糖酐。

3. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，所述右旋糖酐支持物包括第一支持面和在所述第一支持面对侧的第二支持面，其中所述至少一种止血剂被施加到每一右旋糖酐支持物的所述第一支持面，并且其中所述止血层以堆叠构造安排使得所述第一支持面与相邻右旋糖酐支持物的第二支持面彼此相邻。

4. 根据权利要求3所述的止血产品，其特征在于，还包括顶部止血层，所述顶部止血层包括邻近所述多层止血层最上层的第一支持面的右旋糖酐支持物。

5. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，所述止血产品包括约2至20层止血层。

6. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，纤维蛋白原以每平方厘米右旋糖酐支持物约20至60毫克的浓度放置在右旋糖酐支持物上，其中凝血酶以每平方厘米右旋糖酐支持物约2至200 NIH单位的浓度放置在右旋糖酐支持物上，并且其中凝血酶和纤维蛋白原以基本上均匀的方式放置在右旋糖酐支持物上。

7. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，所述凝血酶是鲑鱼凝血酶并且所述纤维蛋白原是鲑鱼纤维蛋白原。

8. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，所述止血产品被切割成至少两片并且其中该切割过程导致止血层结合在一起。

9. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，所述止血层用超声波焊接、缝合、卷边、热密封或粘合剂熔合在一起。

10. 根据权利要求1所述的止血产品，其特征在于，所述止血产品还包括支持材料，所述支持材料选自由纱布、压缩的电纺丝右旋糖酐、聚乙醇酸聚合物、聚乳酸聚合物、己内酯聚合物和带电尼龙组成的组。

11. 一种制备止血产品的方法，其特征在于，包括：

制造多层止血层，包括：形成右旋糖酐支持物；和分配至少一种止血剂在所述右旋糖酐支持物上，其中所述至少一种止血剂选自由凝血酶和纤维蛋白原组成的组；和

以堆叠构造安排所述止血层。

12. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，右旋糖酐支持物包括电纺丝右旋糖酐。

13. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述右旋糖酐支持物包括第一支持面和在所述第一支持面对侧的第二支持面，其中所述一种止血剂被分配到所述第一支持面上，并且其中所述止血层被堆叠使得所述第一支持面与相邻右旋糖酐支持物的第二支持面彼此相邻。

14. 根据权利要求12所述的方法，其特征在于，还包括放置顶部止血层，使得包括与所述多层止血层最上层的第一支持面相邻的右旋糖酐支持物。

15. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述止血产品包括约2至20层止血层。

16. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述基于止血产品的止血能力需要的量选择所述止血产品中止血层的数量。

17. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，纤维蛋白原以每平方厘米右旋糖酐支持物约20至60毫克的浓度放置在右旋糖酐支持物上，其中凝血酶以每平方厘米右旋糖酐支持物约2至200 NIH单位的浓度放置在右旋糖酐支持物上，并且其中凝血酶和纤维蛋白原以基本上均匀的方式放置在右旋糖酐支持物上。

18. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，在分配至少一种止血剂之前将凝血酶和纤维蛋白原混合在一起。

19. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述凝血酶是鲑鱼凝血酶并且所述纤维蛋白原是鲑鱼纤维蛋白原。

20. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，还包括将所述止血产品切割成至少两片并且其中该切割过程导致止血层结合在一起。

21. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述止血层用超声波焊接、缝合、卷边、热密封或粘合剂熔合在一起。

22. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述止血产品还包括支持材料，所述支持材料选自由纱布、压缩的电纺丝右旋糖酐、聚乙醇酸聚合物、聚乳酸聚合物、己内酯聚合物和带电尼龙组成的组。

23. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，还包括压缩所述止血层至小于所述止血层初始高度的高度，其中所述压缩使得所述止血层的高度与所述止血层初始高度相比减小至少75％。

24. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于，还包括包装所述止血产品以防止所述止血产品吸潮并维持所述止血产品于压缩的构造。

25. 一种治疗产品，其特征在于，包括多层治疗层，每层包括：

电纺丝右旋糖酐支持物；和

至少一种治疗活性剂，所述活性剂选自由抗生素、减轻疼痛的药物、生长因子、骨形态发生蛋白、血管活性物质、减少炎症的类固醇及它们的组合组成的组，其中所述止血层以堆叠构造安排。