CN103958523A - 作为双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂的(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基化合物 - Google Patents

作为双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂的(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN103958523A
CN103958523A CN201280040793.9A CN201280040793A CN103958523A CN 103958523 A CN103958523 A CN 103958523A CN 201280040793 A CN201280040793 A CN 201280040793A CN 103958523 A CN103958523 A CN 103958523A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sleep
compound
insomnia
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201280040793.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103958523B (zh
Inventor
安德鲁·詹姆斯·莱贾德
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Eli Lilly and Co
Original Assignee
Eli Lilly and Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eli Lilly and Co filed Critical Eli Lilly and Co
Publication of CN103958523A publication Critical patent/CN103958523A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103958523B publication Critical patent/CN103958523B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

本发明描述了式(I)的双重H1反向激动剂/5-HT2A受体拮抗剂，其用途和其制备方法。

Description

作为双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂的(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基化合物
组胺通过其与至少四种不同的G蛋白偶联受体(H1-H4受体)的相互作用，在各种生理学过程中扮演重要角色。在CNS中，H1受体在睡眠调节循环中起到关键作用，并且已知H1拮抗剂/反向激动剂可引起嗜眠。
同样，5-羟色胺通过其与至少十四种不同的G蛋白偶联受体的相互作用，在各种生理学过程中起到重要作用。调节CNS中的5-HT2A受体在睡眠调节循环中起到关键作用，并且已经证明，5-HT2A拮抗剂可改善失眠患者的慢波睡眠和睡眠保持。
具有H1或5-HT2A反向激动剂或拮抗剂活性的化合物已经用于治疗失眠(例如，分别为多塞平和曲唑酮)，并且在动物睡眠研究中显示出显著的药理效果。然而，目前还不能商购得到选择性的双重活性H1/5-HT2A反向激动剂/拮抗剂。
WO 2007/022068描述了用于治疗睡眠障碍的某些取代的(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并二氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基和(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基化合物。
本发明提供了3-[4-(2,8-二甲基-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸和其可药用盐，尤其与其它组胺受体、5-羟色胺受体及其它生理学相关的受体相比较，特别是与5-HT2C受体、GABAA受体、毒蕈碱性受体、多巴胺能受体、肾上腺素能受体和hERG通道相比较，其对于H1受体具有高反向激动剂效能，对于5-HT2A受体具有高拮抗剂效能，并且对于这些受体具有良好的选择性。这些化合物通过动物模型还表明，它们可用于治疗以睡眠保持差为特征的睡眠障碍。因此，认为该化合物可用于治疗以睡眠潜伏期(sleep latency)差或睡眠保持差或这两者为特征的睡眠障碍，例如治疗失眠，例如长期或暂时性原发性失眠、或长期或暂时性继发性失眠、或这两种失眠。继发性失眠的例子包括但不局限于：与抑郁症(例如，严重抑郁症、情绪不良和/或循环性精神病)相关的失眠、与焦虑症(例如，广泛性焦虑症和/或社交恐惧症)相关的失眠、与疼痛(例如，肌纤维痛、慢性骨或关节疼痛，例如，与炎性关节炎或骨关节炎相关的疼痛，或糖尿病性的神经性疼痛)相关的失眠、与过敏性反应(例如，过敏性哮喘、瘙痒、鼻炎(rhinitus)、充血等)相关的失眠、与肺或呼吸道病症(例如，阻塞性睡眠呼吸暂停，反应性呼吸道疾病，等)相关的失眠、与精神病症、痴呆和/或神经变性疾病相关的失眠和/或与生理节奏睡眠障碍(例如，换班工作睡眠障碍、时差综合症、睡眠相位后移障碍、晚期睡眠障碍和非24小时睡眠-觉醒综合征，等)相关的失眠。
此外，当与选择性的5-羟色胺再摄取抑制剂共同给予时，本发明的化合物能够显示它们对非快速动眼睡眠(eye movement sleep)(NREM睡眠)效果的增强。
本发明提供式I化合物
或其可药用盐。也就是3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基丙酸或其可药用盐。
在本发明的另一个方面，提供了药物组合物，其包含式I化合物或其可药用盐以及至少一种可药用载体、稀释剂或赋形剂。此外，本发明的该方面提供了治疗失眠的药物组合物，所述失眠例如以睡眠潜伏期延长或睡眠保持差或这两者为特征的失眠，例如原发性失眠、时差综合症、换班工作睡眠障碍、睡眠相位后移障碍、晚期睡眠障碍和/或非24小时睡眠-觉醒障碍，该药物组合物包含式I化合物或其可药用盐以及一种或多种可药用赋形剂、载体或稀释剂。
本发明该方面的进一步的实施方案提供了药物组合物，其包含根据式I的化合物或其可药用盐以及至少一种可药用载体、赋形剂或稀释剂和任选的其它治疗成分。在本发明该方面的更进一步的实施方案中，该药物组合物进一步包含第二种治疗剂，这种治疗剂是5-羟色胺再摄取抑制剂，例如西酞普兰、帕罗西汀、氟西汀和/或氟戊肟胺(fluvoxetine)。
本发明还提供了治疗哺乳动物的失眠的方法，所述失眠例如以睡眠潜伏期延长或睡眠保持差或这两者为特征的失眠，例如原发性失眠、时差综合症、换班工作睡眠障碍、睡眠相位后移障碍、晚期睡眠障碍和/或非24小时睡眠-觉醒障碍，该方法包括：给予需要这种治疗的哺乳动物有效量的式I化合物或其可药用盐。在本发明该方面的另一个实施方案中，该方法进一步包括同时、分别或顺序联合给予第二种治疗剂，这种治疗剂是5-羟色胺再摄取抑制剂，例如西酞普兰、帕罗西汀、氟西汀和/或氟戊肟胺(fluvoxetine)。在这些治疗方法的一个具体实施方案中，所述哺乳动物是人。
本发明还提供了用于治疗的式I化合物或其可药用盐。在该方面范围内，本发明提供了用于治疗失眠的式I化合物或其可药用盐。在进一步实施方案中，所述失眠的特点在于睡眠潜伏期延长或睡眠保持差或这两者，例如，原发性失眠、时差综合症、换班工作睡眠障碍、睡眠相位后移障碍、晚期睡眠障碍和/或非24小时睡眠-觉醒障碍。在该方面的另一个实施方案中，本发明提供了用于与5-羟色胺再摄取抑制剂(例如西酞普兰、帕罗西汀、氟西汀和/或氟戊肟胺(fluvoxetine))同时、分别或顺序联用治疗失眠的根据式I的化合物或其可药用盐。在本发明该方面的一个具体实施方案中，该用途是在哺乳动物(特别是人)中使用。
本发明的另一个方面提供了式I化合物或其可药用盐在制备用于治疗失眠的药物中的用途，所述失眠例如以睡眠潜伏期延长或睡眠保持差或这两者为特征的原发性失眠，例如原发性失眠、时差综合症、换班工作睡眠障碍、睡眠相位后移障碍、晚期睡眠障碍和/或非24小时睡眠-觉醒障碍。本发明该方面的另一个实施方案提供了式I化合物或其可药用盐和第二种治疗剂在制备用于治疗失眠的药物中的用途，其中第二种治疗剂是5-羟色胺再摄取抑制剂，例如西酞普兰、帕罗西汀、氟西汀和/或氟戊肟胺(fluvoxetine)，所述失眠例如以睡眠潜伏期延长和/或睡眠保持差为特征的失眠，例如原发性失眠、时差综合症、换班工作睡眠障碍、睡眠相位后移障碍、晚期睡眠障碍和/或非24小时睡眠-觉醒障碍。
为了清楚起见，在整个该申请中，使用三环环结构的下列编号：
本发明的化合物具有碱性和酸性部分，并且相应地与许多有机和无机酸和碱反应，以形成可药用盐。本发明化合物的可药用盐意在包括在本申请范围内。本文使用的术语“可药用盐”是指对于活性生物体基本上无毒的本发明化合物的任何盐。这种盐包括Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2-19(1977)中所列的那些盐，它们为技术人员所知晓。
本文使用的缩写定义如下：
“盐水”是指饱和NaCl水溶液。
“DMEM”是指Dulbecco最小量Eagle培养基。
“DMSO”是指二甲亚砜。
“EDTA”是指乙二胺四乙酸。
“Equiv”是指一个或多个当量。
“FBS”是指胎牛血清。
“HEPES”是指4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸。
“HPLC”是指高压液相色谱。
“hr.”是指一个或多个小时。
“IC50”是指达到最大抑制的50%时的浓度。
“LC-MS”是指HPLC-质谱。
“MeOH”是指甲醇。
“min.”是指一分钟或多分钟。
“MS”是指质谱。
“MS(ES+)”是指使用电喷雾离子化的质谱。
“NMR”是指核磁共振。
“RO”是指受体占据。
“THF”是指四氢呋喃。
普通化学
可以根据下列合成实施例制备本发明的化合物。
制备例 1: 5-甲基噻吩-3-甲酸甲酯
将4-溴-2-甲基-噻吩 (24.5 g, 138.37 mmol)、双-(1,3-二苯基膦)丙烷 (2.35 g, 5.53 mmol)、乙酸钯(1.24 g, 5.53 mmol)、三乙胺(38.57 mL, 276.73 mmol)、甲醇(40 mL)和二甲亚砜(80 mL)混合并用一氧化碳吹扫反应容器。用一氧化碳加压至30 PSI并加热至70℃，在一氧化碳下搅拌过夜。在减压下蒸发挥发物以提供深橙色溶液。加入水(300 mL)并用乙酸乙酯(3 x 150 mL)萃取，然后用水(2 x 100 mL)洗涤合并的有机萃取物。经硫酸钠干燥、过滤并在减压下蒸发。添加10%乙醚/异己烷(500 mL)并通过过滤除去所得的深黄色沉淀物。在减压下蒸发滤液以提供液体形式的 5-甲基噻吩-3-甲酸甲酯(18.894 g, 87.42%收率)。1H NMR (400.13 MHz, CDCl3): δ 7.84 (d, J = 1.5, 1H), 7.16 (t, J = 1.5, 1H), 3.83 (s, 3H)和2.46 (d, J =1.5, 3H)。
制备例 2. 5-甲基噻吩-3-甲酸
向250 mL烧瓶中添加5-甲基噻吩-3-甲酸甲酯(16.4 g, 104.99 mmol, 1.00 equiv)并溶于甲醇(57.40 mL)中。加入NaOH (12.60 g, 314.97 mmol, 3 equiv)和水(19.68 mL)。在回流(65℃)下加热悬浮液45分钟直到通过LC-MS测定反应完全。将反应混合物冷却至室温，然后加入5M HCl水溶液(85 mL, 5vol)，再加入乙酸乙酯(130 mL, 7.5vol)。搅拌15分钟，直到所有固体溶解。分离各层并用乙酸乙酯(2 x 130 mL)萃取水层。用水(3 x 130 mL)、然后用盐水(85 mL)洗涤合并的有机物。经硫酸钠干燥、过滤并浓缩以提供5-甲基噻吩-3-甲酸固体(13.93 g, 93.32%收率)。MS (m/z): 141.0 (M-H). 1H NMR (400.13 MHz, CDCl3): 7.99 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 7.20 (d, t= 1.5 Hz, 1H), 2.50 (d, J = 1.5, 3H)。
制备例 3. 2-溴-5-甲基-噻吩-3-甲酸
向5-甲基-噻吩-3-甲酸(13.93 g, 97.98 mmol, 1.00 equiv)在乙酸(119.80 mL)中的溶液中，经20分钟逐滴加入溴(5.03 mL, 97.98 mmol, 1.00 equiv)在乙酸(59.90 mL)中的溶液。在室温下搅拌反应混合物1小时，直到通过LC-MS测定反应完全。在室温下将反应混合物缓慢倒入水(696.50 mL)中，并通过过滤收集所得沉淀物。用水(100 mL)洗涤并在垫上在真空和氮气下干燥16小时以提供2-溴-5-甲基-噻吩-3-甲酸的白色固体(20.55 g, 94.88%收率)。MS (m/z): 218.89, 220.79 (M-H)。1H NMR (400.13 MHz, CDCl3): 7.08 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H)。
制备例 4. 2-溴-N-(2-羟基-4-甲基-苯基)-5-甲基-噻吩-3-甲酰胺
在1 L烧瓶中，向2-溴-5-甲基-噻吩-3-甲酸(45.2 g, 204.46 mmol, 1.00 equiv)在二氯甲烷(316.40 mL)中的悬浮液中加入二甲基甲酰胺(500 µL)，然后逐滴加入2M草酰氯/二氯甲烷(112.45 mL, 224.90 mmol, 1.1 equiv)(当心气体逸出)。在室温下搅拌反应混合物2小时，直到反应混合物变成澄清的深色溶液，并通过TLC(洗脱剂EtOAc 30%/异己烷)测定反应完全。蒸干溶液，然后将所得固体再溶解于无水四氢呋喃(678 mL)中。将该溶液加入装有6-氨基-间甲酚 (33.40 g, 265.79 mmol, 1.3 equiv)、吡啶(82.67 mL, 1.02 mol, 5 equiv)和无水四氢呋喃(678 mL)的烧瓶中。在室温下搅拌2小时直到通过LC-MS测定反应完成。边搅拌边将反应混合物倒入1M HCl水溶液(2.71 L, 60 vol)中，通过过滤收集所得沉淀物。用1M HCl水溶液(250 mL)、然后用水(250 mL)洗涤，并在过滤垫上真空下干燥过夜以提供红色固体2-溴-N-(2-羟基-4-甲基-苯基)-5-甲基-噻吩-3-甲酰胺(62.34 g; 93.47%收率)。如果需要的话，可以通过用甲醇洗涤而进一步纯化该固体。MS (m/z): 325.98, 327.93 (M+H)。
制备例 5. 2,8-二甲基-5H-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-酮
在500 mL烧瓶中，将2-溴-N-(2-羟基-4-甲基-苯基)-5-甲基-噻吩-3-甲酰胺(62.34 g, 191.10 mmol, 1.00 equiv)溶解于二甲亚砜(1.56 L)中并加入碳酸钾(79.23 g, 573.30 mmol, 3 equiv)。边搅拌边将反应混合物加热至140℃保持4小时，直到通过LC-MS测定反应完全。将反应混合物冷却至室温，然后倒入水(2.5 L)中，用冰浴控制放热。用2M HCl水溶液(450 mL)酸化，用二氯甲烷(4 x 800 mL)萃取并用饱和碳酸氢钠水溶液(1.2 L)、然后用水(2 x 2 L)洗涤有机相。干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法在硅胶(750 g)上纯化，用0%至20%乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，以提供2,8-二甲基-5H-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-酮固体(28.1 g; 59.94%)。MS (m/z): 246.09 (M+H)。
制备例 6. 4-氯-2,8-二甲基-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬
在500 mL烧瓶中，将2,8-二甲基-5H-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-酮(26.84 g, 109.42 mmol, 1.00 equiv)在甲氧基苯(107.36 mL)中的悬浮液加热至约60℃。一次性加入N,N-二甲基苯胺(38.89 mL, 306.37 mmol, 2.8 equiv)，然后经15分钟加入三氯氧磷(23.39 mL, 251.66 mmol, 2.3 equiv)。在100℃下加热所得溶液，持续2小时，直到通过LC-MS测定反应完全。稍微冷却反应混合物并蒸发以提供4-氯-2,8-二甲基-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬的深色油状物(28.85g, 假定定量)。MS (m/z): 264.0 (M+H)。
制备例 7. 3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯
向4-氯-2,8-二甲基-噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬(28.85 g, 109.39 mmol, 1.00 equiv)在乙腈(288.50 mL)中的溶液中，加入2,2-二甲基-3-哌嗪-1-基-丙酸甲酯(59.77 g, 218.77 mmol , 2 equiv)和碳酸钾(136.06 g, 984.47 mmol, 9 equiv)。在温和回流下加热(82℃)混合物3小时，直到通过LC-MS测定反应完全。冷却该反应并蒸发。然后在水(300 mL)和乙酸乙酯(3 x 300 mL)之间分配。用水(2 x 300 mL)、然后用盐水洗涤合并的有机萃取物。经硫酸钠干燥、过滤并蒸发。通过快速色谱法在硅胶(800 g)上纯化，用0%至30%乙酸乙酯/异己烷洗脱，以提供3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯的浓稠油状物(37.95 g; 81.14%收率)。MS (m/z): 428.1 (M+H)。
实施例 1. 3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸
向3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸甲酯(37.95 g, 88.76 mmol, 1.00 equiv)在异丙醇(227.70 mL)和水(227.70 mL)中的浆液中，加入氢氧化钠(10.65 g, 266.27 mmol, 3 equiv)并加热该混合物至温和回流(85℃)，持续1.5小时，直到出现完全溶解并且通过LC-MS测定反应完全。冷却至室温并用2M HCl水溶液(约120 mL)中和至约pH 6.0 - 6.5，以提供沉淀的固体。在真空下除去有机溶剂以提供悬浮液。检验悬浮液的pH，如果需要的话用2M HCl水溶液(约15 mL)进一步调节至pH 6.0-6.5。过滤该悬浮液并用水洗涤，然后在真空下干燥过夜。在乙腈(100 mL, 2.5vol)中将粗固体物质制浆，超声处理，然后边搅拌边温和加热(40℃)，持续15分钟。过滤，用乙腈(3 x 20 mL)洗涤，然后在真空下干燥产物以提供3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸固体(29.5 g, 80.37%收率)。MS (m/z): 414.1 (M+H). 1H NMR (400.13 MHz, CDCl3): 6.99 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 7.8和1.5 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.28 (s, 1H), 3.67 (br s, 4H), 2.86 (br s, 4H), 2.59 (s, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.28 (s, 3H) 1.26 (s, 6H)。
实施例 2. 3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸二盐酸盐
在50℃下，向3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸(300 mg, 725.44 µmol, 1.00 equiv)在异丙醇(4.50 mL)中的悬浮液中，加入4M HCl/1,4-二氧杂环己烷 (453.40 µL, 1.81 mmol, 2.5 equiv)。将所得溶液加热至60℃，持续30分钟，然后冷却至室温。在真空下蒸发，将所得固体在乙醚(4.50 mL)中制浆15分钟，然后通过过滤收集，并在垫上干燥。在真空炉中进一步干燥1小时以提供3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸二盐酸盐的结晶固体(346 mg, 98.0%)。MS (m/z): 414.0 (M+H)。
实施例 3. 3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸；4-甲基苯磺酸
在50℃下，向3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸(300 mg, 725.44 µmol, 1.00 equiv)在乙醇(6 mL)中的悬浮液中，加入对甲苯磺酸(124.92 mg, 725.44 µmol, 1 equiv)，并在50℃下搅拌所得溶液30分钟。冷却至室温并在真空下蒸发以提供固体。将所述固体在乙醚(4.50 mL)中制浆15分钟，然后通过过滤收集，并在垫上干燥。在真空炉中进一步干燥1小时以提供3-[4-(2,8-二甲基噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基]-2,2-二甲基-丙酸; 4-甲基苯磺酸的结晶固体(413 mg, 97%)。MS (m/z): 414.0 (M+H)。
文献数据(Morairty SR, Hedley L, Flores J, Martin R, Kilduff TS.(2008) Selective 　 5-HT2A 　 and 　 5-HT6 　 receptor 　 antagonists 　 promote 　 sleep 　 in 　 rats.　Sleep　31,　34-44；以及Barbier, A.J.和Bradbury, M.J.,　Histaminergic 　 Control 　 of 　 Sleep-Wake 　 Cycles: 　 Recent 　 Therapeutic 　 Advances 　 for 　 Sleep 　 and 　 Wake 　 Disorders, CNS & Neurological Disorders-Drug Targets, 第6卷, 第31-43页(2007))，以及非临床动物研究中得到的数据，证实双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂在治疗失眠和对症治疗与其它障碍(例如抑郁症、焦虑症、疼痛、变态反应、肺或呼吸道病症、精神病症、痴呆和/或神经变性疾病)相关的失眠和/或生理节奏睡眠障碍中的作用。具体地说，人们发现，使用EEG监测的啮齿类，某些双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂可有效增加总的睡眠时间，没有出现不相称的或临床上相关的活动减退、REM睡眠减少或嗜睡病。
为了进一步证实本发明化合物的特征，它们可以进行下列体外和体内试验：
体外结合和活性试验：
H1 竞争结合试验
以SPA(闪烁近似测定法)96孔形式进行[3H]-吡拉明结合实验。由稳定表达重组H1受体(人类)的HEK-293细胞制备该试验使用的膜。通过将WGA PVT SPA珠(1mg/孔，Perkin Elmer(MA, USA)RPNQ0001)和3μg膜的混合物添加到含有3.5 nM[3H]-吡拉明和不同浓度的测试化合物(10点浓度响应曲线)的测定缓冲液(67 mM Tris；pH7.6)中，开始进行孵育。在10μM曲普利啶的存在下测定非特异性的结合。将样品在室温下(22℃)孵育4小时，而后在Microbeta Trilux中读数。
5-HT2A 竞争结合试验
以SPA 96孔形式进行[3H]-凯坦色林(Ketanserin)结合实验。由稳定表达重组5-HT2A受体(人类)的AV-12细胞制备该试验使用的膜。通过将WGA YSi SPA珠(1mg/孔，Perkin Elmer(MA, USA)，RPNQ0011)和2μg膜的混合物添加到含有3.1 nM[3H]-凯坦色林(Ketanserin)和不同浓度的测试化合物(10点浓度响应曲线)的测定缓冲液(67 mM Tris，0.5 mM EDTA；pH7.6)中，开始进行孵育。在20μM 1-(1-萘基)哌嗪的存在下测定非特异性的结合。将样品在室温下(22℃)孵育4小时，而后在Microbeta Trilux中读数。
5-HT2C 竞争结合试验
以SPA 96孔形式进行[125I]-(±)DOI结合实验。由稳定表达重组5-HT2C受体(人类)的AV-12细胞制备该试验使用的膜。通过将WGA PVT SPA珠(0.5 mg/孔，Perkin Elmer(MA, USA)，RPNQ0001)和2.5μg膜的混合物添加到含有0.2 nM[[125I]-(±)DOI和不同浓度的测试化合物(10点浓度响应曲线)的测定缓冲液(50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，0.5 mM EDTA，10μM优降宁，0.1%抗坏血酸，pH7.4)中，开始进行孵育。在20μM 1-(1-萘基)哌嗪的存在下测定非特异性的结合。将样品在室温下(22℃)孵育4小时，而后在Microbeta Trilux中读数。
结合数据分析
使用4参数逻辑斯蒂(logistic)非线性方程对曲线进行评价，以获得引起放射性配体结合的50%抑制时的竞争者的浓度(IC50)。平衡解离常数(Ki)按照方程Ki=IC50/(1+L/Kd)计算，其中L等于实验中使用的放射性配体的浓度，Kd等于放射性配体对受体的平衡解离常数，其由标准饱和分析或同源竞争实验来测定。记录的Ki值(其中指明n值)用几何平均值±平均值的标准误差(SEM)来表示，重复测定的次数用n表示。几何平均值由方程几何平均值=10^(平均值(log Ki 1 + log Ki 2 +…log Ki n)/n的平方根)来计算。
在原代神经元 培养物中使用天然受体的 GABAA 拮抗作用
化合物对天然GABAA受体的活性通过使用96孔形式的FLIPR®系统(荧光成像读板仪(FLIPR®，Molecular Devices))监测钙流量来评价。简言之，从E18大鼠胚胎分离胚胎皮质神经元，并将其以最佳密度铺于黑壁透明底的涂覆聚-D-赖氨酸的96-孔FLIPR®板。使细胞负载钙敏感性染料(Fluo4-AM，Molecular Devices)后,将细胞浸于含有低浓度氯化物(氯化物被葡糖酸盐替换)的溶液之中。在这些条件下，GABAA受体的活化引起氯离子外流(沿着化学梯度的方向)，这导致膜去极化，并因此使电压门控的钙通道(VGCC)活化。使用FLIPR®系统记录通过VGCC的钙内流并进行离线分析。为了药理学验证该试验，记录标准激动剂(GABA)和标准拮抗剂(克他命(Gabazine))的浓度响应曲线(CRC)。任何效果都以CRC模式针对10μM的固定浓度的激动剂GABA(相当于EC90 GABA响应)来确定。
方法：
通过比较在存在和不存在化合物时对激动剂GABA的峰值荧光响应，使用10点剂量响应曲线将化合物的拮抗剂作用定量。测试窗确定为由GABA在其预定的 EC90浓度下获得的最大响应减去由完全抑制浓度的克他命(gabazine)(50μM)获得的响应。拮抗剂作用被计算为该测试窗的百分比。利用四参数逻辑斯蒂曲线拟合程序(Prism Graphpad® 3.01)，将所有数据计算为相对IC50值。在每次试验中，将所有化合物的拮抗剂效能与克他命(gabazine)进行比较(一式三份)。
另外，可以通过用于其它生理学上重要的受体(例如但不局限于：hERG通道、其它5-羟色胺受体(具体而言5-HT1B、5-HT1D受体，对5-HT2B受体、5-HT2C、5-HT5、5-HT6和5-HT7受体缺乏激动剂活性)、多巴胺能受体(具体而言D1、D2和D3)、GABAA受体、肾上腺素能受体和单胺转运体)的公知的方法，在结合试验和功能活性试验中测试本发明的化合物。
基本如上所述测试实施例2的化合物，并且发现其具有如表1所示的活性谱。
表1. 选择性数据
实施例2
H1 Ki (nM) 131
5-HT2A Ki (nM) 11.3
5-HT2B Ki (nM) 95.8
5-HT2B 激动剂EC50 (nM) >10,000
5-HT2B 拮抗剂Kb (nM) 45
5-HT2C Ki (nM) 883
GABAA IC50 (µM) 98
hERG通道(µM) >100
多巴胺D1 Ki (nM) 2,350
多巴胺D2 Ki (nM) 2,480
多巴胺D3 Ki (nM) >5,660
5-HT1B Ki (nM) ND
5-HT1D Ki (nM) >3,980
5-HT5 Ki (nM) >8,830
5-HT7 Ki (nM) >2,060
肾上腺素能α1A Ki (nM) >10,500
肾上腺素能α1B Ki (nM) >16,200
肾上腺素能α2A Ki (nM) >9,020
肾上腺素能α2B Ki (nM) 3,710
肾上腺素能α2C Ki (nM) >5,550
5-羟色胺转运体 Ki (nM) >651
去甲肾上腺素转运体Ki (nM) >674
多巴胺转运体Ki (nM) >877
因此，预计生理学相关剂量的本发明化合物在体内提供对H1和5-HT2A受体的显著抑制，而基本上不与其它生理学相关的受体相互作用，并由此预期可提供期望的药理学作用，同时避免与脱靶活性相关的不希望的作用。这种不希望的作用包括但不局限于下列：与治疗突然出现的体重增加相关的5-HT2C拮抗剂活性，与心脏瓣膜病相关的5-HT2B激动剂活性，与QT延长相关的hERG通道调节和与癫痫发作活动相关的GABAA拮抗剂活性。此外，通过对多巴胺受体、其它5-羟色胺受体、肾上腺素能受体和单胺转运体的选择性，避免了对睡眠/觉醒生理机能的干扰。
5-HT2A 受体占据：测定了受体占据(RO)以证实对于5-HT2A受体的体内拮抗剂/反向激动剂活性。简言之，使重量大约230-280克的雄性Sprague-Dawley大鼠(Harlan Sprague-Dawley，Indianapolis，IN)随意获取食物和水，直到3小时实验方案开始为止。1 mg/kg凯坦色林(ketanserin)(非选择性的5-HT2A拮抗剂)用作阳性对照以确定测定有效性。通过口服饲喂法给予测试化合物或对照(在由20%羟基丙基β-环糊精组成的媒介物中)。MDL 100907((R)-(+)-α-(2,3-二甲氧基苯基)-1-[2-(4-氟苯基)乙基]-4-哌啶甲醇)(选择性的5-HT2A拮抗剂)用作示踪剂。将MDL 100907悬浮在含有5μl稀乳酸(1 mg/ml)的水中，用盐水稀释至6μg/ml，并以1 mL/kg的体积经由尾侧静脉静脉内给予以得到3μg/kg的示踪剂剂量。给予大鼠测试化合物、凯坦色林(ketanserin)或媒介物(N=4)，1小时以后，静脉内给予3μg/kg示踪剂剂量的MDL 100907。在给予示踪剂时，认为要测定RO。给予示踪剂之后十五分钟，将大鼠通过颈部脱位处死。收集血浆样品，并取出额叶皮质和小脑的样品。在各皮质和小脑样品中测定MDL 100907示踪剂的水平。使用得到确认的比值法计算RO，所述比值法使用通过没有或有极低水平的受体的部位(小脑)标准化的代表总结合的高受体密度的区域(额叶皮质)。该区域，被称为零区域(null region)，表示配体探针的非特异性结合。在皮质中相对于小脑的示踪剂水平的媒介物比例表示0%占据。比例为1表示100%占据，当MDL 100907示踪剂与5-HT2A受体的所有特异性结合被阻断时达到1的比例。将来自测试化合物预处理组的皮质与小脑的示踪剂的中间比例线性内插于媒介物处理的动物(0%占据)的示踪剂水平的比例和1 的比例(100%占据)之间，以测定5-HT2A RO百分比。
MDL 100907 分析：将皮质和小脑的样品称重，并置于在冰上的尖底离心管中。将四体积(w/v)的含0.1%甲酸的乙腈加入各管中。然后将样品匀化，并以14,000 RPM(21,920 x g)离心16分钟。通过在HPLC进样小瓶中添加100–900μL无菌水来将上清液稀释以用于LC/MS/MS分析。使用Agilent 1200型 HPLC(Agilent Technologies, Palo Alto, CA)和API 4000质谱仪进行MDL 100907的分析。色谱分离在2.1 X 50 mm C18柱(Agilent部件号：971700-907)上进行，流动相由具有总计0.1%的甲酸含量的60%乙腈/水组成。通过监测质荷比(m/z) 374.2至123.0的前体向产物离子的转变，完成MDL 100907的检测。通过向来自未处理大鼠的脑组织样品添加已知量的分析物并如上所述处理来制备标准品。
统计方法：利用JMP® 8.0版(SAS Institute Inc, Cary NC)将各个研究的曲线拟合至4参数逻辑斯蒂函数(下限固定在0%)，并利用该软件计算绝对ED50。以平均值、标准误差和95%置信区间的形式给出数值。基本如所述测试实施例2的化合物，并且发现达到高的5-HT2A受体占据，ED50为0.09 mg/kg。
DOI 诱导的摇头活动的抑制：通过本发明的化合物阻断5-HT2A受体激动剂2,5-二甲氧基-4-碘代苯丙胺(DOI)诱导的头部摇动活动的能力证实其5-HT2A受体拮抗剂的体内活性。(参见例如Bartoszyk GD, van Amsterdam C, Böttcher H, Seyfried CA. EMD 281014, a new selective serotonin 5-HT2A receptor antagonist.　Eur 　 J 　 Pharmacol. 2003　473: 229-230.)。简言之，将雄性C57BL/6J小鼠(20-25 g，Charles River)在标准饲养条件下(32只小鼠在一个大的IVC笼中，07.00至19.00的光照期，恒定温度(19-23℃)和湿度(50% +/-10)，可随意获取食物和水)饲养。小鼠接受媒介物(0.25%甲基纤维素)、DOI (3mg/kg，在盐水中)或者以10mg/kg PO的测试化合物+DOI (3mg/kg，在盐水中)。每次试验将各组(每组四只)中的测试化合物单独评价，对于各化合物n = 4，同时评价媒介物和DOI+媒介物(n = 8)。用测试化合物预处理60分钟后，小鼠接受皮下给药的媒介物(盐水)或3mg/kg DOI，然后将它们置于透明的有机玻璃(perspex)观察室中。DOI或媒介物给药5分钟后，对各单独小鼠表现出的可见的得分的摇头数目进行15 分钟的计数。使用ANOVA和事后Dunnet检验分析数据。基本如所述那样测试实施例2的化合物，发现其在10mg/kg抑制DOI诱导的摇头响应达100%。
大鼠的睡眠和行为监测：在大鼠中测试本发明化合物的下述能力：增加睡眠量或减少睡眠中断或两者，而没有不希望的作用，例如抑制REM睡眠、觉醒运动损害(waking motor impairment)和/或反跳性失眠(rebound insomnia)。通过脑电图(EEG)、肌电图(EMG)和测定累积的非REM睡眠、累积的总睡眠、平均每次睡眠(average sleep bout)持续时间、最长一次睡眠持续时间、反跳性失眠、REM睡眠抑制和觉醒期间运动行为强度(locomotor activity intensity)的行动来连续监测试验动物。这种研究的方法在本领域是已知的(参见例如下列文献中所描述的方法：Edgar DM, Seidel WF. Modafinil induces wakefulness without intensifying motor activity or subsequent rebound hypersomnolence in the rat.　J 　 Pharmacology 　 & 　 Experimental 　 Therapeutics 　1997；283: 757-769; van Gelder RN, Edgar DM, Dement WC. Real-time automated sleep scoring: validation of a microcomputer-based system for mice. Sleep 1991，14: 48-55; 和 Gross BA, Walsh CM, Turakhia AA, Booth V, Mashour GA, Poe GR. Open-source logic-based automated sleep scoring software using electrophysiological recordings in rats.　J 　 Neurosci 　 Methods. 　2009；184(1):10-8)。如下进行所述研究：
动物准备。如下对成年雄性Wistar大鼠(手术时约270-300 g)进行外科手术以适合长期记录EEG、EMG以及行动：对大鼠进行外科手术装备颅植入物，其由四个用于EEG记录的不锈钢螺丝钉组成(两个额部[前囟前方3.9mm，中间外侧±2.0mm]和两个枕部[前囟后方6.4mm，中间外侧±5.5mm])，并装备两根用于EMG记录的涂覆Teflon的不锈钢丝(位于颈背的斜方肌下)。在手术前将所有的导线焊接于微型连接器(Microtech，Boothwyn, PA)。通过将不锈钢的EEG记录螺丝钉、应用于植入物连接器和颅骨之间的氰基丙烯酸酯及牙科用丙烯酸树脂组合而将植入物组件附着于颅骨。通过手术置于腹部的微型发射器(Minimitter PDT4000G, Philips Respironics, Bend, OR)监测运动行为。允许进行至少3周的恢复。
记录环境。将每只大鼠在微型隔离笼中单独饲养，笼中插入有聚碳酸酯滤器顶的提升器(polycarbonate filter-top riser)以允许有更多的垂直顶部空间。使最小程度限制活动的软电缆一端连接附着于笼顶的整流器(commutator)，另一端连接动物的颅植入物。每个笼子位于不锈钢的睡眠-觉醒记录室的分开的、通风的隔间内。可随意获得食物和水，并将环境温度保持在约23±1℃。在整个研究期间使用荧光灯保持24-小时光照-黑暗循环(LD12:12)。相对湿度平均为约50%。在每次处理之前和之后至少30小时不打扰动物。
研究设计和给药。将媒介物(安慰剂，0.25%在水中的甲基纤维素，15厘泊)或测试化合物剂量水平之一以lmL/kg伪随机地经口给予，使得没有大鼠接受两次相同的治疗，且在任何一项研究中没有大鼠接受了 8种治疗中超过两种的治疗。将各大鼠从其笼中取出约I分钟以称重和治疗。在每次治疗之前和之后进行至少6天的“清除”期。
数据收集。睡眠和觉醒分辨可自动进行(例如，Van Gelder等人，1991 (上文)；Edgar 等人，1997 (上文)；Winrow CJ 等人，Neuropharmacology 2010；58(I): 185-94和Gross等人，2009 (上文))。将EEG放大并滤波(X10,000，带通l-30Hz)，将EMG放大并积分(带通10-100Hz，RMS积分)，并同时监测非特异性运动行为(LMA)。将唤醒状态分为各10秒 的时期，其为非-REM睡眠、REM睡眠、觉醒或θ占优势的觉醒。将运动行为(LMA)记录为每分钟的计数，并通过商购可得的遥测接收器(ER4000, Minimitter, Bend, OR)检测。
统计分析。将具有至少一种结果的所有动物包括在总结的结果中(例如，我们包括了来自遥测数据可用而EEG数据不可用的动物治疗的适合的数据)。将治疗后的观察期分为适合各结果的给药后间隔，其中将给药的时间定义为时刻=0的开始，且通过计算每小时平均值或贯穿各个时期的累积值来总结观察期中的结果(参见用于精确定义各个结果的表2的图例)。以对数标度分析各次睡眠以稳定差异(variation)，以线性标度分析所有其他变量。使用治疗组和治疗日期作为因子且相应的预处理间隔(24小时之前)作为协变量通过协方差分析来分析各个时期的每个结果。对于每个治疗组总结校正平均值和自媒介物平均值的变化及它们相应的标准误差。将以对数标度分析的结果转换回来，以报道几何平均值和与媒介物结果的平均比值。
基本如所述测试实施例2的化合物。发现3 mg/kg的实施例2的化合物显著增加累积的NREM睡眠时间和累积的总睡眠时间，而没有显著的反跳性失眠、或运动强度(LMI)的抑制。然而，不能因这些数据而排除REM睡眠抑制。(参见表2中的睡眠特性和运动行为强度)。
表 2. 结果统计：缩写：N=样本量；校正平均值=相对于媒介物对照的校正的组平均值；SE=平均值的标准误差；LCL=95%置信下限，NREM=非REM，即除REM睡眠之外的所有睡眠。平行参考媒介物组的样本量N=27。
定义和单位 — 平均值是与媒介物对照的校正的差值：
● 累积的睡眠：贯穿治疗后最初的6个小时，以分钟计(‘总睡眠’是指NREM睡眠+REM睡眠)。
● 平均每次睡眠：贯穿治疗后最初的6个小时的每小时平均的各次睡眠的平均数，表示为增加至媒介物对照的n-倍。
● 最长一次睡眠：治疗后最初的6个小时中的最长一次睡眠，表示为增加至媒介物对照的n-倍。
● 反跳性失眠：光照期间的最初的3个小时(即治疗后第7、8和9小时)期间的累积的NREM+REM睡眠的分钟数。
● REM抑制：在治疗后最初的12个小时期间累积的REM睡眠的分钟数。
● 运动行为(LMA)强度：表示为EEG-确定的觉醒的每分钟LMA计数，为贯穿治疗后最初的6个小时的平均数。
确定功效。将治疗之后6小时期间的每个变量的增加(相对于媒介物对照)对log(剂量)绘图，计算四个功效变量中的每个变量的阈值功效。每个变量的阈值功效是利用4参数逻辑斯蒂非线性回归评估的剂量，该剂量可以得到确定的功效阈值；+30分钟的另外累积的非REM睡眠，+25分钟的另外累积的总睡眠，平均每次睡眠持续时间增加至1.75x，最长一次睡眠持续时间增加至1.5x。发现实施例2的化合物具有如表3所示的阈值有效剂量。　　
表 3 评估的功效剂量(mg/kg) 95%置信区间(mg/kg)
NREM累积= 30分钟 0.05 0.04-n.e.*
总睡眠累积= 25分钟 0.07 0.03-0.09
最长一次睡眠(增加至1.75倍) 0.26 0.07-0.20
平均每次睡眠(增加至1.5倍) 0.21 0.03-0.06
*n.e. = 统计上不可估计。
确定不希望的作用。将每个‘不希望的作用’结果变量(参见表2中对于定义的图例)相对于log(剂量)作图。REM睡眠抑制的阈值规定为-10分钟的REM睡眠累计减少。反跳性失眠的阈值规定为-20分钟。降低的LMI的阈值规定为EEG确定的觉醒的每分钟运动行为计数-5。对于在10倍平均有效剂量或小于10倍平均有效剂量的所有剂量而言，当置信下限低于阈值时，确定出现显著的不希望的作用，并且在高于阈值功效剂量的剂量下，剂量反应趋势明显。对于实施例2的化合物，3 mg/kg时REM睡眠抑制超过阈值，但该剂量是最保守功效剂量0.26 mg/kg的10倍多(表3)；在0.25 mg/kg和0.025 mg/kg下，明显的REM睡眠抑制不是剂量相关趋势的一部分，在那些剂量下也不是统计上显著的，并且可因此认定为在那些剂量下的小样本量的人工产物；但REM睡眠抑制不能由于这些数据而被排除。结论是在10倍最保守功效剂量内没有观察到不希望出现的REM反跳性失眠或LMI降低，但不能排除REM睡眠抑制。负值分别表示REM抑制、反跳性失眠和LMI降低。
在进一步研究中，本发明的化合物可以与选择性的5-羟色胺再摄取抑制剂共同给予，以证实它们对非快速动眼睡眠(NREM睡眠)和睡眠保持作用的增强。基本如上对单独化合物所述，在大鼠睡眠研究中与西酞普兰一起共同给予实施例2的化合物，并且发现在显著更低的剂量下可显著增加NREM睡眠。
血浆清除率：对于用于治疗睡眠障碍(例如失眠)的化合物来说，重要的是，它能够以有利的清除率从身体中充分地清除，从而避免不希望的作用，例如，超过期望睡眠时间的嗜眠延长、白天嗜睡、觉醒之后认知受损，等。本发明提供了具有改善的清除率的化合物。可以基本上如下所述测定清除率。
从Charles River, Wilmington, MA 01887, USA获得内置股动脉插管的雄性Sprague Dawley大鼠(体重范围250-320 g)。以1.0 mg/mL的最终药物浓度(游离碱当量)静脉内给予在20% Captisol®/22.5 mM磷酸盐缓冲液(pH2)中的测试化合物溶液(1 mL/kg)。使用内置插管经24小时获取血液样品。通过离心获得血浆样品，并在分析之前冷冻(-20℃)保存或保存在干冰上。
从Marshall Bioresources, USA获得雄性比格犬(体重范围10-12 kg)。以1.0 mg/mL的最终药物浓度(游离碱当量)静脉内给予在20% Captisol®/22.5 mM磷酸盐缓冲液(pH2)中的测试化合物溶液(1 mL/kg)。经24小时从颈静脉获取血液样品。通过离心获得血浆样品，并在分析之前冷冻(-20℃)保存。
将冷冻血浆样品解冻至室温用于生物分析测试化合物的浓度。将相关的内标化合物(在乙腈/甲醇(1:1，v/v)中)加入到所有的血浆样品中(1:1，v/v)。在分析前，将样品离心以去除沉淀的蛋白。通过注射上清液并在Javelin Betasil C18柱上快速梯度洗脱(20 x 2.1 mm柱体，流动相A：水/1M NH4HCO3，2000:10 v/v，流动相B：MeOH/1M NH4HCO3，2000:10 v/v)来分析上清液。使用Sciex API 4000三重四极杆质谱仪，通过LC-MS-MS分析来检测洗脱的分析物。由相同条件下制备和分析的标准品来测定化合物的浓度。利用Watson 7.4(Thermo Fisher Scientific, Inc.)的非房室分析法(Non-compartmental Analysis)计算清除率。
基本如所述测试实施例2的化合物，并且发现其具有有利的清除特性：
。
尽管可能不经任何配制地直接给予本发明的方法中使用的化合物，但所述化合物通常以药物组合物的形式给予，所述药物组合物包含作为活性成分的所述化合物或其可药用盐和至少一种可药用载体、稀释剂和/或赋形剂。这些组合物可以通过多种途径给予，所述途径包括经口、舌下、经鼻、皮下、静脉内和肌内。这样的药物组合物和制备它们的方法为本领域所熟知。参见例如，Remington: The Science and Practice of Pharmacy (University of the Sciences in Philadelphia编，第21版，Lippincott Williams &Wilkins Co.，2005)。
所述组合物优选被配制为单位剂型，各剂量含有约0.1至约60mg、更经常约0.5至约30mg、例如约1至约10mg的活性成分。术语“单位剂型”是指适合作为用于人类个体和其他哺乳动物的单一剂量的物理上分离的单位，各单位包含经计算可产生期望的治疗效果的预定量的活性物质以及至少一种适合的可药用载体、稀释剂和/或赋形剂。
式I化合物通常在很宽的剂量范围内有效。例如，每日剂量的范围通常为约0.002至约1.0mg/kg体重、更经常为约0.008至0.5mg/kg体 重、例如0.015至0.15mg/kg体重。在某些情况中低于上述范围下限的剂量水平可能是绰绰有余的，而在另一些情况中还可以应用更大剂量而不会引起任何有害的副作用，因此上述剂量范围不旨在以任何方式限制本发明的范围。应该理解，实际给予的化合物的量将由主治医生根据相关情况决定，这些相关情况包括待治疗的病况、所选择的给药途径、实际给予的一种或多种化合物、个体患者的年龄、体重和响应以及患者症状的严重程度。

Claims (16)

1.下式的化合物
或其可药用盐。
2.根据权利要求1的化合物，其是HCl盐。
3.根据权利要求1的化合物，其是甲苯磺酸盐。
4.药物组合物，其包含根据权利要求1的化合物或其可药用盐以及至少一种可药用载体、稀释剂或赋形剂。
5.治疗哺乳动物的失眠的方法，所述方法包括向需要这种治疗的哺乳动物给予有效量的根据权利要求1的化合物或其可药用盐。
6.权利要求5的方法，其中所述哺乳动物是人。
7.权利要求5的方法，其中所述失眠的特征在于睡眠开始或睡眠保持或这两者的困难。
8.权利要求7的方法，其中所述哺乳动物是人。
9.根据权利要求1的化合物或其可药用盐，用于治疗。
10.根据权利要求1的化合物或其可药用盐，用于治疗失眠。
11.根据权利要求10使用的化合物或其可药用盐，其中所述失眠的特征在于睡眠开始或睡眠保持或这两者的困难。
12.根据权利要求10或11的任何一项用于人的化合物。
13.根据权利要求1的化合物或其可药用盐在制备用于治疗失眠的药物中的用途。
14.根据权利要求13的用途，其中所述失眠的特征在于哺乳动物的睡眠开始或睡眠保持或这两者的困难。
15.药物组合物，其包含根据权利要求1的化合物或其可药用盐以及至少一种可药用载体、赋形剂或稀释剂和任选的其它治疗成分。
16.权利要求15的药物组合物，其中所述其它治疗成分包含选择性5-羟色胺再摄取抑制剂。
CN201280040793.9A 2011-08-30 2012-08-22 作为双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂的(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂*-4-基)哌嗪-1-基化合物 Expired - Fee Related CN103958523B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161528893P 2011-08-30 2011-08-30
US61/528893 2011-08-30
PCT/US2012/051833 WO2013032804A1 (en) 2011-08-30 2012-08-22 (THIENO[2,3-b][1,5]BENZOXAZEPIN-4-YL)PIPERAZIN-1-YL COMPOUNDS AS DUAL ACTIVITY H1 INVERSE AGONISTS/5-HT2A ANTAGONISTS

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103958523A true CN103958523A (zh) 2014-07-30
CN103958523B CN103958523B (zh) 2016-07-27

Family

ID=46829875

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201280040793.9A Expired - Fee Related CN103958523B (zh) 2011-08-30 2012-08-22 作为双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂的(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂*-4-基)哌嗪-1-基化合物

Country Status (22)

Country Link
US (1) US9512140B2 (zh)
EP (1) EP2751115B1 (zh)
JP (1) JP6042436B2 (zh)
KR (1) KR101596607B1 (zh)
CN (1) CN103958523B (zh)
AU (1) AU2012300451B2 (zh)
BR (1) BR112014004557A2 (zh)
CA (1) CA2843514C (zh)
DK (1) DK2751115T3 (zh)
EA (1) EA024248B1 (zh)
ES (1) ES2650225T3 (zh)
HR (1) HRP20171824T1 (zh)
HU (1) HUE034845T2 (zh)
LT (1) LT2751115T (zh)
MX (1) MX350419B (zh)
NO (1) NO2776955T3 (zh)
PL (1) PL2751115T3 (zh)
PT (1) PT2751115T (zh)
RS (1) RS56537B1 (zh)
SI (1) SI2751115T1 (zh)
WO (1) WO2013032804A1 (zh)
ZA (1) ZA201400874B (zh)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2729474T3 (en) * 2011-07-08 2018-05-22 Lilly Co Eli (THIENO [2,3-b] [1,5] BENZOXAZEPIN-4-YL) PIPERAZIN-1-YL COMPOUNDS AS H1-INVERSE AGONISTS / 5-HT2A DOUBLE EFFECTS
RS56538B1 (sr) * 2013-01-14 2018-02-28 Lilly Co Eli (tieno[2,3-b][1,5]benzoksazepin-4-il)piperazin-1-il jedinjenja kao dvostruko delujućih h1 inverzni agonisti/5-ht2a antagonisti
TW201625644A (zh) 2014-04-29 2016-07-16 美國禮來大藥廠 作為選擇性５－ＨＴＡ反向促效劑之（噻吩并［２，３－ｂ］［１，５］苯并氧氮呯－４－基）哌嗪－１－基化合物
WO2018177993A1 (de) 2017-03-31 2018-10-04 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Pyrazole zur bekämpfung von arthropoden
WO2018234488A1 (en) 2017-06-23 2018-12-27 Basf Se SUBSTITUTED CYCLOPROPYL DERIVATIVES
WO2019185413A1 (en) 2018-03-27 2019-10-03 Basf Se Pesticidal substituted cyclopropyl derivatives
IL284159B1 (en) * 2018-12-21 2024-04-01 Ogeda Sa Synthesis of 3-methyl-4,2,1-thiadiazole-5-carboxyhydrazide or derivatives of its form deuterium methyl-d3
EP4043444A1 (en) 2021-02-11 2022-08-17 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
US20240140917A1 (en) 2021-02-11 2024-05-02 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
WO2024089216A1 (en) 2022-10-27 2024-05-02 Syngenta Crop Protection Ag Novel sulfur-containing heteroaryl carboxamide compounds

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007022068A1 (en) * 2005-08-11 2007-02-22 Hypnion, Inc. Olanzapine analogs and methods of use thereof

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7395251B2 (en) * 2005-07-01 2008-07-01 International Business Machines Corporation Neural networks for prediction and control

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007022068A1 (en) * 2005-08-11 2007-02-22 Hypnion, Inc. Olanzapine analogs and methods of use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CN103958523B (zh) 2016-07-27
EA201490332A1 (ru) 2014-06-30
WO2013032804A1 (en) 2013-03-07
PL2751115T3 (pl) 2018-02-28
RS56537B1 (sr) 2018-02-28
HUE034845T2 (en) 2018-03-28
AU2012300451B2 (en) 2016-10-13
ES2650225T3 (es) 2018-01-17
KR101596607B1 (ko) 2016-02-22
CA2843514A1 (en) 2013-03-07
KR20140051355A (ko) 2014-04-30
JP2014525440A (ja) 2014-09-29
US9512140B2 (en) 2016-12-06
AU2012300451A1 (en) 2014-01-30
EA024248B1 (ru) 2016-08-31
US20140171411A1 (en) 2014-06-19
EP2751115A1 (en) 2014-07-09
DK2751115T3 (en) 2017-10-23
NO2776955T3 (zh) 2018-06-02
MX2014002473A (es) 2016-09-26
SI2751115T1 (sl) 2017-11-30
ZA201400874B (en) 2015-10-28
MX350419B (es) 2017-09-05
PT2751115T (pt) 2017-12-20
HRP20171824T1 (hr) 2017-12-29
JP6042436B2 (ja) 2016-12-14
EP2751115B1 (en) 2017-09-20
LT2751115T (lt) 2017-12-27
BR112014004557A2 (pt) 2017-05-30
CA2843514C (en) 2017-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103958523A (zh) 作为双重活性H1反向激动剂/5-HT2A拮抗剂的(噻吩并[2,3-b][1,5]苯并氧氮杂䓬-4-基)哌嗪-1-基化合物
JP6050813B2 (ja) 二重作用Ｈ１インバースアゴニスト／５−ＨＴ２Ａアンタゴニストとしての（チエノ［２，３−ｂ］［１，５］ベンゾオキサゼピン−４−イル）ピペラジン−１−イル化合物
JP6100400B2 (ja) 二重活性Ｈ１インバースアゴニスト／５−ＨＴ２Ａアンタゴニストとしての（チエノ［２，３−ｂ］［１，５］ベンゾオキサゼピン−４−イル）ピペラジン−１−イル化合物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160727

Termination date: 20200822