CN103755762B - 果同尼皂苷f及其衍生物的中间体、制备方法和用途及果同尼皂苷f衍生物 - Google Patents

果同尼皂苷f及其衍生物的中间体、制备方法和用途及果同尼皂苷f衍生物 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种果同尼皂苷F及其衍生物的中间体、制备方法和用途及果同尼皂苷F衍生物。如式I所示的果同尼皂苷F或其衍生物的制备方法，包含：有机溶剂中，在碱的作用下，将R7为酰基保护的如式I’所示的化合物进行脱保护反应，制得脱去酰基保护基的如式I所示的化合物。本发明还公开了果同尼皂苷F或所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物作为GPR119激动剂或在制备治疗糖尿病或者肥胖症药物中的应用。本发明的果同尼皂苷F类化合物对由GPR119介导的疾病如糖尿病和肥胖症有较好的活性，并且本发明的制备方法的反应条件温和，产率较高。

Description

果同尼皂苷F及其衍生物的中间体、制备方法和用途及果同尼皂苷F衍生物
技术领域
本发明涉及一种果同尼皂苷F及其衍生物的中间体、制备方法和用途及果同尼皂苷F衍生物。
背景技术
南非火地亚（HoodiaGordonii）植物提取物能抑制食欲，是目前广泛使用的一种减肥产品。火地亚植物中含有多种甾体皂苷，其中甙元部分主要包括HoodigogeninA、Isoramanone、Calogenin、Pregna-5,14-diene-3β,20-dio、Hoodistanal和Dehydrohoodistanal等甾体；糖链部分主要由2,6-二脱氧的糍麻糖（cymarose）、洋地黄毒糖（digitoxose）、齐墩果糖（oleandrose）、6-脱氧的黄夹竹桃糖（thevetose）以及葡萄糖（glucose）等通过β-糖苷键构成（Dall’Acqua,S.;Innocenti,G.,Steroids2007,72,559-568.Pawar,R.S.;Shukla,Y.J.;Khan,S.I.;Avula,B.;Khan,I.A.,Steroids2007,72,524-534.vanHeerden,F.R.;MarthinusHorak,R.;Maharaj,V.J.;Vleggaar,R.;Senabe,J.V.;Gunning，P.J.Phytochemistry.2007,68,2545-2553.Pawara,R.S.;Shuklab,Y.J.;Khana,I.A.Steroids.2007,72,881-891.Shukla,Y.J.;Pawar,R.S.;Ding,Y.Q.;Li,X.C.;Ferreira,D.;Khan,I.A.Phytochemistry.2009,70,675-683）。但这些皂苷含量很低，分离纯化十分困难，因此，对其作用靶点和分子层面的作用机制研究很少。目前仅有对P57（又名P57AS3）三糖皂苷的减肥作用的机制研究（US07166611B2和PTCInt.Appl.,WO9846243A119981022），但是其分子层面及构效关系的研究未见报道。另外，有关P57的合成的文献很少，2012年俞飚课题组首次报道了P57的化学全合成。由于直接的三糖糖苷化很困难，该全合成糖苷化步骤采用连续糖苷化策略（Chem.Commun.,2012,48,8679-8681）。
果同尼皂苷F（GordonosideF）是从火地亚中分离出的一种四糖皂苷，甙元部分为HoodigogeninA，这是一种孕甾烷型的甾体。3位的线性四糖片段由一个D-齐墩果糖和三个D-糍麻糖通过1,4-β-糖苷键依次连接而成。目前尚未有对果同尼皂苷F及其衍生物的合成、生物活性和作用机制研究的报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术中果同尼皂苷F或其衍生物的制备方法中，反应条件苛刻，目标化合物的产率低的缺陷，而提供了一种果同尼皂苷F及其衍生物的中间体、制备方法和用途及果同尼皂苷F衍生物。本发明的果同尼皂苷F或其衍生物对由GPR119介导的疾病如糖尿病和肥胖症有较好的活性，并且本发明的制备方法的反应条件温和，产率较高。
本发明提供了一种如式I所示的果同尼皂苷F衍生物：
其中，R为取代或未取代的C1～C10的烷基、取代或未取代的C3～C10的环烷基、取代或未取代的C2～C10的烯基，或者取代或未取代的C6～C10的芳基；
R1为氢、取代或未取代的C1～C10的烷基、取代或未取代的C3～C10的环烷基、取代或未取代的C2～C10的烯基、取代或未取代的C6～C10的芳基、酰基或硅基；
R2、R3、R4和R5相同或不同，各自独立地为取代或未取代的C1～C10的烷基；
R7为氢或者酰基；
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物的5位和6位碳原子通过单键或双键连接；
R、R1、R2、R3、R4和R5中，所述的取代是指被下列一个或多个取代基取代：C1～C10的烷基、C1～C10的烷氧基、C3～C10的烯基、C3～C10的环烷基、C6～C10的芳基、硝基、卤素、氨基或硅基；
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物，其不包含以下任一结构：
所述的C1～C10的烷基。为C1～C4的烷基。所述的C1～C4的烷基较佳地为甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基。
所述的C3～C10的环烷基较佳地为C3～C6的环烷基。所述的C3～C6的环烷基较佳地为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
所述的C2～C10的烯基较佳地为C2～C4的烯基。所述的C2～C4的烯基较佳地为乙烯基、丙烯基、2-甲基丙烯基、丁烯基、3-甲基丁烯基、2-甲基丁烯基或2,3-二甲基丁烯基。
所述的C6～C10的芳基较佳地为C6～C8的芳基。所述的C6～C8的芳基较佳地为苯基。
所述的酰基较佳地为-COR6，其中，R6为取代或未取代的C1～C6的烷基，或者取代或未取代的C6～C10的芳基。
所述的C1～C10的烷氧基较佳地为C1～C4的烷氧基。所述的C1～C4的烷氧基较佳地为甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。
所述的卤素较佳地为F、Cl、Br或I。
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物中，3-位的糖苷键可为α构型或β构型。
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物中，17位取代基可为S构型或R构型，较佳地为R构型。
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物，其中，R、R2、R3、R4和R5较佳地为甲基。
R1为氢或其中Ra为单取代或多取代，相同或不同，选自下列基团中的一个或多个：氢、C1～C4的烷基、C1～C4的烷氧基、C1～C4的烷胺基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、叠氮基或三氟甲基。
当R7为-COR6，其中，R6较佳地为取代或未取代的C1～C4的烷基，或者取代或未取代的C6～C8的芳基。所述的C1～C4的烷基较佳地为甲基。所述的C6～C8的芳基较佳地为苯基。
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物，较佳地，为如下任一化合物：
本发明还提供了一种果同尼皂苷F或其衍生物的制备方法，其包含下列步骤：有机溶剂中，在碱的作用下，将R7为酰基保护的如式I’所示的化合物进行如下所示的脱保护反应，制得脱去酰基保护基的如式I所示的化合物；
其中，R7为酰基；R、R1、R2、R3、R4和R5的定义均同前所述。
所述的脱保护反应的方法和条件可为本领域常规的方法和条件。本发明优选下列方法和条件：所述的有机溶剂较佳地为芳烃类溶剂、卤代烃类溶剂、酮类溶剂、醇类溶剂和醚类溶剂中的一种或多种。所述的芳烃类溶剂较佳地为甲苯。所述的卤代烃类溶剂较佳地为二氯甲烷（DCM）。所述的酮类溶剂较佳地为丙酮。所述的醇类溶剂较佳地为甲醇（MeOH）和/或乙醇（EtOH）。所述的醚类溶剂较佳地为四氢呋喃（THF）。所述的碱较佳地为无机碱。所述的无机碱较佳地为氢氧化钠（NaOH）、氢氧化钾（KOH）、甲醇钠、乙醇钠和叔丁醇钠中的一种或多种。所述的碱与R7为-COR6时的如式I所示的化合物的摩尔比值较佳地为0.2～4。所述的溶剂的用量以不影响反应的进行即可，所述的有机溶剂与R7为酰基保护的如式I’所示的化合物的体积质量比较佳地为0.2mL/mg。所述的脱保护基反应的温度较佳地为10℃～30℃。所述的反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法（如TLC、HPLC或NMR）进行监控，一般以R7为酰基保护的如式I’所示的化合物消失时作为反应终点，所述的反应的时间较佳地为0.5～12小时。
所述的脱保护反应结束后，较佳地还可进一步包含后处理纯化步骤。所述的后处理纯化步骤的方法和条件可为本领域常规的方法和条件，本发明优选柱层析分离纯化即可。所述的柱层析的方法和条件均可按本领域常规进行选择。
所述的果同尼皂苷F或其衍生物的制备方法，其优选包含下列步骤：
（1）有机溶剂中，惰性气体的保护下，在路易斯酸的作用下，将如式IV所示的化合物和如式V所示的化合物进行如下所示的糖苷化反应，制得R7为酰基保护的如式I’所示的化合物；
（2）有机溶剂中，在碱的作用下，将R7为酰基保护的如式I’所示的化合物进行如下所示的脱保护反应，制得如式I所示的化合物；
其中，R、R1、R2、R3、R4、R5和R7的定义均同前所述，但是R7不为氢；R8为氢、取代或未取代的C1～C10的烷基、取代或未取代的C3～C10的环烷基，或者取代或未取代的C6～C10的芳基；R8中，所述的取代是指被下列一个或多个取代基取代：C1～C4的烷基、C1～C4的烷氧基或硝基；步骤（2）中所述的脱保护反应的方法和条件均如前所述。
R8较佳地为氢、取代或未取代的C1～C4的烷基、取代或未取代的C3～C6的环烷基，或者取代或未取代的C6～C8的芳基。
R8中，更佳地，所述的C1～C4的烷基较佳地为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基。所述的C3～C6的环烷基较佳地为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。所述的取代或未取代的C6～C8的芳基较佳地为苯基、对甲氧基苯基、对硝基苯基、邻甲氧基苯基或邻硝基苯基。
步骤（1）中，所述的糖苷化反应的方法和条件可为本领域常规的方法和条件，本发明优选包含下列步骤：有机溶剂中，在路易斯酸的作用下，惰性气体保护下，将如式IV所示的化合物、干燥剂和如式V所示的化合物混合，进行反应，制得酰基保护的如式I’所示的化合物。所述的干燥剂可为本领域常规的干燥剂，较佳地为分子筛、分子筛、分子筛、酸洗的分子筛、酸洗的分子筛、酸洗的分子筛、无水硫酸钠、无水硫酸钙、无水硫酸铜和无水硫酸镁中的一种或多种。所述的酸洗可为本领域常规的方法和条件，例如，包括将所述分子筛与含酸溶液混合接触后，过滤、洗涤、干燥并焙烧的步骤。所述的酸洗中采用的酸选自无机酸或有机酸中的一种或几种，例如：盐酸、硝酸、硫酸、磷酸，甲酸、乙酸、草酸、己二酸、丙二酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸中的一种或几种。所述的干燥剂与如式V所示的化合物的质量比值较佳地为1.0～4.0。所述的有机溶剂较佳地为卤代烃类溶剂、腈类溶剂、酯类溶剂和醚类溶剂中的一种或多种，更佳地为卤代烃类溶剂。所述的卤代烃类溶剂较佳地为二氯甲烷（DCM）。所述的腈类溶剂较佳地为乙腈。所述的酯类溶剂较佳地为乙酸乙酯（EA）。所述的醚类溶剂较佳地为四氢呋喃（THF）。所述的惰性气体较佳地为氮气或氩气。所述的路易斯酸较佳地为AuCl、AuCl3、AuLOTf、AuLNTf2、HgOTf和PtCl2中的一种或多种，其中，L为本领域常规的膦配体，较佳地为三丁基膦、三乙基膦、三苯基膦或三金刚烷基膦。所述的路易斯酸最佳地为PPh3AuOTf。所述的路易斯酸与如式IV所示的化合物的摩尔比值较佳地为0.001～1，更佳地为0.01～0.5。所述的如式V所示的化合物与如式IV所示的化合物的摩尔比值较佳地为0.5～15，更佳地为1～1.5。所述的反应的温度较佳地为-18～5℃。所述的反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法（如TLC、HPLC或NMR）进行监控，一般以如式IV所示的化合物消失时作为反应终点，所述的反应的时间较佳地为0.5～24小时，更佳地为0.5～2小时。
本发明还提供了一种果同尼皂苷F或其衍生物的制备方法，其包含下列步骤：有机溶剂中，惰性气体的保护下，在路易斯酸的作用下，将如式IV所示的化合物和如式V所示的化合物进行如下所示的糖苷化反应，制得R7为酰基保护的如式I’所示的化合物；
其中，R、R1、R2、R3、R4、R5和R7的定义均同前所述，但是R7不为氢；R8为氢、取代或未取代的C1～C10的烷基、取代或未取代的C3～C10的环烷基，或者取代或未取代的C6～C10的芳基；R8中，所述的取代是指被下列一个或多个取代基取代：C1～C4的烷基、C1～C4的烷氧基或硝基。
R8较佳地为氢、取代或未取代的C1～C4的烷基、取代或未取代的C3～C6的环烷基，或者取代或未取代的C6～C8的芳基。
R8中，更佳地，所述的C1～C4的烷基较佳地为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基。所述的C3～C6的环烷基较佳地为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。所述的取代或未取代的C6～C8的芳基较佳地为苯基、对甲氧基苯基、对硝基苯基、邻甲氧基苯基或邻硝基苯基。
步骤（1）中，所述的糖苷化反应的方法和条件可为本领域常规的方法和条件，本发明优选包含下列步骤：有机溶剂中，在路易斯酸的作用下，惰性气体保护下，将如式IV所示的化合物、干燥剂和如式V所示的化合物混合，进行反应，制得酰基保护的如式I’所示的化合物。所述的干燥剂可为本领域常规的干燥剂，较佳地为分子筛、分子筛、分子筛、酸洗的分子筛、酸洗的分子筛、酸洗的分子筛、无水硫酸钠、无水硫酸钙、无水硫酸铜和无水硫酸镁中的一种或多种。所述的酸洗可为本领域常规的方法和条件，例如，包括将所述分子筛与含酸溶液混合接触后，过滤、洗涤、干燥并焙烧的步骤。所述的酸洗中采用的酸选自无机酸或有机酸中的一种或几种，例如：盐酸、硝酸、硫酸、磷酸，甲酸、乙酸、草酸、己二酸、丙二酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸中的一种或几种。所述的干燥剂与如式V所示的化合物的质量比值较佳地为1.0～4.0。所述的有机溶剂较佳地为卤代烃类溶剂、腈类溶剂、酯类溶剂和醚类溶剂中的一种或多种，更佳地为卤代烃类溶剂。所述的卤代烃类溶剂较佳地为二氯甲烷（DCM）。所述的腈类溶剂较佳地为乙腈。所述的酯类溶剂较佳地为乙酸乙酯（EA）。所述的醚类溶剂较佳地为四氢呋喃（THF）。所述的惰性气体较佳地为氮气或氩气。所述的路易斯酸较佳地为AuCl、AuCl3、AuLOTf、AuLNTf2、HgOTf和PtCl2中的一种或多种，其中，L为本领域常规的膦配体，较佳地为三丁基膦、三乙基膦、三苯基膦或三金刚烷基膦。所述的路易斯酸最佳地为PPh3AuOTf。所述的路易斯酸与如式IV所示的化合物的摩尔比值较佳地为0.001～1，更佳地为0.01～0.5。所述的如式V所示的化合物与如式IV所示的化合物的摩尔比值较佳地为0.5～15，更佳地为1～1.5。所述的反应的温度较佳地为-18～5℃。所述的反应的进程可以采用本领域中的常规测试方法（如TLC、HPLC或NMR）进行监控，一般以如式IV所示的化合物消失时作为反应终点，所述的反应的时间较佳地为0.5～24小时，更佳地为0.5～2小时。
本发明还提供一种果同尼皂苷F或如前所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物作为GPR119激动剂的应用。
本发明还提供了一种果同尼皂苷F或如前所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物在制备治疗糖尿病或者肥胖症药物中的应用。
上述两种应用中，所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物为：
其中，R为取代或未取代的C1～C10的烷基、取代或未取代的C3～C10的环烷基、取代或未取代的C2～C10的烯基，或者取代或未取代的C6～C10的芳基；
R1为氢、取代或未取代的C1～C10的烷基、取代或未取代的C3～C10的环烷基、取代或未取代的C2～C10的烯基、取代或未取代的C6～C10的芳基、酰基或硅基；
R2、R3、R4和R5相同或不同，各自独立地为取代或未取代的C1～C10的烷基；
R7为氢或者酰基；
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物的5位和6位碳原子通过单键或双键连接；
R、R1、R2、R3、R4和R5中，所述的取代是指被下列一个或多个取代基取代：C1～C10的烷基、C1～C10的烷氧基、C3～C10的烯基、C3～C10的环烷基、C6～C10的芳基、硝基、卤素、氨基或硅基；
所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物，其不包含以下任一结构：
本发明中，如式V所示的化合物的制备方法可参照Zhang,J.;Shi,H.;Ma,Y.;Yu,B.Chem.Commun.,2012,48(69):8679-8681中记载的内容。
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：
本发明的果同尼皂苷F及其衍生物对GPR119靶蛋白具有特异的选择性和药物活性，并且本发明的制备方法的反应条件温和，产率较高。
附图说明
图1为在GPR119/pCRE-luc稳转细胞系中细胞内的荧光素酶活性图。
图2为在GPR119稳转细胞系中细胞内cAMP的累积的图。
图3为在GPR119/Gα16稳转细胞系中细胞内的钙离子浓度图。
图4为在表达GPR119的HEK293细胞中ERK磷酸化水平图。
图5为在不表达GPR119的HEK293细胞中ERK磷酸化图。
图6为果同尼皂苷F促进体外胰岛素释放图。
图7为实施例5中的化合物（3）体外胰岛素释放图。
图8为实施例5中的化合物（3）体内胰岛素水平图。
图9为实施例5中的化合物（3）体内GLP1水平图。
图10为实施例5中的化合物（3）在野生型小鼠中葡萄糖耐量图。
图10-1为图10的曲线下面积柱状图。
图11为实施例2中的制得的化合物（3）改善口服葡萄糖耐量图。
图11-1为图11的曲线下面积柱状图。
图12为实施例5中的化合物（3）抑制C57BL/6小鼠食欲的剂量效应图。
图13为实施例5中的化合物（3）抑制GPR19野生型小鼠食欲图。
图14为实施例5中的化合物（3）在GPR119敲除小鼠中不能抑制食欲图。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
下述实施例中的化合物4a的制备方法如下：
三乙酰化-D-葡萄糖烯（3-1）作为原料制备得到6-脱氧糖稀（3-2），具体可参照文献Roush,W.R.Org.Lett.2003,5,1875-1878。化合物3-2再在NIS的作用下，得到葡萄糖型的2位碘代的齐墩果糖乙酸酯，水合肼脱除化合物3-2异头位的乙酰基，得到的半缩醛，再与N-苯基三氟乙酰亚胺氯反应得到所需要的2-位碘代的齐墩果糖给体3-3。
具体实验操作和步骤：
将3-26（400mg，2.2mmol）溶解于25.0mL甲苯中，加入HOAc（0.5mL，8.8mmol，4.0equiv），加热至回流，加入NIS（1.461g，6.5mmol，3.0equiv）。在该温度下反应15分钟之后，停止反应，降至室温，加入10%Na2S2O3（20.0mL）。溶液，搅拌至体系紫色褪去。EA稀释，依次用饱和Na2S2O3溶液洗和饱和NaCl溶液洗涤，Na2SO4干燥，过滤，浓缩，柱层析（PE：EA=10:1～4:1）得458mg白色固体3-2，产率：57%(α:β=1:4.6)。
化合物3-2:1HNMR(400MHz,CDCl3):δ6.12(d,J=3.2Hz,1H,α),5.69(d,J=9.6Hz,1H,β),4.66(t,J=9.5Hz,1H,α),4.63(t,J=9.2Hz,1H,β),3.93(dd,J=11.2,3.5Hz,1H,α),3.85-3.76(m,1H,α/β),3.60-3.48(m,1H,α/β),3.43-3.38(m,1H,β),3.41(s,3H,α/β),2.06(s,3H,α),2.03(s,3H,β),2.01(s,3H,α/β),1.09(d,J=6.0Hz,3H,β),1.03(d,J=6.0Hz,3H,α).
13CNMR(100MHz,CDCl3):δ169.1(β),169.0(α),168.4(β),168.3(α),93.7(β),91.7(α),84.0(β),80.5(α),75.0(α),74.6(β),70.8(β),68.1(α),59.5(α),59.3(β),28.9(β),26.6(α),20.6(βα),20.5(βα),17.0(α),16.8(β).
HRMS(MALDI)CalcdforC11H17IO6Na[M+Na]+:394.9962,Found394.9957.
将化合物3-2（458mg，1.23mmol）溶解于7mLCH2Cl2/7mLMeOH的混合溶剂中，加入水合肼(300uL)。室温下反应2.5小时之后，停止反应，柱层析分离纯化(石油醚/乙酸乙酯,2/1),得到408mg无色糖浆，产率：100%。
1HNMR(400MHz,CDCl3):δ5.25(t,J=3.2Hz,1H,α),5.06(brs,-OH,β),4.82(d,J=8.8Hz,1H,β),4.66-4.58(m,1H,α/β),4.57(brs,-OH,α),4.07-4.01(m,1H,α),3.87(dd,J=11.2,2.8Hz,1H,α),3.78(dd,J=11.2,9.2Hz,1H,β),3.68(dd,J=11.0,9.0Hz,1H,α),3.49-3.38(m,2H,β),3.42(s,3H,α),3.41(s,3H,β),2.03(s,3H,α/β),1.12(d,J=6.4Hz,3H,β),1.04(d,J=6.4Hz,3H,α).
13CNMR(100MHz,CDCl3):δ170.0,169.8,96.9,93.2,84.0,80.1,75.7,74.7,69.9,85.5,59.4,58.9,33.2,29.9,20.78,20.75,17.04,16.98.
HRMS(ESI)CalcdforC9H15IO5Na[M+Na]+:352.9856,found352.9855.
将上述无色糖浆(200mg，0.606mmol)溶解于10mLCH2Cl2中，加入Cs2CO3（589mg，1.82mmol）和N-苯基三氟乙酰氯（N-phenyl-trifluoroacetimidoylchloride）(159uL，1.454mmol)。在室温下反应2.5小时之后，停止反应，过滤，浓缩，柱层析分离纯化(pH=7.0DavisilTM硅胶，石油醚/乙酸乙酯,20/1)得347mg无色糖浆3-3，产率：73%。
1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.35(t,J=8.0Hz,2H),7.16(t,J=7.6Hz,1H),6.9(d,J=7.2Hz,2H),5.96(brs,1H),4.82(t,J=9.2Hz,1H),4.01(t,J=9.0Hz,1H),3.55(s,3H),3.59-3.42(m,1H),2.06(s,3H),2.13(s,3H),1.25(d,J=6.0Hz,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3):δ169.3,143.1,128.7,124.4,119.1,96.4,84.0,74.5,71.2,59.4,28.0,20.7,17.0.
以化合物2-1（其合成方法参见文献JOC,2011,76(23),9748-56）为单体，以对甲氧基苯酚(MpOH)为还原端保护基，通过常规保护基操作和糖苷反应（参考JOC,2011,76(23),9748-56及其引用文献）制备得到糍麻糖三糖片段2-9.
将化合物2-9（1.90g，3.4mmol）溶解于10.0mLCH2Cl2中，依次加入化合物3-3（3.04g,5.3mmol）和活化的分子筛。在室温下搅拌30min之后，降温至-72℃，加入TBSOTf(77uL,0.34mmol)。在该温度下反应半小时之后，加入三乙胺淬灭反应，过滤，浓缩，柱层析分离纯化(石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯,5/1/2)，得2.86g白色固体2-10，产率：97%。
[α]D 25=36.2(c0.9,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.91(d,J=8.8Hz,2H),6.75(d,J=8.8Hz,2H),5.26(d,J=8.8Hz,1H),4.74(d,J=8.8Hz,1H),4.68(t,J=9.4Hz,1H),4.57(d,J=8.8Hz,1H),3.96-3.76(m,7H),3.70(s,3H),3.44(s,3H),3.41(s,6H),3.37(s,3H),3.27(d,J=7.6Hz,1H),3.22-3.17(m,2H),2.25(d,J=12.4Hz,1H),2.13-2.06(m,2H),2.06(s,3H),1.78(t,J=10.8Hz,1H),1.66-1.51(m,2H),1.37(d,J=5.6Hz,3H),1.23-1.15(m,9H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ169.4,154.5,151.2,117.4,114.2,103.9,99.4,96.6,84.3,83.4,82.3,81.8,77.2,76.8,76.5,76.2,74.7,69.9,68.7,68.2,58.9,57.8,57.7,55.4,35.1,35.0,34.6,31.2,20.7,19.2,18.1,18.0,17.2.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC37H57O15INa[M+Na]+891.2634,found891.2653.
将化合物2-10(2.86g,3.3mmol)溶于干燥的甲苯(50mL)中，室温下加入AIBN(55mg,0.34mmol)。升温至80oC，Ar保护下加入Bu3SnH(1.1mL,4.1mmol)，在此温度下继续反应30min。冷却至室温后，浓缩，得到的油状物以硅胶柱层析分离纯化(石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯,6/2/3)，得2.25g白色固体2-11，产率：92%。
[α]D 25=-7.9(c0.4,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.96(d,J=8.8Hz,2H),6.80(d,J=8.8Hz,2H),5.31(dd,J=9.6,1.6Hz,1H),4.80-4.75(m,2H),4.65(t,J=9.2Hz,1H),4.51(dd,J=9.6,1.6Hz,1H),4.05-3.98(m,1H),3.92-3.78(m,5H),3.76(s,3H),3.45(s,6H),3.44(s,3H),3.40-3.28(m,6H),3.26-3.20(m,2H),2.35-2.28(m,2H),2.16-2.20(m,2H),2.095(s,3H),1.87-1.78(m,1H),1.70-1.59(m,4H),1.27(d,J=6.0Hz,3H),1.23(d,J=6.4Hz,6H),1.19(d,J=6.4Hz,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ170.0,154.6,151.2,117.4,114.2,101.2,99.6,99.5,96.6,82.5,82.3,81.9,77.6,76.9,76.8,76.5,75.1,69.8,68.7,68.3,68.1,58.2,57.9,57.7,56.3,55.4,36.0,35.5,35.1,34.6,20.9,18.1,17.5.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC37H58O15Na[M+Na]+765.3668,found765.3679.
化合物2-11(2.25g,3.0mmol)溶于乙腈/水（500mL/200mL）的混合溶液中，室温下加入Ag(DPAH)2(3.07g,6.7mmol)。避光反应3h，饱和NaHCO3溶液淬灭反应。乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，除去溶剂后柱层析分离纯化(石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯,2/1/1)，得1.88g白色固体，产率：98%。
将上述半缩醛(1.78g,2.8mmol)溶于干燥CH2Cl2(20.0mL)中，依次加入2-(环丙基乙炔基)苯甲酸(629mg,3.4mmol)，DMAP(340mg,2.4mmol)，EDCI(646mg,5.2mmol)和DIPEA(0.85mL)。室温下反应过夜后，DCM稀释，依次用1NHCl，饱和NaHCO3和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析分离纯化(石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯，6/1/2.5)，得2.17g白色固体4a，产率：97%。
[α]D 25=11.2(c1.6,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J=7.6Hz,1H),7.46(d,J=7.6Hz,1H),7.40(t,J=7.4Hz,1H),7.28(d,J=7.6Hz,1H),6.23(dd,J=9.4,1.8Hz,1H),4.82-4.75(m,2H),4.85(t,J=9.4Hz,1H),4.52(d,J=8.8Hz,1H),4.16-4.06(m,1H),3.92-3.76(m,5H),3.48(s,3H),3.46(s,6H),3.45(s,3H),3.41-3.33(m,3H),3.33(s,3H),3.26-3.22(m,2H),2.38-2.30(m,2H),2.18-2.09(m,2H),2.09(s,3H),1.87-1.78(m,1H),1.70-1.59(m,3H),1.5-1.48(m,1H),1.28(d,J=6.4Hz,3H),1.23(d,J=6.0Hz,6H),1.19(d,J=6.8Hz,3H),0.91-0.85(m,4H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ170.1,164.3,134.1,131.6,131.1,130.4,126.8,124.8,101.3,99.6,99.4,91.8,82.6,82.3,81.4,77.6,77.2,76.93,76.86,76.1,75.2,74.4,69.9,68.3,68.2,58.3,57.9,57.5,56.3,36.0,35.6,35.1,33.3,29.5,20.9,18.1,18.0,17.6,8.7,0.5.
HRMS(ESI)CalcdforC42H60O15Na[M+Na]+827.3824,found827.3821.
实施例中各个编号所表示的含义：
I’为路易斯酸：①：PPh3AuOTf；②：PBu3AuOTf；③：PPh3AuNTf2；④：HgOTf；⑤：PtCl2；⑥：PMe3OTf。
II’为惰性气体：⑦：氩气（Ar）；⑧：氮气（N2）。
III’为摩尔比：是指原料1的摩尔数：原料2的摩尔数：路易斯酸的摩尔数。
IV’为质量比：是指原料1的质量：干燥剂的质量。
V’为干燥剂：1’：分子筛；2’：酸洗分子筛；3’：无水硫酸钙；4’：分子筛；5’：分子筛。
表A
表B
实施例 目标物 原料 碱 有机溶剂 摩尔比 温度 时间
1 （1） （1）a KOH MeOH/甲苯 1:3.7 25 40min
1 （2） （2）a KOH MeOH/甲苯 1:3.7 25 40min
2 （1） （1）a NaOH EtOH/DCM 1:4 10 1h
2 （2） （2）a NaOH EtOH/DCM 1:4 10 1h
3 （1） （1）a 甲醇钠 EtOH/THF 0.2:1 30 12h15 -->
3 （2） （2）a 甲醇钠 EtOH/THF 0.2:1 30 12h
4 （1） （1）a 乙醇钠 EtOH/丙酮 1:2 30 6h
4 （2） （2）a 乙醇钠 EtOH/丙酮 1:2 30 6h
5 （3） （3）a KOH MeOH/甲苯 1:2.4 25 40min
5 （4） （4）a KOH MeOH/甲苯 1:2.4 25 40min
实施例1化合物（1）和化合物（2）的合成
具体实验过程和数据：
步骤（A）：将化合物4a（80mg,0.10mmol）和5a（60mg,0.14mmol）溶于5.0mL新蒸二氯甲烷中，氩气保护下加入2g新活化（在300-800度高温烘烤除水）的分子筛，室温搅拌0.5h。冷却至0℃后，加入新制备的PPh3AuOTf（0.05M溶于DCM,0.2mL），在此温度下搅拌反应1h后，硅藻土过滤，将滤液除去溶剂后柱层析分离纯化（石油醚/乙酸乙酯,2/1），得52mg白色固体（1）a（产率：50%，纯度为99%）和50mg白色固体（2）a（产率：48%，纯度为99%）。
化合物（1）a:[α]D 28=6.4(c1.3,CHCl3);1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.92(qd,J=7.0,1.4Hz,1H),5.41(brs,1H),4.84(d,J=9.6Hz,1H),4.76(d,J=9.2Hz,1H),4.74(d,J=8.8Hz,1H),4.68-4.61(m,2H),4.51(dd,J=9.8,1.4Hz,1H),4.25(brs,1H),3.90-3.76(m,6H),3.58-3.47(m,1H),3.45(s,3H),3.441(s,3H),3.437(s,3H),3.39-3.33(m,2H),3.33(s,3H),3.25-3.12(m,4H),2.41-2.30(m,3H),2.20(s,3H),2.20-1.20(m,30H),1.26-1.18(m,12H),1.06(s,3H),0.98(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ217.0,170.1,167.6,139.0,137.7,128.7,121.9,101.3,99.7,99.6,95.8,85.6,82.6,82.44,82.42,77.7,77.2,76.7,75.8,75.2,70.0,68.5,68.3,68.2,58.3,57.94,57.92,57.1,56.4,53.7,43.0,38.6,37.2,37.0,36.1,35.65,35.58,35.5,35.2,34.3,33.1,29.6,29.4,27.3,26.0,24.3,21.0,19.2,18.2,18.1,17.6,14.4,12.1,9.8.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC56H88O18Na[M+Na]+1071.5863,found1071.5876.
化合物（2）a:[α]D 28=44.1(c1.3,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.93(q,J=6.8Hz,1H),5.37(brs,1H),4.88(d,J=4.0Hz,1H),4.79(d,J=8.8Hz,1H),4.76(d,J=8.8Hz,1H),4.67-4.62(m,2H),4.51(d,J=8.4Hz,1H),4.28-4.17(m,2H),3.91-3.71(m,5H),3.45(s,3H),3.43(s,3H),3.42(s,3H),3.39-3.29(m,6H),3.23(dd,J=9.6,2.4Hz,1H),3.16-3.10(m,1H),2.38-2.26(m,4H),2.20(s,3H),2.20-1.20(m,29H)1.26-1.18(m,12H),1.06(s,3H),0.98(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ216.9,170.1,167.6,139.4,137.7,128.7,121.5,101.3,99.6,99.4,93.8,85.7,82.6,82.3,81.5,77.7,77.2,76.9,75.9,75.5,75.2,69.9,68.4,68.2,62.8,58.3,57.8,57.4,57.1,56.4,53.7,42.9,39.8,37.1,37.0,36.1,35.64,35.56,35.0,34.3,33.0,32.8,29.6,27.4,27.2,26.0,24.3,21.0,19.3,18.14,18.11,17.62,17.60,14.4,12.1,9.8.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC56H88O18Na[M+Na]+1071.5863,found1071.5869.
步骤（B）：将步骤（A）中制得的化合物（1）a（50mg,0.048mmol）溶于甲苯（8.0mL）中，然后加入KOH的甲醇溶液（0.8mL,11mg/mL），室温下反应40min。然后用1MHCl盐酸中和至pH为6～7，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，除去溶剂后柱层析分离纯化（石油醚/乙酸乙酯,2/3），得白色固体（1）（45mg，收率：94%，纯度为99%）。
[α]D 27=6.1(c2.1,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.93(q,J=6.8Hz,1H),5.41(brs,1H),4.84(d,J=8.4Hz,1H),4.76(d,J=7.6Hz,1H),4.74(d,J=8.0Hz,1H),4.64(dd,J=12.0,4.0Hz,1H),4.50(d,J=8.4Hz,1H),4.26(brs,1H),3.92-3.78(m,6H),3.58-3.48(m,1H),3.45(s,3H),3.44(s,3H),3.41(s,3H),3.39(s,3H),3.32-3.10(m,7H),2.59(brs,1H),2.40-2.26(m,3H),2.20(s,3H),2.14-2.09(m,1H),2.09-1.50(m,26H),1.33-1.12(m,12H),1.06(s,3H),0.98(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ217.0,167.6,138.9,137.7,128.7,121.9,101.4,99.7,99.6,95.8,85.6,82.5,82.42,82.38,80.5,77.2,76.9,75.8,75.3,71.5,68.5,68.3,68.2,58.1,58.0,57.9,57.1,56.2,53.7,43.0,38.6,37.2,37.0,35.6,35.5,35.4,35.3,35.2,34.3,33.1,29.6,29.4,27.3,26.0,24.3,19.2,18.2,18.14,18.11,17.9,14.4,12.1,9.8.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H86O17Na[M+Na]+1029.5757,found1029.5758.
步骤（C）：将步骤（A）中制得的化合物（2）a（50mg,0.048mmol）溶于甲苯（8.0mL）中，然后加入KOH的甲醇溶液（0.8mL,11mg/mL），室温下反应40min。然后用1MHCl盐酸中和至pH为6～7，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，除去溶剂后柱层析分离纯化（石油醚/乙酸乙酯,2/3），得白色固体（2）（43mg，收率：89%，纯度为99%）。
[α]D 27=46.7(c2.2,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.93(qd,J=6.8,1.0Hz,1H),5.37(brs,1H),4.88(d,J=3.6Hz,1H),4.79(d,J=8.4Hz,1H),4.76(d,J=9.2Hz,1H),4.64(dd,J=11.6,4.4Hz,2H),4.50(dd,J=6.4,1.2Hz,1H),4.28-4.17(m,2H),3.90-3.72(m,5H),3.444(s,3H),3.435(s,3H),3.42(s,3H),3.39(s,3H),3.33-3.10(m,7H),2.59(brs,1H),2.40-2.25(m,4H),2.20(s,3H),2.20-1.07(m,26H),1.33-1.13(m,12H),1.06(s,3H),0.98(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ217.0,167.6,139.4,137.7,128.7,121.5,101.4,99.6,99.4,93.8,85.7,82.5,82.3,81.5,80.5,77.2,76.9,75.9,75.5,75.3,71.5,68.35,68.25,62.8,58.1,57.8,57.4,57.1,56.2,53.7,42.9,39.8,37.1,37.0,35.6,35.35,35.27,35.1,34.3,33.0,32.8,29.6,27.3,27.2,26.0,24.3,19.3,18.2,18.1,18.0,17.6,14.4,12.1,9.8.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H86O17Na[M+Na]+1029.5757,found1029.5767.
实施例2化合物（1）和化合物（2）的合成
按照实施例1相同的方法和操作，具体的反应条件参见表A和表B。
按照实施例1中的步骤（A）的操作，制得化合物（1）a和（2）a；按照实施例1步骤（B）由（1）a制得化合物（1）；按照实施例1步骤（C）由（2）a制得化合物（2）；其中，（1）a、（1）a、（1）和（2）的核磁数据同实施例1。
实施例3化合物（1）和化合物（2）的合成
按照实施例相同的方法和操作，具体的反应条件参见表A。
按照实施例1中的步骤（A）的操作，制得化合物（1）a和（2）a；按照实施例1步骤（B）由（1）a制得化合物（1）；按照实施例1步骤（C）由（2）a制得化合物（2）；其中，（1）a、（1）a、（1）和（2）的核磁数据同实施例1。
实施例4化合物（1）和化合物（2）的合成
按照实施例1相同的方法和操作，具体的反应条件参见表A和表B。
按照实施例1中的步骤（A）的操作，制得化合物（1）a和（2）a；按照实施例1步骤（B）由（1）a制得化合物（1）；按照实施例1步骤（C）由（2）a制得化合物（2）；其中，（1）a、（1）a、（1）和（2）的核磁数据同实施例1。
实施例5化合物（3）和化合物（4）的合成
具体实验过程和数据：
步骤（D）：将化合物5b（1.20g,2.64mmol）和4a（2.07g,2.57mmol）溶于60mL新蒸二氯甲烷中，氩气保护下加入200mg新活化的分子筛，室温搅拌0.5h。冷却至0℃后加入新制备的PPh3AuOTf（0.7mL,0.25MinCH2Cl2），在此温度下搅拌反应1h。硅藻土过滤，将滤液除去溶剂后柱层析分离纯化（石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯,5/1/3），得到1.32g白色固体3（a）（产率：48%）和1.37g白色固体（4）a（产率：49%，纯度为99%）。
化合物3（a）:[α]D 28=8.4(c1.0,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J=7.2Hz,2H),7.62(t,J=7.4Hz,1H),7.49(d,J=7.8Hz,2H),5.43(d,J=3.2Hz,1H),4.88-4.82(m,2H),4.75(t,J=8.4Hz,2H),4.65(t,J=9.4Hz,1H),4.51(dd,J=9.8,1.4Hz,1H),4.32(brs,1H),3.92-3.76(m,6H),3.60-3.50(m,1H),3.450(s,3H),3.445(s,3H),3.437(s,3H),3.39-3.33(m,2H),3.326(s,3H),3.21-3.19(m,4H),2.42-2.32(m,3H),2.17(s,3H),2.10(s,3H),1.16(s,3H),2.20-1.07(m,24H),1.00(s,3H).
13CNMR(125MHz,CDCl3)δ216.9,170.1,166.2,139.0,133.3,130.1,129.5,128.6,121.9,101.4,99.7,99.6,95.9,85.7,82.6,82.5,82.4,77.7,77.4,77.2,77.0,76.6,75.2,70.0,68.5,68.3,68.2,58.3,58.0,57.9,57.2,56.4,53.7,43.0,38.6,37.2,37.0,36.1,35.7,35.6,35.5,35.2,34.4,33.1,29.4,27.3,26.1,24.4,21.0,19.3,18.18,18.15,17.6,9.9.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC58H86O18Na[M+Na]+1093.5706,found1093.5679.
化合物（4）a:[α]D 27=37.6(c1.0,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(d,J=7.6Hz,2H),7.60(t,J=6.8Hz,1H),7.48(d,J=7.6Hz,2H),5.40-5.36(m,1H),4.86(d,J=2.4Hz,1H),4.84(dd,J=12.4,4.4Hz,1H),4.78(dd,J=9.6,1.6Hz,1H),4.75(dd,J=9.2,1.6Hz,1H),4.64(t,J=9.6Hz,1H),4.50(dd,J=9.6,1.6Hz,1H),4.26-4.17(m,2H),3.88-3.71(m,5H),3.44(s,3H),3.42(s,3H),3.40(s,3H),3.37-3.29(m,6H),3.24-3.17(m,3H),2.37-2.29(m,4H),2.20-1.07(m,23H),2.15(s,3H),2.08(s,3H),1.17(s,3H),0.98(s,3H).
13CNMR(125MHz,CDCl3)δ216.9,170.2,166.2,139.5,133.3,130.2,129.5,128.6,121.5,101.4,99.6,99.4,93.9,85.7,82.6,82.3,81.6,77.7,77.0,76.7,75.6,75.5,75.3,70.0,68.4,68.2,62.9,58.3,57.8,57.4,57.2,56.4,53.8,43.0,39.8,37.12,37.07,36.1,35.7,35.6,35.1,34.4,33.1,32.8,27.4,27.3,26.2,24.4,21.0,19.3,18.18,18.15,17.7,10.0.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC58H86O18Na[M+Na]+1093.5706,found1093.5704.
步骤（E）：将步骤（D）中制得的化合物（3）a（1.32g,1.23mmol）溶于甲苯（150.0mL）中，然后加入KOH的甲醇溶液（15.0mL,11mg/mLinMeOH），室温下反应40min。然后用1MHCl盐酸中和至pH为6～7，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤,除去溶剂后柱层析分离纯化（石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯,4/2/3），得到1.14g白色固体（3），产率：90%，纯度为99%。
[α]D 28=10.5(c1.0,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J=8.4Hz,2H),7.62(t,J=7.2Hz,1H),7.49(d,J=7.6Hz,2H),5.45-5.41(m,1H),4.88-4.82(m,2H),4.78-4.72(m,2H),4.50(dd,J=9.6,2.0Hz,1H),4.32(brs,1H),3.90-3.78(m,6H),3.60-3.50(m,1H),3.445(s,6H),3.439(s,3H),3.39(s,3H),3.32-3.10(m,7H),2.50(brs,1H),2.42-2.32(m,3H),2.19-2.07(m,33H),2.17(s,3H),1.18(s,3H),1.00(s,3H).
13CNMR(125MHz,CDCl3)δ216.9,166.2,139.0,133.3,130.1,129.5,128.6,121.9,101.4,99.7,99.6,95.9,85.7,82.6,82.5,82.4,80.6,77.4,77.2,77.0,76.9,76.6,75.4,71.5,68.5,68.4,68.3,58.1,58.01,57.95,57.2,56.3,53.8,43.1,38.6,37.2,37.1,35.7,35.5,35.4,35.3,34.4,33.2,29.4,27.3,26.1,24.4,19.3,18.23,18.19,18.16,18.0,10.0.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC56H84O17Na[M+Na]+1051.5600,found1051.5613.
步骤（F）：将步骤（D）中制得的化合物（4）a（1.37g,1.28mmol）溶于甲苯（150.0mL）中，然后加入KOH的甲醇溶液（15.0mL,11mg/mLinMeOH），室温下反应40min。然后用1MHCl盐酸中和至pH为6～7，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，除去溶剂后柱层析分离纯化（石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯,4/2/3），得到1.17g白色固体（4），产率：89%，纯度为99%。
[α]D 27=39.0(c1.0,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(d,J=7.6Hz,2H),7.60(t,J=7.6Hz,1H),7.48(d,J=7.6Hz,2H),5.40-5.36(m,1H),4.87(d,J=3.2Hz,1H),4.84(dd,J=12.0,4.4Hz,1H),4.80-4.72(m,2H),4.49(dd,J=9.4,1.8Hz,1H),4.30-4.17(m,2H),3.88-3.77(m,4H),3.76-3.72(m,1H),3.433(s,3H),3.425(s,3H),3.40(s,3H),3.38(s,3H),3.32-3.08(m,7H),2.47(brs,1H),2.35-2.28(m,4H),2.17-1.07(m,33H),2.15(s,3H),1.17(s,3H),0.98(s,3H).
13CNMR(125MHz,CDCl3)δ216.9,166.2,139.5,133.3,130.2,129.5,128.6,121.5,101.4,99.6,99.5,93.9,85.7,82.6,82.4,81.6,80.6,77.2,76.98,76.97,75.6,75.5,75.4,71.5,68.4,68.3,62.9,58.1,57.9,57.4,57.3,56.3,53.8,43.0,39.8,37.12,37.08,35.7,35.4,35.3,35.1,34.4,33.1,32.9,27.4,27.3,26.2,24.4,19.3,18.2,18.1,18.0,17.6,10.0.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC56H84O17Na[M+Na]+1051.5600,found1051.5608.
实施例6化合物（3）和化合物（4）的合成
按照实施例相同的方法和操作，具体的反应条件参见表A和表B。
按照实施例5中的步骤（D）的操作，制得化合物（3）a和（4）a；按照实施例5中步骤（E）由（3）a制得化合物（3）；按照实施例5中步骤（F）由（4）a制得化合物（4）；其中，（3）a、（4）a、（3）和（4）的核磁数据同实施例5。
实施例7化合物（5）和化合物（6）的合成
具体实验过程和数据：
步骤（G）：将实施例1中制得的化合物（1）（17.8mg,0.017mmol）溶于MeOH/H2O（4.0mL/1.0mL）混合溶剂中，然后加入NaOH（2.7mg,0.068mmol），室温下反应5h。然后用1MHCl盐酸中和至pH为6～7，二氯甲烷萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，除去溶剂后柱层析分离纯化（石油醚/乙酸乙酯,1/1），得到5.5mg白色固体（5）（产率：34%，纯度为99%）和10.0mg白色固体（6）（产率：61%，纯度为99%）。
化合物（5）:1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.44-5.38(m,1H),4.84(d,J=8.4Hz,1H),4.76(d,J=8.0Hz,1H),4.74(d,J=8.0Hz,2H),4.50(dd,J=9.6,1.6Hz,1H),4.36(brs,1H),3.89-3.78(m,6H),3.61(t,J=7.0Hz,1H),3.45(s,3H),3.44(s,6H),3.39(s,3H),3.59-3.10(m,7H),2.45(brs,1H),2.42-1.07(m,37H),2.27(s,3H),0.99(s,3H),0.92(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ218.1,138.9,122.1,101.4,99.7,99.6,95.9,85.6,82.6,82.5,80.6,77.5,77.2,75.4,73.5,71.5,68.5,68.4,68.3,58.1,58.0,57.9,56.9,56.3,55.0,43.4,38.6,37.3,36.9,35.7,35.5,35.4,35.3,34.5,33.1,29.9,29.7,29.5,27.4,24.4,19.3,18.24,18.19,18.0,8.2.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC49H80O16Na[M+Na]+947.5339,found947.5340.
化合物（6）:[α]D 27=21.7(c1.1,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.42-5.37(m,1H),4.84(dd,J=8.0,1.6Hz,1H),4.78-4.72(m,2H),4.50(dd,J=9.6,1.6Hz,1H),3.91-3.78(m,6H),3.61(m,1H),3.60-3.50(m,1H),3.444(s,6H),3.439(s,3H),3.39(s,3H),3.28-3.09(m,7H),2.48(brs,1H),2.40-2.31(m,2H),2.26(s,3H),2.25-1.09(m,36H),1.17(s,3H),0.98(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ214.5,139.9,121.0,101.4,99.71,99.65,96.0,86.9,82.6,82.4,80.6,77.5,77.2,75.4,71.5,68.5,68.4,68.3,68.2,60.4,58.1,58.02,57.99,56.3,55.2,43.1,38.7,37.1,37.0,36.9,35.6,35.4,35.3,31.8,31.2,29.5,26.4,22.3,19.4,18.22,18.18,18.0,11.6.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC49H80O16Na[M+Na]+947.5339,found947.5335.
实施例8化合物（7）和化合物（8）的合成
具体实验过程参考实施例1，其他反应具体条件参见表A和表B。
（7）a（产率：53%，纯度为98%）；（8）a（产率：46%，纯度为99%）。得白色固体（7）（43mg，收率：89%，纯度为99%）。
化合物（7）：[α]D 27=11.2(c0.15,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.92(m,1H),4.77(d,J=8.8Hz,1H),4.75(d,J=10.0Hz,1H),4.68(d,J=9.6Hz,1H),4.61(d,J=9.2Hz,1H),4.18(brs,1H),4.00(brs,1H),3.89-3.78(m,6H),3.45(s,3H),3.44(s,3H),3.43(s,3H),3.39(s,3H),3.33-3.08(m,7H),2.42(d,J=1.7Hz,1H),2.38-2.32(m,1H),2.20-1.15(m,48H),1.03(s,3H),0.93(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ217.0,167.7,137.7,128.7,99.6,99.4,95.8,85.5,82.4,76.6,72.8,72.4,70.7,68.5,68.4,58.0,57.9,57.2,57.1,54.0,39.4,36.4,35.6,35.3,35.2,33.9,33.7,33.1,32.2,30.3,30.1,26.60,26.55,26.1,24.7,23.6,21.7,18.3,18.2,18.1,14.5,12.1,10.0.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H88O17Na[M+Na]+1031.5914,found1031.5909.
（8）（收率：89%，纯度为99%）。
化合物（8）：[α]D 27=51.2(c0.15,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.92(m,1H),4.77(d,J=3.6Hz,1H),4.75(d,J=10.0Hz,1H),4.68(d,J=9.6Hz,1H),4.61(d,J=9.2Hz,1H),4.18(m,2H),4.00(brs,1H),3.89-3.61(m,5H),3.44(s,6H),3.43(s,3H),3.26-3.17(m,3H),3.10(m,1H),2.27-1.33(m,35H),1.27(d,J=6.4Hz,3H),1.21(m,6H),1.03(s,3H),0.93(s,3H).
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H88O17Na[M+Na]+1031.5914,found1031.5909.
实施例9化合物（7）和化合物（8）的合成
按照实施例1相同的方法和操作，具体的反应条件参见表A和表B。
按照实施例1中的步骤（A）的操作，制得化合物（7）a和（8）a；按照实施例1中步骤（B）由（7）a制得化合物（7）；按照实施例1中步骤（C）由（8）a制得化合物（8）；其中，（7）a、（8）a、（7）和（8）的核磁数据同实施例8。
实施例10化合物（7）和化合物（8）的合成
按照实施例相同的方法和操作，具体的反应条件参见表A和表B。
按照实施例1中的步骤（A）的操作，制得化合物（7）a和（8）a；按照实施例1中步骤（B）由（7）a制得化合物（7）；按照实施例1中步骤（C）由（8）a制得化合物（8）；其中，（7）a、（8）a、（7）和（8）的核磁数据同实施例8。
实施例11化合物（9）和化合物（10）的合成
具体实验操作和反应条件同实施例1，其他反应条件参见表A和表B。
化合物（9）产率：95%。[α]D 26=4.7(c0.5,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.87(d,J=4.0Hz,1H),4.77(t,J=8.4Hz,2H),4.54(dd,J=11.6,4.0Hz,1H),4.50(d,J=10.4Hz,1H),4.27-4.18(m,1H),3.90-3.78(m,5H),3.76-3.72(m,1H),3.44(s,3H),3.4.3(s,3H),3.41(s,3H),3.39(s,3H),3.34-3.02(m,7H),2.46(brs,1H),2.45-2.39(m,1H),2.36-2.31(m,1H),2.20(s,3H),0.99(s,3H),0.78(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ217.0,176.4,101.4,99.7,99.4,93.9,85.3,82.6,82.4,81.6,80.6,77.2,75.9,75.5,75.4,75.1,71.6,68.4,68.3,62.5,58.1,57.8,57.5,57.1,56.3,53.8,46.0,44.8,41.7,41.5,39.2,37.0,35.9,35.8,35.4,35.3,35.1,33.8,33.1,33.03,32.97,28.4,27.7,27.2,26.8,26.7,26.1,24.8,18.23,18.16,18.0,17.6,16.9,16.7,12.1,11.8,11.7,9.8.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H90O17Na[M+Na]+1033.6070,found1033.6087.
化合物（10）；产率：91%。[α]D 26=47.8(c0.5,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.86(d,J=4.0Hz,1H),4.76(t,J=8.2Hz,2H),4.54(dd,J=11.6,4.1Hz,1H),4.50(d,J=10.3Hz,1H),4.27-4.18(m,2H),3.90-3.78(m,4H),3.76-3.72(m,1H),3.45(s,3H),3.42(s,3H),3.41(s,3H),3.39(s,3H),3.33-3.01(m,7H),2.46(brs,1H),2.45-2.38(m,1H),2.36-2.31(m,1H),2.20(s,3H),0.97(s,3H),0.78(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ217.2,176.3,101.3,99.7,99.4,93.9,85.3,82.6,82.4,81.6,80.6,77.2,75.9,75.6,75.4,75.1,71.5,68.4,68.3,62.9,58.1,57.9,57.5,57.1,56.3,53.8,46.0,44.8,41.7,41.5,39.2,37.0,35.9,35.7,35.4,35.3,35.2,33.8,33.1,33.03,32.97,28.4,27.7,27.2,26.8,26.7,26.1,24.8,18.23,18.16,18.2,17.8,16.9,16.7,12.2,11.9,11.7,9.8.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H90O17Na[M+Na]+1033.6070,found1033.6087.
实施例6化合物（11）的合成
具体步骤：
将化合物（1）(13mg,0.013mmol)溶于甲醇/乙酸乙酯(3mL/2mL)混合溶剂中，然后加入20%Pd(OH)2/C(150mg)，常压条件下，H2还原。室温下反应24h，硅藻土过滤，除去溶剂后得到12.9mg白色固体（11），产率：98%。[α]D 26=5.7(c0.5,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.87(d,J=8.0Hz,1H),4.77(t,J=8.4Hz,2H),4.54(dd,J=11.6,4.0Hz,1H),4.50(d,J=10.4Hz,1H),4.27-4.18(m,1H),3.90-3.78(m,5H),3.76-3.72(m,1H),3.44(s,3H),3.4.3(s,3H),3.41(s,3H),3.39(s,3H),3.34-3.02(m,7H),2.46(brs,1H),2.45-2.39(m,1H),2.36-2.31(m,1H),2.20(s,3H),0.99(s,3H),0.78(s,3H).
13CNMR(100MHz,CDCl3)δ217.0,176.4,101.4,99.7,99.4,93.9,85.3,82.6,82.4,81.6,80.6,77.2,75.9,75.6,75.4,75.1,71.5,68.4,68.3,62.9,58.1,57.9,57.5,57.1,56.3,53.8,46.0,44.8,41.7,41.5,39.2,37.0,35.9,35.8,35.4,35.3,35.1,33.8,33.1,33.03,32.97,28.4,27.7,27.2,26.8,26.7,26.1,24.8,18.23,18.16,18.0,17.6,16.9,16.7,12.1,11.8,11.7,9.8.
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H90O17Na[M+Na]+1033.6076,found1033.6087.
实施例7化合物（12）的合成
将化合物（2）(15mg,0.015mmol)溶于甲醇/乙酸乙酯(3mL/2mL)混合溶剂中，然后加入20%Pd(OH)2/C(150mg)，常压条件下，H2还原。室温下反应24h，硅藻土过滤，除去溶剂后得到14.9mg白色固体（2），产率：99%。
[α]D 26=48.7(c0.5,CHCl3).
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.87(d,J=4.0Hz,1H),4.77(t,J=8.4Hz,2H),4.54(dd,J=11.6,4.0Hz,1H),4.50(d,J=10.4Hz,1H),4.27-4.18(m,2H),3.90-3.78(m,4H),3.76-3.72(m,1H),3.44(s,3H),3.4.3(s,3H),3.41(s,3H),3.39(s,3H),3.34-3.02(m,7H),2.46(brs,1H),2.45-2.39(m,1H),2.36-2.31(m,1H),2.20(s,3H),0.99(s,3H),0.78(s,3H).
HRMS(MALDI)m/zcalcdC54H90O17Na[M+Na]+1033.6070,found1033.6087.
效果实施例中的原料来源信息如下表所示：
效果实施例1果同尼皂苷F（GordonosideF）提高GPR119介导的报告基因表达实验
将稳定表达GPR119受体和pCRE-luc报告基因的HEK293细胞株（HEK293/GPR119/pCRE-luc，实验室自行构建，简单步骤如下：将GPR19表达载体和CRE-luc报告基因表达载体通过电转方式导入到HEK93细胞中。利用抗生素杀死没有转染上述表达载体的细胞，具有抗性的细胞则会以克隆形式生长。挑选这些具有抗性的克隆独立培养，最后获得稳定表达GPR119和pCRE-luc报告基因的HEK93细胞株）按1×104个细胞/孔细胞密度接种至96孔板，在含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基中在37C、5%CO2条件下培养16小时。然后加入10μL含不同浓度（0-100μM）的GordonosideF，AR231453（阳性对照），PSN632408（阳性对照）或1%DMSO（阴性对照），在细胞培养箱37C、5%CO2条件下继续培养24小时。然后每孔吸去50μL培养基，加入50μL荧光素酶活性检测试剂，振荡5min。最后每孔吸取80μL上述混合物，转移到新的96孔板，在Envision2101多功能微孔板酶标仪检测化学发光计数值。
实验结果如图1所示：在HEK293/GPR119/pCRE-luc细胞系中，GordonosideF通过激活GPR119提高细胞内的荧光素酶的表达，并且其活性呈剂量依赖关系，其EC50值为0.23μM，而阳性化合物PSN632408和AR231453的EC50值分别为0.61μM和0.94nM。上述结果说明GordonosideF是GPR119受体的激动剂。
效果实施例2果同尼皂苷F（GordonosideF）通过激活GPR119提高细胞内环磷酸腺苷3'-5'-环磷酸腺苷(cAMP)的累积实验
为了进一步验证GordonosideF的GPR119激动活性,利用HEK293/GPR119细胞系（实验室自行构建）进行cAMP实验。具体操作为：在HEK293/GPR119细胞系中加入3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）（终浓度为0.5mM），按4×103个细胞/孔/5μL细胞密度接种至384孔板，然后加入5μL含不同浓度（0-100μM）的GordonosideF，AR231453（阳性对照），PSN632408（阳性对照）或1%DMSO（阴性对照），混合均匀，室温避光孵育30min。然后分别加入稀释好的5μLcAMP-d2和5μLanti-cAMP-Cryptate（试剂盒的来源：试剂盒购Cisbio(HTRFDynamic2cAMPkit,cat.no.62AM4PEJ)），离心混合均匀。室温避光反应1小时。最后在Envision2101多功能微孔板酶标仪（PerkinElmer）读数。
实验结果如图2所示：GordonosideF在表达GPR119的HEK293细胞中能够提高细胞内cAMP的累积，其活性呈剂量依赖关系，EC50值为0.76μM。阳性化合物PSN632408和AR231453的EC50值分别为0.69μM和0.99nM。结果进一步说明GordonosideF是GPR119受体的激动剂。
效果实施例3GordonosideF通过激活GPR119介导细胞质内钙离子浓度升高实验
为了进一步验证GordonosideF的GPR119激动活性，利用GPR119/Gα16/HEK293稳转细胞系并通过钙流实验进行验证。具体操作为：将稳定表达GPR119和Gα16的HEK293细胞株接种在96孔板里，培养24小时后，将细胞与2μMfluo4-AM（购自Invitrogen）染料在37℃孵育45分钟，移去染料，加入25μL的HBSS（5.4mMKCl,0.3mMNa2HPO4,0.4mMKH2PO4,4.2mMNaHCO3,1.3mMCaCl2,0.5mMMgCl2,0.6mMMgSO4,137mMNaCl,5.6mMD-glucose,和250μMsulfinpyrazone），室温孵育10min，然后用FlexStation3微孔板检测仪（MolecularDevices）加入25μL含不同浓度的GordonosideF，AR231453（阳性对照），PSN632408（阳性对照）或1%DMSO（阴性对照）的HBSS进行刺激，同时用485nm的光激发并于525nm波段检测细胞内钙离子浓度变化引起的染料荧光强度的变化。
实验结果如图3所示：GordonosideF在表达GPR119的HEK293细胞中能够提高细胞内的钙离子浓度，其活性呈剂量依赖关系，EC50值为4.3μM。阳性化合物PSN632408和AR231453的EC50值分别为4.7μM和0.28μM。结果进一步说明GordonosideF是GPR119受体的激动剂。
效果实施例4GordonosideF通过激活GPR119导致胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化实验
GPCR常常通过MAPK信号转导通路的三级激酶级联反应将细胞外刺激转导至细胞内并完成相应的生物学效应。细胞外调节蛋白激酶（extracellularregulatedproteinkinases,ERK）包括ERK1和ERK2，其为将信号从表面受体传导至细胞内的关键激酶。磷酸化激活的ERK1/2由胞质转位到核内，进而介导Elk-1、ATF、NF-κB、Ap-1、c-fos和c-Jun等的转录活化，从而参与细胞增殖与分化、细胞形态维持、细胞骨架的构建、细胞凋亡和细胞的恶变等多种生物学反应。为了研究GPR119受体活化后所引起的ERK激活情况，首先将人源GPR119或空载体瞬转至HEK293细胞，在37C、5%CO2条件下培养24小时。实验前，将培养液换为无血清培养液，使细胞饥饿两个小时，然后在37℃条件用10μMGordonosideF分别刺激0min、2min、5min、10min、30min、60min、120min。以PMA（1μM），AR321453（1μM），PSN632408（10μM）为阳性对照，DMSO（0.1%）为阴性对照。刺激后立即将细胞置于冰上，并用1×SDS裂解液收集样品并经超声裂解。最后用Westernblot检测样品中的ERK表达及磷酸化（p-ERK）情况。
实验结果表明，在表达GPR119的HEK293细胞中，PMA（1μM），AR321453（1μM），PSN632408（10μM）等阳性对照均能导致p-ERK的增加。而用10μMGordonosideF刺激后，p-ERK也有明显增加，此现象在刺激后2min、5min和10min后最为明显，并呈时间依赖性，具体如图4所示。而在不表达GPR119（转染空载体）的HEK293细胞中，除了PMA（佛波酯），其余化合物均不能导致ERK磷酸化，具体如图5所示。PMA是PKC的激动剂，其对ERK的激活不依赖于GPR119。图4和图5的实验数据结果显示GordonosideF能够通过GPR119激活ERK，进一步说明GordonosideF是GPR119受体的选择性激动剂。
效果实施例5果同尼皂苷F受体选择性实验
为了进一步验证GordonosideF是否可以激活其他G蛋白偶联受体，利用钙流实验进行验证。具体操作为：将稳定表达各种G蛋白偶联受体（包括GPR119、GPR40、GPR41、GPR43、GPR120、CB1、CB2、DRD1、DRD2、DP2、EP2、EP4、S1P1、AGTR1、GLP-1R、GCGR、α1AAR、α1BAR、β2AR、DOR、KOR、MOR、CCR2、CCR5、CCR7、CXCR2、CXCR4和CXCR6）和Gα16的HEK293或者CHO细胞株接种在96孔板里，培养24小时后，将细胞与2μMfluo4-AM染料在37℃孵育45分钟，移去染料，加入25μL的HBSS，室温孵育10min，然后再用含不同浓度的果同尼皂苷F以及相应受体的含不同浓度的配体作为阳性对照，即AR231453、PSN632408、亚油酸（LinoleicAcid）、丙酸钠（SodiumPropionate）、亚麻酸（LinolenicAcid）、CP55940、多巴胺（Dopamine）、PGD2、PGE2、S1P、血管紧张素II（AngiotensinII）、GLP1、胰高血糖素（Glucagon）、苯肾上腺素（Phenylephrine）、NECA、异丙肾上腺素（Isoproterenol）、DPDPE、U50488、DAGO、MCP-1、RANTES、CCL19、IL-8、SDF-1、CXCL16等进行刺激，记录钙信号。用FlexStation3微孔板检测仪（MolecularDevices）读数。检测仪在指定时间点，可自动将25μL激动剂加入到反应体系中，同时用485nm的光激发并于525nm波段检测细胞内钙离子浓度变化引起的染料荧光强度的变化。
实验结果如表1所示，果同尼皂苷F对GPR40、GPR41、GPR43、GPR120、CB1、CB2、DRD1、DRD2、DP2、EP2、EP4、S1P1、AGTR1、GLP-1R、GCGR、α1AAR、α1BAR、β2AR、DOR、KOR、MOR、CCR2、CCR5、CCR7、CXCR2、CXCR4和CXCR6等G蛋白偶联受体都没有反应，这也进一步说明果同尼皂苷F是一个高度选择性的GPR119激动剂。
表1
效果实施例6果同尼皂苷F体外胰岛素分泌实验
GPR119是一种在α-细胞中高度表达的促胰岛素受体。接下来验证GordonosideF是否对离体小鼠胰岛细胞的葡萄糖刺激胰岛素释放有影响。实验前，所有胰岛均在37℃、5%CO2培养箱中孵育60min，使胰岛适应实验用培养基的改变。显微镜下仔细选取包膜完整、形态正常的、大小差不多的胰岛用于功能检测。24孔培养板中每孔加入1mLRPMI1640培养液、5个胰岛和不同浓度的葡萄糖和受试化合物，分为低糖（葡萄糖2.8mM）、高糖（葡萄糖16.8mM），即低糖+0.1%DMSO，低糖+100nMGLP-1,低糖+500nMAR231453，低糖+果同尼皂苷F（1μM,3μM和10μM）；高糖+0.1%DMSO，高糖+100nMGLP-1，高糖+500nMAR231453，高糖+果同尼皂苷F（1μM,3μM和10μM），每组至少3孔。作用60min后吸取上清检测胰岛素水平。数据用GraphPadPrism软件分析处理。数据表示为平均值±标准误差，统计学差异分析用史蒂顿特氏t检验分析。p<0.05为有统计学意义。本发明的附图中，*表示P<0.05,**表示P<0.01,***表示P<0.001。
小鼠体外胰岛素释放实验结果如图6所示，与低糖组（2.8mM）相比，高糖组（16.8mM）胰岛素释放量明显增加。与阴性对照相比，果同尼皂苷F在高糖（16.8mM）条件下能够明显刺激胰岛素释放，而且具有统计学差异，其中AR231453和GLP1作为阳性对照。但在GPR119敲除小鼠中，果同尼皂苷F在高糖（16.8mM）条件下不能刺激胰岛素释放，而GLP1在野生型和GPR119敲除小鼠中都能够刺激胰岛素分泌。这些结果表明，果同尼皂苷F确实通过GPR119来调节胰岛素分泌，而且所有小鼠胰岛都具有葡萄糖刺激胰岛素释放功能。
效果实施例7果同尼皂苷F衍生物激活GPR119受体的实验
为了验证果同尼皂苷F衍生物是否能激活GPR119，利用cAMP实验（方法见效果实施例3）和钙流实验（方法见效果实施例4）进行验证。数据用GraphPadPrism软件分析处理。非线性回归分析产生剂量依赖曲线并计算半数激动浓度（EC50）。数据来自三次独立实验，每次实验三复孔，表示为平均值±标准误差。通过cAMP实验和钙流实验测试上述化合物对GPR119的激动活性，所得结果列于表2。其中，化合物（1）～（4）对GPR119受体有良好的激动活性。
表2
效果实施例8化合物（3）（Gordonoside1）受体选择性实验
通过效果实施例7结果表明，与同尼皂苷F（GordonosideF）相比，化合物（3）具有更好的GPR119激动活性，因此利用钙流实验进行验证化合物（3）是否对其他GPCR受体具有选择特异性，方法见效果实施例5。
结果如表1所示，化合物（3）对GPR40、GPR41、GPR43、GPR120、CB1、CB2、DRD1、DRD2、DP2、EP2、EP4、S1P1、AGTR1、GLP-1R、GCGR、α1AAR、α1BAR、β2AR、DOR、KOR、MOR、CCR2、CCR5、CCR7、CXCR2、CXCR4和CXCR6等G蛋白偶联受体都没有反应，这也进一步说明化合物（3）是一个高度选择性的GPR119激动剂。
效果实施例9化合物（3）体外胰岛素分泌实验
化合物（3）是一个高度选择性的GPR119激动剂。因此，验证化合物（3）是否也能通过GPR119介导胰岛素分泌，方法见效果实施例6。
小鼠体外胰岛素释放实验结果如图7所示：与低糖组（2.8mM）相比，高糖组（16.8mM）胰岛素释放量明显增加。与阴性对照相比，化合物（3）在高糖（16.8mM）条件下能够明显刺激胰岛素释放，而且具有统计学差异，其中AR231453和GLP1作为阳性对照。但在GPR119敲除小鼠中，化合物（3）在高糖（16.8mM）条件下不能刺激胰岛素释放，而GLP1在野生型和GPR119敲除小鼠中都能够刺激胰岛素分泌。这些结果表明，化合物（3）确实通过GPR119来调节胰岛素分泌，而且所有小鼠胰岛都具有葡萄糖刺激胰岛素释放功能。
效果实施例10化合物（3）通过GPR119改善口服葡萄糖耐量的实验
为了进一步探索GPR119的体内功能，因此评估了化合物（3）对小鼠体内的胰岛素，GLP-1水平和葡萄糖稳态的变化情况的影响。
具体操作：分别对野生型和敲除GPR119小鼠进行随机分组，每组8只。小鼠饥饿过夜，分三组口服给药，1×PBS作为阴性对照，20mg/kgAR231453作为阳性对照，200mg/kg化合物（3）作为实验组。给药30分钟后，测量血糖并记录结果。然后立即口服2g/kg葡萄糖。分别在15min、30min、60min、90min和120min时测试血糖水平并记录结果。数据用GraphPadPrism软件分析处理。数据表示为平均值±标准误差，统计学差异分析用史蒂顿特氏t检验分析。p<0.05为有统计学意义。
小鼠口服糖耐量实验结果如图8和图9所示：口服葡萄糖10min后的血样中，200mg/kg的化合物（3）实验组明显提高野生型小鼠体内胰岛素和GLP-1水平，而对GPR119敲除小鼠则没有作用。图10、图10-1和图11和图11-1表明：在小鼠口服葡萄糖耐量试验中，200mg/kg的化合物（3）实验组明显能够改善野生型小鼠的糖耐量，但不能改善GPR119敲除小鼠。图10、图10-1、图11和图11-1的数据说明：化合物（3）的作用主要是通过加强β-细胞的葡萄糖依赖性胰岛素释放和小鼠肠道细胞的GLP-1释放来调节葡萄糖含量，而且化合物（3）的这些功是通过GPR119来进行调节的。
效果实施例11化合物（3）通过GPR119抑制小鼠食欲的实验
在南非沙漠的火地亚（HoodiaGordonii）植物提取物能抑制食欲，是目前广泛使用的一种减肥产品，因此我们进一步验证了化合物（3）是否通过GPR119抑制小鼠食欲。
具体操作：分别对野生型和敲除GPR119小鼠进行随机分组，每组8只。小鼠饥饿过夜，分三组口服给药，1×PBS作为阴性对照，100mg/kg化合物（3）和200mg/kg化合物（3）作为实验组。给药后给与饲料，分别在0、2h、4h、8h和24h时间点称量饲料重量并记录结果。数据用GraphPadPrism软件分析处理。数据表示为平均值±标准误差，统计学差异分析用史蒂顿特氏t检验分析。p<0.05为有统计学意义。
小鼠急性摄食量实验结果如图12～图14所示：其中，图12表明：在C57BL/6小鼠中，200mg/kg化合物（3）实验组食物摄入量明显减少相对于阴性对照组，尤其在4h和8h时间点具有统计学意义。而100mg/kg化合物（3）实验组食物摄入量也产生了食物摄入量减少，但这种差异无统计学意义。图13表明：在野生型小鼠中，200mg/kg化合物（3）实验组食物摄入量明显减少相对于阴性对照组，在4h、8h和24h时间点具有明显统计学意义。图14表明：在GPR119敲除小鼠中，化合物（3）不能抑制小鼠食欲。因此，上述实验结果表明，化合物（3）可以通过GPR119抑制小鼠食欲。

Claims (9)

1.一种如式I所示的果同尼皂苷F衍生物：
其中，R为甲基；R1为苯甲酰基；R2、R3、R4和R5为甲基；R7为H；3-位的糖苷键为β构型；5位和6位碳原子通过双键连接；所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物为下列化合物：
2.一种果同尼皂苷F衍生物的制备方法，其特征在于包含下列步骤：有机溶剂中，在碱的作用下，将R7为酰基保护的如式I’所示的化合物进行如下所示的脱保护反应，制得R7为脱去酰基保护基的如式I所示的化合物；
其中R7为酰基；R、R1、R2、R3、R4和R5的定义如权利要求1所述。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的脱保护反应中，所述的有机溶剂为芳烃类溶剂、卤代烃类溶剂、酮类溶剂、醇类溶剂和醚类溶剂中的一种或多种；所述的碱为无机碱；所述的碱与R7为酰基保护的如式I’所示的化合物的摩尔比值为0.2～3；所述的脱保护基反应的温度为10℃～30℃。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包含下列步骤：
(1)有机溶剂中，惰性气体的保护下，在路易斯酸的作用下，将如式IV所示的化合物和如式V所示的化合物进行如下所示的糖苷化反应，制得R7为酰基保护的如式I’所示的化合物；
(2)有机溶剂中，在碱的作用下，将R7为酰基保护的如式I’所示的化合物进行如下所示的脱保护反应，制得如式I所示的化合物；
其中，R、R1、R2、R3、R4、R5和R7的定义如权利要求2所述；R8为氢、取代或未取代的C1～C10的烷基、取代或未取代的C3～C10的环烷基，或者取代或未取代的C6～C10的芳基；R8中，所述的取代是指被下列一个或多个取代基取代：C1～C4的烷基、C1～C4的烷氧基或硝基；步骤(2)中，所述的脱保护反应的方法的条件如权利要求2所述。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的糖苷化反应的方法和条件包含下列步骤：有机溶剂中，在路易斯酸的作用下，惰性气体保护下，将如式IV所示的化合物、干燥剂和如式V所示的化合物混合，进行反应，制得R7为酰基保护的如式I’所示的化合物。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的干燥剂为分子筛、分子筛、分子筛、酸洗的分子筛、酸洗的分子筛、酸洗的分子筛、无水硫酸钠、无水硫酸钙、无水硫酸铜和无水硫酸镁中的一种或多种；所述的干燥剂与如式V所示的化合物的质量比值为1.0～4.0；所述的有机溶剂为卤代烃类溶剂、腈类溶剂、酯类溶剂和醚类溶剂中的一种或多种；所述的惰性气体为氮气或氩气；所述的路易斯酸为AuCl、AuCl3、AuLOTf、AuLNTf2、HgOTf和PtCl2中的一种或多种，其中，L为三丁基膦、三乙基膦、三苯基膦或三金刚烷基膦；所述的路易斯酸与如式IV所示的化合物的摩尔比值为0.001～1；所述的如式V所示的化合物与如式IV所示的化合物的摩尔比值为0.5～15；所述的反应的温度为-18～5℃。
7.一种如权利要求1所述的果同尼皂苷F衍生物的中间体：其为下列化合物
8.一种如权利要求1所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物在制备GPR119激动剂中的应用。
9.一种如权利要求1所述的如式I所示的果同尼皂苷F衍生物在制备治疗糖尿病或者肥胖症药物中的应用。
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Expeditious synthesis of saponin P57, an ppetite suppressant from Hoodia plants;ZHANG Jian等;《Chem. Commun.》;20121231;第48卷;8679-8681 *
Pregnane glycosides from Hoodia gordonii;SHUKLA Yatin J.等;《Phytochemistry》;20090319;第70卷;675-683 *

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