CN103535278B

CN103535278B - 一种鸡冠花试管花卉的生产方法

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Publication number: CN103535278B
Application number: CN201310445940.7A
Authority: CN
Inventors: 齐迎春; 柳俊; 张星; 许志强; 李运广; 段德君
Original assignee: Huazhong Agricultural University
Current assignee: Huazhong Agricultural University
Priority date: 2013-09-27
Filing date: 2013-09-27
Publication date: 2015-01-14
Anticipated expiration: 2033-09-27
Also published as: CN103535278A

Abstract

本发明公开了一种鸡冠花试管花卉的生产方法，该方法以长出四片真叶的鸡冠花茎尖为外植体，接种在装有生根培养基的玻璃瓶内培养，获得可供观赏的鸡冠花试管花卉，所述的生根培养基为：MS+0.2mg/LNAA、琼脂7g/L、白砂糖30-50g/L、pH值为5.8-6.2。本发明涉及的鸡冠花试管花卉生产方法具有工艺简单、培养基廉价的优点，所生产的试管花卉占用空间小，开花率高，株高和花絮大，观赏时间长。

Description

一种鸡冠花试管花卉的生产方法

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种鸡冠花的组织培养方法，特别涉及一种鸡冠花试管花卉的生产方法。

背景技术

自古以来，花卉在人们的日常生活中是不可或缺的一部分，用花卉装扮生活物件和空间，营造出一种欣欣向荣的、美好的氛围，给人带来精神上的享受。现如今更是如此，随着中国经济的不断繁荣，人们物质生活更加富足，越来越多的人开始追求更高质量的生活，期望在物质和精神上都能获得满足，所以花卉市场存在着很大的需求。然而，多数花卉都存在季节性，即在某一限定的季节开放，而且许多花卉的花期又短，如何能让一些在不同季节开放的花在同一时间大量开放且又能延长其花期，以满足市场需求，这仍然是一个需要解决的问题。

但是随着组织培养技术在花卉上的应用，尤其是试管花卉的不断研究，似乎找到了解决上述问题的方法。所谓试管花卉是指植物的外植体接种到一个封闭的、无菌的容器里，完成营养生长和生殖生长的整个过程。试管花卉又被称为手指苗圃、天使花房、微型花卉等，是将组织培养的无菌苗接种于装有各种颜色基质、形态不同且具有观赏价值的瓶子里，以达到可以直接观赏的目的的新型的装饰品。试管花卉的特点是精致美观、便于携带、不需要特别的养护等。试管花卉的特点不仅仅体现在植物能够开花上，更为主要的是植物、培养基和瓶子三者组合达到的整个试管花卉的特色。最早的试管花卉出现在1946年，罗士韦报道了菟丝子茎尖培养物在试管内成花。经过最近几十年的发展，目前报道的植物试管内开花的研究已经有100多种植物，可以说试管花卉研究已经迈出了很大一步，然而能在试管开花的植物并不是很多，更多的是一些观叶的植物。另外，随着研究的深入，新的问题也在不断的出现。比如试管花卉的生产应用所出现的问题，如何通过一些成本较低廉，可操作性强的生产方法来制作出试管花卉，以保证试管花卉在市场上具有一定的价格优势，也为生产试管花卉的企业降低生产成本。

鸡冠花(Celosia cristata L.)为苋科青葙属，一年生草本，因其花序呈鸡冠状，而得名，享有“花中之禽”的美誉，是常见的庭院植物。鸡冠花原产于非洲、美洲热带和印度，因其花大色艳、花期长、株矮而齐、极具观赏价值而越来越受到人们的青睐，世界各地广为栽培。鸡冠花一般于4-5月进行播种繁殖，气温在20-25℃，适宜的生长温度为18 -28℃，喜阳光充足、湿热，不耐霜冻。鸡冠花植株有高型、中型、矮型三种，矮型的一般有30cm，高的可达2m，茎直立粗壮，叶互生，长卵形或卵状披针形。肉穗状花序顶生，多扁平而肥厚，长8-25cm，宽5-20cm，最大直径40cm，上缘宽，具皱褶，下端渐窄，常残留扁平的茎，自然花期夏、秋至霜降。鸡冠花的品种因花序形态不同，可分为扫帚鸡冠、面鸡冠、鸳鸯鸡冠、缨络鸡冠等。

鸡冠花因其花大色艳、花期长、观赏价值高的特点，备受研究者们的青睐，最几年陆续有鸡冠花试管花卉的研究报道。2007年，王军玲等，研究了细胞分裂素和生长素、光照强度、培养基离子浓度对鸡冠花试管花卉的影响，得出了植物激素可以影响鸡冠花在试管里的发育，并给出了鸡冠花试管开花最合适的激素组合为6-BA 1.0mg/L + NAA 0.2mg/L；随着光照强度的提高，鸡冠花开花率提高，并且花的颜色更加鲜艳；营养水平不同对鸡冠花开花有影响，培养基中的大量元素减半有利于鸡冠花试管开花（王军玲，陆方方，陈晓梅等．鸡冠花试管开花初探［J］．热带农业科技，2007，30：34-35）。之后几篇报道的文章在此基础上，又对鸡冠花的离体快繁进行了研究，得出了培养基MS+6-BA 0.6mg/L + NAA 0.1mg/L 诱导的鸡冠花芽数量最多，而且芽生长表现较好，为最适芽诱导培养基；改良MS+6-BA 0．2 mg/L + NAA O.01mg/L + PP333 0.5mg/L诱导的花大且都集中在主茎上，花型紧凑美观，为最适的鸡冠花试管苗开花培养基（梁艳，杨晓杰，刘敏等．鸡冠花的离体快繁及试管开花研究［J］．北方园艺，2012，8：127-130）。2011年，何雪娇等进行了铵态氮/硝态氮对鸡冠花试管开花的影响的研究，得出了：铵态氮/硝态氮比值低时有利于鸡冠花试管开花，铵态氮/硝态氮比值高时对鸡冠花试管开花不利，甚至会造成植物铵中毒（何雪娇，何国昌，赖钟雄．铵态氮/硝态氮对鸡冠花试管开花的影响［J］．安徽农业科学，2011，39：10761-10763）。从这些已经报道的研究中可以看出，植物激素、培养基营养和培养条件是主要的研究对象，这是因为植物花的发育从成花诱导，到诱导状态到分生组织的转换，再到花的发端，最后花器官的形态发生是一个很复杂的过程，而植物激素、培养基营养和培养条件在这个过程中起着最为主要的作用，也是研究植物试管开花必须要考虑的因素。

目前，部分研究所和公司制作并销售试管花卉，但是量都不是很大，其原因是多方面的，其中所接种植物的选育，成本的控制是其中两个重要的因素。因此，选择合适的植物并控制生产成本，这对于试管花卉的大量推广显得尤为重要。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种观赏性好、成本低廉的鸡冠花试管花卉的生产方法。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究，最终获得了如下技术方案：

一种鸡冠花试管花卉的生产方法，该方法以长出四片真叶的鸡冠花茎尖为外植体，接种在装有生根培养基的玻璃瓶内培养，获得可供观赏的鸡冠花试管花卉，所述的生根培养基为：MS+0.2mg/L NAA、琼脂7g/L、白砂糖30-50g/L、pH值为5.8-6.2。

优选地，如上所述的鸡冠花试管花卉的生产方法，其中所述的生根培养基中白砂糖的浓度为40g/L。

优选地，如上所述的鸡冠花试管花卉的生产方法，其中所述的玻璃瓶空间大小为100-250mL。

进一步优选地，如上所述的鸡冠花试管花卉的生产方法，其中所述外植体在生根培养基中培养的条件为：培养温度22℃，光强5000lx，光照周期12hrs/d。

本发明任何地方所述的培养基中，其中：

MS 是国际通用的培养基，其成分和配制方法参见文献（谭文澄、戴策刚主编，观赏植物组织培养技术，北京：中国国林业出版社，1991）

NAA的化学成分为萘乙酸，使用时配置成0.5mg /mL的母液。具体配置方法：称取50毫克NAA，先用少量95%酒精溶解，然后用蒸馏水定容至100毫升，即可使用。

与现有技术相比，本发明涉及的鸡冠花试管花卉生产方法具有工艺简单、培养基廉价的优点，所生产的试管花卉占用空间小，开花率高，株高和花絮大，观赏时间长，且花卉均在无菌条件下生长，无需浇水、施肥等管理，具有非常显著的经济效益和社会效益。

具体实施方式

以下是本发明生产工艺的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。

本实例所用的鸡冠花的种子是由甘肃酒泉七彩园艺有限责任公司生产，生产日期是2011年12月25日，产品品牌是七彩园艺，购买地是湖北省武汉市南湖花木城花卉市场。白砂糖是由湖北省武汉榕丰园贸易有限公司生产。

本实例除特殊培养条件外，其余培养条件的基本培养基为MS培养基；培养温度22℃，光强5000lx，光照周期12hrs/d。本实例数据是用Excel进行的统计分析。

1、不同白砂糖浓度对鸡冠花试管花卉的影响

在超净工作台中，选取长出四片真叶的鸡冠花茎尖接种到白砂糖浓度分别为30g/L、40g/L和50g/L的250mL培养瓶的生根培养基中，其中生根培养基为MS培养基中，添加浓度为0.2mg/L NAA，浓度为7g/L琼脂，pH值为5.8-6.2。每个处理接种30个。

本实例是将长出四片真叶的鸡冠花茎尖接种到白砂糖浓度分别为30g/L、40g/L和50g/L的MS培养基中，培养基中添加浓度为0.2mg/L NAA，经过150天的观察，实验结果如下。

（1）不同白砂糖浓度对鸡冠花花芽诱导率和株高的影响

由表1可以看出，白砂糖浓度为40g/L时，鸡冠花的花芽诱导率最高，达到86.67%。而当白砂糖浓度进一步增加到50g/L时，鸡冠花的花芽诱导率有所下降至80%。白砂糖浓度为40g/L时，鸡冠花的株高和无花序株高(无花序株高是指除去花序之后，植株的高度)都是最大，分别达到10.07cm、7.96cm。白砂糖浓度为40g/L时的株高与白砂糖浓度为30g/L、50g/L相比，相差不明显，差异性不显著。但也可以看出当白砂糖浓度进一步增加到50g/L时，鸡冠花的株高有所下降至9.1cm。而无花序株高白砂糖浓度为50g/L时，与白砂糖浓度为30g/L、40g/L相比，具有显著性差异。白砂糖浓度为30g/L、40g/L之间鸡冠花的无花序株高差异性不显著。

另外，对三种不同白砂糖浓度的鸡冠花株高和无花序株高整体，做α=0.05时的方差分析，得到：株高的P_0.05=0.352，无花序株高P_0.05=0.044。分析结果表明三种不同白砂糖浓度的鸡冠花株高无显著性差异，而无花序株高存在显著性差异。

表1 不同白砂糖浓度对鸡冠花株高和花芽诱导率的影响

（2）不同白砂糖浓度对鸡冠花营养生长时间和花期的影响

从表2可以看出，随着白砂糖浓度的不断增加，鸡冠花的营养生长时间逐渐减小，鸡冠花的花期逐渐增长。表示出较高的糖浓度不仅可以缩短鸡冠花的营养生长时间，还可以增长花期的时间，如白砂糖浓度为50g/L比30g/L时鸡冠花营养生长时间缩短了约8天，而花期增加了约8天。

实验观察还发现，随着白砂糖浓度的不断增加，鸡冠花的叶片的颜色也越来越深，即白砂糖浓度不仅对鸡冠花的营养生长时间和花期有影响，而且对叶片颜色深浅也有很大的影响。

表2 不同白砂糖浓度对鸡冠花营养生长时间和花期的影响

白砂糖浓度（g/L）	观测数	营养生长时间（天）	花期（天）	叶片颜色
					30	19	58.84±30.84a	63.05±27.88a	浅绿色
40	26	53.85±20.17a	64.81±14.71a	绿色
					50	24	50.75±24.57a	71.00±23.67a	深绿色

（3）不同白砂糖浓度对鸡冠花花序大小的影响

从表3可以看出，白砂糖浓度为50g/L时鸡冠花花序的高度和宽度都是三种不同白砂糖浓度中最大的，分别达到3.1cm和2.89cm。而白砂糖浓度为40g/L时鸡冠花花序的高度和宽度都是三种不同白砂糖浓度中最小的，比白砂糖浓度为50g/L时鸡冠花花序的高度和宽度分别小了0.66cm和0.55cm。

实验观察还发现，随着白砂糖浓度的不断增加，鸡冠花花的颜色也越来越深，即白砂糖浓度不仅对鸡冠花花的大小有影响，而且对花的颜色深浅也有很大的影响。

表3 不同白砂糖浓度对鸡冠花花序大小的影响

白砂糖浓度（g/L）	观测数	花序高度（cm）	花序宽度（cm）	花的颜色
					30	19	2.72±1.91a	2.62±1.32a	浅红色
40	26	2.44±1.21a	2.34±1.28a	红色
					50	24	3.10±1.10a	2.89±1.15a	深红色

2、不同培养瓶空间大小对鸡冠花试管花卉的影响

在超净工作台中，选取长出四片真叶的鸡冠花茎尖接种到培养空间大小分别为100mL、150mL和250mL的生根培养基中，其中生根培养基为MS培养基中，添加浓度为0.2mg/LNAA，浓度为7g/L琼脂，pH值为5.8-6.2。每个处理接种30个。

本实例是将长出四片真叶的鸡冠花茎尖接种到培养瓶容量分别为100mL、150mL和250mL三种NAA浓度为0.2mg/L的MS培养基中，经过150天的观察、统计，结果如下。

（1）不同培养空间大小对鸡冠花株高的影响

从表4中可以看出，培养空间为250mL时，鸡冠花的株高和无花序株高都是最大，分别达到10.87cm、8.32cm。培养空间为250mL时的株高与培养空间为100mL、150mL相比具有显著性差异。培养空间为100mL、150mL之间相差不大，差异不显著。无花序株高培养空间为250mL时的株高与培养空间为100mL、150mL相比也具有显著性差异。培养空间为100mL、150mL之间相差也不大，差异也不显著。可见随着培养空间的增加，鸡冠花的株高也是随着增加的。

另外，对三种不同培养空间的鸡冠花株高和无花序株高整体，做α=0.05时的方差分析，得到：株高的P_0.05=0.0024，无花序株高P_0.05=0.015。分析结果表明三种不同培养空间的鸡冠花株高和无花序株高之间都存在显著性差异。

表4 不同培养空间对鸡冠花株高的影响

培养空间（mL）	接种数（个）	株高（cm）	无花序株高（cm）
				100	30	8.76±2.19b	6.99±1.50b
150	30	8.88±2.93b	6.88±2.05b
				250	30	10.87±2.49a	8.32±2.56a

（2）不同培养空间大小对鸡冠花营养生长时间、花期和花序大小的影响

从表5可以看出，培养空间为250mL时鸡冠花的营养生长时间和花期都是最长的，分别为66.69天、69.73天。随着培养空间的不断增加，鸡冠花的营养生长时间逐渐增加，且培养空间为250mL与100mL时鸡冠花营养生长时间相差了约22天，与150mL时也相差了约19天，而三种不同培养空间下鸡冠花的花期相差不是很大。培养空间为250mL时鸡冠花花序的高度和宽度都是三种不同培养空间中最大的，分别达到2.95cm和3.55cm。三种不同培养空间鸡冠花花序的高度相差不是很大，而培养空间为250mL时鸡冠花花序的宽度分别比100mL、150mL宽了1.55cm和1.47cm。

表5不同培养空间对鸡冠花营养生长时间、花期和花序大小的影响

培养空间（mL）	观测数	营养生长时间（天）	花期（天）	花序高度（cm）	花序宽度（cm）
						100	20	44.8±9.06b	66.7±8.64a	2.65±0.94a	2.00±0.93b
150	23	48.09±20.03b	62.61±19.98a	2.61±1.23a	2.08±0.85b
						250	26	66.69±31.5a	69.73±29.83a	2.95±1.84a	3.55±1.21a

Claims

1.一种鸡冠花试管花卉的生产方法，其特征在于：以长出四片真叶的鸡冠花茎尖为外植体，接种在装有生根培养基的玻璃瓶内培养，获得可供观赏的鸡冠花试管花卉，所述的生根培养基为：MS+0.2mg/L NAA、琼脂7g/L、白砂糖30-50g/L、pH值为5.8-6.2。

2. 根据权利要求1所述的鸡冠花试管花卉的生产方法，其特征在于：所述的生根培养基中白砂糖的浓度为40g/L。

3.根据权利要求1所述的鸡冠花试管花卉的生产方法，其特征在于：所述的玻璃瓶空间大小为100-250mL。

4.根据权利要求1-3任一项所述的鸡冠花试管花卉的生产方法，其特征在于：所述外植体在生根培养基中培养的条件为：培养温度22℃，光强5000lx，光照周期12hrs/d。