CN103734479B - 降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂生产方法，将季也蒙毕赤酵母 Pichia guilliermondii ACCC 20311、乳酸乳球菌 Lactococcus lactis ACCC 10179、醋化醋杆菌奥尔兰亚种 Acetobacter aceti subsp. Orleanensis CICC 7001和类布氏乳杆菌 Lactobacillus parabuchner CICC 6052混合发酵生产饲料添加剂。本发明打破了以往的单菌种发酵最后再进行复配成产品的生产方式，混合发酵不但降低了生产成本，同时提高了产品降解雌激素、胆固醇的效果，而且更明显的促进了动物的生长及抗病能力。

Description

降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂生产方法

技术领域

本发明涉及一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂生产方法。

背景技术

随着人们生活水平的不断提高，尤其是人们对生活质量提高的要求，国内外都在积极发展绿色农业来生产安全、无公害的绿色食品，保证人们的身体健康。

目前，越来越多的难降解化合物，如类固醇类物质、杀虫剂、多环芳烃等大量排入环境中，对生态造成了重大破坏，也对人体健康产生了很大影响。类固醇(如雌二醇、口服避孕药等)又称为甾体化合物，已经被确认为是有雌激素活性的70多种化学物之一。环境激素，是有类似雌激素的作用。主要是人类的活动排泄到环境中，破坏机体稳定性和调控作用，成为继“臭氧层破坏”、“温室效应”之后又一全球性的重大环境问题。环境中的天然雌激素和人工合成的雌激素，主要是由畜禽和人类排泄而进入环境的，近年来由于饲养业的迅猛发展，在饲养畜禽排泄大量天然雌激素的同时，为促进动物生长过多使用人工合成激素，使雌激素污染环境问题变得更加严重。

雌激素会干扰生物与人体正常的内分泌机能，导致生物与人体的性激素分泌量及活性和精子数量减少，生殖器官异常，癌症(乳腺癌、阴道癌、宫颈癌、卵巢癌、睾丸癌、前列腺癌)等发病率增加，生殖能力降低，男性女性化，记忆力、注意力下降等。

发明内容

基于以上不足之处，本发明公开一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂生产方法，该方法制得的饲料添加剂具有调整和维持动物肠道内微生态平衡，促进并增强机体免疫力、减少疾病发生、提高饲料转化率的功效，如下：以下操作都在无菌条件下进行，

(1)一级菌种培养

菌种培养基

培养基各组分的重量百分数：蜂蜜0.4％、葡萄糖2％、甘油1.5％、硫酸铵0.1％、蛋白胨0.1％、无水乙醇1％和水94.9％，pH值自然；

将0.2mL季也蒙毕赤酵母Pichia guilliermondii ACCC 20311、乳酸乳球菌Lactococcus lactis ACCC 10179、醋化醋杆菌奥尔兰亚种Acetobacter aceti subsp.Orleanensis CICC 7001和类布氏乳杆菌Lactobacillus parabuchneri CICC 6052一起加入到500ml三角瓶培养，瓶内装培养基200mL，放入摇床中35℃±1℃，120转/每分钟培养15小时，一级菌种培养结束；

(2)二级种子的培养

菌种培养基

重量百分数：牛肉膏0.3％、酵母膏0.5％、葡萄糖3％、甘油1％、L-谷氨酸钠0.2％、无水乙醇2％和水93％，pH值自然；

将以上培养好的一级菌种在无菌条件下接种到罐中，发酵罐温度为35℃±1℃，接种量是罐内培养基的5％，再加入重量百分数2％的无水乙醇，进行无菌空气通风发酵，无菌空气用量为每100公斤种子培养液每分钟用无菌空气0.15立方，pH自然，搅拌转速90转每分钟，发酵培养15小时，镜检无杂菌为合格，以上称为种子罐培养菌种；

(3)成品发酵

以100公斤发酵液为例，重量百分数：大麦芽浸粉3.5％、燕麦粉2％、甘油1.5％、豆粕粉3％、葡萄糖3.5％，无水乙醇1.5％和水85％，pH值自然；

在无菌条件下向罐中接入培养好的二级菌种，接种量是罐内培养液的10％，调整发酵罐温度为35℃±1℃。搅拌速度为90转/分钟，通风量每100公斤发酵液每分钟通入无菌空气0.15立方米，发酵时pH值为自然；

发酵36小时，发酵结束，得发酵液；

(4)成品提取

将以上发酵液在每分钟13000转的条件下离心，收集湿菌体，将收获的湿菌体加入载体，以100公斤湿菌体加入重量百分数：工业葡萄糖1％，脱脂奶粉2％，麦芽糊精1.5％，甘油1.5％，搅拌溶化后，在40℃的干燥条件下进行干燥，当水分降至重量百分数8％-10％时，停止干燥，然后粉碎成60目的细粉，分装于包装袋中，即为成品。

将如上所述的方法制得的一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂，在猪饲料中按重量百分数0.1％添加。

酵母菌、醋酸菌、乳酸菌本来属于一种微生态制剂，可以直接饲喂动物，具有调整和维持动物肠道内微生态平衡，促进并增强机体免疫力、减少疾病发生、提高饲料转化率、保护环境的作用，同时具有无毒副作用、无残留、无抗药性、生产成本低、效果显著等优点。本发明将季也蒙毕赤酵母Pichia guilliermondiiACCC 20311、乳酸乳球菌Lactococcus lactis ACCC 10179、醋化醋杆菌奥尔兰亚种Acetobacter aceti subsp.Orleanensis CICC 7001和类布氏乳杆菌Lactobacillusparabuchneri CICC 6052混合发酵，打破了以往的单菌种发酵最后再进行复配成产品的生产方式，混合发酵不但降低了生产成本，同时提高了产品降解雌激素、胆固醇的效果，而且更明显的促进了动物的生长及抗病能力。混合发酵后酵母多糖由原来单一菌种发酵的1％(干品)提高到了现在的3％，即提高了3倍，乳酸菌活菌由原来单一菌种发酵的每毫升发酵液10亿个活菌，提高到了现在的每毫升发酵液60亿个活菌，提高了6倍，醋酸菌活菌体由原来的每毫升发酵液5亿个，提高到了现在的20亿个，提高了4倍，从而形成了一种具有高生物活性的酵母菌、乳酸菌、醋酸菌菌体及次生代谢产物，经加工处理后，生产出了一种能降低畜禽体内雌激素、胆固醇含量、促进畜禽生长及抗病的绿色饲料添加剂。该添加剂的生产工艺简单，设备投资少，原料易得，生产中无废水、废气、废渣排放，生产成本低廉等特点。

具体实施方式

实施例1

生产所使用的设备：管式离心机、鼓风干燥箱、通用搅拌式发酵罐、蒸汽锅炉、超净工作台、种子罐、烘干机。

(1)一级菌种培养

菌种培养基

培养基各组分的重量百分数：蜂蜜0.4％、葡萄糖2％、含量98％的甘油1.5％、硫酸铵0.1％、蛋白胨0.1％、无水乙醇1％、水94.9％，pH值自然，混合搅拌溶化备用。

具体操作：首先取500mL三角瓶，每瓶装以上溶解好的培养基200mL然后将三角瓶用6-8层纱布封口，再用一层牛皮纸包扎，放入医用压力消毒器中蒸汽灭菌。首先接通消毒器的加热源，当消毒器中的蒸汽压力达到0.05兆帕时，打开消毒器上的排气阀门，排出冷空气，排气时间4-6分钟。当消毒器上的压力表归零时，关闭排气阀门，继续加热，当消毒器中的蒸汽压力达到0.12-0.14兆帕时，保持35分钟，然后将消毒器离开加热源，让其自然降温到35℃±1℃，然后在超净工作台中，打开三角瓶，将0.2mL季也蒙毕赤酵母Pichiaguilliermondii ACCC 20311、乳酸乳球菌Lactococcus lactis ACCC 10179、醋化醋杆菌奥尔兰亚种Acetobacter aceti subsp.Orleanensis CICC 7001和类布氏乳杆菌Lactobacillus parabuchneri CICC 6052一起加入到500ml三角瓶培养，每瓶装培养基200mL，然后将三角瓶用纱布封好口，放入摇床中35℃±1℃，120转每分钟培养15小时，停止摇床，一级菌种培养结束。

发酵设备管道及无菌过滤器的灭菌

打开各进出管道阀门及无菌空气管道的各个阀门，通入0.12-0.14兆帕的蒸汽，让蒸汽与管道阀门联通并有蒸汽排出，通气20分钟，然后关闭各个排气阀门，让管道内蒸汽压力保持0.12-0.14兆帕，保持45分钟。

种子罐及发酵罐的空罐灭菌

关闭各个阀门，打开罐夹层的排污阀门，再打开直接蒸汽阀门向罐内通入0.12-0.14兆帕的蒸汽，当罐内达到121℃±1℃时开始计时，灭菌时间为35分钟，然后关闭罐底排污阀，罐中温度降到35℃±1℃备用。

(2)二级种子的培养

菌种培养基

培养基各组分的重量百分比：牛肉膏0.3％、酵母膏0.5％、葡萄糖3％、含量98％的甘油1％、L-谷氨酸钠0.2％、无水乙醇2％、水93％，pH值自然，混合搅拌溶化备用。

具体操作：首先将配方中使用的水投入到已空罐灭菌的罐中，并开动搅拌机，然后分别加入配方中的原材料(加入顺序不分前后)，然后通入蒸汽加热，利用夹层蒸汽加热到95℃时，再改用直接蒸汽加热，当罐中蒸汽压力达到0.12-0.14兆帕时，保温40分钟，即可达到灭菌效果，然后关闭蒸汽，当罐中温度降到35±1℃时，将以上培养好的一级菌种在无菌条件下接种到罐中，接种量是罐内培养基的5％，再加入2％的无水乙醇，然后盖好接种口盖，开始无菌空气通风发酵，无菌空气用量为每100公斤种子培养液每分钟用无菌空气0.15立方，pH自然，搅拌转速90转每分钟，发酵培养15小时，镜检无杂菌为合格，以上称为种子罐培养菌种。

(3)成品发酵

培养基各组分的重量百分比：

以100公斤发酵液为例,重量百分数：大麦芽浸粉3.5％、燕麦粉2％、含量98％甘油1.5％、豆粕粉3％、葡萄糖3.5％，无水乙醇1.5％、水85％，pH值自然。

具体操作：首先将配方中的水投入到已空罐灭菌的发酵罐中去，然后开动搅拌机，分别加入配方中的大麦芽浸粉、燕麦粉(不分前后加入)，然后通入蒸汽加热，当发酵罐中蒸汽压力达到0.11-0.12兆帕、温度121℃-122℃时，保温50分钟即可达到灭菌的效果。然后向夹层通入水降温，当罐内温度下降到35℃±1℃时，在无菌条件下向罐中接入培养好的二级菌种，接种量是罐内培养液的10％，完后盖好发酵罐上的接种盖(接种口)，调整发酵罐温度为35℃±1℃。搅拌速度为90转/分钟，通风量每100公斤发酵液每分钟通入无菌空气0.15立方米，发酵时pH值为自然。

发酵36小时，发酵结束(此称为发酵液)。

成品提取：将以上发酵液用管式离心机在每分钟13000转的条件下离心，收集湿菌体，将收获的湿菌体加入载体，即100公斤湿菌体加入重量百分含量：工业葡萄糖1％，脱脂奶粉2％，麦芽糊精1.5％，含量98％的甘油1.5％，搅拌溶化后，放在鼓风干燥机中在40℃的干燥条件下进行干燥，当水分降至重量百分含量8％-10％时，停止干燥，然后用粉碎机粉碎成60目的细粉，分装于包装袋中，即为成品。

该饲料添加剂的应用

在猪饲料中添加0.1％的添加剂，畜禽体内雌激素、胆固醇降解与促生长的效果明显，猪皮红毛亮。

采用杜洛克猪雌激素降解试验对照表

采用杜洛克猪降解胆固醇试验对照表

Claims (3)

1.一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂生产方法，其特征在于，方法如下：以下操作都在无菌条件下进行，

(1)一级菌种培养

菌种培养基

培养基各组分的重量百分数：蜂蜜0.4％、葡萄糖2％、甘油1.5％、硫酸铵0.1％、蛋白胨0.1％、无水乙醇1％和水94.9％，pH值自然；

将0.2mL季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)ACCC 20311、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)ACCC 10179、醋化醋杆菌奥尔兰亚种(Acetobacter aceti subsp.Orleanensis)CICC 7001和类布氏乳杆菌(Lactobacillus parabuchneri)CICC 6052一起加入到500ml三角瓶培养，瓶内装培养基200mL，放入摇床中35℃±1℃，120转/每分钟培养15小时，一级菌种培养结束；

(2)二级种子的培养

菌种培养基

重量百分数：牛肉膏0.3％、酵母膏0.5％、葡萄糖3％、甘油1％、L-谷氨酸钠0.2％、无水乙醇2％和水93％，pH值自然；

将以上培养好的一级菌种在无菌条件下接种到罐中，发酵罐温度为35℃±1℃，接种量是罐内培养基的5％，再加入重量百分数2％的无水乙醇，进行无菌空气通风发酵，无菌空气用量为每100公斤种子培养液每分钟用无菌空气0.15立方，pH自然，搅拌转速90转每分钟，发酵培养15小时，镜检无杂菌为合格，以上称为种子罐培养菌种；

(3)成品发酵

以100公斤发酵液为例，重量百分数：大麦芽浸粉3.5％、燕麦粉2％、甘油1.5％、豆粕粉3％、葡萄糖3.5％，无水乙醇1.5％和水85％，pH值自然；

在无菌条件下向罐中接入培养好的二级菌种，接种量是罐内培养液的10％，调整发酵罐温度为35℃±1℃；搅拌速度为90转/分钟，通风量每100公斤发酵液每分钟通入无菌空气0.15立方米，发酵时pH值为自然；

发酵36小时，发酵结束，得发酵液；

(4)成品提取

将以上发酵液在每分钟13000转的条件下离心，收集湿菌体，将收获的湿菌 体加入载体，以100公斤湿菌体加入重量百分数：工业葡萄糖1％，脱脂奶粉2％，麦芽糊精1.5％，甘油1.5％，搅拌溶化后，在40℃的干燥条件下进行干燥，当水分降至重量百分数8％-10％时，停止干燥，然后粉碎成60目的细粉，分装于包装袋中，即为成品。

2.如权利要求1所述的一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂生产方法生产的一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂。

3.如权利要求2所述的一种降低畜禽体内雌激素和胆固醇含量的饲料添加剂，其特征在于：在猪饲料中按重量百分数0.1％添加。