CN103936650B - 酰亚胺类苯基哌嗪衍生物及其盐、制备方法和用途 - Google Patents

酰亚胺类苯基哌嗪衍生物及其盐、制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了酰亚胺类苯基哌嗪衍生物及其盐、制备方法和用途。酰亚胺类苯基哌嗪衍生物（Ⅰ），其中：m、n、o、X、Y、R1-R9的定义见说明书。本发明还公开了这些酰亚胺类苯基哌嗪衍生物的制备方法以及使用这些新型衍生物用于抗良性前列腺增生和抗肿瘤的用途。本发明所述的化合物经初步药效学研究，通过双荧光素酶报告基因及体外抗肿瘤实验，结果显示：一些化合物表现较好的α1-AR亚型选择性及良好的抗肿瘤活性，可研制开发为新型抗良性前列腺增生和抗肿瘤药物。

Description

酰亚胺类苯基哌嗪衍生物及其盐、制备方法和用途
技术领域
本发明涉及药物化学、药物先导化合物技术领域，具体地说，涉及酰亚胺类苯基哌嗪衍生物及其盐、制备方法和用途。
背景技术
良性前列腺增生（Benignprostatichyperplasia,BPH），是一种常见的老年男性泌尿障碍症，BPH主要临床表现为下尿路症状（LUTS）：尿频、尿急、尿等待、夜尿增多、尿无力，严重可导致并发症如急性尿潴留、尿失禁、反复发作的尿路感染、血尿、肾衰竭、膀胱结石等。随着疾病的进展同时伴随复杂的并发症。因此，BPH的治疗药物研究已成为老年疾病研究的新热点（J.Med.Chem.1988,31,1087-1093;Br.J.Pharmacol.2000,129,653-660;Pharmacol.Ther.2000,88,281-309）。近年来，随着国民生活水平的提高,人口平均寿命的延长及人口老龄化的加速，其发病率有逐渐增加的趋势，在国外50～60岁的老年男性中约50%患有前列腺增生症，而80岁时可达80%～90%，较国内为高。
α1adrenergicreceptors(α1-ARs)，是G蛋白偶联受体（GPCRs）家族的重要成员之一，其具有调节心血管系统和中枢神经系统活动的功能，这类7次跨膜受体在药物研发中占据核心的位置。按照其生理调节特点可分为α1A，α1B和α1D三种亚型。病理生理学研究表明：膀胱颈、前列腺包膜及增生的前列腺基质中的平滑肌细胞以α1-AR为主（TheAtlasofClinicalUrology.1990,17,641-649)。α1-AR引起的平滑肌收缩是引发BPH的主要原因（Reviewsinurology.2005.7(Suppl8):p.S34～42）。研究表明拮抗α1A-AR可以缓解尿路梗阻，拮抗α1D-AR对逼尿肌功能失调的刺激性和灌注性排泄症状有改善作用。而α1B与小阻力血管控制有关，拮抗α1B将产生低体位性低血压、心悸、昏厥等副作用。选择性作用于α1A及α1D亚型是公认的有效治疗BPH有效靶标（Curr.Med.Chem.2006,13,3395-3416;B.J.UInternational.2000,86Suppl2:p.23-8,discussion28-30）。然而，目前应用的α1-AR拮抗剂主要困难在于大多数拮抗剂对α1-AR三种亚型存在普遍拮抗性（Eur.J.Pharmacol.1999,374,495–502），难以区分血管和尿路α肾上腺素受体。因此，导致患者产生一系列心血管副作用。因而，开发出新一代的高效、低毒、高选择性的α1-AR拮抗剂具有重大意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种新型的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物及其盐。
本发明的另一目的是提供上述新型的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物及其盐的制备方法。
本发明的进一步目的是提供新型的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物在制备抗良性前列腺增生药物和抗肿瘤药物中的用途。
本发明新型的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物具有下述通式（Ⅰ）的结构：
其中：
m=1或2；
n=2、3或4；
o=0或1；
X=C或N;Y=C或N;
R1=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R2=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R3=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R4=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R5=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R6=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R7=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R8=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R9=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基、烷氧基、不饱和的烷氧基、F、Cl、Br、I、CF3、CN、NO2、OH、CHO、SR10、烷基砜基、取代或未取代芳基砜基、氨基、酰基、酯基；
R10=H、直连或支链烷基、不饱和的烷基、取代或未取代苯基、取代或未取代苄基、芳烷基；
本发明所述的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物通过下述方法制备：首先原料4-(溴乙烷)苯乙酸被硼烷二甲基硫醚络合物(BMS)还原成中间体Ⅱ，其次中间体Ⅱ在碱催化下与邻苯二甲酰亚胺钾盐反应得到中间体Ⅲ，再次中间体Ⅲ在碱催化下与对甲苯磺酰氯（TsCl）反应生成羟基保护的中间体Ⅳ；最后中间体Ⅳ与相应苯基哌嗪类化合物发生亲核取代反应得到相应的化合物1-22。
本发明上述化合物经初步药理学研究，通过双荧光素酶报告基因及体外抗肿瘤实验，结果显示：一些化合物表现较好的α1-AR亚型选择性及良好的抗肿瘤活性，可研制开发为新型抗良性前列腺增生药物和抗肿瘤药物。
本发明的优选化合物具有下述化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22的结构:
本发明中间体Ⅱ的制备过程如下：
中间体Ⅱ的制备工艺包括：
4-(溴乙烷)苯乙酸在常温下与硼烷二甲基硫醚络合物(BMS)反应得到2-(4-(bromomethyl)-phenyl)ethanol（中间体Ⅱ）。
本发明中间体Ⅲ的制备过程如下：
中间体Ⅲ的制备工艺包括：
2-(4-(bromomethyl)phenyl)ethanol（中间体Ⅱ）在碳酸钾催化下，与邻苯二甲酰亚胺钾盐反应得到2-(4-(2-hydroxyethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione（中间体Ⅲ）。
本发明中间体Ⅳ的制备过程如下：
中间体Ⅳ的制备工艺包括：
2-(4-(2-hydroxyethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione（中间体Ⅲ）在三乙胺催化下，与对甲苯磺酰氯反应得到（中间体Ⅳ）。
本发明化合物1的制备过程如下：
化合物1的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与N-苯基哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-phenylpiperazin-1-yl)ethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物1）。
本发明化合物2的制备过程如下：
化合物2的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-苄基哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-benzylpiperazin-1-yl)ethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物2）。
本发明化合物3的制备过程如下:
化合物3的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-吡啶基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(pyridin-2-yl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)-isoindoline-1,3-dione（化合物3）。
本发明化合物4的制备过程如下:
化合物4的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-甲基苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-o-tolylpiperazin-1-yl)ethyl)benzyl)isoin-doline-1,3-dione（化合物4）。
本发明化合物5的制备过程如下:
化合物5的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(4-甲基苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-p-tolylpiperazin-1-yl)ethyl)benzyl)isoin-doline-1,3-dione（化合物5）。
本发明化合物6的制备过程如下:
化合物6的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-甲氧苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2-methoxyphenyl)piperazin-1-yl)ethyl)-benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物6）。
本发明化合物7的制备过程如下:
化合物7的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(4-甲氧苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(4-methoxyphenyl)piperazin-1-yl)ethyl)-benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物7）。.
本发明化合物8的制备过程如下:
化合物8的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-乙氧苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2-ethoxyphenyl)piperazin-1-yl)ethyl)-benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物8）。
本发明化合物9的制备过程如下:
化合物9的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-氟苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2-fluorophenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)-isoindoline-1,3-dione（化合物9）。
本发明化合物10的制备过程如下:
化合物10的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(4-氟苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(4-fluorophenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)-isoindoline-1,3-dione（化合物10）。
本发明化合物11的制备过程如下:
化合物11的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2,4-二氟苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2,4-difluorophenyl)piperazin-1-yl)ethyl)-benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物11）。
本发明化合物12的制备过程如下:
化合物12的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与3-氟-4-(1-哌嗪基)苯腈反应得到4-(4-(2-(4-((1,3-dioxoisoindolin-2-yl)methyl)-phenyl)ethyl)-piperazin-1-yl)-3-fluorobenzonitrile（化合物12）。
本发明化合物13的制备过程如下:
化合物13的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-氯苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2-chlorophenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)-isoindoline-1,3-dione（化合物13）。.
本发明化合物14的制备过程如下:
化合物14的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(4-氯苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(4-chlorophenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)-isoindoline-1,3-dione（化合物14）。
本发明化合物15的制备过程如下:
化合物15的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-甲氧-5-氯苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(5-chloro-2-methoxyphenyl)piperazi-n-1-yl)ethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物15）。
本发明化合物16的制备过程如下:
化合物16的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(4-溴苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(4-bromophenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)-isoindoline-1,3-dione（化合物16）。
本发明化合物17的制备过程如下:
化合物17的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-苯甲腈)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2-isocyanophenyl)piperazin-1-yl)ethyl)-benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物17）。
本发明化合物18的制备过程如下:
化合物18的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与4-哌嗪基苯腈反应得到4-(4-(2-(4-((1,3-dioxoisoindolin-2-yl)methyl)phenyl)ethyl)-piperazin-1-yl)benzonitrile（化合物18）。
本发明化合物19的制备过程如下:
化合物19的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-三氟甲基苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2-(trifluoromethyl)phenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物19）。
本发明化合物20的制备过程如下:
化合物20的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(4-三氟甲基苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(4-(trifluoromethyl)phenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione（化合物20）。
本发明化合物21的制备过程如下:
化合物21的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与1-(2-甲砜基苯基)哌嗪反应得到2-(4-(2-(4-(2-(methylsulfonyl)phenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)isoindoline-1,3-dione(化合物21）。
本发明化合物22的制备过程如下:
化合物22的制备工艺包括：
中间体Ⅳ与4-哌嗪基苯乙酮反应得到2-(4-(2-(4-(4-acetylphenyl)piperazin-1-yl)ethyl)benzyl)-isoindoline-1,3-dione（化合物22）。
本发明所述酰亚胺类苯基哌嗪衍生物的盐由下列Ⅴ表示：
其中HX为生理上可接受的无机盐类或有机盐类
本发明所述的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物的盐主要包括氢溴酸盐、氢碘酸盐、盐酸盐、高氯酸盐、硫酸盐、马来酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、杏仁酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、草酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、墟泊酸盐、乳酸盐中的一种。
本发明所述的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物可药用盐的制备方法：将酰亚胺类苯基哌嗪衍生物溶于有机溶剂中，然后加入HX酸，常温下搅拌，析出的固体为酰亚胺类苯基哌嗪衍生物的无机酸盐或有机酸盐。
本发明所涉及的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物，初步药理学研究（双荧光素酶报告基因和体外抗肿瘤细胞测试），结果显示：一些化合物表现较好的α1-AR亚型选择性及良好的抗肿瘤活性，可进一步研制开发为新型抗良性前列腺增生和抗肿瘤药物。
具体实施方式
下面通过实施例进一步说明本发明。实施例给出了代表性新化合物的合成、相关结构鉴定数据及化合物活性数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
熔点测定用aFisherJohnshot-stage测定仪(温度计未校正)。
1HNMR，13CNMR用瑞士BrukerAVANCEAV-400NB，TMS做内标。
低分辨质谱（EI）用ThremoDSQ质谱仪测定。
高分辨质谱(HRESI)用LTQOrbitrapLC-MS(Thermo,Rockford,IL,USA)测定。
实施例1：中间体Ⅱ的制备
在250mL圆底烧瓶中加入5g(0.021mol)4-(溴乙烷)苯乙酸，100mL四氢呋喃，在0℃下缓慢加入21.9mL硼烷二甲基硫醚络合物(BMS，2MinTHF)。反应混合物在0℃下反应1h后，然后逐渐恢复常温。反应结束后缓慢加入水终止反应，用乙酸乙酯萃取（100mL×3），合并有机相，有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。粗产物没有纯化直接用于下一步反应。实施例2：中间体Ⅲ的制备
在250mL圆底烧瓶中加入4g（18.7mmol）中间体Ⅱ，3.46g（18.7mmol）邻苯二甲酰亚胺钾盐，2.58g（18.7mmol）碳酸钾，150mL丙酮，在60℃下反应16h。TLC显示原料反应完全。停止反应，过滤，浓缩。粗产物经硅胶柱层析纯化，洗脱剂：V(乙酸乙酯):V(石油醚)=1:8，得4.31g白色固体，收率：70%（以原料4-(溴乙烷)苯乙酸）。mp：101.2-101.8℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.38(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),4.82(s,2H),3.82(t,J=6.5Hz,2H),2.83(t,J=6.5Hz,2H),1.44(s,1H);MS(EI,m/z):281(M+),363,251(100%),232,204,192,178,160。
实施例3：中间体Ⅳ的制备
在250mL圆底烧瓶中加入4g（14.2mmol）中间体Ⅲ，5.75g（56.8mmol）三乙胺，0.2g4-（N,N-二甲基）氨基吡啶(催化量)，100mL二氯甲烷，在0℃下缓慢加入4.06g（21.3mmol）对甲苯磺酰氯（TsCl）的二氯甲烷溶液。反应混合物在0℃下反应16h，TLC显示原料反应完全。缓慢加入水终止反应，用二氯甲烷萃取（100mL×3），合并有机相，有机相分别用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。粗产物经硅胶柱层析纯化，洗脱剂：V(乙酸乙酯):V(石油醚)=1:10，得5.88g白色固体，收率：95%。mp：108.2-108.9℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.71(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.66(d,J=8.3Hz,2H),7.31(d,J=8.0Hz,2H),7.28(d,J=8.3Hz,2H),7.05(d,J=8.0Hz,2H),4.81(s,2H),4.16(t,J=7.0Hz,2H),2.91(t,J=7.0Hz,2H),2.42(s,3H);MS(EI,m/z):435(M+),363,250(100%),235,204,178,148。
实施例4：化合物1的制备
在25mL圆底烧瓶中加入100mg（0.23mmol）中间体Ⅳ，44.7mg（0.28mmol）N-苯基哌嗪，190.4mg（1.38mmol）碳酸钾，15mL乙腈，在85℃下反应16h，TLC显示原料反应完全。停止反应，过滤，浓缩。粗产物经硅胶柱层析纯化，洗脱剂：V(乙酸乙酯):V(石油醚)=1:4，得83mg白色固体，收率：85%。mp：130.2-131.0℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.1Hz,2H),7.28-7.24(m,2H),7.18(d,J=8.1Hz,2H),6.93(d,J=7.9Hz,2H),6.85(t,J=7.3Hz,1H),4.82(s,2H),3.22(t,J=5.0Hz,4H),2.81(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.67(t,J=5.0Hz,4H),2.62(dd,J=9.8,6.4Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC27H28O2N3,426.2176[M+1]+;found,426.2169。
实施例5：化合物2的制备
中间体Ⅳ与1-苄基哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得80.7g白色固体，收率：80%。mp：122.8-123.4℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.83(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.69(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.35(d,J=8.0Hz,2H),7.31–7.28(m,5H),7.14(d,J=8.0Hz,2H),4.81(s,2H),3.51(s,2H),2.75(dd,J=10.0,6.4Hz,2H),2.66–2.38(m,10H);HRMS(ESI)calcdforC28H30O2N3,440.2332[M+1]+;found,440.2327。
实施例6：化合物3的制备
中间体Ⅳ与1-(2-吡啶基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得85g白色固体，收率：86.8%。mp：123.0-123.4℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):8.18(dd,J=5.0,1.6Hz,1H),7.83(dd,J=5.4,3.0Hz,2H),7.69(dd,J=5.4,3.0Hz,2H),7.46(ddd,J=8.8,7.2,1.6Hz,1H),7.36(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.63(d,J=8.8,1H),6.60(dd,J=7.2,5.0Hz,1H),4.82(s,2H),3.57(t,J=5.0Hz,4H),2.81(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.64–2.59(m,6H);HRMS(ESI)calcdforC26H27O2N4,427.2128[M+1]+;found,427.2130。
实施例7：化合物4的制备
中间体Ⅳ与1-(2-甲基苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得87.8g白色固体，收率：87%。mp：120.8-121.6℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.19–7.14(m,4H),7.06–6.95(m,2H),4.83(s,2H),2.97(t,J=4.8Hz,4H),2.82(dd,J=10.0,6.3Hz,2H),2.68(brt,4H),2.64(dd,J=10.0,6.3Hz,2H),2.30(s,3H);HRMS(ESI)calcdforC28H30O2N3,440.2333[M+1]+;found,440.2326。
实施例8：化合物5的制备
中间体Ⅳ与1-(4-甲基苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得45.4g淡黄色固体，收率：45%。mp：150.4-151.1℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),7.07(d,J=8.6Hz,2H),6.85(d,J=8.6Hz,2H),4.82(s,2H),3.17(t,J=4.8Hz,4H),2.81(dd,J=9.9,6.3Hz,2H),2.67(t,J=4.8Hz,4H),2.62(dd,J=9.9,6.3Hz,2H),2.27(s,3H);HRMS(ESI)calcdforC28H30O2N3,440.2332[M+1]+;found,440.2324。
实施例9：化合物6的制备
中间体Ⅳ与1-(2-甲氧苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得86.8g白色固体，收率：83%。mp：132.8-133.6℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.18(d,J=8.0Hz,2H),7.02–6.85(m,4H),4.82(s,2H),3.86(s,3H),3.12(brt,4H),2.82(dd,J=10.0,6.2Hz,2H),2.73(brt,4H),2.64(dd,J=10.0,6.2Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC28H30O3N3,456.2282[M+1]+;found,456.2273。
实施例10：化合物7的制备
中间体Ⅳ与1-(4-甲氧苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得75g淡黄色固体，收率：
71.7%。mp：142.6-143.6℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.69(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.92–6.81(m,4H),4.82(s,2H),3.76(s,3H),3.11(t,J=4.8Hz,4H),2.81(dd,J=10.0,6.3Hz,2H),2.67(t,J=4.8Hz,4H),2.62(dd,J=10.0,6.3Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC28H30O3N3,456.2281[M+1]+;found,456.2273。
实施例11：化合物8的制备
中间体Ⅳ与1-(2-乙氧苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得92.7g白色固体，收率：86%。mp：122.4-123.1℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.69(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.18(d,J=8.0Hz,2H),6.98–6.83(m,4H),4.82(s,2H),4.07(q,J=7.0Hz,2H),3.15(brt,4H),2.82(dd,J=10.0,6.2Hz,2H),2.72(brt,4H),2.64(dd,J=10.0,6.2Hz,2H),1.45(t,J=7.0Hz,3H);HRMS(ESI)calcdforC29H32O3N3,470.2438[M+1]+;found,470.2432。
实施例12：化合物9的制备
中间体Ⅳ与1-(2-氟苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得83.5g白色固体，收率：82%。mp：133.6-134.1℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.69(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.18(d,J=8.0Hz,2H),7.08–6.89(m,4H),4.82(s,2H),3.14(t,J=4.7Hz,4H),2.81(dd,J=10.0,6.2Hz,2H),2.70(t,J=4.7Hz,4H),2.63(dd,J=1.0,6.2Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC27H27O2N3F,444.2082[M+1]+;found,444.2075。
实施例13：化合物10的制备
中间体Ⅳ与1-(4-氟苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得60g淡黄色固体，收率：59%。mp：152.0-152.6℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.98–6.85(m,4H),4.82(s,2H),3.14(t,J=4.8Hz,4H),2.80(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.66(t,J=4.8Hz,4H),2.62(dd,J=9.8,6.3Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC27H27O2N3F,444.2081[M+1]+;found,444.2075。
实施例14：化合物11的制备
中间体Ⅳ与1-(2,4-二氟苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得80g白色固体，收率：75.5%。mp：122.4-123.0℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.93–6.86(m,1H),6.83–6.76(m,2H),4.82(s,2H),3.07(t,J=4.6Hz,4H),2.80(dd,J=10.0,6.2Hz,2H),2.69(t,J=4.6Hz,4H),2.63(dd,J=10.0,6.2Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC27H26O2N3F2,462.1988[M+1]+;found,462.1982。
实施例15：化合物12的制备
中间体Ⅳ与3-氟-4-(1-哌嗪基)苯腈的反应，合成过程同实施例4。得50g白色固体，收率：46.5%。mp：170.3-171.3℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.36(d,J=8.0Hz,2H),7.34(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.24(dd,J=12.8,1.6Hz,1H),7.16(d,J=8.0Hz,2H),6.90(t,J=8.4Hz,1H),4.82(s,2H),3.24(t,J=4.8Hz,4H),2.80(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.67(t,J=4.8Hz,4H),2.63(dd,J=9.8,6.3Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC28H26O2N4F,469.2034[M+1]+;found,469.2025。
实施例16：化合物13的制备
中间体Ⅳ与1-(2-氯苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得90.7g白色固体，收率：86%。mp：147.7-148.1℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.38–7.34(m,3H),7.24–7.16(m,3H),7.05(dd,J=8.0,1.5Hz,1H),6.96(td,J=8.0,1.5Hz,1H),4.82(s,2H),3.10(brt,4H),2.81(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.71(brt,4H),2.64(dd,J=9.8,6.3Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC27H27O2N3Cl,460.1786[M+1]+;found,460.1782。
实施例17：化合物14的制备
中间体Ⅳ与1-(4-氯苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得78g淡黄色固体，收率：73.9%。mp：160.0-160.6℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.36(d,J=8.0Hz,2H),7.19(dd,J=7.2,2.4Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.83(dd,J=7.2,2.4Hz,2H),4.82(s,2H),3.18(t,J=4.8Hz,4H),2.80(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.65(t,J=4.8Hz,4H),2.62(dd,J=9.8,6.3Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC27H27O2N3Cl,460.1786[M+1]+;found,460.1782。
实施例18：化合物15的制备
中间体Ⅳ与1-(2-甲基-5-氯苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得87g白色固体，收率：80%。mp：183.8-184.7℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.18(d,J=8.0Hz,2H),7.07(d,J=8.0Hz,1H),6.97(d,J=2.0Hz,1H),6.94(dd,J=8.0,2.0Hz,1H),4.82(s,2H),2.94(t,J=4.6Hz,4H),2.81(dd,J=9.8,6.2Hz,2H),2.66(brt,4H),2.64(dd,J=9.8,6.2Hz,2H),2.24(s,3H);HRMS(ESI)calcdforC28H29O2N3Cl,474.1942[M+1]+;found,474.1938。
实施例19：化合物16的制备
中间体Ⅳ与1-(4-溴苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得81g淡黄色固体，收率：70%。mp：167.4-167.9℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.36(d,J=8.0Hz,2H),7.33(dd,J=6.8,2Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.78(dd,J=6.8,2Hz,2H),4.82(s,2H),3.17(t,J=4.8Hz,4H),2.79(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.64(t,J=4.8Hz,4H),2.61(dd,J=9.8,6.3Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC27H27O2N3Br,504.1281[M+1]+;found,504.1271。
实施例20：化合物17的制备
中间体Ⅳ与1-(2-苯甲腈)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得85g白色固体，收率：82.2%。mp：141.7-142.2℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.55(dd,J=7.8,1.3Hz,1H),7.47(ddd,J=8.4,7.6,1.3Hz,1H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),7.01–6.98(m,2H),4.82(s,2H),3.26(t,J=4.6,4H),2.81(dd,J=9.8,6.0Hz,2H),2.74(t,J=4.6,4H),2.65(dd,J=9.8,6.0Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC28H27O2N4,451.2128[M+1]+;found,451.2122。
实施例21：化合物18的制备
中间体Ⅳ与4-哌嗪基苯腈的反应，合成过程同实施例4。得50g淡黄色固体，收率：48.4%。mp：150.0-150.8℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.83(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.48(d,J=9.0Hz,2H),7.36(d,J=8.0Hz,2H),7.16(d,J=8.0Hz,2H),6.84(d,J=9.0Hz,2H),4.82(s,2H),3.33(t,J=4.8Hz,4H),2.79(dd,J=9.6,6.3Hz,2H),2.64–2.59(m,6H);HRMS(ESI)calcdforC28H27O2N4,451.2128[M+1]+;found,451.2127。
实施例22：化合物19的制备
中间体Ⅳ与1-(2-三氟甲基苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得90g白色固体，收率：79.4%。mp：141.3-142.3℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.61(dd,J=7.8,0.8Hz,1H),7.51(t,J=7.8Hz,1H),7.51(d,J=7.8Hz,1H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.22(d,J=7.8Hz,1H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),4.82(s,2H),2.98(t,J=4.7Hz,4H),2.81(dd,J=10.0,6.2Hz,2H),2.68–2.62(m,6H);HRMS(ESI)calcdforC28H27O2N3F3,494.2049[M+1]+;found,494.2041。
实施例23：化合物20的制备
中间体Ⅳ与1-(4-三氟甲基苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得55g淡黄色固体，收率：48.5%。mp：164.3-164.9℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.47(d,J=8.7Hz,2H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.91(d,J=8.7Hz,2H),4.82(s,2H),3.33(t,J=4.8Hz,4H),2.80(dd,J=9.7,6.3Hz,2H),2.66–2.60(m,6H);HRMS(ESI)calcdforC28H27O2N3F3,494.2049[M+1]+;found,494.2040。
实施例24：化合物21的制备
中间体Ⅳ与1-(2-甲砜基苯基)哌嗪的反应，合成过程同实施例4。得85g白色固体，收率：73.5%。mp：228.5-229.4℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):8.07(dd,J=8.0,1.6Hz,1H),7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.61(td,J=8.0,1.6Hz,1H),7.41(dd,J=8.0,0.8Hz,1H),7.37(d,J=8.0Hz,2H),7.32(td,J=8.0,0.8Hz,1H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),4.82(s,2H),3.33(s,3H),3.12(brt,4H),2.81(dd,J=9.9,6.1Hz,2H),2.72(brt,4H),2.65(dd,J=9.9,6.1Hz,2H);HRMS(ESI)calcdforC28H30O4N3S,504.1951[M+1]+;found,504.1941。
实施例25：化合物22的制备
中间体Ⅳ与4-哌嗪基苯乙酮的反应，合成过程同实施例4。得60g淡黄色固体，收率：55.9%。mp：157.4-157.8℃;1HNMR(δH,400MHz,CDCl3):7.87(d,J=9.0Hz,2H),7.84(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.70(dd,J=5.5,3.0Hz,2H),7.36(d,J=8.0Hz,2H),7.17(d,J=8.0Hz,2H),6.86(d,J=9.0Hz,2H),4.82(s,2H),3.38(t,J=4.8Hz,4H),2.81(dd,J=9.8,6.3Hz,2H),2.65–2.61(m,6H),2.51(s,3H);HRMS(ESI)calcdforC29H30O3N3,468.2281[M+1]+;found,468.2273。
实施例26：α1-AR亚型受体的拮抗作用
α1-AR亚型选择性拮抗剂高通量筛选模型的建立：
1.质粒（pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.74[hRluc/TK],EX-A0967-M29,EX-Y3321-M29,EX-Y2008-M29）的保存和提取。
1.1质粒转化保存：将1μL上述质粒转到1.5mL离心管底部冰浴，加入200μL感受态细胞（DH5α）中，充分混匀后，冰浴30min。于42℃热激40s，冰浴3min。加入400μLS.O.C培养基，37℃震荡培养1h后，取50μL涂布到含有100μg/mL氨芐青霉素的固体培养基平板表面。37℃培养过夜，挑取单克隆接种到500μLLB液体培养基中，37℃摇床培养6h，加入含有100μg/mL氨芐青霉素的抗性甘油中，甘油终浓度为15-25%。
1.2菌株培养和质粒提取：将含有对应质粒的菌株，加入到LB液体培养基中培养过夜。采用质粒提取试剂盒（QIAprepSpinMiniprepKit）的方法提取质粒。并用微型核酸蛋白定量仪（GeneCompanyLimited,ND-100）测定质粒浓度。
2.待筛选的化合物样品的制备：化合物样品：将2-3mg纯品化合物溶于适量的二甲基亚砜（DMSO）中，配制成浓度为2mmol/L的储备液，取0.5μL作用于99μL含瞬转细胞的培养基中，使药物终浓度为10μmol/L。
3.细胞培养、铺板：从液氮罐取出HEK293细胞，细胞复苏后，转入50mL细胞培养瓶中，加入含10%胎牛血清，1%双抗的DMEM高糖培养基，37℃培养，每天换液，当细胞汇合度达90%时，用PBS缓冲液清洗细胞瓶两次后胰酶消化，10倍体积培养基稀释，离心弃上清。加入适量DMEM培养基（10%胎牛血清，1%双抗）吹散。用细胞计数板数细胞浓度按105个/mL，铺96孔板。置于37℃恒温培养过夜。
4.瞬时转染：铺板24h后，在显微镜下观察细胞板孔中的细胞，如果各孔总体汇合度达到90%以上，则可进行瞬转。用于细胞转染的混合液需临时配制，由A和B组成，其中，A由质粒α1A/α1B/α1D、报告基因luc2p-CRE和hRluc-TK以及无血清双抗的高糖培养基DMEM配制而成，B由脂质体和DMEM配制而成。A液和B液所需所有成分的体积都需经过计算得出。其中α1-AR亚型真核表达质粒：报告基因：内参=1：1：1。对于96孔板，每孔要求加入DNA的量为0.2μg/25μL，要求加入脂质体的量为0.5μL/25μL。操作时，首先按上述计算量分别配制A和B液，静置5-10min，然后将A与B混溶，用移液枪混匀后，静置20-30min。最后，从恒温箱中取出细胞培养板，用PBS清洗2次后弃去废液，在每孔中分别加入DMEM培养基50μL，待A+B作用完毕后，从中吸取50μL至每孔中，摇匀，放入恒温箱中进行培养。转染完毕后，经过4h培养后取出细胞培养板，将细胞液置换为含血清和双抗的DMEM高糖培养基培养18-22h。
5.化合物活性检测：共转染后，取出细胞培养板，用PBS清洗2次。在每孔中加入99μL含10%胎牛血清和1%双抗的DMEM高糖培养基中。将待测化合物和激动剂（苯肾上腺素，Phenylephrinehydrochloride，PE）配制浓度2mmol/L，分别取0.5μL加入到每孔含99μL培养基的平板中（使药物终浓度为10μmol/L）。顺序是优先添加拮抗剂和空白对照试剂，作用30min后再添加激动剂。添加完毕后混匀细胞液，37℃培养8h。为了对转染质量进行监控，每块板按照以下分组进行操作。空白对照组：1μLDMSO于99μL含10%血清、1%双抗的培养基中。阴性对照组：加入0.5μLDMSO于99μL含10%血清、1%双抗的培养基中作用30min中后再添加0.5μL激动剂PE（2mmol/L）。阴性对照组和空白对照组的比值表示在激动剂的刺激下相对于背景的诱导倍增发光数即信噪比，当信噪比大于2时，表示该微孔板的转染和肾上腺素诱导是有效的，也就是说该板进行的筛选有效的。对照组：进行转染时待测试化合物对α1-ARs的三个亚型：α1A-,α1B-,和α1D-AR的拮抗活性同时进行，采用非选择性拮抗剂哌唑嗪（Prazosin）作为阳性对照。具体方法如下：加入0.5μL哌唑嗪（2mmol/L）于每孔99μL含10%血清、1%双抗的培养基中，作用30min后，添加刺激因素苯肾上腺素0.5μL（2mmol/L）。样品组：待筛选样品用DMSO溶解，添加终浓度上限设定为10μmol/L，测试结果反映待测样品对苯肾上腺素受体的结合抑制程度。
6.细胞裂解冻存：加药完毕8h后，取出培养板，用PBS清洗2次，加入1*passivelysisbuffer，每孔35μL。将细胞培养板置于脱色摇床上充分裂解30min。置于-80℃过夜保存。
7.测定每个细胞孔中的相对荧光酶含量并得出相对比：将冻存于低温环境下的细胞培养板取出，待细胞液融化后，置于脱色摇床上摇荡15min左右取下，从每孔中吸取5μL细胞液分别注入到96孔白板中的指定孔中，加入25μL终止测试液（采用Dual-LuciferaseReproterAssaySystem（Promega，USA）双报告基因试剂盒）。利用荧光检测分析仪（GloMaxTM96MicroplateLuminometer（Promega公司））测试萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶活性的比值(RLU,relativelightunits)。测试化合物的RLU与阳性对照哌唑嗪RLU数值之比[测试化合物（RLU）/哌唑嗪（RLU）]，即：该化合物相对于哌唑嗪的拮抗活性强弱，数值越小表示拮抗活性越高。
表1是测试化合物的RLU与阳性对照哌唑嗪RLU数值之比
表1
实施例27：体外抗肿瘤细胞活性测试
1.材料：
1.1CCK-8试剂盒购于日本同仁化学研究所。
1.2靶细胞的制备：人前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP、DU145以及正常的前列腺上皮细胞RWPE-1的复苏与培养。
a.分别从液氮罐中取出人前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP、DU145以及正常的前列腺上皮细胞RWPE-1的冷存管，迅速置入37℃水浴箱中，不停摇动使之迅速溶化，无菌操作移入离心管中;
b.分别加DMEM完全培养液到PC-3细胞及RWPE-1细胞的离心管至10mL，F12完全培养基到LNCaP细胞的离心管至10mL，1640完全培养基到DU145细胞的离心管至10mL，1000rmp离心5min，弃上清。
c.PC-3、RWPE-1细胞分别加DMEM完全培养基3-4mL吹打使细胞混匀后移入培养瓶中，LNCaP细胞加3-4mL的F12完全培养基吹打使细胞混匀后移入培养瓶中，DU145细胞加3-4mL的1640完全培养基吹打使细胞混匀后移入培养瓶中，5%CO2，37℃培养；
d.观察细胞生长情况，及时更换培养液，分瓶。
1.3细胞计数：
a.选取对数生长期细胞，胰酶消化，分别对应的完全培养基终止，移入离心管中，加相应的完全培养基至10mL；
b.取10μL细胞悬液滴入计数板一侧凹槽中，显微镜下计数四个大格的细胞总数、除以4，乘104，即为每毫升培养液所含细胞数；
c.调整细胞数至1×105cells/mL。
1.4酰亚胺类苯基哌嗪衍生物溶液配置：
取酰亚胺类苯基哌嗪衍生物加入DMSO溶剂，调整初浓度为10mmol，配置浓度为1mmol待用，4℃保存。
2.试验方法
2.196孔板各孔加入人前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP、DU145以及正常的前列腺上皮细胞RWPE-1100μL（1×105cells/mL），37℃培养过夜。
2.2弃液，加入不同浓度的受试对象100μL，对照加DMEM完全培养基100μL，继续培养24h。.
2.3各孔加入CCK-8检测试剂10μL，继续培养20min至1h。
2.4酶标仪450nm下测定每孔OD值。
2.5计算抑制率：
肿瘤细胞抑制率%=[(对照组测定的平均OD值—加药组测定的平均OD值)/对照组测定的平均OD值]×100%。
2.6以抑制率对药物浓度的对数作图，求得IC50值：
以lgc为横坐标，抑制率为纵坐标，求得IC50值。
表2是本发明化合物的体外抗肿瘤细胞活性结果。
表2

Claims (5)

1.酰亚胺类苯基哌嗪衍生物，其特征是具有下述结构的化合物1-22，
2.如权利要求1所述酰亚胺类苯基哌嗪衍生物的盐，其特征在于包括氢溴酸盐、氢碘酸盐、盐酸盐、高氯酸盐、硫酸盐、马来酸盐、富马酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、杏仁酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、草酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐或乳酸盐。
3.权利要求2所述的酰亚胺类苯基哌嗪衍生物的盐的制备方法，其特征是：将酰亚胺类苯基哌嗪衍生物溶于有机溶剂中，然后加入HX酸，析出的固体为酰亚胺类苯基哌嗪衍生物的盐；所述HX酸为氢溴酸、氢碘酸、盐酸、高氯酸、硫酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、草酸、磷酸、琥珀酸或乳酸。
4.权利要求1所述酰亚胺类苯基哌嗪衍生物在制备抗良性前列腺增生药物中的应用。
5.权利要求1所述酰亚胺类苯基哌嗪衍生物在制备抗前列腺癌药物中的应用。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN1787995A (zh) * 2002-04-08 2006-06-14 兰贝克赛实验室有限公司 用作尿－选择性α－1A肾上腺素受体阻滞剂的α,w－二羧酰亚胺衍生物
CN1990470A (zh) * 2005-12-30 2007-07-04 北京协和药厂 酞丁安衍生物及其制法和其药物组合物与用途
CN101870696A (zh) * 2009-04-22 2010-10-27 连云港恒邦医药科技有限公司 具有多巴胺D2和5-HT2a双重活性的N-芳基哌嗪衍生物

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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New arylpiperazines with flexible versus partly constrained linker as serotonin 5-HT1A/5-HT7 receptor ligands;Piotr Kowalski等;《Archiv der Pharmazie》;20130422;第346卷(第5期);第339－348页 *

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