CN103819578B - 一种加氢氧化钠法提高硫酸软骨素收率的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种提高硫酸软骨素收率的方法，这种方法使我们企业减少了生产成本，增加了企业效益，因而增强了产品竞争优势。技术方案是在碱解工序，对多种抑菌剂、不同操作温度和各比例的氢氧化钠加入量进行试验；在精制工序，采用几种常用的还原剂进行试验，得出结论：选择合适的抑菌剂和还原剂，在适宜的操作温度下，加入一定量的氢氧化钠，提高硫酸软骨素的收率。从而使产品收率大大提高，同时也减少对硫酸软骨素的破坏。

Description

一种加氢氧化钠法提高硫酸软骨素收率的方法
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体地说涉及在一定条件下加入一定量的氢氧化钠，减少对硫酸软骨素的破坏从而提高硫酸软骨素收率的方法。
背景技术
硫酸软骨素(CS)，是从动物的软骨组织中得到的酸性粘多糖。早在1861年，由Fischer和Boeaeker等从动物的软骨中分离出来，首次报告了硫酸软骨素并给以命名，1891年Schmiedebery也从鼻软骨中分离成功。1938年麦耶(Meyer)提出粘多糖的定义为己糖胺类多糖的总称，现在有人认为把这一类化合物命名为糖胺多糖比较恰当。
自然界中，硫酸软骨素多存在于动物的软骨、喉骨、鼻骨(猪含41％)、牛、马中膈和气管(含36％～39％)中，其他骨腱、韧带、皮肤、角膜等组织中也含有，鱼类软骨中含量很丰富，如鲨鱼骨中含50％～60％，结缔组织含量很少。腔肠动物、海绵动物、原生动物也含有，植物中几乎没有。软骨中的硫酸软骨素与蛋白质结合以蛋白多糖的形式存在。
硫酸软骨素能增强脂肪酶的活性，使乳糜微粒中的甘油三酯分解成脂肪酸，使血液中乳糜微粒减少而澄清，还具有抗凝和抗血栓形成的作用。实验药理和临床研究结果表明，可用于冠状动脉粥样硬化性疾病、血脂和胆固醇增高、动脉硬化、心绞痛、心肌缺血、心肌梗死等症。
发明内容
本发明提供了一种加氢氧化钠法提高硫酸软骨素收率的方法，是为了减少对硫酸软骨素的破坏从而提高硫酸软骨素的收率，利用在合适的抑菌剂和还原剂，适宜的操作温度下，加入一定量的氢氧化钠，减少对硫酸软骨素的破坏，从而实现对硫酸软骨素的收率提高的目的。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案予以实现：
一种加氢氧化钠法提高硫酸软骨素收率的方法，其特征在于：采用合适的抑菌剂和还原剂，适宜的操作温度加入一定量的氢氧化钠，减少对硫酸软骨素的破坏。
在发明的技术方案中，还具有以下技术特征：所述加氢氧化钠法包括如下步骤
一、提取
1、粗品溶解：
开启水阀，加入一定量纯化水，再将猪鼻骨粗品加入到反应罐中，边搅边加，按原料与纯化水1：(6-7)比例溶解，搅拌5-6小时后，用搅拌棒试底部是否全部溶解；
2、碱解：
将原水弃去，再加入一倍重量的纯化水，再加入片碱，搅拌3-5小时；
3、酶解：
配制2mol盐酸，用2mol盐酸的调节pH至8.0，再慢慢升温至45℃。加入胰脏，同时加入氯化钠，保温在45℃-50℃之间，3-4个小时。
4、还原过滤：
调节pH值至6.5，同时加入硫代硫酸钠，后过滤至清。
二、精制
1、第一次沉淀：
待上述上滤液打入沉淀罐中，搅拌溶解后，边搅边加浓度为95％酒精，使得乙醇的浓度在60℃时达到45～50％，沉淀6小时；
2、第二次沉淀：溶液加入300L纯化水，搅拌溶解后，加入分析纯级氯化钠6.0kg，用盐酸溶液调将溶液PH6.0-7.0，边搅边加浓度为95％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在60℃时达到45～50％，沉淀6小时；
3、第一次脱水：弃去上层废乙醇，然后加入体积95％酒精，脱水10小时；
4、第二次脱水：虹吸上层酒精，，边搅边加无水乙醇，脱水10小时；
5、烘干：用80°酒精将烘干箱灭菌，然后将产品装入盘中，放入箱中同时放入8瓶五氧化二磷，把箱子关紧，用真空泵抽至负压下。
6、包装：将产品取出，称重，使每包装袋25kg，用封口机封口，放在纸桶中待验。
7.入库待验：清场按SOP要求进行场、填写清场记录，悬挂清场合格证，填写批生产记录。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：
本发明的硫酸软骨素精品生产采用氢氧化钠氧化法，结合醇洗分离法，将大量的杂质用乙醇带走，其精品收率由原来的30％提高到38％，含量提高到95％以上，其质量标准符合中国药典、美国药典、英国药典及西欧药典所规定的各项指标。
附图说明图1为硫酸软骨素成品检验报告单
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
一、提取
1、粗品溶解：
开启水阀，加入一定量纯化水，再将猪鼻骨粗品加入到反应罐中，边搅边加，按原料与纯化水1：(6-7)比例溶解，搅拌5-6小时后，用搅拌棒试底部是否全部溶解；
2、碱解：
将原水弃去，再加入一倍重量的纯化水，再加入片碱，搅拌3-5小时；
3、酶解：
配制2mol盐酸，用2mol盐酸的调节pH至8.0，再慢慢升温至45℃。加入胰脏，同时加入氯化钠，保温在45℃-50℃之间，3-4个小时。
4、还原过滤：
调节pH值至6.5，同时加入硫代硫酸钠，后过滤至清。
二、精制
1、第一次沉淀：
待上述上滤液打入沉淀罐中，搅拌溶解后，边搅边加浓度为95％酒精，使得乙醇的浓度在60℃时达到45～50％，沉淀6小时；
2、第二次沉淀：溶液加入300L纯化水，搅拌溶解后，加入分析纯级氯化钠6.0kg，用盐酸溶液调将溶液PH6.0-7.0，边搅边加浓度为95％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在60℃时达到45～50％，沉淀6小时；
3、第一次脱水：弃去上层废乙醇，然后加入体积95％酒精，脱水10小时；
4、第二次脱水：虹吸上层酒精，，边搅边加无水乙醇，脱水10小时；
5、烘干：用80°酒精将烘干箱灭菌，然后将产品装入盘中，放入箱中同时放入8瓶五氧化二磷，把箱子关紧，用真空泵抽至负压下。
6、包装：将产品取出，称重，使每包装袋25kg，用封口机封口，放在纸桶中待验。
7.入库待验：清场按SOP要求进行场、填写清场记录，悬挂清场合格证，填写批生产记录。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (1)

1.一种加氢氧化钠法提高硫酸软骨素收率的方法，其特征在于：选用合适的抑菌剂和还原剂，在适宜的操作温度下，加入一定量的氢氧化钠，使产品的收率得到提高，具体步骤如下：
一、提取
1、粗品溶解：
开启水阀，加入一定量纯化水，再将猪鼻骨粗品加入到反应罐中，边搅边加，按原料与纯化水1∶(6-7)比例溶解，搅拌5-6小时后，用搅拌棒测试底部是否全部溶解；
2、碱解：
将原水弃去，再加入一倍重量的纯化水，再加入片碱，搅拌3-5小时；
3、酶解：
配制2mol盐酸，用2mol盐酸的调节pH至8.0，再慢慢升温至45℃，加入胰脏，同时加入氯化钠，保温在45℃-50℃之间，3-4个小时；
4、还原过滤：
调节pH值至6.2-6.7，同时加入硫代硫酸钠，后过滤至清；
二、精制
1、第一次沉淀：
待上述滤液打入沉淀罐中，搅拌溶解后，边搅拌边加浓度为95％酒精，使得乙醇的浓度在60℃时达到45～50％，沉淀6小时；
2、第二次沉淀：溶液加入300L纯化水，搅拌溶解后，加入分析纯级氯化钠6.0kg，用盐酸溶液调将溶液pH6.0-7.0，边搅边加浓度为95％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在60℃时达到45～50％，沉淀6小时；
3、第一次脱水：弃去上层废乙醇，然后加入体积95％酒精，脱水10小时；
4、第二次脱水：虹吸上层酒精，边搅边加无水乙醇，脱水10小时；
5、烘干：用80°酒精将烘干箱灭菌，然后将产品装入盘中，放入箱中同时放入8瓶五氧化二磷，把箱子关紧，用真空泵抽至负压下；
6、包装：将产品取出，称重，使每包装袋25kg，用封口机封口，放在纸桶中待验；
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101851300A (zh) * 2010-06-19 2010-10-06 江西海鑫贸易有限公司 硫酸软骨素提取工艺
CN103145874A (zh) * 2012-12-08 2013-06-12 青岛九龙生物医药有限公司 一种提高硫酸软骨素含量的方法
WO2013102144A2 (en) * 2011-12-30 2013-07-04 Halozyme, Inc. Ph20 polypeptede variants, formulations and uses thereof
CN103214595A (zh) * 2013-04-11 2013-07-24 重庆奥力生物制药有限公司 硫酸软骨素钠的制备方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101851300A (zh) * 2010-06-19 2010-10-06 江西海鑫贸易有限公司 硫酸软骨素提取工艺
WO2013102144A2 (en) * 2011-12-30 2013-07-04 Halozyme, Inc. Ph20 polypeptede variants, formulations and uses thereof
CN103145874A (zh) * 2012-12-08 2013-06-12 青岛九龙生物医药有限公司 一种提高硫酸软骨素含量的方法
CN103214595A (zh) * 2013-04-11 2013-07-24 重庆奥力生物制药有限公司 硫酸软骨素钠的制备方法

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