CN103734010A - 一种组培瓶口防霉胶及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种组培瓶口防霉胶及其使用方法，涉及植物组织培养技术领域。本防霉胶包括由下述制备方法得到的产物：（1）在100重量份水中，加入10～15份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；（2）向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入10～12份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶。本发明还提供了使用该防霉胶的方法，包括以下步骤：（1）以无菌操作方式进行接种并盖紧组培瓶盖；（2）采用灭菌的涂布棒将新鲜配制的防霉胶均匀涂布于组培瓶盖与瓶口的接口部位；（3）防霉胶自然干燥形成一层透明的防霉薄膜；（4）将组培瓶置于培养室中培养。本发明大大降低组培瓶苗在培养时的感染率，提高培养成功率和培养物的成活率。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种组织培养过程中用到的防霉胶体及其使用方法。
背景技术
近20 年来, 植物组培技术由于自身独特的优势, 在无性系快速繁殖、脱毒苗的培育、加快育种进程、优良品种选育和种质资源低温保存等方面都取得了明显的经济效益、社会效益和生态效益, 其在科研和生产应用上的作用也越来越重要。但是,由微生物所引起的植物组培污染一直是当前制约植物组培发展的主要障碍。植物组培污染的控制取决于灭菌技术、灭菌设备、外植体年龄和环境条件等许多方面。尽管在植物组培过程中尽量使无菌条件更完善, 但是污染还是经常发生, 甚至有时整个实验室的组培苗因突发污染而全部死亡, 这是无法挽回的巨大损失。
近几年，铁皮石斛、金线莲等名贵中药材，因其市场行情走俏，许多企业进行组培育苗，人工种植。在进行植物组培时，因培养时间长，加上多数组培厂对培养环境的无菌条件控制不严，造成大量组培瓶苗在培养间培养时形成大量霉菌污染，最高时污染率可达80%-90%,造成巨大损失。究其原因主要是培养间环境空气中真菌孢子浓度大，加上培养瓶与瓶盖有缝隙，其封口材料多用塑料盖、胶塞、棉塞、塑料薄膜等，使用过久会发生老化或者划破，导致密封性差，造成污染，且工厂化生产，瓶口清洗不净也会造成霉菌污染。因此在控制良好的无菌环境条件的同时对组培瓶口进行无菌处理是控制污染的重要途径。林盛等(林盛, 马崇烈.组织培养中污染的控制[ J] .广西农业科学, 1994(2) :87- 88)利用4 号消毒液处理瓶口能控制污染率在0. 3%以下，但是这种方法只在消毒初期有用，后期也会随着消毒液浓度的降低而失效，需要定期对瓶口进行消毒，耗费大量人力物力且效果不佳，因此能否有效控制瓶口霉菌的污染是组培工厂化育苗成败的关键。
发明内容
本发明的目的在于提供一种组培瓶口防霉胶及其使用方法，克服现有组培过程中组培瓶口防霉处理效果不佳，造成组培瓶苗在培养时形成大量霉菌污染的缺陷，提供一种能有效阻隔在培养时空气中真菌孢子通过组培瓶口与瓶盖接口部感染瓶苗，大大降低组培瓶苗在培养时的感染率的组培瓶口防霉胶及其使用方法。
本发明提供的组培瓶口防霉胶，包括由下述制备方法得到的产物：（1）在100重量份水中，加入10～15份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；（2）向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入10～12份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶。
本发明还提供了使用上述组培瓶口防霉胶的方法，依次按以下步骤使用：（1）以无菌操作方式进行接种并盖紧组培瓶盖；（2）采用灭菌的涂布棒将新鲜配制的防霉胶均匀涂布于组培瓶盖与瓶口的接口部位；（3）防霉胶自然干燥形成一层透明的防霉薄膜；（4）将组培瓶置于培养室中培养。
本发明在本领域中具有下述优点：本发明防霉胶中选用的长效防霉剂的主要成分为辛基异噻唑啉酮的乳化物，该防霉剂具有抗菌能力强, 应用剂量小, 相容性好, 毒性低等优点，且其对环境无害，能自然降解为无毒物质，不导致环境污染。该防霉剂结合水溶性聚乙烯醇胶体溶液干燥后形成透明薄膜的特性，在组培瓶盖与瓶口的接口部位形成一层防霉、抗霉特性的薄膜，能有效阻隔在培养时空气中真菌孢子通过瓶口与瓶盖接口部感染瓶苗，大大降低组培瓶苗在培养时的感染率，提高培养成功率和培养物的成活率、降低了成本、提高了经济效益。
具体实施方式
实施例1：组培瓶口防霉胶制备
1、 在100重量份水中，加入10份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；
2、 向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入10份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶，编号防霉胶01。
实施例2：组培瓶口防霉胶制备
1、 在100重量份水中，加入12份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；
2、 向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入10份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶，编号防霉胶02。
实施例3：组培瓶口防霉胶制备
1、 在100重量份水中，加入15份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；
2、 向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入10份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶，编号防霉胶03。
实施例4：组培瓶口防霉胶制备
1、 在100重量份水中，加入10份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；
2、 向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入12份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶，编号防霉胶04。
实施例5：组培瓶口防霉胶制备
1、 在100重量份水中，加入12份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；
2、 向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入12份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶，编号防霉胶05。
实施例6：组培瓶口防霉胶制备
1、 在100重量份水中，加入15份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；
2、 向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入12份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶，编号防霉胶06。
实施例7：铁皮石斛组培瓶口防霉胶的使用
1、 取60瓶铁皮石斛组培苗，以无菌操作方式进行扩繁，每瓶组培苗扩繁7瓶子代组培苗并将此7瓶平均分于6个实验组和一个对照组，共形成420瓶子代组培苗，为减少其他因素的影响，在此阶段用于接种的子代组培培养基为同批配制、灭菌，接种工作在一天内完成；
2、 在6个实验组中分别用灭菌的涂布棒将新鲜配制的防霉胶01、防霉胶02、防霉胶03、防霉胶04、防霉胶05、防霉胶06均匀的涂布于组培瓶盖与瓶口的接口部位；
3、 防霉胶自然干燥形成一层透明的防霉薄膜；
4、 将组培瓶置于同个培养室中培养，定期观察污染情况。
实施例8：用于铁皮石斛组培瓶口防霉胶的防霉效果
| 组别 | 防霉胶 | 接种瓶数/瓶 | 污染数/瓶 | 污染比例/% |
| 对照组 | 无 | 60 | 32 | 53.3% |
| 实验组1 | 防霉胶01 | 60 | 6 | 10% |
| 实验组2 | 防霉胶02 | 60 | 5 | 8.3% |
| 实验组3 | 防霉胶03 | 60 | 4 | 6.7% |
| 实验组4 | 防霉胶04 | 60 | 9 | 15% |
| 实验组5 | 防霉胶05 | 60 | 8 | 13.3% |
| 实验组6 | 防霉胶06 | 60 | 8 | 13.3% |
从实验结果可以看出，在铁皮石斛组培瓶瓶盖与瓶口接合处涂布防霉胶有效阻止了霉菌孢子从在瓶口和瓶盖接合处侵入培养瓶，感染率极大地降低。
Claims (2)
1.一种组培瓶口防霉胶，其特征在于包括由下述制备方法得到的产物：（1）在100重量份水中，加入10～15份水溶性聚乙烯醇粉末，搅拌溶解；（2）向溶解的聚乙烯醇胶体溶液中加入10～12份辛基异噻唑啉酮的乳化物，搅拌溶解制得所述的防霉胶。
2.使用权利要求1所述的一种组培瓶口防霉胶的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）以无菌操作方式进行接种并盖紧组培瓶盖；（2）采用灭菌的涂布棒将新鲜配制的防霉胶均匀涂布于组培瓶盖与瓶口的接口部位；（3）防霉胶自然干燥形成一层透明的防霉薄膜；（4）将组培瓶置于培养室中培养。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114711242A (zh) * | 2022-02-14 | 2022-07-08 | 绍兴崇高新材料科技有限公司 | 一种新型防霉材料及其制备方法与应用 |
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| CN1193344A (zh) * | 1995-06-02 | 1998-09-16 | 植物细胞技术公司 | 防止植物组织培养基微生物污染的组合物和方法 |
| CN102234492A (zh) * | 2010-04-21 | 2011-11-09 | 王钱生 | 一种室内装饰装修用植物无毒胶粘剂及其制备方法 |
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