CN103536862B - 防治胃癌的益气活血复方中药制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种防治胃癌的益气活血复方中药制剂及其制备方法,属于防治胃癌中药制剂技术领域。技术方案是由乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子组成,各中药组分的重量百分比为:乌骨藤15-25%,苦荞叶15-25%,白术15-20%,莪术10-15%,薏苡仁10-15%,鸦胆子10-15%。可以根据需要制成胶囊、片剂、散剂等。全方益气活血、散结止痛,能有效缓解胃癌患者上腹部疼痛、胀闷、不思饮食之症。作用于脾、胃、大肠等多个脏器,充分体现了中医学对人体有机整体的独特认识;通过调节全身机能,达到抗肿瘤的目的,疗效明确,药源广、成本低廉、生产和服用方便,治疗胃癌效果显著。
Description
技术领域
本发明涉及一种防治胃癌的益气活血复方中药制剂及其制备方法,属于预防、治疗胃癌中药制剂技术领域。
背景技术
胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,在世界范围内位居肿瘤死亡的第二位,据世界卫生组织/国际癌症研究中心公布的统计数据显示,2008 年全球胃癌新病例98.9万,中国新发病例数为46.3万,占全球胃癌发病的 46.8%;2008年全球死于胃癌的病例为73.7万,中国死亡病例为35.2万,占全球胃癌死亡的 47.8%。早期胃癌没有特异症状和表现,发病出现症状大多数已进入中晚期,严重威胁人民群众的身体健康。该病早期可以采取根治手术治愈,但对于中晚期患者尚缺乏有效治疗手段,目前,治疗方法仍以手术切除为主,配合化疗、放疗和免疫疗法,但都达不到理想效果,且治疗费用昂贵。
发明内容
本发明目的是提供一种防治胃癌的益气活血复方中药制剂及其制备方法,疗效明确,药源广、成本低廉、生产和服用方便,解决背景技术中存在的上述问题。
本发明的技术方案是:
防治胃癌的益气活血复方中药制剂,其特征在于由乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子组成,各中药组分的重量百分比为:乌骨藤15-25%,苦荞叶15-25%,白术15-20%,莪术10-15%,薏苡仁10-15%,鸦胆子10-15%。
防治胃癌的益气活血复方中药制剂的制备方法,包含如下工艺步骤:选择中药乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子,各中药组分的重量百分比为:乌骨藤15-25%,苦荞叶15-25%,白术15-20%,莪术10-15%,薏苡仁10-15%,鸦胆子10-15%;洗净,打成粉末;加水煎煮,过滤,将药渣再加水煎煮、过滤,水浴浓缩,成膏状,干燥,研碎,制成防治胃癌的益气活血中药制剂。
防治胃癌的益气活血复方中药制剂可以根据需要制成胶囊、片剂、散剂等。
本发明将乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子配伍,以乌骨藤、苦荞叶配伍为基础,配以补益脾胃之气的药物白术,及常用抗癌药物莪术、薏苡仁、鸦胆子组成。
乌骨藤味微辛、涩,性温,活血化瘀,通经止痛等效果优,其主要成分为生物碱。本研究团队实验表明,其对胃癌肿瘤细胞具有良好抑制作用,该药能较明显抑制大鼠和小鼠移植性肿瘤生长。乌骨藤注射液对大鼠瓦克肉瘤、荷瘤小鼠(S180肉瘤、宫颈癌、肝癌等)具有明显抑制瘤体生长作用。已有的研究表明,乌骨藤可改善肿瘤局部血流,提高机体免疫功能,从而起到抗肿瘤作用。
苦荞叶是中国特有的荞麦品种----苦荞的叶子。苦荞属双子叶蓼科荞麦植物,药理和化学成分研究表明,其有效成分主要是黄酮类、多酚类物质。特别是苦荞叶黄酮含量更高,且荞麦黄酮所表现出的生理功能大多是基于抗氧化作用可用于消炎、消肿、降压、降血脂等,且已广泛用于食品、药品等。苦荞多酚具有抗炎症、抗变态反应、抗病毒和抗癌症特性。具有吞噬自由基的能力,是抗氧化物的重要来源。已有研究表明,苦荞多酚可抑制白血病细胞的生长。本研究团队实验表明,苦荞叶可显著抑制消化道肿瘤细胞增殖。
白术,味苦甘,性温,入脾胃经。可健脾益气、燥湿利水。用于脾虚食少、腹胀泄泻、水肿等。《医学启源》记载:“除湿益燥,和中益气,温中,去脾胃中湿,除胃热,强脾胃,进饮食,止渴,安胎。”该药在中医临床脾胃病治疗中被广泛应用,是中草药中用于治疗脾胃病的最高频次用药。白术可用作治疗脾胃疾病的引经药。
莪术味辛、苦、性温,归肝、脾经,破血行气止痛,主要成分为挥发油。已有的研究表明莪术油制剂在体外对小鼠艾氏腹水癌细胞、615纯系小鼠的L615白血病及腹水型肝癌细胞等多种瘤株的生长有明显抑制和破坏作用。不同浓度的莪术水提、醇提液对瘤细胞均有明显的直接破坏作用,有作用快而强的特点。实验研究提示莪术有直接杀瘤细胞的作用。
薏苡仁,为禾本科植物薏苡的种仁,有健脾胃功效。近年来,中外学者陆续报道了薏苡仁的抗肿瘤、免疫调节的药理活性。已有的关于薏苡仁抗肿瘤活性成分研究表明,油酸、亚油酸抑癌效果明显。其抗肿瘤的作用机制包括诱导细胞周期停滞和细胞凋亡;抑制环氧合酶-2的活性;抑制肿瘤血管生成。其药理作用包括免疫调节、抗病毒、调节肠道菌群等。
鸦胆子,苦寒,可清热解毒,腐蚀赘疣,化瘀生新。鸦胆子含有脂肪油,在体外能抑制小鼠艾氏腹水癌细胞及腹水型肝癌细胞;对肉瘤局部给药也有一定疗效。鸦胆子油乳剂和油中所含油酸在体外均能抑制H-TDR掺入小鼠艾氏腹水癌细胞DNA,表明其能抑制癌细胞DNA的合成,其作用随浓度增加而加强,除去药物后仍保留一定的后作用。
全方益气活血、散结止痛,能有效缓解胃癌患者上腹部疼痛、胀闷、不思饮食之症。作用于脾、胃、大肠等多个脏器,充分体现了中医学对人体有机整体的独特认识;通过调节全身机能,达到抗肿瘤的目的。
本发明的积极效果是:疗效明确,药源广、成本低廉、生产和服用方便,治疗胃癌效果显著。
附图说明
图1为各药物对MGC803细胞生长形态影响的镜下观察(荧光显微镜, ×400)空白对照组;
图2为各药物对MGC803细胞生长形态影响的镜下观察(荧光显微镜,×400)乌骨藤、苦荞麦、白术组;
图3为各药物对MGC803细胞生长形态影响的镜下观察(荧光显微镜,×400)莪术、薏苡仁、鸦胆子组;
图4为各药物对MGC803细胞生长形态影响的镜下观察(荧光显微镜,×400)本发明组;
图5为各药物组对MGC803细胞周期的影响空白对照组;
图6为各药物组对MGC803细胞周期的影响本发明组;
图7为各药物组对MGC803细胞周期的影响CH1组;
图8为各药物组对MGC803细胞周期的影响CH2组;
图9为本发明对MGC803细胞PI3K/AKT信号通路蛋白表达影响;
图9中:C:空白对照组;CHI1:乌骨藤、苦荞叶、白术组;CHI2:莪术、薏苡仁、鸦胆子组;T:本发明组。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步说明。
防治胃癌的益气活血复方中药制剂,由乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子组成,各中药组分的重量百分比为:乌骨藤15-25%,苦荞叶15-25%,白术15-20%,莪术10-15%,薏苡仁10-15%,鸦胆子10-15%。
防治胃癌的益气活血复方中药制剂的制备方法,包含如下工艺步骤:选择中药乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子,洗净,打成粗末;按照重量百分比配制及煎煮,各中药组分的重量百分比为乌骨藤15-25%,苦荞叶15-25%,白术15-20%,莪术10-15%,薏苡仁10-15%,鸦胆子10-15%;加水煎煮,过滤,将药渣再加水煎煮、过滤,水浴浓缩,成膏状,干燥,研碎,制成防治胃癌的复方中药制剂。
具体实施例的各种要组分重量百分比见下表:
本发明通过细胞实验和药效学研究,取得理想疗效,得到如下主要结论:
1.本发明通过药物抑制细胞实验,显微镜形态观察,本发明显著抑制胃癌细胞的生长。
2.本发明通过MTT法检测表明,本发明对胃癌细胞半数抑制率为IC50 =178μg·mL-1。
3.本发明通过抑制细胞进入G1细胞期,达到抑制胃癌细胞的增殖。
4.本发明通过抑制PI3K/AKT信号通路肿瘤蛋白表达,切断肿瘤生长、浸润途径。
本发明抑制胃癌的实验研究结果:
(1)本发明对胃癌MGC803细胞形态的影响,见图1-4。
使用倒置显微镜在200倍目镜下观察各组细胞形态,与对照组相比,各药物组细胞增长缓慢,形体偏小、皱缩,细胞间隙加大;培养基内细胞残片增多,细胞集落变小,汇合率低。本发明组细胞生长受抑制最为明显,细胞形态变圆,疏松分散,胞内充满大量颗粒状或空泡样物质。
图1-4 为各药物对MGC803细胞生长形态影响的镜下观察(荧光显微镜,×400)
本发明对MGC803细胞生长抑制作用量效关系(MTT法),见表1。
表1 各方对MGC803细胞增殖抑制率(%)量效关系( ±s)
注:CHI1:乌骨藤、苦荞叶、白术组;CHI2:莪术、薏苡仁、鸦胆子组;T:本发明组。同一浓度抑制率比较:与本发明组比较,*:P<0.01;Δ:P<0.05
结果提示,两拆方组随药物浓度增高而抑制率增高,具有明显的剂量依赖关系,其最大抑制率分别为46.91%和42.24%,本发明组抑制细胞生长强于两拆方组,具有显著性差异,达到53.54%,证明两拆方组具有协同作用。
本发明全方及两拆方可不同程度地抑制细胞增殖,抑制率随药物浓度增加而上升,呈现量效依赖性关系,根据生长抑制作用量效关系拟合曲线方程求出各组IC50值,分别是:乌骨藤、苦荞叶、白术组IC50 =911μg·mL-1、莪术、薏苡仁、鸦胆子组IC50 =1243μg·mL-1、全方组IC50 =178μg·mL-1。
(3)本发明及拆方对胃癌MGC803细胞周期的影响,见图5-8和表2。
与对照组比较,三药物组对细胞周期的调节各异:本发明组和拆方2组表现相似,主要将细胞阻滞于G2期,使细胞无法进入M分裂期;而拆方1组则将细胞阻滞于G1期。本发明组和拆方2组细胞G2期细胞分别占69.56%、61.15%;而拆方1组细胞G1期细胞占74.01%。研究表明,本发明通过抑制MGC803细胞从G2期进入G1期,从而抑制了细胞的生长。
图5-8各药物组对MGC803细胞周期的影响差异。
(4)本发明对MGC803细胞PI3K/AKT信号通路蛋白表达影响,见图9。
C:空白对照组;CHI1:乌骨藤、苦荞叶、白术组;CHI2:莪术、薏苡仁、鸦胆子组;T:本发明组。
图9各药物对MGC803细胞PI3K/AKT信号通路的影响
Western blot法检测显示应用本发明及拆方处理的MGC803细胞,PI3K/AKT通路各蛋白条带与对照组相比减弱,说明对其表达具有一定的抑制作用,抑制作用强弱依次为:T>CH2>CH1>C。
PI3K/AKT信号通路在细胞代谢、细胞周期调控等方面发挥重要作用。临床研究表明, PI3K/AKT通路与胃癌的发生发展、转移、治疗耐药性密切相关。PI3K/Akt的活化通过磷酸化多个靶蛋白,导致肿瘤发生或细胞耐药,此通路通常被包括胃癌在内的多种肿瘤所激活。实验研究表明,该信号通路在细胞增殖和存活中起着重要的作用。PI3K能够产生第二信使,包括广泛的细胞功能,如细胞增殖、浸润和转移,AKT是它的一个重要下游分子,是PI3K下游唯一一个促进细胞恶性转化的蛋白。AKT活化进一步作用于其下游分子如NF-κB、caspase-9等,从而促进细胞的异常分化与增殖。已有的研究证据表明,PI3K/AKT通路的异常激活在胃癌的发生发展中起着重要作用。
在本次实验中我们用Western blot法检测对照组和本发明及拆方组中EGFR、PI3K、P-PI3K和AKT蛋白表达。结果显示应用本发明全方和两拆方处理MGC803细胞后,与对照组相比各蛋白表达有不同程度地减弱,全方作用强于拆方。实验结果说明本发明治疗胃癌的有效组分在益气活血类药。
研究证明,本发明中的各味药物正是紧扣胃癌气虚血瘀的病机,以益气活血为主要功效治疗胃癌。
Claims (2)
1.一种防治胃癌的益气活血复方中药制剂,其特征在于由乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子组成,各中药组分的重量百分比为:乌骨藤15-25%,苦荞叶15-25%,白术15-20%,莪术10-15%,薏苡仁10-15%,鸦胆子10-15%。
2.一种防治胃癌的益气活血复方中药制剂的制备方法,其特征在于包含如下工艺步骤:选择中药乌骨藤、苦荞叶、白术、莪术、薏苡仁、鸦胆子,各中药组分的重量百分比为:乌骨藤15-25%,苦荞叶15-25%,白术15-20%,莪术10-15%,薏苡仁10-15%,鸦胆子10-15%;洗净,打成粉末;加水煎煮,过滤,将药渣再加水煎煮、过滤,水浴浓缩,成膏状,干燥,研碎,制成防治胃癌的益气活血中药制剂。
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