CN103776938A - 盐酸氨基葡萄糖胶囊的含量测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种盐酸氨基葡萄糖胶囊的含量测定方法。该方法采用高效液相-蒸发光散射检测法，色谱柱：NH2柱，5um，250×4.6um，流动相组成为乙腈：水=（8-6:2.5-3.5），流速为0.8-1.2ml/min，柱温为30-40℃，检测器为AlltechELSD2000，漂移管温度为65-75℃，氮气压力为0.6-3.0MPA；吸取对照贮备液、供试品溶液、阴性辅料溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。计算标准品溶液浓度的值为X与相应峰面积值为Y，进行线性拟合，得出线性回归方程，线性范围为0.2-1.2mg/ml。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物的质量控制方法，特别涉及盐酸氨基葡萄糖胶囊的含量测定方法。
背景技术
盐酸氨基葡萄糖胶囊原国家标准WS1-(X-090)-2005Z采用紫外可见分光光度法测定，该法是通过测定衍生化反应生成物含量间接测定盐酸氨基葡萄糖的含量，但测定的重复性较差。样品处理需衍生化反应，操作较为繁琐，且样品溶液的稳定性不高，重复性不强。
专利申请号：201210012194.8盐酸氨基葡萄糖胶囊的含量测定方法公示了一种盐酸氨基葡萄糖胶囊的测定方法，该方法使用乙腈、水和三氟乙酸为流动相，使用C18为填料的色谱柱。该方法流动相中的三氟乙酸具有腐蚀性，并且色谱图中峰保留时间较短，分离效果较差，该方法的线性范围为0.8~1.2mg/ml，测量浓度范围窄。
目前盐酸氨基葡萄糖胶囊的质量控制方法尚不完善。
发明内容
本发明目的在于提供盐酸氨基葡萄糖胶囊的含量测定方法。
本发明的目的是通过如下技术方案实现，该方法包括如下步骤：
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6um，流动相组成为乙腈：水=（8-6:2.5-3.5），流速为0.8-1.2ml/min，柱温为30-40℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为65-75℃，氮气压力为0.6-3.0MPA。
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料液。
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99；精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰。
本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
本发明盐酸氨基葡萄糖胶囊含量测定的优选方法如下：
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7:3），流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70℃，氮气压力为1.0MPA。
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料夜。
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99；精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰。
本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7.5:3），流速为1.2ml/min，柱温为30℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为75℃，氮气压力为1.2MPA。
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料夜。
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰。
本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（6.5:3），流速为0.9ml/min，柱温为40℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为72℃，氮气压力为1.4MPA。
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料夜。
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰。
本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
盐酸氨基葡萄糖胶囊由如下方法制成：由盐酸氨基葡萄糖为主药，微晶纤维素为填充剂，经制粒，总混，胶囊填充，包装即得。
本发明质量控制方法依据试验结果表明其重复性良好，线性关系良好，精密度良好，溶液稳定性好，回收率良好，线性范围广。
附图说明：系统适用性对照品图1；
系统适用性供试品图2；
系统适用性阴性图3；
线性关系标准曲线图4。
以下通过实施例形式再对本发明的内容作进一步详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本发明上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本发明的范围内。
实施例1 系统适用性实验
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7:3），流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70℃，氮气压力为1.0MPA。
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料夜。
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果表明：供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液色谱相同保留时间处，有相同的峰，峰形对称，理论塔板数为2000以上，阴性辅料样品溶液色谱中，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰。结果见图1、图2、图3。
实施例2 线性关系实验
取对照品贮备液（2mg/ml），分别加水稀释成0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、1.2mg/ml不同浓度的对照品溶液，分别吸取各对照溶液20ul，注入液相色谱仪。计算浓度值与峰面积值的线性方程及回归系数，结果见表1见图4。
表1线性关系实验数据表
回归方程：y = 7171696.1810 x - 201307.8667 ，相关系数R2 = 0.9999 。
实验结果表明，在0.202mg/ml-1.212mg/ml范围内，溶液浓度的值与相应峰面积值的线性关系良好。，
实施例3 精密度实验
精密吸取对照品溶液（1.0mg/ml）20ul注入色谱仪，重复测定5次，计算其精密度，结果见表2。
表2精密度实验数据表
实验结果表明，精密度良好。
实施例4 稳定性实验
取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，加水制成1mg/ml溶液，测定峰面积，分别0小时、2小时、4小时、8小时、12小时20ul注入色谱仪，结果见表3。
表3稳定性实验数据表
实验结果表明，溶液在12小时内稳定。
实施例5 重复性实验
取盐酸氨基葡萄糖胶囊样品适量，精密称取相当于盐酸氨基葡萄糖25mg的内容物置25ml容量瓶中，制成浓度约为1mg/ml的溶液。依此方法重复制备样品5份，20ul注入色谱仪，结果见表4。
表4重复性实验数据表
实验结果表明，本方法重复性较好。
实施例6 回收率实验
精密称取盐酸氨基葡萄糖适量，分别为规定量的80%、100%、120%各三份，按处方比例加相应辅料，置容量瓶中，加水溶解稀释至刻度，滤过。计算回收率。考察相对标准偏差，结果见表5。
表5回收率实验数据表
实验结果表明，本方法回收率良好。
实施例7耐用性实验
为了研究液相色谱条件的微小变化对试验结果的影响程度，进行耐用性实验。影响高效液相-蒸发光散射含量测定方法的主要因素有流动相比例、流速、色谱柱、漂移管温度、氮气压力。测定方法采用的条件为流速1.0ml/min，
漂移管温度为70℃，氮气压力为1.0MPA，流动相组成为乙腈：水（7:3）色谱柱NH2柱。供试品与对照品溶液的制备方法同实施例1项下要求。盐酸氨基葡萄糖的理论含量为847.9mg/g。结果见表6。
表6耐用性实验数据表
实验结果表明，该方法含量测定方法稳定可靠，耐用性较好。
实施例8 含量测定实验
实验1
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7:3），流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70℃，氮气压力为1.0MPA。
供试品溶液的制备：精密称取批号为130806的盐酸氨基葡萄糖胶囊内容物，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度约为1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，制成浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。
精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。测得含量为标示量的99.8%。
实验2
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7:3），流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70℃，氮气压力为1.0MPA。
供试品溶液的制备：精密称取批号为130807的盐酸氨基葡萄糖胶囊内容物，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度约为1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，制成浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。
精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。测得含量为标示量的100.2%。
实验3
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7:3），流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70℃，氮气压力为1.0MPA。
供试品溶液的制备：精密称取批号为130808的盐酸氨基葡萄糖胶囊内容物，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度约为1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，制成浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。
精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。测得含量为标示量的101.6%。
Claims (4)
1.一种盐酸氨基葡萄糖胶囊的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6um，流动相组成为乙腈：水=（8-6:2.5-3.5），流速为0.8-1.2ml/min，柱温为30-40℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为65-75℃，氮气压力为0.6-3.0MPa；
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液；
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用；
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料液；
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰：本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml；
所述盐酸氨基葡萄糖胶囊由如下方法制成：由盐酸氨基葡萄糖为主药，微晶纤维素为填充剂，经制粒，总混，灌装，包装即得。
2.权利要求1.所述的盐酸氨基葡萄糖胶囊的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7:3），流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70℃，氮气压力为1.0MPa；
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜 滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液；
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用；
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料液；
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰：本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
3.权利要求1.所述的盐酸氨基葡萄糖胶囊的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（7.5:3），流速为1.2ml/min，柱温为30℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为75℃，氮气压力为1.2MPa；
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液；
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用；
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料液；
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰：本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
4.权利要求1.所述的盐酸氨基葡萄糖胶囊的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
色谱柱NH2柱，5um，250×4.6mm，流动相组成为乙腈：水（6.5:3），流速为0.9ml/min，柱温为40℃，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为72℃，氮气压力为1.4MPa；
供试品溶液的制备：取相当于100mg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度1mg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液；
对照溶液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用；
阴性辅料溶液的制备：按处方比例称取辅料约100mg，制得浓度约1mg/ml的溶液作为阴性辅料液；
在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰：本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
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| CN102590410A (zh) * | 2012-01-13 | 2012-07-18 | 亚宝药业太原制药有限公司 | 盐酸氨基葡萄糖胶囊的含量测定方法 |
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2013
- 2013-11-13 CN CN201310569729.6A patent/CN103776938B/zh active Active
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