CN103860656A - 一种中药组合物及其制备方法和其应用 - Google Patents

一种中药组合物及其制备方法和其应用 Download PDF

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张许科
刘兴金
张晓会
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Luoyang Huizhong Animal Medicine Co Ltd
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Luoyang Huizhong Animal Medicine Co Ltd
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Abstract

本发明提供了一种中药组合物,所述中药组合物的药材原料包含黄芪2-7份、女贞子1-8份、板蓝根1-10份。本发明提供的中药组合物具有促进动物免疫器官发育,提高家禽细胞免疫功能;此外,与疫苗同时使用,还能起到提高家禽抗体效价水平的效果。

Description

一种中药组合物及其制备方法和其应用
技术领域
本发明涉及一种中药组合物,具体地说,涉及一种免疫增强作用的中药组合物。
背景技术
免疫力是指机体识别和排除抗原性异物功能,即机体区分自己和非己的功能。动物免疫力低的具体表现为易感染,抵御病原体能力下降。提高动物机体免疫力可显著促进其疾病的预防与治疗。具免疫增强作用的纯中药组合物由于结构复杂、成分多样、具备内在的多功能性,符合动物机体脏腑功能的相互协调和整体统一规律,可以调动机体内非特异性抗菌抗病毒的积极作用,增强动物机体的免疫功能和促进生长发育。因此,开发动物专用中药组合物具有很好的市场前景。
专利申请CN1935182公开了一种中草药复方组合物,即一种用于增强动物免疫力的新型中草药复方精提制剂。该发明的制剂由柴胡、黄芪、防风、党参、淫羊霍、大青叶、忍冬藤、刺五加叶及腐植酸组成(参见权利要求1)。该发明的制剂是一种纯天然、无残留、无耐药性、无污染等的动物保健品,有较好的应用价值。然而,所含药味较多,所得制剂成分复杂,增加制剂工艺难度。
公告号为101647852的专利公开了一种增强免疫功能的兽药,其配方组分(按重量计)为:黄芪9~18份,淫羊藿6~9份,女贞子6~9份(参见权利要求1)。然而,然而其对活疫苗的免疫具有协同作用,没有给出对灭活疫苗协同作用的技术启示,且但其对病毒病基本无作用,不利于病毒病的预防和治疗。
发明内容
为解决现有技术的不足,本发明提供了一种具有提高动物机体免疫力的更加高效的中药组合物,为预防动物疾病提供一种良好的途径。
本发明的主要目的在于提供一种中药组合物,所述中药组合物的药材原料包含黄芪2-7份、女贞子1-8份、板蓝根1-10份。
优选地,所述黄芪为3-5份、女贞子2-4份、板蓝根2-4份。
更优选地,所述黄芪为4份、女贞子3份、板蓝根3份。
优选地,所述药材原料还包含防风1-10份、和/或白术1-10份、和/或淫羊藿1-8份。
优选地,所述中药组合物剂型为口服液、颗粒剂、注射液,所述颗粒剂每g含黄芪甲苷不得少于0.32mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)不得少于0.2mg;所述口服液、注射液每ml含黄芪甲苷不得少于0.32mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)不得少于0.2mg。
本发明的中药组合物使用本领域技术人员熟知的提取方法包括水提取、醇提取以及超声波提取;用本领域熟知的纯化方法,包括醇沉、超速离心纯化。
本发明的另一目的在于提供一种制备中药组合物的方法,所述制备方法包括:取所述各种药材原料,按所述药材原料重量分别加入8倍量的水,浸泡16小时,回流提取两次,每次1.5小时,提取结束后,所述提取液混匀,在55~60℃减压浓缩,所述浓缩液于10000rpm,4℃下离心30分钟,收集上清液,得中药提取物;将分别制备的所述中药提取物合并,再次在55~60℃减压浓缩至2g生药/ml,得到所述中药组合物。
优选地,所述制备方法还包括后续处理步骤:将所述用浓缩液用NaOH溶液调节pH值为5.0~7.0,加入医学上可接受的载体,制成临床常用剂型,所述载体包括蔗糖、糊精、注射用水。
本发明的再一目的在于提供所述的中药组合物在增强畜禽免疫功能方面的应用,其中,所述中药组合物的用量为:颗粒剂为1-2g兑水1L,口服液1-2ml兑水1L,注射剂猪、羊0.1ml/kg、鸡、鸭、鹅0.2ml/kg。
优选地,所述应用为增强鸡的免疫功能的应用。
本发明中药组合物的各剂型,黄芪甲苷的含量测定参照2010版中华人民共和国兽药典二部黄芪项下的检测方法进行,以乙腈-水(32∶68)为流动相,黄芪甲苷标准品为对照,进行高效液相色谱法检测,1g/mL各剂型试剂含黄芪甲苷(C14H68O14)不得少于0.32mg。(R,S)-告依春的含量测定参照2010版中华人民共和国兽药典二部板蓝根项下的检测方法进行,以甲醇-0.02%磷酸溶液(7∶93)为流动相,(R,S)-告依春标准品为对照,进行高效液相色谱法检测,1g/mL各剂型试剂含(R,S)-告依春(C5H7NOS)不得少于0.2mg。
本发明提供的中药组合物具有促进动物免疫器官发育,提高细胞免疫功能;此外,与疫苗同时使用,还能起到提高抗体效价水平效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明,本发明的优点和特点将会随着描述更为清楚。但这些实施例仅是范例性的,并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1本发明的中药组合物的制备例
制备例1、取黄芪4份(0.4kg)、女贞子3份(0.3kg)、板蓝根3份(0.3kg),以上三味药材饮片分别加入到5000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并三种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.62mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.30mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
制备例2、取黄芪2份(0.2kg)、女贞子8份(0.8kg)、板蓝根1份(0.1kg),以上三味药材饮片分别加入到5000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并三种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药组合物口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.49mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.28mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.32mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.20mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.32mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.20mg。
制备例3、取黄芪7份(0.7kg)、女贞子1份(0.1kg)、板蓝根8份(0.8kg),以上三味药材饮片分别加入到5000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并三种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药组合物口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.73mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.50mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.20mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.50mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.20mg。
制备例4、取黄芪4份(0.4kg)、女贞子4份(0.4kg)、板蓝根5份(0.5kg),以上三味药材饮片分别加入到5000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并三种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.62mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.32mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.28mg。
取同样比例的三味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取三种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.28mg。
制备例5、取黄芪4份(0.4kg)、女贞子3份(0.3kg)、板蓝根3份(0.3kg)、防风1份(0.1kg),以上四味药材饮片分别加入到5000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并四种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.62mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.30mg。
取同样比例的四味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取四种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
取同样比例的四味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取四种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
制备例6、取黄芪4份(40g)、女贞子3份(30g)、板蓝根3份(30g)、防风10份(100g)、白术1份(10g),以上五味药材饮片分别加入到3000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并四种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.62mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.30mg。
取同样比例的五味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取四种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
取同样比例的五味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取四种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
制备例7、取黄芪4份(40g)、女贞子3份(30g)、板蓝根3份(30g)、防风8份(80g)、白术10份(100g)、淫羊藿10份(100g),以上六味药材饮片分别加入到3000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并六种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.62mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.30mg。
取同样比例的六味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取六种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
取同样比例的六味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取六种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
制备例8、取黄芪4份(40g)、女贞子3份(30g)、板蓝根3份(30g)、防风10份(100g)、白术10份(100g)、淫羊藿1份(10g),以上六味药材饮片分别加入到3000ml三颈瓶中,其加入8倍量水浸泡16小时,均置于油浴锅中(油浴油温130℃~140℃)升温回流提取2次,每次1.5小时,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,合并六种药材提取液,再次减压浓缩(55~60℃)至约2g生药/ml,即得口服液。
取上述中药口服液,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及板蓝根项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.62mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.30mg。
取同样比例的六味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取六种药材的提取物,低温浓缩(40-60℃)浓缩至相对密度为1.30-1.35的稠膏,加入蔗糖和糊精,膏重、蔗糖、糊精的比例为1∶2∶1,制成颗粒,进行干燥后即得中药组合物颗粒。
取上述中药颗粒,进行溶解,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每g含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
取同样比例的六味药材,以上述方法提取,提取结束后,提取液趁热倾出,混匀,提取液减压浓缩(55~60℃),自然放凉,移至离心管内,于10000rpm4℃下离心30分钟,收集上清液,取六种药材的提取物,加水稀释至每毫升含原生药材1-1.2g,按0.5-1%比例加入注射用炭,搅拌30-60min,过滤,除去杂质。滤液用孔径0.45μm滤膜精滤,加注射用水至刻度,调节PH值,灌装,灭菌,即得中药组合物注射液。
取上述中药组合物注射剂,按照中华人民共和国兽药典二部黄芪及(R,S)-告依春项下的检测方法分别测定黄芪甲苷和(R,S)-告依春的含量,经测定,本品每ml含黄芪甲苷0.41mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)0.25mg。
实施例2本发明的中药组合物对鸡免疫功能的影响
采用本发明制备例1-8所得的口服液,同时与自制黄芪多糖口服液进行对照,其中黄芪多糖口服液按照刘富岗等的黄芪多糖提取纯化方法研究中所述方法进行提取,文章编号1004-3918(2008)06-0662-03,并将所得提取液进行浓缩,使每毫升液体含原生药材1g。测定本发明的中药组合物口服液对鸡免疫功能的影响。
1、本发明中药组合物对鸡免疫器官指数及生化指标的影响
试验药品:本发明制备例1-8所得的制剂;
对照药品:黄芪多糖口服液,自制。
IBDV:毒号AV7BC6/85,购自中国兽药监察所,种毒复壮病毒液,用生理盐水100×稀释,以滴鼻途径进行攻毒(模拟自然感染),100ul/羽。
试验方法:1日龄肉雏鸡300只,分为10个组,每组30只。正常饲养至14日龄,按表1方案进行给药,连续7d,其中F组为空白对照组。在21日龄时,A-D组点眼攻毒IBDV,观察攻毒前、后各组鸡只的临床症状。
雏鸡饲养至第24、31、38、45天,从各组分别随机抽取10只,称重,分离血清;然后剖杀取法氏囊。
免疫器官指数的计算方式为:免疫器官指数=免疫器官重量(mg)/体重(g)。
血清总蛋白:双缩脲法,血清蛋白分类:醋酸纤维薄层电泳法。
表1试验具体分组及处理
Figure BDA00002564985800121
1.1、本发明所得口服液对鸡免疫器官指数的影响
使用Excel和SPSS软件对试验数据进行统计分析,试验数据以平均值±方差表示,P<0.05为差异显著,P>0.05为差异不显著,P<0.01为差异极显著。分析结果如表2-3所示。
表2本发明所得口服液对鸡法氏囊指数的影响(mg/g)
Figure BDA00002564985800133
注:同一列数据中,肩标小写字母完全不同表示差异显著(P<0.05),大写字母完全不同表示差异极显著(P<0.01),含相同大小写字母表示差异不显著(P>0.05)。
从表2可以看出,24-31日龄时,各试验组与空白组相比,差异不显著(P>0.05);38日龄、45日龄时,本发明制得中药组合物制剂与空白组、黄芪多糖口服液对照组相比,差异显著(P<0.05),其中E、F、G、H组差异极显著(P<0.01)。试验结果表明按照本发明制得中药组合物制剂均能增加鸡法氏囊指数,其效果均优于黄芪多糖口服液对照,在所用中药组合物制剂中,按制备例5、6、7、8所得制剂增加鸡法氏囊指数的效果最为显著,说明在组方中添加防风、白术、淫羊藿后可增加中药组合物制剂的免疫增强效果。
1.2、本发明的方法制备的口服液对鸡生化指标的影响
使用Excel和SPSS软件对试验数据进行统计分析,试验数据以平均值±方差表示,P<0.05为差异显著,P>0.05为差异不显著,P<0.01为差异极显著。分析结果如表4所示。
表3本发明所得口服液对鸡血清蛋白含量的影响(g/L-1)
Figure BDA00002564985800141
Figure BDA00002564985800151
由表3可知:对于血清总蛋白来说,24日龄时,各给药组与空白组相比,差异显著(P<0.05),且各给药组TP水平高于黄芪多糖口服液对照组,31日龄时,各给药组与空白组相比,差异不显著(P>0.05);对于白蛋白ALB而言,24日龄时,饲喂本发明所得中药组合物制剂的给药组与空白组、黄芪多糖口服液对照组相比差异显著(P<0.05),31日龄时,饲喂本发明所得中药组合物制剂的给药组与空白组、黄芪多糖口服液对照组相比差异均不显著(P>0.05)。综合比较得出,饲喂本发明所得中药组合物制剂的给药组球蛋白含量比黄芪多糖口服液对照组有所提高,说明饲喂本发明所得中药组合物制剂有利于降低IBDV对机体的损伤,有利于疾病的防治,提高疫苗的防治效果。
2.本发明中药组合物对鸡血液淋巴细胞增殖反应的影响
1日龄肉雏鸡300只,分为10个组,每组30只。正常饲养至14日龄,按表4方案进行给药,连续7d,其中J组为空白对照组。给药完毕后,每组随机抽取10只鸡,无菌采取抗凝血1-2mL,加入盛有淋巴细胞分离液的离心管中,2000r/min离心15min,分离淋巴细胞。用培养液重悬淋巴细胞,经台盼蓝染色计数活细胞数>95%,调整细胞浓度为1×107/mL,于37℃、饱和湿度和5%CO2的培养箱中培养。MTT染色法进行测定,OD570nm处测定各组细胞的吸光度,用SPSS统计软件进行分析,结果见表5。
表4试验具体分组及处理
Figure BDA00002564985800161
表5饲喂各中药组合物后鸡淋巴细胞增殖的影响(
Figure BDA00002564985800172
n=6)
Figure BDA00002564985800173
注:同一列数据中,标有相同肩标表示差异不显著。
实验结果表明,各试验组淋巴细胞增殖显著优于空白组,差异显著(P<0.05),另外,饲喂本发明所得中药组合物制剂的给药组鸡群的淋巴细胞增殖显著优于黄芪多糖口服液对照组(G组除外),差异显著(P<0.05)。因此可知,本发明中药组合物制剂与黄芪多糖口服液均能增强鸡群淋巴细胞增殖反应,而且本发明中制备例所得中药组合物制剂的效果优于黄芪多糖口服液。
3.本发明中药组合物对免疫雏肉鸡抗体效价的影响(免疫增强应用效果验证)
1日龄肉鸡210只,分为7个组,每组30只。正常饲养至7日龄,按表6的方案进行给药,连续给药14天。末次给药后的次日,用鸡新城疫灭活疫苗免疫鸡群,于免疫后的10d、20d、30d、40d,采血,分离血清,HI试验测定鸡新城疫抗体效价。
表6试验具体分组及处理
Figure BDA00002564985800181
表7、中药组合物及其成分对鸡新城疫抗体水平的影响(
Figure BDA00002564985800182
n=8)
Figure BDA00002564985800183
注:同一列数据中,标有不同肩标表示差异显著(p<0.05)。
结果显示,给药各组鸡群,使用新城疫灭活疫苗免疫后第10d、20d、30d、40d抗体水平均高于空白对照组和黄芪多糖口服液对照组,差异显著(P<0.05)。说明本发明制备例所得的中药组合物均能促进鸡新城疫抗体的产生,且效果优于黄芪多糖口服液。另外,B、C、D、E组鸡群羽毛光泽度、采食情况、活泼程度以及反应灵敏度均优于其他组,说明在组方中添加白术、防风、淫羊藿后,可显著改善鸡群临床状况,能促进鸡群的健康生长。
本发明提供的中药组合物具有促进动物免疫器官发育,提高家禽细胞免疫功能;此外,与疫苗同时使用,还能起到提高家禽抗体效价水平的效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种中药组合物,所述中药组合物的药材原料包含黄芪2-7份、女贞子1-8份、板蓝根1-10份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其中,所述黄芪为3-5份、女贞子2-4份、板蓝根2-4份。
3.根据权利要求2所述的中药组合物,其中,所述黄芪为4份、女贞子3份、板蓝根3份。
4.根据权利要求1所述的中药组合物,其中,所述药材原料还包含防风1-10份、和/或白术1-10份、和/或淫羊藿1-8份。
5.根据权利要求1所述的中药组合物,其中,所述中药组合物剂型为口服液、颗粒剂、注射液,所述颗粒剂每g含黄芪甲苷不得少于0.32mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)不得少于0.2mg;所述口服液、注射液每ml含黄芪甲苷不得少于0.32mg,含(R,S)-告依春(C5H7NOS)不得少于0.2mg。
6.一种制备权利要求1~4所述的中药组合物的方法,所述制备方法包括:取所述各种药材原料,按所述药材原料重量分别加入8倍量的水,浸泡16小时,回流提取两次,每次1.5小时,提取结束后,所述提取液混匀,在55~60℃减压浓缩,所述浓缩液于10000rpm,4℃下离心30分钟,收集上清液,得中药提取物;将分别制备的所述中药提取物合并,再次在55~60℃减压浓缩至2g生药/ml,得到所述中药组合物。
7.根据权利要求6所述的制备方法,所述制备方法还包括后续处理步骤:将所述用浓缩液用NaOH溶液调节pH值为5.0~7.0,加入医学上可接受的载体,制成临床常用剂型,所述载体包括蔗糖、糊精、注射用水。
8.权利要求1~5所述的中药组合物在增强畜禽免疫功能方面的应用,其中,所述中药组合物用量为:颗粒剂为1-2g兑水1L,口服液1-2ml兑水1L,注射剂猪、羊0.1ml/kg、鸡、鸭、鹅0.2ml/kg。
9.根据权利要求8所述的应用,其中,所述应用为增强鸡的免疫功能的应用。
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