CN103616456A - 二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法，属于二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测领域。所述方法包括：将含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的样品进行前处理；用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对样品进行衍生化处理；衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测。本发明检测方法对于土壤中二硫代磷酸酯类农药代谢物的回收率为79.3～90.7%，精密度为9.38%和5.93%，检出限为0.01mg/kg和0.005mg/kg，在0.005～1.000mg/kg范围内线性相关系数为0.9992和0.9997，具有良好的回收率、定量限、精密度和线性，符合农产品中农药残留及其代谢物检测方法的要求。
Description
技术领域
本发明涉及一种农药代谢物的检测方法，尤其涉及一种二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法，属于二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测领域。
背景技术
有机磷农药具有广谱、高效等众多优点，是当前农药的三大支柱之一，广泛用作农业杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂等，不论在品种的数量、产量的规模等都位居各种农药首位（张强.有机磷农药快速检测方法研究综述[J].广东化工.2013,10(40):142-147），有机磷农药在农业的广泛应用可能导致土壤、地表水及生物等被污染，并可能最终传递于食品（Ballesteros,E.,&Parrado,M.J..Continuous solid-phase extraction and gas chromatographicdetermination of organophosphorus pesticidesin natural and drinking waters[J].Journal of Chromatography A,2004,1029,267-273.）。二硫代磷酸酯类有机磷农药是农业生产中最常用一类农药，部分农药还在大量使用，多数为剧毒农药，杀虫效果好，降解周期长，主要种类有甲拌磷、乙拌磷、乐果、特丁硫磷及马拉硫磷等，其主要代谢产物为O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯（图1）。
传统有机磷农药的检测一般采用气相色谱或气质联用的方法，但在检测二硫代磷酸酯类农药代谢物过程中，都遇到了一些问题。
二硫代磷酸酯类农药代谢物中磷原子接受巯基中的硫原子提供的孤对电子形成π键，其一对电子供给硫原子形成σ配键，因此氧原子上的氢易失去电子，发生亲和取代反应（苏寿承.有机磷农药的分子结构和化学性质.浙江林学院学报.1988,5(3):318-327.）。痕量二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测方法主要有气相色谱法，由于代谢物结构不稳定，气相色谱法采用五氟苄基苯（PFBBr）对代谢物进行衍生化处理，但存在衍生时间长，灵敏度不高等问题（杨玉林,芮振荣,王宏,等.气相色谱法分析尿样中六种有机磷农药代谢产物[J].中国卫生检验杂志,2003,13(1):24；邬春华,郑力行,周志俊.尿中有机磷农药代谢产物的测定[J].复旦学报,2006,33(4):552-554）；采用五氟溴苄基苯（PFBBr）衍生时，将羟基屏蔽以减小O,O-二甲基二硫代磷酸酯或O,O-二乙基二硫代磷酸酯的活性，再进行气相色谱-FPD法进行检测，实际测得土壤中O,O-二甲基二硫代磷酸酯或O,O-二乙基二硫代磷酸酯灵敏度分别为0.5mg/kg和1.0mg/kg，远低于液相色谱-质谱法。
此外，O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯遇热甲基化为三甲基硫代磷酸酯和O,O-二乙基-S-甲基二硫代磷酸酯（如图1），转化效率不高，且转化速率较慢，因而峰形对称性不好，峰形不尖锐，无法准确定量。
二硫代磷酸酯类农药代谢物极性较强，使用普通的液相色谱柱无法保留，即使使用对极性化合物保留较强的HILIC液相色谱柱，仍很难保留且无法将两种化合物进行分离，因此无法采用液相色谱-质谱法直接进行检测。采用液相色谱-串联质谱法直接测定二硫代磷酸酯类农药代谢物，色谱保留时间过短，代谢物无法完全分离，造成基质效应过高，实际样品灵敏度较低（Schenke D..Analytical Method for the determination ofO,O-diethylphosphate and O,O-diethylthiophosphate in faecal sample[J].Chemosphere,2000,41:1313-13201；刘倩,谢曼丹,朱育芬.硫逐磷酸酯和二硫代磷酸酯的电喷雾电离质谱[J].分析测试学报.2000,19(5):24-27.）。
总之，采用气相色谱测定二硫代磷酸酯类农药代谢物（O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯）时，以五氟溴苄基苯作为衍生化试剂，存在衍生时间长，灵敏度低的缺陷，而且这种衍生化试剂不适合在液相色谱-串联质谱上检测；直接采用液相色谱-串联质谱的检测方法又存在无法保留，灵敏度低等问题。
发明内容
针对现有的二硫代磷酸酯类农药代谢物检测方法所存在的缺陷，本发明提供了一种新的二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法，该方法采用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸作为二硫代磷酸酯类农药代谢物的衍生化试剂，所获得的衍生化产物易溶于水相，适合液相色谱-质谱检测，检测灵敏度远高于五氟溴苄基苯衍生后用气相色谱进行检测的方法，且衍生时间也显著缩短。
为此，本发明首先提供了3-溴甲基-4-硝基苯甲酸作为二硫代磷酸酯类农药代谢物高效液相色谱-串联质谱检测的衍生化试剂的新用途；
本发明进一步提供了一种二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法，该方法包括：将待检测的含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的土壤样品进行前处理，得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物；用衍生化试剂将提取物进行衍生化处理，获得衍生化产物；将衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测，获得样品中二硫代磷酸酯类农药代谢物的含量；其中，所述的衍生化试剂是3-溴甲基-4-硝基苯甲酸。
本发明通过实验发现，3-溴甲基-4-硝基苯甲酸极性与二硫代磷酸酯类农药相似，在乙腈中溶解度高，结构小于五氟溴苄基苯，亲和取代位阻较小，更有利于衍生化反应的进行，采用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化处理，衍生化产物易溶于水相，适合液相色谱-质谱检测，检测灵敏度远高于五氟溴苄基苯衍生后用气相色谱进行检测，衍生时间缩短，更适合二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测。
本发明中所述的二硫代磷酸酯类农药代谢物优选为O,O-二甲基二硫代磷酸酯或O,O-二乙基二硫代磷酸酯；
本发明特别提供了一种O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的高效液相色谱-串联质谱检测方法，该方法包括：将待检测的含有O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的土壤样品进行前处理，获得O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的提取物；用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的提取物进行衍生化处理，获得衍生化产物；将衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测，获得样品中O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的含量。
本发明优选在氮气保护加热条件下对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化处理。
本发明检测方法中所述的前处理方式依次包括：（1）从土壤样品中提取得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物；（2）将提取物进行净化处理。
步骤（1）中所述的从土壤样品中提取得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物的方法包括：将土壤样品风干后加入丙酮作为提取溶剂进行振荡提取，将提取液离心后，取上清液；将上清液旋转蒸发近干后用乙酸乙酯溶解得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物。有机磷农药及其代谢产物在乙酸乙酯、乙腈及CHCl3等试剂中均有较好的溶解度，考虑到对环境的污染及乳化问题，通常提取试剂宜采用乙腈、丙酮或乙酸乙酯。土壤中成分较为复杂，腐殖质含量高的土壤色素含量较高，而乙酸乙酯对色素的提取效率不高，提取物色素类杂质含量较低，而且乙酸乙酯可以有效地降低土壤中各种无机盐类的溶解，因此本发明优选采用乙酸乙酯作为提取溶剂从土壤中提取二硫代磷酸酯类农药代谢物，再用活性炭小柱再除去残留的色素，效果较为理想。
在对二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物进行净化处理时，本发明最初的试验中采用反相C18净化小柱对提取物进行浓缩，浓缩后用5%甲醇的乙酸氨溶液溶解过柱，由于O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯极性较强，固相萃取柱保留效果不好，损失较大；本发明通过进一步的试验发现，将土壤样品用乙酸乙酯溶解后用活性炭去掉残留的色素后，再采用弗罗里硅土串联小柱可以有效除去土壤中的色素及大分子的非极性有机物，净化效果较好，因而本发明优选采用活性炭小柱加弗罗里硅土串联固相萃取柱的正相净化方式对提取物进行净化。
本发明将衍生产物用ACQUITY UPLC BEH C18液相色谱柱分离，流动相为乙腈和5mmol的乙酸铵，采用梯度洗脱模式，XEVO TQ三重四极质谱仪检测，采用负多反应监测模式。
本发明将O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的衍生产物进行质谱分析发现，两种物质的分子离子峰分别为336和365，丰度较高，说明反应产物纯度较高，质谱电离较好。336和365进行二级电离，分别可以得到292、157、125和321、185、153等离子，也说明336和365分别为O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的衍生产物，292是O,O-二甲基二硫代磷酸酯衍生产物脱掉羧基后的离子，157是O,O-二甲基二硫代磷酸酯的离子峰，两个离子都具有特征性，而292分子量大干扰少，且响应值较高；因此，本发明选择192和157作为O,O-二甲基二硫代磷酸酯衍生产物的监测离子，192为定量离子；O,O-二乙基二硫代磷酸酯与O,O-二甲基二硫代磷酸酯相似，衍生产物的监测离子分别为321和185，321为定量离子。
回收率、精密度、定量限及线性实验表明，本发明检测方法对于土壤中O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的回收率为79.3～90.7%，精密度为9.38%和5.93%，检出限为0.01mg/kg和0.005mg/kg，在0.005～1.000mg/kg范围内线性相关系数为0.9992和0.9997，具有良好的回收率、定量限、精密度和线性，符合农产品中农药残留及其代谢物检测方法的要求，适合于科研或日常工作中有机磷农药代谢物的检测。
附图说明
图1O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的结构式。
图23-溴甲基-4-硝基苯甲酸对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化反应的通式。
图3O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯衍生产物质谱图。
图40.01μg/mLO,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯衍生产物多反应监测质谱图。
具体实施方式
通过下列实施例将更具体说明本发明的实施方式，但是应理解所述实施例仅是范例性的，不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改或替换均落入本发明的保护范围。仪器与试剂
液相色谱-质谱/质谱联用仪（Waters公司）；振荡器（IKA公司）；固相萃取装置等。
二硫代磷酸酯类农药代谢产物标准品：O,O-二甲基二硫代磷酸酯（O,O-dimethyl dithiophosphrate，97%，维赛诺化学技术有限公司），O,O-二乙基二硫代磷酸酯（O,O-diethyl phosphorodithioate，97%，维赛诺化学技术有限公司），标准品用乙腈溶解，4℃冰箱保存，使用时用流动相定容；衍生试剂：3-溴甲基-4-硝基苯甲酸（Sigma）；500mg6mL活性炭固相萃取柱及500mg6mL弗罗里硅土固相萃取小柱（Supelco）；乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯试剂。
实施例1土壤中O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯含量的高效液相色谱-串联质谱检测方法的建立
1、实验方法
1.1、样品前处理及衍生
土壤样品风干后，过40目筛，称取约5g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加入20mL丙酮，漩涡混匀后，用振荡器振荡提取10min，然后4000r/min离心5min，取上层清液，残渣在提取一次，合并提取液，旋转蒸发至近干，用2mL乙酸乙酯溶解，过500mg6mL活性炭和500mg6mL弗罗里硅土串联固相萃取柱（小柱经5mL乙酸乙酯活化处理），再用1mL乙酸乙酯洗涤样品瓶两次，过串联小柱，再用5mL乙酸乙酯洗脱固相萃取柱，流出液氮吹至近干。
残渣用200μL乙腈溶解，加入干燥后的无水碳酸钾约10mg，3-溴甲基-4-硝基苯甲酸30μL，充入氮气后密封瓶口，置于50℃烘箱中衍生化反应5h，反应完成后加入1mL乙腈和5mmol乙酸铵（V:V=25:75）的流动相，尽快进行测定。
1.2、液相色谱条件
液相色谱为Waters ACQUITY Ultra Performance液相色谱系统，并配有溶剂管理器，液相色谱柱采用ACQUITY UPLC BEH C18（50mm×2.1mmi.d.,1.7um），柱温30℃，流动相溶剂A为乙腈，溶剂B为5mmol的乙酸铵，采用梯度洗脱模式（表1）。
表1O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯衍生产物优化后的液相色谱梯度洗脱条件
| 时间（min） | 流速（ml/min） | A溶剂（%） | B溶剂（%） |
| 0.0 | 0.25 | 30 | 70 |
| 0.5 | 0.25 | 30 | 70 |
| 1.0 | 0.25 | 65 | 35 |
| 2.0 | 0.25 | 65 | 35 |
| 2.5 | 0.25 | 30 | 70 |
| 3.0 | 0.25 | 30 | 70 |
1.3、质谱条件
Waters XEVO TQ三重四极质谱仪，并配有负多反应监测（MRM）模式，检测条件为：毛细管电压（2.5kV）；离子源温度（150℃）；脱溶剂气（N2，650L/h）；雾帘气（N2，50L/h）；脱溶剂气温度（400℃）；碰撞气为氩气；数据处理为MassLynx v4.1系统。
表2O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯衍生产物质谱条件
注：*为定量离子；Note：*is the quantitative ion
2实验结果
2.1前处理条件的选择
有机磷农药及其代谢产物，在乙酸乙酯、乙腈及CHCl3等试剂中均有较好的溶解度，考虑到对环境的污染及乳化问题，通常提取试剂宜采用乙腈、丙酮或乙酸乙酯。土壤中成分较为复杂，腐殖质含量高的土壤色素含量较高，而乙酸乙酯对色素的提取效率不高，提取物色素类杂质含量较低，而且乙酸乙酯可以有效地降低土壤中各种无机盐类的溶解，因此采用乙酸乙酯进行提取，用活性炭小柱再除去残留的色素，效果较为理想。净化试验中选择反相C18净化小柱，浓缩后用5%甲醇的乙酸氨溶液溶解过柱，由于O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯极性较强，固相萃取柱保留效果不好，损失较大；正相净化方式的选择，用乙酸乙酯溶解，过活性炭和弗罗里硅土串联小柱，可以有效除去土壤中的色素及大分子的非极性有机物，净化效果较好，因而采用活性炭和弗罗里硅土串联固相萃取柱的正相净化方式。2.2检测条件的选择
传统有机磷农药的检测一般采用气相色谱或气质联用的方法，但在检测二硫代磷酸酯类农药代谢物过程中，都遇到了一些问题。O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯遇热甲基化为三甲基硫代磷酸酯和O,O-二乙基-S-甲基二硫代磷酸酯（图1），转化效率不高，且转化速率较慢，因而峰形对称性不好，峰形不尖锐，无法准确定量。二硫代磷酸酯类农药代谢物极性较强，使用普通的液相色谱柱无法保留，即使使用对极性化合物保留较强的HILIC液相色谱柱，仍很难保留且无法将两种化合物进行分离，因此无法采用液相色谱-质谱法直接进行检测。
二硫代磷酸酯类农药代谢物中磷原子接受巯基中的硫原子提供的孤对电子形成π键，其一对电子供给硫原子形成σ配键，因此氧原子上的氢易失去电子，发生亲和取代反应[9]。二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测多数采用五氟溴苄基苯（PFBBr）衍生，将羟基屏蔽以减小O,O-二甲基二硫代磷酸酯或O,O-二乙基二硫代磷酸酯的活性，再进行气相色谱-FPD法进行检测，实际测得土壤中O,O-二甲基二硫代磷酸酯或O,O-二乙基二硫代磷酸酯灵敏度分别为0.5mg/kg和1.0mg/kg，远低于液相色谱-质谱法，衍生物不溶于水相溶剂，不适合液相色谱-质谱法进行检测。
采用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸作为衍生化试剂对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化处理时，3-溴甲基-4-硝基苯甲酸极性与二硫代磷酸酯类农药相似，在乙腈中溶解度高，结构小于五氟溴苄基苯，亲和取代位阻较小，更有利于衍生化反应的进行，衍生化反应的通式见图2：衍生化产物易溶于水相，适合液相色谱-质谱检测，检测灵敏度远高于五氟溴苄基苯衍生后用气相色谱进行检测，衍生时间缩短，更适合二硫代磷酸酯类农药代谢物的检测。
将O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的衍生产物进行质谱分析（图1），两种物质的分子离子峰分别为336和365，丰度较高，说明反应产物纯度较高，质谱电离较好。336和365进行二级电离，分别可以得到292、157、125和321、185、153等离子，也说明336和365分别为O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的衍生产物，292是O,O-二甲基二硫代磷酸酯衍生产物脱掉羧基后的离子，157是O,O-二甲基二硫代磷酸酯的离子峰，两个离子都具有特征性，而292分子量大干扰少，且响应值较高，因此选择192和157作为O,O-二甲基二硫代磷酸酯衍生产物的监测离子，192为定量离子；O,O-二乙基二硫代磷酸酯与O,O-二甲基二硫代磷酸酯相似，衍生产物的监测离子分别为321和185，321为定量离子（图2）。
试验例1 回收率试验
试验采用标准添加法进行回收率实验，5.0g土壤中分别添加1.0mL0.025μg/mL、0.100μg/m和0.250μg/mL的O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯水溶液，摇匀后放置2h，前处理后进行测定（按照实施例1所建立的方法进行测定），每个水平测定3次，样品的添加回收率为79.3～90.7%，符合土壤中农药代谢物检测的要求（表3）。
表3土壤中二硫代磷酸酯类农药代谢物的回收率实验结果
试验例2 精密度试验
采用标准添加法对添加样品分别进行精密实验，5.0g土壤中分别添加1.0mL0.250μg/mL的O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯水溶液，摇匀后放置2h，前处理后进行测定（按照实施例1所建立的方法进行测定），每个水平测定6次（表4），样品的RSD为9.38%和5.93%，本方法的室内精密度实验结果符合测定的要求。
表4土壤中二硫代磷酸酯类农药代谢物的精密度实验结果
试验例3 定量限及线性试验
将O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯水溶液添加至5.0g土壤中，前处理后进行测定，浓度逐级降低，信噪比为10时得测定浓度为定量限（表4）；将逐级稀释后的O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯标准品衍生后，进行检测，以峰面积为纵坐标，标准品的质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，并计算相关系数，在0.005～1.000mg/kg线性范围内均线性良好，线性相关系数均满足实验室检测的要求（表4）。
试验例4 本发明检测方法的具体应用
在哈尔滨市民主乡实验田随机采集10份土壤样本，以实施例1所建立的检测方法进行检测，发现一个韭菜地土壤样本中检测到0.0143mg/kg O,O-二甲基二硫代磷酸酯，说明该土壤中曾使用过二硫代磷酸酯类农药，其它样本均未检出。
Claims (10)
1.3-溴甲基-4-硝基苯甲酸作为二硫代磷酸酯类农药代谢物衍生化试剂的应用。
2.按照权利要求1所述的应用，其特征在于：所述二硫代磷酸酯类农药代谢物指示物是O,O-二甲基二硫代磷酸酯或O,O-二乙基二硫代磷酸酯。
3.一种二硫代磷酸酯类农药代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法，该方法包括：将待检测的含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的土壤样品进行前处理，得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物；用衍生化试剂将提取物进行衍生化处理，获得衍生化产物；将衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测，获得样品中二硫代磷酸酯类农药代谢物的含量；其特征在于：所述的衍生化试剂是3-溴甲基-4-硝基苯甲酸。
4.按照权利要求3所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：氮气保护加热条件下用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对二硫代磷酸酯类农药代谢物进行衍生化处理。
5.按照权利要求3所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于，所述的前处理依次包括：（1）从土壤样品中提取得到含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的提取物；（2）将提取物进行净化处理。
6.按照权利要求5所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：步骤（1）中采用以下方式将土壤样品中提取得到含有二硫代磷酸酯类农药代谢物的提取物：将土壤样品风干后加入丙酮作为提取溶剂进行振荡提取，将提取液离心后，取上清液；将上清液旋转蒸发近干后用乙酸乙酯溶解得到二硫代磷酸酯类农药代谢物提取物；步骤（2）中采用正相净化方式对提取物进行净化。
7.按照权利要求6所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：步骤（3）中所述的正相净化方式是采用活性炭小柱加弗罗里硅土串联固相萃取柱的正相净化方式对提取物进行净化处理。
8.按照权利要求3所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：将衍生化产物用ACQUITY UPLC BEH C18液相色谱柱分离，流动相为乙腈和5mmol的乙酸铵，采用梯度洗脱模式；收集的洗脱物用XEVO TQ三重四极质谱仪进行检测，采用负多反应监测模式。
9.一种O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的高效液相色谱-串联质谱检测方法，该方法包括：将待检测的含有O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的土壤样品进行前处理，得到含有O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的提取物；用3-溴甲基-4-硝基苯甲酸对提取物进行衍生化处理，获得衍生化产物；将衍生化产物用液相色谱-串联质谱进行检测，获得样品中O,O-二甲基二硫代磷酸酯和O,O-二乙基二硫代磷酸酯的含量。
10.按照权利要求9所述的高效液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：选择192和157作为O,O-二甲基二硫代磷酸酯衍生化产物的监测离子，192为定量离子；选择321和185作为O,O-二乙基二硫代磷酸酯衍生化产物的监测离子，321为定量离子。
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Cited By (3)
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Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| TOSHIAKI MATSUI，ET AL: "Discovery of Novel Phosphonic Acid Derivatives as New Chemical Leads for Inhibitors of TNF-a Production", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY》 * |
| YEONG-BEOM LEE，ET AL: "Simple synthetic route to soluble polyimides via nitro-displacement reaction and their second-order nonlinear optical properties", 《J. MATER. CHEM.》 * |
| 杨玉林等: "气相色谱法分析尿样中六种有机磷农药代谢产物", 《中国卫生检验杂志》 * |
| 苏寿承: "有机磷农药的分子结构和化学性质", 《浙江林学院学报》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105891354A (zh) * | 2016-03-31 | 2016-08-24 | 山东五洲检测有限公司 | 一种高粱种植土壤中倍硫磷含量的检测方法 |
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| CN115436556A (zh) * | 2022-09-20 | 2022-12-06 | 常州佳德医药科技有限公司 | 一种利用反相液相色谱法测定硼酸酯类化合物纯度的方法及应用 |
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Application publication date: 20140305 Assignee: Heilongjiang Hua Testing Technology Co.,Ltd. Assignor: HEILONGJIANG ENTRY EXIT INSPECTION AND QUARANTINE TECHNICAL CT Contract record no.: 2015230000115 Denomination of invention: High performance liquid chromatography-tandem mass spectrum detection method of dithiophosphate pesticide metabolites Granted publication date: 20150603 License type: Exclusive License Record date: 20150910 |
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Effective date of registration: 20161017 Address after: 150000 West research building, Lunan thermal power freight yard, Limin Development Zone, Harbin, Heilongjiang, Nanjing Patentee after: Heilongjiang Hua Testing Technology Co.,Ltd. Address before: 150001 No. 9 Gan Gan Road, Nangang District, Heilongjiang, Harbin Patentee before: HEILONGJIANG ENTRY EXIT INSPECTION AND QUARANTINE TECHNICAL CT |
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