CN103923482B - 花蟹蟹壳红色素的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及花蟹蟹壳红色素的提取方法，按以下步骤进行：花蟹分离蟹壳和蟹肉，蟹壳蒸、烘干、粉碎；蟹壳粉脱钙过滤；胃蛋白酶酶解蟹壳滤饼，抽滤、水洗、真空干燥，得到蟹壳酶解物；浸提蟹壳酶解物；提取液浓缩，真空干燥得到蟹壳红色素粗产品；蟹壳红色素粗产品加入氢氧化钾-甲醇溶液，恒温水浴，皂化反应，混合物过滤，取滤渣，真空干燥后得皂化粗产品；取皂化粗产品，用无水乙醇溶解，湿法上硅胶柱，接着即用洗脱剂进行梯度洗脱，收集红色洗脱液，蒸发洗脱剂，即得蟹壳红色素。本发明工艺合理，可制得高纯度的蟹壳红色素。

Description

花蟹蟹壳红色素的提取方法

技术领域

本发明涉及花蟹蟹壳红色素的提取方法。

背景技术

花蟹蟹壳除了含有甲壳质、无机盐碳酸钙和蛋白质外，还含有红色素，红色素成分较复杂，主要成分有β-胡萝卜素、叶黄素、虾红素，随着人们食品安全意识的提高，食品中色素添加剂的安全性受到广泛关注。将花蟹壳中的天然红色素应用于食品，不仅可以满足食品色泽要求，而且同时赋予食品新的生理活性。现有花蟹蟹壳红色素的提取方法多采用单一的溶剂法提取（多用液-液提取），很难得到高纯度的蟹壳红色素。

发明内容

本发明提供一种花蟹蟹壳红色素的提取方法，其可制得高纯度的蟹壳红色素。

花蟹蟹壳红色素的提取方法，按以下步骤进行：

（1）花蟹分离蟹壳和蟹肉，清洗蟹壳，将蟹壳隔水蒸，水开后蒸10min；

（2）将蒸后的蟹壳进一步清洗干净，然后置于50℃烘箱中烘干；将烘干后的蟹壳用粉碎机粉碎，粉碎粒度75目，得到蟹壳粉；

（3）将100质量份蟹壳粉加入200质量份1%的盐酸溶液搅拌脱钙2h，过滤，得蟹壳滤饼；

（4）在PH值2.5、温度50℃的条件下用5质量份胃蛋白酶酶解蟹壳滤饼2h，抽滤、水洗滤渣至中性，于50℃下真空干燥，得到蟹壳酶解物；

（5）采用乙酸乙酯浸提蟹壳酶解物，料液比1:3；PH值4，浸提温度60℃，时间2h；过滤，滤饼加乙酸乙酯在第一次条件下再浸提一次，合并两次乙酸乙酯提取液，浓缩，真空干燥得到蟹壳红色素粗产品；

（6）取蟹壳红色素粗产品，加入0.5mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液，料液质量比为1:2，在30℃下恒温水浴50min，将皂化反应混合物过滤，取滤渣，真空干燥后得皂化粗产品；蟹壳红色素组分复杂，使得纯化困难，而经过皂化后，能除去部分油脂，有利于纯化蟹壳红色素；

（7）取皂化粗产品，用无水乙醇溶解，料液质量比为2:1，湿法上硅胶柱，上样量样品与硅胶质量比1∶40，硅胶柱径高比1∶10，上样完毕后，接着即用洗脱剂进行梯度洗脱，先选用乙酸甲酯:苯:石油醚体积比为3:11:3的混合溶液洗脱，再用乙酸甲酯:苯:石油醚体积比为2:8:5的混合溶液洗脱，洗脱流速为1BV/h，收集红色洗脱液，蒸发洗脱剂，即得蟹壳红色素。

采用上述技术方案后，本发明与现有的背景技术相比，具有如下优点：

蟹壳粉经过盐酸溶液脱钙、胃蛋白酶酶解蛋白质，然后采用乙酸乙酯浸提得色素初产品，再经过皂化反应除脂，最后采用混合洗脱剂柱状层析纯化，工艺合理，可制得高纯度的蟹壳红色素。

具体实施方式

以下提供本发明的一些实施例，以助于进一步理解本发明，但本发明的保护范围并不仅限于这些实施例。

花蟹蟹壳红色素的提取方法，按以下步骤进行：

（1）花蟹分离蟹壳和蟹肉，清洗蟹壳，将蟹壳隔水蒸，水开后蒸10min；

（2）将蒸后的蟹壳进一步清洗干净，然后置于50℃烘箱中烘干；将烘干后的蟹壳用粉碎机粉碎，粉碎粒度75目，得到蟹壳粉；

（3）将100质量份蟹壳粉加入200质量份1%的盐酸溶液搅拌脱钙2h，过滤，得蟹壳滤饼；

（4）在PH值2.5、温度50℃的条件下用5质量份胃蛋白酶酶解蟹壳滤饼2h，抽滤、水洗滤渣至中性，于50℃下真空干燥，得到蟹壳酶解物；胃蛋白酶活力为20000U/g。

（5）采用乙酸乙酯浸提蟹壳酶解物，料液比1:3；PH值4，浸提温度60℃，时间2h；过滤，滤饼加乙酸乙酯在第一次条件下再浸提一次，合并两次乙酸乙酯提取液，浓缩，真空干燥得到蟹壳红色素粗产品；

（6）取蟹壳红色素粗产品，加入0.5mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液，料液质量比为1:2，在30℃下恒温水浴50min，将皂化反应混合物过滤，取滤渣，真空干燥后得皂化粗产品；蟹壳红色素组分复杂，使得纯化困难，而经过皂化后，能除去部分油脂，有利于纯化蟹壳红色素；

（7）取皂化粗产品，用无水乙醇溶解，料液质量比为2:1，湿法上硅胶柱，上样量样品与硅胶质量比1∶40，硅胶柱径高比1∶10，上样完毕后，接着即用洗脱剂进行梯度洗脱，先选用乙酸甲酯:苯:石油醚体积比为3:11:3的混合溶液洗脱，流下淡黄色部分及少量红色部分，再用乙酸甲酯:苯:石油醚体积比为2:8:5的混合溶液洗脱，将红色部分全部洗脱，洗脱流速为1BV/h，收集红色洗脱液，蒸发洗脱剂，即得蟹壳红色素。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (1)

1.花蟹蟹壳红色素的提取方法，其特征是：按以下步骤进行：

（1）花蟹分离蟹壳和蟹肉，清洗蟹壳，将蟹壳隔水蒸，水开后蒸10min；

（2）将蒸后的蟹壳进一步清洗干净，然后置于50℃烘箱中烘干；将烘干后的蟹壳用粉碎机粉碎，粉碎粒度75目，得到蟹壳粉；

（3）将100质量份蟹壳粉加入200质量份1%的盐酸溶液搅拌脱钙2h，过滤，得蟹壳滤饼；

（4）在pH值2.5、温度50℃的条件下用5质量份胃蛋白酶酶解蟹壳滤饼2h，抽滤、水洗滤渣至中性，于50℃下真空干燥，得到蟹壳酶解物；

（5）采用乙酸乙酯浸提蟹壳酶解物，料液比1:3；pH值4，浸提温度60℃，时间2h；过滤，滤饼加乙酸乙酯在第一次条件下再浸提一次，合并两次乙酸乙酯提取液，浓缩，真空干燥得到蟹壳红色素粗产品；

（6）取蟹壳红色素粗产品，加入0.5mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液，料液质量比为1:2，在30℃下恒温水浴50min，将皂化反应混合物过滤，取滤渣，真空干燥后得皂化粗产品；

（7）取皂化粗产品，用无水乙醇溶解，料液质量比为2:1，湿法上硅胶柱，上样量样品与硅胶质量比1∶40，硅胶柱径高比1∶10，上样完毕后，接着即用洗脱剂进行梯度洗脱，先选用乙酸甲酯:苯:石油醚体积比为3:11:3的混合溶液洗脱，再用乙酸甲酯:苯:石油醚体积比为2:8:5的混合溶液洗脱，洗脱流速为1BV/h，收集红色洗脱液，蒸发洗脱剂，即得蟹壳红色素。