CN103897995A - 一种短乳杆菌及其应用 - Google Patents

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满朝新
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Beijing Youduote Biotechnology Co., Ltd.
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Northeast Agricultural University
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Abstract

本发明涉及一种短乳杆菌及其应用，属于食品生物技术领域。提供了一种短乳杆菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.6683，该菌株可用于发酵生产单质硒，具有亚硒酸盐耐受度高的优点。

Description

一种短乳杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及一种短乳杆菌及其应用，属于食品生物技术领域。
背景技术
短乳杆菌是乳杆菌属的重要菌种，具有益生功能，研究和报道表明,短乳杆菌具有高产酸能力和解毒、抑菌、提高机体免疫能力等多种功能特性，常用于发酵食品的加工，在食品工业具有广泛用途。
发明内容
本发明提供了一种短乳杆菌JLD715，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 6683。
所述菌株筛选自传统乳制品，已于2012年10月18日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 6683，建议分类命名为 短乳杆菌Lactobacillus brevis，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
所述短乳杆菌16SrDNA序列如SEQ ID NO.1 所示。
本发明还提供了短乳杆菌CGMCC No. 6683的应用，是将所述短乳杆菌用于生产单质硒，是用CGMCC No. 6683发酵亚硒酸盐生产单质硒。
所述亚硒酸盐为亚硒酸钠。
具体而言是将亚硒酸盐加入含有CGMCC No. 6683的培养体系，所述培养体系可以为液体培养体系或固体培养体系，优选短乳杆菌常用发酵培养基，例如MRS培养基，培养基组成是可进行优化，培养基优化过程为常规技术手段。
亚硒酸盐加入时间为发酵开始前、短乳杆菌的延滞期、对数生长期或稳定期中任一一个时期，也可以在各个时期均加入一定量的亚硒酸盐，具体添加方式和添加量可根据有限次的实验得以确定。
经实验验证，优选亚硒酸盐浓度为0.01mM-30mM，更进一步地优选亚硒酸盐浓度为0.01mM-20 mM。
本发明具有如下有益效果：
１） CGMCC No. 6683好氧条件下活菌数高；
２）为单质硒的发酵生产提供了新方法。
附图说明
图1 CGMCC No. 6683扫描电镜和EDS分析
图2 CGMCC No. 6683对0.2mM、0.5mM、1 mM亚硒酸钠的转化率
具体实施方式
实施例1　 
结合说明书附图1对实施例1进行说明。
将CGMCC No. 6683接种到亚硒酸钠浓度为10mM的MRS培养基中，30摄氏度培养5天，离心收集菌泥，进行冷冻真空干燥，得到橘红色粉末。送样进行扫描电镜分析，并对菌体表面进行EDS能谱分析，结果见附图1。发现菌体表面存在C、O和Se（0价）元素，结合文献报道，可以认定CGMCC No. 6683产生了单质硒。通过扫描电镜结合EDS能谱分析，单质硒富集在菌体表面。
实施例2 
发酵培养基采用MRS培养基，出发菌株为CGMCC No. 6683。在灭菌后的MRS培养基中加入0.2 mM亚硒酸钠后，立即接入10%CGMCC No. 6683， 30℃好氧培养200小时，剩余亚硒酸盐含量如图2所示。
实施例3 
发酵培养基采用MRS培养基，出发菌株为CGMCC No. 6683。在灭菌后的MRS培养基中加入0.5 mM亚硒酸钠后，立即接入10%CGMCC No. 6683， 30℃好氧培养250小时，剩余亚硒酸盐含量如图2所示。
实施例4 
发酵培养基采用MRS培养基，出发菌株为CGMCC No. 6683。在灭菌后的MRS培养基中加入1 mM亚硒酸钠后，立即接入10%CGMCC No. 6683， 30℃好氧培养250小时，剩余亚硒酸盐含量如图2所示。
实施例5
将CGMCC No. 6683接种到含有10mM的亚硒酸盐的MRS琼脂培养基，得到红色菌落。
实施例6
将CGMCC No. 6683在MRS液体培养基中活化两代，接入含有10 mM亚硒酸钠的MRS液体发酵培养基，培养至稳定期，取1mL离心生理盐水洗涤后，逐级稀释涂布于MRS固体培养基，CGMCC No. 6683活菌数为6.29×107 CFU /mL。
实施例7
将CGMCC No. 6683在MRS液体培养基中活化两代，接入含有20 mM亚硒酸钠的MRS液体发酵培养基，培养至稳定期，取1mL离心生理盐水洗涤后，逐级稀释涂布于MRS固体培养基，CGMCC No. 6683活菌数为7.5×105 CFU /mL。
                        序列表
 
<110>  东北农业大学
 
<120>  一种短乳杆菌及其应用
 
<160>  1    
 
<170>  PatentIn version 3.3
 
<210>  1
<211>  1433
<212>  DNA
<213>  CGMCC No. 6683 16SrDNA
 
<400>  1
ccatgcagtc gacgagcttc cgttgaatga cgtgcttgca ctgatttcaa caatgaagcg     60
 
agtggcgaac tggtgagtaa cacgtgggaa atctgcccag aagcagggga taacacttgg    120
 
aaacaggtgc taataccgta taacaacaaa atccgcatgg attttgtttg aaaggtggct    180
 
tcggctatca cttctggatg atcccgcggc gtattagtta gttggtgagg taaaggccca    240
 
ccaagacgat gatacgtagc cgacctgaga gggtaatcgg ccacattggg actgagacac    300
 
ggcccaaact cctacgggag gcagcagtag ggaatcttcc acaatggacg aaagtctgat    360
 
ggagcaatgc cgcgtgagtg aagaagggtt tcggctcgta aaactctgtt gttaaagaag    420
 
aacacctttg agagtaactg ttcaagggtt gacggtattt aaccagaaag ccacggctaa    480
 
ctacgtgcca gcagccgcgg taatacgtag gtggcaagcg ttgtccggrw ttattgggcg    540
 
taaagcgagc gcaggcggtt ttttaagtct gatgtgaaag csttcggctt aaccggagaa    600
 
gtgcatcgga aactgggaga cttgagtgca gaagaggaca gtggaactcc atgtgtagcg    660
 
gtggaatgcg tagatatatg gaagaacacc agtggcgaag gcggctgtct agtctgtaac    720
 
tgacgctgag gctcgaaagc atgggtagcg aacaggatta gataccctgg tagtccatgc    780
 
cgtaaacgat gagtgctaag tgttggaggg tttccgccct tcagtgctgc agctaacgca    840
 
ttaagcactc cgcctgggga gtacgaccgc aaggttgaaa ctcaaaggaa ttgacggggg    900
 
cccgcacaag cggtggagca tgtggtttaa ttcgaagcta cgcgaagaac cttaccaggt    960
 
cttgacatct tctgccaatc ttagagataa gacgttccct tcggggacag aatgacaggt   1020
 
ggtgcatggt tgtcgtcagc tcgtgtcgtg agatgttggg ttaagtcccg caacgagcgc   1080
 
aacccttatt atcagttgcc agcattcagt tgggcactct ggtgagactg ccggtgacaa   1140
 
accggaggaa ggtggggatg acgtcaaatc atcatgcccc ttatgacctg ggctacacac   1200
 
gtgctacaat ggacggtaca acgagtcgcg aagtcgtgag gctaagctaa tctcttaaag   1260
 
ccgttctcag ttcggattgt aggctgcaac tcgcctacat gaagttggaa tcgctagtaa   1320
 
tcgcggatca gcatgccgcg gtgaatacgt tcccgggcct tgtacacacc gcccgtcaca   1380
 
ccatgagagt ttgtaacacc caaagccggt gagataacct tcgggagtca gcg          1433
 
 

Claims (10)

1. 一种短乳杆菌，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 6683。
2.根据权利要求1所述短乳杆菌，其特征在于，其16SrDNA序列如SEQ ID NO.1 所示。
3.根据权利要求1所述短乳杆菌，其特征在于，其用于生产单质硒。
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，用CGMCC No. 6683发酵亚硒酸盐生产单质硒。
5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述亚硒酸盐为亚硒酸钠。
6.根据权利要求4所述方法，其特征在于，在灭菌后的短乳杆菌发酵培养基中加入亚硒酸钠，接入CGMCC No. 6683进行发酵。
7.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述短乳杆菌发酵培养基为短乳杆菌生长增殖培养基。
8.根据权利要求4所述方法，其特征在于，发酵培养基采用MRS培养基，在灭菌后的MRS培养基中加入0.2mM-20mM亚硒酸钠后，立即接入CGMCC No. 6683， 30℃好氧培养。
9.根据权利要求4所述方法，其特征在于，发酵培养基采用MRS培养基，在灭菌后的MRS培养基中加入1mM-20mM亚硒酸钠后，立即接入10% CGMCC No. 6683， 30℃好氧培养。
10.根据权利要求4所述方法，其特征在于，发酵培养基采用MRS培养基，在灭菌后的MRS培养基中加入10mM亚硒酸钠后，立即接入10% CGMCC No. 6683， 30℃好氧培养。
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