CN103908510A - 一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,所述组合物含有大黄、五味子、茵陈和栀子,以所述组合物的重量为基准,大黄的含量为10-80重量%,五味子的含量为10-80重量%,茵陈的含量为0-40重量%,栀子的含量为0-40重量%。还公开了一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物的制备方法及其制备的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,以及本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物在制备用于防治鲟鱼脂肪肝的中药复方制剂中的应用。本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,采用纯中药配方,对鲟鱼安全无害,将本发明的中药组合物拌入饲料中,可在不影响鲟鱼生长的情况下有效防治鲟鱼的脂肪肝,安全有效。

Description

一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及水产兽药领域,具体地,涉及一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法,以及该中药组合物在制备用于防治鲟鱼脂肪肝的中药复方制剂中的应用。
背景技术
我国是世界上最大的鲟鱼养殖国,产量超过世界鲟鱼养殖产量的80%。鲟鱼是动物食性的鱼类,目前由于鲟鱼的营养需求及配合饲料研究不成熟,生产中鲟鱼脂肪肝频发,给养殖户和企业造成一定的损失。
鲟鱼经济价值较高,用药也较谨慎。兽药国家标准中可以用于鱼类肝病防治的中草药制剂“肝胆利康散”、“龙胆泻肝散”、“柴黄益肝散”等复方由于工艺和鱼类消化道结构等原因,效果不理想。目前,市场上防治鲟鱼脂肪肝采取常规方法,在饲料中添加维生素、胆碱、胆汁酸等来防治,但效果也不是很理想。因此,目前急需一种安全有效的防治鲟鱼脂肪肝的方法。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有防治鲟鱼脂肪肝效果不理想的问题,提供一种安全有效的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法,以及该中药组合物在制备用于防治鲟鱼脂肪肝的中药复方制剂中的应用。
本发明的发明人在研究中发现,含有大黄、五味子、茵陈和栀子的中药组合物,以所述组合物的重量为基准,大黄的含量为10-80重量%,五味子的含量为10-80重量%,茵陈的含量为0-40重量%,栀子的含量为0-40重量%,将该中药组合物拌入鲟鱼饲料中,可在不影响鲟鱼生长的情况下有效防治鲟鱼的脂肪肝。
因此,为了实现上述目的,一方面,本发明提供了一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,所述组合物含有大黄、五味子、茵陈和栀子,以所述组合物的重量为基准,大黄的含量为10-80重量%,五味子的含量为10-80重量%,茵陈的含量为0-40重量%,栀子的含量为0-40重量%。
优选地,所述组合物由大黄、五味子和茵陈组成,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.2-5:0.1-3;更进一步优选地,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。
第二方面,本发明提供了一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物的制备方法,所述方法包括:
(1)将每种原料中草药的粗粉分别加水煎煮两次,合并煎液,过滤,蒸发浓缩至稠膏状,干燥,粉碎成细粉;
(2)将步骤(1)得到的每种原料中草药的细粉混合;
其中,原料中草药包括大黄、五味子、茵陈和栀子,以所述中药组合物的重量为基准,大黄细粉的用量为10-80重量%,五味子细粉的用量为10-80重量%,茵陈细粉的用量为0-40重量%,栀子细粉的用量为0-40重量%。
优选地,所述原料中草药由大黄、五味子和茵陈组成,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.2-5:0.1-3;更进一步优选地,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。
第三方面,本发明提供了如上所述的方法制备的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物。
第四方面,本发明提供了如上所述的中药组合物在制备用于防治鲟鱼脂肪肝的中药复方制剂中的应用。
本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,采用纯中药配方,对鲟鱼安全无害,将本发明的中药组合物拌入饲料中,可在不影响鲟鱼生长的情况下有效防治鲟鱼的脂肪肝,安全有效。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
图1是试验例中普通对照组L8、高脂对照组L16、试验组F1、对比试验组D1的肝脏的照片。
图2是试验例中普通对照组L8、高脂对照组L16、试验组F1、对比试验组D1的肝脏的病理切片的光镜照片。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明,并不用于限制本发明。
一方面,本发明提供了一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,该组合物含有大黄、五味子、茵陈和栀子,以组合物的重量为基准,大黄的含量为10-80重量%,五味子的含量为10-80重量%,茵陈的含量为0-40重量%,栀子的含量为0-40重量%。
根据本发明,尽管组合物含有大黄、五味子、茵陈和栀子,以组合物的重量为基准,大黄的含量为10-80重量%,五味子的含量为10-80重量%,茵陈的含量为0-40重量%,栀子的含量为0-40重量%,即可实现本发明的目的,即能够在不影响鲟鱼生长的情况下有效防治鲟鱼的脂肪肝。但优选情况下,组合物由大黄、五味子和茵陈组成,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.2-5:0.1-3;进一步优选地,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。在上述优选情况下,能够更有效地防治鲟鱼的脂肪肝。因此,优选地,组合物由大黄、五味子和茵陈组成,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.2-5:0.1-3;更进一步优选地,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。
本发明中,大黄、五味子、茵陈和栀子为中药领域常用的中草药,为本领域技术人员所公知,在此不再赘述。
第二方面,本发明提供了一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物的制备方法,该方法包括:
(1)将每种原料中草药的粗粉分别加水煎煮两次,合并煎液,过滤,蒸发浓缩至稠膏状,干燥,粉碎成细粉;
(2)将步骤(1)得到的每种原料中草药的细粉混合;
其中,原料中草药包括大黄、五味子、茵陈和栀子,以所述中药组合物的重量为基准,大黄细粉的用量为10-80重量%,五味子细粉的用量为10-80重量%,茵陈细粉的用量为0-40重量%,栀子细粉的用量为0-40重量%。
根据本发明,尽管根据上述方法制备的中药组合物即可实现本发明的目的,即能够在不影响鲟鱼生长的情况下有效防治鲟鱼的脂肪肝。但优选情况下,原料中草药由大黄、五味子和茵陈组成,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.2-5:0.1-3;更进一步优选地,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。在上述优选情况下,制备得到的中药组合物能够更有效地防治鲟鱼的脂肪肝。因此,优选地,原料中草药由大黄、五味子和茵陈组成,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.2-5:0.1-3;更进一步优选地,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。
本发明中,原料中草药的粗粉即是指将中草药原料粉碎得到的粉末,对于粗粉的粒径无特殊要求,可以为煎煮中草药常规的粒径,例如,粗粉的粒径可以为355-2000μm。
本发明步骤(1)中,第一次加水量优选为粗粉体积的10-12倍,第二次加水量优选为粗粉体积的8-10倍,煎煮的温度优选为96-100℃,每次煎煮的时间优选为1-3h。
本发明步骤(1)中,对于合并煎液、过滤、蒸发浓缩至稠膏状、干燥,均为本领域的常规操作,对于蒸发浓缩的温度和时间无特殊要求,例如,蒸发的温度可以为50-80℃,蒸发的时间可以为2-10h。对于干燥的温度和时间无特殊要求,例如,干燥的温度可以为45-65℃,干燥的时间可以为12-24h。
本发明中,细粉的粒径优选为150-850μm,更优选为180-250μm。
第三方面,本发明提供了如上所述的方法制备的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物。
第四方面,本发明提供了如上所述的中药组合物在制备用于防治鲟鱼脂肪肝的中药复方制剂中的应用。
采用本发明的中药组合物防治鲟鱼的脂肪肝时,可以将本发明的中药组合物拌入饲料中使用,用药量优选为饲料的1-3重量%。
实施例
实施例1
本实施例用于说明本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法。
(1)将大黄、五味子和茵陈三味原料中草药分别进行如下操作:粉碎成粒径为355-800μm的粗粉,加粗粉体积10倍的水在100℃下煎煮2h,然后倒出煎液,在剩余药渣中再加粗粉体积8倍的水在100℃下煎煮2h,倒出煎液,将两次煎液合并,过滤,将滤液在50℃下蒸发10h浓缩成稠膏状,然后在45℃下干燥24h,粉碎成粒径为180μm的细粉。
(2)将步骤(1)得到的大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉按照1:0.5:0.2的重量比混合得到中药组合物F1。
实施例2
本实施例用于说明本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法。
(1)将大黄、五味子和茵陈三味原料中草药分别进行如下操作:粉碎成粒径为800-1500μm的粗粉,加粗粉体积11倍的水在100℃下煎煮2h,然后倒出煎液,在剩余药渣中再加粗粉体积9倍的水在100℃下煎煮2h,倒出煎液,将两次煎液合并,过滤,将滤液在70℃下蒸发6h浓缩成稠膏状,然后在55℃下干燥18h,粉碎成粒径为200μm的细粉。
(2)将步骤(1)得到的大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉按照3:2:2的重量比混合得到中药组合物F2。
实施例3
本实施例用于说明本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法。
(1)将大黄、五味子和茵陈三味原料中草药分别进行如下操作:粉碎成粒径为1500-2000μm的粗粉,加粗粉体积12倍的水在100℃下煎煮2h,然后倒出煎液,在剩余药渣中再加粗粉体积10倍的水在100℃下煎煮2h,倒出煎液,将两次煎液合并,过滤,将滤液在80℃下蒸发2h浓缩成稠膏状,然后在65℃下干燥12h,粉碎成粒径为250μm的细粉。
(2)将步骤(1)得到的大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉按照1:2:1.5的重量比混合得到中药组合物F3。
实施例4
本实施例用于说明本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法。
按照实施例1的方法制备防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,不同的是,将步骤(1)得到的大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉按照1:0.2:0.1的重量比混合得到中药组合物F4。
实施例5
本实施例用于说明本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法。
按照实施例1的方法制备防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,不同的是,将步骤(1)得到的大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉按照1:3:2的重量比混合得到中药组合物F5。
实施例6
本实施例用于说明本发明的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物及其制备方法。
按照实施例1的方法制备防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,不同的是,原料中草药增加栀子,将步骤(1)得到的大黄细粉、五味子细粉、茵陈细粉和栀子细粉按照1:5.1:3.2:0.2的重量比混合得到中药组合物F6。
对比例1
胆汁酸购自北京桑普生物化学技术有限公司,含量为4%,记为D1。
试验例
本试验例通过高脂饲料并不添加胆碱(L16)诱发鲟鱼脂肪肝模型。
试验鲟鱼:来自中国水产科学研究院鲟鱼繁育技术工程中心,选择健康活泼,规格相近的鲟鱼,体重48.13±4.20g、体长19.13±0.38cm。
饲料:制作两种脂肪含量饲料,一种脂肪添加量为8%(L8)(添加1%胆碱),另一种脂肪添加量为16%(L16)(不添加胆碱),以鱼油和玉米油作为脂肪来源,其他饲料原料见表1。饲料粒径为2.5mm,室温下阴干,-20℃储存备用。饲料取样本进行成分分析,主要成分见表2。
表1
原料成分(Ingredients)(g/100g) L8 L16
鱼粉(Fish meal) 40 40
谷朊粉(Wheat Gluten) 20 20
鱼油(Fish oil) 6 10
玉米油(Corn oil) 2 6
淀粉(α-starch) 14 14
复合维生素(Vitamin mix) 1 1
复合矿物质(Mineral mix) 1 1
氯化胆碱(choline chloride) 1 0
结晶纤维素(CrystallineCellulose) 15 8
注:每千克复合矿物质含MgSO4·5H2O333g,MnSO4·H2O67g,ZnSO4·H2O200g,FeSO4·H2O200g,Na2SeO345g,CoCl21.7g,KI53g;每千克复合维生素含VA186700IU,VD93300IU,VE200g,VB18g,VB610.7g,VB353g,VK313.33g,B120.13g。
表2
饲料主要成分(g/100g) L8 L16
水分(Moisture) 7.52 6.93
粗蛋白(Crude protein) 45.64 43.63
粗脂肪(Crude protein) 10.57 16.52
粗灰分(Ash) 8.64 7.74
试验于中国水产科学研究院无公害渔药创制中心循环水系统进行。分别设置普通对照组(L8)、高脂对照组(L16)、6个试验组(F1-F6),1个对比试验组(D1),每组设置三个重复,每个重复20尾个体,共计540尾鲟鱼,27个养殖缸(1米×0.5米×0.6米)。普通对照组一直投喂L8饲料,高脂对照组一直投喂L16饲料,6个试验组和1个对比试验组投喂4周高脂饲料后,在高脂饲料中分别拌饵投喂F1-F6、D1(用药量为饲料重量的2%)。继续养殖3周。整个养殖过程充气(溶解氧含量为7.0-9.5mg/L),温度控制在21±2℃。日投饵量为鱼体重的2%,每天投饵3次,整个养殖试验持续7周。
养殖结束后,每组随机取20尾。
测定体长、体重,并计算平均体长、体重,结果见表3。
尾静脉采血,室温放置1-2h,离心取上清,用于测定血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),并计算各项指标平均值,AST、ALT的结果见表4。
采血后,解剖,将完整肝脏取下,滤纸吸干表面水分和血液后,拍照,记录肝脏和胆囊颜色,结果见表5,试验组F1、对比试验组D1、普通对照组L8、高脂对照组L16的照片见图1。
精确称取肝脏重量,按下式计算肝指数,结果见表6。
肝指数=肝脏重量(g)/体重(g)×100%。
小心切取大小为1cm×1cm×0.5cm肝组织,用4%甲醛固定,石蜡包埋,切片,苏木精-伊红(HE)染色,在10×40光镜下观察,试验组F1、对比试验组D1、普通对照组L8、高脂对照组L16的照片见图2。
谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)测定方法:通过谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)试剂盒测定,购自南京建成生物工程研究所。
表3
编号 体重 体长
L8 104.36±22.60 25.23±1.57ab
L16 116.93±21.95 26.50±1.48ab
F1 108.24±21.33 25.5±1.36ab
F2 115.61±26.70 25.76±1.50ab
F3 120.39±19.86 26.33±1.06ab
F4 100.55±23.79 25.13±1.94ab
F5 118.03±18.73 26.78±1.15a
F6 100.37±12.24 24.88±0.98b
D1 106.23±14.76 25.03±1.24ab
注:同一列数据中有不同字母表示差异显著(P<0.05)
由表3可以看出,各组体重差异不显著,体长无规律性变化,说明本发明的中药组合物不影响鲟鱼的生长。
表4
编号 AST ALT
L8 24.52±6.29cd 1.93±1.21cd
L16 41.47±5.42a 4.11±0.38a
D1 38.82±7.82a 4.01±0.48a
F1 28.11±6.13bcd 2.01±0.41cd
F2 29.03±11.54bc 2.13±0.63cd
F3 31.97±10.77abc 2.57±0.40abcd
F4 36.56±4.80ab 3.66±0.94ab
F5 32.81±7.14abc 3.7±1.18ab
F6 36.97±11.37ab 3.82±0.57a
注:同一列数据中有不同字母表示差异显著(P<0.05)
由表4可以看出,本发明的中药组合物能够降低血清学AST、ALT,且效果优于胆汁酸。
将F1分别与F4-F6进行比较可以看出,中药组合物由大黄、五味子和茵陈组成,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.2-5:0.1-3,能够进一步降低血清中的AST、ALT,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5,能够更进一步降低血清中的AST、ALT。
表5
编号 肝脏颜色 胆囊颜色
L8 深暗红色 暗绿色
L16 乳白色 黄色
D1 灰白色 黄色
F1 暗红色 绿色
F2 暗红色 绿色
F3 暗红色 绿色
F4 浅红色 黄绿色
F5 浅红色 黄绿色
F6 浅红色 黄绿色
鱼类肝脏的颜色与脂肪含量有关,一般情况下脂肪含量高则肝色越淡,脂肪含量低则肝色较深。由表5和图1可以看出,本发明的中药组合物能够降低鲟鱼肝脏的脂肪含量,且效果优于胆汁酸。
将F1分别与F4-F6进行比较可以看出,中药组合物由大黄、五味子和茵陈组成,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5,能够进一步降低肝脏的脂肪含量。
表6
编号 肝指数
L8 1.773±0.391c
L16 2.469±0.249a
D1 2.298±0.222a
F1 1.807±0.218b
F2 2.077±0.257ab
F3 2.085±0.224ab
F4 2.194±0.365a
F5 2.181±0.416ab
F6 2.232±0.242a
由表6可以看出,本发明的中药组合物能够降低鲟鱼的肝指数,且效果优于胆汁酸。在一定的比例下如F1,能够显著的降低肝指数。
将F1分别与F4-F6进行比较可以看出,中药组合物由大黄、五味子和茵陈组成,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.2-5:0.1-3,能够进一步降低肝指数,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5,能够更进一步降低肝指数。
由图2可以看出,各组肝细胞均存在不同程度的空泡。普通对照组L8的肝细胞轮廓清晰,细胞膜完整,脂肪呈小颗粒状分布在细胞内。高脂对照组L16,部分肝细胞膜破裂,多个肝细胞脂肪颗粒融成一个大的脂肪滴,细胞呈现透明空泡化,一些肝细胞变性坏死,细胞核破裂或溶解。D1少部分肝细胞膜破裂,一些肝细胞内出现大的脂肪滴,部分细胞核破裂或溶解,空泡化程度较L16减轻。F1细胞轮廓较为完整,多数细胞内的空泡多成小颗粒状分布。细胞内大脂肪滴较少,空泡化程度较L16和D1均有显著的减轻。由此可见,本发明的中药组合物对鲟鱼肝脏细胞具有一定的修复效果。
以上结合附图详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合,为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外,本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合,只要其不违背本发明的思想,其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (10)

1.一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物,其特征在于,所述组合物含有大黄、五味子、茵陈和栀子,以所述组合物的重量为基准,大黄的含量为10-80重量%,五味子的含量为10-80重量%,茵陈的含量为0-40重量%,栀子的含量为0-40重量%。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其中,所述组合物由大黄、五味子和茵陈组成,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.2-5:0.1-3。
3.根据权利要求2所述的中药组合物,其中,大黄、五味子和茵陈的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。
4.一种防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物的制备方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)将每种原料中草药的粗粉分别加水煎煮两次,合并煎液,过滤,蒸发浓缩至稠膏状,干燥,粉碎成细粉;
(2)将步骤(1)得到的每种原料中草药的细粉混合;
其中,原料中草药包括大黄、五味子、茵陈和栀子,以所述中药组合物的重量为基准,大黄细粉的用量为10-80重量%,五味子细粉的用量为10-80重量%,茵陈细粉的用量为0-40重量%,栀子细粉的用量为0-40重量%。
5.根据权利要求4所述的方法,其中,所述原料中草药由大黄、五味子和茵陈组成,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.2-5:0.1-3。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,大黄细粉、五味子细粉和茵陈细粉的用量的重量比为1:0.5-2:0.2-1.5。
7.根据权利要求4-6中任意一项所述的方法,其中,步骤(1)中,第一次加水量为粗粉体积的10-12倍,第二次加水量为粗粉体积的8-10倍,每次煎煮1-3h。
8.根据权利要求4-6中任意一项所述的方法,其中,所述细粉的粒径为150-850μm。
9.一种由权利要求4-8中任意一项所述的方法制备的防治鲟鱼脂肪肝的中药组合物。
10.权利要求1-3中任意一项所述的中药组合物或权利要求9所述的中药组合物在制备用于防治鲟鱼脂肪肝的中药复方制剂中的应用。
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