CN103913454B - 一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，通过用不同浓度的亚硝酸盐溶液分别作用血液样本，绘制亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图；根据所述效量关系图将血液样本配置不同高铁血红蛋白浓度；然后将所述不同高铁血红蛋白浓度血液样本分别滴于空白采血卡上扫描并测定其RGB值，根据这些RGB值进行统计学分析，并绘制出不同浓度的高铁血红蛋白比色卡，最后打印出来即可以使用。本发明通过上述制备方法得到的比色卡能够对高铁血红蛋白含量快速检测，使用简便，并且更加安全经济。

Description

一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法

技术领域

本发明属于高铁血红蛋白血症检测技术领域，尤其涉及一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法。

背景技术

高铁血红蛋白(methemoglobin，MetHb)是遗传因素或吸收毒性化合物后由红细胞产生的。其含量超过血红蛋白总量1％时即可引起高铁血红蛋白血症(methemoglobinemia)，按原因分为获得性和遗传性两大类。获得性高铁血红蛋白血症最常见，多为摄入某些氧化(还原)性药物(如磺胺类、氯喹、伯氨喹等药物)或毒物(如亚硝酸盐、硝酸铵、硝酸钾等化学试剂)时的一过性表现。遗传性高铁血红蛋白血症(hereditarymethemoglobinemia，HM)绝大部分为NADH-细胞色素b5还原酶(NADH-cytochromeb5reductase，b5R)的遗传缺陷所致，呈常染色体隐性遗传，故又称隐性先天性高铁血红蛋白血症(recessive congenital methemoglobinemia，RCM)；一小部分由血红蛋白先天异常(即血红蛋白M)引起，一般呈显性遗传。

MetHb含量测定方法有很多种，分为三大类，几乎所有方法都以比尔-朗伯定律(Beer-Lambert’s Law)A＝E×C×L(A为吸光度，E为吸光系数，C为吸光物质浓度，L为吸光物质溶液的液层厚度或者光程长度)为基础。但是这些测定方法都普遍存在这设备要求高、检测速度慢、临床效果差等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，旨在解决现有检测方法设备要求高、检测速度慢、临床效果差的问题。

本发明是这样实现的，一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，包括以下步骤：

(1)用不同浓度的亚硝酸盐溶液分别作用多份不同组织来源的一级血液样本，绘制亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图；

(2)根据所述效量关系图，将上述一级血液样本配置成具有不同高铁血红蛋白浓度的二级血液样本；

(3)将所述二级血液样本分别滴于空白采血卡上，晾干5～15s后扫描后用绘图软件测定高铁血红蛋白的R、G、B值，将具有相同高铁血红蛋白浓度的R值、G值以及B值分别求和算均值得到R均值、G均值以及B均值；

(4)将所述R均值、G均值以及B均值用绘图软件整合并绘制出不同高铁血红蛋白浓度的高铁血红蛋白比色卡，统计学分析后，打印比色卡。

优选地，在步骤(1)中，所述亚硝酸盐溶液的摩尔浓度与高铁血红蛋白血浓度的关系用函数定义为：Y＝1.2876+24.80X，r＝0.995，P<0.001；其中，X代表亚硝酸盐溶液的摩尔浓度；Y代表高铁血红蛋白血浓度；r代表相关系数；P代表否定原假设的概率；

在步骤(1)中，所述多份不同组织来源的一级血液样本具体为：采集50名健康人的静脉血液样本，并定义该静脉血液样本为一级血液样本。

优选地，在步骤(2)中，所述二级血液样本中高铁血红蛋白浓度包括：正常组、5％～80％百分比浓度，其中，所述5％～80％百分比浓度之间的浓度间隔为5％。

优选地，在步骤(3)中，所述晾干的时间为10s；

在步骤(3)中，所述扫描为通过图片扫描仪扫描，所述绘图软件为Photoshop或CorelDRAW绘图软件。

优选地，在步骤(4)中，所述绘图软件为Photoshop或CorelDRAW绘图软件；

在步骤(4)中，所述统计学分析为将具有相同高铁血红蛋白浓度二级血样R值、G值以及B值分别求和后，在求其算数平均值，得到具有相同高铁血红蛋白浓度二级血样的R算数平均值、G算数平均值以及B算数平均值。

本发明克服现有技术的不足，提供一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法。由于与正常的血液相比，高铁血红蛋白的血液呈现出一种特殊的棕褐色。而且其浓度越高，颜色越深。此外，RGB色彩模式，即是代表红(Red)、绿(Green)、蓝(Blue)三个通道的颜色使用RGB模型为图像中每一个像素的RGB分量分配一个0～255范围内的强度值。RGB图像只使用三种颜色，就可以使它们按照不同的比例混合，在屏幕上重现16777216种颜色。这个标准几乎包括了人类视力所能感知的所有颜色，是目前运用最广的颜色系统之一。

本发明利用高铁血红蛋白这一特殊的物理化学特性，以及RGB色彩模式，通过用不同浓度的亚硝酸盐溶液分别作用血液样本，绘制亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图；根据所述效量关系图将血液样本配置不同高铁血红蛋白浓度；然后将所述不同高铁血红蛋白浓度血液样本分别滴于空白采血卡上扫描并测定其RGB值，根据这些RGB值进行统计学分析，并绘制出不同浓度的高铁血红蛋白比色卡，最后打印出来即可以使用。

本发明通过上述快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法得到的比色卡能够对高铁血红蛋白血含量快速测定，使用简便，并且更加安全经济。

附图说明

图1是本发明的快速检测高铁血红蛋白血含量的比色卡的制备方法的步骤流程图；

图2是本发明实施例中亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图；

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明提供了一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，如图1所示，包括以下步骤：

S1、用不同浓度的亚硝酸盐溶液分别作用多份不同组织来源的一级血液样本，绘制亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图；

在步骤S1中，更具体包括以下步骤：

A、采集50名健康人的静脉血液样本，定义该静脉血液样本为一级血液样本，并编号1～50号；

B、将不同摩尔浓度的亚硝酸盐溶液分别作用一级血液样本1～50号，其中，亚硝酸盐溶液的摩尔浓度与高铁血红蛋白血浓度的关系用函数定义为：Y＝1.2876+24.80X，r＝0.995，P<0.001；其中，X代表亚硝酸盐溶液的摩尔浓度；Y代表高铁血红蛋白血浓度；r代表相关系数；P代表否定原假设的概率。绘制亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图，如图2所示，图2为亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图。

其中，制作高铁血红蛋白生成率间的效量关系图的根据如下表1所示：

表1

(注：此处运用到的统计学方法为标准差)

S2、根据所述效量关系图，将上述一级血液样本配置成具有不同高铁血红蛋白浓度的二级血液样本；

在步骤S2中，二级血液样本中高铁血红蛋白浓度包括：包括正常组、5％～80％百分比浓度，其中，所述5％～80％百分比浓度之间的浓度间隔为5％，亦即分为17组。正常组为健康人的血液样本，作为对照组。

S3、将所述二级血液样本分别滴于空白采血卡上，晾干5～15s后扫描后用绘图软件测定高铁血红蛋白的R、G、B值，将具有相同高铁血红蛋白浓度的R值、G值以及B值分别求和算均值得到R均值、G均值以及B均值；

在步骤S3中，更具体的，晾干的时间为10s，晾干后通过图片扫描仪扫描后，得到扫描图片，通过Photoshop或CorelDRAW绘图软件分析扫描图片，测定高铁血红蛋白的R、G、B值。

血液样本编号、高铁血红蛋白浓度以及RGB值之间的关系如下表2所示：

表2

在表2中，对应17组不同高铁血红蛋白浓度获得17组的R均值、G均值以及B均值。

S4、将所述R均值、G均值以及B均值用绘图软件整合并绘制出不同高铁血红蛋白浓度的高铁血红蛋白比色卡，统计学分析后，打印比色卡。

在步骤S4中，更具体的，将所述二级血液样本分别滴于空白采血卡上，晾干5～15s后，高分辨率扫描仪扫描到计算机上，后用Photoshop或CorelDRAW绘图软件绘图软件测定具有相同高铁血红蛋白浓度二级血样的R、G、B值，将具有相同高铁血红蛋白浓度二级血样R值、G值以及B值分别求和后，在求其算数平均值，这个平均值输入到这两个任意一个软件中，就可得出不同浓度高铁血红蛋白的RGB值。

此外，在本发明中，可以通过上述方法制备一种用于快速检测高铁血红蛋白血含量的比色卡。

相比与现有技术的缺点和不足，本发明具有以下有益效果：本发明提供的比色卡能够快速检测高铁血红蛋白血含量，使用简便、安全经济。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)用不同浓度的亚硝酸盐溶液分别作用多份不同组织来源的一级血液样本，绘制亚硝酸盐与高铁血红蛋白生成率间的效量关系图；

(2)根据所述效量关系图，将上述一级血液样本配置成具有不同高铁血红蛋白浓度的二级血液样本；

(3)将所述二级血液样本分别滴于空白采血卡上，晾干5～15s后扫描后用绘图软件测定高铁血红蛋白的R、G、B值，将具有相同高铁血红蛋白浓度的R值、G值以及B值分别求和算均值得到R均值、G均值以及B均值；

(4)将所述R均值、G均值以及B均值用绘图软件整合并绘制出不同浓度的高铁血红蛋白比色卡，统计学分析后，打印比色卡。

2.如权利要求1所述的快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述亚硝酸盐溶液的摩尔浓度与高铁血红蛋白血浓度的关系用函数定义为：Y＝1.2876+24.80X，r＝0.995，P<0.001；其中，X代表亚硝酸盐溶液的摩尔浓度；Y代表高铁血红蛋白血浓度；r代表相关系数；P代表否定原假设的概率；

在步骤(1)中，所述多份不同组织来源的一级血液样本具体为：采集50名健康人的静脉血液样本，并定义该静脉血液样本为一级血液样本。

3.如权利要求2所述的快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述二级血液样本中高铁血红蛋白浓度包括：正常组、5％～80％百分比浓度，其中，所述5％～80％百分比浓度之间的浓度间隔为5％。

4.如权利要求3所述的快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述晾干的时间为10s；

在步骤(3)中，所述扫描为通过图片扫描仪扫描，所述绘图软件为Photoshop或CorelDRAW绘图软件。

5.如权利要求4所述的快速检测高铁血红蛋白血含量比色卡的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述绘图软件为Photoshop或CorelDRAW绘图软件；

在步骤(4)中，所述统计学分析为将具有相同高铁血红蛋白浓度二级血样R值、G值以及B值分别求和后，在求其算数平均值，得到具有相同高铁血红蛋白浓度二级血样的R算数平均值、G算数平均值以及B算数平均值。