CN103969379A - 一种液相色谱检验的测量值取得方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种液相色谱检验的测量值取得方法，包括如下步骤：取得第一色谱流出曲线；由第一色谱流出曲线得到基线；获取样品组分中所需组分在第一色谱流出曲线中对应色谱峰的波峰和波谷值；获取并保留所需组分对应的色谱峰在上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，并将所述色谱峰的第一上升曲线平移得第二上升曲线；同理，获取第一下降曲线和第二下降曲线，进而获取第一色谱峰；依据第一色谱峰计算出所需组分的含量值，并由相同方法获得第一色谱流出曲线中其他组分的含量值，再由所需组分的含量值及其他组分的含量值得到测量值。实施本发明的液相色谱检验的测量值取得方法，具有以下有益效果：引入的误差较小。

Description

一种液相色谱检验的测量值取得方法

技术领域

本发明涉及医学色谱分析领域，更具体地说，涉及一种液相色谱检验的测量值取得方法。

背景技术

糖化血红蛋白是红细胞中血红蛋白与血糖结合的产物，其浓度与血糖浓度成正比，能在人体血液中保持120天左右，可以反映患者近8～12周的血糖控制情况，是作为诊断糖尿病的重要依据之一。

目前测定糖化血红蛋白的方法主要有离子层析法、电泳法、免疫法、酶法等，而离子层析法作为最重要的检测方法之一，正越来越被广泛的使用，但是对于离子层析法检测出的色谱流出曲线却一直都没有一个准确的函数模型。大部分色谱工作者在解析分割色谱峰时，一直沿用图1所示的中垂线法、图2所示的三角形法、图3所示的切线法等几何方法进行各组分的分割及定量计算。由于它们皆为近似的方法，且都是在色谱峰为对称的高斯峰的前提下建立的，因此在将它们用于实际非对称色谱流出曲线时难免会引入较大的误差。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术的上述几种方法对非对称的拖尾峰进行分割和定量时引入误差较大的缺陷，提供一种引入的误差较小的液相色谱检验的测量值取得方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：构造一种液相色谱检验的测量值取得方法，包括如下步骤：

A)取得第一色谱流出曲线；

B)由所述第一色谱流出曲线得到基线；

C)获取所述样品组分中所需组分在所述第一色谱流出曲线中对应色谱峰的波峰和波谷值；

D)获取所述所需组分对应的色谱峰在所述波峰与波谷之间上升段的最大斜率和下降段的最小斜率；

E)保留所述上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，并将所述色谱峰上升段波谷至上升段斜率最大点处的第一上升曲线，沿着所述上升段斜率最大点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至上升段波谷到达基线位置得第二上升曲线，同理，将所述色谱峰下降段斜率最小点处至下降段波谷的第一下降曲线，沿着所述下降段斜率最小点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至下降段波谷到达基线位置得第二下降曲线，再在第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线上升段和下降段之间各补上一条斜率分别与所述上升段最大值斜率值和下降段斜率最小值相等的直线得第一色谱峰；

F)依据所述第一色谱峰计算出所述所需组分的含量值，并由相同方法获得第一色谱流出曲线中其他组分的含量值，再由所需组分的含量值及其他组分的含量值得到测量值；

在本发明所述的液相色谱检验的测量值取得方法中，所述步骤B)进一步包括：

B1)取得第一色谱流出曲线中起始位置处第一设定个数点对应的色谱值；

B2)计算所述第一设定个数点色谱值的平均值，所述基线的色谱值为所述平均值。

在本发明所述的液相色谱检验的测量值取得方法中，所述对应色谱峰的波峰值和波谷值分别为所述对应色谱峰中色谱值的最大值和最小值。

在本发明所述的液相色谱检验的测量值取得方法中，所述步骤D)进一步包括：

D1)分别计算所述色谱峰在所述波峰与波谷之间上升段中第二设定个数点的斜率；

D2)求取所述第二设定个数斜率中的最大值即得到所述上升段的最大斜率；

D3)分别计算所述色谱峰在所述波峰与波谷之间下降段中第三设定个数点的斜率；

D4)求取所述第三设定个数斜率中的最小值即得到所述下降段的最小斜率；

上述步骤中，先顺序执行所述步骤D1)和D2)再顺序执行所述步骤D3)和D4)，或先顺序执行所述步骤D3)和D4)再顺序执行所述步骤D1)和D2)。

在本发明所述的液相色谱检验的测量值取得方法中，所述步骤E)进一步包括：

E1)保留所述色谱峰上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，计算所述色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别应向两边扩展的宽度及下降的高度；

E2)所述色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别按照所述应向两边扩展的宽度及下降的高度的值进行平移得到第二上升曲线和第二下降曲线；

E3)分别计算在所述第一曲线上升段和下降段与所述第二上升曲线和第二下降曲线间需补入的色谱值，并分别将所述需补入的色谱值补入到所述第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线的上升段和下降段之间得到第一色谱峰。

在本发明所述的液相色谱检验的测量值取得方法中，所述步骤F)进一步包括：

F1)将所述第一色谱峰进行积分得到所述所需组分的含量值；

F2)将所述第一色谱流出曲线中其他组分的色谱峰进行积分得到所述其他组分的含量值；

F3)将所述所需组分的含量值除以所述所需组分与所述其他组分含量值的和得到所述测量值。

在本发明所述的液相色谱检验的测量值取得方法中，所述步骤E3)中，所述第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线上升段和下降段之间补入的部分的斜率分别为所述第一曲线的上升段的最大斜率和下降段的最小斜率。

实施本发明的液相色谱检验的测量值取得方法，具有以下有益效果：由于采用了色谱峰分割方法，将第一色谱流出曲线在所需组分对应的色谱峰在上升段的最大斜率点和下降段的最小斜率点处将其分成两部分；保留所述上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，并将所述色谱峰上升段斜率最大点处至上升段波谷的第一上升曲线，沿着所述上升段斜率最大点处的切线方向往靠近基线的方向平移得第二上升曲线，同理，将所述色谱峰下降段斜率最小点处至下降段波谷的第一下降曲线，沿着所述下降段斜率最小点处的切线方向往靠近基线的方向平移得第二下降曲线，再在第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线上升段和下降段之间补上一条斜率与所述上升段最大值斜率值和下降段斜率最小值相等的直线得第一色谱峰；使处理后得到的第一色谱峰最大程度的接近了实际峰，因此对于实际情况下的非对称的拖尾峰可以最大程度的减少误差，所以其引入的误差较小。

附图说明

图1是背景技术中中垂线分割的示意图；

图2是背景技术中三角形分割的示意图；

图3是背景技术中切线分割的示意图；

图4是本发明实施例中液相色谱检验的测量值取得方法的流程图；

图5是所述实施例中由第一色谱流出曲线得到基线的具体流程图；

图6是所述实施例中获取所需组分对应的色谱峰在上升段的最大斜率和下降段的最大斜率的具体流程图；

图7是所述实施例中得到第一色谱峰的具体流程图；

图8是所述实施例中测量值取得的具体流程图；

图9是所述实施例中色谱检验系统的结构示意图；

图10是所述实施例中色谱检验系统检测出的色谱流出曲线的效果图；

图11是所述实施例中经液相色谱检验的测量值取得方法处理后得到的色谱流出曲线的效果图。

具体实施方式

为了便于本领域的普通技术人员能够理解并实施本发明，下面将结合附图对本发明实施例作进一步说明。

在本发明液相色谱检验的测量值取得方法实施例中，该方法的结构示意图如图4所示。图4中，该方法包括如下步骤：

步骤S01取得第一色谱流出曲线：本步骤中，也即从色谱检测系统中取得其输出的第一色谱流出曲线。

步骤S02由第一色谱流出曲线得到基线：操作条件稳定后，没有样品通过时，检测器所反映的信号-时间曲线为基线，也即基线是没有样品组分流出时的色谱流出曲线，基线反映检测系统噪声随时间变化的情况，稳定的基线应是一条水平直线。本步骤中，由第一色谱流出曲线得到基线。关于如何具体得出基线，稍后会加以描述。

步骤S03获取样品组分中所需组分在第一色谱流出曲线中对应色谱峰的波峰值和波谷值：本步骤中，利用在层析柱长度和液体流速都固定的条件下，色谱流出曲线出峰时间比较稳定的特性，获取样品组分中所需组分在第一色谱流出曲线中对应色谱峰的波峰值和波谷值，上述对应色谱峰的波峰值和波谷值分别为对应色谱峰中色谱值的最大值和最小值，其中，波谷值即为色谱图中色谱峰的尾端离基线的高度。具体来讲，每一组分都会对应一个色谱峰，每个色谱峰都有一个波峰和波谷，也即分别求色谱峰中所有色谱值的最大值和最小值。

本实施例中，利用求最大值和最小值的方法获取对应组分的波峰和波谷值，即波峰P_max＝MAX(Y_a1，Y_a1+1……Y_a1+n)，波谷P_min＝MIN(Y_b1，Y_b1+1……Y_b1+n)，其中P_max为所需组分的波峰值，Y_a1和Y_a1+n为可预知的出峰起始点色谱值和结束点色谱值，P_min为所需组分的波谷值，Y_b1和Y_b1+n为色谱曲线中两相邻组分的波峰值。

步骤S04获取所需组分对应的色谱峰在波峰与波谷之间上升段的最大斜率和下降段的最小斜率：本步骤中，获取所需组分对应的色谱峰在波峰与波谷之间上升段的最大斜率和下降段的最小斜率，也即分别获取所需组分对应的色谱峰在波峰与波谷之间上升段中各点对应斜率的最大值和下降段中各点对应斜率的最小值。

步骤S05保留所述上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，并将所述色谱峰上升段波谷至上升段斜率最大点处的第一上升曲线，沿着所述上升段斜率最大点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至上升段波谷到达基线位置得第二上升曲线，同理，将所述色谱峰下降段斜率最小点处至下降段波谷的第一下降曲线，沿着所述下降段斜率最小点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至下降段波谷到达基线位置得第二下降曲线，再在第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线上升段和下降段之间各补上一条斜率分别与所述上升段最大值斜率值和下降段斜率最小值相等的直线得第一色谱峰：本步骤中，将上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线保持不变，也即上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之上的部分保持不变，并将所述色谱峰上升段斜率最大点处至上升段波谷的第一上升曲线，沿着所述上升段斜率最大点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至上升段波谷到达基线位置得第二上升曲线，同理，将所述色谱峰下降段斜率最小点处至下降段波谷的第一下降曲线，沿着所述下降段斜率最小点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至下降段波谷到达基线位置得第二下降曲线，再在第二上升曲线上靠近第一曲线的端点与第一曲线上升段斜率最大点间补充一条斜率与所述第一曲线上升段最大斜率值相等的直线，同样在第一曲线下降段斜率最小点和第二下降曲线上靠近第一曲线的端点间补上一条斜率与所述下降段斜率最小值相等的直线，这样，所述第二上升曲线、第二下降曲线、第一曲线及补充的直线部分组成第一色谱峰。

步骤S06依据所述第一色谱峰计算出所述所需组分的含量值，并由相同方法获得第一色谱流出曲线中其他组分的含量值，再由所需组分的含量值及其他组分的含量值得到测量值：本步骤中，也即根据第一色谱峰计算出所需组分的含量值，并由相同的方法获得所述第一色谱流出曲线中其他组分的含量值，再将所需组分的含量值除以所述第一色谱流出曲线中所述所需组分和其他组分含量值的和获得测量值。

对于本实施例而言，上述步骤S02可进一步进行细化，其细化后的具体流程图如图5所示。图5中，步骤S02进一步包括：

步骤S21取得第一色谱流出曲线中起始位置处第一设定个数点对应的色谱值：本步骤中，取得第一色谱流出曲线中起始位置处第一设定个数点对应的色谱值，本实施例中，第一设定个数为n，n值根据具体需要可改变；Y₁，Y₂，...，Yn为对应n个取样点上的色谱值。

步骤S22计算第一设定个数色谱值的平均值，基线的色谱值为平均值：本步骤中，计算第一色谱流出曲线开始端n个点的色谱值Y1，Y2，...，Yn的平均值A：其中，A为基线值，n为取样点个数，Yn为第n个取样点上的色谱值。

对于本实施例而言，上述步骤S04可进一步进行细化，其细化后的具体流程图如图6所示。图6中，步骤S04进一步包括：

步骤S41分别计算色谱峰在波峰与波谷之间上升段中第二设定个数点的斜率：本实施例中，第二设定个数为n，本步骤中，通过计算色谱峰中相邻两点对应的色谱值差值来获取色谱峰中波峰与波谷之间上升段中n个点的斜率K_c1，K_c1+1......K_c1+n。

步骤S42求取第二设定个数斜率中的最大值即得到上升段的最大斜率：本步骤中，通过求最大值的方法来获取对应组分色谱峰在波峰与波谷之间上升段的最大斜率K_up＝MAX(K_c1，K_c1+1......K_c1+n)，其中，K_up为色谱峰上升段最大斜率，K_c1和K_c1+n为所需组分对应色谱峰的起始波谷处斜率和波峰处斜率。

步骤S43分别计算色谱峰在波峰与波谷之间下降段中第三设定个数点的斜率：本实施例中，第三设定个数为n，本步骤中，通过计算色谱峰中相邻两点对应的色谱值差值来获取色谱峰中波峰与波谷之间下降段中n个点的斜率K_d1，K_d1+1......K_d1+n。

步骤S44求取第三设定个数斜率中的最小值即得到下降段的最小斜率：本步骤中，通过求最小值的方法来获取对应组分色谱峰下降段的最小斜率K_down＝MIN(K_d1，K_d1+1......K_d1+n)，其中，K_down为色谱峰在波峰与波谷之间下降段的最小斜率，K_d1和K_d1+n为所需组分对应色谱峰的波峰处斜率和结束波谷处斜率，其中K_d1＝K_c1+n。

值得一提的是，本实施例中，上述步骤S41至S44中，可先顺序执行步骤S41)和S42)再顺序执行所述步骤S43)和S44)，或先顺序执行步骤S43)和S44)再顺序执行所述步骤S41)和S42)。

针对本实施例而言，上述步骤S05可进一步进行细化，其细化后的具体流程图如图7所示。图7中，步骤S05进一步包括：

步骤S51保留色谱峰上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，计算色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别向两边扩展的宽度及下降的高度：本步骤中，保留色谱峰上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，计算色谱峰剩余部分的上升段和下降段应分别向两边扩展的宽度及下降的高度，具体来讲，分别经过如下计算： 其中L_up和L_down为色谱峰剩余部分的上升段和下降段应向两边扩展的宽度，H_up和H_down为色谱峰剩余部分的上升段和下降段应下降的高度。

步骤S52色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别按照应向两边扩展的宽度及下降的高度的值进行延伸得到第二上升曲线和第二下降曲线：本步骤中，色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别按照向两边扩展的宽度及下降的高度的值进行平移得到第二上升曲线和第二下降曲线，具体来讲，依次经过如下计算：r＝a-L_up，s＝b-L_down，Y_{[r，r+1，......r+n]}＝Y1_{[a，a+1，......a+n]}-H_up，Y_{[s，s+1，......s+n]}＝Y_{1[b，b+1，......b+n]}-H_down，其中，r和a分别为色谱峰剩余部分的上升段平移后和平移前X轴方向的取样点，s和b分别为色谱峰剩余部分的下降段平移后和平移前X轴方向的取样点。Y_{[r，r+1，......r+n]}和Y_{1[a，a+1，......a+n]}分别为色谱峰剩余部分的上升段平移后和平移前的色谱值，Y_{[s，s+1，......s+n]}和Y_{1[b，b+1，......b+n]}为色谱峰剩余部分的下降段平移后和平移前色谱值。则Y_{[r，r+1，......r+n]}为第二上升曲线，Y_{[s，s+1，......s+n]}为第二下降曲线。

步骤S53分别计算在上升段和下降段需补入的色谱值并分别将其补入到第二上升曲线和第二下降曲线与第一曲线上升段和下降段之间即得到第一色谱峰：本步骤中，具体经过如下计算： 其中，Y_{[t，t+1，......t+n]}为上升段应补的色谱值，Y_{[u，u+1，......u+n]}为下降段应补的色谱值，m为应补的点数。将Y_{[t，t+1，......t+n]}与Y_{[u，u+1，......u+n]}分别补入到第二上升曲线和第二下降曲线与第一曲线上升段和下降段之间后，即可得到第一色谱峰。值得一提的是，第二上升曲线和第二下降曲线与第一曲线上升段和下降段之间补入部分直线的斜率分别为上升段的最大斜率和下降段的最小斜率。

对于本实施例而言，上述步骤S06可进一步进行细化，其细化后的具体流程图如图8所示。图8中，步骤S06进一步包括：

步骤S61将第一色谱峰进行积分得到所需组分的含量值：本步骤中，将第一色谱峰进行积分得到所需组分的含量值，也即经过∫Y_B，其中，∫Y_B为B组分的积分值也即B组分的含量值。

步骤S62用与获取所述第一色谱峰相同的方法，获取第一色谱流出曲线中其他组分的色谱峰，然后进行积分得到其他组分的含量值也即经过∫Y_A、∫Y_C，其中∫Y_A、∫Y_C，为所述第一色谱流出曲线中其他组分的含量值。

步骤S63将所需组分的含量值除以所有组分含量值的和得到测量值：本步骤中，将所需组分的含量值除以所述第一色谱曲线中所述所需组分和其他组分含量值的和得到测量值，也即其中，B1为色谱曲线中所需组分占总组分的百分比值，也即B组分浓度的测量值。

图9为本实施例中液相色谱检验的测量值取得方法所附色谱检测系统的结构示意图。图9中，该色谱检测系统包括用于发光的单色光发光装置1、用于流通洗脱后的不同组分的血红蛋白的比色池2及用于检测的光电转换装置3，其中，比色池2内部有一可透射单色光的通孔和一条可供液体流过的流路。由于不同组分的血红蛋白在血液中的含量不同，因此这些经洗脱液冲洗出来的血红蛋白流经比色池2时，其对应的透射度也不一样，含量高的血红蛋白透射度低，光电转换装置3接收到的光比较弱，对应的电压就小，同理，含量低的血红蛋白对应的电压就高。该色谱检测系统还包括用于采集数据的A/D转换模块4，用于数据计算、存储数据的单片机5及用于图形显示的显示屏6。

具体来讲，洗脱后的不同组分的血红蛋白流经比色池2时，因其透射度不同，所以当用单色光发光装置1照射比色池2时，光电转换装置3接收到的光信号强弱不一致，浓度高的血红蛋白透射度低，光电转换装置3接收到的光信号就弱，对应转换成的电压就小，反之，则转换成的电压就大；A/D转换模块4每隔一定时间对这些电压信号进行采集并转换成数字信号，然后通过I2C协议传输至单片机5中，单片机5接收到这些数据后先将其转换成吸光度，然后再以吸光度为纵坐标，采样点数为横坐标，绘制相应的色谱流出曲线图，并通过串口将其发送到显示屏上显示。色谱流出曲线经过上述液相色谱检验的测量值取得方法处理后最大程度的接近实际的色谱流出曲线。

图10和图11分别为用本实施例中液相色谱检验的测量值取得方法处理前和处理后的色谱曲线，图11中的虚线部分即为处理后的第一色谱峰。图10中，最下面的一条线即是无样品组分流出时的色谱流出曲线即基线，K_up和K_down为所求得的色谱峰上升段和下降段的最大斜率，H_up和H_down为色谱峰上升段及下降段应下降的高度，根据斜率和高度则可以求出色谱峰剩余部分的上升段和下降段应向两边扩展的宽度L_up和L_down，然后根据相应的值将色谱峰剩余部分的上升段和下降段往下往两边扩展，直至色谱峰两尾端与基线重合，再在第一曲线和第二曲线的上升段之间和下降段之间用斜率与最大斜率相等的直线补上，图10中a，b即为补上的直线，虚线所示即为处理后的色谱峰，最终效果如图11所示，最后对n2-n3区间的图形进行积分，用相同的方法对n1-n4区间其他的色谱峰进行处理并积分，积分后将n2-n3区间的积分值除以n1-n4区间所有色谱峰积分的和即得到糖化血红蛋白HbA1c的百分比，也即得到糖化血红蛋白HbA1c的浓度。

总之，在本实施例中针对色谱峰拖尾及不对称的特性，以色谱峰斜率最大点处为分界线将色谱峰分成上下两部分，处理时保持色谱图(第一色谱流出曲线)上半部分(上升段的斜率最大点与下降段的斜率最大点之间的曲线即第一曲线)不变，下半部分(第一色谱流出曲线的其余部分)根据色谱峰两尾端(两个端点)离基线的高度，将所述色谱峰下半部分往两边沿切线方向平移，直至色谱峰两尾端与基线重合，具体就是先计算色谱峰剩余部分的上升段和下降段往两边平移时应下降的高度和应往外扩展的长度，然后再将色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别向两边扩展，并下降相同高度(上升段中所有点下降相同高度，下降段中所有点下降相同高度)后得到第二上升曲线和第二下降曲线，第二上升曲线和第二下降曲线与第一曲线上升段和下降段之间分别用斜率与上升段最大斜率值和下降段最小斜率值相等的直线补上，以达到近似真实色谱峰的波形。由于采用了独特的色谱峰分割方法，使处理后的色谱峰最大程度的接近了实际峰，因此本发明对于实际情况下的非对称的拖尾峰可以最大程度的减少误差。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (7)

1.一种液相色谱检验的测量值取得方法，其特征在于，包括如下步骤：

A)取得第一色谱流出曲线；

B)由所述第一色谱流出曲线得到基线；

C)获取所述样品组分中所需组分在所述第一色谱流出曲线中对应色谱峰的波峰和波谷值；

D)获取所述所需组分对应的色谱峰在所述波峰与波谷之间上升段的最大斜率和下降段的最小斜率；

E)保留所述上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，并将所述色谱峰上升段波谷至上升段斜率最大点处的第一上升曲线，沿着所述上升段斜率最大点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至上升段波谷到达基线位置得第二上升曲线，同理，将所述色谱峰下降段斜率最小点处至下降段波谷的第一下降曲线，沿着所述下降段斜率最小点处的切线方向往靠近基线的方向平移直至下降段波谷到达基线位置得第二下降曲线，再在第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线上升段和下降段之间各补上一条斜率分别与所述上升段最大值斜率值和下降段斜率最小值相等的直线得第一色谱峰；

F)依据所述第一色谱峰计算出所述所需组分的含量值，并由相同方法获得第一色谱流出曲线中其他组分的含量值，再由所需组分的含量值及其他组分的含量值得到测量值。

2.根据权利要求1所述的液相色谱检验的测量值取得方法，其特征在于，所述步骤B)进一步包括：

B1)取得第一色谱流出曲线中起始位置处第一设定个数点对应的色谱值；

B2)计算所述第一设定个数点色谱值的平均值，所述基线的色谱值为所述平均值。

3.根据权利要求2所述的液相色谱检验的测量值取得方法，其特征在于，所述对应色谱峰的波峰值和波谷值分别为所述对应色谱峰中色谱值的最大值和最小值。

4.根据权利要求1至3任意一项所述的液相色谱检验的测量值取得方法，其特征在于，所述步骤D)进一步包括：

D1)分别计算所述色谱峰在所述波峰与波谷之间上升段中第二设定个数点的斜率；

D2)求取所述色谱峰在所述波峰与波谷之间上升段中第二设定个数点的斜率中的最大值即得到所述上升段的最大斜率；

D3)分别计算所述色谱峰在所述波峰与波谷之间下降段中第三设定个数点的斜率；

D4)求取所述色谱峰在所述波峰与波谷之间下降段中第三设定个数点的斜率中的最小值即得到所述下降段的最小斜率；

上述步骤中，先顺序执行所述步骤D1)和D2)再顺序执行所述步骤D3)和D4)，或先顺序执行所述步骤D3)和D4)再顺序执行所述步骤D1)和D2)。

5.根据权利要求4所述的液相色谱检验的测量值取得方法，其特征在于，所述步骤E)进一步包括：

E1)保留所述色谱峰上升段的斜率最大点与下降段的斜率最小点之间的第一曲线，计算所述色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别应向两边扩展的宽度及下降的高度；

E2)所述色谱峰剩余部分的上升段和下降段分别按照所述应向两边扩展的宽度及下降的高度的值进行平移得到第二上升曲线和第二下降曲线；

E3)分别计算在所述第一曲线的上升段和下降段与所述第二上升曲线和第二下降曲线间需补入的色谱值，并分别将所述需补入的色谱值补入到所述第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线的上升段和下降段之间得到第一色谱峰。

6.根据权利要求5所述的液相色谱检验的测量值取得方法，其特征在于，所述步骤F)进一步包括：

F1)将所述第一色谱峰进行积分得到所述所需组分的含量值；

F2)将所述第一色谱流出曲线中其他组分的色谱峰进行积分得到所述其他组分的含量值；

F3)将所述所需组分的含量值除以所述所需组分与所述其他组分含量值的和得到所述测量值。

7.根据权利要求6所述的液相色谱检验的测量值取得方法，其特征在于，所述步骤E3)中，所述第二上升曲线和第二下降曲线分别与第一曲线的上升段和下降段之间补入的部分的斜率分别为所述第一曲线的上升段的最大斜率和下降段的最小斜率。