CN103588732B

CN103588732B - 水杨酸酰胺衍生物的结晶

Info

Publication number: CN103588732B
Application number: CN201310634829.2A
Authority: CN
Inventors: 马俊; 余卫麟
Original assignee: SHENZHEN WANHE PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: SHENZHEN WANHE PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2013-12-02
Filing date: 2013-12-02
Publication date: 2015-03-25
Anticipated expiration: 2033-12-02
Also published as: CN103588732A

Abstract

本发明公开了水杨酸酰胺衍生物的结晶。具体地说，本发明公开了以下式1化合物：其使用Cu‐Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，在约9.4°处有衍射峰。本发明还公开了该式1化合物的制备方法，包含它们的药物组合物，以及该化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、酯、前药、异构体在制备用于治疗或预防癌症、炎症、自身免疫疾病、糖尿病和糖尿病并发症、感染、心血管疾病和缺血-再灌注损伤的药物中的用途。本发明式1化合物具有良好的药物性质。<CNIPR:IMG <CNIPR:IMG file="DDA0000427778480000011.GIF" wi="52" he="36" img-format="tif"

Description

水杨酸酰胺衍生物的结晶

技术领域

本发明涉及式1所示水杨酸酰胺衍生物的结晶，以及其制备方法。该水杨酸酰胺衍生物结晶可供治疗癌症、炎症、自身免疫疾病、糖尿病和糖尿病并发症、感染、心血管疾病和缺陷再灌注损伤。

背景技术

核因子κB(NF-κB，Nuclear factor-kappa B)活化参与各种疾病，包括癌症、糖尿病、心血管疾病、自身免疫疾病、病毒复制、脓毒性休克、神经变性疾病、运动失调性毛细血管扩张症(AT)、关节炎、哮喘、炎性肠病和其它炎性病症。例如，革兰氏阴性细菌脂多糖(LPS)活化NF-κB可产生脓毒性休克，因为NF-κB过度激活许多细胞因子和修饰酶的转录，它们的表达延长可不利地影响关键器官，例如心脏和肝脏的功能(Arcaroli等.，2006；Niu等.，2008)。

类似地，自身免疫疾病，例如全身性红斑狼疮也可能涉及NF-κB的活化。NF-κB转录因子对于适当的树突细胞成熟至关重要，其丧失是全身性红斑狼疮的标志(Kalergis等.，2008；Kurylowicz和Nauman，2008)，此外，在慢性阿尔茨海默病中，淀粉样蛋白β肽导致反应活性氧中间体的产生，通过NF-κB位点间接活化基因表达(Giri等.，2005)。

骨的破坏性侵蚀或骨质溶解是炎性病症，例如类风湿性关节炎(RA)、牙周病和假体周围骨质溶解的主要并发症。RA是影响约1.0%美国成年人的自身免疫疾病，女性和男性之比是2.5到l(Lawrence等.，1998)。其标志是导致主要病态的渐进性关节破坏。牙周病非常普遍，影响全球高达90%的人口。众所周知其是成年人牙齿丧失的主要原因(Pihlstrom等.，2005)。尽管很普遍，但牙周骨侵蚀的发生机制仍不清楚，虽然看来是宿主对口腔中存在的病原微生物的反应触发该过程。外源性植入物器件周围的慢性骨再吸收作用导致假体周围骨质溶解，直至丧失固定作用(Harris，1995)，据信其是针对磨损碎片颗粒的先天免疫反应所致，获得性免疫系统影响不大(Goldring等.，1986)。

虽然这些病症由不同原因引发，通过各种途径而进展，但这些病症的病理性过程中的重要共同因素是发炎组织中NF-κB途径的组成型活化驱动的促炎性细胞因子过度产生。与全身性、激素调控的骨病理状况，例如骨质疏松症不同，这些病症中发现的骨侵蚀大多定位于发炎的组织。在许多这些疾病中发现，这些发炎组织还产生促炎细胞因子，即，TNF-α、IL-1和IL-6，这些促炎细胞因子进而参与破骨细胞分化信号传导和骨再吸收活性。因此，炎性骨质溶解是发炎组织中NF-κB驱动促炎细胞因子推动的破骨细胞募集和活化增强所致。

炎性肠病(IBD)包括涉及胃肠道的许多慢性复发性炎性疾病。IBD的两种最常见的形式是克罗恩病和溃疡性结肠炎，二者的区别在于独特的组织病理学特性和免疫应答(Atreya等.，2008；Bouma和Strober，2003)。目前的治疗疗效有限，还可能有副作用使得患者和医生渴望能控制这些疾病的慢性复发性炎症性质的新疗法。

虽然导致克罗恩病和溃疡性结肠炎的确切病因尚未知，但通常认为是粘膜免疫系统对正常肠菌群的不当和正进行的活化导致(Tilg等.，2008)。因此，驻留型巨噬细胞、树突细胞和T细胞活化并开始主要分泌NF-κB-依赖性趋化因子和细胞因子。NF-κB介导关键促炎介质的过度产生导致人IBD和结肠炎动物模型的启动和进展(Neurath等.，1998；Wirtz和Neurath，2007)。具体地说，IBD患者的巨噬细胞表现出高水平的NF-κB DNA结合活性并伴有白介素(IL)l、IL6和肿瘤坏死因子TNFα的产生增加(Neurath等.，1998)。此外，NF-κB在活化T辅助细胞l(Thl)和T辅助细胞2(Th2)细胞因子中起到关键作用，二者是促进和维持炙症所需(Barnes，1997)。由于NF-κB在IBD中起到的核心作用，人们付出大量努力试图开发靶向该途径的疗法。

NF-κB显示在来自乳腺、卵巢、结肠、胰腺、甲状腺、前列腺、肺、头颈、膀胱和皮肤肿瘤的许多癌症衍生细胞系中组成型表达(Calzado等.，2007)。B-细胞性淋巴瘤、霍奇金病、T-细胞性淋巴瘤、成人T细胞白血病，急性淋巴细胞性白血病、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞性白血病和急性骨髓性白血病中也观察到。NF-κB作为防御性应答的一部分是正常炎症的关键介质；然而，慢性炎症可导致癌症、糖尿病和许多上述其它疾病。已鉴定了几种促炎基因产物在致癌过程、血管发生、侵袭和肿瘤细胞转移中介导关键作用。这些基因产物有TNF-α及其超家族的成员，IL-1α、IL-1D、IL-6、IL-8、IL-18、趋化因子、MMP-9、VEGF、COX-2和5-LOX。所有这些基因的表达主要由转录因子NF-κB调控，其在大多数肿瘤中有组成型活性并由致癌物(例如香烟的烟)、肿瘤促进剂、致癌性病毒蛋白(HIV-tat、KHSV、EBV-LMP1、HTLVl-tax、HPV、HCV和HBV)、化疗剂和γ射线诱导(Aggarwal等.，2006)。这些观察结果暗示抑制NF-κB的抗炎剂应该可能用于预防和治疗癌症。

流感病毒蛋白血凝素还活化NF-κB，该活化可导致细胞因子的病毒诱导和一些流感相关症状(Flory等.，2000；Pahl和BaeueR¹e，1995)。

动脉粥样硬化相关的低密度脂蛋白的氧化脂质活化NF-κB，然后活化其它基因，例如炎性细胞因子(Liao等.，1994)。此外，动脉粥样硬化易感小鼠在喂食致动脉粥样硬化饮食时显示NF-κB活化，因为它们对脂质过氧化产物累积、炎性基因诱导和NF-κB转录因子活化相关的动脉粥样硬化病损形成敏感(Liao等.，1994)。动脉粥样硬化的另一重要原因是凝血酶，其通过NF-κB活化而刺激血管平滑肌细胞增殖(Maruyama等.，1997)。IκB阻遏蛋白的截短形式(IκBα)显示是电离辐射超敏性的原因，在组成型水平NF-κB-活化的运动失调性毛细血管扩张症(AT)细胞中其对DNA合成调控有缺陷(Jung等.，1995)。AT细胞的IκBα中的该突变显示导致NF-κB途径组成型活化的阻遏蛋白灭活。鉴于所有这些发觋，NF-κB的异常活化或表达明显与各种病理学状况相关。

人单核细胞中，HIV-1的感染和生命周期与NF-κB途径紧密相连。病毒感染导致NF-κB活化，从而产生AIDS标志性的T细胞过度刺激和最终耗尽(综述见(Argyropoulos和Mouzaki，2006)。例如，NF-κB调节作为HIV-1关键受体的CCR⁵的表达(Liu等.，1998)。CCR-5启动子的缺失分析证明3’-远端NF-κB/AP-l位点的丧失使得转录降低>95%(Liu等.，1998)。这些研究提示NF-κB的组成型表达导致CCR-5受体信息急剧降低。由于靶T-细胞表面上CCR⁵的表达水平影响HIV-1进入动力学特性(Ketas等.，2007；Platt等.，1998；Reeves等.，2002)，下调CCR⁵可约束大量产生病毒库的感染细胞群扩散。还有报道说NF-κB影响CXCR⁴表达(Helbig等.，2003)，提示NF-κB抑制剂可能同样有效抗感染后期期间出现的X4-向性分离物。整合的DNA-前-病毒的转录需要NF-κB(Baba，2006；Iordanskiy等.，2002；Mukerjee等.，2006；Palmieri等.，2004；Rizzi等.，2004；Sui等.，2006；Williams等.，2007)。事实上，缺乏NF-κB活化导致具有潜伏病毒的细胞群产生，这是消除受感染患者的病毒的主要障碍(Williams等.，2006)。

NF-κB促进超过150种靶基因对炎性刺激物起反应而表达。这些基因包括白介素-1、-2、-6和肿瘤坏死因子受体(TNF-R)(这些受体介导凋亡并起到炎症调节剂的作用)以及编码免疫受体、绌胞粘附分子和酶，例如环加氧酶-II和诱生型-氧化氮核酶(iNOS)的基因(Karin，2006；Tergaonkar，2006)。其还在病毒感染，例如HCV和HIV-1相关疾病的进展中起关键作用。

NF-κB家族的成员包括RelA/p65、RelB、c-Rel、p50/p105(NF-κBl)和p52/pl00(NF-κB2)(Hayden和Ghosh，2004；Hayden等.，2006a；Hayden等.，2006b)。Rel家族成员作为同源二聚体或异源二聚体起作用，对位于NF-κB-调节基因的启动子结构域内的顺式结合元件的特异性不同(Bosisio等.，2006；Natoli等.，2005；Saccani等.，2004)。经典NF-κB-由RelAlp65和p50异源二聚体构成，是NF-κB研究得最清楚的形式(Burstein和Duckett，2003；Hayden和Ghosh，2004)和其中的参考文献)。细胞刺激前，经典NF-κB驻留在细胞质中作为与IκBα抑制蛋白结合的无活性复合物。NF-κB的诱导剂，例如细菌脂多糖、炎性细胞因子或HIV-1Vpr蛋白通过活仳磷酸化IκBα的IκB-激酶复合物(IKK)而从细胞质复合物释放活性NF-κB(Greten和Karin，2004；Hacker和Karin，2006；Israel，2000；Karin，1999；Scheidereit，2006)。IκB的磷酸为随后的泛素化和通过26S蛋白酶体降解提供了标记。游离NF-κB二聚体移位进入核，在核中刺激它们的靶基因转录。

外消旋脱羟基甲基环氧醌霉素(DHMEQ)的分子设计是依据从拟无枝菌酸菌(Amycolatopsis)分离的抗生素环氧醌霉素C(Chaicharoenpong等.2002)。DHMEQ是采用五步骤从2,5-二甲氧基苯胺合成的外消旋物。利用手性柱分离对映体产生(+)和(-)对映体。(-)-对映体显示抑制NF-κB强于(+)-对映体(Umezawa等.2004)。DHMEQ经鉴定为特异性抑制NF-κB移位入核(Ariga等.2002)。具体地说，其以1：1的化学计量比共价修饰p65和其它Rel同源蛋白中的特定半胱氨酸残基(Yammamoto等.2008)。作为NF-κB抑制剂，在各种疾病的动物模型中广泛测试了DHMEQ，证明包括洽疗实体瘤、血液恶性肿瘤、关节炎、肠缺血和动脉粥样硬化在内的广谱效力(Watanabe等.2006)。因此，DHMEQ可用作癌症和炎症的治疗(Takeuchi等.2003)。CN1368954A(中国专利申请号00811487.0)公开了DHMEQ(即其中的DHM2EQ，DHM2EQ和DHMEQ二者在本文中具有相同的含义，可互换使用，在本发明中亦可称为式1化合物或式I化合物)的合成方法，其中在最终步骤中，将溶解有DHMEQ的乙酸乙酯溶液减压浓缩，使所得淡茶色固体悬浮于甲醇中，搅拌洗涤，得到终产物DHMEQ，已经发现，该结晶性产物具有较差的化学稳定性。

因此，本领域技术人员仍然期待有一种以具有良好工艺特征的新方法来制备DHMEQ，特别是期待获得一种具有优良性质例如具有优良稳定性的产物。

发明内容

本发明的目的在于为临床提供一种新颖的DHMEQ结晶，期待该结晶具有良好的性能例如稳定性，例如晶型本身稳定。本发明人发现通过特定工艺获得的DHMEQ结晶具有良好的性能例如稳定性。本发明基于此发现而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了下式1化合物：

其使用Cu‐Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，在约9.4°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.4°、和约18.9°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约23.9°、约26.8°、和约31.7°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约19.7°、约20.1°、约22.9°、约23.9°、约24.6°、约26.0°、约26.8°、约27.4°、约28.5°、约31.7°、约32.3°、约33.5°、约34.0°、约35.4°、约36.2°、和约38.2°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°处的±0.2°或±0.1°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°±0.2°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°和18.9°处的±0.2°或±0.1°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°±0.2°和18.9°±0.2°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°、14.4°和18.9°处的±0.2°或±0.1°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°±0.2°、14.4°±0.2°和18.9°±0.2°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°、14.4°、18.9°、23.9°、26.8°和31.7°处的±0.2°或±0.1°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°±0.2°、14.4°±0.2°、18.9°±0.2°、23.9°±0.2°、26.8°±0.2°和31.7°±0.2°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°、14.4°、18.9°、19.7°、20.1°、22.9°、23.9°、24.6°、26.0°、26.8°、27.4°、28.5°、31.7°、32.3°、33.5°、34.0°、35.4°、36.2°和38.2°处的±0.2°或±0.1°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°±0.2°、14.4°±0.2°、18.9°±0.2°、19.7°±0.2°、20.1°±0.2°、22.9°±0.2°、23.9°±0.2°、24.6°±0.2°、26.0°±0.2°、26.8°±0.2°、27.4°±0.2°、28.5°±0.2°、31.7°±0.2°、32.3°±0.2°、33.5°±0.2°、34.0°±0.2°、35.4°±0.2°、36.2°±0.2°和38.2°±0.2°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，具有基本上如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

本领域技术人员公知，在表示衍射峰的强度时，均可以用衍射相对强度或相对强度(其缩写为I/Io)表示，并且通常将最强峰的I/Io表示为100，其它衍射峰的强度与最强峰的强度的比值乘以100可算得其它衍射峰的相对强度。或者，对于某一衍射图谱，针对其中的某一较强的衍射峰定义其相对强度I/Io值为100，其它衍射峰的强度与最峰的强度的比值乘以100可算得其它衍射峰的相对强度。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.4°处有衍射峰，并且该衍射峰的I/Io值以100计，2θ约18.9°处的衍射峰的I/Io值大于50，优选大于60，例如在60～90之间，例如在60～80之间。

根据本发明第一方面的化合物，其是基本上具有本发明所述衍射特征的式1化合物结晶。

进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明式1化合物结晶的方法，其包括如下步骤：在加热条件下(例如在40～80℃下)将式1化合物溶解于DMF中(例如每1重量份的式1化合物溶解于2～5重量份的DMF中)，向该溶液中加入无水乙醇(例如其体积是DMF的4～8倍)，冷却析晶，滤出沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，即得。

根据本发明第二方面的方法，其中在加入所述无水乙醇的同时，还添加有冰乙酸。在一个实施方案中，所述添加的冰乙酸的重量是所述式1化合物的0.1～0.5倍。优选地，所述添加的冰乙酸的重量是所述式1化合物的0.1～0.3倍。出人意料地发现，当添加适量冰乙酸进行重结晶时，可以更为有效地除去物料中的杂质。

进一步地，本发明第三方面提供了一种药物组合物，其中包含上文所述式1化合物结晶和药学可接受的载体。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是口服制剂或者注射制剂或者外用制剂。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂(包括注射液和冷冻干燥粉针剂)、混悬剂、丸剂、软膏剂。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述式1化合物结晶，以及乳糖一水合物、微晶纤维素、羟基丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅和硬脂酸镁。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述式1化合物结晶40重量份，以及乳糖一水合物20～60重量份、微晶纤维素20～60重量份、羟丙基纤维素3‐30重量份、交联羧甲基纤维素钠2‐15重量份、二氧化硅0.5‐2重量份、和硬脂酸镁0.5‐2重量份。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述式1化合物结晶，以及微晶纤维素、预胶化淀粉、羧甲淀粉钠、聚维酮K30、硬脂酸镁。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述式1化合物结晶40重量份，以及微晶纤维素60～120重量份、预胶化淀粉30～50重量份、羧甲淀粉钠5～15重量份、2～6重量份的聚维酮K30、硬脂酸镁0.5～2重量份。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，并且其进一步被包衣。示例性的包衣材料例如购自卡乐康公司的Opadry II。衣层重可以是大约占片剂总重的1‐4%。

由于通常地辅料本身在测试X‐射线衍射时不会显示典型的衍射峰，而当这些辅料与具有典型衍射峰的活性成分例如本发明的式1化合物混合、制备制剂例如片剂时，如果在制备过程中活性成分的晶型能够保持稳定，则制成的制剂大体上仍然具有与原料药相当的衍射谱，特别是包括原料药的典型衍射峰。

本发明还涉及治疗或预防癌症、炎症、自身免疫疾病、糖尿病和糖尿病并发症、感染、心血管疾病和缺血-再灌注损伤的方法，包括给予需要此类治疗的哺乳动物，例如人治疗有效量的式1所示化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、酯、前药、异构体。

本发明还涉及式1所示化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、酯、前药、异构体在制备用于治疗或预防癌症、炎症、自身免疫疾病、糖尿病和糖尿病并发症、感染、心血管疾病和缺血-再灌注损伤的药物中的用途。

本发明任一方面或该任一方面的任一实施方案所具有的任一技术特征同样适用其它任一实施方案或其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

用于描述本发明的术语具有以下意义。本发明的化合物和中间体可按照IUPAC(国际理论和应用化学联合会)或CAS(化学文摘服务部)命名体系命名。

短语“治疗有效量”指(i)治疗或预防特定疾病、病情或病症，(ii)减弱、缓解或消除特定疾病、病情或病症的一种或多种症状，或(iii)防止或延缓特定疾病、病情的一种或多种症状发作的化合物量。

短语“药学上可接受的”表示指定的载体、运载体、稀释剂、赋形剂和/或盐总体上与构成制剂的其它成分化学和/或物理学相容，并与其受者在生理学上相容。

术语“哺乳动物”指作为分类学哺乳纲成员的各动物，哺乳动物的例子包括但不限于：人、狗、猫、马和牛等。在本发明中，优选的哺乳动物是人。

本发明的药物组合物包含治疗有效量的式1化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体、运载体、稀释剂或赋形剂。优选的本发明药物组合物包含治疗有效量的式1化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体、运载体、稀释剂或赋形剂。虽然不难给予各种剂型的通过混合本发明化合物和药学上可接受的载体、运载体或稀释剂形成的药物组合物，例如片剂、粉末剂、锭剂、糖浆、可注射溶液等。如果需要，这些药物组合物含有附加成分，例如调味剂、粘合剂、赋形剂等。

因此，为口服给药，含有各种赋形剂，例如柠檬酸钠、碳酸钙和/或磷酸钙的片剂可与各种崩解剂，例如淀粉、藻酸和/或某些复合硅酸盐以及粘合剂，例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和/或阿拉伯胶一起使用。此外，润滑剂，例如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石粉常用于压片目的。相似类型的固体组合物也可用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂。为此的优选材料包括乳糖和高分子量聚乙二醇。如果需要口服给予酏剂的水性悬液，其中的活性药物试剂可与各种甜味剂或调味剂、着色物质或染料，和软化剂或悬浮剂(如果需要的话)以及稀释剂，例如水、乙醇、丙二醇、甘油和/或它们的组合混合。

对于胃肠外给药，可利用芝麻油或花生油、水性丙二醇或无菌水溶液配制的本发明化合物或组合物的溶液。如果需要，可适当缓冲此类水性溶液，含充足盐水或葡萄糖的液体稀释剂首先赋予等渗性。这些特定的水性溶液尤其适合静脉内、肌肉内、皮下和腹膜内给药。就此而言，通过本领域技术人员已知的标准技术不难获得所用的无菌水性介质。

在一个示范性实施方式中，药物制剂是单位剂型。在此类剂型中，该制剂再分成单位剂量，其中含有合适量的活性成分。单位剂型可以是包装的制剂，例如小瓶或安瓿中的包装片剂、胶囊和粉末。单位剂型还可以是胶囊、扁囊剂或片剂本身，或者其可以是适当数量的任何这些包装形式。

本领域技术人员己知制备含有一定量活性成分的各种药物组合物的方法。制备药物组合物的方法的例子可参见通过《雷明顿：药学科学和实践》(Remington：The Scienceand Practice of Pharmacy).Lippincott，Williams和Wilkins，第21版.(2005)，其在此全文引用作为参考。

在本发明中，“%”的含义可根据具体使用环境而定，特别是其具有如2010年版中国药典二部凡例中“计量”项下第二十八条(4)款所述含义。

在本发明中，确定各种物料(例如各种晶型的原料药、药物组合物等)中式1化合物或者其它杂质的含量时，以及确定这些物料中的色谱纯度时，可以采用下面的一些方法进行测定，例如下面的“含量测定法”、“有关物质检查法”、“粉末X射线衍射分析方法”，在本发明后文的实施例部分，如需要测定某些物料的含量、有关物质、溶出度、粉末X射线衍射，如未另外说明，均是照如下方法进行。

含量测定法(本法可用于测定原料药、合成中间体、药物组合物中式1化合物的含量)：

采用高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定：

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.12%冰乙酸（90：410）用三乙胺调节pH值至3.0±0.2为流动相；检测波长为225nm。理论板数按式1化合物峰计算应不小于4000；

对照品溶液的制备：取式1化合物对照品(色谱纯度大于99.8%)约40mg，精密称定，置200ml量瓶中，加流动相适量，超声使溶解后用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

供试品溶液制备：取约相当于式1化合物40mg的待测试样，精密称定，置200ml量瓶中，加流动相适量，超声使溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；溶出度试样可在过滤后直接用上述溶剂稀释至相当浓度后测定；

测定法：精密量取对照品溶液和供试品溶液各20ul。分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

有关物质检查法(本法可用于测定原料药或组合物中单一杂质或总杂质的含量)：

取样品适量，加流动相制成每1ml中含0.2mg（以含式1化合物计）的溶液，作为供试品溶液；

再取供试品溶液适量，用流动相稀释成2μg/ml的溶液，作为对照溶液；

采用高效液相色谱法，以上文所述含量测定法中的色谱条件和方法进行，取对照溶液20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图；调整仪器灵敏度，使主成分峰高约为满量程的15～20％，再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图之主成分峰保留时间的4倍；

计算供试品溶液色谱图中各杂质的峰面积；按本领域技术人员公知的方法，通过各杂质峰的峰面积与对照溶液色谱图中主峰面积比较计算供试品中该杂质的含量；例如对照溶液色谱图中主峰面积为1000(其相当于供试品溶液浓度的1%)，如果在供试品溶液色谱图中某杂质的峰面积为500则该杂质在供试品中的含量为0.5%，如果在供试品溶液色谱图中某杂质的峰面积为2000则该杂质在供试品中的含量为2%；这些计算可以得到该供试品中的最大单一杂质的含量；全部杂质的含量加和可以得到总杂质含量。以上在测定有关物质时，对于包含药用辅料的药物组合物，在计算时扣除色谱图中辅料的色谱峰。

粉末X射线衍射分析方法：

仪器型号：粉末X衍射仪，Rigaku Dmax/2400

实验条件：CuKα辐射，石墨单色器，40KV，100MA，2θ扫描范围：0.0‐50°，扫描速度4°/分，步长：0.01°

扫描方式：连续扫描

狭缝设置:出射slit DS：1/2°防散射slit：SS1/2°；RS:0.3mm。

本发明药物组合物中使用的“药学可接受的载体”可以是药物制剂领域中任何常规的载体。特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的载体包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳剂(注射用无菌粉针)等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

在本文中，所用的术语“基峰”，是指某一X射线衍射图中强度最大的峰，其相对强度(I/Io)为100，其它峰可通过衍射仪直接计算出其I/Io值。

在本文中，描述2θ角度的具体值时，以“约”引出的具体角度值表示允许在该角度处的±0.20°、±0.10°或±0.05°的范围内。在本发明其它情况下，以术语“约”修饰某一数值时，例如在用于修饰某一数值或数值范围时，是指包括该数值或数值范围以及该数值或数值范围的本领域技术人员可接受的误差范围，例如该误差范围为±10%、±5%、±2%、±1%、±0.5%等。

附图说明

图1：本发明实施例制备的式1化合物结晶的粉末X射线衍射图，图中横坐标为2θ，以度(°)为单位，纵坐标为峰的强度(cps)，图中各峰标示的是其2θ角，例如2θ角为约9.4°处的峰为最强峰(可称为基峰)。

具体实施方式

下面通过具体的实施例/实验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例和实验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

在制备本发明晶型时使用到的式1化合物原料药可以参照现有技术方法获得，例如参照CN1368954A(中国专利申请号00811487.0)中实施例1至实施例5描述的方法制备。它们经粉末X‐射线衍射测定，在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处均未显示出类似于本发明式1化合物的特征衍射峰。

实施例1：制备式1化合物(5,6-环氧-4-羟基-3-水杨酰氨基-2-环己烯酮，DHM2EQ) 结晶

步骤1：N-(2-乙酰氧基苯甲酰基)-2,5-二甲氧基苯胺的合成

使2,5-二甲氧基苯胺(10.0g，65.3mmol)溶于吡啶(100ml)中。在冰冷却下，在其中添加O-乙酰基水杨酰氯(13.0g，65.3mmol)的乙酸乙酯(50ml)溶液，历时15分钟，然后在相同温度下搅拌15分钟。在反应液中加入水(10ml)使反应停止后，添加乙酸乙酯(500ml)，再依次用3当量盐酸(500ml)、水(500ml)、2%碳酸氢钠水溶液(500ml)和水(500ml)洗涤。乙酸乙酯层用芒硝干燥后，减压浓缩并真空干燥，获得呈淡黄色糖浆状的标题化合物(19.8g)。不对该化合物进行精制直接用于以下步骤。经过分离用薄层色谱法精制的标题化合物，其红外吸收光谱、紫外吸收光谱、FAB质谱、和¹H-NMR光谱数据CN1368954A之实施例1的数据相同。

步骤2：3-(O-乙酰基水杨酰氨基)-4,4-二甲氧基-2,5-环己二烯酮的合成

使步骤1获得的N-(2-乙酰氧基苯甲酰基)-2,5-二甲氧基苯胺(19.8g)溶于甲醇(400ml)中。在冰冷却下，在其中添加二乙酰氧基碘苯(27.3g，84.9mmol)，室温搅拌1小时。在减压浓缩反应液而获得的茶色糖浆状残渣中添加乙酸乙酯(1L)，反应液依次用5%碳酸氢钠水溶液(1L)、10%食盐水(1L)洗涤。然后将乙酸乙酯层减压浓缩，用硅胶柱色谱法(1kg，己烷/乙酸乙酯=2/1)对所得茶色糖浆状残渣进行精制，获得12.6g固状物。将其悬浮于30ml甲醇中，搅拌洗涤，获得10.3g为白色固体的标题化合物，其红外吸收光谱、紫外吸收光谱、FAB质谱、和¹H-NMR光谱数据CN1368954A之实施例2的数据相同。

步骤3：5,6-环氧-4,4-二甲氧基-3-水杨酰氨基-2-环己烯酮的合成

使3-(O-乙酰基水杨酰氨基)-4,4-二甲氧基-2,5-环己二烯酮(10.9g，33.0mmol)溶于二甲基甲酰胺(200ml)中；

在冰冷却下，向其中添加264mmol过氧化氢(以30%过氧化氢水溶液形式加入)及1mol/L的碳酸钠(165ml)，在相同温度下搅拌反应2小时；

向反应液中添加乙酸乙酯(500ml)，依次用1当量的盐酸(300ml)、10%硫代硫酸钠水溶液(300ml×2)、10%食盐水(300ml)洗涤后，乙酸乙酯层用芒硝干燥，然后真空干燥，获得呈淡黄色固体粉末；

使干燥所得淡黄色固体粉末溶解于丙酮-石油醚(二者体积比为10：1)的混合溶剂中，加入等体积的饱和食盐水萃取3次，弃水层，有机层用芒硝干燥，减压浓缩，真空干燥，获得式(4)表示的白色粉末状的5,6-环氧-4,4-二烷氧基-3-水杨酰氨基-2-环己烯酮(本步骤的收率为76%，HPLC纯度为97.3%)。所得式(4)化合物的熔点、红外吸收光谱、紫外吸收光谱、FAB质谱、和¹H-NMR光谱数据CN1368954A之实施例3的数据相同。

步骤4：5,6-环氧-2-水杨酰氨基-2-环己烯-1,4-二酮的合成

使5,6-环氧-4,4-二甲氧基-3-水杨酰氨基-2-环己烯酮(1.0g，3.27mmol)溶于25ml二氯甲烷中。在冰冷却下，在其中添加三氟化硼乙醚络合物(1ml)，于相同温度下搅拌30分钟。然后，在反应液中添加乙酸乙酯(300ml)，用水(200ml)洗涤。乙酸乙酯层用芒硝干燥后，真空干燥，用甲醇(5ml)对所得茶色固状物进行洗涤，获得呈淡茶色固体的标题化合物(404mg)，其红外吸收光谱、紫外吸收光谱、FAB质谱、和¹H-NMR光谱数据CN1368954A之实施例4的数据相同。

步骤5：5,6-环氧-4-羟基-3-水杨酰氨基-2-环己烯酮(DHM2EQ)的合成

使5,6-环氧-2-水杨酰氨基-2-环己烯-1,4-二酮(81.8mg，0.316mmol)悬浮于甲醇(10ml)中。在冰冷却下，在其中添加硼氢化钠(11.9mg，0.316mmol)，相同温度下搅拌10分钟。然后，在反应液中加入乙酸乙酯(50ml)，反应液依次用1当量的盐酸(50ml)和水(50ml)洗涤。乙酸乙酯层用芒硝干燥后，减压浓缩，使所得淡茶色固体悬浮于甲醇(1ml)中，搅拌洗涤。获得呈白色固体的DHM2EQ(45.7mg)，其外观及性质、熔点、TLC的Rf值、红外吸收光谱、紫外吸收光谱、FAB质谱、和¹H-NMR光谱数据CN1368954A之实施例5的数据相同。

该产物含量为99.1%(HPLC)，其中总杂质0.461%，最大单一杂质0.186%；经粉末X‐射线衍射测定，在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处均未显示特征衍射峰。

步骤6：DHM2EQ结晶的制备

在加热条件下(60℃)将步骤5所得产物5g溶解于DMF(其重量是式1化合物重量的4倍)中，向该溶液中加入无水乙醇(例如其体积是DMF的6倍)和冰乙酸(其重量是式1化合物的0.2倍)，冷却析晶，滤出沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，即得。结晶收率85.2%。

分别照上文所述测定含量方法以及有关物质检测法测定含量和杂质：含量为99.8%(HPLC)，其中总杂质0.171%，最大单一杂质0.026%。

测定粉末X射线衍射，结果如图1。

粉末X射线衍射结果显示，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，在约9.4°处有衍射峰，特别是在此数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、和约18.9°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约23.9°、约26.8°、和约31.7°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约19.7°、约20.1°、约22.9°、约23.9°、约24.6°、约26.0°、约26.8°、约27.4°、约28.5°、约31.7°、约32.3°、约33.5°、约34.0°、约35.4°、约36.2°、和约38.2°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰。另外，粉末X射线衍射结果还显示，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约23.9°、约26.8°、和约31.7°处有衍射峰；以约9.4°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约18.9°处衍射峰的I/Io值大于50，特别是大于60，特别是在60～90之间，特别是在60～80之间。另外，将该实施例1样品在另外三台不同品牌粉末X射线衍射仪上测定衍射图，结果约18.9°处衍射峰的I/Io值均在60～80范围内。

以下表1数据是本步骤6所得DHM2EQ结晶在一次典型的粉末X射线衍射测试中的结果

峰No.

2θ(度)

d-值

强度

I/Io

1	9.42	9.381	9918	100
					2	14.44	6.129	969	10
3	18.88	4.696	6746	69
					4	19.68	4.507	547	6
5	20.10	4.414	592	6
					6	22.86	3.887	433	5
7	23.94	3.714	1191	12
					8	24.64	3.610	791	8
9	25.96	3.429	950	10
					10	26.82	3.321	1981	20
11	27.38	3.255	819	9
					12	28.46	3.134	416	5
13	31.68	2.822	1233	13
					14	32.28	2.771	519	6
15	33.54	2.670	440	5
					16	34.02	2.633	328	4
17	35.40	2.534	434	5
					18	36.20	2.479	563	6
19	38.24	2.352	495	5

实施例2：制备式1化合物结晶

在加热条件下(40℃)将以上实施例1步骤5所得产物5g溶解于DMF(其重量是式1化合物重量的5倍)中，向该溶液中加入无水乙醇(例如其体积是DMF的4倍)和冰乙酸(其重量是式1化合物的0.3倍)，冷却析晶，滤出沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，即得。结晶收率83.8%。

含量为99.7%(HPLC)，其中总杂质0.185%，最大单一杂质0.018%。

测定粉末X射线衍射，结果基本上与图1一致，具体地说：与图1中19个峰的2θ值基本一致，各峰与图1相应峰的2θ值相差均在±0.10°的范围内。

总共在四台不同品牌粉末X射线衍射仪上测定衍射图，以约9.4°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约18.9°处衍射峰的I/Io值在60～80之间。

实施例3：制备式1化合物结晶

在加热条件下(80℃)将以上实施例1步骤5所得产物5g溶解于DMF(其重量是式1化合物重量的2倍)中，向该溶液中加入无水乙醇(例如其体积是DMF的8倍)和冰乙酸(其重量是式1化合物的0.1倍)，冷却析晶，滤出沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，即得。结晶收率85.7%。

含量为99.9%(HPLC)，其中总杂质0.202%，最大单一杂质0.014%。

实施例4：制备式1化合物结晶

步骤1：照CN1368954A说明书15页6行(实施例1)至说明书18页6行(实施例5)所记载的方法制备得到式1化合物即DHM2EQ。经测定，该产物含量为99.0%(HPLC)，其中总杂质0.542%，最大单一杂质0.246%；经粉末X‐射线衍射测定，在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处均未显示特征衍射峰。

步骤2：取本实施例以上步骤1所得DHM2EQ，照上文实施例1步骤6的方法制得DHM2EQ结晶，收率83.8%。经测定，该产物含量为99.8%(HPLC)，其中总杂质0.216%，最大单一杂质0.025%。测定粉末X射线衍射，结果基本上与图1一致，具体地说：与图1中19个峰的2θ值基本一致，各峰与图1相应峰的2θ值相差均在±0.10°的范围内。

对照例1：制备式1化合物结晶

参考实施例1的方法，但是不使用冰乙酸。结果在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处均未显示如本发明的典型衍射峰。

对照例2：制备式1化合物结晶

参考实施例1的方法，不同的是在步骤6中将冰乙酸的加入量改为：添加的冰乙酸的重量是所述式1化合物的0.05倍。结果在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处均未显示如本发明的典型衍射峰。

对照例3：制备式1化合物结晶

参考实施例1的方法，不同的是在步骤6中将冰乙酸的加入量改为：添加的冰乙酸的重量是所述式1化合物的0.5倍或者1.0倍，得到试样D3a和D3b，结果收率分别降到68%以下和52%以下。两个试样测定粉末X射线衍射，结果均基本上与图1一致，具体地说：与图1中19个峰的2θ值基本一致，各峰与图1相应峰的2θ值相差均在±0.10°的范围内。

组合物例1：制备式1化合物片剂

使用上文实施例1步骤6制备得到的式1化合物结晶为原料药。

批量投料量为10000片/批。配方：式1化合物10mg、乳糖一水合物50mg、微晶纤维素70mg、羟丙基纤维素20mg、交联羧甲基纤维素钠10mg、二氧化硅1mg、和硬脂酸镁1mg；使用50%乙醇为润湿剂以常规湿法制粒方法制备片剂。

组合物例2：制备式1化合物软膏剂

使用上文实施例1步骤6制备得到的式1化合物结晶为原料药。总配方量1000克。配方：式1化合物20重量份、聚乙二醇200为200重量份、聚乙二醇2000为80重量份。

对照组合物例1：制备式1化合物片剂

使用上文实施例4步骤1中照CN1368954A说明书15页6行(实施例1)至说明书18页6行(实施例5)所记载的方法制备得到式1化合物即DHM2EQ为原料药，照上文组合物例1的配方制备片剂。

对照组合物例2：制备式1化合物软膏剂

使用上文实施例4步骤1中照CN1368954A说明书15页6行(实施例1)至说明书18页6行(实施例5)所记载的方法制备得到式1化合物即DHM2EQ为原料药，照上文组合物例2的配方制备软膏剂。

测试以上组合物例1和对照组合物例1片剂的X射线衍射图，结果显示它们均分别与其所用式1化合物原料的晶型相同的衍射图谱，表明这些不同的结晶，经历不同的制片工艺后，并未显示晶型的改变。

试验例1：稳定性试验

将以上各实施例1～实施例4、对照例1～对照例3所得式1化合物(包括照本发明方式得到的式1化合物结晶，以及未使用本发明典型方法获得的式1化合物)，以上组合物例1、组合物例2和对照组合物例1、对照组合物例2所得制剂作为试样，进行稳定性考察。

将上述各原料药或制剂分别用铝箔袋密封包装，置于42℃恒温箱中放置5月，测定各试样在0月(即放样前)和5月时活性成分的含量以及有关物质含量(以最大单一杂质和总杂质表示)。

对于每一试样，以5月活性成分含量除以0月活性成分含量所得的百分值，作为高温处置5月后的活性成分相对含量(%)，即计算式如下：

活性成分相对含量(%)=(5月含量÷0月含量)×100%

此外，对于每一试样，以5月的最大单一杂质含量除以0月时该的最大单一杂质含量所得的百分值，作为高温处置5月后最大单一杂质的相对含量(%)，即计算式如下：

最大单一杂质相对含量(%)=

(5月最大单一杂质含量÷0月最大单一杂质含量)×100%

此外，对于每一试样，以5月的总杂质含量除以0月时总杂质含量所得的百分值，作为高温处置5月后总杂质的相对含量(%)，即计算式如下：

总杂质相对含量(%)=(5月总杂质含量÷0月总杂质含量)×100%

出人意料地发现，本发明典型方法获得的式1化合物结晶及其所制备的药物组合物具有良好的稳定性，活性成分的含量变化小，而且杂质变化亦较小，高温处置5月后具体结果如表2所示。

表2：

从表中结果可见，本发明典型方法获得的式1化合物在原料药或者制剂状态下均具有比之于其它方法制备的产物结果更好的化学稳定性。

试验例2：本发明式1化合物结晶及其药物组合物的结晶稳定性

测定本发明以上实施例1步骤6产物、实施例2产物、实施例3产物、实施例4步骤2产物的粉末X‐射线衍射图(作为0月图谱)。接着使这些试样分别用铝箔袋密封包装，置于42℃恒温箱中放置5月，测定各试样在5月时(即高温处置后)的粉末X‐射线衍射图(作为5月图谱)。对于同一试样，比较其经高温处置前、后的粉末X‐射线衍射图，即本发明方法所得式1化合物具有良好的结晶稳定性。

结果显示，这些试样在高温处置前、后显示均具有相同的粉末X‐射线衍射图谱。特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，在约9.4°处有衍射峰，特别是在此数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、和约18.9°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、约14.4°、和约18.9°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约23.9°、约26.8°、和约31.7°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，该结晶在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约19.7°、约20.1°、约22.9°、约23.9°、约24.6°、约26.0°、约26.8°、约27.4°、约28.5°、约31.7°、约32.3°、约33.5°、约34.0°、约35.4°、约36.2°、和约38.2°处有衍射峰，特别是在这些数据的±0.2°或±0.1°的范围内有衍射峰。另外，粉末X射线衍射结果还显示，在以2θ角度表示的粉末X‐射线衍射图谱中，在约9.4°、约14.4°、约18.9°、约23.9°、约26.8°、和约31.7°处有衍射峰；以约9.4°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约18.9°处衍射峰的I/Io值大于50，特别是大于60，特别是在60～90之间，特别是在60～80之间。

无需进一步描述，本领域普通技术人员相信采用以上描述和以下示范性实施例可制备和利用本发明化合物并实施本发明方法。虽然参考各种具体的材料、方法和实施例描述和说明了本发明，但应该知道本发明不限于为该目的而选择的材料和方法的特定组合。本领域技术人员应知道此类细节提示有多种变化。本申请通篇引用的所有专利、专利申请和其它参考文献通过引用全文纳入本文。

Claims

1.式1化合物的结晶：

1

其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°±0.2°、14.4°±0.2°、18.9°±0.2°、19.7°±0.2°、20.1°±0.2°、22.9°±0.2°、23.9°±0.2°、24.6°±0.2°、26.0°±0.2°、26.8°±0.2°、27.4°±0.2°、28.5°±0.2°、31.7°±0.2°、32.3°±0.2°、33.5°±0.2°、34.0°±0.2°、35.4°±0.2°、36.2°±0.2°和38.2°±0.2°处有衍射峰。

2．根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°±0.1°、14.4°±0.1°、18.9°±0.1°、19.7°±0.1°、20.1°±0.1°、22.9°±0.1°、23.9°±0.1°、24.6°±0.1°、26.0°±0.1°、26.8°±0.1°、27.4°±0.1°、28.5°±0.1°、31.7°±0.1°、32.3°±0.1°、33.5°±0.1°、34.0°±0.1°、35.4°±0.1°、36.2°±0.1°和38.2°±0.1°处有衍射峰。

3．根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，具有如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

4．根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°处有衍射峰，并且该衍射峰的I/Io值以100计，2θ角在18.9°处的衍射峰的I/Io值大于50。

5．根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°处有衍射峰，并且该衍射峰的I/Io值以100计，2θ角在18.9°处的衍射峰的I/Io值大于60。

6．根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°处有衍射峰，并且该衍射峰的I/Io值以100计，2θ角在18.9°处的衍射峰的I/Io值在60~90之间。

7．根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.4°处有衍射峰，并且该衍射峰的I/Io值以100计，2θ角在18.9°处的衍射峰的I/Io值在60~80之间。

8．制备权利要求1~7任一项所述结晶的方法，其包括如下步骤：在加热条件下将式1化合物溶解于DMF中，向该溶液中加入无水乙醇，冷却析晶，滤出沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，即得。

9．权利要求8的方法，其包括如下步骤：在40~80℃下将每1重量份的式1化合物溶解于2~5重量份的DMF中，向该溶液中加入无水乙醇，其体积是DMF的4~8倍，冷却析晶，滤出沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，即得。

10．权利要求8或9的方法，其中在加入所述无水乙醇的同时，还添加有冰乙酸。

11．权利要求10的方法，所述添加的冰乙酸的重量是所述式1化合物的0.1~0.5倍。

12．一种药物组合物，其中包含权利要求1~7任一项所述结晶和药学可接受的载体。

13．权利要求1~7任一项所述结晶在制备用于治疗或预防癌症、炎症、自身免疫疾病、糖尿病和糖尿病并发症、感染、心血管疾病和缺血-再灌注损伤的药物中的用途。