CN104115819A - 犬冷冻精液稀释液配方 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种犬冷冻精液稀释液配方,其特征在于,其主要由脱脂乳-葡萄糖型稀释液组成,脱脂乳-葡萄糖型稀释液的配方如下:脱脂乳30mg/ml;葡萄糖36mg/ml;果糖18mg/ml;维生素E2.5mg/ml;青霉素500IU/ml;链霉素500IU/ml。本发明用脱脂乳代替常用的卵黄,使用方便,可以保存犬精液。
Description
技术领域
本发明涉及一种稀释液配方,特别是涉及一种犬冷冻精液稀释液配方。
背景技术
由于禽流感的暴发,有些国家已经限制含卵黄的犬冷冻精液入境。另外犬卵黄也没有标准的实验用试剂,质量不稳定,不能高温灭菌,且难以通过细菌滤器。因此,无法达到真正的无菌,使用很不方便。而脱脂乳有标准的实验级商品,质量稳定,能克服卵黄的缺点,是很好的卵黄替代品。开发有效的脱脂乳-葡萄糖型稀释液将有助于犬冷冻精液的生产、流通,推动犬人工授精技术的推广。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种犬冷冻精液稀释液配方,其用脱脂乳代替常用的卵黄,使用方便,可以保存犬精液。
本发明是通过下述技术方案来解决上述技术问题的:一种犬冷冻精液稀释液配方,其特征在于,其主要由脱脂乳-葡萄糖型稀释液组成,脱脂乳-葡萄糖型稀释液的配方如下:
脱脂乳 30 mg/ml
葡萄糖 36 mg/ml
果糖: 18 mg/ml
维生素E 2.5 mg/ml
青霉素 500IU/ml
链霉素 500IU/ml。
优选地,所述脱脂乳-葡萄糖型稀释液与甘油混合均匀。
优选地,所述脱脂乳-葡萄糖型稀释液的体积百分比如下:脱脂乳-葡萄糖型稀释液86%,甘油14%。
本发明的积极进步效果在于:
本发明犬冷冻精液稀释液配方用脱脂乳代替常用的卵黄,使用方便,可以保存犬精液。脱脂乳有专门的分析级商品,容易得到,质量比较稳定,很适合于与其它成分混合制作成专用的冷冻精液稀释液原粉使用或作为商品出售。
具体实施方式
本发明犬冷冻精液稀释液配方主要由脱脂乳-葡萄糖型稀释液(A液)组成, A液的配方如下:
脱脂乳 30 mg/ml
葡萄糖 36 mg/ml
果糖: 18 mg/ml
维生素E 2.5 mg/ml
青霉素 500IU/ml
链霉素 500IU/ml
将上述物质溶于双蒸水中或纯水中,混合均匀,以3000转/分钟的速度,离心15 min,取上清液过滤作为基础稀释液,即A液。
B液的配方如下:
A液: 86%
甘油: 14%
使用前将A液与甘油按上述体积百分比混合均匀,即为B液。
精液的稀释和冷冻:将采集到的犬精液先用等温的A液稀释,将精液稀释到2 × 108 个精子/ml,置于4°C冰箱,缓慢降温2.5小时,使精液的温度达到4°C,然后加入等温的的B液,使用量与A液用量相同,混匀,4°C条件下平衡30分钟,装入0.25ml的细管,封口,再置于4°C冰箱,放置15分钟。将细管置于冷冻盒液氮面上方5cm处,液氮蒸气熏蒸15分钟,然后投入液氮中,即可长期保存。
实例1:
稀释液的配制:
脱脂乳 3g
葡萄糖 3.6 g
果糖 1.8 g
维生素E 250 mg
青霉素 5万IU
链霉素 5万IU
准确称量以上物质,溶于100ml双蒸馏水(或超纯水)中混合均匀,以3000转/分钟的速度,离心15 min,取上清液过滤作为基础稀释液,即A液。取86ml A液和14ml甘油混合均匀作为B液。精液稀释液配好备用。
采精与精液冷冻:毕格公犬,年龄4岁,体重15kg,作为供精犬。采用按摩法收集犬的精液,采精量为4ml,显微镜检查正常,将精液在25°C下以1000转/分钟离心4分钟,吸弃上清,留下离心管底部精液,然后缓慢加入3ml 等温的A液,与精液混合均匀,置于4°C冰箱,缓慢降温2.5小时,使精液的温度达到4°C,然后加入等温的B液3ml,混匀,4°C条件下平衡30分钟,装入0.25ml的细管,封口,再置于4°C冰箱,放置15分钟。将细管置于冷冻盒液氮面上方5cm处,液氮蒸气熏蒸15分钟,然后投入液氮中,即完成冷冻。取出做好的细管冻精,投入37°C温水中1分钟,解冻后活力为0.38可用于人工授精。
冷冻精液人工授精:选择3只雌性毕格,年龄2~5岁,经阴道抹片确定已处于发情期,可以配种。取出冷冻投入35°C温水中1分钟,使其解冻,装入输精器,通过输精器将精液输入到母犬子宫内,隔天再输精一次。结果,三只母犬全部受孕,平均产仔5只。
实例2:
稀释液的配制:按实例1的方法配制冷冻稀释保护液。
采精与精液冷冻:金毛公犬,年龄5岁,体重32kg,作为供精公犬,采精和精液稀释冷冻按实例1的方法开展。解冻后精液活力为0.35,符合人工授精的要求。
冷冻精液人工授精:按实例1的方法给2只发情金毛母犬输精,结果全部受孕,平均产仔6.5只。
实例3:
稀释液的配制:按实例1的方法配制冷冻稀释保护液。
采精与精液冷冻:松狮公犬,年龄2.5岁,体重28kg,作为供精公犬,采精和精液稀释冷冻按实例1的方法开展。解冻后精液活力为0.32,符合人工授精的要求。
冷冻精液人工授精:按实例1的方法给3只发情松狮母犬输精,结果全部受孕,平均产仔5.4只。
本发明犬冷冻精液稀释液配方用脱脂乳代替常用的卵黄,使用方便,可以保存犬精液。脱脂乳有专门的分析级商品,容易得到,质量比较稳定,很适合于与其它成分混合制作成专用的冷冻精液稀释液原粉使用或作为商品出售。本发明以脱脂乳-葡萄糖作为主要成分开发出简单实用的冷冻精液配方,用以保存犬的精液。
本领域的技术人员可以对本发明进行各种改型和改变。因此,本发明覆盖了落入所附的权利要求书及其等同物的范围内的各种改型和改变。
Claims (3)
1.一种犬冷冻精液稀释液配方,其特征在于,其主要由脱脂乳-葡萄糖型稀释液组成,脱脂乳-葡萄糖型稀释液的配方如下:
脱脂乳 30 mg/ml
葡萄糖 36 mg/ml
果糖: 18 mg/ml
维生素E 2.5 mg/ml
青霉素 500IU/ml
链霉素 500IU/ml。
2.如权利要求1所述的犬冷冻精液稀释液配方,其特征在于,所述脱脂乳-葡萄糖型稀释液与甘油混合均匀。
3.如权利要求2所述的犬冷冻精液稀释液配方,其特征在于,所述脱脂乳-葡萄糖型稀释液的体积百分比如下:脱脂乳-葡萄糖型稀释液86%,甘油14%。
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