CN103989017B - 鹌鹑用抗冷应激营养制剂 - Google Patents

Abstract

本发明属于动物营养技术领域，具体涉及一种鹌鹑用抗冷应激营养制剂。本发明制剂由以下重量份的原料制成：小麦水解蛋白60~75份、鹰嘴豆蛋白肽15~30份、维生素C？0.8~1.0份、含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂0.1~0.2份、流散剂0.8~1.1份、麦芽糊精4~6份和玉米淀粉2~4份。本发明制剂对于解决鹌鹑耐寒性差，鹌鹑生产中冬季房舍温度较低的现状具有重要作用，还能改善应激情况下鹌鹑的生理状态，提高鹌鹑的抗病力，加快鹌鹑对营养物质的吸收，促进蛋白质的合成，提高鹌鹑的生产性能和饲料利用率。

Description

鹌鹑用抗冷应激营养制剂

技术领域

本发明属于动物营养技术领域，具体涉及一种鹌鹑用抗冷应激营养制剂。

背景技术

鹌鹑产品由于风味优美、营养丰富而深受消费者青睐，鹌鹑在我国禽类的饲养量中位居第三，而我国的鹌鹑饲养量又占世界的五分之一，是世界第一鹌鹑养殖大国。鹌鹑是一种喜温怕寒的禽类，国内的鹌鹑养殖业主要集中在华东和华中地区，这些地区冬春季节的低温是引起鹌鹑生产性能下降和发病死亡的重要应激原，给鹌鹑生产造成巨大损失。因而，保证寒冷季节鹌鹑的健康和生产就成为鹌鹑生产中迫切需要解决的问题。但因鹌鹑饲养所需的温度较高，冬季若想通过人工采暖的方法来解决低温问题，会大大增加生产成本和碳排放，为此有些生产企业在饲料中使用抗生素来防病保生产，但抗生素会进入鹌鹑产品，并通过食物链进入人体。抗生素易产生耐药性甚至造成三致（致畸、致癌、致突变），严重危害人体健康和影响人类发病时药物的选择。由此，人们一直在寻找既能提高鹌鹑抗冷应激能力和生产性能，又无毒无残留的绿色添加剂。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的主要目的在于：提供一种无毒、无残留、抗冷应激能力和免疫机能强的鹌鹑用抗冷应激营养制剂。本发明制剂对于解决鹌鹑耐寒性差，鹌鹑生产中冬季房舍温度较低的现状具有重要作用，还能改善应激情况下鹌鹑的生理状态，加快鹌鹑对营养物质的吸收，促进蛋白质的合成，提高鹌鹑的生产性能和饲料利用率。

为达到以上目的，本发明通过以下技术方案来实现：

设计一种鹌鹑用抗冷应激营养制剂，由以下重量份的原料制成：小麦水解蛋白60~75份、鹰嘴豆蛋白肽15~30份、维生素C0.8~1.0份、含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂0.1~0.2份、流散剂0.8~1.1份、麦芽糊精4~6份和玉米淀粉2~4份。

对于上述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，优选由以下重量份的原料制成：小麦水解蛋白65~70份、鹰嘴豆蛋白肽20~25份、维生素C0.9份、含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂0.1份、流散剂1份、麦芽糊精5份和玉米淀粉3份。

对于上述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，更优选由以下重量份的原料制成：小麦水解蛋白65份、鹰嘴豆蛋白肽25份、维生素C0.9份、含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂0.1份、流散剂1份、麦芽糊精5份和玉米淀粉3份。

对于上述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，所述流散剂为硬脂酸钙、二氧化硅、硅酸钙中的至少一种。

对于上述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，所述含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂由以下步骤制备而成：1重量份亚硒酸钠与9重量份滑石粉混合后，倒入球磨机粉碎3~4小时，得到10wt%的亚硒酸钠高浓预混料；再取所述10wt%的亚硒酸钠高浓预混料2.2重量份与7.8重量份滑石粉搅拌混合15~20分钟，即制得含亚硒酸钠2.2wt%（含硒1wt%）的预混剂。

对于上述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，制备方法为：先将含硒1%的亚硒酸钠预混剂与麦芽糊精混匀，再加入其它成分混合均匀，即得。

所述鹰嘴豆蛋白肽经由以下方法制成：将8~10wt%的鹰嘴豆蛋白粉悬浮液置于酶反应器中，加热到50℃，用1mol/L的氢氧化钠溶液调整pH至8.0，然后按酶与蛋白质按1:100的质量比加入碱性蛋白酶，反应过程中滴加1mol/L的氢氧化钠溶液使pH稳定在7.5～8.5，反应2.5~3小时后，再加1mol/LHCl调整到pH7.0后，用0.3~0.5wt%中性酶水解1.5~2小时，将反应液加热至沸腾并保持5~10分钟灭酶，冷却到25~30℃后，再2000转/分钟离心10分钟，将上清液喷雾干燥，即可得到鹰嘴豆蛋白肽。

所述小麦水解蛋白经由以下方法制成：将9~10wt%的谷朊粉悬浮溶液置于酶反应器中，加热到50℃，用1mol/L的氢氧化钠溶液调整pH至8.0~8.3，然后按酶与蛋白质按1：100的质量比加入碱性蛋白酶，反应过程中滴入氢氧化钠溶液使pH稳定在8.0~8.3，反应2.5~3小时后，再加HCl溶液调整到pH7.0，用质量百分比为0.2~0.3%的风味酶水解1.5~2小时，将反应液加热至沸腾并保持5~10分钟灭酶，冷却到25~30℃后，再2000转/分钟离心10分钟，将上清液喷雾干燥，即可得到小麦水解蛋白。

本发明的积极有益效果：

本发明是将小麦水解蛋白、鹰嘴豆蛋白肽、维生素C和硒按合适的比例进行组合所形成的复合制剂，在鹌鹑料中的添加量为1.5~6%，适宜添加量为2~3%；所述原料在保持鹌鹑的生理平衡、提高鹌鹑的抗冷应激能力和健康水平、预防其发病死亡方面有协同作用，既能提高鹌鹑抗冷应激能力和生产性能，又无毒无残留，且生产方便，功能多样。

1.本发明制剂在鹌鹑处于低温环境时使用，能够提高鹌鹑的抗冷应激能力，有利于保持鹌鹑在寒冷情况时的内稳态，提高低温时鹌鹑的生产性能和抗病力，增加鹑场的经济效益和保证鹑产品的安全性。

2.本发明制剂能提高鹌鹑的生产性能和免疫机能，对于解决鹌鹑耐寒性差，而鹌鹑生产中冬季房舍温度较低的现状具有重要作用，改善应激情况下鹌鹑的生理状态，减少应激时鹌鹑的发病死亡。

3.本发明制剂能加快鹌鹑对营养物质的吸收，促进蛋白质的合成，提高鹌鹑的生产性能和饲料利用率。

以下为本发明各重要原料的积极作用：

（1）小麦水解蛋白是谷朊粉经酶解的产物，其粗蛋白质含量高达80%，氨基酸含量丰富，尤其是谷氨酰胺含量超过30%，谷氨酰胺既是机体组织间氮转移、氨传递的重要载体,也是肠點膜细胞、淋巴细胞、血管内皮细胞等快速增生细胞的主要能源物质，谷氨酰胺具有促进细胞快速增殖,增强动物免疫功能的作用，它还参与机体内还原剂GSH的合成,能增强机体清除自由基、抗氧化损伤和维持细胞结构的功能，在应激状态下,若不维持血液谷氨酰胺的浓度,而只改善机体内的氮平衡,不仅作用不显著,甚至可能对机体的免疫系统造成严重损害。

（2）鹰嘴豆蛋白肽是鹰嘴豆蛋白粉经酶水解的产物，属于小肽，是无毒、无残留的绿色营养性抗应激添加剂。鹰嘴豆蛋白肽能提高抗体的合成和分泌，改善营养物质的消化吸收，增强鹌鹑的抗冷应激能力，提高冷应激时鹌鹑的生产性能和减少鹌鹑的发病，且小麦水解蛋白和鹰嘴豆蛋白肽中的氨基酸具有互补性。

（3）硒能刺激鹌鹑体内产生免疫球蛋白和抗体，减少过氧化物的形成，提高鹌鹑的抗应激能力和抗病力。

（4）维生素C能提高机体抗应激能力，有助于防治缺铁性贫血，增强中性粒细胞的趋化性和变形能力，提高其杀菌力，并参与免疫球蛋白的合成，促进干扰素的产生，干扰病毒mRNA的转录，抑制病毒增生。

具体实施方式：

以下结合具体实施方式进一步阐述本发明。

实施例1一种鹌鹑用抗冷应激营养制剂，由以下方法制备而成：

（1）小麦水解蛋白的制备：将9~10wt%的谷朊粉悬浮溶液置于酶反应器中，加热到50℃，用1mol/L的氢氧化钠溶液调整pH至8.0~8.3，然后按酶与蛋白质比例1：100（质量比）加入碱性蛋白酶，反应过程中滴入氢氧化钠溶液使pH稳定在8.0~8.3，反应2.5~3小时后，再加HCl溶液调整到pH7.0，用0.2~0.3%（质量百分比）风味酶水解1.5~2小时，将反应液加热至沸腾并保持5~10分钟灭酶，冷却到25~30℃后，再2000转/分钟离心10分钟，将上清液喷雾干燥，即可得到小麦水解蛋白。小麦水解蛋白也可市购。

（2）鹰嘴豆蛋白肽的制备：将8~10wt%的鹰嘴豆蛋白粉（可市购，也可依照常规蛋白粉制备方法以鹰嘴豆为原料制成：鹰嘴豆粉脱脂→碱溶、浸提→离心→等电点沉淀→洗涤→低温干燥→鹰嘴豆蛋白）悬浮液置于酶反应器中，加热到50℃，用1mol/L的氢氧化钠溶液调整pH至8.0，然后按酶与蛋白质比例1:100（质量比）加入碱性蛋白酶，反应过程中滴加1mol/L的氢氧化钠溶液使pH稳定在8左右，反应2.5~3小时后，加1mol/LHCl调整到pH7.0后，用0.3~0.5wt%中性酶水解1.5~2小时，将反应液加热至沸腾并保持5~10分钟灭酶，冷却到25~30℃后，再2000转/分钟离心10分钟，将上清液喷雾干燥，即可得到鹰嘴豆蛋白肽。

（3）含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂制备：1重量份亚硒酸钠与9重量份滑石粉混合后，倒入球磨机粉碎3~4小时，得到10wt%的亚硒酸钠高浓预混料；再取所述10wt%的亚硒酸钠高浓预混料2.2重量份与7.8重量份滑石粉搅拌混合15~20分钟，即制得含亚硒酸钠2.2wt%（含硒1wt%）的预混剂。

（4）制剂制备：先将含硒1%的亚硒酸钠预混剂与麦芽糊精混匀，再加入小麦水解蛋白、鹰嘴豆蛋白肽、维生素C、流散剂和玉米淀粉混合均匀即得，包装，置于阴凉干燥处待用。本发明具体方案通过以下配比实施（参看表1）。

表1鹌鹑用抗冷应激营养制剂的具体配比（重量百分比%）

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实施例2以下试验对本发明使用效果作进一步说明：

（1）本发明制剂对寒冷环境中鹌鹑体内与冷应激有关的生理生化指标的影响

试验设计：选择30日龄健康迪法克鹌鹑600只，随机分为6组，分别为0组（非冷应激对照组）、1组（冷应激对照组）、2～5组（试验组），每组100只，下设4个重复，每个重复25只。0组温度为23℃（适温），1~5组为13℃（处于冷应激状态中），试验时间为18天；0组、1组喂不含本发明制剂的基础日粮，2~5组分别喂含1.5%、2.0%、3%和4%（重量百分比）上述方案2抗冷应激营养制剂（实施例1）的日粮，试验日粮的组成及营养水平见表2。

表2试验日粮的组成及营养水平

注：预混料给每千克日粮提供赖氨酸3毫克，蛋氨酸1.5毫克，食盐3克，锰70毫克，锌60毫克，铜6毫克，铁80毫克，碘0.3毫克，胆碱0.5克，维生素A3000IU，维生素D31500IU，维生素E30IU，维生素K3毫克，烟酸70毫克，泛酸10毫克，核黄素3.5毫克。

数据采集：于试验结束的早晨空腹颈静脉采血约4毫升。测定γ－谷氨酸氨基转移酶(γ-GT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、碱性磷酸酶(ALP)和胆碱脂酶(CHE)等血清酶时血清样本制备：取2mL采集好的血液，置于已灭菌的离心管中，37℃恒温水浴20min，4℃、3500r/min离心10min，收集血清，将血清样品分装于离心管中，置于冰箱中-70℃低温保存待用。测定醛固酮（ALD）、皮质醇（UFC）、总脂(TG)、总蛋白(TP)、甲状腺素（T4）等指标时血清样本的制备：取1.5～2ml采集好的血液，注入离心管中，3000r/min离心15min，取出血清装入离心管，-20℃保存待用。γ-GT、ALT、CK、ALP、CHE、ALD、UFC采用试剂盒法，用全自动生化分析仪进行测定；T4采用试剂盒法，用化学发光酶标仪测定；TG、TP用全自动生化分析仪进行测定。

数据处理：试验数据用SPSS11.0统计软件进行统计分析，差异显著时用SSR法进行多重比较，试验数据用平均数±标准差表示。

结果统计：本发明制剂对鹌鹑血清酶含量的影响见表3，本发明制剂对鹌鹑血液中营养物质和与应激有关的激素含量的影响见表4。

表3试验鹌鹑的血清酶含量

注：同一列中肩标有相同字母的表示差异不显著（P＞0.05），字母相邻表示差异显著（P＜0.05），字母相隔表示差异极显著（P＜0.01），下表同。

表4试验鹌鹑血清营养物质和激素含量

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结果表明，添加鹌鹑抗冷应激营养制剂达到2%以上时，遭遇冷应激的鹌鹑血清酶（除CHE）明显低于未使用抗冷应激制剂的组（P<0.05），而维持在与非冷应激组接近的水平(P＞0．05)；添加2%的抗冷应激营养制剂，能明显提高血清中的总脂、总蛋白浓度，显著降低甲状腺素和皮质醇浓度（P<0.05）；添加3%以上的抗冷应激营养制剂能极显著提高血液中总脂（P<0.01），显著提高总蛋白（P<0.05），明显降低甲状腺素、醛固酮和皮质醇浓度（P<0.05），其总脂、总蛋白、甲状腺素、醛固酮与皮质醇的浓度与非冷应激对照组接近（P＞0.05）。表明在冷应激时，抗应激营养制剂能改善机体内环境，有利于保持生产性能。

（2）本发明制剂对冷应激时鹌鹑产蛋性能、发病死亡的影响

试验设计：选择100日龄黄羽蛋用鹌鹑1000只，随机均分为5组，每组设4个重复，每个重复50只，其中1组为对照组，另4组为试验组。对照组所用日粮为基础日粮（不含抗冷应激制剂），试验1、2、3、4组所用的日粮中分别加入1.5%、2%、3%和5%的上述方案2的抗冷应激营养制剂。各组日粮的组成与营养成分见表5。各组鹌鹑分别养在不同房舍内，各舍条件相同，笼养，光照时间16h，自由采食及饮水，常规饲养管理，自然通风。试验时间为2013年1月1日～28日。试验期鹑舍的最高温度为14.2℃，最低温度为8.6℃，平均为11.3℃，表明试验期鹌鹑处于冷应激中。

表5试验鹌鹑的日粮配比及营养水平

注：预混料给每千克日粮提供赖氨酸1.3毫克，蛋氨酸1.2毫克，食盐3克，锰80毫克，锌65毫克，铜5毫克，铁70毫克，碘0.2毫克，胆碱0.6克，维生素A2800IU，维生素D₃1400IU，维生素E40IU，维生素K4毫克，烟酸60毫克，泛酸12毫克，核黄素4毫克。

测定项目及计算方法：每天统计产蛋数、饲料消耗，每5d测定一次蛋重；每天观察鹑群，记录发病死亡情况。

发病率=发病鹑数×发病天数/试验鹑数×试验天数×100%

数据处理：试验数据用SPSS11.0统计软件进行统计分析，差异显著时用SSR法进行多重比较，试验数据用平均数±标准差表示。

数据统计：试验鹌鹑的产蛋性能和料蛋比见表6；试验鹌鹑的发病死亡率见表7。

表6试验鹌鹑的产蛋性能和料蛋比

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表7试验鹌鹑的发病死亡情况

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结果表明，添加2%的方案2的抗冷应激营养制剂，能够明显改善鹌鹑的产蛋率和发病率死亡率（P<0.05）；添加3%及以上的抗冷应激营养制剂，还能降低料蛋比（P<0.05），并进一步降低发病死亡率（P<0.01），添加5%的抗冷应激营养制剂与添加3%相比，对鹌鹑的生产和健康的影响差异很小（P＞0.05）。

（3）本发明制剂对鹌鹑生长性能和免疫机能的影响

试验设计：选择12日龄健康的朝鲜鹌鹑600只,随机分为5组,分别为对照组和试验1、2、3、4组，每组3个重复、每个重复40只。对照组饲喂不含抗冷应激制剂的基础日粮，试验1、2、3组分别在日粮中添加1.5%、2%、3%和6%的上述方案2的抗冷应激营养制剂，试验日粮的配比及营养水平见表8。试验时间为2013年3月1日至3月21日，共21天。饲养方式为网床平养，小间分区，自由采食与饮水，于14日龄接种新城疫疫苗免疫。试验期房舍最高温度为20℃，最低温度为12℃，平均温度为16℃，对于12日龄的朝鲜鹌鹑来说，处于冷应激状态。

表8试验鹌鹑的日粮配比及营养水平

注：预混料给每千克日粮提供赖氨酸2.5毫克，蛋氨酸1.3毫克，食盐3克，锰70毫克，锌60毫克，铜6毫克，铁80毫克，碘0.3毫克，胆碱0.5克，维生素A3200IU，维生素D₃1600IU，维生素E35IU，维生素K3.5毫克，烟酸75毫克，泛酸11毫克，核黄素4.5毫克。

数据采集：分别于试验的第0、21d早饲前称重、每天统计耗料量,计算不同处理组的平均采食量、日增重和料重比；于试验的第12天每个重复随机取2只鹌鹑于翅静脉采血0.5mL（采血前停食、停水2～3h），加入离心管，置于生化培养箱37℃保存30min，然后-4℃保存12h，取血清置离心管中，准备测定效价，采用红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验法测定新城疫抗体效价；于试验第21天称重后，每个重复抽取2只，取其胸腺、脾脏、腔上囊,剔除周围脂肪，称鲜重,计算免疫器官指数；于试验21d称重后，从每个重复随机抽取2只，翅静脉采血1.5～2mL/只，注入离心管中，离心15min(3000r/min)，取血清装至离心管中，于-22℃保存备用。对已制备的血清样品用全自动生化分析仪测定血清总蛋白(TP)，血清白蛋白(ALB)，免疫球蛋白G(IgG)；用免疫散射比浊法测定补体C3和补体C4的含量。

免疫器官指数=免疫器官鲜重（mg）/活重（g）×100%。

数据处理：试验数据用SPSS11.0统计软件进行统计分析，差异显著时用SSR法进行多重比较，试验数据用平均数±标准差表示。

数据统计：试验鹌鹑的生长性能见表9，试验鹌鹑的免疫器官指数和新城疫抗体效价见表10，试验鹌鹑的血清生化指标见表11。

表9试验鹌鹑的生长性能

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表10试验鹌鹑的免疫器官指数和新城疫抗体效价

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表11试验鹌鹑的血清营养成分和免疫指标

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结果表明,添加1.5%的抗冷应激营养制剂，可以改善胸腺指数、腔上囊指数、血清白蛋白和血清总蛋白的浓度（P<0.05），而日增重、料重比、脾脏指数、新城疫抗体效价、补体C4和免疫球蛋白等指标只有当抗冷应激营养制剂加到2%以上时才得到明显改善（P<0.05）。表明鹌鹑用抗冷应激营养制剂后，能够改善鹌鹑的生长性能和免疫机能，其适宜添加量为2～3%。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于，由以下重量份的原料制成：小麦水解蛋白60~75份、鹰嘴豆蛋白肽15~30份、维生素C0.8~1.0份、含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂0.1~0.2份、流散剂0.8~1.1份、麦芽糊精4~6份和玉米淀粉2~4份。

2.根据权利要求1所述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于，由以下重量份的原料制成：小麦水解蛋白65~70份、鹰嘴豆蛋白肽20~25份、维生素C0.9份、含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂0.1份、流散剂1份、麦芽糊精5份和玉米淀粉3份。

3.根据权利要求1所述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于，由以下重量份的原料制成：小麦水解蛋白65份、鹰嘴豆蛋白肽25份、维生素C0.9份、含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂0.1份、流散剂1份、麦芽糊精5份和玉米淀粉3份。

4.根据权利要求1~3任一项所述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于：所述流散剂为硬脂酸钙、二氧化硅、硅酸钙中的至少一种。

5.根据权利要求1~3任一项所述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于，所述含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂由以下步骤制备而成：1重量份亚硒酸钠与9重量份滑石粉混合后，倒入球磨机粉碎3~4小时，得到10wt%的亚硒酸钠高浓预混料；再取所述10wt%的亚硒酸钠高浓预混料2.2重量份与7.8重量份滑石粉搅拌混合15~20分钟，即得含硒1wt%的亚硒酸钠预混剂。

6.根据权利要求1~3任一项所述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于，所述鹰嘴豆蛋白肽经由以下方法制成：将8~10wt%的鹰嘴豆蛋白粉悬浮液置于酶反应器中，加热到50℃，用1mol/L的氢氧化钠溶液调整pH至8.0，然后按酶与蛋白质按1:100的质量比加入碱性蛋白酶，反应过程中滴加1mol/L的氢氧化钠溶液使pH稳定在7.5～8.5，反应2.5~3小时后，再加1mol/LHCl调整到pH7.0后，用0.3~0.5wt%中性酶水解1.5~2小时，将反应液加热至沸腾并保持5~10分钟灭酶，冷却到25~30℃后，再2000转/分钟离心10分钟，将上清液喷雾干燥，即可得到鹰嘴豆蛋白肽。

7.根据权利要求1~3任一项所述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于，所述小麦水解蛋白经由以下方法制成：将9~10wt%的谷朊粉悬浮溶液置于酶反应器中，加热到50℃，用1mol/L的氢氧化钠溶液调整pH至8.0~8.3，然后按酶与蛋白质按1：100的质量比加入碱性蛋白酶，反应过程中滴入氢氧化钠溶液使pH稳定在8.0~8.3，反应2.5~3小时后，再加HCl溶液调整到pH7.0，用质量百分比为0.2~0.3%的风味酶水解1.5~2小时，将反应液加热至沸腾并保持5~10分钟灭酶，冷却到25~30℃后，再2000转/分钟离心10分钟，将上清液喷雾干燥，即可得到小麦水解蛋白。

8.根据权利要求1~3任一项所述的鹌鹑用抗冷应激营养制剂，其特征在于，所述抗冷应激营养制剂的制备方法为：先将含硒1%的亚硒酸钠预混剂与麦芽糊精混匀，再加入其它成分混合均匀，即得。