CN103548720A - 一种厚壳贻贝人工催产及授精的方法 - Google Patents

一种厚壳贻贝人工催产及授精的方法 Download PDF

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Abstract

厚壳贻贝人工催产及授精的方法，包括以下步骤：亲本培育池：室外培育水泥池规格为10m×1.5m×1m，备有充气石，水泥池上方遮盖帆布，可防雨防晒，四周用黑布遮挡，以调节光照的强度；选择壳表新鲜、完整，无破损，双壳闭合有力，性腺饱满，鳃完整，卵巢呈浅红色，精巢呈白色的贻贝以人工培养的盐藻(Dunaliellaviridis)、亚心形扁藻(Platymonassubcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)单胞藻活饵料为主，辅以人工配合饵料螺旋藻粉、绿藻粉及干酵母片；把经促熟性腺发育好的亲贝,先经6~8h的阴干,再经1h流水刺激后。

Description

一种厚壳贻贝人工催产及授精的方法
技术领域
本发明涉及水产养殖的方法，尤其是一种一种厚壳贻贝人工催产及授精的方法。
背景技术
　贻贝隶属软体动物门(Mollusca)双壳纲(Bivalvia),是我国沿海习见的经济贝类。我国养殖的贻贝主要有紫贻贝(Mytilus edulis)、厚壳贻贝(M·coruscus)和翡翠贻贝(Perna viridis)。浙江省嵊泗县是我国厚壳贻贝的原产地和紫贻贝的集中养殖区, 2005年贻贝养殖面积为1 130 hm2,产量达到了48 800 ,t其中厚壳贻贝养殖面积85hm2,产量4 900 ,t贻贝养殖已成为该县海水养殖的支柱产业。近年来,由于厚壳贻贝的市场价格看涨,经济效益高于紫贻贝2~3倍,为追求更高的养殖经济效益和适应市场化的需要,养殖单位纷纷开始转向养殖经济效益更高的厚壳贻贝,这对该种贻贝的苗种供应提出了更高的要求。过去厚壳贻贝的苗种供应,主要来源为海区半人工采苗,但近年来,由于酷渔滥捕以及保护不力,厚壳贻贝自然资源枯竭,天然苗种已经非常稀少,苗种问题已经成为抑制厚壳贻贝养殖大规模发展的瓶颈,因此,大力发展厚壳贻贝苗种全人工苗种生产已成为当务之急。早在20世纪60~70年代,国内许多科研院所都对厚壳贻贝繁殖生物学进行过详细的研究,但至今大规模生产性苗种生产还缺乏系统的研究,文献资料报道少。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种避免了对实验动物的伤害，突破了厚壳贻贝贝的全人工繁育中关键技术瓶颈，为开展厚壳贻贝多倍体育种、家系选育研究提供基本条件的一种厚壳贻贝人工催产及授精的方法。 
按照本发明提供的技术方案，厚壳贻贝人工催产及授精的方法，包括以下步骤：
1）亲本培育池：室外培育水泥池规格为10 m×1.5 m×1 m，备有充气石，水泥池上方遮盖帆布，可防雨防晒，四周用黑布遮挡，以调节光照的强度；
2）培育用水处理：从外海沙滤井抽上来的海水，经沉淀、砂滤三级过滤后直接用于亲本培育；
3）亲贝蓄养：选择壳表新鲜、完整，无破损，双壳闭合有力，性腺饱满，鳃完整，卵巢呈浅红色，精巢呈白色的贻贝；入池后稳定5d, 入池时水温为15℃ , 以后每天以1℃ 升温速度升至22℃ , 恒温待产；
4）培育饵料：以人工培养的盐藻(Dunaliella viridis)、亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)单胞藻活饵料为主，辅以人工配合饵料螺旋藻粉、绿藻粉及干酵母片；每天投喂8-12 次, 日投喂量由2*104 / d,逐渐增至4* 104cell/d,:每天换水3- 4 次, 每次1/ 3 的培育水体, 每3 天移池1 次;
5）  促熟：升温刺激法: 把经促熟性腺发育好的亲贝, 先经6~ 8h 的阴干, 再经1h 流水刺激后, 直接放入事先准备好的升温海水中, 高出恒温培育时3~ 4℃ , 经1~ 2h 的适应期后, 亲贝能自行排放精、卵, 亲贝排放率为80%，采集的亲贝冲洗干净后放养到室内水泥池，采取散养和单层网箱养殖两种方式，放入亲贝0. 8 万~ 1. 0 万粒，每池放入亲贝200万~ 300 万粒, 亲贝放养密度在370~ 560 粒/ m2放入上遮黑布帘的暂养水泥池, 光照强度在500 lx 以下，加入经过沉淀处理的自然海水, 池水深50~ 80 cm, 每天换水2~ 3次, 换水量100%，换水时清除池底和池壁上的污物, 检查亲贝, 及时挑出死亡个体，入池后保持自然水温一周, 待亲贝适应池养环境后开始升温, 日升温0. 5~ 1℃, 直至25℃时保持恒温，经常观测水质变化情况, 每周检测一次水质指标, 根据实际情况调整换水量, 保证亲贝培育用水水质优良；或者将亲本从培育池中捞出，并置于阴凉的地方干露刺激促熟；或者将亲本放入玻璃缸或水桶中，注入海水并用加热棒加热，使水温升高约3℃，再用准备好的冰袋降至常温，连续2～3 次促熟； 藻液刺激法：把亲本放入容积约为500 L 的塑料盆中，注入120 × 104 cells /mL 金藻( Isochrysis zhanjiangensis)及100 × 104 cells /mL 亚心形扁藻液，约40 min 后，藻液颜色逐渐变清，亲本排放大量条状的粪便； 流水刺激法：打开诱导池排水阀门，用小型抽水泵往池壁处横向冲水，并控制好水流压力，使水能均匀地流过诱导池池底并对亲本进行刺激： 异性产物诱导法：解剖数个达到成熟期的亲本，取其精子及卵子加入诱导池中，以诱导其它待排放的亲本；
6）授精：将用于人工授精的雄贝及分泌物立即移入人工授精组的待孕雌贝培育池中，用于人工授精的雌贝数量与待孕雄贝数量的比为4：1，培育池内暂停流动水，采用气泵增氧，使得培育池中溶氧达到5~8毫克/升，用于人工授精的雄贝的分泌物移入人工授精组的待孕雌贝培育池10~30分钟，人工授精完成。
7）稚贝培育：将饵料密度增加至(8~10)×104cell/mL，若饵料不充足,可适当投喂部分替代饵料如酵母等，前期每天换水3次，每次换水量为1/2;后期将换水量增至育苗水体的1. 5~2. 0倍，待稚贝平均壳长达0. 4 mm以上时,开始装袋出池下海。出池前对稚贝进行流水刺激,以减少下海后的脱落率，下海7 d内
本发明的方法与已有技术相比具有以下优点： 
采用微流水培育技术，使雌贝、雄贝性腺快速完全发育；通过雌雄亲本隔离培育，防止自然受精的发生，并使雌雄亲本性腺发育同步，为提高人工授精的成功率奠定了基础；自然受精组作为对照，通过检查待孕雌贝累计受精比例，精确确定雄贝的人工催产时间，提高了雄贝催产效率及成熟精子比例。
具体实施方式
以下将对本发明的优选实施例进行详细的描述；应当理解，优选实施例仅为了说明本发明，而不是为了限制本发明的保护范围。 
一种厚壳贻贝人工催产及授精的方法，包括以下步骤：
亲本培育池：室外培育水泥池规格为10 m×1.5 m×1 m，备有充气石，水泥池上方遮盖帆布，可防雨防晒，四周用黑布遮挡，以调节光照的强度；
培育用水处理：从外海沙滤井抽上来的海水，经沉淀、砂滤三级过滤后直接用于亲本培育；
亲贝蓄养：选择壳表新鲜、完整，无破损，双壳闭合有力，性腺饱满，鳃完整，卵巢呈浅红色，精巢呈白色的贻贝；入池后稳定5d, 入池时水温为15℃ , 以后每天以1℃ 升温速度升至22℃ , 恒温待产；
培育饵料：以人工培养的盐藻(Dunaliella viridis)、亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)单胞藻活饵料为主，辅以人工配合饵料螺旋藻粉、绿藻粉及干酵母片；每天投喂8-12 次, 日投喂量由2*104 / d,逐渐增至4* 104cell/d,:每天换水3- 4 次, 每次1/ 3 的培育水体, 每3 天移池1 次;
促熟：升温刺激法: 把经促熟性腺发育好的亲贝, 先经6~ 8h 的阴干, 再经1h 流水刺激后, 直接放入事先准备好的升温海水中, 高出恒温培育时3~ 4℃ , 经1~ 2h 的适应期后, 亲贝能自行排放精、卵, 亲贝排放率为80%，采集的亲贝冲洗干净后放养到室内水泥池，采取散养和单层网箱养殖两种方式，放入亲贝0. 8 万~ 1. 0 万粒，每池放入亲贝200万~ 300 万粒, 亲贝放养密度在370~ 560 粒/ m2放入上遮黑布帘的暂养水泥池, 光照强度在500 lx 以下，加入经过沉淀处理的自然海水, 池水深50~ 80 cm, 每天换水2~ 3次, 换水量100%，换水时清除池底和池壁上的污物, 检查亲贝, 及时挑出死亡个体，入池后保持自然水温一周, 待亲贝适应池养环境后开始升温, 日升温0. 5~ 1℃, 直至25℃时保持恒温，经常观测水质变化情况, 每周检测一次水质指标, 根据实际情况调整换水量, 保证亲贝培育用水水质优良；或者将亲本从培育池中捞出，并置于阴凉的地方干露刺激促熟；或者将亲本放入玻璃缸或水桶中，注入海水并用加热棒加热，使水温升高约3℃，再用准备好的冰袋降至常温，连续2～3 次促熟； 藻液刺激法：把亲本放入容积约为500 L 的塑料盆中，注入120 × 104 cells /mL 金藻( Isochrysis zhanjiangensis)及100 × 104 cells /mL 亚心形扁藻液，约40 min 后，藻液颜色逐渐变清，亲本排放大量条状的粪便； 流水刺激法：打开诱导池排水阀门，用小型抽水泵往池壁处横向冲水，并控制好水流压力，使水能均匀地流过诱导池池底并对亲本进行刺激： 异性产物诱导法：解剖数个达到成熟期的亲本，取其精子及卵子加入诱导池中，以诱导其它待排放的亲本；
授精：将用于人工授精的雄贝及分泌物立即移入人工授精组的待孕雌贝培育池中，用于人工授精的雌贝数量与待孕雄贝数量的比为4：1，培育池内暂停流动水，采用气泵增氧，使得培育池中溶氧达到5~8毫克/升，用于人工授精的雄贝的分泌物移入人工授精组的待孕雌贝培育池10~30分钟，人工授精完成。
稚贝培育：将饵料密度增加至(8~10)×104cell/mL，若饵料不充足,可适当投喂部分替代饵料如酵母等，前期每天换水3次，每次换水量为1/2;后期将换水量增至育苗水体的1. 5~2. 0倍，待稚贝平均壳长达0. 4 mm以上时,开始装袋出池下海。出池前对稚贝进行流水刺激,以减少下海后的脱落率，下海7 d内不动网袋,以后每隔5 d左右刷袋一次，下海15~20 d左右、壳长2~3 mm时进行分袋。

Claims (3)

1.一种厚壳贻贝人工催产及授精的方法，包括以下步骤：
亲本培育池：室外培育水泥池规格为10 m×1.5 m×1 m，备有充气石，水泥池上方遮盖帆布，可防雨防晒，四周用黑布遮挡，以调节光照的强度；
培育用水处理：从外海沙滤井抽上来的海水，经沉淀、砂滤三级过滤后直接用于亲本培育；
亲贝蓄养：选择壳表新鲜、完整，无破损，双壳闭合有力，性腺饱满，鳃完整，卵巢呈浅红色，精巢呈白色的贻贝；入池后稳定5d, 入池时水温为15℃ , 以后每天以1℃ 升温速度升至22℃ , 恒温待产；
培育饵料：以人工培养的盐藻(Dunaliella viridis)、亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)及角毛藻(Chaetoceros)单胞藻活饵料为主，辅以人工配合饵料螺旋藻粉、绿藻粉及干酵母片；每天投喂8-12 次, 日投喂量由2*104 / d,逐渐增至4* 104cell/d,:每天换水3- 4 次, 每次1/ 3 的培育水体, 每3 天移池1 次;
促熟：升温刺激法: 把经促熟性腺发育好的亲贝, 先经6~ 8h 的阴干, 再经1h 流水刺激后, 直接放入事先准备好的升温海水中, 高出恒温培育时3~ 4℃ , 经1~ 2h 的适应期后, 亲贝能自行排放精、卵, 亲贝排放率为80%，采集的亲贝冲洗干净后放养到室内水泥池，采取散养和单层网箱养殖两种方式，放入亲贝0. 8 万~ 1. 0 万粒，每池放入亲贝200万~ 300 万粒, 亲贝放养密度在370~ 560 粒/ m2放入上遮黑布帘的暂养水泥池, 光照强度在500 lx 以下，加入经过沉淀处理的自然海水, 池水深50~ 80 cm, 每天换水2~ 3次, 换水量100%，换水时清除池底和池壁上的污物, 检查亲贝, 及时挑出死亡个体，入池后保持自然水温一周, 待亲贝适应池养环境后开始升温, 日升温0. 5~ 1℃, 直至25℃时保持恒温，经常观测水质变化情况, 每周检测一次水质指标, 根据实际情况调整换水量, 保证亲贝培育用水水质优良；或者将亲本从培育池中捞出，并置于阴凉的地方干露刺激促熟；或者将亲本放入玻璃缸或水桶中，注入海水并用加热棒加热，使水温升高约3℃，再用准备好的冰袋降至常温，连续2～3 次促熟； 藻液刺激法：把亲本放入容积约为500 L 的塑料盆中，注入120 × 104 cells /mL 金藻( Isochrysis zhanjiangensis)及100 × 104 cells /mL 亚心形扁藻液，约40 min 后，藻液颜色逐渐变清，亲本排放大量条状的粪便； 流水刺激法：打开诱导池排水阀门，用小型抽水泵往池壁处横向冲水，并控制好水流压力，使水能均匀地流过诱导池池底并对亲本进行刺激： 异性产物诱导法：解剖数个达到成熟期的亲本，取其精子及卵子加入诱导池中，以诱导其它待排放的亲本；
授精：将用于人工授精的雄贝及分泌物立即移入人工授精组的待孕雌贝培育池中，用于人工授精的雌贝数量与待孕雄贝数量的比为4：1，培育池内暂停流动水，采用气泵增氧，使得培育池中溶氧达到5~8毫克/升，用于人工授精的雄贝的分泌物移入人工授精组的待孕雌贝培育池10~30分钟，人工授精完成。
2.稚贝培育：将饵料密度增加至(8~10)×104cell/mL，若饵料不充足,可适当投喂部分替代饵料如酵母等，前期每天换水3次，每次换水量为1/2;后期将换水量增至育苗水体的1. 5~2. 0倍，待稚贝平均壳长达0. 4 mm以上时,开始装袋出池下海。
3.出池前对稚贝进行流水刺激,以减少下海后的脱落率，下海7 d内不动网袋,以后每隔5 d左右刷袋一次，下海15~20 d左右、壳长2~3 mm时进行分袋。
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