CN103749537A - 一种树木防冻防病膜剂及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种树木防冻防病膜剂及其制备方法与应用。由主料和水组成，所述主料包括如下配比的组分：成膜物质200-1100质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-100质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮0.033-3.3质量份、二甲基亚砜10-80质量份、乙二醇10-80质量份；所述成膜物质为a或b，所述a为壳聚糖，所述b为壳聚糖和羧甲基纤维素。本发明的树木防冻防病膜剂对低温、风及冰核细菌等造成的冻害有较好的防治效果，适用于杨树、杂交榛子、苹果等树木幼树茎干、枝条的霜冻预防和越冬防寒、杏树、梨树等早春开花后的倒春寒预防、烂皮病和溃疡病防治及病斑刮除后的创面保护。
Description
本申请是申请号为201210574595.2、申请日为2012年12月26日、发明创造名称为“树木防冻防病膜剂及其制备方法与应用”的分案申请。
技术领域
本发明涉及一种树木防冻防病膜剂及其制备方法与应用，特别涉及树木茎干、枝条、花、果冻害的预防和溃疡病、烂皮病的防治，为复合型防冻防病膜剂。
背景技术
在我国北方，黑杨派及黑杨派与青杨派杂交种等速生型杨树逐渐代替乡土杨树成为主栽树种。但在辽宁、吉林、黑龙江、内蒙古以及河北部分地区，速生杨幼树在特殊年份常遭遇冻害等越冬伤害而死亡，甚至大树也常出现干梢和死亡现象。在板栗、杂交榛子、苹果等果树引种栽培中也出现了类似问题，杏树、梨树在春季倒春寒中还常常发生花芽冻害。除了单纯的冻害，由冻害等越冬伤害诱发的溃疡病和烂皮病常造成树木大面积死亡。冻害与病害的综合作用给林农带来巨大损失。以上问题的解决除了依靠选育抗性强的优良品种外，还需要采取综合防治措施。
树木的防冻方法有物理防护，施抗逆性肥料，施植物防冻保护剂三类方法。物理防护法包括盖草帘子、覆土、设置防风障、熏烟法等，这些方法费时费力、成本高。施抗逆性肥料主要是施磷钾肥。植物防冻剂一般包括防冻保护膜和植物生长调节剂。下面对防冻保护膜和生长调节剂类防冻剂采用的技术进行简述。
当前树木防冻保护膜的成膜物质主要是蜡类物质、聚醋酸乙烯乳液、植物油、淀粉、果胶、明胶一类物质。如橡胶树割口面防冻保护剂是由蜡类物质、乳化剂、植物生长调节剂、水制成的乳化液，林木果树保水防冻剂由石油蜡、矿物油、天然树脂、凝胶化剂、复合乳化剂和水按比例乳化制成，蔬菜果树花芽防冻剂由石蜡、植物油、聚丁烯、黄腐酸、水杨酸、愈创木酚类物质制成，果树冻害抽条FYBF型保水防冻剂，是以酸性石蜡为主要原料制成，植物保护膜剂以聚醋酸乙烯乳液、腐殖酸盐、羟丙基甲基纤维素、烷基磺酸盐等制成，植物旱冻营养保护膜是由淀粉、果胶、纤维素、板蓝根制成。
目前植物生长调节剂类防冻剂主要以植物激素和抗逆物质复合而成的。如植物低温保护剂的混合组份包括硝酸钙、硝酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钾、甘油、琼酯、蔗糖、聚乙二醇、矮壮素、青霉素、二甲基亚砜、巯基乙醇、白明胶、糊精、植物激素和植物生长调节剂；植物抗寒防冻剂是依据细胞膜结构的稳定性是植物抗寒性的关键的学术思想，用具有特殊热能的氨基酸等生理活性物研制而成。此外还有一些以水杨酸为主的抗寒剂。
树木受到越冬伤害而干梢或死亡，是低温、风、冰核细菌、溃疡病和烂皮病菌综合作用的结果，现有的防冻保护剂一般起到生长调节和营养作用，有保温、增温、防冻、防失水功能，缺点是膜防水性差、防护时间短，没有抑菌杀菌作用或者只对细菌或真菌起作用，不能起到综合防治效果。由于目前没有适合于树木的防冻防病剂，使杨树、榛子、杏树等树木存在广泛的越冬伤害和冻花冻果问题，包括由冻害诱发的溃疡病和烂皮病，给林业和果树生产造成严重损失。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种树木防冻防病膜剂，该树木防冻防病膜剂具有下述至少一种特性：1）膜溶胀率低；2）预防树木冻害；3）预防树木溃疡病；4）预防树木烂皮病；5）抑制冰核细菌；6）抑制溃疡病的致病菌；7）抑制烂皮病的致病菌。
本发明所提供的树木防冻防病膜剂，由主料和水组成，所述主料包括如下配比的组分：成膜物质200-1100质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-100质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮0.033-3.3质量份、二甲基亚砜10-80质量份、乙二醇10-80质量份；所述成膜物质为a或b，所述a为壳聚糖，所述b为壳聚糖和羧甲基纤维素。
进一步，所述主料包括如下配比的组分：成膜物质400-1100质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-100质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮0.033-3.3质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份；所述成膜物质为壳聚糖或壳聚糖和羧甲基纤维素。其中，所述主料中的壳聚糖具体可为下述a1-a15中任一种：
a1、900质量份壳聚糖；
a2、1100质量份壳聚糖；
a3、800质量份壳聚糖；
a4、600质量份壳聚糖；
a5、500质量份壳聚糖；
a6、400质量份壳聚糖；
a7、900-1100质量份壳聚糖；
a8、800-1100质量份壳聚糖；
a9、600-1100质量份壳聚糖；
a10、500-1100质量份壳聚糖；
a11、400-1100质量份壳聚糖；
a12、800-900质量份壳聚糖；
a13、600-800质量份壳聚糖；
a14、400-500质量份壳聚糖；
a15、500-600质量份壳聚糖。
所述主料中的壳聚糖和羧甲基纤维素为下述b1或b2：
b1、壳聚糖600质量份，羧甲基纤维素500质量份
b2、壳聚糖200质量份，羧甲基纤维素300质量份。
所述主料中的2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮具体可为下述c1-c6中任一种：
c1、29质量份2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
c2、1质量份2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
c3、96.7质量份2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
c4、1-29质量份2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
c5、29-96.7质量份2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
c6、1-96.7质量份2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
所述主料中的5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮具体可为下述d1-d6中任一种：
d1、1/30质量份5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
d2、1质量份5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
d3、3.3质量份5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
d4、1/30-3.3质量份5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
d5、1/30-1质量份5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
d6、1-3.3质量份5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮；
更进一步，所述主料还包括大于0小于等于500质量份磷酸二氢钾，如500质量份磷酸二氢钾；和/或，
所述主料还包括大于0小于等于200质量份丙三醇，如100-200质量份丙三醇。
具体地，所述树木防冻防病膜剂可为A1至A17中的任一种：
A1、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖900质量份，丙三醇200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份；
A2、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖1100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份；
A3、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖800质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份；
A4、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份；
A5、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖500质量份，磷酸二氢钾500质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份；
A6、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖400质量份，丙三醇200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份；
A7、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1/30质量份；
A8、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份；
A9、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮96.7质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮3.3质量份；
A10、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖400-1100质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-100质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮0.033-3.3质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份；磷酸二氢钾大于0小于等于500质量份，（如500质量份），丙三醇大于0小于等于200质量份（如100-200质量份）；
A11、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29-96.7质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-3.3质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份、磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份；
A12、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29-100质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-3.3质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份、磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份；
A13、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-100质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮0.033-3.3质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份、磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份；
A14、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600-800质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份、磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份；
A15、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖400-900质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份、丙三醇200质量份。
A16、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份，羧甲基纤维素500质量份，丙三醇200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份。
A17、所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖200质量份，羧甲基纤维素300质量份，磷酸二氢钾200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份。
上述树木防冻防病膜剂中，所述主料和水的质量比可为B1-B11中的任一种：
B1、1230：8770；
B2、1530：8470；
B3、1301：8699；
B4、1330：8670；
B5、1400：8600；
B6、1130：8870；
B7、730：9270；
B8、（730-1530）：（8470-9270）；
B9、（1230-1530）：（8470-8770）；
B10、（1130-1530）：（8470-8870）；
B11、（1301-1400）：（8600-8699）。
所述树木防冻防病为树木防冻和/或树木防病；具体地，所述树木防冻可为防止树木发生干梢等冻害，所述树木防病为预防树木溃疡病和/或预防树木烂皮病。
上述树木防冻防病膜剂的下述用途也属于本发明的保护范围：1）预防树木冻害；2）预防树木溃疡病；3）预防树木烂皮病；4）抑制冰核细菌；5）抑制溃疡病的致病菌；6）抑制烂皮病的致病菌。
其中，所述冰核细菌可为丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.syringae Van Hall1902)；溃疡病的致病菌可为小穴壳菌(Dothiorella gregaria Sacc.)；所述烂皮病的致病菌可为污黑腐皮壳菌(Valsa sordida Nit.)。
上文中，所述树木可为杨柳科的树木，如杨属的杨树；还可为桦木科树木，如榛属的榛子；还可为蔷薇科树木，如苹果树、杏树、梨树。
本发明的树木防冻防病膜剂能提高生物酶活性和细胞钾离子含量，杀灭并抑制冰核细菌、溃疡病和烂皮病等真菌，同时在茎、枝、叶、花、果表面罩上一层透光、可降解的高分子膜，提高树体表面温度，防止风干失水，防止病菌侵入。本发明的树木防冻防病膜剂对低温、风及冰核细菌等造成的冻害有较好的防治效果，适用于杨树、杂交榛子、苹果等树木幼树茎干、枝条的霜冻预防和越冬防寒、杏树、梨树等早春开花后的倒春寒预防、烂皮病和溃疡病防治及病斑刮除后的创面保护，可替代石硫合剂加入树木涂白剂中起到杀菌作用,还能延长涂白固着时间。本发明的树木防冻防病膜剂高效、低毒、无残留，在树木引种驯化过程中将得到广泛应用。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中的壳聚糖，购自国药集团化学试剂有限公司，其产品编号为69047438；丙三醇购自国药集团化学试剂有限公司，其产品编号为10010618；乙二醇购自国药集团化学试剂有限公司，其产品编号为10009818；二甲基亚砜购自国药集团化学试剂有限公司，其产品编号为30072418；2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮购自国药集团化学试剂有限公司，其产品编号为K7356901；5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮购自国药集团化学试剂有限公司，其产品编号为K0034401；磷酸二氢钾购自国药集团化学试剂有限公司，其产品编号为10017618；农用链霉素购自重庆济公农牧药业有限公司，渝兽药生证字（99）025号，重兽药经证字（99）028号，渝兽药字（2001）X025009号；多菌灵购自江阴市福达农化有限公司，农药登记证号PD20070014，农药生产许可证号XK13-200-00305，产品标准号HG3290-2000；百菌清购自先正达（苏州）作物保护有限公司，农药临时登记证号LS20070270，农药生产许可证号XK13-200-00918，产品标准号GB9552-1999；甲基硫菌灵购自江苏省江阴市农药二厂有限公司，农药登记证号PD20101560，农药生产许可证号XK13-003-00034，产品标准号GB23552-2009。
丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.syringae Van Hall1902)（曾大鹏等，杨树上的冰核细菌及其在引起杨树冻害和诱发真菌溃疡病过程中的作用，林业科学，1999,35（3）：54-57），公众可从中国林业科学研究院中国林业微生物菌种保藏管理中心，也可从辽宁省杨树研究所获得，以重复本申请实验。
小穴壳菌(Dothiorella gregaria Sacc.)（刘耀华等，五种林木果树上的小穴壳菌的病原相关性研究，河南林业科技，2005,25（3）：1-7），公众可从中国林业科学研究院中国林业微生物菌种保藏管理中心，也可从辽宁省杨树研究所获得，以重复本申请实验。
污黑腐皮壳菌(Valsa sordida Nit.)（李树国，杨树烂皮病发病规律及综合防治技术，牡丹江师范学院学报（自然科学版），2012,2:23-24），公众可从中国林业科学研究院中国林业微生物菌种保藏管理中心，也可从辽宁省杨树研究所获得，以重复本申请实验。
美洲黑杨347（P.×deltoides‘347’）（杨成超等，黑杨苗期高生长形态建成，东北林业大学学报，2010,38（9）：13-15）公众可从辽宁省杨树研究所获得，以重复本申请实验。
平欧杂交榛子（Corylus heterophylla×Corylus avellana）（苏喜廷等，高寒地区平欧杂交榛子引种试验初报，林业实用技术，2009,10:26-28）。公众可从辽宁省杨树研究所获得，以重复本申请实验。
实施例1、树木防冻防病膜剂及其效果
一、制备树木防冻防病膜剂
本实施例制备了如下9种树木防冻防病膜剂：
树木防冻防病膜剂（1）组成为：壳聚糖400质量份，丙三醇200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水9270质量份。
树木防冻防病膜剂（2）组成为：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8670质量份。
树木防冻防病膜剂（3）组成为：壳聚糖900质量份，丙三醇200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8770质量份。
树木防冻防病膜剂（4）组成为：壳聚糖800质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8470质量份。
树木防冻防病膜剂（5）组成为：壳聚糖500质量份，磷酸二氢钾500质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8870质量份。
树木防冻防病膜剂（6）组成为：壳聚糖1100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8770质量份。
树木防冻防病膜剂（7）组成为：壳聚糖600质量份，羧甲基纤维素500质量份，丙三醇200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8570质量份。
树木防冻防病膜剂（8）组成为：壳聚糖200质量份，羧甲基纤维素300质量份，磷酸二氢钾200质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水9170质量份。
树木防冻防病膜剂（9）组成为：羧甲基纤维素钠300质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇300质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8770质量份。
上述树木防冻防病膜剂按照下述方法制备：分别按照上述树木防冻防病膜剂组成中的配比称取各组分。先用水溶解壳聚糖得到壳聚糖溶液。再将，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮与水混匀后，倒入壳聚糖溶液中，搅拌10分钟，得到液体1。然后用水溶解磷酸二氢钾，倒入液体1中，再添加丙三醇、乙二醇和二甲基亚砜，添加各成分时不断搅拌，所有成分添加完成后补足水，再搅拌20分钟，得到本发明防冻防病膜剂。
本发明防冻防病膜剂的具体使用方法是：对枝条和树干进行保护，在气温达到0℃的深秋开始采用涂刷或者喷施的方法，每隔1个月喷涂一次，一直到气温稳定到0℃以上。以辽宁省为例，开始时间大概在10月下旬到11月初，截止时间大概在3月末，整个保护期大概喷涂5次。喷施浓度为10-20倍液，涂刷浓度为2-10倍液。对梨花和杏花等花芽的保护，在花芽萌动后晚霜来临之前喷施1次即可。对易发生溃疡病和烂皮病的树种，在4月初对树干再喷涂1次，可起到较好病害防治效果。刮除病斑后，可用本发明防冻防病膜剂涂刷创面，起到保护和抑菌作用。
本防冻防病膜剂对冰核细菌等细菌、真菌均具有较好的杀灭和抑制作用，可使细胞降低冰点6-8℃，对环境友好，膜形成后具有一定的耐水性，防止枝条风干失水，对冻害和由冻害诱发的溃疡病、烂皮病等有较好的综合防治效果。
二、树木防冻防病膜剂的溶胀性
将树木防冻防病膜剂（1）-（9）分别在干净的玻璃板上流延成膜。将膜放到80℃烘箱中烘干到恒重，称干重，记为A1。将烘干的膜放到蒸馏水中浸泡18-24小时，使膜达到溶胀平衡为标准。用滤纸吸取表面水分后连续称膜溶胀后重量，3次重量无变化后，记录湿重A2。湿重A2减干重A1的差除以干重A1，再乘以100%即为溶胀率。见表1。
表1树木防冻防病膜剂溶胀率测定
二、树木防冻防病膜剂的防冻效果
1、对杨树的防冻效果
2011年11月至2012年3月，在辽宁省凌海市金城镇苗圃，每月1日对一年生美洲黑杨347（P.×deltoides‘347’）进行了整株涂刷树木防冻防病膜剂（1）-（9）的试验，涂刷浓度为原液的2倍稀释液、10倍稀释液和50倍稀释液，每个浓度涂刷30株，以涂刷清水为对照。实验重复三次。其中原液即为树木防冻防病膜剂（1）-（9）。2012年4月20日调查试验苗木的受冻害情况。调查方法为，测定苗木的干梢长度，未干梢的记为0级，干梢达到整株高度五分之一的记为1级，干梢达到整株高度三分之一的记为2级，干梢达到整株高度一半的记为3级，整株死亡的记为4级。按照公式计算冻害指数。
冻害指数=（1级冻害株数×1+2级冻害株数×2+3级冻害株数×3+4级冻害株数×4）/（受冻害总株数×4）
冻害指数越高说明受到的冻害越严重，也就是防冻效果越差。
调查结果表明，对照干梢达到2级，冻害指数为5.0，所有处理的冻害指数如表2所示。用SPSS18.0软件对表2进行了双因素方差分析，各个配方间、浓度处理间的冻害指数达到极显著差异水平，方差分析表如表3。树木防冻防病膜剂（1）-（6）的2倍稀释液、10倍稀释液和50倍稀释液的冻害指数远低于对照，说明树木防冻防病膜剂（1）-（6）对冻害具有较好的预防效果。含有羧甲基纤维素和羧甲基淀粉钠的树木防冻防病膜剂（7）-（9）也有一定防冻害效果，但是由于耐水性差，涂膜易被水冲掉，需要在雨雪天气后补刷防冻膜。试验所有试验苗木都没有发现溃疡病和烂皮病害。
表2不同处理的冻害指数
注：数据为三次重复实验的平均值。
表3.方差分析
注：校正模型P值小于0.05说明模型具有统计学意义，配方和浓度的P值都小于0.01，说明配方间和药剂浓度对防止杨树冻害达到极显著差异水平。
2、对一年生杂交榛子幼苗的防冻试验
2011年11月至2012年3月，在辽宁省黑山县新兴镇，每月1日对一年生平欧杂交榛子（Corylus heterophylla×Corylus avellana）幼苗进行了整株涂刷树木防冻防病膜剂（2）的试验，涂刷浓度为原液的2倍稀释液、10倍稀释液和50倍稀释液，每个浓度涂刷30株，以涂刷清水为对照。实验重复三次。2012年4月20日调查试验苗木的受冻害情况。调查方法为，测定苗木的干梢长度，未干梢的记为0级，干梢达到整株高度五分之一的记为1级，干梢达到整株高度三分之一的记为2级，干梢达到整株高度一半的记为3级，整株死亡的记为4级。
调查结果表明，对照干梢达到2级和3级，对照的冻害指数为0.58，而涂刷浓度为原液的2倍稀释液的干梢程度为0级，涂刷浓度为原液的10倍稀释液的干梢程度为0-1级，冻害指数为0.03，涂刷浓度为原液的50倍稀释液的干梢程度达到1-2级，冻害指数为0.20。说明树木防冻防病膜剂（2）具有较好的防冻害效果。试验所有试验苗木都没有发现溃疡病和烂皮病害。
实施例2、树木防冻防病膜剂及其抑菌效果
一、制备树木防冻防病膜剂
本实施例制备了如下4种树木防冻防病膜剂：
树木防冻防病膜剂A组成为：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮0.2质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1/150质量份，水约8699.8质量份。
树木防冻防病膜剂B组成为：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1/30质量份，水约8699质量份。
树木防冻防病膜剂C组成为：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮29质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1质量份，水8670质量份。
树木防冻防病膜剂D组成为：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮96.7质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮3.3质量份，水8600质量份。
二、树木防冻防病膜剂的抑菌实验
供试病原菌：丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.syringae Van Hall1902)、小穴壳菌(Dothiorella gregaria Sacc.)、污黑腐皮壳菌(Valsasordida Nit.)。其中丁香假单胞菌又名冰核细菌，可降低细胞冰点，引起植物冻害。小穴壳菌属于真菌，能引起溃疡病。污黑腐皮壳菌属于真菌，能引起烂皮病。
1、对冰核细菌的药效实验
冰核细菌的杀灭实验分别采用树木防冻防病膜剂A-D、农用链霉素为参试药剂，每种参试药剂配制300mg/L、600mg/L和1000mg/L3个浓度，3次重复，并设置了未添加药剂的空白对照。实验方法为，药液滤纸片扩散法，细菌培养基为牛肉膏蛋白胨培养基。分别取丁香假单胞菌菌悬液加于固体培养基表面，用玻璃棒涂抹均匀，制成含菌平板。取直径6mm的无菌滤纸片分别放入无菌水或各个浓度参试药剂浸泡5min，用无菌镊子取出浸泡的滤纸片贴在含菌平板上，每皿贴3片，每菌做3次重复，然后置29℃培养箱培养24h，测定滤纸片的抑菌圈大小，比较抑菌效果。实验结果见表4。结果表明，树木防冻防病膜剂A-D及农用链霉素随着药液浓度增加，抑菌圈直径增大。树木防冻防病膜剂A-D中浓度最大的树木防冻防病膜剂D当浓度为1000mg/L时的最大抑菌圈直径为39.0mm,最小抑菌圈直径38.0mm。从树木防冻防病膜剂A-D各个浓度之间抑菌效果的对比来看，树木防冻防病膜剂D三个浓度间抑菌圈直径差异较小，说明达到最大抑制浓度。树木防冻防病膜剂C最大浓度抑菌圈直径和树木防冻防病膜剂D相近，且三个浓度间抑菌圈直径有较大差异，说明树木防冻防病膜剂C抑菌效果好且药剂有效含量较低，是合适的配方。而树木防冻防病膜剂A和B，尤其是树木防冻防病膜剂A抑菌效果较差，说明低浓度的2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮有一定的抑制冰核细菌的效果，但不是最佳配比。农用链霉素有一定的抑菌效果，但与最佳配方相比有较大差距。树木防冻防病膜剂B-D比农用链霉素有更强的杀冰核细菌能力。
表4不同药剂抑制冰核细菌抑菌圈平均直径（mm）
| 参试药剂 | 浓度300mg/L的抑菌直径 | 浓度600mg/L的抑菌直径 | 浓度1000mg/L的抑菌直径 |
| 树木防冻防病膜剂A | 7.0 | 8.0 | 9.0 |
| 树木防冻防病膜剂B | 10.0 | 12.5 | 15.0 |
| 树木防冻防病膜剂C | 23.5 | 30.0 | 36.5 |
| 树木防冻防病膜剂D | 38.0 | 38.5 | 38.8 |
| 农用链霉素 | 9.0 | 10.5 | 11.5 |
| 对照 | 6.0 | 6.0 | 6.0 |
2、对溃疡病和烂皮病真菌的药效实验
杀灭引起溃疡病和烂皮病的真菌的药效实验采用树木防冻防病膜剂A-D、多菌灵、百菌清、甲基硫菌灵为参试药剂，每种参试药剂设100mg/L、300mg/L和600mg/L3个浓度，3次重复。实验方法为，在融化即将冷却的PDA培养基中添加指定浓度的药剂，摇匀倒入培养皿（直径90mm）。等48小时未发现供试PDA平板感染后，接种直径10mm的小穴壳菌菌丝圆块或污黑腐皮壳菌菌丝圆块，并以未添加药剂且加菌丝圆块的平板为对照，置于25℃恒温箱中培养。等到对照培养皿的菌丝长满培养皿时测量其它添加药剂平板的菌斑直径，取相互垂直两个直径的平均值。菌斑直径越小说明药剂对该真菌的抑制能力越强。
实验结果表明，随着药剂浓度的增大，菌斑直径减小，说明药剂抑制效果更好。树木防冻防病膜剂A对小穴壳菌和污黑腐皮壳菌抑制效果较差，说明配方中甲基异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮的浓度偏低。树木防冻防病膜剂B对两种真菌有一定的抑制效果，但不理想。树木防冻防病膜剂C和树木防冻防病膜剂D对两种真菌的抑制效果相近，树木防冻防病膜剂D比树木防冻防病膜剂C效果稍好，但树木防冻防病膜剂C也完全达到了良好的对两真菌的抑制效果，且成本更低。树木防冻防病膜剂C浓度为600ml/L时小穴壳菌的菌斑生长直径（包括菌斑块，下同）为11.0mm，对照长满，详细数据见表5。防冻防病膜剂C配方浓度为600ml/L时污黑腐皮壳菌的菌斑生长直径为10.8mm，对照长满，详细数据见表6。参试药剂杀灭引起溃疡病的真菌能力由大到小的顺序为,树木防冻防病膜剂D>树木防冻防病膜剂C>甲基硫菌灵剂>百菌清=多菌灵；参试药剂杀灭引起烂皮病的真菌能力由大到小的顺序为，树木防冻防病膜剂D>树木防冻防病膜剂C>甲基硫菌灵>百菌清>多菌灵。说明树木防冻防病膜剂D和树木防冻防病膜剂C与甲基硫菌灵有较好的杀灭和抑制溃疡病及烂皮病真菌菌的能力。
表5不同药剂抑制小穴壳菌菌斑生长效果（直径mm）
| 参试药剂 | 浓度100mg/L的菌斑直径 | 浓度300mg/L的菌斑直径 | 浓度600mg/L的菌斑直径 |
| 树木防冻防病膜剂A | 82.0 | 65.3 | 49.0 |
| 树木防冻防病膜剂B | 50.5 | 32.5 | 24.0 |
| 树木防冻防病膜剂C | 18.0 | 15.5 | 11.0 |
| 树木防冻防病膜剂D | 12.5 | 11.0 | 10.8 |
| 多菌灵 | 49.0 | 32.5 | 29.0 |
| 百菌清 | 49.0 | 33.0 | 29.0 |
| 甲基硫菌灵 | 28.0 | 22.0 | 16.5 |
| 对照 | 90.0 | 90.0 | 90.0 |
表6不同药剂抑制污黑腐皮壳菌菌斑生长效果（直径mm）
| 参试药剂 | 浓度100mg/L的菌斑直径 | 浓度300mg/L的菌斑直径 | 浓度600mg/L的菌斑直径 |
| 树木防冻防病膜剂A | 83.0 | 68.5 | 50.5 |
| 树木防冻防病膜剂B | 52.5 | 30.2 | 26.0 |
| 树木防冻防病膜剂C | 19.2 | 15.0 | 10.8 |
| 树木防冻防病膜剂D | 12.0 | 11.0 | 11.0 |
| 多菌灵 | 48.0 | 32.5 | 28.5 |
| 百菌清 | 47.0 | 32.0 | 27.5 |
| 甲基硫菌灵 | 25.5 | 19.5 | 15.0 |
| 对照 | 90.0 | 90.0 | 90.0 |
Claims (9)
1.树木防冻防病膜剂，由主料和水组成，所述主料包括如下配比的组分：成膜物质400-1100质量份、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮1-100质量份、5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮0.033-3.3质量份、二甲基亚砜50质量份、乙二醇50质量份和500质量份磷酸二氢钾；所述成膜物质为壳聚糖。
2.根据权利要求1所述的树木防冻防病膜剂，其特征在于：所述主料还包括100-200质量份丙三醇。
3.根据权利要求1或2所述的树木防冻防病膜剂，其特征在于：所述主料由如下配比的组分组成：壳聚糖600质量份，磷酸二氢钾500质量份，丙三醇100质量份，乙二醇50质量份，二甲基亚砜50质量份，2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮96.7质量份，5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮3.3质量份。
4.根据权利要求1至3中任一所述的树木防冻防病膜剂，其特征在于：所述主料和水的质量比为1400：8600。
5.根据权利要求1至4中任一所述的树木防冻防病膜剂，其特征在于：所述树木防病为防治树木溃疡病和/或防治树木烂皮病。
6.根据权利要求1至5中任一所述的树木防冻防病膜剂，其特征在于：所述树木防冻防病膜剂按照权利要求8所述的方法制备。
7.权利要求1-5中任一所述的树木防冻防病膜剂的制备方法，包括如下步骤：将所述主料和水混匀制成所述树木防冻防病膜剂。
8.权利要求1-6中任一所述的树木防冻防病膜剂的用途；所述用途为1）-6）中的任一种：
1）预防树木冻害；2）预防树木溃疡病；3）预防树木烂皮病；4）抑制冰核细菌；5）抑制溃疡病的致病菌；6）抑制烂皮病的致病菌。
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述冰核细菌为丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.syringae Van Hall1902)；溃疡病的致病菌为小穴壳菌(Dothiorella gregaria Sacc.)；所述烂皮病的致病菌为污黑腐皮壳菌(Valsa sordida Nit.)。
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