CN104039150A - 介素组合物及其在调节不同脊椎动物的行为中的用途 - Google Patents

Abstract

一种包含介素的组合物，其经描述用于调节多种脊椎动物物种的不希望的或有害的应激相关行为或其他行为或生理，以及在来自与天然产生该介素作为信息素的物种不同的物种的脊椎动物中使用该组合物的方法。

Description

介素组合物及其在调节不同脊椎动物的行为中的用途

相关申请

本申请涉及并要求2012年9月20日提交的美国非临时专利申请系列号13/623,279和2011年9月20日提交的美国临时专利申请系列号61/536,673的优先权，其均通过引用全文纳入本文。

发明领域

本发明广泛涉及动物行为和信息素(pheromone)和介素(interomone)的应用的领域。更具体地，本发明涉及信息素雄烯酮作为介素用以在与产生信息素的物种不同的脊椎动物物种(诸如狗、猫、蛇、鸟或马)中产生不同行为或生理效应(诸如镇静或行为改变效应)的用途。

背景技术

信息素是由活的生物体释放的化学物，其通过气味向相同物种的其他生物体传递信息。信息素响应胁迫、警报、危险、有性繁殖和其他行为情况而释放。根据定义和进化理论，信息素具有物种特异性，即它们只对引发相同物种的成员的先天性反应有效。

雄烯酮(也称为5-α-雄-16-烯-3-酮)是在多种脊椎动物中发现的类固醇，但其在雄性家猪或野猪中特别显著。雄烯酮作为猪的性信息素起作用，性接受雌性会寻找公猪并且会在雄烯酮或完整的公猪存在时表现脊柱前凸。雄烯酮，成年家养雄性的气味，也减少较年幼的猪的侵袭性(McGlone，J.J.和J.L.Morrow.1988.通过雄烯酮减少猪格斗行为(Reduction ofpig agonistic behaviorby Androstenone).J.Animal Science.66：880-884)。据信雄烯酮作为猪的社会信息素，其改变相同物种中成年猪行为和生理学。

提供种间交流的化学物被称为异种化感物。一些化合物已知在一个物种中是信息素，但是已经被观察到在其他物种中有强行为效应。例如，由一个物种产生和释放的影响另一个物种的行为或生理以有益于发出者但无益于接受者的化学物在本领域中被称为利己素(参见Grasswitz，T.R.和G.R.Jones(2002).“化学生态学(Chemical Ecology)”.Encyclopedia of Life Sciences(《生命科学百科全书》).约翰韦利森公司(John Wiley & Sons，Ltd.)doi：10.1038/npg.els.0001716)。自然环境中的利己素经观察主要在植物物种中产生，其利用利己素，例如用于保护植物防御植食性昆虫。

益它素是另一种已知的异种化感物。其由一个物种发出并且有益于另一个物种，但是无益于或通常伤害发出者。自然环境中产生的益它素主要在昆虫物种中观察到。例如，当西部松大小蠹(Western pine beetle)破坏树木时，黄松(Ponderosa Pine)树产生一种称为桂叶烯的萜。这种化学物的释放随后诱惑更多的蠹虫至树(参见Wyatt，T.D.(2003).《信息素和动物行为：通过嗅觉和味觉的交流》(Pheromones and Animal Behaviour：Communication by Smell andTaste)，第一版(英国剑桥：剑桥大学出版社(Cambridge University Press))。

互利素是由一个物种产生和释放的对发出者和接受者均有益的异种化感物。例如，植物发出吸引蜜蜂的气味。蜜蜂被吸引到植物来采蜜以摄食，然后蜜蜂带走花粉使其他植物/花受精。

因此，本领域已知的异种化感物包括观察到的由一个物种产生的对另一个物种有影响以有益于和/或不利于发出或接受物种的化学物。所述的是影响另一个物种(即接受物种)的行为和/或生理但对发出物种不另具有有益或有害影响并且对接受物种没有新的或不相关的行为或生理影响的异种化感物。

例如，虽然已知家犬吠叫是属于它们的正常交流方法的部分，狗可能响应外部信号或因厌烦而显示出过度的吠叫/跳跃/聚扰/乞求。聚扰包括反复吠叫和跳跃。当某些狗听见或看见人、动物、汽车或机器时，它们会激动地吠叫和跳跃。一种理论是过度的吠叫是驮畜(pack animal)在它们攻击猎物时所具有的“聚扰”行为的部分(Lord等，吠叫和聚扰(Barking and mobbing.)，Behav.Processes，81：358-368，2009)。

本领域中使用的使吠叫/跳跃/乞求综合征停止的方法包括电击项圈、气味喷雾和巨大噪音，这些都通过惊吓或使狗从对不希望行为的专注中转移注意力来起作用。本领域中也已使用犬类安抚信息素(包括据信复制了由狗释放的某些镇静信息素的合成组合物)来处理狗的某些行为问题，但是迄今还未在缓解某些狗表现出的吠叫/跳跃综合征方面取得成功。另外，本领域中使用的信息素还未受指引用于除发出信息素的物种之外的动物物种。

因此，希望提供包含某一化合物的方法和组合物，该化合物已知是一个物种中的积极调节多个不同脊椎动物物种中的动物行为问题的信息素。具体地，本领域需要用于使多个脊椎动物物种镇静、镇定、减少焦虑或另外积极调节多个脊椎动物物种的行为(包括由一些犬类表现的吠叫/跳跃/乞求综合征)或使焦虑的狗或猫或其他脊椎动物物种镇静的介素。

发明内容

本发明的一个目的是提供用于调节脊椎动物物种的行为的新型方法和组合物，其包含已从一种脊椎动物物种中分离的化合物，但令人惊讶的是，其具有调节不同脊椎动物物种的行为的效果。具体地，已经鉴定了某些信息素，其可被制成化合物并且用作方法的部分以作为介素产生跨物种效应。介素是任何天然分泌的或合成产生的作为一个物种的信息素发出的化学物，其在分离并给予几个不同的脊椎动物物种时引发不同物种的行为或生理变化而无需有益于和/或损害释放该化学物的物种。

本发明具体地涉及介素雄烯酮及其用于各种组合物中对多种脊椎动物(例如狗、马、猫、蛇和鸟)的行为产生调节作用的用途。雄烯酮是家猪在性/求偶和社会行为中利用的气味信息素。通过本发明令人惊讶地认识到雄烯酮对其他物种(如犬类)具有强力影响，且经观察其改变狗的行为。

本发明的组合物可任选地包含必需或所需的其他成分，这取决于终产物的形式和希望的用途。这样的任选的成分可包含但不限于，运载体(诸如水、醇类、溶剂等)；芳香剂、着色剂、防腐剂和抗氧化剂等。所得产物的示例包括但不限于气雾剂或喷雾。或者，所得的产物可以是扩散器、项圈、喷雾项圈、泡沫、浸涂物、擦拭巾、乳膏、凝胶、乳液或织物服装。

本发明的另一个目的是提供调节或积极影响脊椎动物行为的方法，该方法包括给予包含影响特定脊椎动物有效量的介素(如雄烯酮)的组合物，其中行为被调节的脊椎动物与发出该介素作为信息素的动物不同。

本发明的另一个目的是提供用于积极影响不同脊椎动物物种行为(例如，镇静)的包含介素的制剂。已知是一个物种的信息素的化学物可对其他脊椎动物物种的成员具有强的积极的行为或生理影响是意料之外的和令人惊讶的，因为根据定义，信息素仅对特定物种发挥作用。

根据以下说明书并结合所示的附图，通过说明和实施例、本发明的某些实施方式，该用途的各种目的和优势将是显而易见的。

附图简述

图1是确定采用雄烯酮喷雾处理是否会增加狗的心率的比较测试的图示。

发明详述

广义上，本文使用的介素是指在一个脊椎动物物种中作为信息素发出的化学物，其影响不同物种的行为或生理而无需有益于和/或损害发出者或接受物种(尽管介素可有益于或损害发出或接受物种)。在此之前还没有开发出具有跨物种效应而对发出物种不具益处或害处的特定信息素的令人惊讶的用途。

本发明涉及雄烯酮作为介素而非本领域已知或已经利用的猪的信息素在组合物中的用途，以影响不同脊椎动物物种(诸如，狗、猫、马、蛙、蛇、鸟等)的行为。本领域技术人员会理解，可能发现本文未具体公开的其他信息素在其他物种中具有不同或可能有益的影响，所述其他信息素诸如来自其他哺乳动物(例如，猫、虎、狮、象、仓鼠、小鼠和大鼠)的信息素、来自爬行动物(例如，蛇和蜥蜴)的信息素、来自鸟类的信息素或来自两栖类的信息素。雄烯酮已作为介素被配制成组合物以给予不同物种(诸如，马、狗、猫和其他脊椎动物)，从而积极调节不同物种的成员的行为。

具体地，向狗给予作为介素的雄烯酮令人惊讶地导致使表现出焦虑行为的狗的活动性减少或对于所述狗的行为的积极调节。

本发明提供了包含介素的组合物，该介素是由一个物种发出的已知是该物种的信息素但调节不同脊椎动物物种行为的化学物或其相关化合物。当对不同的脊椎动物物种或其附近施用包含该介素的组合物时，所述动物镇定一段时间。在一种脊椎动物物种中发现的天然化合物可对另一个脊椎动物物种的成员具有巨大、有意义的影响是意料之外且令人惊讶的，因为根据定义，信息素具有物种特异性。2-甲基丁-2-烯醛(2012年9月20日提交的美国专利申请号13/623,319所述)和雄烯酮是以跨物种方式作用的两个示例。按照本发明的教导，其他化学物及其跨物种有益用途对于本领域技术人员会是显而易见的。

I.制剂

本发明的制剂可以包含天然分泌的、从分泌物分离的或从脊椎动物物种合成复制的化学物。可按照本发明使用的化学物是对分泌它们的物种产生某种影响但当用于另一个物种时产生不同影响的那些化学物。

本发明的制剂包含介素。在一个优选的实施方式中，采用称为雄烯酮的雄激素类固醇作为介素。所述组合物中使用的雄烯酮可以是从雄性猪直接分泌或分离的天然信息素，或由以下结构式表示的合成的化合物(包括其对映异构体、非对映体或外消旋体)：

根据本发明也可使用雄烯酮相关的化合物，所述化合物包括但不限于雄甾烯醇(androstenol)、雄二烯酮和雌四烯醇(estratetraenol)。所述制剂中雄烯酮的量将是对积极调节或改变特定动物行为(例如，镇静、安抚紧张或降低心率)有效的量。通常，所述制剂中雄烯酮的量应是总组合物的至少0.001％(w/w)。例如，在所述组合物中存在的雄烯酮的浓度可以是约0.001％-约1％(w/w)。具体地，本发明的组合物可以含有约0.001％、0.005％、0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％或1％(w/w)的雄烯酮。在一个实施方式中，所述组合物中雄烯酮的浓度可以是约0.001％-约1％(w/w)。在另一个实施方式中，所述组合物中雄烯酮的浓度可以是约0.01％-约0.1％(w/w)。优选地，所述组合物中存在的雄烯酮的浓度是约0.01％-约0.05％(w/w)，并且最优选地，所述组合物中的雄烯酮的浓度是约0.01％(w/w)。

在一个实施方式中，本发明的组合物含有雄烯酮。在另一个实施方式中，所述组合物包含雄烯酮和至少一种其他信息素组合物的组合。例如，所述组合物可以包含雄烯酮和至少一种其他信息素组合物，诸如在美国公开号2011/0150822中所述的组合物。

除了介素以外，所述制剂可以任选地含有其他组分，诸如溶剂、推进剂、表面活性剂、增稠剂和芳香剂(即，“其他组分”)。所述制剂可以包含不同量的一种其他组分或前述其他组分的任意组合。每种类型的其他组分的合适示例如下详述。

在优选的实施方式中，所述制剂包含至少一种运载体溶剂。合适的运载体溶剂通常为本领域已知并且公认包括亲脂型有机稀释剂、醇类、乙二醇、丙二醇、双丙甘醇、醚、氯仿、苯、二硫化碳、油类(包括非挥发性和挥发性液体和油类)、水，及其组合。例如，可使介素溶于合适的醇并且以液体形式提供，诸如泵式喷雾器，或用于插入式扩散体(plug-in diffuser)。合适的醇类包括乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、戊醇、己醇、庚醇、辛醇和苯乙醇。在一个优选的实施方式中，醇类包括乙醇、异丙醇、丁醇和苯乙醇。醇溶剂可以与水或亲脂性有机稀释剂或运载体(诸如乙二醇、丙二醇、双丙甘醇、双丙甘醇单乙基醚、双丙甘醇甲基醚或DowQ7-9180硅酮液体)合并。在优选的实施方式中，所述溶剂是水和选自乙醇和异丙醇的醇的组合。例如，所述组合物中存在的溶剂的量是该组合物的约0.5％-99.99％(w/w)。例如，所述组合物可以含有约0.5％、1％、1.5％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％和99.99％(w/w)的溶剂。优选地，所述组合物中存在的水的量是该组合物的约70％-约99.99％(w/w)，并且最优选是约80％-约98.5％(w/w)。优选地，所述组合物中存在的醇的量是约1％-约20％(w/w)，并且最优选是约1.5％-约10％(w/w)。

所述制剂可另包含推进剂。合适的推进剂包括含氯氟烃(CFC)(诸如三氯一氟甲烷、二氯二氟甲烷和二氯四氟乙烷)；氢氯氟烃(HCFC)或氢氟烃(HFC)(如氯代二氟甲烷、三氟一氟乙烷乙烷、氯代二氟乙烷、二氟乙烷和七氟丙烷)；烃类(如丙烷、丁烷和异丁烯)；以及压缩气体(如氮气、二氧化碳和一氧化二氮)，以及上述推进剂的任何组合。在一个实施方式中，所述推进剂是丙烷。在另一个实施方式中，所述推进剂是1，1-二氟乙烷。所述推进剂并不包含Tumorigen化合物类型的惰性气体，该类型包括1，1，1，2-四氟乙烷、氯代二氟甲烷和二氯二氟甲烷。优选地，所述推进剂的闪点低于约-50℃。通常，当组合物中包含推进剂时，其占该组合物的约75％-约99.99％(w/w)。例如，所述组合物可以含有约75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、96.5％、97％、97.5％、95.6％、97.7％、97.8％、97.9％、98％、98.5％、99％、99.5％或99.99％(w/w)的推进剂。在一个实施方式中，所述组合物含有约85％-约99.99％(w/w)，并且最优选地含有约95％-约99.99％(w/w)的推进剂。

所述制剂可以任选地包含一种或多种表面活性剂(也称为表面活性物质)。表面活性剂通常用于制备指定将组合物制成乳液的本发明的那些实施方式。可以配制油包水或水包油乳液。合适的表面活性剂的示例包括：非离子型乙氧基化和非乙氧基化的表面活性剂、松香酸、杏仁油PEG、蜂蜡、丁基葡糖苷癸酸酯(butylglucoside caprate)、C18-C36酸二醇酯、C9-C15烷基磷酸酯、癸酸/辛酸甘油三酯PEG-4酯、鲸蜡硬脂醇-7、鲸蜡醇、鲸蜡醇磷酸酯、谷物油PEG酯、DEA-鲸蜡醇膦酸酯、糊精月桂酸酯、二月桂醇聚醚-7柠檬酸酯、磷酸二肉豆蔻酯、甘油聚醚-17椰酸酯、甘油芥酸酯、甘油月桂酸酯、氢化蓖麻油PEG酯、异硬脂醇聚醚-11羧酸、卵磷脂、溶血卵磷脂、壬苯醇醚-9、辛基十二醇聚醚-20、棕榈油酸甘油酯、PEG二异硬脂酸酯、PEG硬酯胺(stearamine)、泊洛沙胺(poloxamine)、聚甘油、亚油酸钾、PPG、棉子糖肉豆蔻酯、己酰乳酰乳酸钠、辛酸钠、椰酸钠、异硬脂酸钠、生育酚磷酸钠、硬脂醇聚醚、TEA-C12-C13链烷醇聚醚-3硫酸酯、三-C12-C15链烷醇聚醚-6磷酸酯和十三烷醇聚醚。

在某些应用中，可能需要使所述制剂增稠。增稠或增粘剂的合适示例包括以下试剂：例如，丙烯酰胺共聚物、琼脂糖、支链淀粉、膨润土、藻酸钙、羧甲基纤维素钙、卡波姆(carbomer)、羧甲基壳多糖、纤维素胶、糊精、明胶、氢化牛脂、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基淀粉、棕榈酸异丙酯、藻酸镁、甲基纤维素、微晶纤维素、果胶、各种PEG、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚乙烯醇、各种PPG、丙烯酸钠共聚物、角叉菜胶钠、黄原胶和酵母β-葡聚糖。所述制剂中存在的增稠剂的量的范围为约1％-约30％(w/w)，优选约5％-约20％(w/w)，并且最优选约10％-约15％(w/w)。

所述组合物还可包含芳香剂。芳香剂可以是提供所需气味掩盖效果的任何芳香剂，由于特定的介素可能有刺激性气味。虽然可以采用多种芳香剂而不偏离本发明的范围，合适的芳香剂包括花香型香精、柑橘花、针叶树的油或提取物，或香料。花香型香精的示例包括玫瑰、丁香、薰衣草、栀子花和茉莉。合适的柑橘花包括橘和柠檬，而合适的针叶树的油或提取物包括松树和杜松。芳香剂通常可占所述组合物的约0.25％-约1％(w/w)。

II给予涂径

哺乳动物(包括犬类)有几个接收嗅觉信号的解剖学器官。两个最关键的“嗅觉”器官是主要嗅觉上皮(MOE)和犁鼻器(VNO)。其他感觉纤维位于可以感觉气味的鼻腔内，但是主要嗅球和辅助嗅球(接收来自VNO的信号)是主要整合系统。

嗅球位于大脑的前部。其发出神经元投射穿过骨骼并使这些突起延伸进入嗅觉上皮。MOE是富含血液供给和粘膜的大片区域，其中使气味气雾剂分子透过进入肺部。气味或水滴会沉降在MOE上，并且如果存在气味受体，则该气味受体会被结合并且导致感觉神经元的激活。在哺乳动物体内的所有基因中，嗅觉受体的基因数量最大。这表明了动物中嗅觉交流的重要性，其中的一些似乎在人中丢失了。

通常通过使动物吸入有效量介素供于递送的任何方法来向对象动物给予介素组合物。这样的给予方法包括，例如将包含介素的组合物放置或分布在动物的环境中，通过将组合物纳入可佩带的装置(如项圈)或通过将组合物施用(例如，喷射或擦拭)至动物生活环境中的表面上或直接施用在动物上(如其面部区域或头部)来进行所述给予。例如，可以使用气雾剂、泵式喷雾、泡沫、项圈、擦拭巾、浸涂物、液体、凝胶、洗剂和/或乳膏向动物局部给予介素组合物。术语“有效量”描述组合物中存在的足以使对象动物的动物行为发生显著改变(即，改善)的介素的量，所述行为的改变按照本文所述的行为观察来确定。所述有效量将取决于以下因素：如处理的行为的严重性；个体动物参数，包括年龄、身体情况、大小和体重；并行处理；处理频率；或给予模式。这些因素是本领域普通技术人员所熟知的，并可以用不超出常规的实验来落实。

在一个实施方式中，所述介素可以一般熟知的各种方式纳入固体载体材料中以形成项圈或标签，然后由动物携带该项圈或标签。所述固体载体材料选自这些材料，通常是聚合化合物，一般被认为适于释放活性化合物并且在本文下文中有进一步详细描述。或者，介素可以与溶剂合并形成液体溶液并且该液体溶液可以进一步制备成各种适于通过吸入递送给动物的制剂。例如，液体溶液可以进一步按照本领域熟知的方法制备，如泵式喷雾、气雾剂、凝胶、泡沫、洗涤液、浸涂物、乳膏、洗剂、凝胶、扩散体或专配制剂。

在一个实施方式中，使雄烯酮溶于或稀释于非水性有机溶剂或溶剂混合物中以形成溶液，所述溶液用于纳入含介素的泵式喷雾中。该溶液可任选地与至少一种其它信息素/介素或信息素/介素组合物合并。优选的泵式喷雾溶液会包含约0.01％(w/w)的雄烯酮、约10％(w/w)的异丙醇和约89％(w/w)的水。另外，可以向溶液添加约0.5％-1％(w/w)的芳香剂。

在另一个实施方式中，用溶剂溶解或稀释雄烯酮并且与推进剂合并以形成溶液，所述溶液用于纳入含介素的气雾喷雾组合物中。优选的气雾喷雾溶液会包含约0.01％(w/w)的雄烯酮、约2％(w/w)的乙醇和约97％(w/w)的丙烷。另外，可以向溶液添加约0.5％-1％(w/w)的芳香剂。

在另外的实施方式中，用溶剂和增稠剂溶解或稀释雄烯酮来形成用于扩散体的溶液。该溶液可任选地与至少一种其它信息素/介素或信息素/介素组合物合并。优选的扩散体溶液会包含约0.02％(w/w)的雄烯酮、约80％(w/w)-约85％(w/w)的溶剂、约15％(w/w)的增稠剂。另外，可以向溶液添加约0.25％-1％(w/w)的芳香剂。

在另外的实施方式中，该介素可以被纳入固体载体材料中以形成含有该介素(或者与至少一种另外的信息素/介素或信息素/介素组合物合并的介素)的基质组合物，如织物服装或项圈。含有介素的基质可以形成项圈，如本领域熟知并详述，例如美国专利号3,852,416。通常活性物(例如，介素)和提供基质的载体材料的掺合物通过挤出工艺形成条，然后每根条通过添加固定装置(诸如弯曲、按扣或钩)来形成项圈。形成所述基质(其中纳入介素)的固体载体材料是，例如具有合适的释放特性的聚合物或聚合物混合物，从而使释放自项圈的信息素被动物吸入。另外，所述含有介素的基质可以形成织物服饰，如本领域所述，例如美国公开号2010/00319632。介素优选占项圈或织物的约0.001％-约1％(w/w)，并且优选占约0.01％-约0.5％(w/w)。

用于形成制作项圈的固体基材的合适聚合物也是熟知的并且包括，但不限于：聚乙烯、聚乙酸乙烯酯、乙烯酸共聚物、乙烯丙烯酸酯、聚氨酯、丁二烯-苯乙烯、聚乙烯醇缩丁醛、聚氯乙烯(PVC)、聚烯烃、聚丙烯酸酯、和聚甲基丙烯酸酯，和硅酮聚合物。所述聚合物可以占项圈的约50％-约99.99％(w/w)，并且通常占项圈的约90％-约99.99％(w/w)。增塑剂可以纳入所述混合物中以使聚合物树脂更加柔韧。合适的增塑剂包括磷酸酯(例如，磷酸三甲苯基酯)或邻苯二甲酸酯(如邻苯二甲酸二辛酯或邻苯二甲酸二异癸酯(DIDP))。项圈也可以包含其他的添加剂，如稳定剂，例如抗氧化剂以保护项圈材料免受紫外光和其他氧化因子的降解。也可以包含润滑剂、着色剂和填料。

III.使用介素来调节动物行为的方法

本发明还涉及使用介素来积极调节不希望或不当的动物行为(例如，吠叫、跳跃、乞求和/或聚扰)或动物生理的方法，所述调节通过将动物暴露至有效量的基于介素的组合物来进行，其中该组合物包含至少约0.001％(w/w)的介素。所述组合物通常包含约0.001％-约1％(w/w)的介素。可以通过允许动物吸入的任何方法使动物暴露至该组合物一段足以使调节目标行为起效的时间，该效果按照行为观察来确定。通常，根据选择的给予途径、特定动物和情况，组合物对动物暴露的时间段将是至少1秒，但也可以是至少1小时、1小时-5小时、至少1天、至少1周、1周-4周、至少1个月或达到满意行为效应可能需要的任何时间段。例如，出现暂时诱发的焦虑(例如，去了一趟兽医办公室、被触摸或焰火)的动物可需要在焦虑诱发的事件之前、期间或之后短暂暴露至所述组合物以缓解焦虑和相关的行为。相反，对于较长和连续时间内处于紧张刺激下的动物(如在家庭中接触新宠物的宠物)而言，常规暴露至所述介素组合物一段延长时间可能是有益的。

对动物而言公认的压力来源包括，例如断奶、运输(尤其在机动车中)、讨厌的事物、缺少锻炼、分离焦虑、大噪音、诱发吠叫/跳跃/乞求或焦虑的事件、介绍给陌生人或动物，和访问兽医办公室。因暴露至此类事件或条件而应激的动物通常会展现出高度不希望的应激相关的行为症状。此类不希望的行为是公认的并且包括例如惧怕的行为，如畏缩或发抖；过度咀嚼、吠叫、乞求、走动，或过度躺倒；过于兴奋，如跳跃；对人或其他动物的侵袭性行为，如咆哮、猛扑或咬；物品破坏；和频繁排尿或遗粪。可以通过例如用包含介素组合物的气雾喷雾向对象动物喷射、使对象动物携带包含该组合物的项圈，或通过以液体扩散体等的形式在与诱发应激条件相关的物理区域内施用该组合物来测试该组合物对任何给定动物的功效。在任何情况下，该组合物具备足够的挥发性以供动物吸入从而暴露至足够量的组合物以产生明显的行为效应。例如，不希望的外部行为的减少是不难确定的(例如，侵袭表现、吠叫和/或跳跃的明显减少)并且可以通过观察诸如心率、体重变化和诸如皮质醇的应激激素的分泌的其他应激物理指示物来补充确定。当观察到不希望的行为时，可以使用本发明的组合物来诱导活动性较低、镇静和兴奋性减少的暂时状态。

在使用中，所述包含介素的组合物可以多种不同的方式实施，所述实施方式部分取决于靶向的动物和希望调节的行为。含有介素的液体溶液可简单地直接施用在动物的皮毛或皮肤上，或喷射在动物环境中的表面或目标物上，或扩散或喷射进动物环境的空气中。例如，可在例如，动物的鼻孔、面部、头部或其环境中喷射含有雄烯酮的示例性液体喷雾制剂(溶于合适的溶剂中)，从而其可以通过嗅觉被感觉到，以所需频率进行所述处理以得到希望的行为调节。另外，可将液体、气体或固体形式的介素纳入增塑材料(诸如PVC等)，所述增塑材料可随后形成标签，或可将所述介素纳入条状物以形成项圈。另外，所述介素组合物可在向动物实施任何上述递送模式之前与至少一种其它信息素/介素或信息素/介素组合物(天然或合成的)合并。

应理解用于组合物的介素可以纯浓缩物(100％浓度)形式，或用其它赋形剂稀释的组合物形式以剂型提供(即所述组合物中活性成分的量低于或等于99.99％，剩余部分由无活性的赋形剂组成)。如果稀释，在各种剂型中分配的介素的量可以是约1.0pg/mL-约1.0g/mL，更优选约1.0ng/mL-约1.0g/mL。本领域技术人员会理解，考虑到稀释，需调节添加到组合物的活性组分的体积并确保最终组合物包含适当终浓度的介素。本领域技术人员还会理解，组合物的各组分可以各种剂型提供，所述剂型包括但不限于：液体溶液或悬浮液、乳液、气雾剂和缓释基质等。

本发明的组合物可以多种方式施用，但是最好通过诸如以下的任何方式通过暴露嗅觉系统来施用，例如，直接在待调节行为的动物的面部区域上或环境中喷射薄雾。另外，本发明的方法最好通过让动物吸入组合物来进行，由于动物的鼻腔、鼻窦、肺和喉具有供芳族分子与嗅觉受体结合的大片面积。该组合物对动物或动物环境的施用可以根据所需频率重复以调节动物的行为。

除非另外定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有本发明提交时所属领域的技术人员通常所理解的同样含义。若具体定义，则本文提供的定义优于任何词典或外在定义。此外，除非本文另外提供，单数术语应包括复数且复数术语应包括单数。本文中，除非另有说明，使用“或”表示“和/或”。本发明中提及的所有专利和出版物通过引用纳入本文。

除非另有说明，本文使用的“一个”和“一种”表示一个或多个。

本文使用的“介素”表示任何天然分泌的或合成产生的由一个物种释放的化学物，当其给予不同脊椎动物物种的成员时，引发该不同物种的行为或生理上的变化，同时所释放的化学物对所述物种产生或不产生益处或损伤。

本文使用的“脊椎动物”或“脊椎动物物种”可与词语“动物”或“动物物种”互换地使用并且涵盖由是否具有脊柱所区分的动物的任何组。脊椎动物物种的示例包括，但不限于：家养动物，如猫和狗；小动物，如仓鼠、兔子、雪貂、大鼠、小鼠和豚鼠；商用动物，如马、绵羊、牛和猪；笼养动物，如猿、猩猩、虎、狮、熊、象、斑马；两栖动物，如蛙和蝾螈；爬行动物，如蛇、海龟、鳄鱼、短吻鳄和蜥蜴；和鸟类等。

尽管本文所述的发明易于各种改良和另外反复，其具体实施方式已于上详细描述。然而应理解，对于雄烯酮的详细描述并不旨在将本发明限制在公开的具体实施方式中。而是应理解本发明旨在包括落在权利要求书所定义的本发明的精神和范围中的所有改良、等价物，及替代方式。

实施例

实施例1-用于狗的含有雄烯酮的气雾剂喷雾组合物的制备

包括雄烯酮的气雾剂组合物按照表1所示的配方制备。

实施例2-测定含有作为介素的雄烯酮的气雾剂喷雾组合物调节犬类行为的功效

按照实施例1制备包含雄烯酮溶液的气雾剂喷雾组合物，但然后在异丙醇中稀释以得到对初始浓度的1∶1000稀释物。稀释的目的是为了掩盖雄烯酮的气味，其在高浓度下可被人闻到。该喷雾溶液置于用丙烷加压的金属喷雾器中。也向喷雾罐中添加噪音制造装置。当受压穿过小洞时，推进剂产生超过70分贝的声音。

在养有大量狗的商业研究设施中测试含有雄烯酮的气雾剂喷雾组合物的功效。指定的人与皮带拴着的平静的狗沿着狗窝的通道行走以鉴别出满足吠叫/跳跃标准的那些狗。皮带拴着的平静的狗在狗窝之间的中间通道中行走并且也在狗窝外蹲坐。为具有作为测试对象的资格，当平静的狗和该人在通道内时狗必须重复跳跃和吠叫。总共15只狗被选择作为测试对象。

这些狗被分为两个处理组。处理组1中的狗是对照组，并当观察到做出吠叫/跳跃行为时，仅用不含任何雄烯酮的有响声的喷雾处理。当观察到做出吠叫/跳跃行为时，用已添加含有雄烯酮的稀释喷雾组合物的有响声的喷雾罐处理处理组2中的狗。测试时间持续1分钟。如果在给予处理后狗不吠叫或跳跃持续至少60秒，狗吠叫/跳跃被认为是被“停止的”。在一些情况下，如果对照(安慰剂)喷雾没有使特定的狗停止吠叫/跳跃或其在初始处理后的60秒内恢复，那么所述狗受到有响声的喷雾加上雄烯酮的处理。

表2就功效而论列示了处理和结果。当仅将有响声的喷雾(安慰剂)直接施用在吠叫/跳跃的狗的面部/口鼻部时，44％的狗的吠叫和跳跃停止持续至少1分钟。当将有响声的喷雾加上雄烯酮直接施用在吠叫/跳跃的狗的面部/口鼻部时，100％的狗的吠叫/跳跃停止持续超过1分钟并且在评价者在场时没有恢复吠叫。

用雄烯酮喷雾再次喷射处理组1中初始未响应安慰剂的狗。在这些狗中，用雄烯酮再次喷射导致83.5％的狗保持平静并且不再吠叫/跳跃。总共12条狗接受了雄烯酮喷雾并且11条狗在用测试喷雾处理后较平静并且不再吠叫或跳跃，其得到91.7％的总功效率。在施用雄烯酮喷雾之后，有一条基于该标准并未响应的狗的吠叫/跳跃停止持续40秒，但是，之后虽然较为平静，仍恢复吠叫了40秒。

观察到稀释的雄烯酮造成狗立即停止吠叫/跳跃并且使狗更加平静，甚至表现得温和镇静使得它们对处理者更具合作性。该测试的结果表明对狗施用内含雄烯酮的喷雾是有用的训练手段，因为含有该介素的组合物以安全、人道的方式降低狗的兴奋性。

实施例3-测定向焦虑的狗施用雄烯酮对心率的影响

进行研究来测定用含有雄烯酮的气雾剂喷雾施用之后狗的心率是否增加。

施用实施例1中提供的配方制备的气雾剂喷雾，其含有约0.1μg/mL的雄烯酮和异丙醇。

给四条经确定为“焦虑”的狗穿上遥测外套和发射器来连续监测心率。狗的心率在处理前检测10分钟，用对照喷雾(仅异丙醇)处理后检测10分钟，并用含有雄烯酮和异丙醇的测试喷雾处理后检测10分钟。

图1显示所得心率数据。如该图所示，对照喷雾和雄烯酮喷雾都对狗的心率没有显著影响。

实施例4-含有雄烯酮的泵式喷雾的制备及在狗和马中的用途

含有雄烯酮的泵式喷雾制剂可以按照上述的常用工业技术制备。表3是可以用于制备包括雄烯酮的液体喷雾制剂的成分列表。

所得的喷雾制剂在喷射到狗或马的面部/口鼻部区域或环境中时会造成动物展现出趋向较平静举止的显著行为变化。

本领域技术人员会容易理解本文所述的方法、组合物和产物是示例性的实施方式的代表并且并不旨在限制本发明的范围。对本领域的普通技术人员而言，显而易见的是，可以对本发明进行各种取代和修改而不会偏离本发明的范围和精神。

本说明书中涉及的所有专利和出版物指示本发明涉及领域技术人员的水平。本文中所有专利和出版物通过引用纳入，就如各出版物被具体地和单独地说明通过引用纳入本文一样。

本文示例性地描述的本发明可以在缺少本文未具体描述的任意一个元素或多个元素、一个限制或多个限制的情况下实施。因此，例如，在本文的各个例子中，术语“包括”、“基本由......组成”和“由......组成”中的任何一个都可用其它两个中的任意一个代替。已经使用的术语和表达用作说明而非限制性的术语，这些术语和表达的使用并不排除所显示和所描述的特征或其部分的任何等同特征或其部分，但应认识到各种修饰都可能落入本发明要求的范围之内。因此，应理解尽管本发明通过优选的实施方式和任选的特征进行了具体地公开，但是本领域技术人员能够想到本文所揭示的内容的改变和变体，这些改变和变体应认为落在本发明权利要求书所限定的范围内。

Claims (30)

1.一种给予动物用于调节行为的组合物，该组合物包含约0.001％-约1％(w/w)的介素和约0.5％-99.99％(w/w)的至少一种运载体溶剂，其中给予所述动物的介素的量为约1.0pg/mL-约1.0g/mL。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述介素是雄烯酮。

3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，雄烯酮以所述组合物约0.01％-约0.1％(w/w)的量存在。

4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述至少一种溶剂选自下组：亲脂性有机稀释剂、醇类、乙二醇、丙二醇、双丙甘醇、醚、氯仿、苯、二硫化碳、非挥发性油类、挥发性液体、水，及其组合。

5.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述至少一种溶剂包含选自下组的醇：乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、戊醇、己醇、庚醇、辛醇和苯乙醇。

6.如权利要求5所述的组合物，其特征在于，所述醇选自下组：乙醇或异丙醇。

7.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述醇以所述组合物的约1％(w/w)-约20％(w/w)存在于所述组合物中。

8.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述的至少一种溶剂包含水。

9.如权利要求8所述的组合物，其特征在于，水以所述组合物的约70％-约99.99％(w/w)存在于所述组合物中。

10.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含推进剂。

11.如权利要求10所述的组合物，其特征在于，所述推进剂选自下组：含氯氟烃、氢氯氟烃、氢氟烃、烃、压缩气体，及其组合。

12.如权利要求11所述的组合物，其特征在于，所述推进剂包含丙烷或1，1-二氟乙烷。

13.如权利要求10所述的组合物，其特征在于，所述推进剂以所述组合物的约75％-约99.99％(w/w)存在于所述组合物中。

14.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含选自下组的其它成分：表面活性剂、增稠剂、芳香剂及其组合。

15.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含至少一种额外的信息素或信息素组合物。

16.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述动物选自下组：狗、猫、马和蛇。

17.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物以气雾剂喷雾或泵式喷雾的形式给予。

18.一种以积极方式调节动物行为的方法，所述方法包括：给予所述动物介素组合物一段时间，所述组合物包含约0.001％-约1％(w/w)的介素和约0.5％-99.99％(w/w)的至少一种运载体溶剂，其中向所述动物给予的介素的量为约1.0pg/mL-约1.0g/mL，并且其中所述动物选自下组：狗、猫、马和蛇。

19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述介素包括雄烯酮或其合成形式。

20.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述组合物还包含推进剂。

21.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述给予方法是吸入给予。

22.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述组合物被配制成喷雾、气雾剂、扩散体或缓释基质。

23.如权利要求22所述的方法，其特征在于，所述喷雾组合物和所述气雾剂组合物的给予包括：对所述动物喷射或对所述动物的环境喷射所述组合物。

24.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述一段时间为至少1秒。

25.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述一段时间为至少1周。

26.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述一段时间为至少1个月。

27.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述组合物包含至少一种额外的信息素或信息素组合物。

28.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述组合物包含0.01％(w/w)的雄烯酮、2.0％(w/w)的乙醇和97.99％(w/w)的丙烷。

29.一种以积极方式调节动物行为的方法，所述方法包括：给予所述动物有效量的介素气雾剂组合物一段时间，所述气雾剂组合物包含0.01％(w/w)的雄烯酮或其合成形式、2.0％(w/w)的乙醇和97.99％(w/w)的丙烷，其中所述动物选自下组：狗、猫和马。

30.一种以积极方式调节动物行为的方法，所述方法包括：给予所述动物有效量的介素喷雾组合物一段时间，所述组合物包含0.01％(w/w)的雄烯酮或其合成形式、10.0％(w/w)的异丙醇、89.49％(w/w)的水和0.5％(w/w)的芳香剂，其中所述动物选自下组：狗、猫和马。