CN104098586A

CN104098586A - 含腈基的噻吩并吡啶脂类衍生物的晶型、其制法和应用

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Publication number: CN104098586A
Application number: CN201310462399.0A
Authority: CN
Inventors: 刘登科; 刘颖; 穆帅; 张旭阳; 黄阳; 魏巍
Original assignee: Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Co Ltd
Current assignee: Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Co Ltd
Priority date: 2013-04-03
Filing date: 2013-09-29
Publication date: 2014-10-15
Anticipated expiration: 2033-09-29
Also published as: CN104098586B

Abstract

本发明提供了一种(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯的晶型，该晶型属于单斜晶系，空间群为P21/n，晶胞参数： α=90°，β=99.06(3)°，γ=90°，Z=4。本发明还提供了上述晶型的制备方法，以及晶型在制备用于抗血小板聚集的药物组合物中的用途。

Description

含腈基的噻吩并吡啶脂类衍生物的晶型、其制法和应用

技术领域

本发明涉及一种含腈基的噻吩并吡啶脂类衍生物的晶型，具体涉及一种(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯的晶型，以及该晶型的制备方法和应用。

背景技术

血栓的形成可导致急性心肌梗塞、中风、肺栓塞等心、脑、肺循环疾病，严重威胁人类的健康和生命，这也是外科手术中常见的并发症以及介入性血管成形术后再闭塞的因素之一。

导致血栓形成的因素有很多，例如血小板在损伤的血管壁表面上的粘附和聚集、血流淤滞、凝血因子的激活促使凝血酶的形成、溶酶活性低下等。在上述因素中，血小板是血栓形成的必需物质，因此抑制血小板的聚集是预防和治疗血栓疾病的重要手段之一。

本发明人曾就“一类含腈基的噻吩并吡啶酯类衍生物、其制备方法和用途”提交了中国发明专利申请（公开号：CN102241690）。该发明公开了一种化学结构式如式（I）所示的化合物：(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯（以下简称为式（I）化合物）。

上述发明公开了化合物(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶 -2-基)乙酸酯对于治疗人类因血小板聚集而引起的疾病是有效的，例如血栓性疾病。

以不同晶型化合物结构存在的能力被称为同质多晶现象，已知其存在于许多有机化合物中。这些不同的晶型被称作“多晶型物”，并在其结晶固态的堆积方式、几何排列和其他描述性质方面而不同。不同的多晶型物具有不同的晶格能，由此其在固态时展示出了不同的物理性质，例如形状、颜色密度、硬度、可变形性、稳定性和溶解性等。

为此，本发明人研究了(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯的多晶现象，并希望寻找具有优良理化性质的结晶形态，从而为药品制造提供更多的原料选择。

发明内容

因此，本发明的目的在于克服上述缺陷，提供了式（I）化合物的一种新晶型，该晶型具有稳定的外观状态和良好的保存稳定性，可以稳定地供给制备原料药。本发明还提供了该晶型的制备方法和应用。

本发明提供了一种(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯的晶型，该晶型属于单斜晶系，空间群为P21/n，晶胞参数： α=90°，β=99.06(3)°，γ=90°， Z（晶胞中的分子数）=4。

根据本发明的晶型，其中，该晶型的熔点可以为91.1～91.8℃。另外，该晶型的纯度可以为99.0%或以上。

根据本发明的晶型，其中，该晶型的晶胞中的分子堆积可以如图2所示。

本发明还提供了用于制备上述晶型的方法，该方法包括以下步骤：

（1）按照1:6～10的重量体积比将(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯加入甲醇中，在搅拌下加热溶解，过滤；上述重量体积比可以为g/ml，例如，当(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯为1g时，甲醇的体积可以为6～10ml。

（2）将步骤（1）过滤所得的滤液放置20～24h析晶，过滤收集结晶，干燥，得到所述晶型。所述放置析晶的温度例如为25～35℃，可以为25～27℃，可优选为25℃。优选地，可以使用真空油泵进行干燥操作，例如可干燥时间为4～8小时，可优选为5小时。

根据本发明的方法，其中，在步骤（1）中，所述重量体积比为1:6～10，可优选为1:8；优选地，在搅拌下加热至40～65℃，优选为60℃。

本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含有效量的上述晶型和一种或多种药学上可接受的辅料。所述药学上可接受的辅料可以是保持药物剂型的基质或辅料，通过根据不同的药剂来选用或组合物使用，可选择性地包括载体、赋形剂、稀释剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、矫味剂、防腐剂、包衣材料等。赋形剂包括例如微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、淀粉、糊精、磷酸钙、蔗糖、右旋糖酐、甘露醇、山梨醇、葡萄糖、果糖、水、聚乙二醇、丙二醇、甘油、环糊精、环糊精衍生物中的一种或几种的组合物。填充剂包括例如乳糖、蔗糖、糊精、淀粉、预胶化淀粉、甘露醇、山梨醇、磷酸氢钙、硫酸钙、碳酸钙、微晶纤维素的一种或几种的组合物。粘合剂包括例如蔗糖、淀粉、聚维酮、羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素、羟丙纤维素、甲基纤维素、聚乙二醇、药用乙醇、水的一种或几种的组合物。崩解剂包括例如淀粉、交联聚微酮、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、羧甲纤维素钠、泡腾崩解剂的一种或几种的组合物。

根据本发明的药物组合物，其中，所述药物组合物可以为固体口服制剂、液体口服制剂或注射剂。优选地，所述固体口服制剂包括分散片、肠溶片、咀嚼片、口崩片、胶囊或颗粒剂；所述液体口服制剂包括口服溶液剂；所述注射剂包括注射用水针、注射用冻干粉针、大输液或小输液。

本发明还提供了上述晶型或按照本发明的上述方法制备的晶型在制备用于抗血小板聚集的药物组合物中的用途。另外，本发明还提供了上述晶型或按照本发明的上述方法制备的晶型在制备用于治疗因抗血小板聚集而引起的冠状动脉综合征、心肌梗死、心肌缺血、心脑血管疾病的药物组合物中的用途。本发明人已通过对小鼠血小板聚集抑制作用试验证实，本发明的式（I）化合物的晶型有明显的抗ADP诱导的血小板聚集作用，因此其可以用来预防或治疗因血小板聚集而引起的冠状动脉综合症、心肌梗死、心肌缺血等心脑血管疾病。

本发明的晶型在相当宽的剂量范围内是有效的。例如每天服用的剂量约在10mg～500mg范围内，分为一次或数次给药。实际服用本发明晶型的剂量可由医生根据有关的情况来决定。这些情况包括：被治疗者的身体状态、给药途径、年龄、体重、对药物的个体反应，症状的严重程度等。

与通过直接蒸干溶剂（如二氯甲烷）方式制得的式（I）化合物的白色固体产物相比，本发明所制备的晶型在批次间具有良好的外观稳定性和重现性。例如，本发明人通过实验发现，该晶型在连续制备15批的批次范围内，其外观是稳定的，均是正常的白色固体，且经测定每批均是稳定的晶型（测试结果如表1所示）。

表1晶型稳定性试验

批次	外观	熔点/℃	纯度/%
				1	白色针状结晶	91.3～91.6	99.5
2	白色针状结晶	91.2～91.5	99.4
				3	白色针状结晶	91.4～91.7	99.7
4	白色针状结晶	91.3～91.5	99.6
				5	白色针状结晶	91.1～91.4	99.9
6	白色针状结晶	91.6～91.8	99.0
				7	白色针状结晶	91.6～91.7	99.4
8	白色针状结晶	91.2～91.5	99.1
				9	白色针状结晶	91.3～91.6	99.2
10	白色针状结晶	91.4～91.6	99.4
				11	白色针状结晶	91.2～91.4	99.6
12	白色针状结晶	91.7～91.8	99.7
				13	白色针状结晶	91.1～91.3	99.2
14	白色针状结晶	91.5～91.8	99.3
				15	白色针状结晶	91.6～91.8	99.4

此外，本发明的晶型还具有良好的保存稳定性。例如，本发明人通过实验验证，该晶型在为期两周的对光、热、湿的稳定性实验中，其杂质没有明显增加，因而具有良好的贮存稳定性。

基于上述特性，本发明的晶型可以作为式（I）化合物原料药的稳定供给源，更适于工业化生产。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1示出了通过已知方法制得的式（I）化合物的X射线粉末衍射图谱；

图2示出了实施例1中制得的晶型的晶胞中的分子堆加图。

具体实施方式

下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本部分对本发明试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在上下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

结合以下实施例，本发明对晶型的测定条件如下：

X-射线粉末衍射（PXRD）条件：

仪器：日本理学D/MAX-2500.0186X射线多晶粉未衍射仪

靶：Cu-Kα辐射，2θ=0～40°

阶跃角：0.04°

计算时间：0.5秒

管压：40KV

管流：100mA

扫描速度：8℃/min

滤片：石墨单色器

熔点测定：

仪器：YTR-3型熔点仪（购自天津大学精密仪器厂）

高效液相色谱（HPLC）条件：

色谱柱：C₁₈，150mm×4.6mm，5um

流动相：甲醇：水：乙酸=70：30：0.25

波长：230nm

流速：0.8ml/min

进样量：10uL

柱温：35℃

仪器：

普析通用L6液相色谱仪

日立L-7250自动进样器

普析通用LC Win色谱工作站

实施例1

本实施例用于说明本发明的(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯的晶型及其制备过程。

制备(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯作为原料。其制备过程可以参照中国发明专利公开CN102241690中记载的反应流程。例如，其反应流程可以为：

中间体1的制备：

在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5,6,7,7a-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2(4H)-酮19.2g，用70mL乙腈将其溶解，搅拌下冷却至-10℃，加入无水碳酸钾41.5g。将2-氰基溴苄19.6g分批加入反应体系中，加毕升温至45℃继续反应4h（板层显示反应完全）。过滤，滤液蒸干溶剂乙腈，加入50mL二氯甲烷，用3×50mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得黄色油状产物22.6g（HPLC：97.2%）。Rf=0.47[单点，展开剂：v(石油醚)∶v(乙酸乙酯)=1∶2]。MS，m/Z：270.0(M)。

式（I）化合物（(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯）的制备：

在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入2.7g上述制得的中间体1，用10mL二氯甲烷将其溶解，搅拌下加入氢氧化钠1.2g。将反应体系冷却至-20℃，将1.02g乙酸酐分批加入反应体系。加完，于室温下继续搅拌反应1h（板层显示反应完全）。用3×15mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，柱分离，即得白色固体产物（HPLC：99.6%）。Rf=0.58[单点，展开剂：v(石油醚):v(乙酸乙酯)=4:1]。 ¹H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：2.253(s，3H)，2.700(s，2H)，2.767～2.780(d，2H)，3.402(s，2H)，3.816(s，2H)，6.421(s，1H)，7.452～7.489(t，1H)，7.606～7.625(d,1H)，7.660～7.697(t,1H)，7.803～7.822(d，1H)。MS，m/Z：312.0（M）。

对上述所得的白色固体产物（(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯）进行X射线粉末衍射（PXRD）表征，其PXRD图谱如图1所示。重复上述制备方法，测定所得的白色固体产物的熔点均为85～85.5℃。

本发明晶型的制备：

取3g上述方法制得的白色固体（(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯），加入18ml的甲醇，在搅拌下加热至65℃，使其全部溶解，过滤，取滤液；将所得滤液在室温下放置20h析晶，过滤收集结晶，干燥，得到本发明的晶体2.49g。

用Rigaku Saturn724CCD面探测仪收集上述晶型的衍射强度数据，测定条件：CuK_α辐射，人工多层膜聚焦镜，准直管，晶体与CCD距离为45mm，管压50kV，管流24mA，ω扫描，最大2θ角为72.5°，扫描范围为0～180°，回摆角度为2°，间隔为2°，扫描速度为1.5s/°，每个画面扫描一次，总计摄取201幅图像，总收集衍射点为16000个，独立衍射点为3034个（Rint=0.045），可观察点（F2≧2σF2）为2819个，数据完整度为98.5%。

在微机上用直接法（shelxs-97）解析晶体结构，获得全部非氢原子位置，使用最小二乘法修正结构参数和判别原子种类，使用几何计算法和差值Fourier法获得全部氢原子位置。计算得出：晶型属于单斜晶系，空间群为P21/n，晶胞参数：α=90°，β=99.06(3)°，γ=90°，，Z（晶胞中的分子数）=4，其晶胞中的分子堆加如图2所示。另外，测得该晶型的熔点为91.1～91.8℃。由此可以确定本实施例制得的晶体为本发明的式（I）化合物的晶型。

实施例2

按照与实施例1中相同的方法制备式（I）化合物作为原料。

取3g上述方法制得的白色固体（(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯），加入24ml的甲醇，在搅拌下加热至60℃，使其全部溶解，过滤，取滤液；将所得滤液在室温下放置22h析晶，过滤收集结晶，干燥，得到本发明的晶体2.50g。

按照与实施例1相同的方式对晶体进行分析，结果如下：晶型属于单斜晶系，空间群为P21/n，晶胞参数：，α=90°，β=99.06(3)°，γ=90°，，Z=4，其晶胞中的分子堆加如图2所示。测得该晶型的熔点为91.1～91.8℃，使用HPLC测得该晶型的纯度为99.0%。

实施例3

按照与实施例1中相同的方法制备式（I）化合物作为原料。

取3g上述方法制得的白色固体（(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯），加入30ml的甲醇，在搅拌下加热至40℃，使其全部溶解，过滤，取滤液；将所得滤液在室温下放置24h析晶，过滤收集结晶，干燥，得到本发明的晶体2.49g。

实施例4

本实施例用于说明含有本发明晶型的片剂的制备。

将实施例1制得的样品晶型、预胶化淀粉和微晶纤维素过筛，以处方量充分混合，加入含有处方量聚乙烯吡咯烷酮的溶液，混合，制软材，过筛，制湿颗粒，于50～60℃干燥；然后将羧甲基淀粉钠盐、硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，以处方量加入到上述干燥后的颗粒中，压片，即得含有本发明的晶型的片剂。

试验例1

本试验例用于说明本发明的晶型对大鼠血小板聚集的抑制作用。

1、实验药物与试剂：

实施例1制备的晶型；

ADP：SIGMA公司产品；

羧甲基纤维素钠800-1200：国药集团化学试剂有限公司，批号：F20051103。

2、实验动物：

Wistar大鼠：SPF级，雄性，中国医学科学院实验动物研究所提供，许可证号SCXK(京)2005－0013。

3、实验仪器：

PAM-3型双通道血小板聚集仪：江苏省丹阳无线电厂产品。

4、实验方法与结果：

选用健康雄性Wistar大鼠，体重210～250g，随机分组。每批均设正常对照组和晶型给药组。晶型给药组的剂量为30mg/kg。采用灌胃给药，给药容积均为10mL/kg·bw，正常对照组给予等量0.5%CMC-Na，给药后2h，腹腔注射40mg/kg戊巴比妥钠（1mL/kg）麻醉，腹主动脉采血，用3.8%枸橼酸钠抗凝，分别制备富血小板血浆（PRP）和贫血小板血浆(PPP)，在PAM-3型双通道血小板聚集仪测定ADP（终浓度：1.08μM）诱导的血小板最大聚集百分率。结果见表2。

表2对ADP诱导的血小板聚集的影响

由表2可见，与正常对照组相比，本发明的晶型（30mg/kg）有明显的抗ADP诱导的血小板聚集作用。因此其可以用于预防或治疗因血小板聚集而引起的冠状动脉综合征、心肌梗死、心肌缺血等心脑血管疾病。

试验例2

将实施例1制得的本发明的晶型与作为对比的式（I）化合物原料进行影响因素试验，分别在光照（4500±500Lx）、高温（60℃）和高湿（92.5%相对湿度）的条件下放置两周（14天），与第0天比较外观、杂质个数及杂质量（以HPLC测定）。试验结果分别见表3～5。

表3光照稳定性试验数据

表4高温稳定性试验数据

表5高湿稳定性试验数据

由表3～5可知，在为期两周的光照、高温、高湿条件下的稳定性试验中，本发明晶型的外观未发生可见的变化，晶型保持稳定，同时通过HPLC 测定，其杂质数和杂质总量也未明显增加，因而与式（I）化合物原料相比，本发明的晶型具有较好的贮存稳定性，可以作为式（I）化合物原料药的稳定来源。

尽管本发明已进行了一定程度的描述，明显地，在不脱离本发明的精神和范围的条件下，可进行各个条件的适当变化。可以理解，本发明不限于所述实施方案，而归于权利要求的范围，其包括所述每个因素的等同替换。

Claims

1.一种(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯的晶型，其特征在于，该晶型属于单斜晶系，空间群为P21/n，晶胞参数： α=90°，β=99.06(3)°，γ=90°，Z=4。

2.根据权利要求1所述的晶型，其特征在于，该晶型的熔点为91.1～91.8℃。

3.根据权利要求1或2所述的晶型，其特征在于，该晶型的晶胞中的分子堆积如图2所示。

4.权利要求1至3中任一项所述晶型的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）按照1:6～10的重量体积比将(5-(2-腈基苄基)-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酸酯加入甲醇中，在搅拌下加热溶解，过滤；

（2）将步骤（1）过滤所得的滤液放置20～24h析晶，过滤收集结晶，干燥，得到所述晶型；所述放置析晶的温度优选为25～35℃。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在步骤（1）中，所述重量体积比为1:8；优选地，在搅拌下加热至40～65℃，优选为60℃。

6.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含有效量的权利要求1～3中任一项所述的晶型和一种或多种药学上可接受的辅料。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为固体口服制剂、液体口服制剂或注射剂；优选地，所述固体口服制剂包括分散片、肠溶片、咀嚼片、口崩片、胶囊或颗粒剂；所述液体口服制剂包括口服溶液剂；所述注射剂包括注射用水针、注射用冻干粉针、大输液或小输液。

8.权利要求1至3中任一项所述的晶型或按照权利要求4或5所述的方法制备的晶型在制备用于抗血小板聚集的药物组合物中的用途。

9.权利要求1至3中任一项所述的晶型或按照权利要求4或5所述的方法制备的晶型在制备用于治疗因抗血小板聚集而引起的冠状动脉综合征、心肌梗死、心肌缺血、心脑血管疾病的药物组合物中的用途。