CN103834604B

CN103834604B - 一种多菌种微生物发酵剂及其制备方法

Info

Publication number: CN103834604B
Application number: CN201410130259.8A
Authority: CN
Inventors: 肖梅
Original assignee: GANZHOU TIANLV BIOCHEMICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: GANZHOU TIANLV BIOCHEMICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2014-04-02
Filing date: 2014-04-02
Publication date: 2015-04-01
Anticipated expiration: 2034-04-02
Also published as: CN103834604A

Abstract

本发明涉及一种多菌种微生物发酵剂及其制备方法。通过先将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、黑曲霉菌、乳酸链球菌、产脘假丝酵母、谷氨酸棒杆菌分别进行菌种活化、斜面培养，后将上述6种微生物菌种按数量百分比配比混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养2-3天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂。通过使用本发明针对脐橙特点所选择的特定的6种微生物菌种所制备的多菌种微生物发酵剂，可以改善脐橙的品质，提高脐橙的产量，使产量增产10-15%，以满足价格高峰期的需求。

Description

一种多菌种微生物发酵剂及其制备方法

技术领域

本发明属于生物材料领域，涉及一种多菌种微生物发酵剂及其制备方法。

背景技术

自上世纪70年代开始种植脐橙以来，赣南脐橙产业从无到有，从小到大，经历了一条艰难曲折的发展道路。由于地理环境的特殊，拥有丰富的稀土，因此赣南脐橙不仅味鲜、甜美多汁，更能起到保健养身之作用。但是，仍然存在当价格高峰期时产量却供不应求的情况。另外，虽然相对于国内其他脐橙的出汁率，赣南脐橙算是较高的，但也达不到巴西等国家的水平。例如，巴西工业橙的出汁可达到60%以上，而赣南脐橙的出汁量最多只能达到40%左右，且榨汁所剩下的固形物也将会形成环境污染。因此，如何提高脐橙的利用率，拓展脐橙生物深加工领域，处理榨汁留下的固形物或通过对脐橙的生物加工生成新的生物酵素。

本发明是现有技术的背景下，研究出一种多菌种微生物发酵剂及其制备方法，通过将该多菌种微生物发酵剂与脐橙混合进行生物发酵生成脐橙酵素或是与脐橙榨汁留下的固形物及秸秆、豆饼渣、鸡粪等混合生成微生物肥料。

发明内容

本发明的目的是：提供一种多菌种微生物发酵剂及其制备方法。通过使用该多菌种微生物发酵剂，将其与脐橙混合能提高脐橙酵素的产量，将其加与脐橙榨汁留下的固形物混合入肥料基料，应用于脐橙种植，达到提高脐橙的产量以及出汁率的目的。

本发明的技术方案是：

一种多菌种微生物发酵剂，其特征在于，所述多菌种微生物发酵剂是由以下数量百分比的多种微生物菌种按比例制成：枯草芽孢杆菌9%-15%、巨大芽孢杆菌11%-18%、黑曲霉菌10%-17%、乳酸链球菌12%-21%、产脘假丝酵母22%-30%、谷氨酸棒杆菌18%-27%，上述各微生物菌种的数量百分比总和为100％。

其中，多种微生物菌种的数量百分比优选：枯草芽孢杆菌10%-13%、巨大芽孢杆菌12%-16%、黑曲霉菌11%-15%、乳酸链球菌12%-17%、产脘假丝酵母24%-28%、谷氨酸棒杆菌21%-26%，上述各微生物菌种的数量百分比总和为100％。更优选：枯草芽孢杆菌12.5%、巨大芽孢杆菌12.5%、植物乳杆菌12.5%、乳酸链球菌12.5%、产脘假丝酵母25%、黑曲霉菌25%。

本发明的多菌种微生物发酵剂是通过如下方法制备的：

(1)将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、黑曲霉菌、乳酸链球菌、产脘假丝酵母、谷氨酸棒杆菌分别进行菌种活化、斜面培养，其中，枯草芽孢杆菌的培养基是淀粉0.15%+葡萄糖0.5%+尿素0.1%+磷酸氢二钾0.3%+磷酸二氢钾0.15%+硫酸镁0.05%+酵母膏0.02%+氯化铁0.01%+碳酸钙0.01%+豆粕1%; 巨大芽孢杆菌的培养基是牛肉膏5.0克、蛋白胨8.0克、葡萄糖2.0克、硫酸镁0.5克、氯化钠 3.0克、磷酸氢二钾1.0克、水 1000ml，pH = 7.0-7.5、温度 34℃；植物乳杆菌的培养基是牛肉膏5.0克、酵母粉2.5克、葡萄糖10.0克、吐温-80 0.5克、柠檬酸铵 1.0克、乙酸钠 2.5克、硫酸锰 0.05克、硫酸镁 0.3克、磷酸氢二钾 1.0克、水1000ml，pH=6.2-6.5、温度37℃；乳酸链球菌的培养基是牛肉膏5.0克、麦芽精5.0克、蛋白胨8.0克、葡萄糖10.0克、水1000ml、琼脂20.0克，pH=6.2-6.5、温度24℃；产脘假丝酵母的培养基为牛肉膏5.0克、麦芽精5.0克、蛋白胨 5.0克、葡萄糖10.0克、水1000ml、琼脂20.0克，pH = 6.5-7.0、温度24℃；谷氨酸棒杆菌的培养基是硝酸钠3.0克、磷酸氢二钾1.0克、硫酸铁0.1克、蔗糖20.0克、硫酸镁 0.5克、水1000ml、琼脂20.0克，pH =6.5-7.0、温度28℃；

(2)将所述多种微生物菌种按数量百分比配比混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养2-3天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂。

本发明的多菌种微生物发酵剂其养分高，内含有多种有益微生物和多种微量元素，能加快脐橙发酵，脐橙发酵的周期从144小时缩短到96小时。通过使用本发明针对脐橙特点所选择的特定的6种微生物菌种所制备的多菌种微生物发酵剂，可以改善脐橙的品质，提高脐橙的产量，使产量增产6-10%；多菌种微生物发酵剂与脐橙榨汁留下的固形物混合入肥料基料能使脐橙出汁率提高10-15%。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行进一步说明。

实施例1

将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、黑曲霉菌、乳酸链球菌、产脘假丝酵母、谷氨酸棒杆菌分别进行菌种活化、斜面培养，其中，枯草芽孢杆菌的培养基是淀粉0.15%+葡萄糖0.5%+尿素0.1%+磷酸氢二钾0.3%+磷酸二氢钾0.15%+硫酸镁0.05%+酵母膏0.02%+氯化铁0.01%+碳酸钙0.01%+豆粕1%; 巨大芽孢杆菌的培养基是牛肉膏5.0克、蛋白胨8.0克、葡萄糖2.0克、硫酸镁0.5克、氯化钠 3.0克、磷酸氢二钾1.0克、水 1000ml，pH = 7.0-7.5、温度 34℃；植物乳杆菌的培养基是牛肉膏5.0克、酵母粉2.5克、葡萄糖10.0克、吐温-80 0.5克、柠檬酸铵 1.0克、乙酸钠 2.5克、硫酸锰 0.05克、硫酸镁 0.3克、磷酸氢二钾 1.0克、水1000ml，pH=6.2-6.5、温度37℃；乳酸链球菌的培养基是牛肉膏5.0克、麦芽精5.0克、蛋白胨8.0克、葡萄糖10.0克、水1000ml、琼脂20.0克，pH=6.2-6.5、温度24℃；产脘假丝酵母的培养基为牛肉膏5.0克、麦芽精5.0克、蛋白胨 5.0克、葡萄糖10.0克、水1000ml、琼脂20.0克，pH = 6.5-7.0、温度24℃；谷氨酸棒杆菌的培养基是硝酸钠3.0克、磷酸氢二钾1.0克、硫酸铁0.1克、蔗糖20.0克、硫酸镁 0.5克、水1000ml、琼脂20.0克，pH =6.5-7.0、温度28℃。

将各微生物菌种按数量百分比配比：枯草芽孢杆菌9%、巨大芽孢杆菌18%、黑曲霉菌10%、乳酸链球菌21%、产脘假丝酵母22%、谷氨酸棒杆菌20%，混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养2天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂1。

实施例2

枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、黑曲霉菌、乳酸链球菌、产脘假丝酵母、谷氨酸棒杆菌进行菌种活化、斜面培养的方法同实施例1。

将各微生物菌种按数量百分比配比：枯草芽孢杆菌10%、巨大芽孢杆菌11%、植物乳杆菌15%、乳酸链球菌17%、产脘假丝酵母28%、谷氨酸棒杆菌19%，混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养3天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂2。

实施例3

将各微生物菌种按数量百分比配比：枯草芽孢杆菌13%、巨大芽孢杆菌16%、植物乳杆菌11%、乳酸链球菌12%、产脘假丝酵母24%、谷氨酸棒杆菌24%，混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养2天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂3。

实施例4

将各微生物菌种按数量百分比配比：枯草芽孢杆菌15%、巨大芽孢杆菌12%、植物乳杆菌17%、乳酸链球菌15%、产脘假丝酵母23%、谷氨酸棒杆菌18%，混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养3天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂4。

实施例5

将各微生物菌种按数量百分比配比：枯草芽孢杆菌12.5%、巨大芽孢杆菌12.5%、黑曲霉菌12.5%、乳酸链球菌12.5%、产脘假丝酵母25%、谷氨酸棒杆菌25%，混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养3天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂5。

将实施例1-5制得的多菌种微生物发酵剂1-5与柑桔碎沫进行混料，其中，多菌种微生物发酵剂的质量百分比为1%。试验结果如下：

	脐橙（公斤）	发酵时间（小时）	发酵产量（公斤）
				1	1000	96	600
2	1000	96	650
				3	1000	96	580
4	1000	96	620
				5	1000	96	610
常规发酵剂	1000	144	450

由上表可见，发酵时间缩短，发酵素产量提高了130公斤至200公斤。

将复合微生物肥料1-5与仅由秸秆、豆饼渣、鸡粪构成的普通肥料在相同的条件下分别施用于相同面积的脐橙试验棚中。试验结果如下：

	亩产（公斤/亩）	出汁率
			1	3100	53%
2	3000	59%
			3	3200	56%
4	3100	57%
			5	3300	61%
施用普通肥料	2800	39%

由上表可见，通过施用含有本发明所述的多菌种微生物发酵剂的肥料基料，应用于脐橙种植，可使得产量增产10-15%，脐橙出汁率接近60%，达到巴西工业橙的水平。

Claims

1.一种多菌种微生物发酵剂，其特征在于，所述多菌种微生物发酵剂是由以下数量百分比的多种微生物菌种按比例制成：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）9%-15%、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）11%-18%、黑曲霉菌（Aspergillus niger）10%-17%、乳酸链球菌（Streptococcus lactis）12%-21%、产脘假丝酵母（Candida utilis）22%-30%、谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）18%-27%，上述各微生物菌种的数量百分比总和为100％。

2.根据权利要求1所述的多菌种微生物发酵剂，其特征在于，所述多种微生物菌种的数量百分比为：枯草芽孢杆菌10%-13%、巨大芽孢杆菌12%-16%、植物乳杆菌11%-15%、乳酸链球菌12%-17%、产脘假丝酵母24%-28%、黑曲霉菌21%-26%，上述各微生物菌种的数量百分比总和为100％。

3. 根据权利要求1所述的多菌种微生物发酵剂，其特征在于，所述多种微生物菌种的数量百分比为：枯草芽孢杆菌12.5%、巨大芽孢杆菌12.5%、植物乳杆菌12.5%、乳酸链球菌12.5%、产脘假丝酵母25%、黑曲霉菌25%。

4. 一种权利要求1所述的多菌种微生物发酵剂的制备方法，其特征在于：

(1)将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、植物乳杆菌、乳酸链球菌、产脘假丝酵母、黑曲霉菌分别进行菌种活化、斜面培养，其中，枯草芽孢杆菌的培养基是牛肉膏5.0克、蛋白胨5.0克、氯化钠 5.0克、酵母粉1.0克、碳酸钙 0.5克、硫酸镁 0.5克、水1000ml，pH = 7.0-7.5、温度35℃; 巨大芽孢杆菌的培养基是牛肉膏5.0克、蛋白胨8.0克、葡萄糖2.0克、硫酸镁0.5克、氯化钠 3.0克、磷酸氢二钾1.0克、水 1000ml，pH = 7.0-7.5、温度 34℃；植物乳杆菌的培养基是牛肉膏5.0克、酵母粉2.5克、葡萄糖10.0克、吐温-80 0.5克、柠檬酸铵 1.0克、乙酸钠 2.5克、硫酸锰 0.05克、硫酸镁 0.3克、磷酸氢二钾 1.0克、水1000ml，pH=6.2-6.5、温度37℃；乳酸链球菌的培养基是牛肉膏5.0克、麦芽精5.0克、蛋白胨8.0克、葡萄糖10.0克、水1000ml、琼脂20.0克，pH=6.2-6.5、温度24℃；产脘假丝酵母的培养基为牛肉膏5.0克、麦芽精5.0克、蛋白胨 5.0克、葡萄糖10.0克、水1000ml、琼脂20.0克，pH = 6.5-7.0、温度24℃；黑曲霉菌的培养基是硝酸钠3.0克、磷酸氢二钾1.0克、硫酸铁0.1克、蔗糖20.0克、硫酸镁 0.5克、水1000ml、琼脂20.0克，pH =6.5-7.0、温度28℃；

(2)将所述多种微生物菌种按数量百分比配比：枯草芽孢杆菌9%-15%、巨大芽孢杆菌11%-18%、植物乳杆菌10%-17%、乳酸链球菌12%-21%、产脘假丝酵母22%-30%、黑曲霉菌18%-27%，混合放入三角瓶中，置于摇床内，在28℃的条件下培养2-3天，控制pH在6.5-7.0，使菌数含量达6-8亿/ml，制得所述多菌种微生物发酵剂。

5. 根据权利要求4所述的多菌种微生物发酵剂的制备方法，其特征在于，所述多种微生物菌种的数量百分比为：枯草芽孢杆菌10%-13%、巨大芽孢杆菌12%-16%、植物乳杆菌11%-15%、乳酸链球菌12%-17%、产脘假丝酵母24%-28%、黑曲霉菌21%-26%。

6. 根据权利要求4所述的多菌种微生物发酵剂的制备方法，其特征在于，所述多种微生物菌种的数量百分比为：枯草芽孢杆菌12.5%、巨大芽孢杆菌12.5%、植物乳杆菌12.5%、乳酸链球菌12.5%、产脘假丝酵母25%、黑曲霉菌25%。