CN103603138B - 一种用于角膜组织移植的plga纤维膜的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明用静电纺丝的方法制备了一种用于角膜组织移植、可生物可降解的PLGA纤维膜。本发明涉及一种合成的、无菌的可以快速降解的纤维膜，该纤维膜支持分离的角膜上皮细胞快速生长，将完好的组织移植物直接放到膜上时角膜上皮细胞具有向外生长的能力，分离的细胞或者从角膜移植物上向外生长的细胞在所本发明制备的膜上有很好的传输性能。本发明制备的纤维膜可以直接用作人体羊膜的代替物，在临床角膜再生领域中具有广阔的应用前景。

Description

一种用于角膜组织移植的PLGA纤维膜的制备方法
技术领域
本发明涉及一种纤维膜的制备方法，尤其涉及一种用于角膜组织移植、可生物可降解的PLGA纤维膜的制备方法。
背景技术
目前世界上仅仅有几个专科眼科实验室可以用纤维蛋白或者人体羊膜实现角膜上皮细胞到角膜的转移。一种用人工培养细胞的方法就是让细胞在角膜移植物上原位生长，这样至少可以在实验室水平上对那些单一角膜干细胞不足的病人来说可以避免角膜上皮细胞扩展的需要。
全厚度的角膜移植可以暂时修复患有角膜干细胞缺乏的病人的视力，但是最终因为必需的角膜干细胞的缺乏将会使移植失败。为了代替丧失的干细胞，角膜上皮细胞的培养及转移，是世界上很多专科中心治疗病人的一种可以选择的方法，任何可能的时候可以从病人的另一只没有感染的眼睛进行细胞的培养，或者从捐献者的眼中提取，后者往往需要经历更长时间的免疫反应。
现有技术已经用合成的或天然的材料来代替人体羊膜。这样的材料包括纤维蛋白、胶原蛋白膜、热响应型基底和合成高分子膜，这些材料中只有人体角膜和纤维蛋白膜可以用作临床角膜再生中细胞转移的载体。
用于传输角膜干细胞的膜所必须有的特征就是它可以牢固的粘附细胞并且支撑它们的增殖和转移。另外，这种膜必须具有临床上最低的危险性，而且能够固定到细胞培养的眼睛上并且在几周之后将角膜干细胞牢固地附着到角膜上之后自身降解掉且不会引起免疫反应。
发明内容
本发明的目的是简化和安全化用于角膜干细胞不足造成视力丧失的病人的角膜上皮细胞再生的方法，建立一种合成的、无菌的可以快速降解的膜，这种膜可以直接用作人体羊膜的代替物以开发实验室培养细胞和小的角膜移植物上的细胞生长。现成的膜和角膜上皮细胞培养的结合可以使这项技术对很多手术和原来只有在很少的角膜干细胞治疗中心才可以接受治疗的病人来说都变得可取。
本发明中用静电纺丝的方法制备了一种用于角膜组织移植、可生物降解的PLGA纤维膜的制备方法，具体步骤如下：
(1)聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA)(60∶40，分子量为60kg／mol)溶解在二氯甲烷中配制成50wt％的溶液。然后将溶液装入到四个10mL的注射器中，注射针的内径为0.4mm；注射器与注射泵连接，静电纺丝的参数为：聚合物溶液的流速为0.8～1.2mL／h，纺丝电压为20～35kV，接收端装置为覆盖有聚四氟乙烯纤维布的转速为3500～5000rpm的转筒；最后得到的膜的厚度为80～120μm。
(2)在25℃和温和的搅拌前提下将聚合物溶解在1，1，1,3,3,3-六氟异丙醇中配制成不同浓度(40wt％、60wt％)的纺丝液。将聚合物溶液装入到10mL的塑料注射器中，连接的注射针的内径为0.4mm。纺丝参数如下：纺丝电压为20～35kV，接收装置为旋转的圆筒(直径100mm，长度300mm)，纺丝距离为150mm。得到的膜在25℃下真空干燥48h以彻底地去除掉溶剂。
本发明涉及的纤维膜支持分离的角膜上皮细胞快速生长，将完好的组织移植物直接放到膜上时角膜上皮细胞具有向外生长的能力。分离的细胞或者从角膜移植物上向外生长的细胞在本发明所制备的膜上有很好的传输性能。
具体实施方式
为了加深对本发明的理解，下面结合具体实例对本发明做进一步的详述：
(1)聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA)(60∶40，分子量为60kg／mol)溶解在二氯甲烷中配制成50wt％的溶液，然后将溶液装入到四个10mL的注射器中，注射针的内径为0.4mm；注射器与注射泵连接，静电纺丝的参数为：聚合物溶液的流速为0.8mL／h，纺丝电压为20kV，接收端装置为覆盖有聚四氟乙烯纤维布的转速为3500rpm的转筒；最后得到的膜的厚度为80～120μm。
(2)在25℃和温和的搅拌前提下将聚合物溶解在1，1，1,3,3,3-六氟异丙醇中配制成不同浓度(40wt％、60wt％)的纺丝液。将聚合物溶液装入到10mL的塑料注射器中，连接的注射针的内径为0.4mm；纺丝参数如下：纺丝电压为20kV，接收装置为旋转的圆筒(直径100mm，长度300mm)，纺丝距离为150mm，得到的膜在25℃下真空干燥48h以彻底地去除掉溶剂。

Claims (3)

1.一种用于角膜组织移植的PLGA纤维膜的制备方法，其步骤为：
聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA)溶解在二氯甲烷中配制成50wt％的溶液，然后将溶液装入到四个10mL的注射器中，注射针的内径为0.4mm，注射器与注射泵连接；静电纺丝的参数为：聚合物溶液的流速为0.8～1.2mL/h，纺丝电压为20～35kV，接收端装置为覆盖有聚四氟乙烯纤维布的转速为3500～5000rpm的转筒；最后得到的膜的厚度为80～120μm；
所述聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA)为60:40，分子量为60kg/mol。
2.如权利要求1所述的PLGA纤维膜的制备方法，其特征在于：所述纺丝电压为20kV。
3.如权利要求1所述的PLGA纤维膜的制备方法，其特征在于：所述转筒直径为100mm，长度为300mm。
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