CN103736157A - 一种复合抗凝血材料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供的一种复合抗凝血材料,至少由丝素蛋白和桑黄多糖制成。本发明还提供了上述复合抗凝血材料的制备方法。该复合抗凝血材料制备工艺简单、成本低廉,其具有优异的抗凝血作用,同时具有较好的力学相容性和组织相容性;此外,采用桑黄多糖配合丝素蛋白,从而得到的复合抗凝血材料毒副作用小。
Description
技术领域
本发明属于医用材料领域,特别涉及一种复合抗凝血材料,还涉及该复合抗凝血材料的制备方法。
背景技术
与生物组织相接触的医用材料应该具有良好的生物相容性,包括组织相容性、血液相容性和力学相容性。组织相容性是指材料与生物体组织及体液接触后不引起细胞突变、畸变、癌变以及排异反应。血液相容性是指材料和血液接触后不引起血浆蛋白质的变性,不破坏血液的有效成分,不导致血液的凝固和血栓的形成。力学相容性是对于植入体内承受负荷,以及要求其弹性形变和植入部位的组织的弹性形变相协调的生物材料的力学性能。其中,血液相容性(抗凝血性)是评价材料性能的重要指标。
抗凝血材料是生物材料的重要组成部分,被广泛应用于与人体血液和组织相接触的医疗器械或组织工程化材料上,例如人工心脏瓣膜、血液透析系统、体外循环系统、血管栓塞剂、心脏起搏器、人工血管、血管支架、介入导管、外科手术线等。与血液直接接触的抗凝血材料不仅要求具有组织相容性,不会对生物体组织引起炎症,而且要求具有血液相容性,能够抗血栓,不会在材料表面发生凝血现象,还要求具有与人体组织相似的弹性、延展性及良好的耐疲劳性等生物即力学相容性。因此,研制一种无需注射抗凝剂、抗血栓作用强而致凝作用弱、生物相容性和力学性能俱佳的医用抗凝血生物材料具有重要的理论意义和应用价值。
发明内容
发明目的:本发明的目的在于提供一种组织相容性、血液相容性和力学相容性俱佳的复合抗凝血材料。
本发明的第二目的在于提供该复合抗凝血材料的制备方法。
技术方案:本发明提供的一种复合抗凝血材料,至少由丝素蛋白和桑黄多糖制成。
优选地,所述复合抗凝血材料,至少由以下重量份的组分制成:丝素蛋白10-40份、桑黄多糖60-90份。
本发明还提供了上述复合抗凝血材料的制备方法,包括以下步骤:
(1)将丝素蛋白和桑黄多糖于50-70℃真空干燥20-30h;
(2)将干燥的丝素蛋白分散于碱溶液中,35-40℃保温0.5-1h,冷却,滴加至酸溶液中,得丝素蛋白溶液;
(3)将桑黄多糖溶于酸溶液中,过滤、离心脱气,即得桑黄多糖溶液;
(4)将丝素蛋白溶液和桑黄多糖溶液混匀,离心脱气,得丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液;
(5)将丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液烘干后,加入氨水浸泡,洗净、晾干,即得。
其中,步骤(2)中,所述碱溶液为质量百分比浓度为5-10%的氢氧化钠水溶液;所述酸溶液为质量百分比浓度为0.1-0.5%的醋酸溶液;所述丝素蛋白、碱溶液和酸溶液的用量比为(1-3)g:(10-40)ml:(60-90)ml。
其中,步骤(3)中,所述酸溶液为质量百分比浓度为0.1-0.5%的醋酸溶液;所述桑黄多糖和酸溶液的用量比为(1-3)g:100ml;离心速率为4000-6000rpm。
其中,步骤(4)中,所述丝素蛋白溶液和桑黄多糖溶液的体积比为(10-40):(60-90)。
其中,步骤(5)中,烘干温度为40-60℃;氨水的质量百分比浓度为5-10%,浸泡时间为5-10min。
有益效果:本发明提供的复合抗凝血材料制备工艺简单、成本低廉,其具有优异的抗凝血作用,同时具有较好的力学相容性和组织相容性;此外,采用桑黄多糖配合丝素蛋白,从而得到的复合抗凝血材料毒副作用小。
附图说明
图1为不同止血材料的凝血指数对比。
图2为不同止血材料的止血时间对比。
图3为不同止血材料的出血量对比。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做出进一步说明。
实施例1
复合抗凝血材料,由以下重量份的组分制成:丝素蛋白10份、桑黄多糖90份。
复合抗凝血材料的制备方法,包括以下步骤:
(1)将丝素蛋白和桑黄多糖于60℃真空干燥25h;
(2)将3g干燥的丝素蛋白分散于40ml质量百分比浓度为10%的氢氧化钠水溶液中,37℃保温0.5h,冷却,滴加至60ml质量百分比浓度为0.5%的醋酸溶液中,得丝素蛋白溶液;
(3)将3g桑黄多糖溶于100ml质量百分比浓度为0.5%的醋酸溶液中,过滤、离心脱气,即得桑黄多糖溶液;
(4)将10ml丝素蛋白溶液和90ml桑黄多糖溶液混匀,6000rpm离心脱气,得丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液;
(5)将丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液烘干后,加入质量百分比浓度为10%氨水浸泡5min,洗净、晾干,即得。
实施例2
复合抗凝血材料,由以下重量份的组分制成:丝素蛋白20份、桑黄多糖80份。
复合抗凝血材料的制备方法,包括以下步骤:
(1)将丝素蛋白和桑黄多糖于50℃真空干燥20h;
(2)将1g干燥的丝素蛋白分散于10ml质量百分比浓度为5%的氢氧化钠水溶液中,35℃保温1h,冷却,滴加至90ml质量百分比浓度为0.1%的醋酸溶液中,得丝素蛋白溶液;
(3)将1g桑黄多糖溶于100ml质量百分比浓度为0.1%的醋酸溶液中,过滤、离心脱气,即得桑黄多糖溶液;
(4)将20ml丝素蛋白溶液和80ml桑黄多糖溶液混匀,4000rpm离心脱气,得丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液;
(5)将丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液烘干后,加入质量百分比浓度为5%氨水浸泡10min,洗净、晾干,即得。
实施例3
复合抗凝血材料,由以下重量份的组分制成:丝素蛋白40份、桑黄多糖60份。
复合抗凝血材料的制备方法,包括以下步骤:
(1)将丝素蛋白和桑黄多糖于70℃真空干燥30h;
(2)将2g干燥的丝素蛋白分散于20ml质量百分比浓度为8%的氢氧化钠水溶液中,40℃保温0.5h,冷却,滴加至80ml质量百分比浓度为0.3%的醋酸溶液溶液中,得丝素蛋白溶液;
(3)将2g桑黄多糖溶于100ml质量百分比浓度为0.3%的醋酸溶液中,过滤、离心脱气,即得桑黄多糖溶液;
(4)将40ml丝素蛋白溶液和60ml桑黄多糖溶液混匀,5000rpm离心脱气,得丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液;
(5)将丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液烘干后,加入质量百分比浓度为7%氨水浸泡6min,洗净、晾干,即得。
实施例4本发明的复合抗凝血材料体外凝血效果测试
分别测试本发明的复合抗凝血材料体外凝血指数、止血时间、出血量。
1.本发明的复合抗凝血材料体外凝血指数的测定
抽取家兔心脏新鲜血液并加入自制的柠檬酸钠抗凝血剂(血液与抗凝血仪剂的体积比为9:1)待用。
以普通纱布和明胶海绵作为对照。
将本发明的复合抗凝血材料样品剪成1cm2小块,平放在烧杯中,放入水浴锅37℃温5min,将0.1mL家兔新鲜血液滴加到样品上后,立即滴加0.2mol/L CaCl2溶液0.02mL开始凝血过程,5min后加入20mL去离子水,37℃恒温下振荡5min,随后取出溶液用紫外分光光度计测其OD(415nm)值。
将0.1mL血液用去离子水稀释为20mL后的OD(415nm)值假定为100做参考值,BCI=100*OD(415nm)/参考OD(415nm)。BCI越低,凝血效过越好。各样品的凝血指数如图1所示。由图可知,普通纱布、明胶海绵的凝血指数分别为86%和67%,而本发明的复合抗凝血材料凝血指数为24%,明显优于其他两种止血材料。
2.本发明的复合抗凝血材料凝血测试
将本发明的复合抗凝血材料样品剪成2*2cm2小块,称量后备用。
以普通纱布和明胶海绵作为对照。
12只供试家兔随机普通纱布对照组、明胶海绵对照组、本发明的复合抗凝血材料组,每组4只家兔6个耳动脉出血试验点;将3种止血材料上分别覆盖称量过的医用棉球,压迫止血10s后拿开棉花,观察各种材料的止血效果。
(1)止血时间的测定:无更多血液从材料渗出时记录时间为T1,以后每5s观察1次,直至完全止血,记录时间为T2;止血时间为T1和T2平均值。各样品的止血时间如图2所示。
由图可知,普通纱布、明胶海绵的止血时间分别为127秒和115秒;本发明的复合抗凝血材料止血时间为65秒,止血时间大大缩短。
(2)出血量的测定:止血前,精确称量棉球质量m1;止血完成后,精确称量吸入血液的棉球质量m2;计算出血量(m):m=m2-m1;结果如图3所示。由图可知,使用普通纱布、明胶海绵止血的出血量分别为52克和43克;而本发明的复合抗凝血材料的止血时间为15克,出血量明显减少。
Claims (7)
1.一种复合抗凝血材料,其特征在于:至少由丝素蛋白和桑黄多糖制成。
2.根据权利要求1所述的一种复合抗凝血材料,其特征在于:至少由以下重量份的组分制成:丝素蛋白10-40份、桑黄多糖60-90份。
3.一种权利要求1所述的复合抗凝血材料的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)将丝素蛋白和桑黄多糖于50-70℃真空干燥20-30h;
(2)将干燥的丝素蛋白分散于碱溶液中,35-40℃保温0.5-1h,冷却,滴加至酸溶液中,得丝素蛋白溶液;
(3)将桑黄多糖溶于酸溶液中,过滤、离心脱气,即得桑黄多糖溶液;
(4)将丝素蛋白溶液和桑黄多糖溶液混匀,离心脱气,得丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液;
(5)将丝素蛋白溶液-桑黄多糖共混液烘干后,加入氨水浸泡,洗净、晾干,即得。
4.权利要求3所述的一种复合抗凝血材料的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述碱溶液为质量百分比浓度为5-10%的氢氧化钠水溶液;所述酸溶液为质量百分比浓度为0.1-0.5%的醋酸溶液;所述丝素蛋白、碱溶液和酸溶液的用量比为(1-3)g:(10-40)ml:(60-90)ml。
5.权利要求3所述的一种复合抗凝血材料的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述酸溶液为质量百分比浓度为0.1-0.5%的醋酸溶液;所述桑黄多糖和酸溶液的用量比为(1-3)g:100ml;离心速率为4000-6000rpm。
6.权利要求3所述的一种复合抗凝血材料的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,所述丝素蛋白溶液和桑黄多糖溶液的体积比为(10-40):(60-90)。
7.权利要求3所述的一种复合抗凝血材料的制备方法,其特征在于:步骤(5)中,烘干温度为40-60℃;氨水的质量百分比浓度为5-10%,浸泡时间为5-10min。
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