CN103519164A - 一种用于解酒护肝的氨基酸、植物化合物组合物及其在食品、保健食品中的应用 - Google Patents
一种用于解酒护肝的氨基酸、植物化合物组合物及其在食品、保健食品中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种用于解酒护肝的组合物，该组合物包括以下重量份的原料：L-半胱氨酸2~3份；牛磺酸3~6份；甘氨酸8~12份；姜黄素10~20份；水飞蓟素10~20份；槲皮素30~60份。经体外乙醇脱氢酶（ADH）活性试验和抗氧化能力指数（ORAC）试验证明，本发明组合物具有即时有效地提高乙醇脱氢酶（ADH）的活性的能力，加速乙醇代谢；同时可以高效地清除自由基，降低因乙醇引起的氧化损伤，防止因一次性大量饮酒及长期饮酒造成的醉酒、头晕、酒精性肝损伤等不良结果。该组合物可制成具有解酒护肝作用的食品、保健食品，作为即时解酒、长期保护肝脏的辅助产品等。
Description
技术领域
本发明属于食品加工领域，具体涉及一种用于解酒护肝组合物及其在食品、保健食品中的应用。
背景技术
我国的酒文化源远流长，酒在国民生活中占据着重要的位置。从三千年前的商周时代开始，我国就有了酒曲复式发酵法酿制黄酒的记载。从宋代开始，白酒成为中国人饮用的主要酒类。2012年的中国白酒产量达1023.32万千升，11月产量为115.09万千升，同比增长18%。然而伴随着饮酒文化及酒产业的发展，因饮酒产生的疾病也逐渐加剧。长期饮酒或一次性大量摄入酒类制品都有可能导致急性酒精中毒及相关并发症，过量饮酒被视为不健康的生活方式。
在饮酒人群中，商务人士、管理人员、知识分子、公务人员等具有更高的健康意识，迫切需要一种能够有效地即时解酒、保护肝脏的保健产品。传统的解酒产品主要有以下几类：一种是以催吐为主要解决方式的药物，通过排出胃中的乙醇降低乙醇吸收，对人体胃肠刺激较大，不适合做；另一种是养胃护肝的保健药品，但大多起效慢，需要长期服用，对于即时解酒效果并不好；还有一种是以中药为原料制成的解酒茶，味道浓重，口感接受度较差。基于此种情况，研发一种具有即时解酒效果，并且能保护肝脏的保健产品，将会有极大的社会效益及应用前景。
研究表明，乙醇在机体内主要有三条代谢途径，如图1所示。乙醇进入胃中经过首关代谢（First Pass metabolism, FPM）后，再通过肝脏内的脱氢酶系统（乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶）以及氧化酶-过氧化酶系统完成催化代谢。摄入体内的乙醇主要由肝脏中的乙醇脱氢酶（ADH）催化代谢，而氧化酶-过氧化酶系统的作用是降低因乙醇激发的自由基所造成的氧化损伤。
越来越多的研究表明，某些氨基酸具备较好的解酒醒酒以及护肝功效。L-半胱氨酸具有促进肝纤维化逆转及抗肝脏脂质过氧化的作用；牛磺酸能够提高肝脏内ADH和ALDH的活性；改善肝脏结构，降低ALT、AST、ALP、谷氨酰转移酶、白细胞介素、肿瘤坏死因子水平，抑制血清中纤维、胶原沉淀、降低病理学损伤；甘氨酸能够改良肝脏、胰脏微循环。姜黄素、槲皮素、水飞蓟素具备较好的护肝功效。姜黄素可以显著降低MDA，抑制活性氧(ROS)的产生，又能清除氧化过程中产生的氧自由基，还可以通过直接修饰NFKB使NFKB不能与DNA结合，肝组织中依赖NFKB的基因MCP-1和MIP-2等表达明显减少，肝脏炎症反应减轻；槲皮素可以有效促进LDH，AST，MDA，GSH，SOD，CAT等水平恢复到酒精干预之前的状况；水飞蓟素可减轻酒精对肝脏的损害和肝纤维化程度。
通过体外乙醇脱氢酶（ADH）活性试验和抗氧化能力指数（ORAC）试验，证明本发明组合物具有激活乙醇脱氢酶活性、加速乙醇代谢，从而改善因酒精引起的醉酒症状的作用；同时又能清除因乙醇引发的自由基，从而降低因乙醇引起的氧化损伤，防止氧化损伤造成的不良后果。
发明内容
在下文中给出关于本发明的简要概述，以便提供关于本发明的某些方面的基本理解。应当理解，这个概述并不是关于本发明的穷举性概述。它并不是意图确定本发明的关键或重要部分，也不是意图限定本发明的范围。其目的仅仅是以简化的形式给出某些概念，以此作为稍后论述的更详细描述的前序。
本发明要解决的技术问题是提供一种用于解酒护肝的组合物及其在食品、保健食品中的应用。
本发明采用如下技术方案解决上述技术问题：
本发明组合物由以下重量份的原料配方制成：L-半胱氨酸2~3份；牛磺酸3~6份；甘氨酸8~12份；姜黄素10~20份；水飞蓟素10~20粉；槲皮素45~55份。
本发明组合物在制备食品、保健食品的过程中，可以按照需要加入调味剂、助溶剂、乳化剂、赋形剂，制成的食品、保健食品是任意形式可接受的产品，如胶囊、片剂、冲剂、泡腾片、饮料、食品配料包等类型的产品。
体外乙醇脱氢酶（ADH）活性试验和抗氧化能力指数（ORAC）试验证明，本发明组合物具有激活乙醇脱氢酶活性、加速乙醇代谢，从而改善因酒精引起的醉酒症状的作用；同时又能清除因乙醇引发的自由基，从而降低因乙醇引起的氧化损伤，防止氧化损伤造成的不良后果。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1. 配方合理：本发明解酒护肝组合物包含能够有效促进乙醇脱氢酶活性的原料，也包含有效提高抗氧化能力的原料。各原料配伍使用，疗效更佳。
2. 本发明解酒护肝组合物能够有效提高人体内乙醇脱氢酶（ADH）的活性，促进ADH对乙醇的代谢，降低血液中的乙醇浓度。
3. 本发明解酒护肝组合物能够提高机体抗氧化能力，清除因乙醇激发的自由基，提高机体抗氧化水平，减轻脂质过氧化等损伤，预防酒精性肝病的发生，改善饮酒造成的身体不适。
4. 本发明组合物原料均为天然物质，不含化学合成物质，安全无副作用。
5. 本发明组合物可以制成多种形式的食品、保健食品，如胶囊、片剂、冲剂、泡腾片、饮料、食品配料包等，适宜在各种场合服用，便于携带与保存。
下面实验例用于进一步说明本发明。
实验例1 体外乙醇脱氢酶（ADH）活力评价试验
1 试验原理
氧化型辅酶I（氧化态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD）是一种脱氢酶的辅酶，在乙醇脱氢酶(ADH)氧化乙醇反应时，接受氢离子，从氧化态转化为还原型辅酶I（还原态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，NADH）。NADH在340nm处有吸收峰，因此可以采用测定NADH的A340nm的方法，推导计算NADH的含量及ADH的活性。
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 试剂
氧化辅酶I，美国Sigma公司；乙醇脱氢酶，美国Sigma公司；荧光物质Sodium Fluorescein，美国Sigma公司；磷酸氢二钾，北京化工厂，分析纯；磷酸二氢钠，北京化工厂，分析纯；焦磷酸钠，北京化工厂，分析纯；乙醇，北京化工厂，分析纯。
2.1.2 仪器设备
Synergy H4多功能荧光分析仪及GENE5工作站，德国BIO-TEK公司；96微孔板。
2.1.3 样品
本发明解酒护肝组合物。
2.2 试验方法
参考瓦勒-霍赫（Vallee&Hoch）方法中各样品溶液的比例，调节酶标板中各个反应溶液的添加量，测定体外ADH的活性。
在96孔白色板各微孔中分别加入焦磷酸钠缓冲液（pH=8.8）135μL、1mg/mL的待测样品溶液10μL、体积分数为11.5%的乙醇溶液45μL（以等量蒸馏水代替乙醇调零），用自动加样器向各微孔中添加浓度为27mmol/L的氧化辅酶I（NAD+）90μL，在25°C下温育5min后，用自动加样器加入浓度为0.25U/mL的ADH溶液15μL并迅速启动反应，以激发波长测定体系在340nm处的吸光度，整个体系保持25°C，每45s测定一次荧光强度，每次测定前中速震动孔板5s，连续测定20min后停止，取反应最初的线性部分（曲线如图2所示）。
2.3 计算方法
计算ΔA340nm/min的值，根据生成物NADH在340nm处的摩尔消光系数为6.22，计算ADH的活力单位。
酶活性（U/mL）=(△A×(Tv/Sv )×1000)/(min×ε×L)
ε：消光系数，ε340NADH=6.22×103；
Tv：总反应体积；
Sv：样品体积；
L：光径。
按下式计算激活/抑制率：
激活/抑制率=((酶活力加样品试验组-酶活力无样品试验组)/酶活力无样品试验组 )×100%
3 测定结果及分析
根据前20min内各样品的吸光度变化，如图4所示。根据2.3所述公式计算样品的酶活激活/抑制率，结果如表1所示。
表1 不同样品对乙醇脱氢酶活性的影响
| 编号 | 样品 | 激活/抑制率 |
| 1 | L-半胱氨酸 | 875.63%±14.04% |
| 2 | 牛磺酸 | 894.12%±10.50% |
| 3 | 甘氨酸 | 907.56%±6.34% |
| 4 | 姜黄素 | 91.60%±2.52% |
| 5 | 水飞蓟素 | 33.61%±4.37% |
| 6 | 槲皮素 | -94.12%±5.82% |
本发明解酒护肝组合物中的配方组分对ADH的激活率有较高的激活作用，氨基酸配方均达到850%以上，结果表明，本发明组合物能够显著的提高乙醇脱氢酶的活性，使其快速代谢乙醇，从而达到快速解酒的作用。
实验例2 抗氧化能力指数（ORAC）试验
1 试验原理
抗氧化能力指数（Oxygen Radical Absorption Capacity，ORAC）分析方法是根据自由基破坏荧光探针，使荧光强度产生变化原理，以维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准，使用荧光微孔板分析仪进行分析。荧光强度的变化大小反映自由基破坏的程度。在抗氧化剂存在时，它可以抑制由自由基引起的荧光变化。抑制程度反映了它对自由基的抗氧化能力。
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 试剂
荧光物质Sodium Fluorescein，美国Sigma公司；自由基产生剂AAPH，美国Sigma公司；抗氧化标准物质Trolox，美国Sigma公司；磷酸氢二钾，北京化工厂，分析纯；磷酸二氢钠，北京化工厂，分析纯；焦磷酸钠，北京化工厂，分析纯。
2.1.2 仪器设备
Synergy H4多功能荧光分析仪及GENE5工作站，德国BIO-TEK公司；96微孔板。
2.1.3 样品
本发明解酒护肝组合物。
2.2 试验方法
ORAC反应在75mmol/L磷酸盐缓冲液(pH=7.2)体系中进行。在96孔的黑色荧光酶标板各微孔中分别加入不同浓度的待测样品溶液25μL，用自动加样器向各微孔中添加浓度为8.61×10-5mM的荧光物质FL溶液150μL，中速振摇2min，在37°C下孵育10min后，用自动加样器加入浓度为153mM 的AAPH溶液25μL并迅速启动反应，以激发波长485±20nm，发射波长530±20nm进行连续测定荧光强度，整个体系保持37°C，每2min测定一次荧光强度，每次测定前中速震动孔板10s，测定时间设定在荧光衰减呈基线后为止。
2.3 计算方法
ORAC试验所得的各微孔不同时间点的绝对荧光强度数据与其初始时间的荧光强度相比，折算成相对荧光强度f，以相对荧光强度采用近似积分法计算荧光衰退曲线下面积（AUC），其公式为：AUC=0.5×[2×(f0+f1+…+fn-1+fn)-f0-fn]×Δt
其中fn标示第n个测定点的相对荧光强度，Δt表示相邻两点的时间间隔（2min），则上述公式可简化为：AUC=2×(f0+f1+…+fn-1+fn)-f0-fn。
测定结果以ORAC值表示，ORAC值得计算过程为：首先计算待测样品的AUC与仅有AAPH作用下的AUC之差，得到净AUC（netAUC）值，通过样品与Trolox净AUC的比值与二者摩尔浓度（molarity）的比值做比，得到样品的ORAC值，即Trolox当量。待测样品的ORAC值就是以μmol Trolox当量/g样品表示，具体计算公式表示为：
Relative ORAC value= ((AUCsample-AUCblank)/(AUCTrolox-AUCTrolox))/(molarity of Trolox/molarity of sample)
3 测定结果及分析
根据2.3所述方法，本研究样品（L-半胱氨酸、牛磺酸、甘氨酸、姜黄素、槲皮素、水飞蓟素）每个样品做3份平行实验，经EXCEL软件计算得到ORAC值。
图5所示为样品反应体系下的标准曲线绘制，Trolox系列标准溶液的荧光强度随时间衰减图见图5所示，以时间为横坐标，净面积为纵坐标，绘制Trolox系列标准溶液标准曲线，结果见图6。
由Trolox标准品测定结果可知，Trolox系列标准溶液标准曲线的斜率为0.5668，相关系数R2=0.9985，截距为0.3951，根据Dejian Huang与Boxin Ou的研究报道，截距大小与空白面积有关，对样品的ORAC测定结果无影响。
不同样品的荧光衰减示意图如图7所示，通过绘制标准曲线，计算各样品的ORAC值，如表2所示。
表2 不同样品的ORAC值
| 编号 | 样品 | 激活/抑制率 |
| 1 | L-半胱氨酸 | 854.49 |
| 2 | 牛磺酸 | 0.22 |
| 3 | 甘氨酸 | 0.38 |
| 4 | 姜黄素 | 1136.49 |
| 5 | 水飞蓟素 | 10573.12 |
| 6 | 槲皮素 | 14206.40 |
试验结果表明，姜黄素、水飞蓟素、槲皮素具有极高的清除自由基的能力，其作用主要体现在促进人体内LDH，AST，MDA，GSH，SOD，CAT等水平恢复到酒精干预之前的状况，降低乙醇引起的氧化损伤。此外，在波长340nm的条件下，槲皮素本身可能有一定的吸光值，导致在槲皮素样品环境中，各个时间点的相对荧光强度都远高于其它样品，但这并不影响ADH活性激活/抑制率的计算，因为只需要得到相对荧光强度随时间的变化值即可。L-半胱氨酸的ORAC值为854.49μmol TE/g，具有一定的抗氧化能力。虽然牛磺酸与甘氨酸的ORAC值很低，分别为0.22μmol TE/g和0.38μmol TE/g，表明二者不具备消除自由基的能力，但并非意味着其不具备抗氧化能力。根据张星光等人的研究可知，牛磺酸的抗氧化能力体现在能够促进机体SOD活性，降低MDA生成量等方面，进而降低氧化损伤；甘氨酸利用其金属螯合作用结合金属离子，从而发挥抗氧化能力，使本发明组合物达到保护肝脏的作用。
附图说明
图1为乙醇代谢途径示意图；
图2为NADH在340nm处吸光度（A340）示意图；
图3 为不同样品对吸光度的影响；
图4 为荧光衰减曲线下净面积；
图5 为Trolox系列浓度标准溶液荧光强度随时间衰减图；
图6为Trolox标准曲线图；
图7 不同样品的荧光衰减示意图
图8为本发明实施例提供的解酒胶囊的制备方法的可选流程图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。在本发明的一个附图或一种实施方式中描述的元素和特征可以与一个或更多个其它附图或实施方式中示出的元素和特征相结合。应当注意，为了清楚的目的，附图和说明中省略了与本发明无关的、本领域普通技术人员已知的部件和处理的表示和描述。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一、按照下列重量称取原料
L-半胱氨酸3g；牛磺酸6g；甘氨酸11g；姜黄素13g；水飞蓟素13g；槲皮素45g；明胶1g；甘油0.3g；香精0.05g；麦芽糊精1.95g；β-环糊精5g；羟基苯甲酸甲酯0.7g。
二、解酒护肝胶囊的制备
原料按上述配比混合后经过粉碎、过80目筛；与明胶、甘油、乳化剂、助溶剂、防腐剂混合后溶于水中，再经过乳化、压丸、洗丸、干燥，即得到解酒护肝软胶囊。参见图8。
实施例2
一、按照下列重量称取原料
L-半胱氨酸2.5g；牛磺酸5g；甘氨酸10g；姜黄素12g；水飞蓟素15g；槲皮素40g；麦芽糊精4g；β-环糊精5g；柠檬酸3.5g；薄荷油0.2mL；微晶纤维素3g。
二、解酒护肝咀嚼片的制备
原料按上述配比混合后，加β-环糊精、柠檬酸及水溶解后作为黏合剂，一步制粒。薄荷油用75%乙醇溶解，常温喷入颗粒中，混匀，过20目筛，加入微晶纤维素，混匀后压制成片剂。
在本发明上述各实施例中，实施例的序号仅仅便于描述，不代表实施例的优劣。对各个实施例的描述都各有侧重，某个实施例中没有详述的部分，可以参见其他实施例的相关描述。
在本发明的装置和方法等实施例中，显然，各部件或各步骤是可以分解、组合和/或分解后重新组合的。这些分解和/或重新组合应视为本发明的等效方案。同时，在上面对本发明具体实施例的描述中，针对一种实施方式描述和/或示出的特征可以以相同或类似的方式在一个或更多个其它实施方式中使用，与其它实施方式中的特征相组合，或替代其它实施方式中的特征。
应该强调，术语“包括/包含”在本文使用时指特征、要素、步骤或组件的存在，但并不排除一个或更多个其它特征、要素、步骤或组件的存在或附加。
最后应说明的是：虽然以上已经详细说明了本发明及其优点，但是应当理解在不超出由所附的权利要求所限定的本发明的精神和范围的情况下可以进行各种改变、替代和变换。而且，本发明的范围不仅限于说明书所描述的过程、设备、手段、方法和步骤的具体实施例。本领域内的普通技术人员从本发明的公开内容将容易理解，根据本发明可以使用执行与在此所述的相应实施例基本相同的功能或者获得与其基本相同的结果的、现有和将来要被开发的过程、设备、手段、方法或者步骤。因此，所附的权利要求旨在在它们的范围内包括这样的过程、设备、手段、方法或者步骤。
Claims (12)
1.一种用于解酒护肝的组合物，其特征在于，该组合物包括以下重量份的原料：
L-半胱氨酸2~3份；牛磺酸3~6份；甘氨酸8~12份；姜黄素10~20份；水飞蓟素10~20份；槲皮素30~60份。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物包括以下重量份的原料：
L-半胱氨酸2~2.5份；牛磺酸4~5份；甘氨酸10~11份；姜黄素12~18份；水飞蓟素12~18份；槲皮素35~45份。
3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物包括以下重量份的原料：
L-半胱氨酸2.25份；牛磺酸4.5份；甘氨酸10.5份；姜黄素15份；水飞蓟素15份；槲皮素45份。
4.如权利要求1所述的组合物，在制备食品、保健食品的过程中加入调味剂、助溶剂、乳化剂、赋形剂。
5.如权利要求4所述的组合物，在制备食品、保健食品的过程中加入但不限于的调味剂为柠檬酸、木糖醇、薄荷油。
6.如权利要求4所述的组合物，在制备食品、保健食品的过程中加入但不限于的助溶剂为β-环糊精、麦芽糊精。
7.如权利要求4所述的组合物，在制备食品、保健食品的过程中加入但不限于的乳化剂为乙酰化单、双甘油脂肪酸酯。
8.如权利要求4所述的组合物，在制备食品、保健食品的过程中加入但不限于的赋形剂为硬脂酸镁、微晶纤维素。
9.如权利要求1所述的组合物，其特征是应用于食品、保健食品中的任意形式的产品。
10.如权利要求9所述的组合物制成的食品、保健食品，其特征在于产品的形式为胶囊、片剂、冲剂、泡腾片、饮料、食品配料包等。
11.如权利要求1所述的组合物的用途，其特征是其解酒作用是指激活乙醇脱氢酶的活性，使乙醇加速分解代谢，降低人体内乙醇的浓度，从而改善因酒精引起的醉酒症状。
12.如权利要求1所述的组合物的用途，其特征是其护肝作用是指清除因乙醇引发的自由基，从而降低因乙醇引起的氧化损伤，防止氧化损伤造成的不良后果。
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| CN101889679A (zh) * | 2009-05-20 | 2010-11-24 | 凌沛学 | 一种具有解酒保肝作用的组合物及其在食品、保健食品中的应用 |
| CN102150854A (zh) * | 2011-02-01 | 2011-08-17 | 完美（中国）有限公司 | 一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健食品 |
| CN103202838A (zh) * | 2013-04-16 | 2013-07-17 | 缪为民 | 一种具有肝脏保护作用的植物提取物组合物 |
-
2013
- 2013-09-12 CN CN201310413940.9A patent/CN103519164A/zh active Pending
Patent Citations (3)
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